获取洁净的久置鱼耳石的方法.pdf

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1、(10)申请公布号 CN 104198260 A (43)申请公布日 2014.12.10 CN 104198260 A (21)申请号 201410468242.3 (22)申请日 2014.09.15 G01N 1/34(2006.01) (71)申请人 中国水产科学研究院黑龙江水产研 究所 地址 150070 黑龙江省哈尔滨市道里区松发 街 43 号 (72)发明人 王继隆 刘伟 王臣 (74)专利代理机构 哈尔滨市松花江专利商标事 务所 23109 代理人 侯静 (54) 发明名称 获取洁净的久置鱼耳石的方法 (57) 摘要 获取洁净的久置鱼耳石的方法， 它涉及获取 鱼耳石的方法。本发。

2、明是要解决现有技术对于久 存鱼采集出的耳石会或多或少带上部分组织和粘 液， 很快干燥后耳石会呈现出一团毛绒状态， 为后 续检测带来极大干扰， 对腐鱼采集出的耳石甚至 会带有大量污垢， 而且难以去除的问题。方法 ： 将 鱼预处理， 并将头部截下， 在解剖镜下， 将耳石取 出， 剔除周围组织和淋巴液， 滴加盐酸胍溶液， 并 用蒸馏水清洗， 使用透明指甲油或环氧树脂将耳 石封存并固定， 得到洁净的久置鱼耳石 ； 制备方 法 ： 将鱼预处理， 然后将耳石取出， 置于盐酸胍溶 液中浸泡， 然后置于蒸馏水中浸泡保存， 得到洁净 的久置鱼耳石。本发明用于获取洁净的久置鱼耳 石的方法。 (51)Int.Cl.。

3、 权利要求书 2 页 说明书 8 页 附图 6 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书2页 说明书8页 附图6页 (10)申请公布号 CN 104198260 A CN 104198260 A 1/2 页 2 1. 获取洁净的久置鱼耳石的方法， 其特征在于获取洁净的久置鱼耳石的方法是按以下 步骤进行 ： 一、 将鱼预处理， 然后用解剖剪将鱼的头部截下， 得到鱼头 ； 所述的鱼为低温保存的仔幼鱼、 腐臭的仔幼鱼或干枯的仔幼鱼 ； 二、 将鱼头置于解剖镜下， 调节放大倍数至视野清晰 ； 三、 用尖细的解剖针从鱼头两腮向斜前方插入颅内， 分别向两边拉动撕开两腮和表。

4、皮， 直至露出枕骨和耳骨， 并可见两腮下的耳石 ； 四、 用解剖针按压耳石上层软骨， 挤出下方的耳石， 用另一解剖针将耳石取出， 剔除周 围组织和淋巴液 ； 五、 向耳石上滴加浓度为3mol/L7.5mol/L的盐酸胍溶液， 并浸渍于盐酸胍溶液中至 周边组织溶解， 然后用解剖针挑开余下的粘丝状物质 ； 六、 用滤纸吸除耳石上剩余盐酸胍溶液， 并用蒸馏水清洗 ； 七、 用滤纸吸除耳石上蒸馏水， 待耳石干燥后， 使用透明指甲油或环氧树脂将耳石封存 并固定， 得到洁净的久置鱼耳石。 2. 根据权利要求 1 所述的获取洁净的久置鱼耳石的方法， 其特征在于当步骤一中所述 的鱼为低温保存的仔幼鱼时， 具体。

5、操作如下 ： 将低温保存的仔幼鱼取出， 常温解冻， 得到解 冻仔幼鱼， 然后用解剖剪将解冻仔幼鱼的头部截下， 得到鱼头。 3. 根据权利要求 1 所述的获取洁净的久置鱼耳石的方法， 其特征在于当步骤一中所述 的鱼为腐臭的仔幼鱼时， 具体操作如下 ： 用解剖剪将腐臭的仔幼鱼的头部截下， 得到鱼头。 4. 根据权利要求 1 所述的获取洁净的久置鱼耳石的方法， 其特征在于当步骤一中所述 的鱼为干枯的仔幼鱼时， 具体操作如下 ： 将干枯的仔幼鱼浸泡在3mol/L7.5mol/L盐酸胍 溶液中， 浸泡 10min 20min， 得到浸泡后仔幼鱼， 然后用解剖剪将浸泡后仔幼鱼的头部截 下， 得到鱼头。 5。

