用在靶向治疗的敏化剂、医药组合物、试剂盒及用途.pdf

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1、(10)申请公布号 CN 102648911 A (43)申请公布日 2012.08.29 CN 102648911 A *CN102648911A* (21)申请号 201110100357.3 (22)申请日 2011.04.20 100106076 2011.02.23 TW A61K 31/436(2006.01) A61K 31/4706(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (71)申请人 优普生物科技股份有限公司 地址 中国台湾台北市中山区中山北路一段 83 巷 5 号 3 楼之 4 (72)发明人 廖珮如 (74)专利代理机构 北京纪凯知识产权代理有限 公司。

2、 11245 代理人 赵蓉民 (54) 发明名称 用在靶向治疗的敏化剂、 医药组合物、 试剂盒 及用途 (57) 摘要 一种靶向治疗敏化剂， 其包括雷帕霉素与喹 啉衍生物。本发明另揭露一种含有上述敏化剂 的医药组合物、 含有上述两种化合物的试剂盒及 上述两种化合物的组合用在靶向治疗敏化剂的用 途。利用本发明的靶向治疗敏化剂、 医药组合物、 试剂盒及用途， 可显著提升靶向治疗对癌症的疗 效。 (30)优先权数据 (51)Int.Cl. 权利要求书 3 页 说明书 7 页 附图 1 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 3 页 说明书 7 页 附图 1 页 1。

3、/3 页 2 1. 一种靶向治疗敏化剂， 其特征在于， 包括雷帕霉素与喹啉衍生物。 2. 根据权利要求 1 所述的靶向治疗敏化剂， 其特征在于， 所述雷帕霉素是具有下列结 构式的化合物， 3. 根据权利要求 1 所述的靶向治疗敏化剂， 其特征在于， 所述喹啉衍生物是氯喹啉。 4. 根据权利要求 1 所述的靶向治疗敏化剂， 其特征在于， 所述雷帕霉素与所述喹啉衍 生物的重量百分比介于 1 100 至 1 5000 之间。 5. 根据权利要求 1 所述的靶向治疗敏化剂， 其特征在于， 所述雷帕霉素与所述喹啉衍 生物协同作用。 6. 根据权利要求 1 所述的靶向治疗敏化剂， 其特征在于， 其与一有效。

4、量的治疗上活性 成份共同投予一有需要的个体。 7. 根据权利要求 6 所述的靶向治疗敏化剂， 其特征在于， 其改善或增进所述治疗上活 性成份对所述有需要的个体中癌症或肿瘤的功效。 8. 一种医药组合物， 其特征在于， 包括一如权利要求 1 至 5 中任一项的靶向治疗敏化 剂、 一有效量的治疗上活性成份、 以及一医药上可接受的载体、 稀释剂、 赋形剂或其组合。 9. 根据权利要求 8 所述的医药组合物， 其特征在于， 所述靶向治疗敏化剂改善或增进 所述治疗上活性成份对一有需要的个体中癌症或肿瘤的功效。 10. 一种靶向治疗增敏试剂盒， 其特征在于， 包括 ： 雷帕霉素与一第一医药上可接受的载体、。

5、 稀释剂、 赋形剂或其组合 ； 以及 喹啉衍生物与一第二医药上可接受的载体、 稀释剂、 赋形剂或其组合。 11. 根据权利要求 10 所述的靶向治疗增敏试剂盒， 其特征在于， 所述雷帕霉素是具有 下列结构式的化合物， 权 利 要 求 书 CN 102648911 A 2 2/3 页 3 12. 根据权利要求 10 所述的靶向治疗增敏试剂盒， 其特征在于， 所述喹啉衍生物是氯 喹啉。 13. 根据权利要求 10 所述的靶向治疗增敏试剂盒， 其特征在于， 所述雷帕霉素与所述 喹啉衍生物协同作用。 14. 根据权利要求 10 所述的靶向治疗增敏试剂盒， 其特征在于， 其配合一有效量的治 疗上活性成份。

