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1、(10)申请公布号 CN 104111295 A (43)申请公布日 2014.10.22 CN 104111295 A (21)申请号 201410354037.4 (22)申请日 2014.07.24 G01N 30/02(2006.01) G01N 30/90(2006.01) (71)申请人 神威药业集团有限公司 地址 051430 河北省石家庄市栾城县城南口 (72)发明人 李东 郭勇 南艳平 李志刚 张纲 李军山 (54) 发明名称 一种中药制剂的质量控制方法 (57) 摘要 本发明提供了一种金柴制剂的质量控制方 法， 该方法包括含量测定， 或还包括鉴别方法， 其 要求本品含金银花。
2、以绿原酸 (C16H18O9) 计， 每粒不 得少于 4.00mg， 含黄芩以黄芩苷 (C23H28O11) 计， 每 粒不得少于 16.00mg。该方法具有稳定、 重现性 好的特点， 可以有效地监督生产， 控制该品种的质 量， 保证产品质量的稳定。 (51)Int.Cl. 权利要求书 3 页 说明书 11 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书3页 说明书11页 (10)申请公布号 CN 104111295 A CN 104111295 A 1/3 页 2 1. 一种金柴制剂的质量控制方法， 其特征在于该方法中的含量测定方法包括 ： (1) 绿原酸的含量测。
3、定 照高效液相色谱法测定 ； 色谱条件与系统适用性试验 ： 用十八烷基硅烷键合硅胶为填 充剂 ； 16 ： 84 的乙腈 ： 0.1磷酸溶液为流动相 ； 检测波长为 327nm ； 理论板数按绿原酸峰计 算应不低于 3000 ； 对照品溶液的制备 ： 精密称取绿原酸对照品适量， 置棕色量瓶中， 加 50甲醇制成每 1ml 含 26.6g 的溶液， 即得 (10以下保存 ) ； 供试品溶液的制备 ： 取金柴制剂内容物 0.1g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加甲醇 溶液 50ml， 称定重量， 超声处理 15 45 分钟， 放冷， 再称定重量， 用甲醇溶液补足减失的重 量， 摇匀， 滤过，。
4、 取滤液作为供试品溶液， 其中所述甲醇溶液是 50甲醇或甲醇 ； 测定法 ： 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液 10l， 注入液相色谱仪， 测定， 即得 ； 本品含金银花按绿原酸 (C16H18O9) 计， 每粒不得少于 4.00mg ； (2) 黄芩苷的含量测定 照高效液相色谱法测定 ； 色谱条件与系统适用性试验 ： 用十八烷基硅烷键合硅胶为填 充剂 ； 47 ： 53 ： 0.2的甲醇 ： 水 ： 磷酸溶液为流动相 ； 检测波长为280nm ； 理论板数按黄芩苷峰 计算应不低于 2500 ； 对照品溶液的制备 ： 精密称取黄芩苷对照品适量， 加甲醇制成每 1ml 含 0.110mg 的溶。
5、 液， 即得 ； 供试品溶液的制备 ： 取金柴制剂内容物 0.1g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入醇 溶液50ml， 称定重量， 超声处理1545分钟， 放冷， 再称定重量， 用醇溶液补足减失的重量， 摇匀， 滤过， 取滤液作为供试品溶液， 其中所述醇溶液是甲醇或 70乙醇 ； 测定法 ： 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液 10l， 注入液相色谱仪， 测定， 即得 ； 本品含黄芩按黄芩苷 (C23H28O11) 计， 每粒不得少于 16.00mg。 2. 根据权利要求 1 所述的金柴制剂的质量控制方法， 其特征在于， 绿原酸的含量测定 中供试品溶液的制备步骤中所述甲醇溶液是 50甲。
6、醇， 黄芩苷的含量测定中供试品溶液的 制备步骤中所述醇溶液是甲醇。 3. 根据权利 1-2 所述的金柴制剂的质量控制方法， 其特征在于， 绿原酸的含量测定和 黄芩苷的含量测定中超声处理时间是 30 分钟。 4. 根据权利要求 1-2 所述的金柴制剂的质量控制方法， 其特征在于该方法中的鉴别方 法选自如下方法中一种或几种 ： (1)取金柴制剂内容物1g， 精密称定， 加甲醇10ml， 超声处理30分钟， 滤过， 滤液作为供 试品溶液 ； 另取绿原酸对照品， 加甲醇制成每 1ml 含 1mg 的溶液， 作为对照品溶液 ； 照薄层 色谱法试验， 吸取供试品溶液 10l， 对照品溶液 10l， 分别点。
