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针对前蛋白转化酶枯草溶菌素/KEXIN9抑制的灵敏的功效性和特异性生物标志.pdf

  • 上传人：xia****o6
  • 文档编号：4591885
  • 上传时间：2018-10-21
  • 格式：PDF
  • 页数：74
  • 大小：17.06MB
    • 摘要
    申请专利号：

    CN201380027083.7

    		 申请日：

    2013.05.24
    公开号：

    CN104508488A

    		 公开日：

    2015.04.08
    当前法律状态：

    实审

    		 有效性：

    审中
    法律详情：

    实质审查的生效IPC(主分类):G01N 33/92申请日:20130524|||公开
    IPC分类号：

    G01N33/92

    		 主分类号：

    G01N33/92
    申请人：

    佐拉生物科学公司
    发明人：

    R·拉克松恩
    地址：

    芬兰埃斯波
    优先权：

    12169517.5 2012.05.25 EP; 61/651,569 2012.05.25 US
    专利代理机构：

    北京三友知识产权代理有限公司11127

    		 代理人：

    庞东成; 张培源
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    内容摘要

    本发明特别提供一种方法及其应用，所述方法通过检测生物样品中的脂质浓度和/或脂质-脂质浓度比并将其与对照相比较来测量前蛋白转化酶枯草溶菌素/Kexin 9(PCSK9)的抑制剂治疗的药物功效和特异性。本发明特别适用于确定PCSK9抑制药是否高效地发挥降低血清低密度脂蛋白(LDL)浓度的作用以及PCSK9抑制药是否显示出任何不良副作用，例如肝脏毒性。此处提供的脂质标志在检测药物功效和可能的药物引发的不良副作用方面比目前采用的临床标志具有更高的特异性和灵敏度。还提供了针对所述脂质的抗体，以及该抗体在预测和诊断由PCSK9抑制药引发的不良反应中的应用。本发明还涉及用于确定PCSK9抑制药的功效及药物引发的不良反应的包含脂质和/或其抗体的试剂盒。

    权利要求书

    1.  一种确定受试对象中的降脂药治疗的功效的方法，所述方法包括：
    (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照相比时下降或升高的浓度表明所述治疗的功效高，
    其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自：
    Glc/GalCer(dl8:l/16:0)，LacCer(dl8:l/16:0)，Cer(dl8:l/16:0)、CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer和总LacCer；
    且其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自：
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA和总SPH；
    或
    (b)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述样品中与对照相比时下降或升高的脂质-脂质浓度比表明所述治疗的功效高，
    其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自：
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6， Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)和PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1；
    且其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自：
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)。

    2.      一种预测受试对象中的降脂药治疗的功效的方法，所述方法包括：
    (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照相比时升高或下降的浓度表明所述治疗将具有功效，
    其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自：
    Glc/GalCer(dl8:l/16:0)，LacCer(dl8:l/16:0)，Cer(dl8:l/16:0)、CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer和总LacCer；
    且其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自：
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3， TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA和总SPH；
    或
    (b)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述样品中与对照相比时升高或下降的脂质-脂质浓度比表明所述治疗将具有功效，
    其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自：
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)和PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1；
    且其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自：
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)。

    3.      一种确定受试对象对降脂药治疗的顺应性的方法，所述方法包括：
    (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照相比时下降或升高的浓度表明良好的治疗顺应性，
    其中，与对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自：
    Glc/GalCer(dl8:l/16:0)，LacCer(dl8:l/16:0)，Cer(dl8:l/16:0)、CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer和总LacCer；
    且其中，与对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自：
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA和总SPH；
    或
    (b)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述样品中与对照相比时下降或升高的脂质-脂质浓度比表明良好的治疗顺应性，
    其中，与对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自：
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)和 PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1；
    且其中，与对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自：
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)。

    4.      一种鉴定可用作降脂药或用于治疗心脏血管疾病及其并发症的化合物的方法，所述方法包括：
    (a)确定来自正在接受所述化合物的治疗的所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照相比时下降或升高的浓度表明可用作降脂药，
    其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自：
    Glc/GalCer(dl8:l/16:0)，LacCer(dl8:l/16:0)，Cer(dl8:l/16:0)、CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer和总LacCer；
    且其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自：
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA和总SPH；
    或
    (b)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述 样品中与对照相比时下降或升高的脂质-脂质浓度比表明作为降脂药的可用性，
    其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自：
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)和PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1；
    且其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自：
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)。

    5.      如权利要求1～4中任一项所述的方法，其中，所述降脂药是PCSK9抑制剂/沉默因子，其中，所述PCSK9抑制剂/沉默因子可选地是：
    (a)针对PCSK9的抗体；
    (b)PCSK9的药物抑制剂；
    (c)抑制LDL受体与PCSK9的相互作用的小分子；
    (d)模仿LDL受体中与PCSK9相互作用的结构域的肽；
    (e)对PCSK9有特异性的反义寡核苷酸；或
    (f)对PCSK9有特异性的小干扰RNA(siRNA)。

    6.      一种确定PCSK9抑制剂/沉默因子的特异性的方法，其中，将来自受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度或脂质-脂质浓度比与对照进行比较，其中，所述一种或多种脂质或脂质-脂质浓度比选自：
    Glc/GalCer(dl8:l/16:0)，LacCer(dl8:l/16:0)，Cer(dl8:l/16:0)、CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer和总LacCer，
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA，总SPH，
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，PC16:0/16:0/鞘氨醇d16:1，
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE  18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)；
    其中，所述对照是：
    (a)源自具有PCSK9功能缺失性突变的一个或多个受试对象的样品或值；
    (b)源自具有PCSK9功能缺失型脂质谱的一个或多个受试对象的样品或值；或
    (c)源自用已知的特定PCSK9抑制剂/沉默因子治疗过的一个或多个受试对象的样品或值；
    并且其中，如果所述一种或多种脂质或脂质-脂质浓度比在所述样品和所述对照之间没有差异，则说明所述PCSK9抑制剂/沉默因子治疗具有特异性；如果有差异，则说明所述PCSK9抑制剂/沉默因子或化合物引起了非特异性作用，例如一种或多种不良副作用。

    7.      如权利要求6所述的方法，其中，所述PCSK9功能缺失型脂质谱是通过确定对照中的一种或多种脂质的浓度或脂质-脂质浓度比而产生的。

    8.      如权利要求1～7中任一项所述的方法，其中，进行比较时所涉及的所述受试对象是：
    (a)正在接受PCSK9抑制剂/沉默因子或其他PCSK9靶向性化合物的治疗的患者；
    (b)正在接受PCSK9抑制剂/沉默因子或其他PCSK9靶向性化合物的治疗的试验动物；
    (c)正在接受除PCSK9抑制剂/沉默因子以外的降脂药治疗的患者或试验动物；或
    (d)未曾接受且目前未在接受PCSK9抑制剂/沉默因子、其他PCSK9靶向性化合物、或除PCSK9抑制剂/沉默因子以外的降脂药的治疗的患者或试验动物。

    9.      如权利要求1～5中任一项或权利要求8所述的方法，其中，进行比较时所使用的所述对照是在接受相应的降脂药治疗或PCSK9抑制剂/沉默因子治疗之前或在所述治疗中断的过程中取自同一受试对象的对照样品。

    10.      如权利要求1～8中任一项所述的方法，其中，进行比较时所使用的所述对 照是：
    (a)在之前未接受过PCSK9抑制剂/沉默因子治疗的一个或多个健康受试对象中建立的对照值；
    (b)在目前未在接受PCSK9抑制剂/沉默因子治疗的一个或多个健康受试对象中建立的对照值；
    (c)来自携带PCSK9基因任何功能缺失性突变的一个或多个受试对象的对照样品，所述PCSK9基因功能缺失性突变为例如R46L(rs11591147)；或
    (d)在正在接受PCSK9抑制剂/沉默因子治疗且没有药物引发的脱靶效应的迹象或历史的一个或多个受试对象中建立的对照值。

    11.      如权利要求1～10中任一项所述的方法，所述方法还包括确定或评估所述受试对象中或来自所述受试对象的样品中的LDL胆固醇水平；可选的是，其中，所述受试对象具有下降的LDL胆固醇水平。

    12.      如权利要求1～11中任一项所述的方法，其中，
    (a)所述样品是血液、血浆、血清或其组分(例如脂蛋白组分)或组织活检样；和/或
    (b)脂质浓度和/或脂质比用下述方法确定：质谱测定法，核磁共振谱法，荧光光谱法或双偏振干涉法，诸如HPLC或UPLC等高效分离方法，诸如ELISA等免疫测定法，和/或利用能够特异性地结合分析物的结合性部分。

    13.      用于治疗的PCSK9抑制剂/沉默因子，可选的是，其中，所述治疗是降低心脏血管疾病风险或治疗心脏血管疾病，其中，
    (a)所述PCSK9抑制剂/沉默因子使受试对象或其样品中的一种或多种脂质的浓度下降，所述一种或多种脂质选自：
    Glc/GalCer(dl8:l/16:0)，LacCer(dl8:l/16:0)，Cer(dl8:l/16:0)、CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer 和总LacCer；
    (b)所述PCSK9抑制剂/沉默因子使受试对象或其样品中的一种或多种脂质的浓度升高，所述一种或多种脂质选自：
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA和总SPH；或
    (c)所述PCSK9抑制剂/沉默因子使受试对象或其样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比下降，所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自：
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)和PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1；或
    (d)所述PCSK9抑制剂/沉默因子使受试对象或其样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比升高，所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自：
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0) (d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)。

    14.      如权利要求13所述的PCSK9抑制剂/沉默因子，其中，心脏血管疾病是动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、急性心肌梗死和/或卒中。

    15.      如权利要求5～12中任一项所述的方法或权利要求13或14所述的PCSK9抑制剂/沉默因子，其中，所述PCSK9抑制剂/沉默因子选自：
    (a)一种或多种针对PCSK9的抗体；
    (b)PCSK9的药物抑制剂；
    (c)抑制LDL受体与PCSK9的相互作用的小分子；
    (c)模仿LDL受体中与PCSK9相互作用的结构域的肽；
    (d)一种或多种对PCSK9mRNA有特异性的siRNA；和/或
    (e)一种或多种对PCSK9mRNA有特异性的反义寡核苷酸。

    16.      针对权利要求1中限定的任一种脂质或针对权利要求1中限定的脂质-脂质浓度比中的任一种脂质的抗体在预测或确定降脂药治疗的功效中的应用。

    17.      如权利要求16所述的应用，其中，所述降脂药是PCSK9抑制剂/沉默因子。

    18.      针对权利要求1中限定的任一种脂质或针对权利要求1中限定的脂质-脂质浓度比中的任一种脂质的抗体在预防或治疗受试对象的因PCSK9抑制剂/沉默因子治疗而导致的一种或多种不良副作用中的应用。

    19.      如权利要求6所述的方法或权利要求18所述的抗体，其中，所述一种或多种不良副作用是肝脏毒性。

    20.      用于执行权利要求1～12中任一项所述的方法的试剂盒，其中，所述试剂盒包含：
    (a)脂质标准物，所述脂质标准物选自权利要求1中限定的脂质；和可选的一种或多种其他参照化合物，所述其他参照化合物选自：
    (b)一种或多种对照标志，例如一种或多种脂质，例如权利要求1中限定的脂质；或蛋白；
    (c)阳性对照和/或阴性对照；
    (d)内参标准物和/或外参标准物；
    (e)校准线对照；
    (f)能够结合权利要求1中限定的任一种脂质的试剂，可选地为抗体；和
    (g)用于执行所述方法或应用的试剂。

    21.      权利要求20所述的试剂盒在以下用途或方法中的应用：
    (i)权利要求1～12中所述的任何用途；或
    (ii)权利要求1～12中所述的任何方法，其中，可选地用以下(a)和/或(b)来确定来自受试对象的样品中的脂质浓度或脂质-脂质浓度比：
    (a)质谱测定法，
    (b)酶联免疫吸附测定(ELISA)。

    22.      一种用降脂药治疗受试对象的方法，所述方法包括：
    (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照相比时下降或升高的浓度表明所述治疗的功效高，
    其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自：
    Glc/GalCer(dl8:l/16:0)，LacCer(dl8:l/16:0)，Cer(dl8:l/16:0)、CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer和总LacCer；
    且其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自：
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA和总SPH；
    或
    (b)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述样品中与对照相比时下降或升高的脂质-脂质浓度比表明所述治疗的功效高，
    其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自：
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1) (d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)和PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1；
    且其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自：
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)。

    23.      如权利要求22所述的方法，所述方法还包括：
    (a)向所述受试对象施用所述降脂药，和/或
    (b)一旦已确定了高功效，则继续施用所述降脂药。

    24.      一种用降脂药治疗受试对象的方法，所述方法包括在治疗所述受试对象前预测所述治疗在所述受试对象中的功效的步骤，所述步骤包括：
    (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照相比时升高或下降的浓度表明所述治疗将具有功效，
    其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自：
    Glc/GalCer(dl8:l/16:0)，LacCer(dl8:l/16:0)，Cer(dl8:l/16:0)、CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/18:0)， Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer和总LacCer；
    且其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自：
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA和总SPH；
    或
    (b)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述样品中与对照相比时升高或下降的脂质-脂质浓度比表明所述治疗将具有功效，
    其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自：
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)和PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1；
    且其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自：
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE  18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)。

