使用10炔丙基10去氮杂氨基蝶呤治疗T细胞淋巴瘤.pdf

《使用10炔丙基10去氮杂氨基蝶呤治疗T细胞淋巴瘤.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《使用10炔丙基10去氮杂氨基蝶呤治疗T细胞淋巴瘤.pdf（10页完整版）》请在专利查询网上搜索。

1、(10)申请公布号 CN 102824346 A (43)申请公布日 2012.12.19 CN 102824346 A *CN102824346A* (21)申请号 201210342831.8 (22)申请日 2005.05.31 60/521,593 2004.05.30 US 200580017316.0 2005.05.31 A61K 31/519(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (71)申请人 斯隆凯特林癌症研究所 地址 美国纽约 (72)发明人 O.A. 澳康诺尔 F. 西罗特纳克 (74)专利代理机构 中国专利代理(香港)有限公 司 72001 代理人。

2、 李炳爱 (54) 发明名称 使用 10- 炔丙基 -10- 去氮杂氨基蝶呤治疗 T 细胞淋巴瘤 (57) 摘要 通过给患有 T 细胞淋巴瘤的病人服用治疗 性有效量的 10- 炔丙基 -10- 去氮杂氨基蝶呤 (deazaaminopterin) 来治疗 T 细胞淋巴瘤。以低 至 30mg/m2的每周给药剂量水平， 即使是耐药的 T 细胞淋巴瘤， 也在人类病人中观察到症状缓解。 通 常， 所述 10- 炔丙基 -10- 去氮杂氨基蝶呤被以每 剂 30-275mg/m2的量给药。 (30)优先权数据 (62)分案原申请数据 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 6 页 附图 2 页。

3、 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 6 页 附图 2 页 1/1 页 2 1.10- 炔丙基 -10- 去氮杂氨基蝶呤在配制用于治疗 T 细胞淋巴瘤的药物中的应用， 其 中所述 T 细胞淋巴瘤是成熟或周边 T 细胞肿瘤或成淋巴细胞性淋巴瘤。 2.根据权利要求1的应用， 其中所述10-炔丙基-10-去氮杂氨基蝶呤基本上无10-去 氮杂氨基蝶呤。 3.权利要求1或2的应用， 其中所述药物被配制用于以每剂30-275mg/m2的量将10-炔 丙基 -10- 去氮杂氨基蝶呤进行给药。 4. 权利要求 13 任一项的应用， 其中所述周边 T 细胞淋巴。

4、瘤是与 HTLV 相联系的 T 细胞 淋巴瘤。 5. 权利要求 1-3 任一项的应用， 其中所述周边 T 细胞淋巴瘤是脂膜性 T 细胞淋巴瘤。 6. 权利要求 1-3 中任一项的应用， 其中所述药物被配制为用于治疗人类。 7. 权利要求 1-3 中任一项的应用， 其中所述药物被配制为口服液或可注射的溶液。 权 利 要 求 书 CN 102824346 A 2 1/6 页 3 使用 10- 炔丙基 -10- 去氮杂氨基蝶呤治疗 T 细胞淋巴瘤 0001 本申请是申请日为 2005 年 5 月 31 日、 发明名称为 “使用 10- 炔丙基 -10- 去氮杂 氨基蝶呤治疗T细胞淋巴瘤” 的PCT/。

5、US2005/019169的发明专利申请的分案申请， 原申请的 中国专利申请号为 200580017316.0。 0002 本申请要求申请于 2004 年 5 月 30 日的美国临时申请号 60/521,593 的优先权， 在 此引入该申请作为参考。 技术领域 0003 本申请涉及 10- 炔丙基 -10- 去氮杂氨基 (deazaamino)- 蝶呤的组合应用及在治 疗 T 细胞淋巴瘤中的应用。 背景技术 0004 10- 炔丙基 -10- 去氮杂氨基蝶呤 (“PDX” 或 “10- 炔丙基 -10dAM” ) 是已经被试验 过的并在一些情况下发现其对肿瘤治疗有益的一大类化合物之一。该化合物。