7、于同一以羧甲基纤维素钠 硅胶 G 薄层板上， 以 7 ： 2.5 ： 2.5 的醋酸丁酯 ： 甲酸 ： 水的上层溶液为展开剂， 展开， 取出， 晾 干， 置紫外光灯下检视 ； 供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色的亮荧光斑 点 ； (2) 取金柴制剂内容物 1g， 精密称定， 加入甲醇 20ml， 超声处理 30 分钟， 滤过， 滤液蒸 干， 残渣加甲醇 1ml 使溶解， 作为供试品溶液 ； 另取黄芩苷对照品， 加甲醇制成每 1ml 含 1mg 的溶液， 作为对照品溶液 ； 照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液和对照品溶液各 10l， 分 权 利 要 求 书 CN 10411129。
8、5 A 2 2/3 页 3 别点于同一硅胶 G 薄层板上， 以 5 ： 3 ： 1 ： 1 的醋酸乙酯 ： 丁酮 ： 甲酸 ： 水为展开剂， 展开， 取 出， 晾干， 喷以 1三氯化铁乙醇溶液 ； 在供试品色谱中， 在与对照品色谱相应位置上， 显相 同颜色的斑点 ； (3) 取金柴制剂内容物 1g， 加甲醇 25ml， 加热回流 1 小时， 放冷， 滤过， 滤液蒸干， 残渣 加水 20ml 使溶解， 用乙醚振摇提取 2 次， 每次 10ml， 弃去乙醚液， 水层用水饱和正丁醇振摇 提取 3 次， 每次 15ml， 合并正丁醇提取液， 用水洗涤 2 次， 每次 10ml， 分取正丁醇层， 蒸干，。
9、 残 渣加甲醇 1ml 使溶解， 作为供试品溶液 ； 再取人参皂苷 Rb1、 Rg1 对照品， 加甲醇制成每 1ml 各含 2mg 的溶液， 作为对照品溶液 ； 照薄层色谱法试验， 吸取上述溶液各 10ul， 分别点于同 一硅胶 G 薄层板上， 以 15 ： 40 ： 22 ： 10 的氯仿 ： 醋酸乙酯 ： 甲醇 ： 水在 5 10条件下放置 12 小时的下层溶液为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 喷 10硫酸乙醇溶液， 在 105加热至斑点 显色清晰 ； 供试品色谱中在与对照品色谱相应位置上， 分别显相同颜色的斑点 ； (4) 取金柴制剂内容物 1g， 精密称定， 加入甲醇 20ml， 超。
10、声处理 30 分钟， 滤过， 滤液蒸 干， 残渣加甲醇 1ml 使溶解， 作为供试品溶液 ； 另取连翘苷对照品， 加甲醇制成每 1ml 含 1mg 的溶液， 作为对照品溶液 ； 照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液和对照品溶液各 10ul， 分别 点于同一硅胶 G 薄层板上， 以 9 ： 2 的氯仿 ： 甲醇为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 喷 10硫酸乙 醇溶液 ； 在供试品色谱中， 在与对照品色谱相应位置上， 分别显相同颜色的斑点。 5. 一种金柴制剂的质量控制方法， 其特征在于该方法包括以下方法 ： 鉴别 ： (1)取金柴制剂内容物1g， 精密称定， 加甲醇10ml， 超声处理30分钟，。
11、 滤过， 滤液作为供 试品溶液 ； 另取绿原酸对照品， 加甲醇制成每 1ml 含 1mg 的溶液， 作为对照品溶液 ； 照薄层 色谱法试验， 吸取供试品溶液 10l， 对照品溶液 10l， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠 硅胶 G 薄层板上， 以 7 ： 2.5 ： 2.5 的醋酸丁酯 ： 甲酸 ： 水的上层溶液为展开剂， 展开， 取出， 晾 干， 置紫外光灯下检视 ； 供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色的亮荧光斑 点 ； (2) 取金柴制剂内容物 1g， 精密称定， 加入甲醇 20ml， 超声处理 30 分钟， 滤过， 滤液蒸 干， 残渣加甲醇 1ml 使溶解， 作为供试品溶液。
12、 ； 另取黄芩苷对照品， 加甲醇制成每 1ml 含 1mg 的溶液， 作为对照品溶液 ； 照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液和对照品溶液各 10l， 分 别点于同一硅胶 G 薄层板上， 以 5 ： 3 ： 1 ： 1 的醋酸乙酯 ： 丁酮 ： 甲酸 ： 水为展开剂， 展开， 取 出， 晾干， 喷以 1三氯化铁乙醇溶液 ； 在供试品色谱中， 在与对照品色谱相应位置上， 显相 同颜色的斑点 ； (3)取金柴制剂内容物1g， 加甲醇25ml， 加热回流1小时， 放冷， 滤过， 滤液蒸干， 残渣加 水 20ml 使溶解， 用乙醚振摇提取 2 次， 每次 10ml， 弃去乙醚液， 水层用水饱和正丁醇振摇。
