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1、10申请公布号CN104140824A43申请公布日20141112CN104140824A21申请号201410382031822申请日20140806C09K17/40200601C05G3/04200601C09K101/0020060171申请人湖南原生生物科技股份有限公司地址410000湖南省长沙市芙蓉区竹园路7号504、506、508房72发明人唐毓杰胡九洲孟三宏刘海涛杨丽54发明名称含高抗镉污染菌株的生物有机肥料及其制备方法和应用57摘要本发明提供一种含高抗镉污染菌株的生物有机肥料，按重量份计由如下成分组成核心菌剂46份；离子拮抗剂13份；精制有机肥料9195份。本发明还提出所述。
2、含高抗镉污染菌株的生物有机肥料的生产与应用。本发明的核心菌剂中的微生物菌种是从镉污染区的稻田鱼池的污泥中特别筛选出来的优势菌株，功能强大，能迅速在土壤中定植生长并形成强大菌落，通过其生活繁衍作用,改变重金属镉在土壤中的化学形态,使其固定、钝化或解毒,降低其在土壤环境中的移动性和生物可利用性该菌落还能直接吸附重金属离子镉CD到微生物细胞璧或细胞内进行代谢，加上离子拮抗剂和精制有机肥料的共同作用，达到对重金属镉的削减、净化与固定。51INTCL权利要求书1页说明书9页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书9页10申请公布号CN104140824ACN104140824。
3、A1/1页21一种含高抗镉污染菌株的生物有机肥料，其特征在于，所述含高抗镉污染菌株的生物有机肥料按重量份计由如下成分组成核心菌剂46份；离子拮抗剂13份；精制有机肥料9195份。2根据权利要求1所述的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料，其特征在于，所述核心菌剂是由高抗镉污染菌种与酶活物质和膨润土按118的重量比例中混配而成，有效活菌数400600108CFU/G，其中所述的微生物菌种是从镉污染区的污泥中特别筛选出来的优势菌株，即为沼泽红假单胞菌RP3；所述酶活物质为蛋白粉和活性酶，其是按照蛋白粉活性酶为3001100的重量比例均匀混合制成，所述活性酶是从红小豆青荚中提取的活性酶。3根据权利要求1或。
4、2所述的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料，其特征在于，所述离子拮抗剂是由硫酸锌和钼酸铵按91的重量比混合配制而成。4根据权利要求1所述的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料，其特征在于，所述精制有机肥料为养殖场猪粪经生物发酵腐熟后，科学加工而成，其有机质含量45，总养分5。5根据权利要求2所述的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料，其特征在于，所述核心菌剂中的沼泽红假单胞菌RP3是由如下方法分离培养制得菌株的分离和培养用VANNILE富集培养基对采自南京郊外水塘的污泥进行厌氧光照培养，510D后取微红培养物接种于第2瓶富集培养基中继续培养，重复23次后用VANNILE分离，用培养基进行多次划线分离，获得多株。
5、光合细菌菌株，并从中选育出具有高抗镉污染的菌株，命名为沼泽红假单胞菌RP3；用富集培养基富集培养，然后进行菌株鉴定；富集培养基成分为NAH2PO455MG/L，苹果酸15MG/L，乙酸钠2MG/L，NAOH2MG/L，NH4CI1MG/L，MGCL2025MG/L，CACL2005MG/L，酵母膏1MG/L，微量元素1M1，PH70；VANNIEL紫色非硫细菌用分离培养基成分为NH4CL1G,丁二酸钠1G,KH2PO402G,MGSO47H2O0005G,NA2CO302G,酵母膏01G,复合无机盐溶液1ML,水1000ML,PH70。6权利要求15任一项所述的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料的。