    25.      如权利要求24所述的方法，所述方法还包括：一旦已确定所述治疗将对所述受试对象具有功效，则向所述受试对象施用所述降脂药。

    26.      一种用降脂药治疗受试对象的方法，所述方法包括确定受试对象对降脂药治疗的顺应性，所述方法包括：
    (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照相比时下降或升高的浓度表明良好的治疗顺应性，
    其中，与对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自：
    Glc/GalCer(dl8:l/16:0)，LacCer(dl8:l/16:0)，Cer(dl8:l/16:0)、CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer和总LacCer；
    且其中，与对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自：
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA和总SPH；
    或
    (b)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述样品中与对照相比时下降或升高的脂质-脂质浓度比表明良好的治疗顺应性，
    其中，与对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自：
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)和PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1；
    且其中，与对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自：
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)。

    27.      如权利要求26所述的方法，所述方法还包括：
    (a)向所述受试对象施用所述降脂药，和/或
    (b)一旦已确定了良好的治疗顺应性，则继续施用所述降脂药。

    28.      如权利要求22～27中任一项所述的方法，其中，所述降脂药是PCSK9抑制剂/沉默因子。

    29.      一种用PCSK9抑制剂/沉默因子治疗受试对象的方法，其中，将来自受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度或脂质-脂质浓度比与对照进行比较，其中，所述一种或多种脂质或脂质-脂质浓度比选自：
    Glc/GalCer(dl8:l/16:0)，LacCer(dl8:l/16:0)，Cer(dl8:l/16:0)、CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer和总LacCer，
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA，总SPH，
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1，
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC  16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)；
    其中，所述对照是：
    (a)源自具有PCSK9功能缺失性突变的一个或多个受试对象的样品或值；
    (b)源自具有PCSK9功能缺失型脂质谱的一个或多个受试对象的样品或值；或
    (c)源自用已知的特定PCSK9抑制剂/沉默因子治疗过的一个或多个受试对象的样品或值；
    并且其中，如果所述一种或多种脂质或脂质-脂质浓度比在所述样品和所述对照之间没有差异，则说明所述PCSK9抑制剂/沉默因子治疗具有特异性；如果有差异，则说明所述PCSK9抑制剂/沉默因子或化合物引起了非特异性作用，例如一种或多种不良副作用。

    30.      如权利要求29所述的方法，其中，所述PCSK9功能缺失型脂质谱是通过确定对照中的一种或多种脂质的浓度或脂质-脂质浓度比而产生的。

    31.      如权利要求29～30中任一项所述的方法，其中，所述PCSK9抑制剂/沉默因子是
    (a)一种或多种针对PCSK9的抗体；
    (b)PCSK9的药物抑制剂；
    (c)抑制LDL受体与PCSK9的相互作用的小分子；
    (d)模仿LDL受体中与PCSK9相互作用的结构域的肽；
    (e)一种或多种对PCSK9mRNA有特异性的siRNA；和/或
    (f)一种或多种对PCSK9mRNA有特异性的反义寡核苷酸。

    32.      如权利要求22～31中任一项所述的方法，其中，进行比较时所涉及的所述受试对象是：
    (a)正在接受PCSK9抑制剂/沉默因子或其他PCSK9靶向性化合物的治疗的患者；
    (b)正在接受PCSK9抑制剂/沉默因子或其他PCSK9靶向性化合物的治疗的试验动物；
    (c)正在接受除PCSK9抑制剂/沉默因子以外的降脂药治疗的患者或试验动物；或
    (d)未曾接受且目前未在接受PCSK9抑制剂/沉默因子、其他PCSK9靶向性化合物、或除PCSK9抑制剂/沉默因子以外的降脂药的治疗的患者或试验动物。

    33.      如权利要求22～28中任一项或权利要求32所述的方法，其中，进行比较时所使用的所述对照是在接受相应的降脂药治疗或PCSK9抑制剂/沉默因子治疗之前或在所述治疗中断的过程中取自同一受试对象的对照样品。

    34.      如权利要求22～32中任一项所述的方法，其中，进行比较时所使用的所述对照是：
    (a)在之前未接受过PCSK9抑制剂/沉默因子治疗的一个或多个健康受试对象中建立的对照值；
    (b)在目前未在接受PCSK9抑制剂/沉默因子治疗的一个或多个健康受试对象中建立的对照值；
    (c)来自携带PCSK9基因任何功能缺失性突变的一个或多个受试对象的对照样品，所述PCSK9基因功能缺失性突变为例如R46L(rs11591147)；或
    (d)在正在接受PCSK9抑制剂/沉默因子治疗且没有药物引发的脱靶效应的迹象或历史的一个或多个受试对象中建立的对照值。

    35.      如权利要求22～34中任一项所述的方法，所述方法还包括确定或评估所述受试对象中或来自所述受试对象的样品中的LDL胆固醇水平；可选的是，其中，所述受试对象具有下降的LDL胆固醇水平。

    36.      如权利要求22～35中任一项所述的方法，其中，
    (a)所述样品是血液、血浆、血清或其组分(例如脂蛋白组分)或组织活检样；和/或
    (b)脂质浓度和/或脂质比用下述方法确定：质谱测定法，核磁共振谱法，荧光光谱法或双偏振干涉法，诸如HPLC或UPLC等高效分离方法，诸如ELISA等免疫测定法，和/或利用能够特异性地结合分析物的结合性部分。