13、提 取 3 次， 每次 15ml， 合并正丁醇提取液， 用水洗涤 2 次， 每次 10ml， 分取正丁醇层， 蒸干， 残渣 加甲醇 1ml 使溶解， 作为供试品溶液 ； 再取人参皂苷 Rb1、 Rg1 对照品， 加甲醇制成每 1ml 各 含 2mg 的溶液， 作为对照品溶液 ； 照薄层色谱法试验， 吸取上述溶液各 10ul， 分别点于同一 硅胶 G 薄层板上， 以 15 ： 40 ： 22 ： 10 的氯仿 ： 醋酸乙酯 ： 甲醇 ： 水在 5 10条件下放置 12 小时的下层溶液为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 喷 10硫酸乙醇溶液， 在 105加热至斑点显 色清晰 ； 供试品色谱中在与对。
14、照品色谱相应位置上， 分别显相同颜色的斑点 ； (4) 取金柴制剂内容物 1g， 精密称定， 加入甲醇 20ml， 超声处理 30 分钟， 滤过， 滤液蒸 权 利 要 求 书 CN 104111295 A 3 3/3 页 4 干， 残渣加甲醇 1ml 使溶解， 作为供试品溶液 ； 另取连翘苷对照品， 加甲醇制成每 1ml 含 1mg 的溶液， 作为对照品溶液 ； 照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液和对照品溶液各 10ul， 分别 点于同一硅胶 G 薄层板上， 以 9 ： 2 的氯仿 ： 甲醇为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 喷 10硫酸乙 醇溶液 ； 在供试品色谱中， 在与对照品色谱相应位置。
15、上， 分别显相同颜色的斑点 ； 含量测定 ： (1) 绿原酸的含量测定 照高效液相色谱法测定 ； 色谱条件与系统适用性试验 ： 用十八烷基硅烷键合硅胶为填 充剂 ； 16 ： 84 的乙腈 ： 0.1磷酸溶液为流动相 ； 检测波长为 327nm ； 理论板数按绿原酸峰计 算应不低于 3000 ； 对照品溶液的制备 ： 精密称取绿原酸对照品适量， 置棕色量瓶中， 加 50甲醇制成每 1ml 含 26.6g 的溶液， 即得 (10以下保存 ) ； 供试品溶液的制备 ： 取金柴制剂内容物 0.1g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加 50 甲醇50ml， 称定重量， 超声处理30分钟， 放冷， 。
16、再称定重量， 用50甲醇补足减失的重量， 摇 匀， 滤过， 取滤液作为供试品溶液 ； 测定法 ： 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液 10l， 注入液相色谱仪， 测定， 即得 ； 本品含金银花按绿原酸 (C16H18O9) 计， 每粒不得少于 4.00mg ； (2) 黄芩苷的含量测定 照高效液相色谱法测定 ； 色谱条件与系统适用性试验 ： 用十八烷基硅烷键合硅胶为填 充剂 ； 47 ： 53 ： 0.2的甲醇 ： 水 ： 磷酸溶液为流动相 ； 检测波长为280nm ； 理论板数按黄芩苷峰 计算应不低于 2500 ； 对照品溶液的制备 ： 精密称取黄芩苷对照品适量， 加甲醇制成每 1ml 含 。
17、0.110mg 的溶 液， 即得 ； 供试品溶液的制备 ： 取金柴制剂内容物 0.1g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入甲 醇 50ml， 称定重量， 超声处理 30 分钟， 放冷， 再称定重量， 用甲醇补足减失的重量， 摇匀， 滤 过， 取滤液作为供试品溶液 ； 测定法 ： 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液 10l， 注入液相色谱仪， 测定， 即得 ； 本品含黄芩按黄芩苷 (C23H28O11) 计， 每粒不得少于 16.00mg。 6. 根据权利要求 1 所述的金柴制剂的质量控制方法， 其特征在所述制剂是口服固体制 剂， 优选胶囊剂、 颗粒剂或片剂。 权 利 要 求 书 CN 1。
18、04111295 A 4 1/11 页 5 一种中药制剂的质量控制方法 技术领域 0001 本发明涉及一种中药制剂的质量控制方法， 特备涉及一种金柴制剂质量控制方 法。 背景技术 0002 金柴胶囊是抗病毒药物组合物， 其由金银花、 连翘、 柴胡、 黄芩、 半夏、 西洋参、 绵马 贯众组成， 具有透邪解毒之功能， 可用于治疗病毒性上呼吸道感染 ( 中医分型属风热感冒 ) 引起的发热、 咳嗽、 咽痛等症状， 尤其是对感冒引起的头痛、 全身酸痛、 发热、 咳嗽、 咽痛等症 状有明显的疗效。 0003 中国专利申请号 CN200610081518.8 公开了该药物制剂的具体配方及其制备方 法， 但目。
