一种灵芝和人参复合提取物及其制备方法和应用.pdf

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1、(10)申请公布号 CN 103191164 A (43)申请公布日 2013.07.10 CN 103191164 A *CN103191164A* (21)申请号 201310127859.4 (22)申请日 2013.04.12 A61K 36/258(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (71)申请人 吉林大学 地址 130012 吉林省长春市前进大街 2699 号 (72)发明人 杨海滨 (74)专利代理机构 北京万科园知识产权代理有 限责任公司 11230 代理人 刘俊玲 张亚军 (54) 发明名称 一种灵芝和人参复合提取物及其制备方法和 应用 (57) 摘要。

2、 本发明提供一种灵芝和人参的复合提取物， 它是以 1:5 5:1 重量比的灵芝和人参为原料， 混合制成复合粉末后， 用超临界CO2流体萃取得到 的灵芝 / 人参复合油。本发明所述的灵芝和人参 复合提取物， 比分别提取的灵芝油和人参油以同 比例简单混合得到的混合油的药理活性有显著提 高。 本发明还提供所述复合提取物的制备方法， 及 其在制备抗肿瘤药物中的应用。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 7 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书7页 (10)申请公布号 CN 103191164 A CN 103191164 A *CN10。

3、3191164A* 1/1 页 2 1. 一种灵芝和人参的复合提取物， 其特征在于 ： 它是以 1:5 5:1 重量比的灵芝和人 参为原料， 混合制成复合粉末后， 用超临界 CO2流体萃取得到的灵芝 / 人参复合油。 2. 权利要求 1 所述的灵芝和人参的复合提取物， 其特征在于 ： 所述的灵芝为灵芝子实 体 ； 所述的人参为生晒参。 3. 权利要求 1 所述的灵芝和人参的复合提取物， 其特征在于 ： 所述的灵芝和人参的重 量比为 1:5 5:1， 优选 1:1。 4. 权利要求 1 所述的灵芝和人参的复合提取物， 其特征在于 ： 所述的复合粉末细度为 20 40 目。 5.权利要求1所述的灵。

4、芝和人参的复合提取物， 其特征在于 ： 所述的超临界CO2流体萃 取灵芝 / 人参复合油的方法， 是所述的灵芝和人参复合粉末在由萃取釜、 一级分离釜和二 级分离釜构成的超临界 CO2流体萃取系统中， 经过装料、 萃取、 分离过程， 得到灵芝 / 人参复 合油。 6. 权利要求 5 所述的灵芝和人参的复合提取物， 其特征在于 ： 所述的装料是将所述的 灵芝和人参的复合粉末含水率控制在 12 15%， 然后均匀装填到超临界 CO2流体萃取料罐 中， 装填密度控制在 0.10 0.25g/cm3。 7. 权利要求 5 所述的灵芝和人参的复合提取物， 其特征在于 ： 所述的萃取是将 CO2在 装填有所。

5、述的灵芝和人参复合粉末的萃取系统中循环， 同时向萃取釜打入 85% 乙醇作夹带 剂 ； 按 CO2流体体积和料罐横截面积计， 控制 CO2流量为 0.3 0.6L/h.cm2； 萃取釜内的压 力保持在 28 32MPa、 温度保持在 55 60； 夹带剂打入量按灵芝 / 人参复合粉末重量计 为 0.01 0.04mL/g ； 萃取时间为 2.5 24 小时。 8. 权利要求 5 所述的灵芝和人参的复合提取物， 其特征在于 ： 所述的分离是将一级分 离釜的压力保持在 6 8MPa、 温度保持在 60 65； 二级分离釜的压力保持在 4 6MPa、 温度保持在 35 40。 9. 制备权利要求 1。

6、 所述的灵芝和人参的复合提取物的方法， 包括以下步骤 ： 1） 将灵芝和人参分别初步粉碎后， 按照所述1:55:1的重量比混合均匀， 再进一步将 灵芝和人参的混合物粉碎至 20 40 目 ； 2） 将步骤 1） 得到的灵芝和人参的复合粉末含水率控制在 12 15%， 然后均匀装填到 超临界 CO2流体萃取料罐中， 装填密度控制在 0.10 0.25g/cm3； 3） 将 CO2在由萃取釜、 一级分离釜和二级分离釜构成的超临界 CO2流体萃取系统中循 环， 同时向萃取釜打入85%乙醇作夹带剂 ； 按CO2流体体积和料罐横截面积计， 控制CO2流量 为 0.3 0.6L/h.cm2； 萃取釜内的压。