    说明书

    针对前蛋白转化酶枯草溶菌素/Kexin 9抑制的灵敏的功效性和特异性生物标志
    技术领域
    本发明涉及通过测量脂质水平和脂质-脂质浓度比来测量靶向前蛋白转化酶枯草溶菌素/Kexin 9(PCSK9)治疗的药物功效和特异性的方法。本发明特别适用于确定PCSK9靶向性治疗是否高效地发挥作用以及PCSK9靶向性化合物是否显示出脱靶效应。本发明还可用于评估患者对PCSK9靶向性治疗的顺应性。这些方法包括分析生物样品中的脂质生物标志水平并将其与对照进行比较。
    背景技术
    血浆低密度脂蛋白(LDL)胆固醇是冠状血管疾病已经明确的风险因素。通常，用他汀类药物来治疗高血液胆固醇水平。但是，如果患者的初始血浆胆固醇值较高或对他汀类药物治疗显示出抗性，即使高剂量的他汀类药物也可能不足以高效地令人满意地降低胆固醇水平。此外，高的他汀类药物剂量可能增加出现副作用的风险。因此，需要新的降胆固醇干预手段来预防和治疗冠状血管疾病(CVD)。
    人类遗传学研究表明PCSK9在血浆LDL水平的调控中起重要作用(Abifadel,M.等，2003.Mutations in PCSK9 cause autosomal dominant hypercholesterolemia.Nat Genet 34:154-156)。PCSK9属于丝氨酸蛋白酶家族，是前蛋白转化酶(Seidah,N.G.等，2003.The secretory proprotein convertase neural apoptosis-regulated convertase 1(NARC-1):liver regeneration and neuronal differentiation.Proc Natl Acad Sci U S A 100:928-933)。然而，与其酶活性无关的是，PCSK9通过与肝细胞表面表达的LDL受体(LDL-R)在细胞外结合并促进其溶酶体降解而抑制LDL-R再次循环返回细胞表面，从而降低LDL-R的数量(Horton,J.D.等，2009.PCSK9:a convertase that coordinates LDL catabolism.J Lipid Res 50 Suppl:S172-177)。PCSK9基因发生功能缺失性突变的个体具有下降的血浆LDL胆固醇水平，并受到针对CVD的保护(Cohen,J.等，2005.Low LDL cholesterol in individuals of African descent resulting from frequent nonsense  mutations in PCSK9.Nat Genet 37:161-165；Abifadel,M.等，2003.Mutations in PCSK9 cause autosomal dominant hypercholesterolemia.Nat Genet 34:154-156)。与此相反，已表明PCSK9基因功能获得性突变与升高的血浆LDL水平和早期CVD相关(Abifadel,M.等，2003)。此外，通过在小鼠中表达人D374Y功能获得性PCSK9，已表明减少的LDL-R活性可能不是高胆固醇血症的唯一成因，因为与野生型小鼠相比，D374小鼠据显示将更多的富含甘油三酯的脂蛋白分泌到了循环系统中(Herbert,B.等，2010.Increased secretion of lipoproteins in transgenic mice expressing human D374Y PCSK9 under physiological genetic control.Arterioscler Thromb Vasc Biol 30:1333-1339)。这些现象使PCSK9成为治疗高胆固醇血症的潜在靶标。
    在小鼠中，PCSK9主要在肝脏、小肠和肾脏中表达(Zaid,A.等，2008.Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9(PCSK9):hepatocyte-specific low-density lipoprotein receptor degradation and critical role in mouse liver regeneration.Hepatology 48:646-654)。已显示，小鼠中PCSK9的完全敲除导致循环系统中的LDL胆固醇水平下降了约40％(Rashid,S.等，2005.Decreased plasma cholesterol and hypersensitivity to statins in mice lacking Pcsk9.Proc Natl Acad Sci U S A 102:5374-5379)。据显示，施用他汀类药物HMG-辅酶A还原酶抑制剂使LDL水平下降得甚至更多，这表明了同时使用他汀类药物和PCSK9抑制在治疗CVD中的潜力。然而，已显示PCSK9在小鼠肝脏再生中起作用(Zaid,A.等，2008.Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9(PCSK9):hepatocyte-specific low-density lipoprotein receptor degradation and critical role in mouse liver regeneration.Hepatology 48:646-654)。因此，在肝损伤时完全抑制PCSK9功能可能增加并发症或甚至死亡的风险。另一方面，在同一研究中证明，在PCSK9杂合子敲除型小鼠中，PCSK9活性下降50％并不是有害的，且并不破坏肝脏再生。
    近来，在人体中，已显示他汀类药物和其他降脂药能够通过活化固醇调节元件结合蛋白2(SREBP-2)而使血清PCSK9蛋白水平升高(Careskey,H.E.等，2008.Atorvastatin increases human serum levels of proprotein convertase subtilisin/kexin type 9.J Lipid Res 49:394-398；以及Konrad,R.J.等，2011.Effects of currently prescribed LDL-C-lowering drugs on PCSK9 and implications for the next generation of LDL-C-lowering agents.Lipids Health Dis 10:38)。这些现象说明，为了取得最有效的 治疗结果，将需要联用PCSK9抑制和他汀类药物或其他降脂药物疗法。
    由于PCSK9是治疗血脂异常的潜在靶标，因此，为了鉴定脂质体内稳态在分子脂质水平上的变化，本发明人使用质谱法应用研究了PCSK9缺乏对杂合子和纯合子PCSK9敲除型小鼠的血浆脂质组的影响。还利用了关于PCSK9基因的已知基因变体的功能的现有知识，在人体中研究了这些变化。简言之，将携带已知的功能缺失性突变的受试对象的脂质组学谱与携带主要等位基因的受试对象的脂质组学谱相比较。在开发和选择作用于PCSK9的新化合物和监视PCSK9抑制剂的临床功效时，这种特异性的功效示值将是有用的。典型且精确的功效示值还可用来监视不利的脱靶效应，这是因为，与预定功效谱的偏差可指示这种非特异性的潜在有害的药物效果。
    根据本发明，可以用多种技术来分析脂质。在本发明的背景下，优选的技术是基于电喷雾电离质谱的脂质组学。当设置在正确的环境中时，鸟枪分析法和靶向分析法的优异的品质和特异性将符合严格的管理标准，例如良好的实验室实践准则(GLP)。
    与现有技术相比，由于上述技术的高灵敏性和特异性，可以从甚至最小的样品量中分析本文鉴定出的生物标志。
    本发明鉴定出了表明PCSK9抑制药的功效和特异性的生物标志。这些生物标志将有助于完成以下使命：确保个体在正确的时间以正确的剂量得到正确的PCSK9抑制药，从而将此治疗领域导向使本来相对通用的药物和/或治疗策略变得个体化。所鉴定出的生物标志还可供开发针对PCSK9的新药剂的开发人员使用，用来在候选试剂中选出特异性的先导化合物。
    发明内容
    本发明特别提供指示PCSK9抑制的脂质以及脂质-脂质比。这基于关于功能缺失性突变的敲除型动物的数据和人类翻译数据，在用脂质组学平台进行分析时，这些数据显示出等价的脂质组成。所鉴定出的脂质可以用来监视PCSK9抑制的程度及其特异性。这提供了新颖的改进方法来观察PCSK9抑制；通常，PCSK9抑制的观察方法依赖于LDL胆固醇的示值。然而，LDL胆固醇测量结果并不提供关于PCSK9抑制是否还会使有益且必需的脂质减少的任何信息，而这种减少可能引起不良副作用。困难之处还在于，如果LDL胆固醇水平降低得太多，其可能为患者带来有害的作用。本文所鉴定的脂质标志提供了对PCSK9抑制的功效及其特异性的更佳理解。
    由于PCSK9是治疗血脂异常的潜在靶标，因此，为了鉴定脂质体内稳态在分子脂质水平上的变化，本发明人使用质谱法应用研究了PCSK9缺乏对杂合子和纯合子PCSK9敲除小鼠的血浆脂质组的影响。为了研究缺乏一个或全部两个PCSK9等位基因的小鼠中PCSK9缺乏所带来的影响以及高脂饮食所造成的脂质生物标志差异，从野生型、杂合子和纯合子PCSK9敲除型小鼠中生成了脂质谱，对这些小鼠喂饲了常规饲料(regular chow)或Western饲料(Western chow)。还利用了关于PCSK9基因的已知基因变体的功能的现有知识，在人体中研究了这些变化。简言之，将来自携带已知的功能缺失性突变的受试对象的样品的脂质组学谱与来自携带主要等位基因的受试对象的样品的脂质组学谱相比较。在开发和选择作用于PCSK9的新化合物和监视PCSK9抑制剂的临床功效时，这种特异性的功效示值将是有用的。典型且精确的功效示值还可用来监视不利的脱靶效应，这是因为，与预定功效谱的偏差可指示这种非特异性的潜在有害的药物效果。
    遗传上的功能缺失性突变所导致的天然PCSK9抑制在血浆中引起了有益的分子脂质变化，这可以至少部分地解释该突变的携带者为何具有更低的冠状动脉疾病(CVD)风险。因此，所鉴定出的生物标志可用作任何PCSK9靶向疗法的特异性指示，这是因为，与PCSK9功能缺失所导致的变化的偏差可以归因于不利的非特异性脱靶效应。图1显示出，PCSK9抑制减少了增加CAD风险的脂质。此外，将PCSK9抑制与他汀类药物治疗的降脂效果进行了比较。他汀类药物通过上调肝脏LDL受体并由此增加LDL受体介导的脂质从循环系统的移除来减少血浆脂质。PCSK9抑制也增加肝脏LDL受体的表达，并且因为LDL受体介导的脂质从循环系统的移除作用增加而使脂质减少。因此，理论上讲，这两种治疗模式应当产生相似的血浆脂质变化。图1显示出，因PCSK9功能缺失而导致的特定脂质变化可以用作PCSK9靶向疗法的功效和特异性示值。就此而言，图2显示出，他汀类药物以与PCSK9功能缺失不同的方式影响许多脂质标志的水平，这表明他汀类药物的降低血浆脂质的效果比特定的PCSK9抑制剂/沉默因子更宽泛、特异性更低。
    本发明涉及利用脂质水平来测量靶向PCSK9治疗的药物功效和特异性的方法。本发明特别适用于确定PCSK9靶向性治疗是否高效地发挥作用以及PCSK9靶向性化合物是否具有脱靶效应。此外，本发明还可用于评估患者对PCSK9靶向性治疗的顺应性。这些方法包括分析生物样品的脂质水平并将其与对照进行比较。
    在本发明的一个方面，本文公开和/或要求保护用于分析新药化合物的功能和用于检测接受PCSK9靶向性治疗的患者中的药物功效和特异性的方法、脂质组学标志、药剂(例如抗体)和试剂盒。
    本发明的方法可以包括例如以下步骤：a)提供来自正在接受、即将接受或已经接受PCSK9抑制药治疗的受试对象或试验动物的生物样品；b)确定所述样品中的作为本发明的有效脂质组学标志的在本文鉴定出的一种或多种脂质的浓度和/或一种或多种脂质比率；和c)将所确定的脂质浓度和/或脂质比率与对照中的对应脂质浓度进行比较。
    本发明的脂质组学标志使得可以灵敏地、特异性地检测PCSK9抑制药的功效和特异性。这将有助于改进患者护理和治疗结果、减少毒性症状的发展和困扰、使与药物引发的脱靶效应相关的发病率/死亡率降低。因此，本文所描述和要求保护的脂质组学标志使得可以对接受或即将接受PCSK9抑制药治疗的患者的药物干预进行个人定制。此外，本发明适用于对PCSK9抑制性化合物进行测试的动物实验。本发明使得可以对新的降脂药疗法进行更好的特异性评估。
    因此，在本发明的一个方面，提供一种确定受试对象中的降脂药治疗的功效的方法，所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照相比时下降或升高的浓度表明所述治疗具有高功效，其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自表2～表5中的下降的脂质；并且其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自表2～表5中的升高的脂质。
    在优选实施方式中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自表4～表5中的下降的脂质；并且，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自表4～表5中的升高的脂质。
    在另一个实施方式中，本发明涉及一种确定受试对象中的降脂药治疗的功效的方法，所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述样品中与对照样品相比时下降或升高的脂质-脂质浓度比表明所述治疗具有高功效，其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2～表5中的下降的脂质-脂质浓度比；并且其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2～表5中的升高的脂质-脂质浓度比。
    在优选实施方式中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选 自表4～表5中的下降的脂质-脂质浓度比；并且，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表4～表5中的升高的脂质-脂质浓度比。