19、前尚无对其产品质量控制的有关报道。 发明内容 0004 本发明的目提供了一种实用、 有效的质量控制方法， 以期为金柴胶囊的工业化生 产提供一种质量控制标准。 0005 本发明的金柴制剂的质量控制方法包括含量测定方法， 或还包括鉴别方法。 0006 本发明的金柴制剂的质量控制方法中的含量测定方法包括 ： 0007 (1) 绿原酸的含量测定 0008 照高效液相色谱法测定 ； 色谱条件与系统适用性试验 ： 用十八烷基硅烷键合硅胶 为填充剂 ； 16 ： 84 的乙腈 ： 0.1磷酸溶液为流动相 ； 检测波长为 327nm ； 理论板数按绿原酸 峰计算应不低于 3000 ； 0009 对照品溶液的制。
20、备 ： 精密称取绿原酸对照品适量， 置棕色量瓶中， 加 50甲醇制 成每 1ml 含 26.6g 的溶液， 即得 (10以下保存 ) ； 0010 供试品溶液的制备 ： 取金柴制剂内容物 0.1g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加 甲醇溶液 50ml， 称定重量， 超声处理 15 45 分钟， 放冷， 再称定重量， 用甲醇溶液补足减失 的重量， 摇匀， 滤过， 取滤液作为供试品溶液， 其中所述甲醇溶液是 50甲醇或甲醇 ； 0011 测定法 ： 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液 10l， 注入液相色谱仪， 测定， 即得 ； 本品含金银花按绿原酸 (C16H18O9) 计， 每粒不得少于。
21、 4.00mg ； 0012 (2) 黄芩苷的含量测定 0013 照高效液相色谱法测定 ； 色谱条件与系统适用性试验 ： 用十八烷基硅烷键合硅胶 为填 充剂 ； 47 ： 53 ： 0.2 的甲醇 ： 水 ： 磷酸溶液为流动相 ； 检测波长为 280nm ； 理论板数按黄 芩苷峰计算应不低于 2500 ； 0014 对照品溶液的制备 ： 精密称取黄芩苷对照品适量， 加甲醇制成每1ml含0.110mg的 溶液， 即得 ； 0015 供试品溶液的制备 ： 取金柴制剂内容物 0.1g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加 入醇溶液 50ml， 称定重量， 超声处理 15 45 分钟， 放冷， 再称。
22、定重量， 用甲醇补足减失的重 说 明 书 CN 104111295 A 5 2/11 页 6 量， 摇匀， 滤过， 取滤液作为供试品溶液， 其中所述醇溶液是甲醇或 70乙醇 ； 0016 测定法 ： 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液 10l， 注入液相色谱仪， 测定， 即得 ； 本品含黄芩按黄芩苷 (C23H28O11) 计， 每粒不得少于 16.00mg。 0017 在本发明的一些实施方案中， 绿原酸的含量测定中供试品溶液的制备步骤中所述 甲醇溶液是 50甲醇， 黄芩苷的含量测定中供试品溶液的制备步骤中所述醇溶液是甲醇。 0018 在本发明的一些实施方案中， 绿原酸的含量测定和黄芩苷的含量。
23、测定中超声处理 时间是 30 分钟。 0019 本发明的金柴制剂的质量控制方法， 还进一步包括鉴别方法， 其选自如下方法中 一种或几种 ： 0020 (1) 取金柴制剂内容物 1g， 精密称定， 加甲醇 10ml， 超声处理 30 分钟， 滤过， 滤液 作为供试品溶液 ； 另取绿原酸对照品， 加甲醇制成每 1ml 含 1mg 的溶液， 作为对照品溶液 ； 照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液 10l， 对照品溶液 10l， 分别点于同一以羧甲基纤 维素钠硅胶G薄层板上， 以7 ： 2.5 ： 2.5的醋酸丁酯 ： 甲酸 ： 水的上层溶液为展开剂， 展开， 取 出， 晾干， 置紫外光灯下检视 ； 。
24、供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色的亮 荧光斑点 ； 0021 (2) 取金柴制剂内容物 1g， 精密称定， 加入甲醇 20ml， 超声处理 30 分钟， 滤过， 滤 液蒸干， 残渣加甲醇1ml使溶解， 作为供试品溶液 ； 另取黄芩苷对照品， 加甲醇制成每1ml含 1mg 的溶液， 作为对照品溶液 ； 照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液和对照品溶液各 10l， 分别点于同一硅胶 G 薄层板上， 以 5 ： 3 ： 1 ： 1 的醋酸乙酯 ： 丁酮 ： 甲酸 ： 水为展开剂， 展开， 取 出， 晾干， 喷以 1三氯化铁乙醇溶液 ； 在供试品色谱中， 在与对照品色谱相应位置上， 显。