7、力保持在 28 32MPa、 温度保持在 55 60； 夹带剂 打入量按灵芝 / 人参复合粉末重量计为 0.01 0.04mL/g ； 萃取时间为 2.5 24 小时 ； 所 述的一级分离釜的压力保持在 6 8MPa、 温度保持在 60 65； 上述的二级分离釜的压力 保持在 4 6MPa、 温度保持在 35 40， 最终得到所述的灵芝和人参的复合提取物。 10. 权利要求 1 所述的灵芝和人参的复合提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。 权 利 要 求 书 CN 103191164 A 2 1/7 页 3 一种灵芝和人参复合提取物及其制备方法和应用 技术领域 0001 本发明涉及食用药用真菌和草本。

8、植物的深加工领域， 确切地说， 是涉及一种对灵 芝和人参的活性成分进行萃取的方法。 背景技术 0002 灵芝 （Ganodermalucidum） 是一种灵芝属真菌， 也称为灵芝草、 仙草、 瑞草、 神草等， 是补益强壮， 扶正固本的珍贵药材， 具有多种生理活性和药理作用， 是祖国传统中药宝库中 的珍贵药材。从现代中医学的观点来看， 灵芝具有无毒性、 无副作用 ； 能对全身器官有疗 效 ； 可以促使全部器官机能正常化等特点。灵芝中的有效成分主要有灵芝多糖、 灵芝酸、 核 苷类、 甾醇类、 生物碱类、 氨基酸多肽类、 无机元素和其它不饱和脂肪酸类。在我国， 根据外 观对灵芝进行划分有赤芝、 紫芝。

9、、 黄芝、 白芝、 黑芝、 青芝等六种， 主要分布在我国黑龙江、 吉 林、 河北、 山东、 山西、 内蒙古、 安徽、 江苏、 浙江、 江西、 广东、 广西、 贵州、 云南、 湖南、 福建及 台湾等地。其中长白山灵芝是一种生长在我国东北长白山中的赤芝。 0003 灵芝油是存在于灵芝子实体和灵芝孢子中的脂溶性挥发成分， 在常温下呈膏状， 其主要成分为灵芝酸 （主要为三萜类物质） 、 氨基酸多肽和脂肪酸。其中三萜类物质具有强 烈的药理活性， 有抑制肿瘤、 止痛、 镇静、 抑制组织胺释放、 解毒、 保肝、 毒杀肿瘤细胞等功 效。目前已知的灵芝三萜成分有一百多种。一般地讲， 灵芝生长期越长， 其中的灵芝。

10、酸的含 量就越高， 而灵芝酸含量越高灵芝就越贵重。目前， 灵芝油已被制成丸剂或片剂， 也可以制 成口服液用于抑制肿瘤， 延长癌症患者的寿命。 0004 人参 (Ginseng) 是一种多年生草本植物， 被人们称为 “百草之王” 。它是驰名中外、 老幼皆知的名贵药材。 目前已知人参中的药用成分主要有人参皂甙类、 有机酸及酯类、 维生 素类、 甾醇、 甙类以及多种酶。在人参油中主要含有皂甙和有机酸及酯， 其中人参二醇和人 参三醇均是三萜类化合物， 有较强的药理活性。对久病、 失血、 脱液所致元气欲脱， 神疲脉 微 ； 脾气不足之食少倦怠， 呕吐泄泻 ； 肺气虚弱之气短喘促， 咳嗽无力 ; 心气虚衰。

