切片防脱剂及其制备和使用方法.pdf

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1、(10)申请公布号 CN 104062165 A (43)申请公布日 2014.09.24 CN 104062165 A (21)申请号 201410270745.X (22)申请日 2014.06.17 G01N 1/36(2006.01) (71)申请人塔里木大学地址 843300 新疆维吾尔自治区阿克苏地区阿拉尔市虹桥南路 705 号塔里木大学 (72)发明人王艳萍廖秋萍石长青曾维斌 (74)专利代理机构北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 代理人董芙蓉 (54) 发明名称切片防脱剂及其制备和使用方法 (57) 摘要本发明公开了一种切片防脱剂，包括混合均。

2、匀的下述成分：鸡蛋的蛋清、甘油，乙醇。本发明的切片防脱剂能够将载玻片稳定的粘附在一起，克服了实验过程中，尤其是组织切片免疫组化实验中因组织受到高温及液体中长时间的浸泡极容易掉片的缺陷，与已有的防脱片相比，本发明的切片防脱剂粘附能力更强，不会掉片，并且本发明的切片防脱剂可以清除传统的蛋白甘油黏附剂的红色染色背景，增强分辨力。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页说明书 2 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请权利要求书1页说明书2页 (10)申请公布号 CN 104062165 A CN 104062165 A 1/1 页。

3、 2 1. 切片防脱剂，其特征在于包括混合均匀的下述成分：鸡蛋的蛋清、甘油，小分子有机醇。 2. 根据权利要求 1 的切片防脱剂，其特征在于以体积比计，各成分的用量为鸡蛋的蛋清：甘油：乙醇 (0.5-2) ： (0.1-1.5) ： (0.5-2)。 3. 根据权利要求 1 的切片防脱剂，其特征在于小分子有机醇为乙醇、正丙醇或异丙醇中的一种。 4. 根据权利要求 3 的切片防脱剂，其特征在于小分子有机醇为 40乙醇。 5. 权利要求 1 的切片防脱剂的制备方法，其特征在于包括下述步骤： 1) 从鸡蛋中分离蛋清，搅拌均匀； 2) 将蛋清过滤后与甘油混匀。

4、； 3) 加入小分子有机醇，混匀后倒入滴瓶中冷藏保存。 6. 权利要求 1 的切片防脱剂的使用方法，其特征在于将切片防脱剂滴于载玻片上，再滴蒸馏水，二者混合均匀后将另一玻片贴在滴有切片防脱剂的载玻片上，相互磨擦均匀即可。 7. 根据权利要求 6 的使用方法，其特征在于所述蒸馏水与切片防脱剂体积相同。 8. 根据权利要求 6 的使用方法，其特征在于还包括将黏附好的载玻片加热烘烤的步骤。权利要求书 CN 104062165 A 2 1/2 页 3 切片防脱剂及其制备和使用方法技术领域 0001 本发明涉及一种切片防脱剂，属于生物实验科学器材领域。背景技术 0。

5、002 在理工类科学实验中，尤其是生物类科学实验、病理类科学实验中，为了便于显微镜下观察或标本固定、染色、免疫组化等用途时，常受高温、高压、辐射、酸碱腐蚀等各种各样的外部因素影响 , 组织细胞极易从载玻片上脱落。已有的玻片通常是采用水或者粘附剂处理 , 采用水的问题是粘合的不牢固，采用粘附剂的问题是已有的粘附剂是由普通蛋白和甘油组成导致玻片背景着色、污染，通常是着红色染色背景，不但影响技术人员的日常工作 , 也不利于病理的诊断等用途。发明内容 0003 针对现有技术中存在的问题，本发明公开了一种切片防脱剂，能够将细胞、组织等的切片牢固地粘附于载玻片。

6、上 , 防止脱落，克服了实验过程中，尤其是组织切片免疫组化实验中因组织受到高温及液体中长时间的浸泡极容易掉片的缺陷，与已有的防脱片相比，本发明的切片防脱剂粘附能力更强，不会掉片，并且本发明的切片防脱剂可以清除传统的蛋白甘油黏附剂的红色染色背景，增强分辨力，不影响诊断观察。 0004 为实现上述目的，本发明是通过下述技术方案实现的： 0005 切片防脱剂，包括混合均匀的下述成分：鸡蛋的蛋清、甘油，小分子有机醇。 0006 其中，上述各成分均为液态，根据实际需要可以调整各成分的用量，通常以体积比计，各成分的用量为鸡蛋的蛋清：甘油：乙醇 (0.5-。