25、相 同颜色的斑点 ； 0022 (3) 取金柴制剂内容物 1g， 加甲醇 25ml， 加热回流 1 小时， 放冷， 滤过， 滤液蒸干， 残渣加水 20ml 使溶解， 用乙醚振摇提取 2 次， 每次 10ml， 弃去乙醚液， 水层用水饱和正丁醇 振摇提取 3 次， 每次 15ml， 合并正丁醇提取液， 用水洗涤 2 次， 每次 10ml， 分取正丁醇层， 蒸 干， 残渣加甲醇 1ml 使溶解， 作为供试品溶液 ； 再取人参皂苷 Rb1、 Rg1 对照品， 加甲醇 制成 每 1ml 各含 2mg 的溶液， 作为对照品溶液 ； 照薄层色谱法试验， 吸取上述溶液各 10ul， 分别 点于同一硅胶 G 。
26、薄层板上， 以 15 ： 40 ： 22 ： 10 的氯仿 ： 醋酸乙酯 ： 甲醇 ： 水在 5 10条件 下放置12小时的下层溶液为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 喷10硫酸乙醇溶液， 在105加热 至斑点显色清晰 ； 供试品色谱中在与对照品色谱相应位置上， 分别显相同颜色的斑点 ； 0023 (4) 取金柴制剂内容物 1g， 精密称定， 加入甲醇 20ml， 超声处理 30 分钟， 滤过， 滤 液蒸干， 残渣加甲醇1ml使溶解， 作为供试品溶液 ； 另取连翘苷对照品， 加甲醇制成每1ml含 1mg 的溶液， 作为对照品溶液 ； 照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液和对照品溶液各 10ul，。
27、 分别点于同一硅胶 G 薄层板上， 以 9 ： 2 的氯仿 ： 甲醇为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 喷 10硫 酸乙醇溶液 ； 在供试品色谱中， 在与对照品色谱相应位置上， 分别显相同颜色的斑点。 0024 更进一步地， 本发明的金柴制剂的质量控制方法包括以下方法 ： 0025 鉴别 ： 0026 (1) 取金柴制剂内容物 1g， 精密称定， 加甲醇 10ml， 超声处理 30 分钟， 滤过， 滤液 作为供试品溶液 ； 另取绿原酸对照品， 加甲醇制成每 1ml 含 1mg 的溶液， 作为对照品溶液 ； 照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液 10l， 对照品溶液 10l， 分别点于同一以羧甲基。
28、纤 说 明 书 CN 104111295 A 6 3/11 页 7 维素钠硅胶G薄层板上， 以7 ： 2.5 ： 2.5的醋酸丁酯 ： 甲酸 ： 水的上层溶液为展开剂， 展开， 取 出， 晾干， 置紫外光灯下检视 ； 供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色的亮 荧光斑点 ； 0027 (2) 取金柴制剂内容物 1g， 精密称定， 加入甲醇 20ml， 超声处理 30 分钟， 滤过， 滤 液蒸干， 残渣加甲醇1ml使溶解， 作为供试品溶液 ； 另取黄芩苷对照品， 加甲醇制成每1ml含 1mg 的溶液， 作为对照品溶液 ； 照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液和对照品溶液各 10l， 分。
29、别点于同一硅胶 G 薄层板上， 以 5 ： 3 ： 1 ： 1 的醋酸乙酯 ： 丁酮 ： 甲酸 ： 水为展开剂， 展开， 取 出， 晾干， 喷以 1三氯化铁乙醇溶液 ； 在供试品色谱中， 在与对照品色谱相应位置上， 显相 同颜色的斑点 ； 0028 (3) 取金柴制剂内容物 1g， 加甲醇 25ml， 加热回流 1 小时， 放冷， 滤过， 滤液蒸干， 残渣加水 20ml 使溶解， 用乙醚振摇提取 2 次， 每次 10ml， 弃去乙醚液， 水层用水饱和正丁醇 振摇提取 3 次， 每次 15ml， 合并正丁醇提取液， 用水洗涤 2 次， 每次 10ml， 分取正丁醇层， 蒸 干， 残渣加甲醇1ml。
30、使溶解， 作为供试品溶液 ； 再取人参皂苷Rb1、 Rg1对照品， 加甲醇制成每 1ml各含2mg的溶液， 作为对照品溶液 ； 照薄层色谱法试验， 吸取上述溶液各10ul， 分别点于 同一硅胶 G 薄层板上， 以 15 ： 40 ： 22 ： 10 的氯仿 ： 醋酸乙酯 ： 甲醇 ： 水在 5 10条件下放置 12 小时的下层溶液为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 喷 10硫酸乙醇溶液， 在 105加热至斑点 显色清晰 ； 供试品色谱中在与对照品色谱相应位置上， 分别显相同颜色的斑点 ； 0029 (4) 取金柴制剂内容物 1g， 精密称定， 加入甲醇 20ml， 超声处理 30 分钟， 滤过。