11、之失眠多 梦， 惊悸健忘， 体虚多汗 ； 津亏之口渴， 消渴 ； 血虚之萎黄， 眩晕 ; 肾虚阳萎， 尿频， 气虚外感 等有着显著的疗效。 0005 目前， 超临界二氧化碳萃取是将灵芝油从灵芝实体和灵芝孢子中高效率无成分破 坏地提取出来的一种有效方法。在用超临界二氧化碳萃取灵芝油方面的发明创造中， 中国 专利申请号为 200610033686， 公开号为 CN1850124 公开的一种超临界 CO2萃取灵芝孢子 油的方法， 是选用破壁灵芝孢子粉为原料， 混合一定量的粒状填料， CO2压力范围在 10 35MPa， 温度范围在 35 55下萃取 2-5 小时 ； 一级分离釜压力范围在 8 10M。

12、Pa， 温度范 围在 30 50， 二级分离釜压力范围在 4 6MPa， 温度范围在 30 50， 进行分离， 获得 淡黄色灵芝孢子油。申请号为 200410017468， 公开号为 CN1562334 公开的全灵芝孢子中有 效成分的超临界 CO2萃取方法， 是将粉碎为颗粒的灵芝子实体与灵芝孢子混合物置于萃取 釜， CO2压力范围在 12 40MPa， 温度范围在 32 48下萃取 3-6 小时 ； 在分离釜减压降温 后流出呈油、 膏状态的全灵芝孢子提取物。申请号为 200610000663， 公开号为 CN100998613 说 明 书 CN 103191164 A 3 2/7 页 4 公开。

13、的一种超临界技术生产灵芝有效成分的方法， 是以小麦培养灵芝菌的成品为原料， 采 用超临界二氧化碳萃取技术获得灵芝油、 灵芝三萜类成分、 灵芝核苷成分、 灵芝甾醇和生物 碱。申请号为 200410005571， 公开号为 CN1560072 公开的一种从灵芝中制备灵芝三萜酸和 灵芝多糖的方法， 是将灵芝子实体的颗粒物为原料， 向提取罐内注入 CO2和极性溶剂， 提取 压力为2550MPa， 极性溶剂注入量按体积百分比为1020%， 提取温度为3580， 提取 时间2-4小时， 得到灵芝三萜酸提取液。 申请号为200810023834.9， 公开号为CN101269095A 的灵芝与灵芝孢子超临界。

14、复合式加工方法， 是将灵芝子实体与破壁灵芝孢子粉混合制成复 合粉， 利用超临界 CO2进行提取， 同时渗入 30% 5% 夹带剂水、 乙醇， 以便得到灵芝孢子油。 申请号为 200310107892.7， 公开号为 CN1607001A 的用灵芝菌丝体萃取灵芝油的方法， 是将 灵芝菌丝体粉碎后用超临界 CO2萃取灵芝油。萃取釜内萃取压力为 15 35MPa ； 萃取温度 为 35 60 ； CO2流体流量为 60 100kg/h ； 萃取时间为 0.5 4h。 0006 上述专利主要从萃取釜及分离釜中 CO2的压力、 温度及萃取时间等条件角度， 在一 定程度上解决了从相关灵芝子实体、 灵芝孢子。

15、粉以及灵芝菌丝等原料中提取灵芝油问题。 然而以一定重量比例的灵芝子实体和人参制成复合粉， 用超临界 CO2方法获取灵芝 / 人参 复合油方面的技术还未见专利报道。从中医学来讲， 灵芝油与人参油合理配伍能够提高药 理活性， 而从灵芝人参复合粉末中萃取得到的灵芝 / 人参复合油与简单同比例灵芝油和人 参油相加得到的混合油相比， 其前者的药理活性显著高于后者。 因此， 从灵芝人参复合粉中 提取灵芝 / 人参复合油对于相关中医新药的发展具有重要的意义。 发明内容 0007 本发明的目的之一是提供一种灵芝和人参的复合提取物， 具有比分别提取的灵芝 和人参提取物的混合物更显著的药理活性。 0008 本发明。

16、的另一个目的是提供所述灵芝和人参的复合提油取物的制备方法。 0009 本发明的再一个目的是提供所述灵芝和人参的复合提油取物在药物制备中的应 用。 0010 本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的 ： 0011 提供一种灵芝和人参的复合提取物， 它是以 1:5 5:1 重量比的灵芝和人参为原 料， 混合制成复合粉末后， 用超临界 CO2流体萃取得到的灵芝 / 人参复合油。 0012 所述的灵芝优选灵芝子实体 ； 进一步优选长白山特产的赤灵芝子实体。所述的人 参优选生晒参 ； 进一步优选长白山特产的生晒参。 0013 所述的灵芝和人参的重量比优选 1:5 5:1， 更优选 1:2 2:1 ； 最。