6、共同应用在一有需要的个体。 15. 根据权利要求 14 所述的靶向治疗增敏试剂盒， 其特征在于， 所述靶向治疗增敏试 剂盒透过雷帕霉素与喹啉衍生物的组合改善或增进所述治疗上活性成份对所述有需要的 个体中癌症或肿瘤的功效。 16. 一种雷帕霉素与喹啉衍生物的组合， 其特征在于， 其是作为靶向治疗敏化剂的用 途。 17. 根据权利要求 16 所述的用途， 其特征在于， 所述雷帕霉素是具有下列结构式的化 合物， 18. 根据权利要求 16 所述的用途， 其特征在于， 所述喹啉衍生物是氯喹啉。 19. 根据权利要求 16 所述的用途， 其特征在于， 所述雷帕霉素与所述喹啉衍生物的重 量百分比介于 1 。

7、100 至 1 5000 之间。 20. 根据权利要求 16 所述的用途， 其特征在于， 所述雷帕霉素与所述喹啉衍生物协同 作用。 21. 根据权利要求 16 所述的用途， 其特征在于， 所述靶向治疗敏化剂与一有效量的治 疗上活性成份共同投予一有需要的个体。 权 利 要 求 书 CN 102648911 A 3 3/3 页 4 22. 根据权利要求 21 所述的用途， 其特征在于， 所述靶向治疗敏化剂改善或增进所述 治疗上活性成份对所述有需要的个体中癌症或肿瘤的功效。 23. 根据权利要求 16 所述的用途， 其特征在于， 所述雷帕霉素与喹啉衍生物的组合在 所述靶向治疗实施前使用、 实施中使用。

8、或均使用。 24. 根据权利要求 16 所述的用途， 其特征在于， 所述靶向治疗敏化剂用在固体肿瘤。 25. 根据权利要求 16 所述的用途， 其特征在于， 所述靶向治疗敏化剂是固态或液态口 服剂型。 权 利 要 求 书 CN 102648911 A 4 1/7 页 5 用在靶向治疗的敏化剂、 医药组合物、 试剂盒及用途 技术领域 0001 本发明关于一种敏化剂、 医药组合物、 试剂盒以及用途， 特别关于一种用在靶向治 疗的敏化剂、 医药组合物、 试剂盒以及用途。 背景技术 0002 雷帕霉素 (rapamycin)， 或称为西罗莫司 (sirolimus)， 起初从复活节岛土壤样本 中的吸水。

9、链霉菌 (Streptomyces hygroscopicus) 吸湿后所分离出来的物质。雷帕霉素已 被证实在试管内及活体中皆具有抗霉菌活性， 尤其是对白念珠菌 (Candida albicans)， 因 此早期是将其作为农业抗真菌剂使用。然而， 后来雷帕霉素被发现具有抑制免疫反应及抗 细胞增生的特性后， 反被当作一种免疫抑制药物大量使用， 来避免例如急性异体器官移植 时发生排斥现象。 0003 目 前 市 面 上 贩 卖 含 雷 帕 霉 素 的 药 品 种 类 甚 多， 例 如 惠 氏 药 厂 (Wyeth， Collegeville， PA， USA) 的雷帕鸣 其主要用途是预防肾脏移植后。

10、的排斥反 应。其它如诺华药厂 (Novartis， East Hanover， NJ， USA) 生产的卓定康 亦 能达到避免器官排斥的功效。 0004 另一方面， 氯喹啉(chloroquine)是一种喹啉(quinoline)的衍生物， 而在超过60 年的医疗历史中， 氯喹啉被大量地用在疟疾的预防与治疗、 或治疗风湿性关节炎及因人类 免疫缺陷所引起的病症。 0005 目前已证实雷帕霉素与氯喹啉对癌症及肿瘤均有某些程度的疗效， 推论是源于本 身抗细胞增生以及诱发细胞死亡的特性， 相关的研究内容亦见于各种国际性的期刊论文。 除此之外， 在美国公开专利第 2006/0264384 号以及世界专利。

11、第 2010/132233 号中， 均揭露 了组合使用雷帕霉素与氯喹啉以抑制肿瘤生长与增殖的技术。 0006 然而， 后续的研究却未能进一步突破， 且相较于单独使用， 两种化合物的组合使用 并未具有显著提升的功效， 甚至当使用在某些特定类型的癌症时， 三种方式的疗效几近相 等， 而无组合使用应表现的优势。另外， 到目前为止， 尚无任何研究报导或文章揭露以雷帕 霉素与喹啉衍生物的组合作为癌症治疗中的敏化剂， 而非治疗上活性成份的用途。 发明内容 0007 有鉴于先前技术的不足， 因此研发本发明， 本发明的目的概略是提供一种靶向治 疗敏化剂、 医药组合物、 试剂盒与用途， 其实质上以雷帕霉素与喹啉。

