治疗过敏性疾病的方法及组合物.pdf

本发明提供用以治疗过敏性疾病和/或气管发炎的方法及药学组合物。在一实施例中，提供一种用以治疗过敏性疾病和/或气管发炎的方法，包含对一个体施用一有效量的抗感染剂以减轻过敏性发炎情况。在另一实施例中，此方法还包括在对该个体施用一抗感染剂之前、之后或同时，对该个体施用一抗发炎剂。

权利要求书
1.  一种治疗过敏性疾病的方法，包含对一个体施用一有效量的抗感染剂来减轻过敏性发炎反应。

2.  根据权利要求1所述的方法，其特征在于该抗感染剂为雷巴威林。

3.  根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于该抗感染剂可通过表面局部涂抹、口腔、鼻腔、静脉注射或腹膜内注射来施用。

4.  根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于该抗感染剂的用量在5-20μg/每公斤个体体重。

5.  根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于该过敏性疾病是选自花粉热、支气管型气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎及过敏性休克。

6.  根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于更包含在施用该抗感染剂之前、之后或同时，对该个体施用一抗发炎剂，且该抗发炎剂的用量在5～10μg/每公斤个体体重。

7.  根据权利要求6所述的方法，其特征在于该抗发炎剂及该抗感染剂是同时通过鼻腔施用。

8.  根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于该抗发炎剂是选自由吸入性类固醇、白三烯受体颉抗剂及β-2受体激动剂所组成的群组中。

9.  根据权利要求8所述的方法，其特征在于该吸入性类固醇为皮质固醇。

10.  根据权利要求9所述的方法，其特征在于该皮质固醇是选自由布地奈德、倍他米松、地塞米松、甲泼尼龙、强的松、泼尼松、氟尼缩松、去炎松丙酮化物及氟替卡松丙酸酯所组成的群组中。

11.  根据权利要求8所述的方法，其特征在于该白三烯受体颉抗剂是选自由BLT受体的专一性颉抗剂，包括SB209247、SC53228、CP195543、CGS25019C及LY293111；和CysLT1受体的专一性颉抗剂，包括SR2640、SKF104353、ICI204219、MK476及LY170680，所组成的群组中。

12.  根据权利要求8所述的方法，其特征在于该β-2受体激动剂是选自由丙卡特罗、净特罗、沙美物罗、福莫特罗、特布他林及酚丙喘宁所组成的群组中。

13.  一种可治疗过敏性疾病的药学组合物，包含一有效量的抗感剂及一药学上可接受的载体。

14.  根据权利要求13所述的药学组合物，其特征在于该抗感染剂为雷巴威林。

15.  根据权利要求13或14所述的药学组合物，其特征在于该抗感染剂可通过表面局部涂抹、口腔、鼻腔、静脉注射或腹膜内注射来施用。

16.  根据权利要求13或14所述的药学组合物，其特征在于该抗感染剂的用量在5-20μg/每公斤个体体重。

17.  根据权利要求13或14所述的药学组合物，其特征在于该过敏性疾病是选自花粉热、支气管型气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎及过敏性休克。

18.  根据权利要求13或14所述的药学组合物，其特征在于还包含一抗发炎剂，其是在施用该抗感染剂之前、之后或同时，对该个体施用，且该抗发炎剂的用量在5～10μg/每公斤个体体重。

19.  根据权利要求18所述的药学组合物，其特征在于该抗发炎剂及该抗感染剂是同时通过鼻腔施用。

20.  根据权利要求18或19所述的药学组合物，其特征在于该抗发炎剂是选自由吸入性类固醇、白三烯受体颉抗剂及β-2受体激动剂所组成的群组中。

21.  根据权利要求20所述的药学组合物，其特征在于该吸入性类固醇为皮质固醇。

22.  根据权利要求21所述的药学组合物，其特征在于该皮质固醇是选自由布地奈德、倍他米松、地塞米松、甲泼尼龙、强的松、泼尼松、氟尼缩松、去炎松丙酮化物及氟替卡松丙酸酯所组成的群组中。