6、. 根据权利要求 1 所述的获取洁净的久置鱼耳石的方法， 其特征在于步骤五中向耳石 上滴加浓度为 6mol/L 的盐酸胍溶液， 并浸渍于盐酸胍溶液中至周边组织溶解， 然后用解剖 针挑开余下的粘丝状物质。 6. 获取洁净的久置鱼耳石的方法， 其特征在于获取洁净的久置鱼耳石的方法是按以下 步骤进行 ： 一、 将鱼预处理， 然后使鱼呈直立状且头部向上 ； 所述的鱼为低温保存的中型鱼、 低温保存的小型鱼、 腐臭的中型鱼、 腐臭的小型鱼、 干 枯的中型鱼或干枯的小型鱼 ； 二、 用解剖剪自吻端延鱼体中轴线将颅骨整体剪开至脊椎骨， 头颅分为两边， 直至可见 两边听囊内的耳石 ； 三、 用小镊子将耳石夹出，。

7、 置于装有浓度为3mol/L7.5mol/L的盐酸胍溶液的离心管 中， 浸泡 1min 2min， 然后取出耳石， 并置于装有蒸馏水的离心管中浸泡保存， 得到洁净的 久置鱼耳石。 7. 根据权利要求 6 所述的获取洁净的久置鱼耳石的方法， 其特征在于当步骤一中所述 的鱼为低温保存的中型鱼或低温保存的小型鱼时， 具体操作如下 ： 将低温保存的中型鱼或 低温保存的小型鱼取出， 常温解冻， 得到解冻中型鱼或解冻小型鱼， 然后使解冻中型鱼或解 权 利 要 求 书 CN 104198260 A 2 2/2 页 3 冻小型鱼呈直立状且头部向上。 8. 根据权利要求 6 所述的获取洁净的久置鱼耳石的方法， 。

8、其特征在于当步骤一中所述 的鱼为腐臭的中型鱼或腐臭的小型鱼时， 具体操作如下 ： 使腐臭的中型鱼或腐臭的小型鱼 呈直立状且头部向上。 9. 根据权利要求 6 所述的获取洁净的久置鱼耳石的方法， 其特征在于当步骤一中所述 的鱼为干枯的中型鱼或干枯的小型鱼时， 具体操作如下 ： 将干枯的中型鱼或干枯的小型鱼 浸泡在 3mol/L 7.5mol/L 盐酸胍溶液中， 浸泡 10min 20min， 得到浸泡后中型鱼或浸泡 后小型鱼， 然后使浸泡后中型鱼或浸泡后小型鱼呈直立状且头部向上。 10. 根据权利要求 6 所述的获取洁净的久置鱼耳石的方法， 其特征在于步骤三中用小 镊子将耳石轻轻夹出， 置于装有。

9、浓度为 6mol/L 的盐酸胍溶液的离心管中。 权 利 要 求 书 CN 104198260 A 3 1/8 页 4 获取洁净的久置鱼耳石的方法 技术领域 0001 本发明涉及获取鱼耳石的方法。 背景技术 0002 鱼类耳石存在于鱼体内耳膜迷路中， 共有三对， 主要由碳酸盐类矿物质和少量 有机质和微量元素构成， 生理学上起着听觉和平衡的作用。耳石很早就得到了鱼类研究 者的关注， 最早是作为年龄鉴定的有效途径， 比鳞片上的年轮更加准确易读。自 1971 年 Pannella 首次发现日轮以来， 利用日轮进行的各种相关研究已有大量报道， 耳石一度成为 研究的热点。 0003 耳石作为生命矿物， 兼。

10、具生命体和矿物质的优良特性。它不仅记录着鱼类生长及 生活史中的相关信息， 而且还标示着其生活水环境的现状和变迁， 耳石一旦形成便呈现出 生物惰性， 通过其上的微结构和微化学形式将这些数据永久保存下来。将耳石中微量元素 的特性与日轮结合起来研究， 可以有效解决很多鱼类生态学问题。 目前， 以耳石为媒介进行 信息分析的应用涵盖了鱼类生态学研究的诸多方面， 如鱼类的孵化和早期发育生长、 产卵 场和产卵期判定、 年龄鉴定与种群鉴定、 个体迁移等。且随着相关理论和技术的发展， 成为 一种揭示鱼类生活史以及水体环境域变的关键技术。 0004 因此， 耳石的摘取特别是获得洁净易读的样本在分析中显得尤其重要。。

11、而对耳石 的采集却并未形成系统和特定的模式， 多为研究者在实践中自己总结的一套方法， 如对成 鱼的直接剖颅结合位置寻找方法和对仔稚鱼的压片法等。 对于活体或鲜鱼的解剖这些方式 固然有效 ： 将挖出的耳石周围的胶状生物膜剥离， 并置于 95乙醇和蒸馏水中浸泡数日， 取出晾干(或烘干)即可。 然而， 实际工作中不可能在短期内就能将采集的全部活鱼的耳石 及时取出， 野外工作尤其如此， 不得不将样本低温保存并逐量处理。而对于久存的样品， 耳 石采集中会存在一系列的问题， 如耳石所在的周围组织和腔液由透明变成乳白色而影响解 剖视线， 周边组织也会因为变性而粘连在耳石上难以剥离， 大量油状物分散也会极大阻。