12、衍生物的组合提升靶向 治疗中活性成份的治疗效果。 0008 本发明可采用以下技术方案来实现的。 0009 依据本发明的一种靶向治疗敏化剂， 其包括雷帕霉素与喹啉衍生物， 较佳包括有 效量的雷帕霉素与喹啉衍生物以及一医药上可接受的载体、 稀释剂、 赋形剂或其组合。 0010 依据本发明的医药组合物， 其包括一上述的靶向治疗敏化剂、 一有效量的治疗上 活性成份、 以及一医药上可接受的载体、 稀释剂、 赋形剂或其组合。 说 明 书 CN 102648911 A 5 2/7 页 6 0011 依据本发明的一种靶向治疗增敏试剂盒， 其包括雷帕霉素与一第一医药上可接受 的载体、 稀释剂、 赋形剂或其组合以。

13、及喹啉衍生物与一第二医药上可接受的载体、 稀释剂、 赋形剂或其组合。 0012 依据本发明的一种雷帕霉素与喹啉衍生物的组合的用途， 作为靶向治疗敏化剂。 0013 为使下述内容能清楚呈现本发明的技术特征， 以下先定义特定名词， 然后进一步 说明本发明内容。 另外要先说明的是， 在本发明中， 因靶向治疗敏化剂同时含有雷帕霉素与 喹啉衍生物， 故就意义上而言， 本说明书中有称雷帕霉素与喹啉衍生物的组合时， 可视为涵 盖靶向治疗敏化剂以及调制靶向治疗增敏试剂盒所得的产物在内。 0014 在本说明书中所使用的 靶向治疗敏化剂 一词意指一种含有至少两种物质的成 份组成， 较佳是一种含有有效量的两种物质与。

14、一医药上可接受的载体、 稀释剂、 赋形剂或其 组合的成份组成。举例而言， 上述成份组成可在靶向治疗的实施前使用、 实施中使用或均 使用， 以改善或增进一种或一种以上的有效量的治疗上活性成份对一有需要的个体中癌 症或肿瘤的功效， 进而达成消除、 抑制、 改善、 缓解、 预防癌症及其症状、 或延缓、 阻止、 反转 (reverse) 肿瘤增生速率、 或达到与上述目的相似的医疗效果。其中， 上述所称的成份组成 可以是雷帕霉素与喹啉衍生物的组合。 0015 接续上述，改善或增进治疗上活性成份对一有需要的个体中癌症或肿瘤的功效 意指在有需要的个体中， 通過使用所称的成份组成并透过例如特定的生化反应或讯号。

15、传递 途径 ( 例如特定蛋白质的磷酸化 )， 以改善、 增进或强化未使用时治疗上活性成份对癌症、 癌细胞、 变异细胞、 肿瘤细胞或其组合的细胞毒性 (cytotoxicity)、 降低未使用时癌症或上 述各类型细胞对治疗上活性成份的 抗性 (resistance)、 诱导癌症或上述各类型细胞受治 疗上活性成份引发细胞凋亡或上述三种方式的组合。 0016 雷帕霉素 0017 在本说明书中所使用的 雷帕霉素 一词意指一组含有基本雷帕霉素结构 ( 如下 所示的化学结构式 I) 的化合物的其中之一， 其包括基本雷帕霉素结构经化学或生物学修 饰或取代所产生的衍生物， 而且仍保有原基本雷帕霉素结构的性质或。

16、具有与原基本雷帕霉 素结构相似的性质。所以， 所称的 雷帕霉素 实质上包括雷帕霉素的酯类、 醚类、 酶类、 腙 类和羟胺类， 以及在基本雷帕霉素结构上的官能基已经过还原或氧化修饰或取代的雷帕霉 素。当然，雷帕霉素 一词也包括雷帕霉素的医药上可接受的盐类， 其依据化学结构式 I 上 的酸或碱基部份而形成。 0018 说 明 书 CN 102648911 A 6 3/7 页 7 0019 雷帕霉素即等同于本领域公知的西罗莫司 (sirolimus)， 当然也包括其它具有相 同或相似结构但贩卖名称不同的。另外， 除雷帕霉素外， 依据本发明而适用的还包括可以 选自由依维莫司 (everlimus)、 。