6、配制以及在农作物生产中的应用。权利要求书CN104140824A1/9页3含高抗镉污染菌株的生物有机肥料及其制备方法和应用技术领域0001本发明属于农业微生物应用领域，具体涉及含有活性菌剂的生物有机肥料及其制备方法和应用。背景技术0002随着工业化和农业集约化经济的发展，我国耕地重金属污染状况越来越严重。20世纪90年代初，我国镉污染耕地面积达13104HM2,涉及11个省市的25个地区。据湖南省重金属污染专项调查和近年来的农业环境质量监测结果表明，湖南省被镉污染的耕地面积己占全省耕地总面积的237，还有27左右的农田灌溉水和25左右的农田大气受到了不同程度的污染。为了减少水稻对镉的吸收累积，。
7、目前国内外主要研究了两种方式一是将土壤中的镉转化为难溶态，即土壤中的活性态镉被钝化，从而使作物难以吸收二是将镉从土壤中去除，即利用工程或生物的方法修复镉污染土壤。后者因工程修复所需资金较大，难以进行大面积推广。因此，研究如何降低和钝化固定土壤中的镉等重金属的方法，具有重大的现实意义。本发明的一种含高抗镉污染菌株的生物有机肥料，其核心菌剂中的微生物菌种是从镉污染区稻田鱼塘的污泥中特别筛选出来的优势菌株，功能强大，能迅速在土壤中定植生长并形成强大菌落，通过其生活繁衍作用,改变重金属镉在土壤中的化学形态,使其固定或解毒,降低其在土壤环境中的移动性和生物可利用性该菌落还能直接吸附重金属离子镉CD到微生。
8、物细胞璧或细胞内进行代谢，加上本发明中加入的离子拮抗剂和有机肥料的共同作用，达到对重金属镉的削减、净化与固定。发明内容0003针对本领域的不足之处，实现对重金属镉的削减、净化与固定并降低作物对重金属离子镉CD的吸收累加，本发明提供了一种含高抗镉污染菌株的生物有机肥料。0004本发明的另一目的是提供含高抗镉污染菌株的生物有机肥料的制备方法和应用。0005实现本发明上述目的的具体技术方案为一种含高抗镉污染菌株的生物有机肥料，按其重量份计由如下成分组成核心菌剂46份；离子拮抗剂13份；精制有机肥料9195份。优选地，其组成成分为核心菌剂5份；离子拮抗剂2份；精制有机肥料93份。0006其中，所述核心。
9、菌剂是将高抗镉污染的沼泽红假单胞菌RP3在无菌条件下依次进行斜面培养、摇床培养、发酵罐培养后，将得到的发酵液经过浓缩干燥得到孢子粉，然后将孢子粉与酶活物质和膨润土按照118的重量比例混配而成，有效活菌数400600108CFU/G。其中所述的微生物菌种是从镉污染区的污泥中特别筛选出来的优势菌株，即为沼泽红假单胞菌RP3；所述酶活物质为蛋白粉和活性酶，其是按照蛋白粉活性酶为30011001的重量比例均匀混合制成，所述活性酶是从红小豆青荚中提取的活性酶。提取的方法为首先将大豆上等好的青荚进行植物组织细胞的破碎。采用磷酸缓冲液（PH值60）按照料液比15混合于器皿中，得到的混合液进行过滤过滤23次，。
10、除掉固说明书CN104140824A2/9页4体杂质，得到酶的粗提取液。然后对得到的粗提取液58水浴加热，10分钟后取出器皿，静置5分钟（切忌过长），器皿底部沉淀出大豆青夹中含有固体杂质蛋白质，取上清液于另一器皿中，用硫酸铵进行沉淀（PH值58）。最后用磷酸缓冲液（PH值57）对沉淀溶解得到的酶液进行分离纯化。0007所述核心菌剂中的沼泽红假单胞菌RP3是由如下方法分离培养制得菌株的分离和培养用VANNILE富集培养基对采自南京郊外水塘的污泥进行厌氧光照培养，510D后取微红培养物接种于第2瓶富集培养基中继续培养，重复23次后用VANNILE分离，用培养基进行多次划线分离，获得多株光合细菌菌株。