23.  根据权利要求20所述的药学组合物，其特征在于该白三烯受体颉抗剂是选自由BLT受体的专一性颉抗剂，包括SB209247、SC53228、CP195543、CGS25019C及LY293111；和CysLT1受体的专一性颉抗剂，包括SR2640、SKF104353、ICI204219、MK476及LY170680，所组成的群组中。

24.  根据权利要求20所述的药学组合物，其特征在于该β-2受体激动剂是选自由丙卡特罗、净特罗、沙美物罗、福莫特罗、特布他林及酚丙喘宁所组成的群组中。

25.  一种治疗气管发炎的方法，包含对一个体施用一有效量的抗感染剂来减轻发炎反应。

26.  根据权利要求25所述的方法，其特征在于该抗感染剂为雷巴威林。

27.  根据权利要求25或26所述的方法，其特征在于该抗感染剂可通过表面局部涂抹、口腔、鼻腔、静脉注射或腹膜内注射来施用。

28.  根据权利要求25或26所述的方法，其特征在于该抗感染剂的用量在5-20μg/每公斤个体体重。

29.  根据权利要求25或26所述的方法，其特征在于该过敏性疾病是选自花粉热、支气管型气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎及过敏性休克。

30.  根据权利要求29所述的方法，还包含在施用该抗感染剂之前、之后或同时，对该个体施用一抗发炎剂，且该抗发炎剂的用量在5～10μg/每公斤个体体重。

31.  根据权利要求30所述的方法，其特征在于该抗发炎剂及该抗感染剂是同时通过鼻腔施用。

32.  根据权利要求30所述的方法，其特征在于该抗发炎剂是选自由吸入性类固醇、白三烯受体颉抗剂及β-2受体激动剂所组成的群组中。

33.  根据权利要求32所述的方法，其特征在于该吸入性类固醇为皮质固醇。

34.  根据权利要求33所述的方法，其特征在于该皮质固醇是选自由布地奈德、倍他米松、地塞米松、甲泼尼龙、强的松、泼尼松、氟尼缩松、去炎松丙酮化物及氟替卡松丙酸酯所组成的群组中。

35.  根据权利要求32所述的方法，其特征在于该白三烯受体颉抗剂是选自由BLT受体的专一性颉抗剂，包括SB209247、8C53228、CP195543、CGS25019C及LY293111；和CysLT1受体的专一性颉抗剂，包括SR2640、SKF104353、ICI204219、MK476及LY170680，所组成的群组中。

36.  根据权利要求32所述的方法，其特征在于该β-2受体激动剂是选自由丙卡特罗、净特罗、沙美物罗、福莫特罗、特布他林及酚丙喘宁所组成的群组中。

37.  一种可治疗气管发炎的药学组合物，包含一有效量的抗感剂及一药学上可接受的载体。

38.  根据权利要求37所述的药学组合物，其特征在于该抗感染剂为雷巴威林。

39.  根据权利要求37或38所述的药学组合物，其特征在于该抗感染剂可通过表面局部涂抹、口腔、鼻腔、静脉注射或腹膜内注射来施用。

40.  根据权利要求37或38所述的药学组合物，其特征在于该抗感染剂的用量在5-20μg/每公斤个体体重。

41.  根据权利要求37或38所述的药学组合物，其特征在于该气管发炎是选自花粉热、支气管型气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎及过敏性休克。

42.  根据权利要求37或38所述的药学组合物，还包含一抗发炎剂，其是在施用该抗感染剂之前、之后或同时，对该个体施用，且该抗发炎剂的用量在5～10μg/每公斤个体体重。

43.  根据权利要求42所述的药学组合物，其特征在于该抗发炎剂及该抗感染剂是同时通过鼻腔施用。

44.  根据权利要求42所述的药学组合物，其特征在于该抗发炎剂是选自由吸入性类固醇、白三烯受体颉抗剂及β-2受体激动剂所组成的群组中。

45.  根据权利要求44所述的药学组合物，其特征在于该吸入性类固醇为皮质固醇。

46.  根据权利要求45所述的药学组合物，其特征在于该皮质固醇是选自由布地奈德、倍他米松、地塞米松、甲泼尼龙、强的松、泼尼松、氟尼缩松、去炎松丙酮化物及氟替卡松丙酸酯所组成的群组中。