17、西罗莫司酯化物 (temsirolimus)、 他克莫司 (tacrolimus)、 2-( 二 甲 基 亚 膦 酰 ) 西 罗 莫 司 (deforolimus)、 雷 帕 霉 素 半 合 成 物 (biolimus) 及 (42S)-42- 脱氧 -42-(1 氢 - 四唑 -1- 基 )- 雷帕霉素 (zotarolimus) 组成的群组。 0020 喹啉衍生物 0021 本发明所使用的 喹啉衍生物一词除可指氯喹啉外， 喹啉衍生物还可包括但 不限于氯喹啉再经修饰或取代所生成的衍生物或氯喹啉相似物。其中， 氯喹啉再经修饰 或取代所生成的衍生物可以是具有氯喹啉化学结构， 但其上的一或多个氢或。

18、官能基再以 一或多个取代基修饰或取代的。具体而言， 上述取代基可以是卤素、 C1-10烷基、 0C1-10烷 基、 氢氧基、 C6-10芳基、 杂芳基、 杂环烷基、 alk- 杂环烷基 (alkheterocycloalkyl)、 杂烷 基 (heteroalkyl) 或 alk- 杂烷基 (alkheteroalkyl)。举例来说， 喹啉衍生物可例如但 不限于选自由羟氯喹啉 (hydroxychloroquine)、 伯氨喹啉 (primaquine)、 amoproquine、 阿莫地喹啉 (amodiaquine)、 环喹啉 (cycloquine)、 甲氯喹啉 (sontoquine)。

19、、 奎纳克林 (quinacrine)、 替布喹啉 (tebuquine) 及 bis-pyroquine 所组成的群组。 0022 化合物 0023 在本说明书中有提及且与本发明技术特征实质相关的化合物或物质均可涵盖 所称的化合物或物质以及其任何医药上可接受的形式。其中， 医药上可接受的形式可例 如但不限于含非镜像异构物 (diastereomer) 与镜像异构物 (enantiomer) 的各式异构 物 (isomer)、 盐类、 游离形式、 溶剂、 前药 (prodrug)、 多形体 (polymorph) 及消旋混合物 (racemic mixture)。 0024 比例与使用方式 0。

20、025 如欲雷帕霉素与喹啉衍生物的组合表现增敏效果， 在靶向治疗敏化剂中， 有效量 的雷帕霉素与喹啉衍生物的重量百分比可介于约 1 6108至约 2000 1 之间， 然而， 在 此范围内， 各比例间所产生的增敏效果可能具有颇大的落差， 因此， 实际运用的建议比例在 约 1 100 至约 1 5000 之间， 较佳可介于约 1 1000 至约 1 3000 之间， 更佳可是约 1 2000。当然， 上述比例亦可应用在本发明的医药组合物， 或是作为本发明靶向治疗增敏 试剂盒实际使用时的调制比例。 0026 依据上述比例举一实例， 若将雷帕霉素与喹啉衍生物的组合制成溶液形式， 以供 口服或注射时，。

21、 有效量的雷帕霉素可以是约 1pg/ml 至约 1g/ml， 而有效量的喹啉衍生物 可以是约 0.5ng/ml 至约 0.6mg/ml ； 较佳地， 有效量的雷帕霉素可以是约 100pg/ml 至约 10ng/ml， 而有效量的喹啉衍生物可以是约 10ng/ml 至约 50g/ml。 0027 依据本发明的雷帕霉素与喹啉衍生物的组合可与一有效量的治疗上活性成份共 同投予一有需要的个体。其中， 在本说明书中所使用的 有效量 一词意指所称的物质或化 合物的量， 其能有效抑制或治疗癌症症状、 或延缓或反转肿瘤增生速率。 0028 在本说明书中所使用的 治疗上活性成份 一词意指一种或多种天然物质、 或。

22、天 然物质经加工处理的产物、 或合成化合物， 其在有效的剂量范围内， 可通過改变被投予对象 的生理条件， 以对特定的疾病、 失调症或适应症产生治疗或预防效果。举例来说， 治疗上活 性成份可以是一化合物， 较佳可以是一小分子合成物、 一抗体、 一抗体 - 药物复合体或其组 说 明 书 CN 102648911 A 7 4/7 页 8 合。 具体而言， 治疗上活性成份可 例如是埃罗替尼(Erlotinib)、 贺癌平(Herceptin)或吉 非替尼 (Gefitinib) 等。 0029 另外， 需强调的是， 本说明书中所使用的 共同投予 一词包括将雷帕霉素与喹啉 衍生物的组合在治疗上活性成份的。