11、，用富集培养基富集培养，然后进行菌株鉴定，并从中选育出具有高抗镉污染的优势菌株，命名为沼泽红假单胞菌RP3。该优势菌株功能强大，能迅速在土壤中定植生长并形成强大菌落，通过其生活繁衍作用,改变重金属镉在土壤中的化学形态,使其固定或解毒,降低其在土壤环境中的移动性和生物可利用性该菌落还能直接吸附重金属离子镉CD到微生物细胞璧或细胞内进行代谢，达到对重金属镉的削减、净化与固定。0008沼泽红假单胞菌RP3分离所用富集培养基成分为NAH2PO455MG/L，苹果酸15MG/L，乙酸钠2MG/L，NAOH2MG/L，NH4CI1MG/L，MGCL2025MG/L，CACL2005MG/L，酵母膏1MG/。
12、L，微量元素1M1，PH70；所用VANNIEL紫色非硫细菌用分离培养基成分为NH4CL1G,丁二酸钠1G,KH2PO402G,MGSO47H2O0005G,NA2CO302G,酵母膏01G,复合无机盐溶液1ML,水1000ML,PH70。复合无机盐溶液组成为EDTA05G,FESO47H2O02G,ZNSO47H2O001G,硼酸003G,MNCL24H2O0003G,CACL22H2O002G,NICL26H2O0002G,CUCL22H2O0001G,NA2MOO42H2O0003G,水100ML,HCL调PH30。0009其中，所述离子拮抗剂是由硫酸锌和钼酸铵按91的重量比混合配制而成。
13、。995硫酸锌ZNSO47H2O是由廊坊鹏彩精细化工有限公司提供，镉含量000025；998钼酸铵NH42MO4O132H2O中的镉无检出。由于CD和ZN通常是伴随而生的,具有相似的化学性质和地球化学行为,因而ZN具有拮抗CD被植物吸收的特性，土壤中适宜的镉锌比,可以抑制植物对CD的吸收。因此,可以通过向CD污染的土壤中加入适量ZN,调节镉锌比,减少CD在植物体内富集。同样,施用钼酸铵也能够减少镉向植物体内富集。0010其中，所述精制有机肥料为湖南新五丰股份公司养殖场猪粪经生物发酵腐熟后，科学加工而成，其有机质含量45，总养分5。有机肥不仅可改善土壤理化性状、提高土壤肥力,而且影响重金属在土壤。
14、中的形态及植物对它的吸收。向CD污染的土壤中施入有机肥,由于有机肥中大量官能团的存在和具有较大的比表面积,可促进土壤中重金属离子与其形成重金属有机络合物,增加土壤对重金属的吸附能力,提高土壤对重金属的缓冲性,从而减少植物对其吸收,阻碍它进入食物链。因此,在CD污染土壤中施加有机肥是一种十分有效的治理方法。0011本发明所述的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料的制备方法，其是将核心菌剂46份，离子拮抗剂13份，精制有机肥料9195份混合搅拌均匀制得。0012本发明所述的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料在农作物生产中的应用，在应用中，该含高抗镉污染菌株的生物有机肥料为粉状或颗粒状剂型，在土地翻耕时拌细黄。
15、土或掺入基肥中均匀撒施，平整土地，平均用量为7501500KG/HM2。说明书CN104140824A3/9页5本发明的有益效果在于1、本发明的微生物功能更强。该发明的核心菌剂中的微生物沼泽红假单胞菌RP3功能强大，能迅速在土壤中定植生长并形成强大菌落，通过其生活繁衍作用,改变重金属镉在土壤中的化学形态,使其固定、钝化或解毒,降低其在土壤环境中的移动性和生物可利用性该菌落还能直接吸附重金属离子镉CD到微生物细胞璧或细胞内进行代谢，达到对重金属镉的削减、净化与固定。00132、本发明的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料技术处在国际领先前沿。优势作用在于利用沼泽红假单胞菌RP3（简称SRP3）直接吸附。
16、固化、钝化以及代谢产生的S2与重金属离子反应生成难溶的硫化物沉淀而使重金属离子镉CD钝化固化的双重作用高价MH低价MH（M为重金属离子，H为原子氢），SRP3菌SO42HS2H2O，M2S2MS。因沼泽红假单胞菌RP3表面带有一定的负电性，故对重金属离子镉CD有较强的吸附性以及较强的生物禁絮凝作用，使重金属硫化物得以很好地固化，难以移动，降低了生物可利用性，减少了作物对重金属离子镉CD的吸收累加。00143、本发明的核心菌剂制备方法先进科学，实施操作性强，孢子数含量高，存活时间长。加入酶活物质能使孢子在土壤中迅速定植生长，大量繁殖。00154、本发明特别添加了离子拮抗剂硫酸锌和钼酸铵，由于CD。