    在本发明的另一方面，提供一种预测受试对象(即，尚未接受降脂治疗的受试对象)中的降脂药治疗的功效的方法，所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照样品相比时升高或下降的浓度表明所述治疗将具有功效，其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自表2～表5中的下降的脂质；并且其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自表2～表5中的升高的脂质。
    在优选实施方式中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自表4～表5中的下降的脂质；并且，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自表4～表5中的升高的脂质。
    在另一个实施方式中，本发明涉及一种预测受试对象(即，尚未接受降脂治疗的受试对象)中的降脂药治疗的功效的方法，所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述样品中与对照样品相比时升高或下降的脂质-脂质浓度比表明所述治疗将具有功效，其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2～表5中的下降的脂质-脂质浓度比；并且其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2～表5中的升高的脂质-脂质浓度比。
    在优选实施方式中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表4～表5中的下降的脂质-脂质浓度比；并且，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表4～表5中的升高的脂质-脂质浓度比。
    上述实施方式可用于尚未接受所述降脂药治疗的受试对象。
    在另一个实施方式中，本发明涉及一种确定受试对象对降脂药治疗的顺应性的方法，所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照样品相比时下降或升高的浓度表明良好的治疗顺应性，其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自表2～表5中的下降的脂质；并且其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自表2～表5中的升高的脂质。
    在优选实施方式中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自表4～表5中的下降的脂质；并且，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自表 4～表5中的升高的脂质。
    在另一个实施方式中，本发明涉及一种确定受试对象对降脂药治疗的顺应性的方法，所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述样品中与对照样品相比时下降或升高的脂质-脂质浓度比表明良好的治疗顺应性，其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2～表5中的下降的脂质-脂质浓度比；并且其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2～表5中的升高的脂质-脂质浓度比。
    在优选实施方式中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表4～表5中的下降的脂质-脂质浓度比；并且，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表4～表5中的升高的脂质-脂质浓度比。
    在另一个实施方式中，本发明涉及一种鉴定可用作降脂药或用于治疗心脏血管疾病及其并发症的化合物的方法，所述方法包括确定来自正在用所述化合物进行治疗的受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照样品相比时下降或升高的浓度表明作为降脂药的可用性，其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自表2～表5中的下降的脂质；并且其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自表2～表5中的升高的脂质。
    在优选实施方式中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自表4～表5中的下降的脂质；并且，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自表4～表5中的升高的脂质。
    在另一个实施方式中，本发明涉及一种鉴定可用作降脂药或用于治疗心脏血管疾病及其并发症的化合物的方法，所述方法包括确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述样品中与对照样品相比时下降或升高的浓度表明作为降脂药的可用性，其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2～表5中的下降的脂质-脂质浓度比；并且其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2～表5中的升高的脂质-脂质浓度比。
    在优选实施方式中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自表4～表5中的下降的脂质-脂质浓度比；并且，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种选自表4～表5中的升高的脂质-脂质浓度比。
    在本发明的任何方法的优选实施方式或其他实施方式中，所述降脂药是PCSK9 抑制剂/沉默因子。
    本发明的方法中还可以包括测量循环系统中的LDL水平。如果施用后LDL水平升高，则说明该化合物不可用做降脂药。相反，如果施用后LDL水平下降，则说明该化合物可用做降脂药。
    作为另一种选择，本发明的方法还可以包括测量所述化合物的抑制PCSK9结合LDL受体的能力。如果在施用后该化合物并未阻止PCSK9结合LDL受体，则说明该化合物不可用做降脂药。如果在施用后该化合物阻止了PCSK9结合LDL受体，则说明该化合物可用做降脂药。
    在另一个实施方式中，本发明涉及一种确定PCSK9抑制剂/沉默因子的特异性的方法，所述方法包括将来自受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度或脂质-脂质浓度比与对照进行比较，其中，所述一种或多种脂质或脂质-脂质浓度比选自表2～表5中的脂质和脂质-脂质浓度比；并且其中，所述对照是源自具有PCSK9功能缺失性突变的一个或多个受试对象的样品或值。
    在该方法的另一实施方式中，所述对照是源自具有PCSK9功能缺失型脂质谱的一个或多个受试对象的样品或值。PCSK9功能缺失型脂质谱可以通过确定对照中的一种或多种脂质的浓度或脂质-脂质浓度比来产生。
    在该方法的另一实施方式中，所述对照是源自用已知的特定PCSK9抑制剂/沉默因子治疗过的一个或多个受试对象的样品或值。
    该方法中，如果所述一种或多种脂质或脂质-脂质浓度比在样品和对照之间不存在差异，则说明用所述PCSK9抑制剂/沉默因子进行的治疗的特异性。相反，如果所述一种或多种脂质或脂质-脂质浓度比在样品和对照之间存在差异，则说明所述PCSK9抑制剂/沉默因子或化合物引起了非特异性作用，例如一种或多种不良副作用。
    在所述方法的优选实施方式中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自表4～表5中的下降的脂质和脂质-脂质浓度比；并且，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自表4～表5中的升高的脂质和脂质-脂质浓度比。
    在本文所描述和要求保护的本发明的所有方面和实施方式中，进行比较时所涉及的所述受试对象可以是：(a)正在接受PCSK9抑制剂/沉默因子或其他PCSK9靶向性化合物的治疗的患者；(b)正在接受PCSK9抑制剂/沉默因子或其他PCSK9靶向性化合物的治疗的试验动物；(c)正在接受除PCSK9抑制剂/沉默因子之外的降脂药的治疗 的患者或试验动物；或(d)未曾接受且目前未在接受PCSK9抑制剂/沉默因子、其他PCSK9靶向性化合物或除PCSK9抑制剂/沉默因子之外的降脂药的治疗的患者或试验动物。
    对于本文公开的确定或预测降脂药治疗(例如，PCSK9抑制剂/沉默因子)的功效的方法、确定受试对象对降脂药治疗(例如，PCSK9抑制剂/沉默因子)的顺应性的方法、或鉴定可用作降脂药(例如，PCSK9抑制剂/沉默因子)的化合物的方法，比较时所用的对照可以是在进行PCSK9抑制剂/沉默因子治疗前或在该治疗中断的过程中取自同一受试对象的对照样品。
    为了实现本发明的目的，对照样品也可以从患者组获得，例如通过将来自群体的多种样品混合。如果使用患者组，则将来自群体的若干种脂质谱组合，并从该组合中产生脂质组学标志。为了实现本文所述和/或所要求保护的方法的目的，将来自受试对象的样品中的单个的脂质或脂质-脂质浓度比的水平或量与对照中的所述脂质或脂质-脂质浓度比的水平或量进行比较。
    在一个实施方式中，比较时所用的对照可以是从之前未用PCSK9抑制剂/沉默因子治疗过的一个或多个健康受试对象中建立的对照值。其也可以是代表来自患者群体的样品组合的样品。作为另一种选择，所述对照可以是从目前未在接受PCSK9抑制剂/沉默因子治疗的一个或多个健康受试对象中建立的对照值。作为另一种选择，所述对照可以是有关本发明的脂质组学标志的数据集，例如，关于从携带任何PCSK9基因的功能缺失性突变(例如R46L(rs11591147))的一个或多个受试对象的对照样品采集的样品中的本发明的脂质浓度或脂质-脂质浓度比的信息。作为另一种选择，所述对照可以是从正在接受PCSK9抑制剂/沉默因子治疗且没有药物引发的脱靶效应的迹象或历史的一个或多个受试对象中建立的对照值。
    所述信息可以(因此对应的数据集也可以)已经预先确定、计算得到或外推得到，或可以尚未确定、计算得到或外推得到，或还可以从文献中获得。
    优选的是，对照样品是血液、血浆、血清、尿或组织，或其脂蛋白组分。
    对于本发明的所有方面和实施方式，本文所要求保护和/或所描述的任何方法都可以进一步包括确定或评估所述受试对象或所述受试对象的样品中的LDL胆固醇水平。在一个实施方式中，受试对象的LDL胆固醇水平下降。
    根据本发明的方法，所述样品可以是血液、血浆、血清或尿。所述样品还可以是 血液、血浆、血清或尿的组分，例如脂蛋白组分。可以制备血液样品，并可以用本领域技术人员公知的技术从所述血液样品中分离出血浆或血清或其组分。作为另一种选择，来自受试对象的样品和对照样品还可以是组织样品(例如组织活检样)或其脂蛋白组分。作为另一种选择，所述样品可以是任何哺乳动物细胞(例如，红细胞)。
    从受试对象的样品或者从对照样品收集本发明的方法的脂质组学标志(即，本文所描述和要求保护的脂质、脂质浓度或脂质组学标志组合)的相关信息可以通过多种化学技术和高分辨率分析技术来进行。特别适合的分析技术包括但不限于质谱测定法和核磁共振谱测定法。实际上，能够解析单个脂质或脂质类别并提供其结构信息的任何高分辨率技术都可以用来确定受试对象的样品以及对照样品中的本发明的脂质组学标志。为了实现本发明的方法的目的，脂质浓度或脂质比率优选用质谱测定法来确定。不过，在这方面也可以使用核磁共振谱测定法、荧光谱测定法或双偏振干涉测量法、高效分离方法(例如HPLC或UPLC)、免疫测定(例如ELISA)和/或利用能够特异性结合脂质分析物的结合性部分的方法。
    如上所示，根据本发明的方法的替代性实施方式或其他实施方式，样品中的脂质分析物可以通过将该分析物与能够特异性地结合该分析物的结合性部分组合来检测和/或定量。所述结合性部分可以包括例如配体-受体对(即能够具有特异性结合相互作用的分子对)中的成员。所述结合性部分还可以包括例如特异性结合对(例如抗体-抗原、酶-底物、核酸类配体、其他蛋白配体或本领域中已知的其他特异性结合对)中的成员。
    在特别优选的实施方式中，用质谱测定法(MS)来确定本发明的脂质组学标志，其中，MS装置可选地与直接注入方法和高效分离方法(例如HPLC或UPLC)联用。在将所收集的脂质谱与对照进行比较时，使用所收集的脂质组学标志中的单个的脂质或脂质类别的量。
    本发明还包括用于进行治疗的PCSK9抑制剂/沉默因子。优选的是，所述治疗是治疗高胆固醇血症。同样优选的是，所述治疗是治疗心脏血管疾病(例如动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、急性心肌梗死和/或卒中)或降低其风险。在本发明的此方面背景下，所述PCSK9抑制剂/沉默因子使受试对象中的选自表2至表5中的下降的脂质中的一种或多种脂质的浓度下降。同样还涵盖了对应的治疗方法。在优选的实施方式中，所述PCSK9抑制剂/沉默因子使受试对象中的选自表4至表5中的下降的脂质中的一 种或多种脂质下降。
    在另一实施方式中，所述PCSK9抑制剂/沉默因子使受试对象中的选自表2至表5中的升高的脂质中的一种或多种脂质升高。在优选的实施方式中，所述PCSK9抑制剂/沉默因子使受试对象中的选自表4至表5中的升高的脂质中的一种或多种脂质升高。
    在另一实施方式中，所述PCSK9抑制剂/沉默因子使选自表2至表5中的下降的脂质-脂质浓度比中的一种或多种脂质-脂质浓度比下降。在另一实施方式中，所述PCSK9抑制剂/沉默因子使选自表4至表5中的下降的脂质-脂质浓度比中的一种或多种脂质-脂质浓度比下降。