17、优选 1:1。 0014 所述的复合粉末， 优选细度为 20 40 目。 0015 所述的超临界 CO2流体萃取灵芝 / 人参复合油的方法， 优选使所述的灵芝和人参 复合粉末在由萃取釜、 一级分离釜和二级分离釜构成的超临界 CO2流体萃取系统中， 经过装 料、 萃取、 分离过程， 得到灵芝 / 人参复合油。 0016 所述的装料优选将所述的灵芝和人参的复合粉末含水率控制在 12 15%， 然后均 匀装填到超临界 CO2流体萃取料罐中， 装填密度控制在 0.10 0.25g/cm3； 0017 所述的萃取优选将 CO2在装填有所述的灵芝和人参复合粉末的萃取系统中循环， 同时向萃取釜打入 85% 。

18、乙醇作夹带剂 ； 按 CO2流体体积和料罐横截面积计， 控制 CO2流量为 说 明 书 CN 103191164 A 4 3/7 页 5 0.3 0.6L/h.cm2； 萃取釜内的压力保持在 28 32MPa、 温度保持在 55 60 ； 夹带剂打 入量按灵芝 / 人参复合粉末重量计为 0.01 0.04mL/g ； 萃取时间为 2.5 24 小时。 0018 所述的分离优选一级分离釜的压力保持在 6 8MPa、 温度保持在 60 65； 二级 分离釜的压力保持在 4 6MPa、 温度保持在 35 40。 0019 本发明还提供所述的灵芝和人参的复合提取物的制备方法， 包括以下步骤 ： 002。

19、0 1） 将灵芝和人参分别初步粉碎后， 按照所述1:55:1的重量比混合均匀， 再进一 步将灵芝和人参的混合物粉碎至 20 40 目 ； 0021 2） 将步骤 1） 得到的灵芝和人参的复合粉末含水率控制在 12 15%， 然后均匀装 填到超临界 CO2流体萃取料罐中， 装填密度控制在 0.10 0.25g/cm3； 0022 3） 将 CO2在由萃取釜、 一级分离釜和二级分离釜构成的超临界 CO2流体萃取系统 中循环， 同时向萃取釜打入 85% 乙醇作夹带剂 ； 按 CO2流体体积和料罐横截面积计， 控制 CO2 流量为 0.3 0.6L/h.cm2； 萃取釜内的压力保持在 28 32MPa。

20、、 温度保持在 55 60； 夹 带剂打入量按灵芝/人参复合粉末重量计为0.010.04mL/g ； 萃取时间为2.524小时 ； 所述的一级分离釜的压力保持在 6 8MPa、 温度保持在 60 65； 上述的二级分离釜的压 力保持在 4 6MPa、 温度保持在 35 40， 最终得到本发明所述的灵芝和人参的复合提取 物。 0023 本发明所述的制备方法中， 步骤 2） 所述的控制灵芝和人参的复合粉末含水率， 可 以通过现有的多种方法完成， 例如可以通过以下方法实现 ： 0024 首先测定灵芝子实体和生晒参的含水率。方法是将一个批次的灵芝子实体和生 晒参分别取样破碎成粒度为 8 12mm 的块。

21、体， 称其重量 （W0） 后放置到真空干燥箱中， 其真 空度为小于 50Pa， 在 60下恒温干燥 2 小时， 自然冷却至室温后取出称重 （W） ， 其含水率为 =（W0-W） /W0。再对同一批次的将灵芝子实体和生晒参块体称重， 分别为 W灵芝和 W人参， 按 一定重量比例 W灵芝/W人参=1:5 5:1 混合均匀并继续破碎到 20 40 目粉末。根据所测定 的含水率， 灵芝和 人参对同一批次的灵芝子实体和生晒参复合粉用水进行加湿或干燥处 理， 使复合粉的含水率保持在 12 15%。 0025 本发明所述的制备方法中， 步骤 3） 所述的 CO2流体的流量 Q（单位是立升 / 小时 （L/h。