7、2) ： (0.1-1.5) ： (0.5-2)。 0007 优选的，各成分的用量为鸡蛋的蛋清：甘油：乙醇 (1 1.5) ： (0.8-1.2) ： (1-1.5)。 0008 本发明的切片防脱剂，利用鸡蛋蛋清中的多种蛋白成分，主要是卵白蛋白、卵类粘蛋白、卵粘蛋白等，对玻璃表面微结构起到化学修饰效果 , 改变玻璃基材表面的理化活性从而形成稳定的结合结构使得切片与载玻片的结合更牢固；同时，通过甘油，小分子有机醇的协同作用，改善载玻片的亲润性，增加液体扩散速度，使得切片细胞均匀、单一的分布在观察区域；同时，利用三者相互混合效果，消除了传统的粘附。

8、剂的红色染色背景，保证了观察的准确性。 0009 在本发明中，所用的小分子有机醇为乙醇、正丙醇或异丙醇中的一种，优选的，小分子有机醇为乙醇，通常为低浓度乙醇，更优选为 40乙醇。 0010 相应的，本发明公开了所述切片防脱剂的制备方法，包括下述步骤： 0011 1) 从鸡蛋中分离蛋清，搅拌均匀； 0012 2) 将蛋清过滤后与甘油混匀； 0013 3) 加入小分子有机醇，混匀后倒入滴瓶中冷藏保存。 0014 为了便于识别和标记，上述滴瓶可以贴上标签、签名和日期等。说明书 CN 104062165 A 3 2/2 页 4 0015 最后，本发明还公开了。

9、切片防脱剂的使用方法，通过将切片防脱剂滴于载玻片上，再滴蒸馏水，二者混合均匀后将另一玻片贴在滴有切片防脱剂的载玻片上，相互磨擦均匀即可。 0016 其中，蒸馏水、切片防脱剂的用量都可以根据实际需要进行选择，一般而言二者的体积用量是相同的。 0017 为了消除病原微生物等外部污染，并除去多余水渍，上述使用方法还包括将黏附好的载玻片加热烘烤的步骤。具体实施方式 0018 实施例 1 ：切片防脱剂的制备 0019 1)、打破鸡蛋，分离取出蛋清，用玻璃棒搅拌均匀。 0020 2)、用双层定性滤纸过滤后放入量筒中，再加入等体积的甘油，混匀。 0021 3)、加入。

10、体积为蛋清和甘油体积和 2/3 的 40乙醇，混匀。 0022 4)、倒入 30ml 滴瓶中。贴上标签、签名和日期。冰箱冷藏保存。 0023 实施例 2: 切片防脱剂的制备 0024 1)、打破鸡蛋，分离取出蛋清，用玻璃棒搅拌均匀。 0025 2)、用双层定性滤纸过滤后放入量筒中，再加入 1.1 倍体积的甘油，混匀。 0026 3)、加入体积为蛋清和甘油体积和 0.7 倍的 40乙醇，混匀。 0027 4)、倒入 30ml 滴瓶中。贴上标签、签名和日期。冰箱冷藏保存。 0028 实施例 3: 切片防脱剂的制备 0029 1)、打破鸡蛋，分离取出蛋清，用玻璃棒搅拌。

11、均匀。 0030 2)、用滤纸过滤后放入量筒中，再加入 0.85 倍体积的甘油，混匀。 0031 3)、加入体积为蛋清和甘油体积和 0.6 倍的 55乙醇，混匀。 0032 4)、倒入 30ml 滴瓶中。贴上标签、签名和日期。冰箱冷藏保存。 0033 实施例 4: 切片防脱剂的制备 0034 1)、打破鸡蛋，分离取出蛋清，用玻璃棒搅拌均匀。 0035 2)、蛋清过滤后放入量筒中，再加入 1.3 倍体积的甘油，混匀。 0036 3)、加入体积为蛋清和甘油体积和 0.9 倍的正丙醇，混匀。 0037 4)、倒入 30ml 滴瓶中。贴上标签、签名和日期。冰箱冷藏保存。

12、。 0038 上述的切片防脱剂按照下述方法使用：用滴管滴一滴于载玻片上，再滴一滴蒸馏水，二者混合均匀；将另一玻片贴在滴有黏附剂的玻片上，相互磨擦均匀，依次类推，制作多张片后放入 50 度烘箱烤片 1-2 小时即可。 0039 利用本发明的防脱剂，处理 500 张载玻片，进行细胞学、组织学制片，各种制片细胞掉片率均为 0，同时对于各种细胞制片，无论是固态或者液基都保持有良好的亲润性，玻片表面非常干净均匀，载玻片粘附性能极佳，并且在整个实验观察过程中均没有出现传统的普通蛋白甘油黏附剂的红色染色背景干扰现象。已有的普通蛋白甘油黏附剂不仅存在红色背景干扰，更关键的是这种黏附剂对于液基细胞切片亲润性和粘附性很差，存在较高的掉片率，并且采用普通蛋白甘油黏附剂玻片表面镜下观察可发现表面高低不平，清洁度不好。说明书 CN 104062165 A 4 。