12、碍 解剖。取出的耳石通常都会或多或少带上部分组织和粘液， 很快干燥后耳石会呈现出一团 毛绒状态， 为后续检测带来极大干扰。对腐鱼则更甚， 其采集出的耳石都会带有大量污垢， 且这些耳石都极脆， 为去污带来极大困难。通常方法是将耳石放入 70 95乙醇和蒸馏 水中浸泡， 试图将这些杂质溶解， 但实际上这种方法会加重耳石周边污垢的不透明化， 很难 达到除污目的， 效率极低。 发明内容 0005 本发明是要解决现有技术对于久存鱼采集出的耳石会或多或少带上部分组织和 粘液， 很快干燥后耳石会呈现出一团毛绒状态， 为后续检测带来极大干扰， 对腐鱼采集出的 耳石甚至会带有大量污垢， 而且难以去除的问题， 而。

13、提供获取洁净的久置鱼耳石的方法。 0006 本发明获取洁净的久置鱼耳石的方法是按以下步骤进行 ： 0007 一、 将鱼预处理， 然后用解剖剪将鱼的头部截下， 得到鱼头 ； 说 明 书 CN 104198260 A 4 2/8 页 5 0008 所述的鱼为低温保存的仔幼鱼、 腐臭的仔幼鱼或干枯的仔幼鱼 ； 0009 二、 将鱼头置于解剖镜下， 调节放大倍数至视野清晰 ； 0010 三、 用尖细的解剖针从鱼头两腮向斜前方插入颅内， 分别向两边拉动撕开两腮和 表皮， 直至露出枕骨和耳骨， 并可见两腮下的耳石 ； 0011 四、 用解剖针按压耳石上层软骨， 挤出下方的耳石， 用另一解剖针将耳石取出， 。

14、剔 除周围组织和淋巴液 ； 0012 五、 向耳石上滴加浓度为3mol/L7.5mol/L的盐酸胍溶液， 并浸渍于盐酸胍溶液 中至周边组织溶解， 然后用解剖针挑开余下的粘丝状物质 ； 0013 六、 用滤纸吸除耳石上剩余盐酸胍溶液， 并用蒸馏水清洗 ； 0014 七、 用滤纸吸除耳石上蒸馏水， 待耳石干燥后， 使用透明指甲油或环氧树脂将耳石 封存并固定， 得到洁净的久置鱼耳石。 0015 本发明获取洁净的久置鱼耳石的方法是按以下步骤进行 ： 0016 一、 将鱼预处理， 然后使鱼呈直立状且头部向上 ； 0017 所述的鱼为低温保存的中型鱼、 低温保存的小型鱼、 腐臭的中型鱼、 腐臭的小型 鱼、。

15、 干枯的中型鱼或干枯的小型鱼 ； 0018 二、 用解剖剪自吻端延鱼体中轴线将颅骨整体剪开至脊椎骨， 头颅分为两边， 直至 可见两边听囊内的耳石 ； 0019 三、 用小镊子将耳石夹出， 置于装有浓度为3mol/L7.5mol/L的盐酸胍溶液的离 心管中， 浸泡 1min 2min， 然后取出耳石， 并置于装有蒸馏水的离心管中浸泡保存， 得到洁 净的久置鱼耳石。 0020 本发明的有益效果是 ： 使用盐酸胍溶液能迅速溶解耳石周围组织和腔液中的蛋白 质， 使组织变得透明松散易去除， 而且能起到一定的透明作用， 可避免毒性极大的透明剂二 甲苯在耳石采集中的使用， 并且还对解剖过程也起到了极大的辅助。

16、作用， 特别适用于耳石 未除垢便干枯的情况， 对腐鱼的解剖效果尤其明显。将盐酸胍引入耳石的采集过程为获取 优质的耳石样本提供了极大便利， 对耳石的后续分析意义重大。并且本发明的解剖方法也 能方便快速地达到获取耳石的目的， 极大的提高了工作效率。 附图说明 0021 图 1 为实施例一低温保存的大麻哈鱼仔鱼步骤五所得耳石的照片 ； 0022 图 2 为实施例一低温保存的大麻哈鱼仔鱼步骤七所得洁净的久置鱼耳石的照片 ； 0023 图 3 为实施例二低温保存的大麻哈鱼仔鱼步骤五所得耳石的照片 ； 0024 图 4 为实施例二低温保存的大麻哈鱼仔鱼步骤六所得鱼耳石的照片 ； 0025 图 5 为实施例。