22、） ） 与复合粉的装填密度及料罐的横截面积 S（单位是平方厘米 （cm2） ） 有关， 定义比流 量 q=Q/S ； 所述的夹带剂的打入量 V 与复合粉的重量 W 有关。 0026 步骤 3） 上述的萃取中， 在所述工艺条件下萃取 24 小时后已基本没有萃取物， 可以 认为经 24 小时萃取已将复合粉末中的灵芝 / 人参复合油完全萃取出来。定义萃取率 =X 小时复合油提取重量 （wx） /24 小时复合油提取重量 （w24） 。所述的 X 小时复合油提取重量 是指在上述工艺参量下， 经 X 小时萃取后在一级分离釜和二级分离釜得到的复合油重量之 和 ； 所述的24小时复合油提取重量是指在同样工艺。

23、参量下， 经24小时萃取后在一级分离釜 和二级分离釜得到的复合油重量之和。 0027 在本发明所述的工艺参量下， 经4小时萃取， 其萃取率高于95%。 经色谱分析表 明， 其三萜类物质含量高于 22%。 0028 本发明还提供所述的灵芝和人参的复合提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。 0029 所述的抗肿瘤药物优选抗口腔粘膜癌的药物。 0030 与现有技术相比， 本发明先将灵芝和人参混合制粉后， 再经超临界 CO2流体萃取， 说 明 书 CN 103191164 A 5 4/7 页 6 得到的灵芝和人参复合提取物， 不仅在灵芝和人参活性成分提取率方面取得了显著提高， 而且本发明人经过试验发现， 经。

24、本发明方法获得的灵芝 / 人参复合油， 比分别提取的灵芝 油和人参油以同比例简单混合得到的混合油的药理活性显著提高， 有以下对比试验为证 ： 0031 1. 试验制剂及动物饲养 ： 0032 取本发明实施例 1 制备的复合油 10 克， 用 0.5% 羧甲基纤维素钠溶液配制成浓度 为 10g/L 的灵芝 / 人参复合油羧甲基纤维素钠溶液， 简称 A 溶液。 0033 再取单独用灵芝经超临界CO2流体萃取的灵芝油5克、 单独用人参经超临界CO2流 体萃取的人参油 5 克， 混合在一起， 用 0.5% 羧甲基纤维素钠溶液配制成浓度为 10g/L 的灵 芝 / 人参混合油羧甲基纤维素钠溶液， 简称 。

25、B 溶液。 0034 再取单独用灵芝经超临界 CO2流体萃取的灵芝油 10 克， 用 0.5% 羧甲基纤维素钠 溶液配制成浓度为 10g/L 的灵芝油羧甲基纤维素钠溶液， 简称 C 溶液。 0035 取 0.5% 羧甲基纤维素钠溶液为 D 溶液。 0036 6 7 周龄健康的金黄地鼠 240 只， 体重 80 100g， 雌雄各半。随机分为 A、 B、 C 和 D 四组， 在干燥、 空气流通、 24 小时光暗循环条件下雌雄分笼饲养， 饲以金黄地鼠专用饲 料， 饮用水为普通自来水。 0037 用分析纯丙酮将二甲基苯丙蒽 （9,10-dimethyl-1,2-benzanthracene,DMBA。

26、， 购自 Sigma 公司） 配置成 0.5%（5g/L） 的 DMBA 丙酮液。用于诱导金黄地鼠颊囊癌变。 0038 2. 试验方案 ： 0039 （1） A 组 60 只， 常规饲养 2 周后 , 每日上午禁食 4 小时， 按 100mg/kg 剂量将 A 溶 液 1ml 经口直接喂入。每周一、 三、 五对金黄地鼠双侧颊囊圆周式涂布 2 次 DMBA 丙酮液， 涂 药前后吹干颊囊粘膜， 涂药后禁水禁食 2 小时。涂布期间分 6， 9， 12 周 （周日） 各处死 20 只， 得到双侧颊囊标本。 0040 （2） B 组 60 只， 常规饲养 2 周后， 按 100mg/kg 剂量灌胃喂服 。