31、， 滤 液蒸干， 残渣加甲醇1ml使溶解， 作为供试品溶液 ； 另取连翘苷对照品， 加甲醇制成每1ml含 1mg 的溶液， 作为对照品溶液 ； 照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液和对照品溶液各 10ul， 分别点于同一硅胶 G 薄层板上， 以 9 ： 2 的氯仿 ： 甲醇为展开剂， 展开， 取出， 晾干， 喷 10硫 酸乙醇溶液 ； 在供试品色谱中， 在与对照品色谱相应位置上， 分别显相同颜色的斑点 ； 0030 含量测定 ： 0031 (1) 绿原酸的含量测定 0032 照高效液相色谱法测定 ； 色谱条件与系统适用性试验 ： 用十八烷基硅烷键合硅胶 为填充剂 ； 16 ： 84 的乙腈 ： 。
32、0.1磷酸溶液为流动相 ； 检测波长为 327nm ； 理论板数按绿原酸 峰计算应不低于 3000 ； 0033 对照品溶液的制备 ： 精密称取绿原酸对照品适量， 置棕色量瓶中， 加 50甲醇制 成每 1ml 含 26.6g 的溶液， 即得 (10以下保存 ) ； 0034 供试品溶液的制备 ： 取金柴制剂内容物 0.1g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加 50甲醇 50ml， 称定重量， 超声处理 30 分钟， 放冷， 再称定重量， 用 50甲醇补足减失的重 量， 摇匀， 滤过， 取滤液作为供试品溶液 ； 0035 测定法 ： 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液 10l， 注入液相色谱。
33、仪， 测定， 即得 ； 本品含金银花按绿原酸 (C16H18O9) 计， 每粒不得少于 4.00mg ； 0036 (2) 黄芩苷的含量测定 0037 照高效液相色谱法测定 ； 色谱条件与系统适用性试验 ： 用十八烷基硅烷键合硅胶 为填充剂 ； 47 ： 53 ： 0.2的甲醇 ： 水 ： 磷酸溶液为流动相 ； 检测波长为280nm ； 理论板数按黄芩 苷峰计算应不低于 2500 ； 0038 对照品溶液的制备 ： 精密称取黄芩苷对照品适量， 加甲醇制成每1ml含0.110mg的 说 明 书 CN 104111295 A 7 4/11 页 8 溶液， 即得 ； 0039 供试品溶液的制备 ： 。
34、取金柴制剂内容物 0.1g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加 入甲醇 50ml， 称定重量， 超声处理 30 分钟， 放冷， 再称定重量， 用甲醇补足减失的重量， 摇 匀， 滤过， 取滤液作为供试品溶液 ； 0040 测定法 ： 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液 10l， 注入液相色谱仪， 测定， 即得 ； 本品含黄芩按黄芩苷 (C23H28O11) 计， 每粒不得少于 16.00mg。 0041 本发明的金柴制剂的质量控制方法适用于其口服固体制剂， 优选胶囊剂、 颗粒剂 或片剂。 0042 发明的质量控制方法对产品的质量控制更为有效， 具有精密度高、 灵敏度高、 稳定 性 好的特点。。
35、 0043 本发明的质量控制方法， 适用于实施例 1 所述的金柴胶囊制剂， 也可以适用于其 他与实施例 1 所述的金柴胶囊制剂具有相同原料组成的其他制剂。 具体实施方案 0044 以下通过实施例对本发明做进一步解释和说明， 但不应将此理解为本发明上述主 题的范围仅限于以下的实施例。在不脱离本发明上述思想情况下， 根据本领域普通技术知 识和惯用手段做出的各种替换或变更， 均应包括在本发明的范围内。 0045 实验例 1 绿原酸的含量测定 0046 1、 仪器、 试剂及样品 0047 (1) 仪器色谱仪 ： 日本岛津 LC-2012AHT 高效液相色谱仪。 0048 (2) 试剂乙腈为色谱纯， 其。
36、余为分析纯。 0049 (3) 对照品绿原酸 ( 供含量测定用 ： 批号 0753-9908 中国药品生物制品检定所 )。 0050 (4) 对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品适量， 置棕色量瓶中， 加 50甲醇 制成每 1ml 含 26.6g 的溶液， 即得 (10以下保存 )。 0051 (5) 供试品溶液的制备 0052 a) 提取方法和溶剂的选择 ： 取 2 份供试品， 每份约 0.1g， 精密称定， 置具塞锥形 瓶中， 分别精密加 50甲醇或甲醇 50ml， 称定重量， 超声处理 30min， 放冷， 再称定重量， 用 50甲醇或甲醇补足减失的重量， 摇匀， 滤过， 即得。测定绿原。