6、， 具有图 1 所 示结构， 已经由 DeGraw 等人在 “10- 炔丙基 -10- 去氮杂氨基蝶呤的合成及抗肿瘤活性” J. MedicalChem.36 ： 2228-2231(1993) 一文中公开， 并显示了其在鼠 L1210 细胞株中作为生长 抑制剂以及较少程度地抑制化学酶二氢叶酸还原酶 ( “DHFR” ) 活性。另外， 已经使用 E0771 鼠乳腺肿瘤模型给出所述化合物的抗肿瘤性质的一些结果。 由于在试验中所使用的小白鼠 的数量少 ( 每剂量 3 个 )、 缺少量化该数据可靠性的标准偏差信息、 以及所使用的最高剂量 对所述小白鼠实际上是有毒的的事实， 因而该数据是不可靠的。 尽。

7、管如此， 假定该数据对于 药物在治疗人类肿瘤中的效果具有一些预示价值， 它最多预见药物， 以同等水平的耐受量， 其具有可与氨甲喋呤相比的性质抑或稍微比氨甲喋呤好的性质。 0005 PCT 公开号 WO98/02163 公开了令人惊讶的观察结果， 即当在异种移植模型中 试验它们抗人类肿瘤的效果时， 更高纯化的 PDX 组合物目前已被证明是远胜于氨甲喋呤 (“MTX” ) 而且甚至优于更新的临床候选药依达曲沙 (edatrexate，“ETX” )。此外， 10- 炔 丙基 -10-dAM 显示出对于治疗肿瘤的令人惊讶的能力， 即在治疗停止之后数周也没有肿瘤 生长的迹象。因此， 可以根据本发明使用。

8、含有 10- 炔丙基 -10dAM 的高纯化组合物来治疗肿 瘤， 所述肿瘤既包括实体肿瘤又包括白血病。 针对在治疗人类乳腺瘤及人类肺癌中的应用， 对所述组合物进行说明。 0006 对于 PDX 的后续研究表明其自身及与其他治疗剂组合都是有用的。例如， Sirotnak 等人在临床癌症研究 (Clinical Cancer Research) 第 6 卷， 第 3705-3712 页 (2000) 报道了 PDX 与丙磺舒的共同给药， 丙磺舒是一种 cMOAT/MRP- 类胞膜 ATP 酶抑制剂， 大大增强了 PDX 在体内抗人类实体肿瘤的效果。PDX 以及 PDX 与基于铂的化疗剂的组合已 经。

9、被证明对于抗间皮瘤是有效的。(Khokar 等人， Clin.Cancer Res.7 ： 3199-3205(2001)。 0007 术语 “淋巴瘤”是指多种疾病状态， 包括非何杰金氏 (Non-Hodgkins) 淋巴瘤 (NHL)、 弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、 滤泡性淋巴瘤(FL)、 何杰金氏(Hodgkins)病、 伯 基特氏(Burkitt s)淋巴瘤、 皮肤T细胞淋巴瘤、 原发性中枢神经系统淋巴瘤以及淋巴瘤 说 明 书 CN 102824346 A 3 2/6 页 4 性转移。在大多数情况下， 淋巴瘤以癌性 B 细胞的存在为特征。但是， 在 T 细胞淋巴瘤中， 所述疾病状。

10、态以癌性 T 淋巴细胞为特征。 发明内容 0008 根据本发明， 使用 PDX 治疗 T 细胞非何杰金氏淋巴瘤。因此， 根据本发明的一个方 面， 提供一种治疗 T 细胞非何杰金氏淋巴瘤的方法， 其包括给患有淋巴瘤的病人服用治疗 有效量的PDX。 对人的初步临床结果已经表明该治疗是显著有效的， 甚至对于其他治疗方式 难以治疗的淋巴瘤而言。 附图说明 0009 图 1 给出 PDX 和氨甲喋呤的结构 ； 0010 图 2 给出根据现有技术制备的不纯的 10- 炔丙基 -10dAM 制剂的 HPLC ； 0011 图 3 给出根据本发明的高纯化 PDX 制剂的 HPLC ； 0012 图 4 给出在。