17、和ZN通常是伴随而生的,具有相似的化学性质和地球化学行为,因而ZN具有拮抗CD被植物吸收的特性，土壤中适宜的镉锌比,可以抑制植物对CD的吸收。因此,可以通过向CD污染的土壤中加入适量ZN,调节镉锌比,减少CD在植物体内富集。同样,施用钼酸铵也能够减少镉向植物体内富集。00165、向CD污染的土壤中施入本发明的有机肥料,由于有机肥中大量官能团的存在和具有较大的比表面积,可促进土壤中重金属离子与其形成重金属有机络合物,增加土壤对重金属的吸附能力,提高土壤对重金属的缓冲性,从而减少植物对其吸收,阻碍它进入食物链。因此,在CD污染土壤中施加有机肥是一种十分有效的治理方法。0017本发明的具体实施方式结。
18、合以下实施例，对本发明的具体实施方式作详细描述，进一步说明本发明的内容。但仅仅只是用于说明本发明，而不是用来限制本发明的范围。0018实施例1含高抗镉污染菌株的生物有机肥料的构成按其重量份计由如下成分组成核心菌剂5份；离子拮抗剂2份；精制有机肥料93份。0019所述核心菌剂是将高抗镉污染的沼泽红假单胞菌RP3在无菌条件下依次进行斜面培养、摇床培养、发酵罐培养后，将得到的发酵液经过浓缩干燥得到孢子粉，然后将孢子粉与酶活物质和膨润土按照118的重量比例混配而成，有效活菌数500108CFU/G。其中所述的微生物菌种是从株洲市天元区大塘坡的镉污染区稻田鱼池的污泥中特别筛选出来的优势菌株，命名为沼泽红。
19、假单胞菌RP3；所述酶活物质为蛋白粉和活性酶，其是按照蛋白粉活性酶为30011001的重量比例均匀混合制成，所述活性酶是从红小豆青荚中提取的活性酶。提取的方法为首先将大豆上等好的青荚进行植物组织细胞的破碎。采用磷酸缓冲液（PH值60）按照料液比15混合于器皿中，得到的混合液进行过滤过滤23次，除掉固体杂质，得到酶的粗提取液。然后对得到的粗提取液58水浴加热，10分钟后取出器皿，静置5分钟（切忌过长），器皿底部沉淀出大豆青夹中含有固体杂质蛋白质，说明书CN104140824A4/9页6取上清液于另一器皿中，用硫酸铵进行沉淀（PH值58）。最后用磷酸缓冲液（PH值57）对沉淀溶解得到的酶液进行分离。
20、纯化。0020所述核心菌剂中的沼泽红假单胞菌RP3是由如下方法分离培养制得菌株的分离和培养用VANNILE富集培养基对采自湖南省株洲市郊区水稻田水沟的污泥进行厌氧光照培养，510D后取微红培养物接种于第2瓶富集培养基中继续培养，重复23次后用VANNILE分离，用培养基进行多次划线分离，获得多株光合细菌菌株，用富集培养基富集培养，然后进行菌株鉴定，并从中选育出具有高抗镉污染的优势菌株，命名为沼泽红假单胞菌RP3。0021沼泽红假单胞菌RP3分离所用富集培养基成分为NAH2PO455MG/L，苹果酸15MG/L，乙酸钠2MG/L，NAOH2MG/L，NH4CI1MG/L，MGCL2025MG/L。
21、，CACL2005MG/L，酵母膏1MG/L，微量元素1M1，PH70；所用VANNIEL紫色非硫细菌用分离培养基成分为NH4CL1G,丁二酸钠1G,KH2PO402G,MGSO47H2O0005G,NA2CO302G,酵母膏01G,复合无机盐溶液1ML,水1000ML,PH70。复合无机盐溶液组成为EDTA05G,FESO47H2O02G,ZNSO47H2O001G,硼酸003G,MNCL24H2O0003G,CACL22H2O002G,NICL26H2O0002G,CUCL22H2O0001G,NA2MOO42H2O0003G,水100ML,HCL调PH30。0022所述沼泽红假单胞菌RP。