37、酸含量， 结果见表 1。 0053 表 1 提取溶剂的考察 0054 结果表明， 两种提取溶剂的测定结果无显著差异， 可优选 50甲醇溶液为提取溶 剂。 0055 b)提取时间的选择 ： 取3份供试品， 每份约0.1g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密 加50甲醇50ml， 称定重量， 超声处理15、 30、 45min， 放冷， 再称定重量， 用50甲醇补足减 失的重量， 摇匀， 滤过， 即得。测定绿原酸含量， 结果见表 2。 说 明 书 CN 104111295 A 8 5/11 页 9 0056 表 2 提取时间的考察 0057 结果表明， 超声处理 30min 供试品中绿原酸即提取。
38、完全， 优选超声处理 30min。 0058 c) 供试品溶液的制备 ： 取供试品约 0.1g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加 50 甲醇50ml， 称定重量， 超声处理30分钟， 放冷， 再称定重量， 用50甲醇补足减失的重量， 摇 匀， 滤过， 即得。 0059 2、 测试条件考察 0060 (1)色谱条件色谱柱 ： C18钻石柱(4.6mm200mm)， 粒度5m， 以十八烷基硅烷键合 硅胶为填充剂 ； 流动相 ： 乙腈 -0.1磷酸溶液 (16 ： 84) ； 检测波长 ： 327nm ； 进样量 ： 10l。 0061 (2) 分离度应大于 2， 理论板数按绿原酸峰计算应不低。
39、于 3000。 0062 (3) 线性关系考察 0063 取绿原酸对照品适量， 精密称定， 加 50甲醇制成每 1ml 含 26.55g 的对照品溶 液。分别精密吸取对照品溶液 4、 6、 8、 10、 12l 注入色谱仪， 测定。以绿原酸对照品的进样 量(X， g)为横坐标， 相应色谱峰峰面积积分值(Y)为纵坐标进行线性回归， 求得回归方程 Y 4051425.6X+586.4(R2 0.9993)， 结果见表 3。结果表明， 绿原酸在 10.62 31.86g 之间成良好线性关系。 0064 表 3 线性关系试验 0065 3、 供试品的干扰实验 0066 (1) 空白试验 0067 阴性。
40、对照溶液 ： 按本品制备方法制成不含金银花的样品， 按供试品制备项下制成 阴性对照溶液。 0068 分别精密吸取对照品溶液、 供试品溶液和阴性对照溶液各 10l， 注入液相色谱 仪， 记录色谱图。结果表明， 本品中金银花提取物以外的组分对绿原酸的测定无干扰。 0069 4、 溶液稳定性试验 0070 精密吸取同一供试品溶液(室温条件下放置的)10l， 分别于0、 2、 4、 6、 8h进样一 次， 按上述色谱条件测定相应峰面积， 结果见表 4。结果表明， 供试品溶液中绿原酸在 8h 内 稳定， 样品测试一般在 2 小时内即可完成。 0071 表 4 稳定性试验 说 明 书 CN 1041112。
41、95 A 9 6/11 页 10 0072 5、 精密度试验 0073 精密吸取绿原酸对照品溶液 10l， 连续进样 6 次， 测定绿原酸峰面积， 结果见表 5。结果表明， 仪器精密度较好。 0074 表 5 精密度试验 0075 6、 重现性试验 0076 取同一批样品 6 份， 按供试品制备项下分别制备供试品溶液后， 分别测定并计算 绿原酸含量， 结果见表 6。结果表明， 重现性良好。 0077 表 6 重现性试验 0078 7、 回收率试验 0079 精密称取已知绿原酸含量的本品 6 份， 每份 50mg 左右， 分别加入绿原酸对照品溶 液 (0.33mg/ml)2ml， 按照供试品制备。
42、项下制成供试品溶液后， 测定绿原酸含量， 结果见表 7。结果表明， 回收率较好。 0080 表 7 回收率试验 0081 8、 供试品含量测定 0082 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液 10l， 注入液相色谱仪， 测定， 计算供试 品含量， 结果见表 8。 说 明 书 CN 104111295 A 10 7/11 页 11 0083 表 8 样品中绿原酸的含量 0084 实验测定了 6 批样品 6 个数据， 绿原酸的平均含量为 5.73mg/ 粒， 鉴于生产实际、 药材及其它方面的因素， 制定本品标准， 规定本品含金银花按绿原酸(C16H18O9)计， 每粒不得 少于 4.00mg。 00。