11、制备根据本发明的化合物中有用的合成路线图 ； 以及 0013 发明详述 0014 本申请涉及 10- 炔丙基 -10- 去氮杂氨基蝶呤在治疗 T 细胞淋巴瘤中的应用。 0015 T 细胞淋巴瘤是其中病人的 T 细胞被确定是癌性的淋巴瘤。T 细胞淋巴瘤包括多 种情况， 其包括但不限于 ： 0016 (a) 成淋巴细胞性淋巴瘤， 其中恶性肿瘤出现于来自胸腺的原始淋巴前体 ； 0017 (b) 成熟的或周边 T 细胞肿瘤， 包括 T 细胞原淋巴细胞性白血病 (T cell prolymphocytic leukemia)、 T 细胞粒状淋巴细胞性白血病、 侵蚀性 NK- 细胞白血病、 皮肤 T 细胞。

12、淋巴瘤 ( 蕈样肉芽肿病 / 西泽里综合征 )、 整形大细胞淋巴瘤、 T 细胞型、 肠道病型 T 细胞淋巴瘤， 成人 T- 细胞白血病 / 淋巴瘤、 其包括那些与 HTLV-1 相联系的、 血管免疫母 细胞 T 细胞淋巴瘤以及皮下脂膜性 T 细胞淋巴瘤 (subcutaneous panniculitic T cell lymphoma) ； 以及 0018 (c) 周边 T 细胞淋巴瘤， 其最初包括淋巴结淡色拟薄壁组织皮层并从不成长为真 正的小囊类型。 0019 在本发明的一个实施方案中， 所述组合物包含 “高纯化” PDX。如同本说明书及权 利要求书在此所使用的，“高纯化” 的组合物含有基。

13、本上不含其他叶酸衍生物， 特别是10-去 氮杂氨基蝶呤的PDX， 它们能够干涉所述PDX的抗肿瘤活性。 在本发明范围内的组合物可以 包括用于将所述 PDX 配制为用于治疗应用的适宜剂量单位形式的载体或赋形剂， 以及另外 的， 非叶酸治疗剂。 0020 可以用上文的 DeGraw 论文中或者美国专利号 5,354,751 的实施例 7 中公开的方 法合成 PDX， 其在此被引入作为参考。由该方法制备的所述产物的 HPLC 评价显示出杂质 A 以相当的量 (-4.6 ) 存在 ( 图 2)， 其具有与 10- 去氮杂胺基 - 蝶呤一致的保留时间。因 此， 如果使用该合成方法， 那么超出 DeGra。

14、w 等人的论文所公开的进一步纯化是必需的。这 样的纯化可以通过另外的 HPLC 或结晶来进行从而去除所述 10- 去氮杂氨基蝶呤及其他可 能存在的叶酸衍生物。 0021 图 3 给出使用实施例 1 中所述方法制备的根据本发明的基本上由 10- 炔丙 说 明 书 CN 102824346 A 4 3/6 页 5 基 -10dAM 组成的高纯化制剂的 HPLC。在这种情形中， PDX 的量 ( 当由 HPLC 峰面积确定时 ) 接近 98， 而且与 10- 去氮杂氨基蝶呤相对应的峰未被处理软件检出， 尽管在该区域存在 次要的基线波纹。 0022 PDX 已经被用于 I/II 期研究， 其中有患有侵。

15、蚀性淋巴瘤的病人参加， 包括三个患 有耐药的 T 细胞淋巴瘤的病人。已经获得了以下病例摘要。每个病人还被用叶酸 ( 每日 1mg/m2， 开始于用 PDX 治疗之前 1 周 ) 及 B12( 每月 1mg/m2) 补充给药。 0023 病人 1. 0024 诊断 ： 周边 T 细胞淋巴瘤， IV 期 0025 人口资料 ： 48 岁男性 0026 早先的治疗 ： CHOP4 疗程 (2002 年七月 -2002 年十一月 )- 难治疗的 0027 ICE4 疗程 (2002 年十二月 )- 难治疗的 0028 Campath(2003 年三月 -2003 六月 )- 混合响应的 0029 预治。

16、疗阶段 ： 广泛性疾病皮肤疾病 0030 研究治疗 ： PDX 135mg/m21 剂量 0031 毒性 ： 3 级口腔炎 ； 3 级中性白细胞减少 ； 败血症 0032 响应 ： 通过 PET 扫描， 基本上完全缓解 0033 注解 ： 该病人在从带有革兰氏阳性细菌的开放皮肤损害发展为菌血症及败血症后 最终死去。 0034 病人 2. 0035 诊断 ： 成淋巴细胞性淋巴瘤， 前体 T 细胞， IV 阶段 0036 人口资料 ： 65 岁女性 0037 早先的治疗 ： L20- 复合组合化学疗法， 自从 2002 年五月， 用药两年多。曾从 2002 五月到 2004 年二月服用 MTX。2。