22、3孢子粉由以下步骤制得斜面培养将沼泽红假单胞菌RP3菌种在无菌条件下接种于斜面培养基上，在291条件下培养40H；摇床培养将上述步骤培养的菌种在无菌条件下接种于液体培养基，在PH68、温度为30条件下，140R/MIN摇床培养36H；发酵罐培养将上述步骤培养的菌种在无菌条件下接种于发酵罐培养基，在PH72、罐压05KG、温度为30、通风量108条件下，培养50H后，菌数大于101010/ML，80菌体转成芽孢时下罐，得到发酵液；将步骤中得到的发酵液经过浓缩干燥制备成孢子粉，然后将孢子粉与酶活物质和膨润土按照118的重量比例混配而成，有效活菌数400600108CFU/G。0023在上述混合孢子。
23、粉的制备中，步骤中选用的斜面培养基的配方如下成分为NAH2PO455MG/L，苹果酸15MG/L，乙酸钠2MG/L，NAOH2MG/L，NH4CL1MG/L，MGCL2025MG/L，CACL2005MG/L，酵母膏1MG/L，微量元素1M1（微量元素溶液为氯化亚铁、氯化钴、氯化镍、氯化铜、氯化锰、氯化锌、钼酸钠、五水亚硒酸钠复合溶液），PH70。0024上述步骤中的液体培养基配方如下葡萄糖10G、牛肉膏5G、酵母粉5G、淀粉10G、豆饼粉5G、K2HPO405G、MGSO402G、水1000ML。0025上述步骤中的发酵罐培养基配方如下玉米粉26KG、豆饼粉16KG、硫酸铵4KG、葡萄糖8K。
24、G、酵母粉25KG、蛋白胨17KG、加水至600KG。0026所述离子拮抗剂是由硫酸锌和钼酸铵按91的重量比混合配制而成。995硫酸锌ZNSO47H2O是由廊坊鹏彩精细化工有限公司提供，镉含量000025；998钼酸铵NH42MO4O132H2O中的镉无检出。0027所述精制有机肥料为湖南新五丰股份公司养殖场猪粪经生物发酵腐熟后，科学加工而成，其有机质含量45，总养分5。说明书CN104140824A5/9页70028将上述材料按照核心菌剂5份、离子拮抗剂2份、精制有机肥料93份的重量比例充分混匀，制备得到本发明的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料。0029实施例2含高抗镉污染菌株的生物有机肥料的。
25、构成按重量份计由如下成分组成核心菌剂5份；离子拮抗剂1份；精制有机肥料94份。0030所述核心菌剂是将实施例1中的高抗镉污染的沼泽红假单胞菌RP3在无菌条件下依次进行斜面培养、摇床培养、发酵罐培养后，将得到的发酵液经过浓缩干燥得到孢子粉，然后将孢子粉与酶活物质和膨润土按照118的重量比例混配而成，有效活菌数550108CFU/G。其中所述的酶活物质为蛋白粉和活性酶，其是按照蛋白粉活性酶为30011001的重量比例均匀混合制成，所述活性酶是从红小豆青荚中提取的活性酶，提取方法同实施例1。0031所述核心菌剂中的沼泽红假单胞菌RP3是由如下方法分离培养制得菌株的分离和培养用VANNILE富集培养基。
26、对采自湖南省株洲市郊区水稻田水沟的污泥进行厌氧光照培养，510D后取微红培养物接种于第2瓶富集培养基中继续培养，重复23次后用VANNILE分离，用培养基进行多次划线分离，获得多株光合细菌菌株，用富集培养基富集培养，然后进行菌株鉴定，并从中选育出具有高抗镉污染的优势菌株，命名为沼泽红假单胞菌RP3。0032沼泽红假单胞菌RP3分离所用富集培养基成分以及VANNIEL紫色非硫细菌用分离培养基成分与实施例1相同。0033所述沼泽红假单胞菌RP3孢子粉由以下步骤制得斜面培养将沼泽红假单胞菌RP3菌种在无菌条件下接种于斜面培养基上，在291条件下培养40H；摇床培养将上述步骤培养的菌种在无菌条件下接种。
27、于液体培养基，在PH68、温度为30条件下，140R/MIN摇床培养36H；发酵罐培养将上述步骤培养的菌种在无菌条件下接种于发酵罐培养基，在PH72、罐压05KG、温度为30、通风量108条件下，培养50H后，菌数大于101010/ML，80菌体转成芽孢时下罐，得到发酵液；将步骤中得到的发酵液经过浓缩干燥制备成孢子粉，然后将孢子粉与酶活物质和膨润土按照118的重量比例混配而成，有效活菌数400600108CFU/G。0034在上述混合孢子粉的制备中，步骤中选用的斜面培养基的配方如下成分为NAH2PO455MG/L，苹果酸15MG/L，乙酸钠2MG/L，NAOH2MG/L，NH4CL1MG/L，。