47.  根据权利要求44所述的药学组合物，其特征在于该白三烯受体颉抗剂是选自由BLT受体的专一性颉抗剂，包括SB209247、SC53228、CP195543、CGS25019C及LY293111；和CysLT1受体的专一性颉抗剂，包括SR2640、SKF104353、ICI204219、MK476及LY170680，所组成的群组中。

48.  根据权利要求44所述的药学组合物，其特征在于该β-2受体激动剂是选自由丙卡特罗、净特罗、沙美物罗、福莫特罗、特布他林及酚丙喘宁所组成的群组中。

说明书治疗过敏性疾病的方法及组合物
技术领域
本发明有关可治疗过敏性疾病的方法及组合物。更特定的说，是提供一种以抗感染剂来治疗过敏性疾病的方法及组合物。
背景技术
过敏性疾病盛行于大部份的已开发及开发中国家内，其一般是被界定为由第I型过敏症(亦即，由IgE抗体所媒介的第I型免疫反应)所引起的功能性失衡(functional disturbances)，且病征包括花粉热、支气管型气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎及过敏性休克。过敏性疾病已成为当今文明社会中一项相当严重的问题，也造成庞大的社会支出。在各种过敏病征当中，最常见的就是过敏性鼻炎。在某些情况下，甚至可因过敏而导致患者死亡。依据国立台湾大学附设医院小儿科在民国八十三年所做的一份统计数据显示，在台北市的学生当中，过敏性鼻炎的盛行率超过33％，此数字约为气喘的3倍(约10～11％)，且每年患病的人数仍在持续攀升，其中，又以幼儿患者的人数增加最快。因此，许多研究都致力于要找到一种解决方案，以减轻过敏性疾病患者的经济及生理负担。
身体内过敏反应的最初阶段是发展出IgE抗体，其可与肥大细胞(mast cell)或嗜碱性白细胞表面上的受体结合。当过敏原被诸如巨噬细胞之类的抗原表现细胞吞入后，由其细胞膜表面上第二类MHC分子所代表的胜肽将可被T-细胞表面上的受体认得。这些活化的T-细胞并可制造出诸如IL-2、IFN-α、TNF-β(肿瘤坏死因子-β，衍生自Th-1细胞)及IL-4、IL-5、IL-6、IL-9及IL-10(衍生自Th-2细胞)之类的细胞活化物质(细胞素(cytokines))。所制造出来的细胞活化物质会作用在T细胞及B细胞上，以参与后续的细胞增生及分化。通过T-细胞表面上的CD40配体与B-细胞表面上的CD40配体两者的结合，可活化B-细胞。此外，随着IL-4(来自T-细胞)的加入，B-细胞会继续分化成可产生IgE的细胞。在肥大细胞中，两分子的IgE可和多价抗原结合而在细胞膜表面的受体上形成一个架桥，并导致一系列可引起去颗粒化现象(degranulation)的生化反应。诸如组织胺之类的各种生化介质均会因为此种去颗粒化现象而自肥大细胞中被分泌出来，并因而可提高微血管的通透性、使平滑肌收缩及提高黏液分泌，并与细胞膜上因为花生四烯酸的代谢而新产生的前列腺素及白三烯素等一起促成以下现象，包括皮肤出现瘙痒、潮红、荨麻疹、及血管性水肿；呼吸道出现咳嗽、窒息、胸部紧缩、呼吸困难及发疳；心血管系统出现脸色苍白、低血压及心律不整现象；在肠胃道出现恶心、呕吐及下痢；神经系统出现感觉倒错、眩晕、头痛、抽搐及丧失意识。
目前用来缓解各式过敏症状的药物本身都有一些问题，例如只能提供暂时缓解，或是长期使用会出现副作用等。已知在对幼儿患者而言相当严重的病理性慢性黏液渗出现象中扮演相当重要角色的IL-6，就无法被抗生素所压制。也有人建议长期合并使用抗生素及类固醇来压制IL-6，但是，长期施用抗生素及类固醇会导致全身免疫功能受到抑制，因此并不是一项好的解决方案。
本申请发明人在经过长期临床研究及试验后，终于找到一种可治疗过敏性疾病的新颖治疗方法，且不会产生任何副作用。本申请发明人发现一种核苷酸类似物，雷巴威林(Ribavirin)，其具有极佳的抗发炎作用，同时不会产生任何副作用，因而完成本发明。具体说，本发明的方法及组合物可提高一宿主本身的免疫力，借以抑制发炎并控制过敏的情况。