17、三腐臭的大麻哈鱼仔鱼所得洁净的久置鱼耳石的照片 ； 0026 图 6 为实施例四腐臭的大麻哈鱼仔鱼步骤六所得鱼耳石的照片 ； 0027 图 7 为实施例五腐臭的大麻哈鱼仔鱼步骤六所得鱼耳石的照片 ； 0028 图 8 为实施例六干枯的大麻哈鱼仔鱼所得洁净的久置鱼耳石的照片 ； 0029 图 9 为实施例七干枯的大麻哈鱼仔鱼步骤六所得鱼耳石的照片 ； 0030 图 10 为实施例八低温保存的瓦氏雅罗鱼成鱼所得洁净的久置鱼耳石的照片 ； 0031 图 11 为实施例九低温保存的瓦氏雅罗鱼成鱼步骤三所得鱼耳石的照片。 说 明 书 CN 104198260 A 5 3/8 页 6 具体实施方式 003。

18、2 具体实施方式一 ： 本实施方式获取洁净的久置鱼耳石的方法是按以下步骤进行 ： 0033 一、 将鱼预处理， 然后用解剖剪将鱼的头部截下， 得到鱼头 ； 0034 所述的鱼为低温保存的仔幼鱼、 腐臭的仔幼鱼或干枯的仔幼鱼 ； 0035 二、 将鱼头置于解剖镜下， 调节放大倍数至视野清晰 ； 0036 三、 用尖细的解剖针从鱼头两腮向斜前方插入颅内， 分别向两边拉动撕开两腮和 表皮， 直至露出枕骨和耳骨， 并可见两腮下的耳石 ； 0037 四、 用解剖针按压耳石上层软骨， 挤出下方的耳石， 用另一解剖针将耳石取出， 剔 除周围组织和淋巴液 ； 0038 五、 向耳石上滴加浓度为3mol/L7.。

19、5mol/L的盐酸胍溶液， 并浸渍于盐酸胍溶液 中至周边组织溶解， 然后用解剖针挑开余下的粘丝状物质 ； 0039 六、 用滤纸吸除耳石上剩余盐酸胍溶液， 并用蒸馏水清洗 ； 0040 七、 用滤纸吸除耳石上蒸馏水， 待耳石干燥后， 使用透明指甲油或环氧树脂将耳石 封存并固定， 得到洁净的久置鱼耳石。 0041 本实施方式步骤五中向耳石上滴加浓度为 3mol/L 7.5mol/L 的盐酸胍溶液， 周 边组织即刻变透明和松软 ； 0042 本实施方式步骤七中使用透明指甲油为化妆品中使用的普通透明指甲油， 或使用 环氧树脂将耳石封存并固定能使耳石充分透明化。 0043 本实施方式步骤一所述的鱼为低。

20、温保存的仔幼鱼是在 0 4下保存的仔幼 鱼 ； 0044 本实施方式步骤一所述的鱼为腐臭的仔幼鱼为鱼体已腐烂， 耳石被腐肉包埋 ； 0045 本实施方式步骤一所述的鱼为干枯的仔幼鱼为鱼体已脱水且已变形， 耳石不易摘 取。 0046 本实施方式的有益效果是 ： 使用盐酸胍溶液能迅速溶解耳石周围组织和腔液中的 蛋白质， 使组织变得透明松散易去除， 而且能起到一定的透明作用， 可避免毒性极大的透明 剂二甲苯在耳石采集中的使用， 并且还对解剖过程也起到了极大的辅助作用， 特别适用于 耳石未除垢便干枯的情况， 对腐鱼的解剖效果尤其明显。将盐酸胍引入耳石的采集过程为 获取优质的耳石样本提供了极大便利， 对。

21、耳石的后续分析意义重大。并且实施方式的解剖 方法也能方便快速地达到获取耳石的目的， 极大的提高了工作效率。 0047 具体实施方式二 ： 本实施方式与具体实施方式一不同的是 ： 当步骤一中所述的鱼 为低温保存的仔幼鱼时， 具体操作如下 ： 将低温保存的仔幼鱼取出， 常温解冻， 得到解冻仔 幼鱼， 然后用解剖剪将解冻仔幼鱼的头部截下， 得到鱼头。其他与具体实施方式一相同。 0048 具体实施方式三 ： 本实施方式与具体实施方式一或二之一不同的是 ： 当步骤一中 所述的鱼为腐臭的仔幼鱼时， 具体操作如下 ： 用解剖剪将腐臭的仔幼鱼的头部截下， 得到鱼 头。其他与具体实施方式一或二相同。 0049 。

22、具体实施方式四 ： 本实施方式与具体实施方式一至三之一不同的是 ： 当步骤一中 所述的鱼为干枯的仔幼鱼时， 具体操作如下 ： 将干枯的仔幼鱼浸泡在3mol/L7.5mol/L盐 酸胍溶液中， 浸泡 10min 20min， 得到浸泡后仔幼鱼， 然后用解剖剪将浸泡后仔幼鱼的头 说 明 书 CN 104198260 A 6 4/8 页 7 部截下， 得到鱼头。其他与具体实施方式一至三相同。 0050 具体实施方式五 ： 本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是 ： 步骤五中向 耳石上滴加浓度为 6mol/L 的盐酸胍溶液， 并浸渍于盐酸胍溶液中至周边组织溶解， 然后用 解剖针挑开余下的粘丝状物质。