23、使用前、 使用中或上述两个期间均投予。 具体而言， 例如 在同一疗程中与治疗上活性成份同时投予、 在单一天内不同但相近的时间点分别投予、 甚 至在使用治疗上活性成份前的不同天但仍能维持其效力的情况下预先单独投予。 0030 在本说明书中所使用的 有需要的个体 一词意指罹患癌症、 或体内形成肿瘤、 或 具有癌症或肿瘤的病症、 或有罹患癌症或体内形成肿瘤的倾向的动物。前述动物包括哺乳 动物， 较佳是指人类。 0031 当投予有需要的个体后， 雷帕霉素可与喹啉衍生物产生协同作用， 因而能形成比 雷帕霉素、 或喹啉衍生物单独使用时， 更显著的增敏效果。另外， 虽公知技术已有将雷帕霉 素或喹啉衍生物分别。

24、作为治疗上活性成份使用， 即一种抗癌或抗肿瘤药剂， 但治疗效果皆 相当有限。 而申请人发现雷帕霉素与喹啉衍生物的组合并不适用在担任一靶向治疗疗程中 提供治疗效果的活性成份， 而应是类似辅助的角色， 即是本发明揭露的靶向治疗敏化剂。 0032 治疗对象与投药路径 0033 依据本发明的雷帕霉素与喹啉衍生物的组合可应用在任一形式癌症或肿瘤的靶 向治疗， 尤其适合应用在例如肺癌、 大肠癌或乳癌， 特别适合用在各式固体肿瘤， 以治疗肿 瘤、 延缓肿瘤增长或预防肿瘤形成。 0034 本发明的雷帕霉素与喹啉衍生物的组合可以制成例如但不限于固态或液态口服 剂型， 如锭剂或胶囊， 较佳是与有效量的治疗上活性成。

25、份共同制成口服锭剂。至于， 其它能 使用的剂型还包括丸剂、 扁囊剂、 颗粒剂 (granule)、 散剂、 口嚼锭 (chewing gum)、 悬浮剂、 乳化剂、 栓剂或溶液。 0035 除口服外， 雷帕霉素与喹啉衍生物的组合亦可以与治疗上活性成份共同或分别地 透过肠胃道外的路径投予， 例如但不限于静脉输注、 或皮下、 肌内、 髓鞘内、 腹腔内、 直肠内、 阴道内、 鼻内、 胃内、 气管内、 肺内、 肿瘤上或肿瘤周边 (peritumoral) 的注射或植入方式。 0036 综上所述， 依据本发明的靶向治疗敏化剂、 医药组合物、 试剂盒与用途， 其利用雷 帕霉素与喹啉衍生物的组合增加癌细胞或。

26、肿瘤的敏感性， 从而在与治疗上活性成份配合应 用时， 能达到改善或增进了治疗上活性成份对有需要的个体中癌症或肿瘤的功效。 附图说明 0037 图 1 是实验例三的流式细胞分析仪分析在吉非替尼作用下细胞凋亡结果的数据 图 ； 以及 0038 图 2 是实验例四的流式细胞分析仪分析在埃罗替尼作用下细胞凋亡结果的数据 图。 0039 主要元件符号说明 ： 0040 无 具体实施方式 0041 以下将配合图式说明本发明的实施例与实验例， 惟相关雷帕霉素、 喹啉衍生物及 说 明 书 CN 102648911 A 8 5/7 页 9 两种化合物组合的比例与使用方式等均可参照前述， 在此不再赘述。 0042。

27、 依据本发明提供的一种靶向治疗敏化剂， 其包括雷帕霉素与喹啉衍生物。在本实 施例中， 雷帕霉素是具有前述化学结构式 I 的化合物， 而喹啉衍生物是氯喹啉。 0043 雷帕霉素与喹啉衍生物的制备方法均是本发明所属技术领域的专业人员所熟知， 另外， 将两种化合物共同制成靶向治疗敏化剂的技术亦可透过本说明书的揭示而轻易知 晓。在本实施例中， 靶向治疗敏化剂还可包括一医药上可接受的载体、 稀释剂、 赋形剂或其 组合， 以利在制成合用的剂型或配方形式。其中， 医药上可接受的载体、 稀释剂或赋形剂可 例如是公知的碳酸镁、 硬脂酸镁、 滑石、 糖、 乳糖或其组合。 0044 靶向治疗敏化剂并不以雷帕霉素与喹。