发明内容
本发明目的在于提供一种用来治疗一易感染诸如花粉热、支气管型气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎及过敏性休克之类的过敏性疾病/或易受诸如花粉热、支气管型气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎及过敏性休克之类的过敏性疾病之苦的个体的方法及组合物。
因此，本发明一态样在于提供一种治疗一个体的方法，该个体易感染过敏性疾病/或易受过敏性疾病之苦，包含对该个体施用一有效量的抗感染剂，及选择性地，一抗发炎剂。
在本发明另一态样中，本发明提供一种用以治疗一个体的药学组合物，该个体易感染过敏性疾病/或易受过敏性疾病之苦，该组合物包含一有效量的抗感染剂，并选择性地包含一抗发炎剂；及一药学上可接受的载体。
在一较佳实施例中，本发明提供一种治疗过敏性疾病的方法，包含对一个体施用一有效量的抗感染剂。在此方法中，并选择性地包含一抗发炎剂。该抗感染剂是通过鼻腔施用且其用量为5～20μg/每公斤个体体重。在另一实施例中，此方法还包含在对该个体施用一有效量的抗感染剂之前、之后或同时，对该个体施用一有效量的抗发炎剂。该抗发炎剂可选自吸入性类固醇、白三烯受体颉抗剂及β-2受体激动剂；且该抗发炎剂的用量为5～10μg/每公斤个体体重。较佳是，该抗感染剂及该该抗发炎剂两者均是从鼻腔施用。
在本发明另一较佳实施例中，本发明提供一种用来治疗过敏性疾病的药学组合物，包含一有效量的抗感染剂。在此组合物中，该抗感染剂是通过鼻腔施用且其用量为5～20μg/每公斤个体体重。在另一实施例中，此组合物还包含一有效量的抗发炎剂，其是选自吸入性类固醇、白三烯受体颉抗剂及β-2受体激动剂。该抗发炎剂可在施用该抗感染剂之前、之后或同时施用，且其用量为5～10μg/每公斤个体体重。较佳是，该抗感染剂及该该抗发炎剂两者均是从鼻腔施用。
以下，将通过详细实施说明及实施例来阐述本发明的其它特点、目的及优点。
附图说明
为让本发明的上述和其它目的、特征、优点能更明显易懂，以下将配合附图对本发明的较佳实施例进行详细说明，其中：
图1绘示出依据本发明一实施例的OVA流程的示意图；
图2绘示出依照本发明一较佳实施例，在一OVA-敏感小鼠中，雷巴威林对该些小鼠因乙醯化甲胆碱(Mch)所致的气管反应性的效果，其中在施用OVA后，再通过鼻腔施用雷巴威林(0、10、30mg/ml)，结果以平均值+标准偏差方式表示，每一组中有5只小鼠，实验是重复3次，且每次结果均类似，相较于控制组(没有雷巴威林处理者)，*p＜0.05；
图3的柱状图显示雷巴威林对小鼠气管中细胞浸润现象的影响，其中(A)为雷巴威林对3毫升BAL液中的细胞总数的影响，(B)为雷巴威林对个别细胞类型的数目的影响，包括单核细胞、嗜中性白血球、嗜伊红性白血球及淋巴细胞；实验是重复3次，且每次结果均类似，相较于控制组(没有雷巴威林处理者)，*p＜0.05且#p＜0.01；
图4的照片显示出有或无雷巴威林处理的OVA-敏感小鼠的肺组织形态，其中(A)为经过30mg/ml雷巴威林处理的OVA-敏感小鼠肺组织的光学相位差照片；(B)为经过10mg/ml雷巴威林处理的OVA-敏感小鼠肺组织的光学相位差照片；(C)为未经过雷巴威林处理的OVA-敏感小鼠肺组织的光学相位差照片，这些组织是经过苏木素及伊红染色后再以光学显微镜观察的结果(原始放大倍数＝400倍)：
图5绘示出由ELISA试验测得的实施例1.1的小鼠的BAL液中(A)INF-γ，(B)IL-4，(C)KC及(D)嗜伊红性白血球细胞亲合素的含量，实验是重复2次，且每次结果均类似，相较于控制组(没有雷巴威林处理者)，*p＜0.05。