23、。其他与具体实施方式一至四相同。 0051 具体实施方式六 ： 本实施方式获取洁净的久置鱼耳石的方法是按以下步骤进行 ： 0052 一、 将鱼预处理， 然后使鱼呈直立状且头部向上 ； 0053 所述的鱼为低温保存的中型鱼、 低温保存的小型鱼、 腐臭的中型鱼、 腐臭的小型 鱼、 干枯的中型鱼或干枯的小型鱼 ； 0054 二、 用解剖剪自吻端延鱼体中轴线将颅骨整体剪开至脊椎骨， 头颅分为两边， 直至 可见两边听囊内的耳石 ； 0055 三、 用小镊子将耳石夹出， 置于装有浓度为3mol/L7.5mol/L的盐酸胍溶液的离 心管中， 浸泡 1min 2min， 然后取出耳石， 并置于装有蒸馏水的离心。

24、管中浸泡保存， 得到洁 净的久置鱼耳石。 0056 本实施方式所述的鱼为低温保存的中型鱼、 腐臭的中型鱼或干枯的中型鱼为长度 为 5cm 15cm。 0057 本实施方式所述的鱼为腐臭的小型鱼、 低温保存的小型鱼或干枯的小型鱼为长度 为 0.8cm 5cm ； 0058 本实施方式步骤一所述的鱼为低温保存的中型鱼或低温保存的小型鱼是在 0 4下保存的中型鱼或小型鱼 ； 0059 本实施方式步骤一所述的鱼为腐臭的中型鱼或腐臭的小型鱼为鱼体已腐烂呈肉 糜状或者已经无完整鱼形的中型鱼或小型鱼 ； 0060 本实施方式步骤一所述的鱼为干枯的中型鱼或干枯的小型鱼为鱼体脱水发硬， 干 瘪状的中型鱼或小型鱼。

25、 ； 0061 本实施方式步骤三中向耳石上滴加浓度为 3mol/L 7.5mol/L 的盐酸胍溶液， 周 边组织即刻变透明和松软 ； 0062 本实施方式的有益效果是 ： 使用盐酸胍溶液能迅速溶解耳石周围组织和腔液中的 蛋白质， 使组织变得透明松散易去除， 而且能起到一定的透明作用， 可避免毒性极大的透明 剂二甲苯在耳石采集中的使用， 并且还对解剖过程也起到了极大的辅助作用， 特别适用于 耳石未除垢便干枯的情况， 对腐鱼的解剖效果尤其明显。将盐酸胍引入耳石的采集过程为 获取优质的耳石样本提供了极大便利， 对耳石的后续分析意义重大。并且实施方式的解剖 方法也能方便快速地达到获取耳石的目的， 极大。

26、的提高了工作效率。 0063 具体实施方式七 ： 本实施方式与具体实施方式六不同的是 ： 当步骤一中所述的鱼 为低温保存的仔幼鱼时， 具体操作如下 ： 将低温保存的仔幼鱼取出， 常温解冻， 得到解冻仔 幼鱼， 然后用解剖剪将解冻仔幼鱼的头部截下， 得到鱼头。其他与具体实施方式六相同。 0064 具体实施方式八 ： 本实施方式与具体实施方式六或七之一不同的是 ： 当步骤一中 所述的鱼为腐臭的仔幼鱼时， 具体操作如下 ： 用解剖剪将腐臭的仔幼鱼的头部截下， 得到鱼 头。其他与具体实施方式六或七相同。 0065 具体实施方式九 ： 本实施方式与具体实施方式六至八之一不同的是 ： 当步骤一中 所述的鱼。

27、为干枯的仔幼鱼时， 具体操作如下 ： 将干枯的仔幼鱼浸泡在3mol/L7.5mol/L盐 说 明 书 CN 104198260 A 7 5/8 页 8 酸胍溶液中， 浸泡 10min 20min， 得到浸泡后仔幼鱼， 然后用解剖剪将浸泡后仔幼鱼的头 部截下， 得到鱼头。其他与具体实施方式六至八相同。 0066 具体实施方式十 ： 本实施方式与具体实施方式六至九之一不同的是 ： 步骤三中用 小镊子将耳石轻轻夹出， 置于装有浓度为 6mol/L 的盐酸胍溶液的离心管中。其他与具体实 施方式六至九相同。 0067 通过以下实施例验证有益效果 ： 0068 实施例一 ： 获取洁净的久置鱼耳石的方法是按。

