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1、(10)申请公布号 CN 102871008 A (43)申请公布日 2013.01.16 CN 102871008 A *CN102871008A* (21)申请号 201210383613.9 (22)申请日 2012.10.11 A23L 1/00(2006.01) A23L 1/16(2006.01) (71)申请人 北京大北农科技集团股份有限公司 地址 100080 北京市海淀区中关村大街 27 号中关村大厦 14 层大北农集团 申请人 湖南大北农农业科技有限公司 漳州大北农农牧科技有限公司 (72)发明人 汪攀 张军 孙晓雯 闫轶洁 王安如 (54) 发明名称 一种芽孢杆菌菌粉简易。
2、制备方法 (57) 摘要 本发明公开了一种芽孢杆菌菌粉简易制备方 法。该方法包括如下步骤 : 1) 将发酵结束后的芽 孢杆菌发酵液和菌液吸附剂按重量比 1.0 : 1.0 1.5 混合, 搅拌混匀 ; 2) 把混合均匀的发酵液和菌 液吸附剂的混合物分摊成2cm3cm, 置于通风处 自然晾干至含水量降至 20% 以下时, 菌粉制备完 成。本发明采用菌液吸附剂吸附发酵液中的活菌 及其代谢产物, 经干燥后直接制成微生态制剂, 工 艺简单, 技术难度低。 省去发酵结束后菌体分离程 序, 最大限度的利用了发酵液中益生菌的有益代 谢产物。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 3 页 (19。
3、)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 3 页 1/1 页 2 1. 一种芽孢杆菌菌粉简易制备方法, 其包括如下步骤 : 1) 将发酵结束后的芽孢杆菌发酵液和菌液吸附剂按重量比 1.0 : 1.0 1.5 混合, 搅拌 混匀 ; 2) 把混合均匀的发酵液和菌液吸附剂的混合物分摊成 2cm 3cm, 置于通风处自然晾 干至含水量降至 20% 以下时, 菌粉制备完成。 2. 如权利要求 1 所述的制备方法, 其特征在于, 步骤 2) 中发酵液和菌液吸附剂的混合 物自然晾干至含水量为 5% 15%。 3. 如权利要求 1 或 2 所述的制备方法, 其特征在于。
4、, 所述的菌液吸附剂选自玉米芯粉、 淀粉、 米糠中的一种或几种。 4. 如权利要求 1 或 2 所述的制备方法, 其特征在于, 所述的芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌、 地衣芽孢杆菌和 / 或短小芽孢杆菌。 5.如权利要求1或2所述的制备方法, 其特征在于, 所述的发酵液和菌液吸附剂的混合 物自然晾干时避免阳光直射。 权 利 要 求 书 CN 102871008 A 2 1/3 页 3 一种芽孢杆菌菌粉简易制备方法 技术领域 0001 本发明属于微生态制剂技术领域, 涉及一种饲用芽孢杆菌菌粉简易制备方法。 背景技术 0002 微生态制剂是指根据微生态理论, 将从动物体内外分离的对动物有益的微生物, 经特。
5、殊工艺制成的只含有活菌或包含细菌菌体及其代谢产物的主要用于动物的活菌制剂。 0003 目前用于微生态活菌制剂的加工方法主要有喷雾干燥法、 真空冷冻干燥法和微囊 包被法。市场现有的微生态产品, 大部分采用大部分是喷雾干燥法, 干燥法优点是处理量 大, 所得微胶囊粉末流散性好, 加工过程易于控制。 真空冷冻干燥法也是微生物制品应用中 最为广泛的方法之一, 通过真空冷冻干燥法, 也可以得到活菌率较高的微生态产品, 但是真 空冷冻干燥法存在着以下问题 : 应用成本较高 (喷雾干燥的 5-8 倍) 、 时间成本比较高 (48h/ 批次) 、 设备损耗较迅速、 制得的产品集结在一起, 需要进一步的进行破碎。
6、, 制粉, 流散性差。 微囊包被是保护益生菌活力最为直接有效的方法, 壁材在加工过程中, 在菌体细胞外形成 玻璃化状态, 更好的保护菌体细胞膜和胞内蛋白质, 使产品中活菌数大大提高。 这三种加工 方法虽然被广泛使用, 但都需要额外添加价格较高的干燥保护剂或载体、 需要专业的干燥 设备, 生产工艺比较复杂, 必须由专业的人员来生产操作。 发明内容 0004 为了解决上述问题, 本发明提供一种芽孢杆菌菌粉简易制备方法。 0005 本发明提供的制备方法, 包括如下步骤 : 1) 将发酵结束后的芽孢杆菌发酵液和菌 液吸附剂按重量比 1.0 : 1.0 1.5 混合, 搅拌混匀 ; 2) 把混合均匀的发。