具体实施方式
所揭示实施例及所使用的技术名词均是为了阐述本发明而用，非用以限制本发明的范畴。本发明范畴也涵盖未揭示于此，但对参阅过本说明书之后的任一熟悉本领域技术的人士来说显而易见的实施例。
本发明是有关于过敏性疾病治疗上的一种新颖的解决方案，这些过敏性疾病包括花粉热、支气管型气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎及过敏性休克等类的过敏性疾病，在本发明方案中是使用一种抗感染剂，并选择性地包含一抗发炎剂来进行治疗。因此，本发明可提供一种治疗过敏性疾病的方法，该个体易感染过敏性疾病/或易受过敏性疾病之苦，该方法包含对该个体施用一有效量的抗感染剂。在一较佳实施例中，该抗感染剂为雷巴威林(Ribavirin)。
该方法还包含一额外的步骤，即在施用该抗感染剂之前、之后或同时施用一有效量的抗发炎剂。该抗发炎剂包括，但不限于，吸入性类固醇、白三烯受体颉抗剂及β-2受体激动剂。该吸入性类固醇的适当实例包括，但不限于，诸如布地奈德(budesonide)、倍他米松(betamethasone)、地塞米松(dexamethasone)、甲泼尼龙(methylprednisolone)、强的松(prednisolone)、泼尼松(prednisone)、氟尼缩松(flunisolide)、去炎松丙酮化物(triamcinolone acetonide)及氟替卡松丙酸酯(fluticasone propionate)之类的皮质固醇。目前市面上有关于该吸入性类固醇的适当商业产品包括，例如，FLIXONASE、FLIXOTIDE、FLUTICASONE、PULMICORT、FLOVENT、AEROBID、AZNACORT及ADVAIR。该白三烯受体颉抗剂包括，但不限于，BLT受体的专一性颉抗剂，例如SB209247、SC53228、CP195543、CGS25019C及LY293111；及CysLT1受体的专一性颉抗剂，例如SR2640、SKF104353、ICI204219、MK476及LY170680。至于β-2受体激动剂的例子包括，但不限于，丙卡特罗(procaterol)、净特罗(zinterol)、沙美物罗(salmeterol)、福莫特罗(formoterol)、特布他林(terbutaline)及酚丙喘宁(fenoterol)。
该抗感染剂和/或抗发炎剂可由相同或不同途径施用，例如表面局部涂抹、口腔、鼻腔、静脉或腹膜内。较佳是，该抗感染剂和/或抗发炎剂是直接施用到受测个体的呼吸道内，例如以气雾性颗粒形式施用到鼻腔内膜。或者，可由鼻腔施用该抗感染剂，同时则以表面局部涂抹、口腔、鼻腔、静脉注射或腹膜内注射等形式来施用抗发炎剂。
该抗感染剂的用量可在1～50μg/每公斤个体体重。但如果是经鼻腔内膜施用，则其较佳用量在5～20μg/每公斤个体体重。当同时合并使用抗感染剂与抗发炎剂且是通过一与鼻腔内膜不同的路径施用时，该抗感染剂的用量较佳是在5～30μg/每公斤个体体重。
抗发炎剂的用量可为0.5～1mg/每公斤个体体重，但较佳是在5～10μg/每公斤个体体重。该抗感染剂及该抗发炎剂两者的施用剂量可以相同，也可以不同，临床医师并可在无需过度实验的情况下，依据每一个体的性别、年龄、体重和/或病史来调整。
该个体可以是一哺乳类动物，较佳是人类。
本发明一较佳实施例提供一种治疗一个体的方法，该个体易感染气管发炎/或易受气管发炎之苦，该方法包含对该个体施用一有效量的抗感染剂，及选择性地施用，一抗发炎剂。该抗感染剂为雷巴威林(Ribavirin)，且该抗发炎剂包括，但不限于，吸入性类固醇、白三烯受体颉抗剂及β-2受体激动剂。该等适当的吸入性类固醇、白三烯受体颉抗剂及β-2受体激动剂的实例，如前文所述。此外，抗感染剂及抗发炎剂的施用途径、剂量也一如前文所述。