28、啉衍生物均匀混合调制为条件， 换言之， 在 同一剂型的靶向治疗敏化剂内， 雷帕霉素与喹啉衍生物可以具有其它程度的混合， 甚至不 混合亦可， 举例而言， 靶向治疗敏化剂可以是一锭剂或胶囊， 其中部分是雷帕霉素， 另一部 分是喹啉衍生物。较佳地， 在本实施例中， 雷帕霉素与氯喹啉可以自贩卖厂商处购得 ( 请参 考实验例 )， 而靶向治疗敏化剂可通过混合粉状的两种化合物所制成的一散剂。 0045 一般而言， 本发明所属技术领域的专业人员可轻易知晓雷帕霉素与喹啉喹啉衍生 物适合使用的剂量范围， 此同时是本发明所适用的剂量范围， 举例而言， 有需要的个体每日 每公斤体重可接受的雷帕霉素的剂量范围在约 0。

29、.001 毫克至约 1,000 毫克之间， 而可接受 的喹啉衍生物的剂量范围在约0.015毫克至约1,500毫克之间， 较佳地， 雷帕霉素的剂量范 围是约 0.1 毫克至约 100 毫克之间， 而喹啉衍生物的剂量范围是约 1.5 毫克至约 150 毫克 之间。当然， 需特别强调 的是， 雷帕霉素或喹啉衍生物的剂量可能会随配合的治疗上活性 成份、 投予路径或有需要的个体及其生理状况的不同而有所变化。 普遍而言， 口服方式需要 较高的剂量， 反观治疗初期所使用的剂量则相对较低。 0046 每一配方中可含有一个剂量单位的靶向治疗敏化剂， 换言之， 一个配方即含有足 可对有需要的个体产生增敏效果的剂量。

30、， 以方便直接投予。 在本实施例中， 每一包散剂即含 有一个剂量单位的靶向治疗敏化剂。 当然， 在本发明其它实施例中， 一个剂量单位的靶向治 疗敏化剂亦可分散在数个次剂量单位或次包装中， 例如分散在二至三粒锭剂或胶囊内并包 装在同一泡罩包装 (blister pack) 中。 0047 在本实施例中， 由于靶向治疗敏化剂与有效量的治疗上活性成份相互分离， 是以， 在使用时， 可采分别投予的方式。举例而言， 在实施治疗上活性成份的一个治疗疗程中， 靶 向治疗敏化剂可以在实施前使用、 实施中使用或均使用。 具体而言， 靶向治疗敏化剂可与治 疗上活性成份在同一时间点投予或在同一天内的不同时间点分别投。

31、予， 例如两种化合物相 差 1 小时或 5 小时。此外， 靶向治疗敏化剂与治疗上活性成份在投予次数上与顺序上亦无 特别限制， 在本实施例中， 在一个治疗疗程中， 可仅投予一次靶向治疗敏化剂即可。而在其 它实施例中， 靶向治疗敏化剂则在每次投予治疗上活性成份前均提供， 或每投予两次、 三次 或五次治疗上活性成份的期间即重新投予一次靶向治疗敏化剂， 本发明在此不限。 0048 进一步说明， 在本实施例中， 当靶向治疗敏化剂在靶向治疗实施前使用、 实施中 使用或均使用时， 雷帕霉素与喹啉衍生物可发生协同作用， 以改善或增进一种或一种以上 的有效量的治疗上活性成份对有需要的个体中癌症或肿瘤的功效， 进。

32、而达成消除、 抑制、 改 善、 缓解、 预防癌症及其症状、 或延缓、 阻止、 反转肿瘤增生速率、 或达到与上述目的相似的 医疗效果。 特别是因为本发明的靶向治疗敏化剂的使用， 可透过特定的生化反应途径， 例如 说 明 书 CN 102648911 A 9 6/7 页 10 特定蛋白质的磷酸化， 而改善、 增进或强化未使用时治疗上活性成份对癌症、 癌细胞、 变异 细胞、 肿瘤细胞或其组合的细胞毒性、 降低未使用时癌症或上述各类型细胞对治疗上活性 成份的抗性、 诱导癌症或上述各类型细胞受治疗上活性成份引发细胞凋亡或上述三种方式 的组合。 0049 本发明另一实施例亦提供一种医药组合物， 其含有一靶。