28、MGCL2025MG/L，CACL2005MG/L，酵母膏1MG/L，微量元素1M1（微量元素溶液为氯化亚铁、氯化钴、氯化镍、氯化铜、氯化锰、氯化锌、钼酸钠、五水亚硒酸钠复合溶液），PH70。0035上述步骤中的液体培养基配方如下葡萄糖10G、牛肉膏5G、酵母粉5G、淀粉10G、豆饼粉5G、K2HPO405G、MGSO402G、水1000ML。0036上述步骤中的发酵罐培养基配方如下玉米粉26KG、豆饼粉16KG、硫酸铵4KG、葡萄糖8KG、酵母粉25KG、蛋白胨17KG、加水至600KG。0037所述离子拮抗剂是由硫酸锌和钼酸铵按91的重量比混合配制而成。995硫酸锌ZNSO47H2O是由廊。
29、坊鹏彩精细化工有限公司提供，镉含量000025；998钼酸铵说明书CN104140824A6/9页8NH42MO4O132H2O中的镉无检出。0038所述精制有机肥料为湖南新五丰股份公司养殖场猪粪经生物发酵腐熟后，科学加工而成，其有机质含量45，总养分5。0039将上述材料按照核心菌剂5份、离子拮抗剂1份、精制有机肥料94份的重量比例充分混匀，制备得到本发明的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料。0040实施例3含高抗镉污染菌株的生物有机肥料的构成按重量份计由如下成分组成核心菌剂6份；离子拮抗剂3份；精制有机肥料91份。0041所述核心菌剂是将实施例1中的高抗镉污染的沼泽红假单胞菌RP3在无菌条件下。
30、依次进行斜面培养、摇床培养、发酵罐培养后，将得到的发酵液经过浓缩干燥得到孢子粉，然后将孢子粉与酶活物质和膨润土按照118的重量比例混配而成，有效活菌数400600108CFU/G。其中所述的酶活物质为蛋白粉和活性酶，其是按照蛋白粉活性酶为30011001的重量比例均匀混合制成，所述活性酶是从红小豆青荚中提取的活性酶。提取的方法同实施例1。0042所述核心菌剂中的沼泽红假单胞菌RP3是由如下方法分离培养制得菌株的分离和培养用VANNILE富集培养基对采自湖南省株洲市郊区水稻田水沟的污泥进行厌氧光照培养，510D后取微红培养物接种于第2瓶富集培养基中继续培养，重复23次后用VANNILE分离，用培。
31、养基进行多次划线分离，获得多株光合细菌菌株，用富集培养基富集培养，然后进行菌株鉴定，并从中选育出具有高抗镉污染的优势菌株，命名为沼泽红假单胞菌RP3。0043沼泽红假单胞菌RP3分离所用富集培养基成分以及VANNIEL紫色非硫细菌用分离培养基成分与实施例1相同。0044所述沼泽红假单胞菌RP3孢子粉的制取步骤和方法与实施例1相同。0045所述离子拮抗剂是由硫酸锌和钼酸铵按91的重量比混合配制而成。995硫酸锌ZNSO47H2O是由廊坊鹏彩精细化工有限公司提供，镉含量000025；998钼酸铵NH42MO4O132H2O中的镉无检出。0046所述精制有机肥料为湖南新五丰股份公司养殖场猪粪经生物发。
32、酵腐熟后，科学加工而成，其有机质含量45，总养分5。0047将上述材料按照核心菌剂6份、离子拮抗剂3份、精制有机肥料91份的重量比例充分混匀，制备得到本发明的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料。0048实验例1本发明实施例1的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料盆栽试验1材料及方法11采用盆栽试验，研究本发明对不同稻田土高抗镉污染的效果。试验设置2个处理，每个处理重复三次，随机区组排列。0049处理施用本发明实施例1的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料1215G/盆折合田间用量为1500KG/HM2处理对照CK不施用本发明实施例1的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料。005012试验使用27CM30CM的白色塑。