在另一实施例中，本发明提供一种包含气雾式颗粒于其中的药物，其包含一抗感染剂，并选择性地包括一抗发炎剂；及一药学上可接受的载体。该药物是可用于治疗诸如花粉热、支气管型气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎及过敏性休克之类的过敏性疾病。
除非另作定义，否则在此所使用的技术性或科学性名词，均采用此领域普通技术人士所已知的定义，虽然也可采用与所揭示内容相当的其它方法或材料来实施本发明，但以下实施例中将会揭示可用以实施本发明的较佳材料及方法。所有曾述及的文献，其内容在此均并入作为参考。除非另作说明，否则所采用的技术均为此领域普通技术人士所已知的标准技术，至于所用的材料及方法，均为例示目的，非用以限制本发明范畴。
除非另作说明，否则单数名词“一(a，an，the)”在此均涵盖其复数形式。除了在操作实施例中或另有定义之外，所有在此用来表示一成分数量的数值大小，均为一约略范围。因此，除非代表相反意涵，否则所有的数值均可视欲求的反应效果或性质来加以变化。
实施例
以下实施例仅供阐述本发明性质及帮助此领域中具备一般通常知识者来实施本发明之用。所揭示的实施例并非用以限制本发明的范畴。
动物
BALB/c雌鼠是向国立台湾大学医学院附设动物中心(台湾，台北)购买并寄养在该处。所用实验动物的年龄在6周～10周间，且每一实验所使用的小鼠年龄均大致相当。同时，动物实验的流程并获得国立台湾大学医学院动物委员会的认可。
诱使老鼠过敏的卵白蛋白(ovalbumin，OVA)流程及施用雷巴威林来诱发气管过反应性(Airway hyper-responsiveness，AHR)
将小鼠随机分成4组并以腹膜内注射OVA(10μg)的方式使其过敏，其中所使用的OVA是在实验开始前的第0天，即先与硫酸铝钾(又称白矾(alum)，2mg)形成错化物。所有的小鼠并分别在实验开始后的第14天及第28天，分别再次追加另一剂OVA(10μg)。负控制组中的小鼠，是注射磷酸缓冲液(PBS)。至于其它3组实验组中的小鼠，则在第38-40天，分别由鼻腔施用20μl的0、10或30mg/ml的雷巴威林及0.05mg的OVA。在第41天时测量每一只小鼠的AHR反应，并在第42天实验结束时牺牲所有的小鼠。图1标出本试验所用OVA流程的时间顺序。
测量气管过反应性(AHR)
依照下列方式来评估在OVA-敏感小鼠中雷巴威林对这些小鼠因气雾化-乙酰化甲胆碱(aerosolized methacholine(Mch))所致的气管过反应性的效果。首先，依据本发明实施例1.1所述的方法以OVA使小鼠敏感，之后通过鼻腔分别在有或无雷巴威林(正控制组小鼠是施以盐水，其它组的小鼠则分别施以10或30mg/ml的雷巴威林)的情况下，提高Mch的浓度，分别为0、6.25、12.5、25及50mg/ml，之后，并通过测量一体积描记仪的主腔室(其中包含该受测个体)与一参考腔室间的压力差数值的方式，来测量全身的体积描记图。每一图是记录约3分钟并取其全部记录时间内的平均值。所计算后的数据是以超过正控制组以盐水刺激所获得的基础数值的倍数来表示，其单位为压力差(Penh)。结果示于图2。从图2可看出Penh会随着Mch浓度的增加而增加，且以OVA过敏、但未施以雷巴威林处理的小鼠会对Mch的刺激发展出明显的AHR反应。相较于以PBS处理的小鼠来说，在鼻腔内施用雷巴威林可抑制OVA-敏感小鼠对Mch刺激所发展出的AHR反应。
雷巴威林对气管嗜伊红性白血球细胞发炎(airway eosinophilicinflammation)的治疗效果