摘要
申请专利号：	CN201410270745.X	申请日：	2014.06.17
公开号：	CN104062165A	公开日：	2014.09.24
当前法律状态：	撤回	有效性：	无权
法律详情：	发明专利申请公布后的视为撤回IPC(主分类):G01N 1/36申请公布日:20140924\|\|\|实质审查的生效IPC(主分类):G01N 1/36申请日:20140617\|\|\|公开
IPC分类号：	G01N1/36	主分类号：	G01N1/36
申请人：	塔里木大学
发明人：	王艳萍; 廖秋萍; 石长青; 曾维斌
地址：	843300 新疆维吾尔自治区阿克苏地区阿拉尔市虹桥南路705号塔里木大学
优先权：
专利代理机构：	北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385	代理人：	董芙蓉
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内容摘要

本发明公开了一种切片防脱剂，包括混合均匀的下述成分：鸡蛋的蛋清、甘油，乙醇。本发明的切片防脱剂能够将载玻片稳定的粘附在一起，克服了实验过程中，尤其是组织切片免疫组化实验中因组织受到高温及液体中长时间的浸泡极容易掉片的缺陷，与已有的防脱片相比，本发明的切片防脱剂粘附能力更强，不会掉片，并且本发明的切片防脱剂可以清除传统的蛋白甘油黏附剂的红色染色背景，增强分辨力。

权利要求书

权利要求书
1.  切片防脱剂，其特征在于包括混合均匀的下述成分：鸡蛋的蛋清、甘油，小分子有机醇。

2.  根据权利要求1的切片防脱剂，其特征在于以体积比计，各成分的用量为鸡蛋的蛋清：甘油：乙醇＝(0.5-2)：(0.1-1.5)：(0.5-2)。

3.  根据权利要求1的切片防脱剂，其特征在于小分子有机醇为乙醇、正丙醇或异丙醇中的一种。

4.  根据权利要求3的切片防脱剂，其特征在于小分子有机醇为40％乙醇。

5.  权利要求1的切片防脱剂的制备方法，其特征在于包括下述步骤：1)从鸡蛋中分离蛋清，搅拌均匀；2)将蛋清过滤后与甘油混匀；3)加入小分子有机醇，混匀后倒入滴瓶中冷藏保存。

6.  权利要求1的切片防脱剂的使用方法，其特征在于将切片防脱剂滴于载玻片上，再滴蒸馏水，二者混合均匀后将另一玻片贴在滴有切片防脱剂的载玻片上，相互磨擦均匀即可。