28、以下步骤进行 ： 0069 一、 将低温保存的鱼取出， 常温解冻， 用解剖剪将鱼的头部截下， 得到鱼头 ； 0070 二、 将鱼头置于解剖镜下， 调节放大倍数至视野清晰 ； 0071 三、 用尖细的解剖针从鱼头两腮向斜前方插入颅内， 分别向两边拉动撕开两腮和 表皮， 直至露出枕骨和耳骨， 并可见两腮下的耳石 ； 0072 四、 用解剖针按压耳石上层软骨， 挤出下方的耳石， 用另一解剖针将耳石取出， 剔 除周围组织和淋巴液 ； 0073 五、 向耳石上滴加浓度为 6mol/L 的盐酸胍溶液， 并浸渍于盐酸胍溶液中至周边组 织溶解， 然后用解剖针挑开余下的粘丝状物质 ； 0074 六、 用滤纸吸除。

29、耳石上剩余盐酸胍溶液， 并用蒸馏水清洗 ； 0075 七、 用滤纸吸除耳石上蒸馏水， 待耳石干燥后， 使用透明指甲油将耳石封存并固 定， 得到洁净的久置鱼耳石。 0076 步骤一中所述的鱼为在温度为 -20下保存两个月以上的大麻哈鱼仔鱼 ； 0077 步骤五中向耳石上滴加浓度为 6mol/L 的盐酸胍溶液后， 周围组织迅速透明化 ； 0078 图 1 为本实施例低温保存的大麻哈鱼仔鱼步骤五所得耳石的照片， 由图可知， 耳 石清洁无有机质粘连， 形态完整易分析。 0079 图 2 为本实施例低温保存的大麻哈鱼仔鱼步骤七所得洁净的久置鱼耳石的照片， 由图可知， 耳石洁净透明， 其内部轮纹结构清晰易。

30、读， 无干扰因素。 0080 实施例二 ： 实施例一的对比试验是按以下步骤进行 ： 0081 一、 将低温保存的鱼取出， 常温解冻， 用解剖剪将鱼的头部截下， 得到鱼头 ； 0082 二、 将鱼头置于解剖镜下， 调节放大倍数至视野清晰 ； 0083 三、 用尖细的解剖针从鱼头两腮向斜前方插入颅内， 分别向两边拉动撕开两腮和 表皮， 直至露出枕骨和耳骨， 并可见两腮下的耳石 ； 0084 四、 用解剖针按压耳石上层软骨， 挤出下方的耳石， 用另一解剖针将耳石取出， 剔 除周围组织和淋巴液 ； 0085 五、 向耳石上滴加蒸馏水清洗， 然后用解剖针挑开余下的粘丝状物质 ； 0086 六、 用滤纸吸。

31、除耳石上蒸馏水， 待耳石干燥后， 使用透明指甲油将耳石封存并固 定， 得到耳石。 0087 步骤一中所述的鱼为在温度为 -20下保存两个月以上的大麻哈鱼仔鱼 ； 0088 图 3 为本实施例低温保存的大麻哈鱼仔鱼步骤五所得耳石的照片， 由图可知， 耳 石周围有大量有机物粘连， 整体发黑， 甚至难以观察其形态。 0089 图 4 为本实施例低温保存的大麻哈鱼仔鱼步骤六所得鱼耳石的照片， 由图可知， 周边组织难以剥离干净， 耳石连同组织稍透明， 但杂质任很明显。 说 明 书 CN 104198260 A 8 6/8 页 9 0090 实施例三 ： 获取洁净的久置鱼耳石的方法是按以下步骤进行 ： 0。

32、091 一、 用解剖剪将鱼的头部截下， 得到鱼头 ； 0092 二、 将鱼头置于解剖镜下， 调节放大倍数至视野清晰 ； 0093 三、 用尖细的解剖针从鱼头两腮向斜前方插入颅内， 分别向两边拉动撕开两腮和 表皮， 直至露出枕骨和耳骨， 并可见两腮下的耳石 ； 0094 四、 用解剖针按压耳石上层软骨， 挤出下方的耳石， 用另一解剖针将耳石取出， 剔 除周围组织和淋巴液 ； 0095 五、 向耳石上滴加浓度为 6mol/L 的盐酸胍溶液， 并浸渍于盐酸胍溶液中至周边组 织溶解， 然后用解剖针挑开余下的粘丝状物质 ； 0096 六、 用滤纸吸除耳石上剩余盐酸胍溶液， 并用蒸馏水清洗 ； 0097 。