至于雷巴威林是否可缓减OVA-敏感小鼠的气管发炎现象，则是利用分析该等小鼠在最后刺激后48小时的细枝气管洗出液(bronchoalveolar lavage，BAL)中的细胞组成来决定。简言之，所有小鼠均以切断眼窝后静脉丛的方式加以放血牺牲。之后，立即利用气管导管，以每次1毫升HBSS(其中不含游离的钙或镁离子)溶液的方式，灌洗小鼠的肺，连续灌洗3次，并收集灌洗液。在4℃下，以400xg的速度将所收集的灌洗液离心10分钟。清洗后，将所收集到的细胞重新悬浮在1毫升的HBSS溶液中，并计算细胞总数。并以刘氏染色法分别对不同的细胞染色。以最少200个细胞来算，可依据标准的外形分类标准而将所获得的细胞分别归类为巨噬细胞(macrophages)、淋巴细胞、嗜中性白血球(neutrophils)及嗜伊红性白血球(eosinophils)细胞。结果示于图3。可发现让鼻腔暴露在OVA下，经常会导致正控制组小鼠BAL灌洗液中，嗜中性白血球及嗜伊红性白血球细胞数目明显增加(图3)。相反的，如果施以10或30mg/ml的雷巴威林处理，则不仅灌洗液内的总细胞数目下降(图3的(A)所示)，此外每一个别类型的细胞数目也会下降，包括单核细胞、嗜中性白血球及嗜伊红性白血球细胞(图3的(B)所示)。
在灌洗后，立即将肺摘出并以10％之中性福尔马林固定，按照一般正常程序处理，并包埋在石腊中，接着制备出约5微米厚的切片并以苏木素及伊红(hemztoxylin and eosin)加以染色。接着，以光学显微镜进行观察，结果示于图4中。可知，雷巴威林(图4的(A)及图4的(B)，分别为30及10mg/ml的雷巴威林)可有效地抑制细胞浸润现象并降低在此OVA-敏感小鼠模型系统中对肺的伤害。
雷巴威林对BAL液中化学增活素(chemokines)的量的治疗效果
依据上述方法对OVA-敏感小鼠的肺进行灌洗，并依据制造商的使用说明，以ELISA试剂套组来测试其中的化学增活素含量。以嗜伊红性白血球细胞亲合素(eotaxin)为例，将所收集的BAL液(BALF)添加到已涂覆有抗-嗜伊红性白血球细胞亲合素抗体的培养孔中，并放4℃下隔夜。经过2小时培育后，以缓冲液清洗培养盘并加入有生物素共轭的抗体。再于室温下培育2小时后，加入HRP-抗生物素蛋白，测量所形成复合物在450nm下的吸光值(OD)，并将该吸光值转换成BAL液中嗜伊红性白血球细胞亲合素的浓度。其它化学增活素，包括KC、IL-4、INF-γ等，均可以类似方法测得。结果示于图5。
从结果可知，在OVA-敏感小鼠中，INF-γ(图5的(A))及IL-4(图5的(B))的含量高低并不受雷巴威林的影响，但是，嗜伊红性白血球细胞亲合素(图5的(D))及KC(图5的(C))含量多寡则会因为施用雷巴威林而明显下降。此结果暗示雷巴威林确实对气喘个体的气管发炎现象具有治疗性的效果。
产业利用性
本发明优点在于可提供一种过敏性疾病的新颖治疗方法，其是利用一种抗感染剂，及选择性地包含一抗发炎剂来达到治疗的目的。本发明的方法及药学组合物可提高一宿主本身的免疫力，藉以抑制发炎并控制过敏的情况，因而可治疗诸如花粉热、支气管型气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎及过敏性休克之类的过敏性疾病。
虽然本发明已以较佳实施例揭露如上，然而其并非用以限定本发明，任何熟悉本技术者，在不脱离本发明的精神和范围内，当可作出各种等同的改变或替换，因此本发明的保护范围当视后附的本申请权利要求范围所界定的为准。
权利要求书(按照条约第19条的修改)
1.一种治疗气管发炎和/或过敏性疾病的方法，包含对一个体施用一有效量的雷巴威林来减轻过敏性发炎反应。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于雷巴威林可通过表面局部涂抹、口腔、鼻腔、静脉注射或腹膜内注射来施用。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于雷巴威林的用量在5-20μg/每公斤个体体重。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于该气管发炎或过敏性疾病是选自花粉热、支气管型气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎及过敏性休克。