17、004 年十二月复发。 0038 预治疗阶段 ： 广泛蔓延的复发 0039 研究治疗 ： 每 4 周， PDX 30mg/m23 周。 0040 至今完成 3 个疗程 0041 毒性 ： 无 0042 反应 ： 通过 PET 及 CT 扫描， 完全缓解 0043 注解 ： 在一剂量 PDX 之后， 患有具广泛性基于窦的疾病 (extensive sinus based disease) 的本质上耐氨甲喋呤的疾病的病人开始缓解。 0044 病人 3. 0045 诊断 ： HTLV 相关的 T 细胞淋巴瘤 0046 人口资料 ： 38 岁男性 0047 早先的治疗 ： EPOCH-infusion。

18、al 组合化学疗法 0048 2003 年十月 -2004 年二月。 0049 预治疗阶段 ： 留有腋下疾病 0050 研究治疗 ： 每周 PDX 30mg/m2 每 4 周 3 次 2 疗程 0051 毒性 ： 无 0052 反应 ： 完全缓解 说 明 书 CN 102824346 A 5 4/6 页 6 0053 注解 ： 到第一疗程结束之时， 临床上明显的疾病完全消失， 耐受良好， 没有毒性。 0054 病人 4 ： 0055 诊断 ： 脂膜性 T 细胞淋巴瘤 0056 人口资料 ： 25 岁男性 0057 早先的治疗 ： Ontak( 难治疗的 )， 9/02-11/02 ； Targ。

19、retin 及 IFN1/03-10/03 0058 ( 持久的部份缓解 ) ； CHOP 4/04-6/04 ； ICE 6/04， 0059 CyPen 7/04-8/04， Targretin/MTX 9/04-2/05 0060 研究治疗 ： 每周 PDX 30mg/m24 0061 反应 ： 通过 PET， 临床完全缓解 0062 毒性 ： 无 0063 注解 ： 治愈皮下病变， 以及难以计数的、 大的溃疡性颗粒状病变 0064 到目前为止， 仅 4 例患有 T 细胞淋巴瘤的病人曾经用 PDX 治疗， 而且所有 4 人均满 足完全缓解标准， 即使基于敏感的 PET 图像技术。有趣地，。

20、 以 135mg/m2治疗的病人仅仅接 受对于治疗具有显著响应的单剂量药物， 而其它的已经仅仅接受在每周计划表上的小的普 通剂量。 0065 对于本发明中的应用， PDX 被有益地配制为药物制剂， 其作为制剂的一部分。所述 具体的剂型将取决于给药的方法， 但可以包括片剂、 胶囊、 口服液以及用于静脉注射、 肌肉 注射或腹腔内给药的可注射溶液。一个适宜的给药剂量计划表包括每两周 150mg/m2的给 药。 当然可以标明较低的剂量水平， 这取决于单个病人的耐受量， 或者是否采用更频繁的给 药。 例如， 在体表面积的40-120mg/m2/日左右的剂量水平是合适的。 在给药3周， 每周30mg/ m。

21、2的剂量之后停药1周， 在每周30mg/m26周之后停药1周， 或者在每周6周的计划表上 逐步增加 PDX 的剂量， 这也是适宜的。如果采用较不频繁给药， 那么可以使用更高的剂量水 平。 因此， 在一般意义上， 30-275mg/m2的剂量适用于各种给药剂量计划表， 例如135-275mg/ m2用于每两周的剂量， 以及 30-150mg/m2用于每周的剂量。所述适当的剂量的确定使用类 似于美国专利号 6,323,205 中所描述的规程， 其在此引入作为参考， 是在所述领域的技术 之内的。 0066 PDX 可以与其他细胞毒性的及抗肿瘤的化合物结合使用， 包括长春花生物 碱例如长春碱、 诺维本。