    在另一实施方式中，所述PCSK9抑制剂/沉默因子使选自表2至表5中的身高的脂质-脂质浓度比中的一种或多种脂质-脂质浓度比升高。在优选实施方式中，所述PCSK9抑制剂/沉默因子使选自表4至表5中的升高的脂质-脂质浓度比中的一种或多种脂质-脂质浓度比升高。
    为实现本发明的目的，PCSK9抑制剂/沉默因子可以选自：(a)针对PCSK9的一种或多种抗体，(b)PCSK9的药物抑制剂，(c)抑制LDL受体与PCSK9的相互作用的小分子；(d)模仿LDL受体的与PCSK9相互作用的结构域的肽，(e)对PCSK9有特异性的一种或多种siRNA，和/或(e)对PCSK9有特异性的一种或多种反义寡核苷酸。为实现本发明的目的，特别优选针对PCSK9的抗体作为降脂药或PCSK9抑制剂/沉默因子。
    本发明还包括：使用针对表2至表5中限定的任一种脂质或针对表2至表5中限定的脂质-脂质浓度比中的任一种脂质的抗体来预测或确定降脂药治疗的功效。在优选实施方式中，所述抗体是针对表4至表5所限定的任一种脂质的抗体或针对表4至表5所限定的脂质-脂质浓度比中的任一种脂质的抗体。同样还涵盖了对应的治疗方法。在优选实施方式中，降脂药是PCSK9抑制剂/沉默因子。
    本发明还包括：使用针对表2至表5所限定的任一种脂质或针对表2至表5所限定的脂质-脂质浓度比中的任一种脂质的抗体来预防或治疗受试对象的因PCSK9抑制剂/沉默因子治疗而导致的一种或多种不良副作用。在优选实施方式中，所述抗体针对表4至表5所限定的任一种脂质或针对表4至表5所限定的脂质-脂质浓度比中的任一种脂质。同样还涵盖了对应的治疗方法。
    为实现本发明的目的，因PCSK9抑制剂/沉默因子治疗而导致的或由PCSK9抑制剂/沉默因子治疗引起的不良副作用可以是肝脏毒性。
    本发明还涵盖一种试剂盒，所述试剂盒用于执行本文所描述和/或所要求保护的方法和应用，其中，所述试剂盒包含试剂和参照化合物。所述参照化合物可以是以下(a)～(f)中的一项或多项，但不限于此：(a)选自表2～5中的脂质的脂质标准物；(b)一种或多种对照标志(例如，脂质，优选是与本文所描述和/或所要求保护的任何脂质组学标志对应的脂质，或其他脂质(例如，总PC)，或其他分子(例如，蛋白))；(c)阳性对照和/或阴性对照；(d)内参标准物和/或外参标准物；(e)校准线对照；(f)能够与表2～5中任一种脂质结合的抗体或其他结合性部分。所述试剂是可用于执行所述方法或应用的溶液、溶剂和/或缓冲剂。
    在本发明的一个实施方式中，提供了一种试剂盒，所述试剂盒用于执行本文所描述和/或所要求保护的方法，其中，所述试剂盒包含试剂和参照化合物。所述参照化合物可以是但不限于以下物质中的一种或多种：(a)选自表2～5所限定的脂质的脂质标准物；和可选的选自以下(b)～(g)的一种或多种其他参照化合物：(b)一种或多种对照标志(例如，脂质，优选是与本文所描述和/或所要求保护的任何脂质组学标志对应的脂质，或其他脂质(例如，总PC)，或其他分子(例如，蛋白))；(c)阳性对照和/或阴性对照；(d)内参标准物和/或外参标准物，其可以是或不是经化学修饰的、带标签的或在人体中非内源性存在的分子；(e)校准线对照；(f)能够与表2～5中任一种脂质结合的试剂(可选地为抗体)；和(g)用于执行所述方法或应用的试剂。
    本发明的优选试剂盒包含例如上文列出的组成部分的以下组合：(a)和(b)，以及可选的(g)；(a)和(c)，以及可选的(g)；(a)和(d)，以及可选的(g)；(a)和(e)，以及可选的(g)；(a)和(f)，以及可选的(g)；(a)、(b)和(c)，以及可选的(g)；(a)、(b)和(d)，以及可选的(g)；(a)、(b)和(e)，以及可选的(g)；(a)、(b)和(f)，以及可选的(g)；(a)、(c)和(d)，以及可选的(g)；(a)、(c)和(e)，以及可选的(g)；(a)、(c)和(f)，以及可选的(g)；(a)、(d)和(e)，以及可选的(g)；(a)、(d)和(f)，以及可选的(g)；或者(a)、(e)和(f)，以及可选的(g)。
    在一个优选实施方式中，所要求保护的试剂盒中的一种或多种对照标志是在临床环境中经常测量的分子。例如，优选以下实施方式：其中，一种或多种所述对照标志是apoA、apoB、白蛋白或总PC或者其组合。
    优选的是，所述试剂盒用于本发明的任何目的，其中，来自受试对象的样品中的脂质浓度、脂质比率或其脂质组合使用质谱测定法来确定。在质谱分析前，可以对所述样品进行纯化和/或其他的样品预处理步骤。纯化步骤可以是但不限于色谱，例如，高效液相色谱(HPLC)、超效液相色谱(UPLC)和/或超高效液相色谱(UHPLC)。样品预处理步骤可以是但不限于固相萃取(SPE)、衍生化、液-液萃取和/或脂蛋白分级分离。所述质谱法确定可以通过串联式质谱来进行。
    在另一个优选实施方式中，使用了一种试剂盒，其中，来自受试对象的样品中的脂质浓度、脂质比率或其脂质组合使用酶联免疫吸附测定(ELISA)来确定。
    在本发明的另一个实施方式中，提供了一种试剂盒，所述试剂盒可用于用来执行本发明的方法的免疫测定中。示例性的试剂盒包括但不限于：(a)能够结合表2至表5中的任一种脂质的抗体；和可选的以下(b)～(f)中的一种或多种：
    (b)所述酶的特异性底物；
    (c)终止溶液； 
    (d)包被有能够结合表2至表5中的任一种脂质的抗体的测定平板；
    (e)标准物和/或校准线标准物；和
    (f)进行所述测定所需的必要的缓冲剂和/或试剂。
    另一种示例性试剂盒包括但不限于：
    (a)与酶偶联的能够结合表2至表5中的任一种脂质的抗体；和可选的以下(b)～(f)中的一种或多种：
    (b)所述酶的特异性底物；
    (c)终止溶液； 
    (d)包被有能够结合表2至表5中的任一种脂质的抗体的测定平板；
    (e)标准物和/或校准线标准物；和
    (f)进行所述测定所需的必要的缓冲剂和/或试剂。
    另一种示例性试剂盒包括但不限于：
    (a)与酶偶联的表2至表5中的任一种脂质；和可选的以下(b)～(f)中的一种或多种：
    (b)所述酶的特异性底物；
    (c)终止溶液； 
    (d)包被有能够结合表2至表5中的任一种脂质的抗体的测定平板；
    (e)标准物和/或校准线标准物；和
    (f)进行所述测定所需的必要的缓冲剂和/或试剂。
    另一种示例性试剂盒包括但不限于：
    (a)与可检测标记(例如，生物素)偶联的能够结合表2至表5中的任一种脂质的抗体；和可选的以下(b)～(f)中的一种或多种：
    (b)所述酶的特异性底物；
    (c)终止溶液； 
    (d)包被有能够结合表2至表5中的任一种脂质的抗体的测定平板；
    (e)标准物和/或校准线标准物；和
    (f)进行所述测定所需的必要的缓冲剂和/或试剂。
    另一种示例性试剂盒包括但不限于：
    (a)与可检测标记偶联的表2至表5中的任一种脂质；和可选的以下(b)～(f)中的一种或多种：
    (b)所述酶的特异性底物；
    (c)终止溶液； 
    (d)包被有能够结合表2至表5中的任一种脂质的抗体的测定平板；
    (e)标准物和/或校准线标准物；和
    (f)进行所述测定所需的必要的缓冲剂和/或试剂。
    以上实施方式的优选试剂盒包含例如上文列出的组成部分的以下组合：(a)和(b)；(a)和(c)；(a)和(d)；(a)和(e)；(a)和(f)；(a)、(b)和(c)；(a)、(b)和(d)；(a)、(b)和(e)；(a)、(b)和(f)；(a)、(c)和(d)；(a)、(c)和(e)；(a)、(c)和(f)；(a)、(d)和(e)；(a)、(d)和(f)；(a)、(e)和(f)；(a)、(b)、(c)和(d)；(a)、(c)、(d)和(e)；(a)、(d)、(e)和(f)；(a)、(b)、(c)、(d)和(e)；或(a)、(c)、(d)、(e)和(f)。
    在上述实施方式的试剂盒的另一优选实例中，所述试剂盒还包含与酶偶联的且能够结合上述实施方式中的抗体的抗体。
    在上述实施方式的试剂盒的另一优选实例中，所述试剂盒还包含与可检测标记(例如生物素或荧光标记)偶联的且能够结合上述实施方式中的抗体的抗体。
    在上述实施方式的试剂盒的另一优选实例中，所述试剂盒还包含一种酶，所述酶 与对上述实施方式中的抗体上的可检测标记有特异性的蛋白偶联，例如，与抗生蛋白链菌素偶联的碱性磷酸酶。
    本发明还涵盖本发明的试剂盒在执行本文所描述和所要求保护的方法中的应用。在此方面使用的试剂盒可以是竞争性ELISA试剂盒，且包括：
    (a)针对表2至表5中任一种脂质的抗体或抗血清；
    (b)与酶偶联的表2至表5中任一个中的任一种脂质；
    (c)标准物和/或校准线标准物；
    (d)包被有能够结合抗体的抗体的测定平板，例如，能够结合兔Ig、山羊Ig、小鼠Ig、豚鼠Ig、大鼠Ig或羊Ig的抗体；
    (e)所述酶的特异性底物；
    (f)终止溶液；和 
    (g)用于执行所述方法或应用的试剂。
    在一个实例中，所述标准物和/或校准线标准物是选自表2至表5中任一种脂质所限定的脂质的脂质标准物。
    该竞争性ELISA试剂盒的示例性应用如下：
    1.用能够结合兔抗体的抗体包被测定平板的孔。
    2.将样品添加到孔中，并可选地向其他孔中添加校准线标准物。
    3.添加与碱性磷酸酶偶联的表2至表5中的任一种脂质的溶液，随后添加能够结合表2至表5中任一种脂质的兔多克隆抗体。
    4.在样品温育过程中，兔多克隆抗体以竞争性方式结合至样品中的表2至表5中任一种脂质或偶联物。
    5.洗涤平板，仅留下所结合的样品脂质或偶联物。
    6.添加特异性底物的溶液，这在脂质偶联物上的碱性磷酸酶的催化下引起显色反应。
    7.用特定的终止溶液使反应停止，并在适合的光波长(例如405nm)下读取每个孔中的颜色变化。
    8.在竞争性ELISA中，颜色强度间接地与样品中的脂质量成比例。
    本发明的所有试剂盒都可以伴随有其使用说明书，从而(i)用于确定受试对象中的降脂药治疗的功效、(ii)用于预测受试对象中的降脂药治疗的功效、(iii)用于确定受试 对象对降脂药治疗的顺应性、(iv)用于鉴定可用作降脂药或用于治疗心脏血管疾病及其并发症的化合物、或(v)用于确定PCSK9抑制剂/沉默因子的特异性，以上都如本文所定义。
    在本文所描述和要求保护的本发明的所有方面和实施方式的背景下，通常使用测定来确定脂质浓度或脂质比率。
    本文所呈现的发明性教导的背景下的技术及其实施方式因以下标准而与本领域的类似工作迥然有别。在样品制备中，样品受到严格的控制和相同的处理，以避免潜在的可能来自不当操作的人为因素。在本发明中，在冰上小心缓慢地解冻样品，随后直接进行用户定制的自动脂质提取，其在脂质操作中具有目前最高的精度，从而使潜在的误差最小化。另外，严格控制样品的冷冻-解冻循环，因为这可以对脂质稳定性产生巨大影响。自动脂质提取基于Folch及其合作者的方法(Folch J等:A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues.J Biol Chem 1957,226(1):497-509)，该方法使用氯仿和甲醇。在需要以最佳的回收率提取从极性到非极性的大范围脂质类别从而防止脂质物种损失时，上述方法是优选的。脂质类别特定的非内源脂质在适用时被用作内参标准物，以在鉴定(使假阳性最少化)和定量测定所监测的分子脂质物种时获得最高精度。以此方式，以当前的技术所能够取得的最高精度确定了内源分子脂质的绝对量或半绝对量。以分子脂质水平监视了内源脂质和相应的标准物。以此方式，不仅使假阳性鉴定结果最少化，而且可以对分子脂质进行精确地鉴定和定量。使用新型的品质控制系统来严格控制分析品质。其主要通过多个内参标准物(IS)、外参标准物(ES)、IS/ES比和设备对照样品来控制。通过严格控制这些要素，容易地将技术和生物学异常值鉴定出并排除在进一步的分析之外。为了在灵敏度、选择性和定量方面获得最佳精度，对每种分子脂质使用了不同的靶向平台。一些脂质通过使用高效液相色谱(HPLC)、超效液相色谱(UPLC)或超高效液相色谱(UHPLC)并组合基于质谱的多重反应监测(MRM)而得到了最佳分析，而另一些脂质则通过直接注入并组合基于质谱的前体离子扫描和中性丢失扫描技术而得到最佳分析。
    附图说明
    图1.死于CVD并发症的患者与具有稳定CAD的患者相比的脂质浓度平均百分比变化(A)、R46L功能缺失性突变携带者与对照相比的脂质浓度平均百分比变化(B)、 阿托伐他汀治疗后的患者与治疗前的相同患者相比的脂质浓度平均百分比变化(C)、辛伐他汀治疗后的患者与治疗前的相同患者相比的脂质浓度平均百分比变化(D)。Cer：神经酰胺；LacCer：乳糖苷神经酰胺。
    图2.特定的PSCK9抑制所引起的脂质变化(具有一个PCSK9功能缺失性基因的患者)。还显示了降脂药阿托伐他汀和辛伐他汀所引起的脂质变化。
    图3.PCSK9-/-小鼠(A)和PCSK9+/-小鼠(B)在喂饲常规饲料或Western饲料(分别为C和D)时与野生型(WT)相比的血浆分子脂质平均浓度的百分比差异。显著性基于学生t检验。每个符号都对应于用MS应用测得的某一类别的脂质分子。
    图4.携带PCSK9基因R46L变异的男性人类CAD患者与无R46L突变的CAD患者相比的血浆分子脂质平均浓度的百分比差异。显著性基于学生t检验。每个点都对应于用MS应用或临床试剂盒测得的脂质分子。
    图5.本发明一些实施方式的系统的示意图。具体而言，该图示出了在根据所公开的系统和方法执行计算机系统106时可以使用的各种硬件、软件和其他资源。在所示的实施方式中，计算机系统106可以包括与随机存取存储器连接的一个或多个处理器110，其根据操作系统或在操作系统的控制下进行操作。实施方式中的处理器110可以包括在一个或多个服务器、机群或其他计算机或硬件资源中，也可以使用云资源来运行。操作系统可以是例如LinuxTM操作系统、UnixTM操作系统、或者其他开源或专有的操作系统或平台的发行版。处理器110可以与数据存储器112(例如，存储在硬盘或盘阵列上的数据库)通信，以获取或储存程序指令和数据。