5.根据权利要求1所述的方法，更包含在施用雷巴威林之前、之后或同时，对该个体施用一抗发炎剂，且其用量在5～10μg/每公斤个体体重。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于该抗发炎剂及雷巴威林是同时通过鼻腔施用。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于该抗发炎剂是选自由吸入性类固醇、白三烯受体颉抗剂及β-2受体激动剂所组成的群组中。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于该吸入性类固醇为皮质固醇。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于该皮质固醇是选自由布地奈德、倍他米松、地塞米松、甲泼尼龙、强的松、泼尼松、氟尼缩松、去炎松丙酮化物及氟替卡松丙酸酯所组成的群组中。
10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于该白三烯受体颉抗剂是选自由BLT受体的专一性颉抗剂，包括SB209247、SC53228、CP195543、CGS25019C及LY293111；和CysLT1受体的专一性颉抗剂，包括SR2640、SKF104353、ICI204219、MK476及LY170680，所组成的群组中。
11.根据权利要求7所述的方法，其特征在于该β-2受体激动剂是选自由丙卡特罗、净特罗、沙美物罗、福莫特罗、特布他林及酚丙喘宁所组成的群组中。
12.一种可治疗气管发炎和/或过敏性疾病的药学组合物，其特征在于包含一有效量的雷巴威林及一药学上可接受的载体。
13.根据权利要求12所述的药学组合物，其特征在于雷巴威林可通过表面局部涂抹、口腔、鼻腔、静脉注射或腹膜内注射来施用。
14.根据权利要求13所述的药学组合物，其特征在于雷巴威林的用量在5-20g/每公斤个体体重。
15.根据权利要求12所述的药学组合物，其特征在于该气管发炎或过敏性疾病是选自花粉热、支气管型气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎及过敏性休克。
16.根据权利要求12所述的药学组合物，其特征在于还包含一抗发炎剂，其是在施用该抗感染剂之前、之后或同时，对该个体施用，且其用量在5～10μg/每公斤个体体重。
17.根据权利要求16所述的药学组合物，其特征在于该抗发炎剂及雷巴威林是同时通过鼻腔施用。
18.根据权利要求17所述的药学组合物，其特征在于该抗发炎剂是选自由吸入性类固醇、白三烯受体颉抗剂及β-2受体激动剂所组成的群组中。
19.根据权利要求18所述的药学组合物，其特征在于该吸入性类固醇为皮质固醇。
20.根据权利要求19所述的药学组合物，其特征在于该皮质固醇是选自由布地奈德、倍他米松、地塞米松、甲泼尼龙、强的松、泼尼松、氟尼缩松、去炎松丙酮化物及氟替卡松丙酸酯所组成的群组中。
21.根据权利要求18所述的药学组合物，其特征在于该白三烯受体颉抗剂是选自由BLT受体的专一性颉抗剂，包括SB209247、SC53228、CP195543、CGS25019C及LY293111；和CysLT1受体的专一性颉抗剂，包括SR2640、SKF104353、ICI204219、MK476及LY170680，所组成的群组中。
22.根据权利要求18所述的药学组合物，其特征在于该β-2受体激动剂是选自由丙卡特罗、净特罗、沙美物罗、福莫特罗、特布他林及酚丙喘宁所组成的群组中。