22、 (navclbine) 以及去乙酰长春酰胺 ； 丙磺舒、 核苷酸类似物例 如吉西他滨 (gemcitabine)、 5- 氟尿嘧啶及阿糖胞苷 ； 烷化剂例如环磷酰胺或异环磷 酰胺 (ifosfamide) ； 顺氯氨铂或卡铂 (carboplatin) ； 亚叶酸 ； 如紫杉醇或多西他赛 (docetaxel) 的紫杉烷类 ； 抗 -CD20 单克隆抗体， 有或者没有放射性同位素， 以及抗生素例 如阿霉素及丝裂霉素。还可以使用 PDX 与若干这些其他抗肿瘤剂或与生长因子抑制剂以及 抗血管生成剂的组合。 0067 PDX 及其他药剂可以被同时给药或作为共同治疗用药法的部分以组合的方式使 用， 。

23、其中所述 PDX 和所述其他药剂不同时给药。例如， 另一药剂可以在相对于所述 PDX 给药 的之前、 随即或一段时间 ( 例如 24 小时 ) 之后给药。因此， 对于本申请的目的， 除非另作说 明， 术语给药一般是指所述药物的同时给药或者顺序给药， 以及在有或者没有所述药物之 间的时间间隔下在平行治疗用药法中以任一顺序给药。 0068 PDX 适宜于与叶酸及维生素 B12 的补充给药结合使用以减小所述治疗的副作用。 说 明 书 CN 102824346 A 6 5/6 页 7 例如， 可以以叶酸 ( 每日 1mg/m2， 始于用 PDX 治疗之前 1 周 ) 及 B12( 每月 1mg/m2)。

24、 治疗病 人。 0069 实施例 1 0070 图 4 给出根据本发明的在制备 10- 炔丙基 -10-dAM 中有用的合成路线图。将油分 散体中的 60 NaH(1.06g， 26.5mmol) 在 18mL 筛干燥的 THF 中的混合物冷却到 0。将该 冷的混合物用高对苯二甲酸二甲酯 (5.0g， 24mmol， 图 4 中的化合物 1) 在干燥 THF(7mL) 中 的溶液处理， 并且将所述混合物在 0搅拌 1 小时。加入溴丙炔 (26.4mmol)， 并且将该混合 物在 0搅拌另外 1 小时， 然后在室温下搅拌 16 小时。将所得到的混合物用 2.4mL 的 50 乙酸处理， 然后将其。

25、倒入 240mL 水中。用醚 (2150mL) 提取所述混合物。将所述醚提取 物合并， 用 Na2SO4干燥， 并浓缩为橙黄色的油。通过以环己烷 -EtOAc(8 1) 洗脱的硅胶 (230-400目， 600mL)色谱法得到白色固体状的-炔丙基高对苯二甲酸二甲酯(化合物2) 产物 (4.66)， 其通过 TLC( 环己烷 -EtOAe， 3 1) 显现是单一的。但是， 该产物的质谱数据 显示其是所需的产物 2 和双炔丙基化化合物的混合物。没有检测到起始原料 1。HPLC 显示 单-与双-炔丙基化产物的比例为大约31。 由于所述双炔丙基化产物， 不同于化合物1， 不能在所述反应的下一步中生成不。

26、需要的副产品， 该原料适合于转化为化合物3。 为了避免 在将加载的物料转化为最终产物期间 10-dAM 的连续形成， 在进行所述合成过程所使用的 产物中没有原料化合物 1 是非常重要的， 因为从 10- 炔丙基 -1-dAM 中完全除去 10-dAM 是 非常困难的。 0071 通过将 0.36g 油分散体中的 60 NaH(9mmol) 与 10mL 干燥的 DMF 混合形成混合 物并将其冷却到 0-5。以第一反应的产物 ( 化合物 2)(2.94g， 12mmol) 在 10mL 干燥 DMF 中的溶液滴加处理该冷的混合物， 然后在 0搅拌 30 分钟。在冷却到 -25之后， 滴加 2， 。

27、4， 二氨基 -6-( 溴甲基 )- 蝶啶氢溴酸盐 -0.2 异丙醇 (1.00g， 2.9mmol) 在 10mL 干燥 DMF 中 的溶液， 同时将温度保持在接近 -25。在 2 小时内， 允许所述搅拌的混合物升温至 -10。 在 -10下的另外 2 小时后， 允许所述温度升至 20 ； 在室温下继续搅拌 2 小时以上。然 后通过添加固体CO2将所述反应调节到pH值为7， 在真空浓缩去除溶剂之后， 将所述残余物 用二乙醚搅拌并收集不溶解于醚的物质， 用水洗涤， 并真空干燥从而得到 1.49g 的粗产物。 将该粗产物溶于 CHCl3-MeOH(10 1) 用于应用到硅胶柱。经过相同的溶剂体系。