43、85 实验例 2 黄芩苷的含量测定 0086 1、 仪器、 试剂及样品 0087 (1) 仪器色谱仪 ： 高效液相色谱仪。 0088 (2) 试剂甲醇为色谱纯， 其余为分析纯。 0089 (3) 对照品黄芩苷 ( 供含量测定用 110736-200220 中国药品生物制品检定所 )。 0090 (4)对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量， 加甲醇制成每1ml含0.110mg 的溶液， 即得。 0091 (5) 供试品溶液的制备 0092 a) 提取方法和溶剂的选择 ： 取 2 份供试品， 每份约 0.1g， 精密称定， 置具塞锥形瓶 中， 分别精密加甲醇 50ml 或 70乙醇 50ml，。
44、 称定重量， 超声处理 30min， 用甲醇或 70乙醇 补足减失的重量， 摇匀， 滤过， 即得。测定黄芩苷含量， 结果见表 9。 0093 表 9 提取溶剂的选择 0094 结果表明， 两种提取溶剂的测定结果无显著差异， 可优选甲醇为提取溶剂。 0095 b)提取时间的选择 ： 取3份供试品， 每份约0.1g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密 加甲醇 50ml， 称定重量， 分别超声处理 15、 30、 45min， 放冷， 再称定重量， 用甲醇补足减失的 重量， 摇匀， 滤过， 即得。测定黄芩苷含量， 结果见表 10。 0096 表 10 提取时间的选择 0097 结果表明， 超声处理。
45、 30min 供试品中黄芩苷即已提取完全， 优选超声处理 30min。 0098 c) 供试品溶液的制备 0099 取供试品约 0.1g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入甲醇 50ml， 称定重量， 超 声处理 30 分钟， 放冷， 再称定重量， 用甲醇补足减失的重量， 摇匀， 滤过， 即得。 说 明 书 CN 104111295 A 11 8/11 页 12 0100 2、 测试条件考察 0101 (1) 色谱条件 0102 色谱柱 ： C18钻石柱(4.6mm200mm)， 粒度5m ； 流动相 ： 甲醇-水-磷酸溶液(47 ： 53 ： 0.2) ； 检测波长 ： 280nm ；。
46、 进样量 ： 10l。 0103 (2) 分离度应大于 2， 理论板数按黄芩苷峰计算应不低于 2500。 0104 (3) 线性关系考察 0105 取黄芩苷对照品适量， 精密称定， 制成每 1ml 含 111.28g 的对照品溶液， 分别吸 取 4、 6、 8、 10、 12l， 分别进样， 测定。以黄芩苷对照品的进样量 (X， g) 横为坐标， 相应峰 面积积分值为纵坐标， 计算标准曲线为 Y 3355463.2X+13884.4(R2 0.9995)， 结果见表 11。结果表明， 黄芩苷在 44.512 133.536g 之间成良好线性关系。 0106 表 11 线性关系试验 0107 3。
47、、 供试品的干扰实验 0108 (1) 空白试验 0109 阴性对照溶液 ： 按本品制备方法制成不含黄芩的样品， 按供试品制备项制成阴性 对照溶液。 0110 分别精密吸取对照品溶液、 供试品溶液和阴性对照溶液溶液各 10l， 分别注入液 相色谱仪中， 记录色谱图。结果表明， 本品中黄芩提取物以外的组分对黄芩苷的测定无干 扰。 0111 4、 溶液稳定性试验 0112 精密吸取同一供试品溶液 ( 室温条件下放置的 )10l， 分别于 0、 2、 4、 6、 8h 进样 一次， 按上述色谱条件测定相应峰面积， 结果见表 12。结果表明， 供试品溶液中黄芩苷在 8h 内稳定。 0113 表 12 。
48、稳定性试验 0114 5、 精密度试验 0115 精密吸取每1ml含111.3g的对照品溶液10l， 连续进样5次， 测定黄芩苷峰面 积， 结果见表 13。结果表明， 仪器精密度较好。 0116 表 13 精密度试验 说 明 书 CN 104111295 A 12 9/11 页 13 0117 6、 重现性试验 0118 取同一批样品 6 份， 按供试品制备项下分别制备供试品溶液后， 分别测定黄芩苷 含量， 结果见表 14。结果表明， 重现性良好。 0119 表 14 重现性试验 0120 7、 回收率试验 0121 精密称取已知黄芩苷含量的样品6份， 每份45mg左右， 精密称定， 分别加入黄芩苷 对照品溶液 (1.24mg/ml)2ml， 按照供试品制备项下制成供试品溶液后， 测定黄芩苷含量， 结 果见表 15。结果表明， 回收率较好。 0122 表 15 回收率试验 0123 8、 供试品含量测定 0124 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液 10l， 注入液相色谱仪， 测定， 计算供试 品含量， 结果见表 16。 0125 表 16 样品中绿原酸的含量 0126 实验测定了 6 批样品 6 个数据， 绿原酸的平均。