7、酵液和菌液吸附剂 的混合物分摊成2cm3cm, 置于通风处自然晾干至含水量降至20%以下时, 菌粉制备完成。 0006 在本发明具体的实施方案中, 步骤 2) 中发酵液和菌液吸附剂的混合物自然晾干至 含水量为 5% 15%。 0007 其中, 所述的菌液吸附剂选自玉米芯粉、 淀粉、 碳酸钙中的一种或几种。 0008 其中, 所述的芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌、 地衣芽孢杆菌和 / 或短小芽孢杆菌。 0009 其中, 所述的发酵液和菌液吸附剂的混合物自然晾干时避免阳光直射。 0010 本发明中, 枯草芽孢杆菌 CGMCC No.4628 已于 CN200810106520.5 中公布 ; 地衣芽 孢杆。
8、菌 CGMCC NO.5094 已在专利 CN201110384444.6 中公布 ; 短小芽孢杆菌 CGMCC No.4756 已于 CN201110140925.2 中公布。 0011 本发明采用菌液吸附剂吸附发酵液中的活菌及其代谢产物, 经干燥后直接制成微 生态制剂, 省去了发酵结束后复杂的后处理及制剂过程, 工艺简单, 技术难度低, 降低了产 品制造的成本。 与现有方法制备的或市售的芽孢杆菌菌粉相比, 菌粉中活菌数含量相近, 且 均能满足饲用微生态制剂中对活菌数和芽孢率的要求。 本发明省去发酵结束后菌体分离程 序, 最大限度的利用了发酵液中益生菌的有益代谢产物, 特别适用于现场发酵直接。
9、饲喂的 养殖模式, 促进芽孢杆菌在微生态制剂中的应用。 说 明 书 CN 102871008 A 3 2/3 页 4 具体实施方式 0012 通过下列实施例将更具体的说明本发明, 但是应理解所述实施例仅是为了说明本 发明, 而不是以任何方式限制本发明的范围。 0013 本发明下列实施例所用的仪器型号、 试剂及其来源如下 : 0014 发酵罐 : NewBrunswick 公司 BioFlo/Celligen 115 型 ; 0015 循环水机 : 北京长流科学仪器公司 DX-208 型 ; 0016 空气压缩机 : 北京豪福机电技术开发应用有限公司 HF-6100C 型 ; 0017 分光光度。
10、计 : 上海精密科学仪器有限公司 721N 型 ; 0018 显微镜 : OLYMPUS CX31 型 ; 0019 超净台 : 苏净安泰 SW-CJ-2FD 型 ; 0020 生化培养箱 : 上海博讯实业有限公司医疗设备厂 SPX-250B-Z 型 0021 玉米芯粉购自山东宏达玉米芯颗粒有限公司, 酵母膏、 牛肉粉、 胰蛋白胨购自北京 奥博星生物技术责任有限公司, 其他试剂均购自北京化学试剂公司。 0022 实施例 1 枯草芽孢杆菌菌粉简易制备方法 0023 利用如下培养基对枯草芽孢杆菌 CGMCC No.4628 进行发酵 : 葡萄糖 10g、 豆饼粉 10g、 氯化钠 5g, 硫酸锰 。
11、0.6g, 通过稀盐酸和氢氧化钠调节 pH 发酵过程中 pH 稳定在 7.0, 28发酵 72 小时。 0024 发酵结束后将发酵液与玉米芯粉按重量比 1:1 混合, 搅拌均匀后, 在曲盘上摊成 薄饼, 厚度 2cm, 放在盘架上自然风干。当含水量降至 10% 时, 即得到枯草芽孢杆菌 CGMCC No.4628 菌粉。经检测该菌粉含枯草芽孢杆菌 CGMCC No.4628 活菌数为 2.7109cfu/g, 芽 孢率 82.3%。 0025 实施例 2 地衣芽孢杆菌菌粉简易制备方法 0026 利用如下培养基对地衣芽孢杆菌 CGMCC No.5094 进行发酵 : 葡萄糖 12g、 豆饼粉 1。
12、1g、 氯化钠 4g, 硫酸锰 0.5g, 通过稀盐酸和氢氧化钠调节 pH 发酵过程中 pH 稳定在 7.0, 28发酵 72 小时。 0027 发酵结束后将发酵液与玉米芯粉按重量比 1:1.2 混合, 搅拌均匀后, 在曲盘上摊 成薄饼, 厚度 2.5cm, 放在盘架上自然风干。当含水量降至 15% 时, 即得到地衣芽孢杆菌 CGMCC 5094 菌粉。经检测该菌粉含地衣芽孢杆菌 CGMCC 5094 活菌数为 3.2109cfu/g, 芽 孢率 79.6%。 0028 实施例 3 短小芽孢杆菌菌粉简易制备方法 0029 利用如下培养基对短小芽孢杆菌 CGMCC No.4756 进行发酵 : 。
13、葡萄糖 10g、 豆饼粉 11g、 氯化钠 5g, 硫酸锰 0.5g, 通过稀盐酸和氢氧化钠调节 pH 发酵过程中 pH 稳定在 7.0, 28发酵 72 小时。 0030 发酵结束后将发酵液与玉米芯粉按重量比 1:1.5 混合, 搅拌均匀后, 在曲盘上摊 成薄饼, 厚度 3cm, 放在盘架上自然风干。当含水量降至 5% 时, 即得到短小芽孢杆菌 CGMCC No.4756 菌粉。经检测该菌粉含短小芽孢杆菌 CGMCC No.4756 活菌数为 2.4109cfu/g, 芽 孢率 84.6%。 0031 以上所述仅是本发明的优选实施方式, 应当指出, 对于本技术领域的普通技术人 说 明 书 CN 102871008 A 4 3/3 页 5 员来说, 在不脱离本发明技术原理的前提下, 还可以做出若干改进和润饰, 这些改进和润饰 也应视为本发明的保护范围。 说 明 书 CN 102871008 A 5 。