28、洗脱得到 10- 炔丙基 -10- 甲酯基 -4- 脱氧 -4- 氨基 -10- 去氮杂蝶酸甲基酯 ( 化合物 3)， 对于 TLC 其是单一的， 收率 40 (485mg)。 0072 将搅拌了的化合物 3(400mg， 0.95mmol) 在 2- 甲氧基乙醇 (5mL) 中的混悬液用水 (5mL) 处理， 然后用 10氢氧化钠溶液 (3.9mL) 处理。在室温下搅拌该混合物 4 小时， 在此 期间得到溶液。用乙酸调节该溶液 pH 值至 8 并在高真空下将其浓缩。将所得到残余物溶 于 15mL 水并酸化至 pH 值 5.5-5.8 导致形成沉淀。收集所述沉淀， 用水洗涤并真空干燥从 而回收。

29、 340mg 化合物 4( 收获率 91 )。HPLC 分析表明产物纯度为 90。 0073 通过在 115-120、 在 15mL 的 DMSO 中将化合物 4(330mg) 加热 10 分钟进行脱羧。 在 10 分钟之后通过 HPLC 的试验证实所述转化基本上是完全的。通过在真空中 (40恒温 浴 ) 蒸馏去除 DMSO。将所述残余物用 0.5N 的 NaOH 搅拌从而得到一种透明溶液， 用 1NHCl 酸化至 pH 值 5.0 得到黄色固体状的 10- 炔丙基 -4- 脱氧 -4- 氨基 -10- 去氮杂蝶酸 ( 化合 物 5)， 收率 70。HPLC 表明此阶段产物纯度在 90。 说 。

30、明 书 CN 102824346 A 7 6/6 页 8 0074 在 含 有 三 乙 胺 (148mg， 1.46mmol) 的 DMF(10mL) 中， 使 用 BOP 试 剂 ( 苯 并 三 唑-1-基氧三(二甲基氨基)膦翁六氟磷酸盐(benzotriazole-1-yloxytris(dimethylami no)phosphonium hexafluorophosphate， 287mg， 0.65mmol， Aldrich Chemical Co.) 将化合 物 5(225mg， 0.65mmol) 与二甲基 L- 谷氨酸酯盐酸盐 (137mg， 0.65mmol) 偶联。将该混合。

31、物 在20-25搅拌3小时然后蒸干。 将所述残余物用水搅拌， 以及收集所述水不溶的粗产物并 真空干燥。通过以含有三乙胺 (0.25， 按体积 ) 的 CHCl3-MeOH(10 1) 洗脱的硅胶色谱 法纯化该粗产物 (350mg) 从而回收 165mg 的 10- 炔丙基 -10- 去氮杂氨基蝶呤二甲酯 ( 化 合物 6， 50收率 )， 其对于 TLC(CHCl3-MeOH 5 1) 是单一的。 0075 将化合物 6(165mg， 0.326mmol) 悬浮于 10mL 搅拌的 MeOH 中， 该 MeOH 中被添加了 0.72mL(0.72 毫当量 )1N 的 NaOH。在室温下继续搅拌。

32、直到数小时后得到溶液。将所述溶液 保持在 20-25持续 8 小时， 然后用 10mL 水稀释。减压蒸发去除所述甲醇， 并将所述浓缩 了的含水溶液在 20-25放置另外 24 小时。然后 HPLC 显示所述酯水解是完全的。将该透 明含水溶液用乙酸酸化至 pH 值 4.0 从而沉淀浅黄固体状的 10- 炔丙基 -10- 去氮杂氨基蝶 呤， 所收集的、 水洗涤了的并真空干燥了的产物重量为 122mg(79收率 )。通过元素分析、 质子 NMR 及质谱的评价试验都与所指定的结构完全一致。HPLC 分析表明纯度为 98而且 确定所述产物中无 10- 去氮杂氨基蝶呤。 说 明 书 CN 102824346 A 8 1/2 页 9 图 1 图 2 图 3 说 明 书 附 图 CN 102824346 A 9 2/2 页 10 图 4 说 明 书 附 图 CN 102824346 A 10 。