27、B 溶液 1ml。其余同 A 组。 0041 （3） C 组 60 只， 常规饲养 2 周后， 按 100mg/kg 剂量灌胃喂服 C 溶液 1ml。其余同 A 组。 0042 （4） D 组 60 只， 常规饲养 2 周后， 灌胃喂服 D 溶液 1ml。其余同 A 组。 0043 各组处死后取动物颊囊粘膜病变组织进行常规脱水、 包埋、 切片并作 HE 染色。根 据WHO口腔癌前病变协作中心12项诊断标准进行分级诊断， 比较各组病损的组织学严重程 度。并结合肉眼观察。得到结果表 1 和表 2 所示 ： 0044 表中 “正常” 为正常黏膜 ： 复层角化鳞状上皮， 细胞排列整齐， 无钉突或钉突不。

28、明 显。棘细胞层较人之正常黏膜薄， 基底层细胞明显， 类似人之正常黏膜。 0045 表中 “单纯增生” 为上皮单纯增生黏膜 ： 上皮多数呈过度角化， 少数错角化。棘层 增厚。基底膜仍整齐， 固有层下有淋巴细胞、 浆细胞浸润。 0046 表中 “异常增生” 为上皮异常增生黏膜 ： 多数基底细胞极性消失， 上皮钉突呈钉状、 乳头状。上皮层次紊乱， 胞核浓染， 并有核仁增大， 有丝分裂相增加。棘细胞层中单个或成 团细胞角化。基底膜仍完整， 未侵入黏膜下层。根据异型性程度和累及范围分为轻、 中、 重 三级。轻度和中度非典型增生， 累及上皮层下部的 1/3 2/3 处， 病因消除后可恢复正常。 重度非典。

29、型增生累及上皮 2/3 以上尚为达到全层且很难逆转， 常转变为癌。 说 明 书 CN 103191164 A 6 5/7 页 7 0047 表中鳞癌 ： 细胞异形性明显， 上皮增殖并突入结缔组织内， 呈团块状或条索状排 列， 部分可见明显的角化珠， 核分裂象增加， 细胞与胞核呈多形性。B、 C 组所诱导的癌均为 疣状癌， D 组多为浸润性鳞癌。 0048 表 1 动物颊囊粘膜组织病理观察结果 （例） 0049 0050 表 2 颊囊癌变过程中不同组织学发生情况 （例） 0051 病损A 组B 组C 组D 组 正常3221122 单纯增生1919145 异常增生9193039 鳞癌01414 0。

30、052 从表 1 和表 2 中可以看出， 6 周组中， 各组正常粘膜上数次序为 A 组 B 组 C 组 D 组， 上皮异常增生例数次序为 A 组 B 组 C 组 D 组 ； 9 周组中， 中重度上皮异常增 生和癌变例数 A 组为 0， 有 B 组 C 组 D 组次序 ； 12 周组中 A 组癌变例数为 0， 有 B 组 C 组 D 组次序。表 2 是两组颊囊癌变过程中不同组织学发生情况统计， 能更明显地看出各 组的癌变规律。 0053 从表 1 和表 2 中可以看出， 在整个癌变动态观察期内， A 组未见有癌变情况发生， 其余各组病变严重程度和所诱导的癌的恶性度有 B 组 C 组 D 组规律。。

31、这些实验结果证 说 明 书 CN 103191164 A 7 6/7 页 8 实了本发明实施例 1 的灵芝 / 人参复合油、 单独提取后再简单混合的灵芝 / 人参混合油、 以 及单纯的灵芝油均对口腔粘膜癌具有抑制作用， 其中， 本发明实施例1的灵芝/人参复合油 对口腔粘膜癌的抑制作用最为显著。对比结果表明， 本发明方法获得的灵芝 / 人参复合油， 比分别提取的灵芝油和人参油以同比例简单混合得到的混合油的药理活性显著提高。 0054 目前， 对于上述药理活性显著提高的原因和机制尚不完全明确。 但发明人认为， 人 参和灵芝两种中药材以 1:5 5:1 的特定比例配伍后， 在混合制粉和萃取过程中可能。