33、向治疗敏化剂、 一有效量 的治疗上活性成份以及一医药上可接受的载体、 稀释剂、 赋形剂或其组合。其中， 靶向治疗 敏化剂与治疗上活性成份的相关说明可参考前述内容， 与 此不再赘述， 只再针对不足或未 说明处加以解释。而医药上可接受的载体、 稀释剂或赋形剂则可以是本发明领域中适用的 固体或液体， 但以固体为佳， 其例如公知的碳酸镁、 硬脂酸镁、 滑石、 糖、 乳糖或其组合。 0050 需特别说明的是， 在本实施例中， 医药组合物可依一定比例将靶向治疗敏化剂与 有效量的治疗上活性成份共同制成一单一剂型， 例如一锭剂或散剂， 以利在例如针对特定 类型的癌症提供治疗， 而与前述靶向治疗敏化剂独立制成、。

34、 投予， 而具较大弹性的取向不 同。在本实施例中， 靶向治疗敏化剂与治疗上活性成份的比例可以是 1000 1 至 0.1 1， 较佳是 100 1 至 1 1。当然， 两种化合物的比例可以随投予对象及其生理条件与治疗癌 症的类型而改变。 至于， 制备医药组合物的方法、 剂型与其中除靶向治疗敏化剂外的组成成 份是本发明所属技术领域的专业人员根据本发明的揭露所能完成的。 0051 在本发明又一实施例中， 另外提供一种靶向治疗增敏试剂盒， 其配合一有效量的 治疗上活性成份共同应用在一有需要的个体。其中， 靶向治疗增敏试剂盒包括一雷帕霉素 与一第一医药上可接受的载体、 稀释剂或赋形剂以及一喹啉衍生物与。

35、一第二医药上可接受 的载体、 稀释剂或赋形剂。其中， 雷帕霉素、 喹啉衍生物与其它部分的相关说明可参考前述 内容， 在此不再赘述， 只再针对不足或未说明处加以解释。 0052 第一与第二医药上可接受的载体、 稀释剂、 赋形剂或其组合可以是本发明领域所 公知的物质或成份， 且个别与雷帕霉素或喹啉衍生物制备成配方的方法与剂型亦可以是本 发明所属技术领域的专业人员所熟知的。但是， 需特别强调的是， 在本实施例中， 靶向治疗 增敏试剂盒可具有独立的包装或容器， 例如泡罩包装， 以分别容置或储存例如以雷帕霉素 与第一医药上可接受的赋形剂制成的锭剂以及以喹啉衍生物与第二医药上可接受的赋形 剂制成的锭剂， 。

36、而在应用时再同时提供给有需要的个体服用， 或经调制后再投予给有需要 的个体。 0053 当然， 在其它实施例中， 上述两种化合物更可共同制成针剂形式， 其在投予时或投 予前一段适当的时间内， 例如一至数周内 ( 如 10 天内、 5 天内或 24 小时内 )， 依照比例进行 调制所得。 据上， 当雷帕霉素与喹啉衍生物必须分别投予、 以不同剂型投予或组成比例需要 调整时， 使用本发明的靶向治疗增敏试剂盒特别有利。 0054 在本发明又一实施例中， 提供一种雷帕霉素与喹啉衍生物的组合作为靶向治疗敏 化剂的用途。其中， 雷帕霉素、 喹啉衍生物与其它部分的相关说明可参考前述内容， 在此不 再赘述。 0。

37、055 承上所述， 依据本发明的靶向治疗敏化剂、 医药组合物、 试剂盒与用途， 其利用雷 帕霉素与喹啉衍生物的组合增加癌细胞或肿瘤的敏感性， 从而在与治疗上活性成份配合应 用时， 能达到改善或增进了治疗上活性成份对有需要的个体中癌症或肿瘤的功效。 0056 实验例一 ： 制备靶向治疗敏化剂 说 明 书 CN 102648911 A 10 7/7 页 11 0057 本 发 明 所 使 用 的 雷 帕 霉 素 与 氯 喹 啉 分 别 购 自 西 克 玛 艾 尔 迪 希 公 司 (Sigma-Aldrich， Inc， St.Louis， MO， USA)。取得后， 在室温下分别秤取雷帕霉素与氯喹。