    处理器110还可以通过网络接口108来通信，进而可以通过一个或多个网络104(例如互联网或其他公共或私人网络)来通信，从而可以从客户端102或其他设备或服务器接收查询或其他请求。此外，处理器110可以利用网络接口108并通过一个或多个网络104来向用户发送信息、指令、工作流查询部分工作流、或其他数据。网络接口104可以包括一个或多个服务器或与一个或多个服务器通信连接。客户端102可以是例如接入互联网的个人计算机。
    通常，可以将处理器110编程或设置成执行控制逻辑运算或控制操作以执行本文所公开的方法。处理器110还可以与协处理器114通信连接(即，通过通信通道的方式连接)。协处理器114可以是被配制成执行本文所公开的方法的专用硬件和/或固件组件。因此，本文所公开的方法可以用处理器110和/或协处理器114来执行。
    计算机系统106、相关的网络连接以及其他硬件、软件和服务器资源的其他配置方式也是可能的。
    具体实施方式
    定义：
    本文所用的一些简称的含义如下：ADR是不良药物反应；MS是质谱测定法；HPLC是高效液相色谱法；UPLC是超高效液相色谱法。
    冠状血管疾病/心脏血管疾病(CVD)具有其在本领域的通常意义，且用来对影响人体的心脏、心脏瓣膜、血液和脉管系统的多种病况进行分类。心脏血管疾病包括内皮功能障碍、冠状动脉疾病、心绞痛心肌梗死、动脉粥样硬化、充血性心力衰竭、高血压、脑血管疾病、卒中、短暂性脑缺血发作、深静脉血栓形成、周缘动脉疾病、心肌病、心律不齐、主动脉狭窄和动脉瘤。此类疾病经常涉及动脉粥样硬化。在本发明的优选实施方式中，心脏血管疾病是与动脉粥样硬化相关的心脏血管疾病。
    CAD为冠状动脉疾病，AMI为急性心肌梗死，ACS为急性冠脉综合征，CAC为冠状动脉钙化，RCT为逆向胆固醇运输，LDL为低密度脂蛋白，HDL为高密度脂蛋白，LDL-C为低密度脂蛋白胆固醇，HDL-C为高密度脂蛋白胆固醇，ApoA为载脂蛋白A，ApoB为载脂蛋白B，ApoC为载脂蛋白C，MS为质谱测定法，HPLC为高效液相色谱法，UPLC为超高效液相色谱法。
    为了实现本发明的目的，“降脂药”或药物优选是PCSK9抑制剂或沉默因子。
    本文所用的“受试对象”包括所有哺乳动物，包括但不限于人，以及非人灵长类动物、犬、猫、马、绵羊、山羊、牛、兔、猪和啮齿类动物(例如小鼠和大鼠)。本发明的特别优选的受试对象是人。
    本文所用的“高风险受试对象”通常是指患有可能影响药物功效或增加不良反应风险的疾病(例如，甲状腺功能减退、肾功能不全或肝脏疾病)的、正在接受高药物剂量和/或多重药物治疗(引起药物相互作用风险)的受试对象，特别是人。
    本文所用的“样品”的定义为从受试对象或受试对象的组或群体获得的任何生物样品。为实现本发明的目的，所述生物样品可以是全血、血清或血浆，优选血清和血浆。采集患者的血液样品属于常规临床实践。可以为了例如测量患者的胆固醇水平来采集血液样品。可以用本领域技术人员公知的技术来制备所采集的血液样品并分离出 血浆或血清。静脉血液样品可以使用针和BD塑料管或Plus塑料管(BDSSTTM管包含喷涂的二氧化硅和用于血清分离的聚合物凝胶)。可以通过在室温下以1300RCF离心10分钟来分离出血清，并将其储存在-80℃的小塑料试管中。样品还可以是全血、血浆或血清的组分，例如脂蛋白组分。在另一优选实施方式中，样品还可以是组织样品(例如肌肉活检组织)或尿或其组分(例如，脂蛋白组分)。
    根据本发明进行比较时所用的对照中的脂质或其他分子在本文中被称为“对照标志”。
    本文所用的“对照”可以是对照样品或仅是对照值。在其为对照值时，应理解的是，其可以是在本发明的方法开始之前就已经确定、计算或外推得到的。或者，对照值可以是在按照本发明的方法确定了所述一种或多种脂质的浓度或所述一种或多种脂质比率后才确定、计算或外推得到的。因此，应理解的是，本发明的适合的对照值完全可以是摘自文献的对照值。
    本文中在谈及“来自同一受试对象”或“来自(另一)受试对象”的对照样品时，其含义可以是所述对照样品是从所述受试对象直接获得的。然而，作为另一种选择，其含义还可以是对照样品是对直接获自或取自所述受试对象的样品进行物理处理或化学处理(例如离心、分级分离、酶促消化、沉淀等)后而获得的。这同样适用于在本文中谈及“来自一个或多个受试对象”、“来自一组受试对象”或“来自一群受试对象”的情况。
    本文中所用的术语“来自一个或多个受试对象的对照样品”或“来自一组受试对象的对照样品”或“来自一群受试对象的对照样品”还优选要求所述对照样品代表所述多于一个受试对象、一组受试对象或一群受试对象。在此背景下，“代表”是指：按照本发明进行比较时所用的对照样品中的一种或多种脂质的浓度对应于来自所述组或群的受试对象的相应个体样品中的所述脂质的平均浓度。优选的是，所述对照样品中的所有脂质的浓度对应于来自所述组或群的受试对象的相应个体样品中的所述脂质的平均浓度。同样的，在按照本发明对一种或多种其他分子(例如其他脂质(例如总PC)或蛋白(例如apoA、apoB或白蛋白))进行比较时，“代表”性对照样品是其中所述分子的浓度对应于来自所述组或群的受试对象的相应个体样品中的所述分子的平均浓度的样品。在优选实施方式中，本发明意义上的“来自一个或多个受试对象的对 照样品”、“来自一组受试对象的对照样品”或“来自一群受试对象的对照样品”通过以下方式获得：将从所述多于一个受试对象、组或群的受试对象直接获得或取得的样品等量混合，或者将其组分、组成物或反应产物(例如，酶促反应产物或沉淀物)等量混合。
    在本文中，如果对照样品是以相同或基本形同的方式从相同类型的生物组织或来源获得的，则称该对照样品“对应”于受试对象的样品。例如，如果受试对象的样品是全血、血浆或血清样品或其组分，则对应的对照样品将同样分别是全血、血浆或血清或其组分。应理解的是，这种对应的对照样品将包括通过将来自受试对象组和群的全血、血浆或血清样品或其某种组分混合而获得的全血、血浆或血清样品或其组分(另见有关本发明的适合的对照样品的本文其他说明和权利要求)。在必要的调整后，这同样适用于例如组织样品和尿样。
    本文所用的表述“与对照样品相比”应理解为包括以下实施方式：其中，实际上针对所关注的脂质组学标志来分析对照样品，即，针对根据本发明的各种方面和实施方式在本文中所具体描述和/或所要求保护的一种或多种脂质的浓度、脂质-脂质浓度比或脂质-临床浓度比或者其组合。然而，应了解的是，上述表述还包括以下实施方式：关于所述对照样品中的所述脂质组学标志的对应信息仅从文献中取得，或者已经预先确定、计算得到或外推得到，或者还未确定、计算得到或外推得到。
    本发明背景下的术语“计算机执行的方法”是指利用机器或装置来达到目标的方法。
    术语“处理器”是指能够解读并执行指令的设备。具体而言，处理器采用逻辑电路来接受输入数据并提供适合的输出数据。处理器可以通过网络相互通信。
    本文所用的“脂质”的定义是疏水性或两亲性小分子。
    出于本发明的目的，脂质遵循以下命名法：CE为胆固醇酯，DAG为二酰甘油，TAG为三酰甘油，PC为磷脂酰胆碱，PC O为烷基连接的PC，PC P为烯基连接的PC，LPC为溶血磷脂酰胆碱，PE为磷脂酰乙醇胺，PE O为烷基连接的PE，PE P为烯基连接的PE，PI为磷脂酰肌醇，Cer为神经酰胺，Glc/GalCer为葡萄糖苷或半乳糖苷神经酰胺，LacCer为乳糖苷神经酰胺，Gb3为球形三脂酰基神经酰胺，SM为鞘磷脂，S1P为鞘氨醇-1-磷酸，SPH为鞘氨醇，SA1P为二氢鞘氨醇-1-磷酸，SPA为二氢鞘氨醇。
    命名法X:Y表示：X为分子的脂肪酸部分中的碳原子总数，Y为分子的脂肪酸部分中的双键总数。
    命名法A/B表示：对于DAG和PC的分子，A和B为与分子的甘油主干连接的脂肪酸部分的类型。
    命名法(dC/A)表示：对于Cer、Gb、GlcCer、LacCer和SM的分子，C为带有通过酰胺连接的脂肪酸部分A的长链基的类型。
    根据本发明，与对照相比的“升高”、“下降”或“差异”各自可以(i)表明受试对象中的降脂药治疗的功效、(ii)预测受试对象中的降脂药治疗的功效、(iii)表明受试对象对降脂药治疗的顺应性、(iv)表明可用作降脂药的或用于治疗心脏血管疾病及其并发症的化合物、或(v)表明PCSK9抑制剂/沉默因子的特异性。优选的是，其为至少5％的升高、下降或差异。更优选的是，其为至少10％的升高、下降或差异。本发明中与对照相比的其他优选的升高、下降或差异是至少15％、更优选至少20％、进一步优选至少25％、50％、75％或100％的升高、下降或差异。超过100％的升高、下降或差异也是特别优选的。
    为了实现本发明的目的，PCSK9抑制剂/沉默因子是阻止PCSK9与LDL受体、特别是存在于肝脏中的LDL受体结合的分子。如本文之前所述，PCSK9抑制剂/沉默因子优选为：(a)针对PCSK9的抗体，(b)PCSK9的药物抑制剂，(c)抑制LDL受体与PCSK9的相互作用的小分子；(d)模仿LDL受体中与PCSK9相互作用的结构域的肽，(e)对PCSK9、特别是PCSK9 mRNA有特异性的siRNA，或(f)对PCSK9、特别是PCSK9 mRNA有特异性的反义寡核苷酸。
    在优选实施方式中，PCSK9抑制剂/沉默因子是阻止PCSK9与LDL受体结合的抗体。此类抗体使本领域中熟知的(参见例如WO2009/055783、WO2008/063382、WO2009/100297、WO2008/125623或WO2009/026558，全部通过援引并入本文中)，并且可以适当地用在本发明的设定中。
    本文所用的术语“抗体”包括显示出与所述脂质的特异性结合的单克隆抗体与多克隆抗体、完整抗体、抗体片段和抗体亚片段。因此，适合的“抗体”可以是任何类别的完整免疫球蛋白(例如IgG、IgM、IgA、IgD、IgE、具有双重或多重抗原或表位特异性的嵌合抗体或杂交抗体)或片段(例如F(ab')2、Fab'、Fab等，包括杂交片段)，且还包括任何免疫球蛋白或通过结合特异性抗原以形成复合物而具有类似抗体的行 为的任何天然的、合成的或遗传改造的蛋白。术语“抗体”涵盖了抗体的抗原结合片段(例如单链抗体、单链可变结构域抗体、Fab片段、F(ab')2、Fd片段、Fv片段和dAb片段)以及完全的抗体。例如，Fab分子可以在经遗传转化的宿主(如大肠杆菌)中表达和组装。因此λ载体系统可以用来表达潜在多样性等于或超过产生其前驱抗体的受试者的一群Fab'。参见Huse WD等,Science 1989,246:1275-81。此类Fab包含在“抗体”的定义中。给定的分子(包括抗体片段或亚片段)的模仿抗体行为并特异性地结合特定抗原的能力可以用本领域已知的结合测定来确定，例如，使用所关注的抗原作为结合配对物。
    针对本发明的脂质的抗体可以用本领域技术人员公知的方法来制备。例如，可以用脂质和佐剂来使小鼠免疫化。以两周为间隔对小鼠实施3次免疫，并每隔一周进行测试采血以获得血清抗体滴度，随后从小鼠采集并汇集脾细胞。将脾细胞制备成3个等分部分，这些等分部分或者立即用于融合实验，或者储存在液氮中供今后融合使用。
    随后按照Stewart和Fuller,J.Immunol.Methods 1989,123:45-53中的程序进行融合实验。在包被有所述脂质的96孔ELISA平板上，用酶联免疫吸附测定(ELISA)对具有正在生长的杂交细胞的孔中的上清液进行单克隆抗体(MAb)分泌者筛选。通过有限稀释来克隆ELISA阳性培养物，通常在2个连续的克隆实验后从单集落建立得到杂交瘤。
    本文所用的术语“小分子”是指低分子量有机化合物。优选的是，本发明的小分子的分子量上限是2,500道尔顿、更优选1,500道尔顿、特别优选800道尔顿。本发明的小分子的尺寸和电荷将优选使得其可以快速扩散跨过细胞膜，从而使该小分子能够到达细胞内的作用部位。
    本文所用的PCSK9的“药物抑制剂”可以是小分子。不过，其也可以是多聚物(例如，除抗体以外的多肽)、糖蛋白、蛋白聚糖、核酸(例如适体)、糖类或脂质。
    实施例
    实施例1
    材料和方法 
    使用来自野生型(Wt)动物、PCSK9纯合子敲除型(Pcsk9-/-)动物和PCSK9杂合子敲除型(Pcsk9+/-)动物的血浆样品来进行脂质组学分析。每组具有18只三个月龄的雄 性小鼠。直到3个月大，对这些小鼠都喂饲了相同的常规饲料(第0天)。之后，先用常规饲料(2018 Teklad Global,Harlan Laboratories)喂饲小鼠2周，而后每组处死3只小鼠用于组织采样(第15天)。将剩下的小鼠变为用标准Western饲料(TD.88137 Harlan Teklad)喂饲，喂饲两周时间，之后处死所有剩余的小鼠(第30天)。Western饲料包含34％的糖、21％的脂肪和0.2％的胆固醇，而常规饲料包含5％的糖、6％的脂肪和0％的胆固醇。
    使小鼠禁食4小时后采血。使用含有EDTA的500μl微型容器(BD)抽取约250μl的面部血液。于4℃以3000rpm离心血样15分钟。将上清液(50～100μl)转移到洁净的Eppendorf管中。采样结束后立即将样品冷冻并储存在-80℃，而后进行脂质组学分析。
    对于鸟枪脂质组学分析，使用10μl小鼠血浆进行脂质萃取。对于神经酰胺和脑苷脂的定量，使用50μl小鼠血浆进行脂质萃取。该研究设计使发明人可以确定在喂饲常规饲料和Western饲料时由全PCSK9抑制(-/-)或部分PCSK9抑制(+/-)诱导的典型脂质组学谱。
    实施例2
    材料和方法 
    本研究是LURIC研究的子项，LURIC研究是针对心脏血管疾病流行病学的大规模前瞻性研究。LURIC数据库包含超过3000位患者的临床信息，其中包括基线冠状血管造影术数据和常规临床实验室数据。在此研究中，发明人比较了携带已知的功能缺失性突变(R46L,rs11591147,Abifadel,M.等，2003.Mutations in PCSK9 cause autosomal dominant hypercholesterolemia.Nat Genet 34:154-156)的受试对象的脂质组学谱和携带具有正常PCSK9功能的主要等位基因的受试对象的脂质组学谱。该比较使得发明人可以确定由PCSK9部分缺陷引起的典型脂质组学谱。临床特性描述于表1中。
    表1.经脂质组学分析的LURIC患者的背景特性