33、料盆钵，装盆前土壤经风干5目过筛，每盆装土层厚约20CMKG，同时在每盆上施用一定的氮、磷、钾肥料，试验期间各处理栽培管理措施说明书CN104140824A7/9页9与田间管理一致。005113装盆土壤分别采自湖南省株洲市天元区大塘坡村的潮泥田和黄牙塘村的黄泥田，实验前的检测结果见下表1。0052表1供试土壤实验前的检测结果14土壤中镉CD采用CACL2浸提一原子吸收分光光度法石墨炉测定，水稻糙米和稻草中的镉是采用硝酸一高氯酸混合酸消解后原子吸收分光光度法石墨炉测定消解后的镉含量。00532结果及分析21试验结果表明，施用本发明实施例1的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料对土壤中的镉CD及水稻糙米。
34、和稻草中镉含量的影响显著见表2。与CK对照相比，施用发明实施例1的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料能显著降低土壤中镉CD含量。潮泥田施用本发明实施例1的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料后土壤镉CD含量比CK对照降低了0096；黄泥田施用本发明实施例1的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料后土壤镉CD含量比CK对照降低了降低了0042。0054表2对土壤CD形态的影响结果22土壤中镉CD为植物吸收利用的主要形态，其含量将明显影响植物的吸收累加。表3的结果显示，施用本发明实施例1的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料能显著降低水稻糙米和稻草中的镉含量，并且使糙米镉含量达到国家粮食卫生标准GB27152005。潮泥。
35、田施用本发明实施例1的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料后，水稻糙米和稻草中镉含量分别比CK对照降低了491和506黄泥田施用本发明实施例1的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料后，水稻糙米和稻草镉含量分别比CK对照降低了404和595。0055表3对水稻糙米和稻草中镉含量的影响23由此可见，本发明实施例1的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料对重金属镉CD污染土壤具有明显的综合效果，适量施用可显著降低土壤中镉CD含量，减少作物累加吸收。说明书CN104140824A8/9页100056实验例2实施例2的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料的效果及后效试验1试验基本情况及材料11采用田间小区试验，研究本发明对双季生。
36、产中的水稻糙米吸收累积镉CD的影响及后效作用。试验地点分别选在湖南省株洲市天元区大塘坡村和黄牙塘村进行，大塘坡村稻田土壤为河流冲积物形成的潮土，黄牙塘村稻田土壤为黄泥田土，实验前检测结果见表4。0057表4供试土壤试验前的化验结果12试验设置3个处理，不设重复，四周设保护区，小区间设05M宽田埂间隔。0058对照CK不施用本发明实施例2的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料施用本发明实施例2的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料750KG/HM2施用本发明实施例2的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料1500KG/HM2。005913第一季早稻施用本发明实施例2的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料，第二季晚稻不施用。