38、啉 约 1 毫克与约 2 克， 依照重量百分比 1 2000 的比例均匀混合粉状的雷帕霉素与氯喹啉。 接着， 包装成为一散剂或扁囊剂的形式， 保存在室温下。 0058 实验例二 ： 制备医药组合物 0059 同样向西克玛艾尔迪希公司 (Sigma-Aldrich， Inc， St.Louis， MO， USA) 购买雷帕 霉素与氯喹啉。其后， 依据实验例一所述的方法先制成靶向治疗敏化剂。接着， 在室温下再 分别取靶向治疗敏化剂与埃罗替尼各约 1 毫克与约 0.1 毫克， 依照重量百分比约 10 1 的 比例将两种化合物均匀混合， 并添加足量的硬脂酸镁作为医药上可接受的载体， 透过压缩 方式制成。

39、锭剂形式的医药组合物， 同样保存在室温下。 0060 实验例三 ： 靶向治疗敏化剂提高吉非替尼对癌细胞造成细胞凋亡的效果 0061 以组织培养技术培养鳞状上皮癌(epidermoid carcinoma)细胞株A431在含有浓 度 10的胎牛血清 (FBS) 的细胞培养液 DMEM 至适当数量。接着， 取含有数量 1106的细 胞的悬浮液接种在 6 孔 (6-wells) 培养皿中。另外， 在室温下分别调制浓度 10nM 的雷帕霉 素、 浓度 10M 的氯喹啉及浓度 5M 的吉非替尼溶液。同样在室温下将上述调制完成的溶 液依序加入。其后， 将培养皿置入 37的培养箱继续培养 48 小时。依序将。

40、各孔中的培养液 及药液吸除， 加入磷酸盐缓冲溶液 (PBS) 清洗， 再利用胰蛋白酵素溶液 (trypsin-EDTA) 收 取细胞分析细胞凋亡。 0062 细胞凋亡以磷脂酰丝氨酸外翻分析法并透过使用细胞凋亡分析试剂盒 Annexin V(BD Pharmingen) 进行， 操作流程则依循随附手册。概略而言， 收取后的 A431 细胞再以 PBS 清洗 3 次， 接着立即以 Annexin V/ 碘化丙啶 (propidium iodide， PI) 染色处理部分细 胞。此些处理的细胞先加入浓度 1的胎牛血清蛋白 (BSA)， 其后在加入 222.5l 的结合 缓冲液 (binding bu。

41、ffer) 后， 直接以 10l 的 PI 以及 2.5l 的 Annexin V-FITC 进行染 色， 且立即将反应移至低温且无光的环境下作用 10 分钟。以流式细胞分析仪及其分析软件 FACSCalibur 计算细胞凋亡百分比。 0063 图 1 为实验例三的流式细胞分析仪分析在吉非替尼作用下细胞凋亡结果的数据 图。请参考图 1 所示， 标示 对照组 的是依据相同处理步骤但未加入氯喹啉或雷帕霉素的 A431 细胞的凋亡比例， 标示 氯喹啉 或 雷帕霉素 的则分别是依据相同处理步骤但仅加 入氯喹啉或雷帕霉素的 A431 细胞的凋亡比例， 而标示 氯喹啉与雷帕霉素 的则是同时加 入两种化合物。

42、。 由数据结果明显可见， 在吉非替尼作为活性成份的靶向治疗实验中， 氯喹啉 或雷帕霉素单独是敏化剂时， 细胞凋亡比例虽有提高， 但均未超过 15。然而， 两种化合物 同时使用时， 细胞凋亡比例则增加约 40至 45。 0064 实验例四 ： 靶向治疗敏化剂提高埃罗替尼对癌细胞造成细胞凋亡的效果 0065 依据与实验例三大致相同的步骤与条件， 惟治疗上活性成分改用浓度 0.5M 的 埃罗替尼。图 2 为实验例四的流式细胞分析仪分析在埃罗替尼作用下细胞凋亡结果的数 据图。参考图 2， 由数据结果明显可见， 氯喹啉与雷帕霉素的组合可显著提升埃罗替尼造成 A431 细胞的细胞凋亡的比例接近 30， 优于不使用或各别使用的对照组。 0066 以上所述仅是举例性， 而非限制性。 任何未脱离本发明的精神与范畴， 而对其进行 的等效修改或变更， 均应包括在权利要求所限定的范围内。 说 明 书 CN 102648911 A 11 1/1 页 12 图 1 图 2 说 明 书 附 图 CN 102648911 A 12 。