    变量 对照(n＝541) 病例(n＝12) 年龄(平均) 65.1 66.3 LDL-C(mg/dL) 116.8 108.3 HDL-C(mg/dL) 36.8 38.2 降脂措施使用者 248 2

    [0174] 分析方法
    质谱测定法达成的脂质组学
    使用了直接注入并联用串联型质谱测定法(即，鸟枪脂质组学、三酰甘油脂质组学)和液相色谱串联型质谱测定(LC-MS/MS)方法(即，神经酰胺与脑苷脂和鞘氨醇脂质谱组学)，通过分析人血清和小鼠血清中的分子脂质物种，来鉴定PCSK9浓度降低的效果。所施用的方法特别针对以下物质的分子的定量进行了优化：胆固醇酯(CE)，游离胆固醇(FC)，磷脂酰胆碱(PC)，溶血磷脂酰胆碱(LPC)及其他溶血磷脂(LPL)，烷基和烯基连接的磷脂酰胆碱(分别为PC O和PC P)及其他烷基和烯基连接的磷脂(分别为PL O和PL P)，磷脂酰丝氨酸(PS)，磷脂酰乙醇胺(PE)，磷脂酰甘油(PG)，磷脂酰肌醇(PI)，磷脂酸(PA)，二酰甘油(DAG)，三酰甘油(TAG)，神经酰胺(Cer)，葡萄糖苷/半乳糖苷神经酰胺(Glc/GalCer)，乳糖苷神经酰胺(LacCer)，球形三脂酰基神经酰胺(Gb3)，鞘氨醇(SPH)，鞘氨醇-1-磷酸(S1P)，二氢鞘氨醇(SPA)，和二氢鞘氨醇-1-磷酸(SA1P)。
    以下物质根据所述方法来使用。高效液相色谱(HPLC)或LC-MS级的氯仿、甲醇、水、乙腈、甲酸、甲醇、异丙醇、乙酸铵、乙酸、氯化钾和丁基羟基甲苯(BHT)购自Sigma-Aldrich(St.Louis,MO,USA)。
    在神经酰胺与脑苷脂脂质组学中，超高效液相色谱(UHPLC)柱(Acquity BEH C18,2.1×50mm id.1.7μm)购自Waters(Milford,MA,USA)。HPLC前置柱(Widepore C18 4×2.0mm)购自Phenomenex(Torrance,CA,USA)。在鞘氨醇和鞘氨醇-1-磷酸脂质组学中，亲水相互作用液相色谱(HILIC)柱(Atlantis HILIC 3mm 2.1×50mm)和HPLC保护柱(Atlantis HILIC 3mm 2.1×10mm)购自Waters(Milford,MA,USA)。所有用于萃取的实验室器具都是耐氯仿的。抗浮质过滤枪头(Molecular BioProducts)和2ml安全锁Eppendorf管、96孔twin.tec PCR平板及Pierce-it-lite热密封箔购自VWR International(West Chester,PA,USA)。CO-RE过滤枪头和96孔2ml Whatman Uniplate购自Hamilton Robotics(Bonaduz,Switzerland)。合成脂质标准物购自Avanti Polar Lipids(Alabaster,AL,USA)、Matreya(Pleasant Gap,PA,USA)和Cayman Chemical(Ann Arbor,MI,USA)。
    根据以下操作规程，在氯仿:甲醇中萃取脂质。将已知量的非内源性合成内参标准物掺入样品中，以进行数据归一化和内源脂质定量。将萃取后掺入的非内源性合成 外参标准物用于品质控制。标准物的储备液通过以下方法制备：将适量称取的每种标准物溶解在氯仿:甲醇(2:1，v/v)中，以达到500μM或1000μM的最终浓度。制作包含每种标准物储备液的内参标准物混合物，并用于脂质萃取。
    使用10μl的人血浆和小鼠血浆进行鸟枪脂质组学和/或三酰甘油脂质组学和/或游离胆固醇的定量，使用10μl人血浆和50μl小鼠血浆进行神经酰胺与脑苷脂脂质组学和/或鞘氨醇与鞘氨醇-1-磷酸脂质组学。并未对人样品进行三酰甘油、游离胆固醇和鞘氨醇碱分析。使用Hamilton MICROLAB STAR系统(Hamilton Robotics,Switzerland)，以自动化方式进行脂质萃取。将充分混合的样品等分添加到含有冰冷甲醇和0.1％BHT的96孔2ml Whatman Uniplate中。在萃取操作规程的每个步骤之后都充分混合样品。添加适当体积的内参标准物混合物和氯仿以及甲醇，从而在室温下进行萃取。在鸟枪、三酰甘油、神经酰胺与脑苷脂、以及鞘氨醇与鞘氨醇-1-磷酸脂质组学中，通过添加20mM乙酸并在500g下离心平板5分钟来促进有机相的分离。将有机相转移至新的96孔2ml Whatman Uniplate中。通过添加适当体积的氯仿并随后离心来清洗剩余的含水相。将两个有机相合并，并在N2下蒸发至干燥。随后将脂质萃取物重新溶解在氯仿:甲醇(1:2，v/v)中，并添加合成的外参标准物。在进行MS分析前，将萃取物储存在-20℃的2ml安全锁Eppendorf管中。将所需体积的液体萃取物等分添加至Eppendorf 96孔twin.tec PCR平板中，并用铝箔将平板热密封以避免蒸发。
    在鸟枪和三酰甘油脂质组学中以及在定量游离胆固醇时，在配备有自动纳米流离子源(NanoMate HD,Advion Biosciences)的混合三重四级杆/线性离子阱质谱仪(QTRAP 5500,AB Sciex)上分析了脂质萃取物。该设备在正离子模式和负离子模式下运行。在正离子模式下，将喷射电压设为1.0kV～1.4kV；在负离子模式下，设为-1.0kV～-1.4kV。使用了0.3psi～0.8psi的气压，并将界面加热器设为60℃。使用合成标准物，为每个脂质类别优化了碰撞能量(CE)和去簇电压(DP)。在使用200Da/s的扫描速度的单位解析模式下操作质谱仪。使用由Stahlman及其合作者所描述的多前体离子扫描(MPIS)和中性丢失扫描(NLS)(Stahlman M等，High-throughput shotgun lipidomics by quadrupole time-of-flight mass spectrometry.J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 2009)，在正离子模式和负离子模式下分析了分子脂质。使用中性丢失扫描在正离子模式下分析了三酰甘油。在分析前利用氯乙酰将游离胆固醇衍 生化为CE 2:0(Liebisch,G.等，High throughput quantification of cholesterol and cholesteryl ester by electrospray ionization tandem mass spectrometry(ESI-MS/MS).Biochim Biophys Acta,2006.1761(1):p.121-8)。
    在神经酰胺与脑苷脂脂质组学中，按下述方式进行了LC-MS/MS分析。色谱装置由CTC HTC PAL自动采样器(CTC Analytics AG,Switzerland)、Rheos Allegro UHPLC泵(Flux Instruments AG,Switzerland)、外部柱加热器(设为60℃用于神经酰胺与脑苷脂脂质组学)和带有串联的前置柱的Acquity BEH C18柱组成。以500μl/分钟的流速，将萃取的样品(每种10μl)注入前置柱中，随后进入分析柱中，并传递至质谱仪。在神经酰胺与脑苷脂脂质组学中，使用了梯度来进行脂质分析物的分离，其中，溶剂A包含含有0.1％甲酸和10mM乙酸铵的HPLC级水，溶剂B为包含0.1％甲酸和10mM乙酸铵的乙腈:异丙醇(4:3，v/v)。以下述方式来构建梯度：0分钟—65％B；2分钟—65％B；2.5分钟—75％B；17.5分钟—100％B；22.5分钟—100％B；22.6分钟—65％B；25分钟—65％B。
    在鞘氨醇与鞘氨醇-1-磷酸脂质组学中，按下述方式进行了LC-MS/MS分析。色谱装置由CTC HTC PAL自动采样器(CTC Analytics AG,Switzerland)、Rheos Allegro UHPLC泵(Flux Instruments AG,Switzerland)、设为50℃的外部柱加热器和带有串联的保护柱的Atlantis HILIC柱组成。以500μl/分钟的流速，将萃取的样品(每种10μl)注入保护柱中，随后进入分析柱中，并传递至质谱仪。在鞘氨醇与鞘氨醇-1-磷酸脂质组学中，使用了梯度来进行脂质分析物的分离，其中，溶剂A包含含有0.2％甲酸和50mM甲酸铵的超纯水，溶剂B为包含0.2％甲酸的乙腈。以下述方式来构建梯度：0分钟—95％B；0.70分钟—95％B；1.50分钟—75％B；1.51分钟—50％B；1.70分钟—50％B；1.71分钟—85％B；3.00分钟—85％B；3.10分钟—95％B；4.00分钟—95％B。
    在神经酰胺与脑苷脂脂质组学和鞘氨醇与鞘氨醇-1-磷酸脂质组学中，均使用LC-MS/MS来分析脂质萃取物。在配备有Turbo V离子源(4000QTRAP,AB Sciex)的混合三重四级杆/线性离子阱质谱仪上进行了MS分析。该设备在正离子模式下运行。将离子源电压设为5500V；并将源温度设为400℃。使用合成标准物，为每个脂质类别优化了碰撞能量(CE)和去簇电压(DP)。每次扫描所使用的采样时间为20/25秒。使用多重反应监测(MRM)扫描模式，该模式基于Sullards及其合作者的描述(Sullards  MC等:Structure-specific,quantitative methods for analysis of sphingolipids by liquid chromatography-tandem mass spectrometry:"inside-out"sphingolipidomics.Methods Enzymol 2007)。
    数据处理按如下方式进行：首先，通过使用内源标准物并在适用时用信息关联采集(IDA)实验来确定保留时间(在LC模式下)并鉴定每个峰。根据所检测到的峰和保留时间(在LC模式下)，以自动化方式处理原始数据。施加严格的截断阈值，从而将背景干扰与实际的脂质峰分开。控制每个样品，且仅在满足严格接受标准时接受样品。将所检测到的峰的峰面积数(cps)转化为对应的脂质名称列表。将脂质归一化至其相应的内参标准物和样品体积，以获得其浓度。
    合成的内参标准物(IS)与相应的萃取后峰值外部标准物(ES)之比，以及对所萃取的基质和溶剂的MS分析，充当了上述分析的品质控制(QC)。此外，分析了所萃取的参照血浆样品以监视仪器性能，即，测定内差异和测定间差异。
    在进行样品分析前，获得了采用合成或分离的标准物的校准线。基于应用选择了合成标准物，其具有与内源脂质或所关注的分析物相似的性质。校准线由覆盖了预期的定量范围的最少五个标准点构成。该校准线用来确定所监测的每个脂质类别的动态定量范围，例如，线性定量极限。由于所用的内参标准物的行为方式与内源脂质相同，所以将其用于定量内源脂质物种。校准线基于用于定量内源脂质的相同的内参标准物。
    对于每个平台，采用严格的截断阈值，从而将背景噪音与实际的脂质峰分开。控制每个样品，且仅在满足接受标准时接受样品。将所检测到的峰的质量和计数转化为对应的脂质名称列表。将脂质根据其相应的内参标准物和样品体积归一化，以获得其浓度。
    统计学分析 
    对照组和病例组之间的脂质浓度百分比变化按如下方法计算：
    100×(病例组的平均[C]-对照组的平均[C])/对照组的平均[C]
    基于t检验来判定统计学显著性。
    伦理
    LURIC研究得到了位于"Rheinland-Pfalz"的伦理审查委员会(Mainz,Germany)的许可。每个参与者都提供了书面签署的知情同意书。小鼠研究得 到了IRCM动物关爱生命伦理学委员会的许可。
    结果
    脂质组学生物标志看上去是PCSK9活性下降的显著生物标志。与Pcsk9-/-小鼠中所见到的相比，一个Pcsk9等位基因的缺失足以引起鞘脂浓度的显著变化。当以饲料喂饲动物时，在Pcsk9-/-和Pcsk9+/-中(分别见图1A和1B，以及表2a和2b)，包含脂肪酸16:0的鞘磷脂[SM(d18:1/16:0)]、神经酰胺[Cer(d18:1/16:0)]、葡萄糖苷/半乳糖苷神经酰胺[Glc/GalCer(d18:1/16:0)]和乳糖苷神经酰胺[LacCer(d18:1/16:0)]等物种据观察是受影响最大的脂质物种。与之相反，据显示三酰甘油(TAG)在Pcsk9-/-和Pcsk9+/-小鼠的血浆中的浓度比在野生型(Wt)小鼠中显著更高。
    与常规饲料条件相比，对于喂饲Western饲料的Pcsk9-/-小鼠，记录到了明显较小的变化(图1C、表2c)。有趣的是，在喂饲Western饲料的情况下，Pcsk9+/-小鼠展示出了比Pcsk9-/-小鼠更显著的脂质浓度变化(图1D、表2d)。喂饲Western饲料的PCSK9缺陷小鼠的血浆中的典型变化看上去是具有长脂肪酰基链的Cer、Glc/GalCer和LacCer物种的下降，例如Glc/GalCer(d18:1/24:0)、Cer(d18:1/24:0)和LacCer(d18:1/24:0)。
    在携带PCSK9功能缺失性突变的人中观察到了类似的脂质组学变化。在携带已知的PCSK9基因功能缺失性变异(R46L)的人中，下降最明显的脂质物种包括与在Pcsk9-/-和Pcsk9+/-小鼠模型中已经观察到的相同的Glc/GalCer、LacCer和SM物种(图2、表3)。然而，由于人样品的数量有限，多数所观察到的变化并未达到统计学显著水平。此外，在禁食的人的血浆样品中，未能观察到基于脂肪酰链长度的脂质物种区分。与小鼠血浆不同，在人血浆中，两种胆固醇酯物种CE 20:3和CE 20:4的浓度因PCSK9缺乏而显著降低。
    在此研究中，如上所述，总共定量了109种分子脂质和257种TAG脂肪酸。其中，基于设定的标准，63种分子脂质和105种TAG脂肪酸是显著的生物标志。基于分子脂质浓度的显著的生物标志候选者示于表2和表3中。在人中，所选的生物标志与传统上使用的生物标志(例如LDL胆固醇)相比具有更佳的效果。与传统标志相比具有更佳效果的单个脂质列于表3a中。表3b列出了与单个脂质相比具有更佳效果的脂质-脂质浓度比。
    从所鉴定出的生物标志候选者中选出的优选实施方式列于表4和表5中。
    表6示出了通式TAG物种和对每种通式物种做出贡献的可能的脂肪酸组合。通式TAG呈现了三种脂肪酸的总合和TAG分子的双键数量。表6示出了每种通式TAG物种的一些实例，但也可能有其他组合。
    表2a.在喂饲常规饲料的PCSK9-/-小鼠中检测出的与野生型相比的基于单个脂质或脂质-脂质浓度比测量结果的显著生物标志。示出了物种名称、p值和百分比变化。不同的脂肪酸组成描述于表6中。