37、。具体施用方法为在该镉污染潮土翻耕施肥前，将本发明实施例2的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料做基肥撒施。所有处理的化肥、农药施用和灌溉管理均一致。水稻糙米和稻草中的镉含量采用硝酸一高氯酸混合酸消解后原子吸收分光光度法石墨炉测定。00602结果与分析21对第一季早稻的作用效果明显利用本发明实施例2的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料对稻田土壤进行试验后，对第一季早稻的试验效果见表2，结果显示，潮泥田施用本发明实施例2的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料750KG/HM2和1500KG/HM2处理的水稻糙米中镉含量分别比CK对照降低271和506；黄泥田施用本发明实施例2的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料75。
38、0KG/HM2和1500KG/HM2处理的水稻糙米中镉含量分别比CK对照降低232和424。其中施用本发明实施例2的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料750KG/HM2和1500KG/HM2处理的水稻糙米中镉含量均达到国家食品卫生标准GB27152005。因此，采用本发明实施例2的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料能显著降低水稻糙米中的镉含量，说明对土壤镉污染的稻田土壤中的镉CD具有明显的钝化和固定效果。006122对第二季晚稻的后效明显利用本发明实施例2的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料对稻田土壤进行试验后，对第二季晚稻种植试验结果如表5，结果显示，第二季晚稻糙米中镉含量仍显著低于对照。其中，潮泥田施。
39、用本发明实施例2的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料750KG/HM2和1500KG/HM2处理区中的晚稻糙米中镉含量分别比CK对照降低283和332；黄泥田施用本发明实施例2的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料750KG/HM2和1500KG/HM2处理区中的晚稻糙米中镉含量分别比CK对照降低282和339。说明在双季稻区施用本发明实施例2的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料有较好的后效作用。说明书CN104140824A109/9页110062表5含高抗镉污染菌株的生物有机肥料的效果及后效作用23试验结果表明，在潮泥田和黄泥田施用本发明实施例2的含高抗镉污染菌株的生物有机肥料750KG/HM2和1500KG/HM2处理区中的晚稻糙米中镉含量分别比CK对照均有降低，但用量为750KG/HM2的处理其后效作用的糙米中镉含量达不到国家食品卫生标准GB27152005。因此建议施用本发明实施例2的重金属含高抗镉污染菌株的生物有机肥料以1500KG/HM2为宜。0063虽然，上面以最佳实施例详细说明了本发明，但本领域技术人员应当知晓，在不偏离本发明思想和精神的前提下，对本发明做出的任何改进和修饰，仍属于本发明要求保护的范围之内。说明书CN104140824A11。