32、会产 生有效成分之间的相互药理激活作用， 由此导致从混合粉末中萃取分离出来的复合油与灵 芝提取油和人参提取油的简单混合物在成分和含量上都有不同。 具体实施方式 0055 实施例 1 ： 0056 将灵芝 / 人参重量比为 1:1（W灵芝/W人参=1） ， 粒度为 20 目， 含水率为 13%， 重量为 300g 的复合粉末按 0.15g/cm3密度均匀装填在料罐内 （装满料罐） 。将料罐放入到萃取釜 中， 密封萃取系统。调整相关阀门使 CO2在萃取系统中循环， 同时向系统中打入 85% 的乙醇 6ml， 控制CO2比流量为0.4L/h.cm2， 萃取釜的压力保持在30MPa， 萃取釜的温度保持。

33、在60； 一级分离釜的压力保持在 7MPa， 一级分离釜的温度保持在 65 ； 二级分离釜的压力保持在 5MPa， 二级分离釜的温度保持在 35。萃取时间为 4 小时， 分别在一级分离釜得到复合油 4.5g， 在二级分离釜得到复合油 0.3g， 共计 4.8g， 萃取率为 96%。 0057 实施例 2 ： 0058 将灵芝 / 人参重量比为 5:1（W灵芝/W人参=5） ， 粒度为 40 目， 含水率为 12%， 重量为 300g 的复合粉末按 0.10g/cm3密度均匀装填在料罐内。将料罐放入到萃取釜中， 密封萃取 系统。调整相关阀门使 CO2在萃取系统中循环， 同时向系统中打入 85% 。

34、乙醇 12ml， 控制 CO2 比流量为 0.3L/h.cm2， 萃取釜的压力保持在 28MPa， 萃取釜的温度保持在 55 ； 一级分离釜 的压力保持在 6MPa， 一级分离釜的温度保持在 60 ； 二级分离釜的压力保持在 4MPa， 二级 分离釜的温度保持在 37。萃取时间为 2.5 小时， 分别在一级分离釜得到复合油 4.0g， 在 二级分离釜得到复合油 0.2g， 共计 4.2g， 萃取率为 84%。 0059 实施例 3 ： 0060 将灵芝 / 人参重量比为 1:5 （W灵芝/W人参=0.2） ， 粒度为 20 目， 含水率为 14%， 重量为 400g 的复合粉末按 0.18g/。

35、cm3密度均匀装填在料罐内。将料罐放入到萃取釜中， 密封萃取 系统。调整相关阀门使 CO2在萃取系统中循环， 同时向系统中打入 85% 乙醇 10ml， 控制 CO2 比流量为 0.5L/h.cm2， 萃取釜的压力保持在 30MPa， 萃取釜的温度保持在 58 ； 一级分离釜 的压力保持在 7.9MPa， 一级分离釜的温度保持在 63 ； 二级分离釜的压力保持在 4MPa， 二 级分离釜的温度保持在 38。萃取时间为 3 小时， 分别在一级分离釜得到复合油 4.1g， 在 二级分离釜得到复合油 0.3g， 共计 4.4g， 萃取率为 88%。 0061 实施例 4 ： 0062 将灵芝 / 人。

36、参重量比为 1:5（W灵芝/W人参=0.2） ， 粒度为 20 目、 含水率为 15%、 重量 为 500g 的复合粉末按 0.25g/cm3密度均匀装填在料罐内。将料罐放入到萃取釜中， 密封萃 取系统。调整相关阀门使 CO2在萃取系统中循环， 同时向系统中打入 85% 乙醇 5ml， 控制 CO2 比流量为 0.6L/h.cm2， 萃取釜的压力保持在 32MPa， 萃取釜的温度保持在 59 ； 一级分离釜 说 明 书 CN 103191164 A 8 7/7 页 9 的压力保持在 8MPa， 一级分离釜的温度保持在 64 ； 二级分离釜的压力保持在 6MPa， 二级 分离釜的温度保持在 40。萃取时间为 3.5 小时， 分别在一级分离釜得到复合油 6.4g， 在 二级分离釜得到复合油 1.1g， 共计 7.5g， 萃取率为 90%。 说 明 书 CN 103191164 A 9 。