33、七、 用滤纸吸除耳石上蒸馏水， 待耳石干燥后， 使用透明指甲油将耳石封存并固 定， 得到洁净的久置鱼耳石。 0098 步骤一中所述的鱼为离心管内常温放置一周以上腐臭的大麻哈鱼仔鱼 ； 0099 步骤五中向耳石上滴加浓度为 6mol/L 的盐酸胍溶液后， 周围组织迅速透明化 ； 0100 图 5 为本实施例腐臭的大麻哈鱼仔鱼所得洁净的久置鱼耳石的照片， 由图可知， 耳石清洁透亮， 无杂质粘连， 表明光滑易分析。 0101 实施例四 ： 实施例三的对比试验是按以下步骤进行 ： 0102 一、 用解剖剪将鱼的头部截下， 得到鱼头 ； 0103 二、 将鱼头置于解剖镜下， 调节放大倍数至视野清晰 ； 。

34、0104 三、 用尖细的解剖针从鱼头两腮向斜前方插入颅内， 分别向两边拉动撕开两腮和 表皮， 直至露出枕骨和耳骨， 并可见两腮下的耳石 ； 0105 四、 用解剖针按压耳石上层软骨， 挤出下方的耳石， 用另一解剖针将耳石取出， 剔 除周围组织和淋巴液 ； 0106 五、 向耳石上滴加质量分数为 95乙醇清洗， 然后用解剖针挑开余下的粘丝状物 质 ； 0107 六、 用滤纸吸除耳石上质量分数为 95乙醇， 待耳石干燥后， 使用透明指甲油将耳 石封存并固定， 得到鱼耳石。 0108 步骤一中所述的鱼为离心管内常温放置一周以上腐臭的大麻哈鱼仔鱼 ； 0109 常温放置一周以上腐臭的大麻哈鱼仔鱼耳石周。

35、围蛋白和脂质大量变性呈乳白色 絮状， 取出的耳石带有大量的杂质， 粘附在耳石上， 并且这种耳石非常易碎， 通常的除杂方 法会有极大的概率破坏耳石完整性。 0110 图 6 为本实施例腐臭的大麻哈鱼仔鱼步骤六所得鱼耳石的照片， 由图可知， 乙醇 将耳石周围变性组织部分透明， 但任有很多杂质， 耳石表面形态难以观察。 0111 实施例五 ： 实施例三的对比试验是按以下步骤进行 ： 0112 一、 用解剖剪将鱼的头部截下， 得到鱼头 ； 0113 二、 将鱼头置于解剖镜下， 调节放大倍数至视野清晰 ； 0114 三、 用尖细的解剖针从鱼头两腮向斜前方插入颅内， 分别向两边拉动撕开两腮和 表皮， 直至。

36、露出枕骨和耳骨， 并可见两腮下的耳石 ； 0115 四、 用解剖针按压耳石上层软骨， 挤出下方的耳石， 用另一解剖针将耳石取出， 剔 说 明 书 CN 104198260 A 9 7/8 页 10 除周围组织和淋巴液 ； 0116 五、 向耳石上滴加蒸馏水清洗， 然后用解剖针挑开余下的粘丝状物质 ； 0117 六、 用滤纸吸除耳石上蒸馏水， 待耳石干燥后， 使用透明指甲油将耳石封存并固 定， 得到鱼耳石。 0118 步骤一中所述的鱼为离心管内常温放置一周以上腐臭的大麻哈鱼仔鱼 ； 0119 常温放置一周以上腐臭的大麻哈鱼仔鱼耳石周围蛋白和脂质大量变性呈乳白色 絮状， 取出的耳石带有大量的杂质，。

37、 粘附在耳石上， 并且这种耳石非常易碎， 通常的除杂方 法会有极大的概率破坏耳石完整性。 0120 图 7 为本实施例腐臭的大麻哈鱼仔鱼步骤六所得鱼耳石的照片， 由图可知， 耳石 周围大量组织包裹， 呈絮状， 极难剥离， 严重影响后续分析。 0121 实施例六 ： 获取洁净的久置鱼耳石的方法是按以下步骤进行 ： 0122 一、 将鱼浸泡在 6mol/L 盐酸胍溶液中， 浸泡 15 min， 然后用解剖剪将鱼的头部截 下， 得到鱼头 ； 0123 二、 将鱼头置于解剖镜下， 调节放大倍数至视野清晰 ； 0124 三、 用尖细的解剖针从鱼头两腮向斜前方插入颅内， 分别向两边拉动撕开两腮和 表皮， 。

38、直至露出枕骨和耳骨， 并可见两腮下的耳石 ； 0125 四、 用解剖针按压耳石上层软骨， 挤出下方的耳石， 用另一解剖针将耳石取出， 剔 除周围组织和淋巴液 ； 0126 五、 向耳石上滴加浓度为 6mol/L 的盐酸胍溶液， 并浸渍于盐酸胍溶液中至周边组 织溶解， 然后用解剖针挑开余下的粘丝状物质 ； 0127 六、 用滤纸吸除耳石上剩余盐酸胍溶液， 并用蒸馏水清洗 ； 0128 七、 用滤纸吸除耳石上蒸馏水， 待耳石干燥后， 使用透明指甲油将耳石封存并固 定， 得到洁净的久置鱼耳石。 0129 步骤一中所述的鱼为常温放置干枯的大麻哈鱼幼鱼 ； 0130 步骤五中向耳石上滴加浓度为 6mol。