7.  根据权利要求6的使用方法，其特征在于所述蒸馏水与切片防脱剂体积相同。

8.  根据权利要求6的使用方法，其特征在于还包括将黏附好的载玻片加热烘烤的步骤。

说明书

说明书切片防脱剂及其制备和使用方法
技术领域
本发明涉及一种切片防脱剂，属于生物实验科学器材领域。
背景技术
在理工类科学实验中，尤其是生物类科学实验、病理类科学实验中，为了便于显微镜下观察或标本固定、染色、免疫组化等用途时，常受高温、高压、辐射、酸碱腐蚀等各种各样的外部因素影响,组织细胞极易从载玻片上脱落。已有的玻片通常是采用水或者粘附剂处理,采用水的问题是粘合的不牢固，采用粘附剂的问题是已有的粘附剂是由普通蛋白和甘油组成导致玻片背景着色、污染，通常是着红色染色背景，不但影响技术人员的日常工作,也不利于病理的诊断等用途。
发明内容
针对现有技术中存在的问题，本发明公开了一种切片防脱剂，能够将细胞、组织等的切片牢固地粘附于载玻片上,防止脱落，克服了实验过程中，尤其是组织切片免疫组化实验中因组织受到高温及液体中长时间的浸泡极容易掉片的缺陷，与已有的防脱片相比，本发明的切片防脱剂粘附能力更强，不会掉片，并且本发明的切片防脱剂可以清除传统的蛋白甘油黏附剂的红色染色背景，增强分辨力，不影响诊断观察。
为实现上述目的，本发明是通过下述技术方案实现的：
切片防脱剂，包括混合均匀的下述成分：鸡蛋的蛋清、甘油，小分子有机醇。
其中，上述各成分均为液态，根据实际需要可以调整各成分的用量，通常以体积比计，各成分的用量为鸡蛋的蛋清：甘油：乙醇＝(0.5-2)：(0.1-1.5)：(0.5-2)。
优选的，各成分的用量为鸡蛋的蛋清：甘油：乙醇＝(1－1.5)：(0.8-1.2)：(1-1.5)。
本发明的切片防脱剂，利用鸡蛋蛋清中的多种蛋白成分，主要是卵白蛋白、卵类粘蛋白、卵粘蛋白等，对玻璃表面微结构起到化学修饰效果,改变玻璃基材表面的理化活性从而形成稳定的结合结构使得切片与载玻片的结合更牢固；同时，通过甘油，小分子有机醇的协同作用，改善载玻片的亲润性，增加液体扩散速度，使得切片细胞均匀、单一的分布在观察区域；同时，利用三者相互混合效果，消除了传统的粘附剂的红色染色背景，保证了观察的准确性。
在本发明中，所用的小分子有机醇为乙醇、正丙醇或异丙醇中的一种，优选的，小分子有机醇为乙醇，通常为低浓度乙醇，更优选为40％乙醇。
相应的，本发明公开了所述切片防脱剂的制备方法，包括下述步骤：
1)从鸡蛋中分离蛋清，搅拌均匀；
2)将蛋清过滤后与甘油混匀；
3)加入小分子有机醇，混匀后倒入滴瓶中冷藏保存。
为了便于识别和标记，上述滴瓶可以贴上标签、签名和日期等。
最后，本发明还公开了切片防脱剂的使用方法，通过将切片防脱剂滴于载玻片上，再滴蒸馏水，二者混合均匀后将另一玻片贴在滴有切片防脱剂的载玻片上，相互磨擦均匀即可。
其中，蒸馏水、切片防脱剂的用量都可以根据实际需要进行选择，一般而言二者的体积用量是相同的。
为了消除病原微生物等外部污染，并除去多余水渍，上述使用方法还包括将黏附好的载玻片加热烘烤的步骤。
具体实施方式
实施例1：切片防脱剂的制备
1)、打破鸡蛋，分离取出蛋清，用玻璃棒搅拌均匀。
2)、用双层定性滤纸过滤后放入量筒中，再加入等体积的甘油，混匀。
3)、加入体积为蛋清和甘油体积和2/3的40％乙醇，混匀。
4)、倒入30ml滴瓶中。贴上标签、签名和日期。冰箱冷藏保存。
实施例2:切片防脱剂的制备
1)、打破鸡蛋，分离取出蛋清，用玻璃棒搅拌均匀。
2)、用双层定性滤纸过滤后放入量筒中，再加入1.1倍体积的甘油，混匀。
3)、加入体积为蛋清和甘油体积和0.7倍的40％乙醇，混匀。
4)、倒入30ml滴瓶中。贴上标签、签名和日期。冰箱冷藏保存。
实施例3:切片防脱剂的制备
1)、打破鸡蛋，分离取出蛋清，用玻璃棒搅拌均匀。
2)、用滤纸过滤后放入量筒中，再加入0.85倍体积的甘油，混匀。
3)、加入体积为蛋清和甘油体积和0.6倍的55％乙醇，混匀。
4)、倒入30ml滴瓶中。贴上标签、签名和日期。冰箱冷藏保存。
实施例4:切片防脱剂的制备
1)、打破鸡蛋，分离取出蛋清，用玻璃棒搅拌均匀。
2)、蛋清过滤后放入量筒中，再加入1.3倍体积的甘油，混匀。
3)、加入体积为蛋清和甘油体积和0.9倍的正丙醇，混匀。
4)、倒入30ml滴瓶中。贴上标签、签名和日期。冰箱冷藏保存。
上述的切片防脱剂按照下述方法使用：用滴管滴一滴于载玻片上，再滴一滴蒸馏水，二者混合均匀；将另一玻片贴在滴有黏附剂的玻片上，相互磨擦均匀，依次类推，制作多张片后放入50度烘箱烤片1-2小时即可。
利用本发明的防脱剂，处理500张载玻片，进行细胞学、组织学制片，各种制片细胞掉片率均为0％，同时对于各种细胞制片，无论是固态或者液基都保持有良好的亲润性，玻片表面非常干净均匀，载玻片粘附性能极佳，并且在整个实验观察过程中均没有出现传统的普通蛋白甘油黏附剂的红色染色背景干扰现象。已有的普通蛋白甘油黏附剂不仅存在红色背景干扰，更关键的是这种黏附剂对于液基细胞切片亲润性和粘附性很差，存在较高的掉片率，并且采用普通蛋白甘油黏附剂玻片表面镜下观察可发现表面高低不平，清洁度不好。