39、/L 的盐酸胍溶液后， 周围组织迅速透明化 ； 0131 图 8 为本实施例干枯的大麻哈鱼仔鱼所得洁净的久置鱼耳石的照片， 由图可知， 所获取耳石洁净透亮， 轮廓分明， 便于后续分析。 0132 实施例七 ： 实施例六的对比试验是按以下步骤进行 ： 0133 一、 将鱼浸泡在蒸馏水中， 浸泡 15 min， 然后用解剖剪将鱼的头部截下， 得到鱼 头 ； 0134 二、 将鱼头置于解剖镜下， 调节放大倍数至视野清晰 ； 0135 三、 用尖细的解剖针从鱼头两腮向斜前方插入颅内， 分别向两边拉动撕开两腮和 表皮， 直至露出枕骨和耳骨， 并可见两腮下的耳石 ； 0136 四、 用解剖针按压耳石上层软。

40、骨， 挤出下方的耳石， 用另一解剖针将耳石取出， 剔 除周围组织和淋巴液 ； 0137 五、 向耳石上先滴加质量分数为 95乙醇清洗， 然后滴加蒸馏水清洗， 再用解剖针 挑开余下的粘丝状物质 ； 0138 六、 用滤纸吸除耳石上质量分数为 95乙醇和蒸馏水， 待耳石干燥后， 使用透明指 甲油将耳石封存并固定， 得到鱼耳石。 说 明 书 CN 104198260 A 10 8/8 页 11 0139 步骤一中所述的鱼为常温放置干枯的大麻哈鱼幼鱼 ； 0140 图 9 为本实施例常温放置干枯的大麻哈鱼幼鱼步骤六所得鱼耳石的照片， 由图可 知， 耳石表面任有部分变性组织， 难以清除干净， 透明后任然。

41、较暗， 难于观察内部结构。 0141 实施例八 ： 获取洁净的久置鱼耳石的方法是按以下步骤进行 ： 0142 一、 将低温保存的鱼取出， 常温解冻， 然后使鱼呈直立状且头部向上 ； 0143 二、 用解剖剪自吻端延鱼体中轴线将颅骨整体剪开至脊椎骨， 头颅分为两边， 直至 可见两边听囊内的耳石 ； 0144 三、 用小镊子将耳石夹出， 置于装有浓度为 6mol/L 的盐酸胍溶液的离心管中， 浸 泡 24 h， 然后取出耳石， 并置于装有蒸馏水的离心管中清洗， 得到洁净的久置鱼耳石。 0145 步骤一中所述的鱼为低温保存的瓦氏雅罗鱼成鱼 ； 0146 图 10 为本实施例低温保存的瓦氏雅罗鱼成鱼所。

42、得洁净的久置鱼耳石的照片， 由 图可知， 获取耳石洁净透明， 形态结构完整， 非常容易进行后续分析。 0147 实施例九 ： 实施例八的对比试验是按以下步骤进行 ： 0148 一、 将低温保存的鱼取出， 常温解冻， 然后使鱼呈直立状且头部向上 ； 0149 二、 用解剖剪自吻端延鱼体中轴线将颅骨整体剪开至脊椎骨， 头颅分为两边， 直至 可见两边听囊内的耳石 ； 0150 三、 用小镊子将耳石轻轻夹出， 剔除周围组织， 置于装有蒸馏水的离心管中浸泡 2 天， 得到鱼耳石。 0151 步骤一中所述的鱼为低温保存的瓦氏雅罗鱼成鱼 ； 0152 图 11 为本实施例低温保存的瓦氏雅罗鱼成鱼步骤三所得鱼。

43、耳石的照片， 由图可 知， 所得耳石较干净， 表面任有部分变性杂质粘结， 发黑， 耳石不透亮。 说 明 书 CN 104198260 A 11 1/6 页 12 图 1 图 2 说 明 书 附 图 CN 104198260 A 12 2/6 页 13 图 3 图 4 说 明 书 附 图 CN 104198260 A 13 3/6 页 14 图 5 图 6 说 明 书 附 图 CN 104198260 A 14 4/6 页 15 图 7 图 8 说 明 书 附 图 CN 104198260 A 15 5/6 页 16 图 9 图 10 说 明 书 附 图 CN 104198260 A 16 6/6 页 17 图 11 说 明 书 附 图 CN 104198260 A 17 。