    表2b.在喂饲常规饲料的PCSK9+/-小鼠中检测出的与野生型相比的基于单个脂质或脂质-脂质浓度比测量结果的显著生物标志。示出了物种名称、p值和百分比变化。



    表2c.在喂饲Western饲料的PCSK9-/-小鼠中检测出的与野生型相比的基于单个脂质或脂质-脂质浓度比测量结果的显著生物标志。示出了物种名称、p值和百分比变化。


    表2d.在喂饲Western饲料的PCSK9+/-小鼠中检测出的与野生型相比的基于单个脂质或脂质-脂质浓度比测量结果的显著生物标志。示出了物种名称、p值和百分比变化。


    表3a.人类样品中的基于单个脂质测量结果的显著生物标志。示出了物种名称、p值和百分比变化。还列出了传统上使用的生物标志及其百分比变化和p值。与传统使用的标志(例如LDL胆固醇)相比，所列出的单个脂质生物标志对PCSK9抑制具有更佳的区分度。


    表3b.人类样品中的基于脂质或脂质-脂质浓度比的显著生物标志。示出了物种名称、p值和百分比变化。


    表4a.喂饲常规饲料的PCSK9-/-小鼠的生物标志的优选实施方式。


    表4b.喂饲常规饲料的PCSK9+/-小鼠的生物标志的优选实施方式。

    表4c.喂饲Western饲料的PCSK9-/-小鼠的生物标志的优选实施方式。


    表4d.喂饲Western饲料的PCSK9+/-小鼠的生物标志的优选实施方式。

    表5.人生物标志的优选实施方式。


    表6.每种TAG通式物种的可能的脂肪酸组合的实例。



    综上，本研究提供了用于确定PCSK9抑制剂和沉默因子的功效和特异性的新型脂质标志。由于仅测量LDL胆固醇不足以提供关于可能的不良药物反应的信息，因此，脂质组学生物标志是针对PCSK9抑制剂和沉默因子的功效的更具特异性和更灵敏的标志。
    鉴于上述内容，应认识到的是本发明还涵盖以下各项：
    1.一种用降脂药治疗受试对象的方法，所述方法包括：
    (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照样品相比时下降或升高的浓度表明所述治疗的高功效，
    其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自表2至表5中的下降的脂质，并且优选选自：
    CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/16:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer和总LacCer；
    并且其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自表2至表5中的升高的脂质，并且优选选自：
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA和总SPH；或
    (b)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述样品中与对照样品相比时下降或升高的脂质-脂质浓度比表明所述治疗的高功效，
    其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2至表5中的下降的脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)和 PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1；
    并且其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2至表5中的升高的脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)。
    2.如第1项所述的方法，所述方法还包括：
    (a)向所述受试对象施用所述降脂药，和/或
    (b)一旦已确定了高功效，持续施用所述降脂药。
    3.一种用降脂药治疗受试对象的方法，所述方法在治疗所述受试对象前包括预测所述治疗在所述受试对象中的功效的步骤，所述步骤包括：
    (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照样品相比时升高或下降的浓度表明所述治疗将具有功效，
    其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自表2至表5中的下降的脂质，并且优选选自：
    CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/16:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer和总LacCer；
    并且其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自表2至表5中的升高的脂质，并且优选选自：
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA和总SPH；或
    (b)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述样品中与对照样品相比时升高或下降的脂质-脂质浓度比表明所述治疗将具有功效，
    其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2至表5中的下降的脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)和PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1；
    并且其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2至表5中的升高的脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)。
    4.如第3项所述的方法，所述方法还包括：一旦已确定所述治疗将对所述受试对象具有功效，则向所述受试对象施用所述降脂药。
    5.一种用降脂药治疗受试对象的方法，所述方法包括确定受试对象对降脂药治疗的顺应性，所述方法包括：
    (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照样品相比时下降或升高的浓度表明良好的治疗顺应性，
    其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自表2至表5中的下降的脂质，并且优选选自：
    CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/16:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer和总LacCer；
    并且其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自表2至表5中的升高的脂质，并且优选选自：
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA和总SPH；或
    (b)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述样品中与对照样品相比时下降或升高的脂质-脂质浓度比表明良好的治疗顺应性，
    其中，与所述对照相比(＝浓度＝)下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2至表5中的下降的脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)， Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)和PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1；
    并且其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2至表5中的升高的脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)。
    6.如第5项所述的方法，所述方法还包括：
    (a)向所述受试对象施用所述降脂药，和/或
    (b)一旦已确定了良好的治疗顺应性，持续施用所述降脂药。
    7.如第1项至第6项中任一项所述的方法，其中，所述降脂药是PCSK9抑制剂/沉默因子。
    8.一种用PCSK9抑制剂/沉默因子治疗受试对象的方法，其中，将来自受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度或脂质-脂质浓度比与对照进行比较，其中，所述一种或多种脂质或脂质-脂质浓度比选自表2～表5中的脂质和脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)， Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/16:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer和总LacCer，
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA，总SPH，
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1，
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)；
    其中，所述对照是：
    (a)源自具有PCSK9功能缺失性突变的一个或多个受试对象的样品或值；
    (b)源自具有PCSK9功能缺失型脂质谱的一个或多个受试对象的样品或值；或
    (c)源自用已知的特定PCSK9抑制剂/沉默因子治疗过的一个或多个受试对象的样品或值；
    并且其中，如果所述一种或多种脂质或脂质-脂质浓度比在所述样品和所述对照之间没有差异，则说明所述PCSK9抑制剂/沉默因子治疗具有特异性；如果有差异，则说明所述PCSK9抑制剂/沉默因子或化合物引起了非特异性作用，例如一种或多种不良副作用。
    9.如第8项所述的方法，其中，PCSK9功能缺失型脂质谱是通过确定对照中的一种或多种脂质的浓度或脂质-脂质浓度比而产生的。
    10.如第7项或第8项所述的方法，其中，所述PCSK9抑制剂/沉默因子是 
    (a)一种或多种针对PCSK9的抗体；
    (b)PCSK9的药物抑制剂；
    (c)抑制LDL受体与PCSK9的相互作用的小分子；
    (d)模仿LDL受体的与PCSK9相互作用的结构域的肽；
    (e)一种或多种对PCSK9 mRNA有特异性的siRNA；和/或
    (f)一种或多种对PCSK9 mRNA有特异性的反义寡核苷酸。
    11.如第1项至第10项中任一项所述的方法，其中，比较时所涉及的所述受试对象是：
    (a)正在接受PCSK9抑制剂/沉默因子或其他PCSK9靶向性化合物的治疗的患者；
    (b)正在接受PCSK9抑制剂/沉默因子或其他PCSK9靶向性化合物的治疗的试验动物；
    (c)正在接受非PCSK9抑制剂/沉默因子的降脂药的治疗患者或试验动物；或
    (d)未曾接受且目前未在接受PCSK9抑制剂/沉默因子、其他PCSK9靶向性化合物、或除PCSK9抑制剂/沉默因子之外的降脂药的治疗的患者或试验动物。
    12.如第1项至第7项中任一项或第11项所述的方法，其中，比较时所使用的所述对照是在接受相应的降脂药治疗或PCSK9抑制剂/沉默因子治疗之前或在所述治疗中断的过程中取自同一受试对象的对照样品。
    13.如第1项至第12项中任一项所述的方法，其中，比较时所使用的所述对照是：
    (a)从之前未接受过PCSK9抑制剂/沉默因子治疗的一个或多个健康受试对象中建立的对照值；
    (b)从目前未在接受PCSK9抑制剂/沉默因子治疗的一个或多个健康受试对象中建立的对照值；
    (c)来自携带任何PCSK9基因功能缺失性突变(例如R46L(rs11591147))的一个或多个受试对象的对照样品；或
    (d)从正在接受PCSK9抑制剂/沉默因子治疗且没有药物引发的脱靶效应的迹象或历史的一个或多个受试对象中建立的对照值。
    14.如第1项至第13项中任一项所述的方法，所述方法还包括确定或评估所述受试对象中或来自所述受试对象的样品中的LDL胆固醇水平；可选的是，其中，所述受试对象具有下降的LDL胆固醇水平。
    15.如第1项至第14项中任一项所述的方法，其中，
    (a)所述样品是血液、血浆、血清或其组分(例如脂蛋白组分)或组织活检样；和/或
    (b)脂质浓度和/或脂质比用下述方法确定：质谱测定法，核磁共振谱法，荧光光谱法或双偏振干涉法，诸如HPLC或UPLC等高效分离方法，诸如ELISA等免疫测定，和/或利用能够特异性地结合分析物的结合性部分。
    鉴于上述内容，还应认识到的是本发明还涵盖以下方面：
    1.一种获得用于确定受试对象中的降脂药治疗是否具有功效的数据的方法，所述方法包括：
    (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，所述一种或多种脂质选自表2～表5中的脂质，并且优选选自：
    Glc/GalCer(d18:1/16:0)，LacCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/16:0)，CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)， Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer，总LacCer，LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA和总SPH；或
    (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2～表5中的脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)和PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1；
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)。
    2.一种获得用于预测受试对象中的降脂药治疗是否具有功效的数据的方法，所 述方法包括：
    (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，所述一种或多种脂质选自表2～表5中的脂质，并且优选选自：
    Glc/GalCer(d18:1/16:0)，LacCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/16:0)，CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer，总LacCer，LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA和总SPH；或
    (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2～表5中的脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)和PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1；
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE  18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)。
    3.一种确定受试对象中的降脂药治疗的功效的方法，所述方法包括：
    (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照样品相比时下降或升高的浓度表明所述治疗具有高功效，其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自表2～表5中的下降的脂质，并且优选选自：
    Glc/GalCer(d18:1/16:0)，LacCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/16:0)，CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer和总LacCer；
    并且其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自表2至表5中的升高的脂质，并且优选选自：
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA和总SPH；或
    (b)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述样品中与对照样品相比时下降或升高的脂质-脂质浓度比表明所述治疗的高功效，
    其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2至表5中的下降的脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1) (d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)和PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1；
    并且其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2至表5中的升高的脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)。
    4.一种预测受试对象中的降脂药治疗的功效的方法，所述方法包括：
    (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照样品相比时升高或下降的浓度表明所述治疗将具有功效，其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自表2～表5中的下降的脂质，并且优选选自：
    Glc/GalCer(d18:1/16:0)，LacCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/16:0)，CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)， GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer和总LacCer；
    并且其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自表2至表5中的升高的脂质，并且优选选自：
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA和总SPH；或
    (b)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述样品中与对照样品相比时升高或下降的脂质-脂质浓度比表明所述治疗将具有功效，
    其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2至表5中的下降的脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)和PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1；
    并且其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2至表5中的升高的脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)， CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)。
    5.一种确定受试对象对降脂药治疗的顺应性的方法，所述方法包括：
    (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照样品相比时下降或升高的浓度表明良好的治疗顺应性，
    其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自表2至表5中的下降的脂质，并且优选选自：
    Glc/GalCer(d18:1/16:0)，LacCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/16:0)，CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer和总LacCer；
    并且其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自表2至表5中的升高的脂质，并且优选选自：
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA和总SPH；或
    (b)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述样品中与对照样品相比时下降或升高的脂质-脂质浓度比表明良好的治疗顺应性，
    其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2至表5中的下降的脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1) (d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)和PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1；
    并且其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2至表5中的升高的脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)。
    6.一种鉴定可用作降脂药或用于治疗心脏血管疾病及其并发症的化合物的方法，所述方法包括：
    (a)确定来自正在接受所述化合物的治疗的受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，所述样品中与对照样品相比时下降或升高的浓度表明作为降脂药的可用性，
    其中，与所述对照相比浓度下降的所述一种或多种脂质选自表2至表5中的下降的脂质，并且优选选自：
    Glc/GalCer(d18:1/16:0)，LacCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/16:0)，CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/18:0)， Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer和总LacCer；
    并且其中，与所述对照相比浓度升高的所述一种或多种脂质选自表2至表5中的升高的脂质，并且优选选自：
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA和总SPH；或
    (b)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质-脂质浓度比，其中，所述样品中与对照样品相比时下降或升高的脂质-脂质浓度比表明作为降脂药的可用性，
    其中，与所述对照相比下降的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2至表5中的下降的脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)和PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1；
    并且其中，与所述对照相比升高的所述一种或多种脂质-脂质浓度比选自表2至 表5中的升高的脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)。
    7.如第1～6方面中任一方面所述的方法，其中，所述降脂药是PCSK9抑制剂/沉默因子，其中，所述PCSK9抑制剂/沉默因子可选地是：
    (a)针对PCSK9的抗体；
    (b)PCSK9的药物抑制剂；
    (c)抑制LDL受体与PCSK9的相互作用的小分子；
    (d)模仿LDL受体的与PCSK9相互作用的结构域的肽；
    (e)对PCSK9有特异性的反义寡核苷酸；或
    (f)对PCSK9有特异性的小干扰RNA(siRNA)。
    8.一种确定PCSK9抑制剂/沉默因子的特异性的方法，其中，将来自受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度或脂质-脂质浓度比与对照进行比较，其中，所述一种或多种脂质或脂质-脂质浓度比选自表2～表5中的脂质和脂质-脂质浓度比，并且优选选自：
    Glc/GalCer(d18:1/16:0)，LacCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/16:0)，CE 16:0，CE 16:1，CE 18:1，CE 20:3，Cer(d18:0/22:0)，Cer(d18:0/24:0)，Cer(d18:0/24:1)，Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:1/24:0)，Cer(d18:1/26:0)，Cer(d18:1/26:1)，Glc/GalCer(d18:1/18:0)，Glc/GalCer(d18:1/20:0)，Glc/GalCer(d18:1/22:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Glc/GalCer(d18:1/24:1)，Glc/GalCer(d18:1/26:0)，Glc/GalCer(d18:1/26:1)，GlcCer(d18:1/16:0)，GlcCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/18:0)，LacCer(d18:1/22:0)，LacCer(d18:1/24:0)，SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，TAG 60:12，总Cer，总Glc/GalCer，总LacCer；
    LPC 16:1，二氢鞘氨醇d18:0，二氢鞘氨醇-1-磷酸d18:0，鞘氨醇d16:1，鞘氨醇 d18:1，鞘氨醇-1-磷酸d18:1，TAG 49:2，TAG 50:4，TAG 52:4，TAG 52:5，TAG 53:3，TAG 54:3，TAG 54:4，TAG 54:5，TAG 54:6，TAG 54:7，TAG 54:8，TAG 56:5，总S1P，总SA1P，总SPA，总SPH，
    Glc/GalCer(d18:1/18:0)/TAG 52:4，CE 18:1/鞘氨醇d16:1，CE 22:2/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，CE 20:3/载脂蛋白A-I(mg/dL)，CE 20:3/HDL胆固醇(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:0/22:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:0/24:0)/Cer(d18:1/18:0)，Cer(d18:0/24:0)/鞘氨醇d16:1，Cer(d18:0/24:1)/FC，Cer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，Cer(d18:1/16:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/载脂蛋白C-III(mg/dL)，Cer(d18:1/18:0)/DAG 16:0/18:1，Cer(d18:1/18:0)/PC 18:0/22:6，Cer(d18:1/18:0)/甘油三酯(EDTA)(mg/dL)，Cer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，Glc/GalCer(d18:1/18:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/22:0)/LPC 20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/PC 16:0/20:4，Glc/GalCer(d18:1/24:0)/鞘氨醇d16:1，GlcCer(d18:1/16:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，GlcCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，LacCer(d18:1/18:0)/SM(d18:1/23:1)(d18:1/22:2-OH)，PC 16:0/16:0/鞘氨醇d16:1，
    TAG 58:10/TAG 60:12，CE 18:2/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 18:3/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:3/PC 16:0/16:0，CE 20:4/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，CE 20:4/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)，CE 20:5/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，Cer(d18:0/22:0)/Cer(d18:1/22:0)，Cer(d18:0/24:0)/FC，Cer(d18:0/24:0)/PC 16:0/18:2，Cer(d18:1/16:0)/Glc/GalCer(d18:1/16:0)，Cer(d18:1/18:0)/Glc/GalCer(d18:1/24:0)，LPC 16:1/TAG 56:5，LPC 18:2/LacCer(d18:1/16:0)，LPC 18:2/SM(d18:1/16:0)(d18:1/15:1-OH)和PC 18:2/8:2/SM(d18:11/6:0)(d18:11/5:1-OH)。
    其中，所述对照是：
    (a)源自具有PCSK9功能缺失性突变的一个或多个受试对象的样品或值；
    (b)源自具有PCSK9功能缺失型脂质谱的一个或多个受试对象的样品或值；或
    (c)源自用已知的特定PCSK9抑制剂/沉默因子治疗过的一个或多个受试对象的样品或值；
    并且其中，如果所述一种或多种脂质或脂质-脂质浓度比在所述样品和所述对照之间没有差异，则说明所述PCSK9抑制剂/沉默因子治疗具有特异性；如果有差异， 则说明所述PCSK9抑制剂/沉默因子或化合物引起了非特异性作用，例如一种或多种不良副作用。
    9.如第8方面所述的方法，其中，所述PCSK9功能缺失型脂质谱是通过确定对照中的一种或多种脂质的浓度或脂质-脂质浓度比而产生的。
    10.如第1～9方面中任一方面所述的方法，其中，比较时所涉及的所述受试对象是：
    (a)正在接受PCSK9抑制剂/沉默因子或其他PCSK9靶向性化合物的治疗的患者；
    (b)正在接受PCSK9抑制剂/沉默因子或其他PCSK9靶向性化合物的治疗的试验动物；
    (c)正在接受非PCSK9抑制剂/沉默因子的降脂药的治疗患者或试验动物；或
    (d)未曾接受且目前未在接受PCSK9抑制剂/沉默因子、其他PCSK9靶向性化合物、或除PCSK9抑制剂/沉默因子之外的降脂药的治疗的患者或试验动物。
    11.如第1～7方面中任一方面或第10方面所述的方法，其中，比较时所使用的所述对照是在接受相应的降脂药治疗或PCSK9抑制剂/沉默因子治疗之前或在所述治疗中断的过程中取自同一受试对象的对照样品。
    12.如第1～10方面中任一方面所述的方法，其中，比较时所使用的所述对照是：
    (a)从之前未接受过PCSK9抑制剂/沉默因子治疗的一个或多个健康受试对象中建立的对照值；
    (b)从目前未在接受PCSK9抑制剂/沉默因子治疗的一个或多个健康受试对象中建立的对照值；
    (c)来自携带任何PCSK9基因功能缺失性突变(例如R46L(rs11591147))的一个或多个受试对象的对照样品；或
    (d)从正在接受PCSK9抑制剂/沉默因子治疗且没有药物引发的脱靶效应的迹象或历史的一个或多个受试对象中建立的对照值。
    13.如第1～12方面中任一方面所述的方法，所述方法还包括确定或评估所述受试对象中或来自所述受试对象的样品中的LDL胆固醇水平；可选的是，其中，所述受试对象具有下降的LDL胆固醇水平。
    14.如第1～13方面中任一方面所述的方法，其中，
    (a)所述样品是血液、血浆、血清或其组分(例如脂蛋白组分)或组织活检样；和/ 或
    (b)脂质浓度和/或脂质比用下述方法确定：质谱测定法，核磁共振谱法，荧光光谱法或双偏振干涉法，诸如HPLC或UPLC等高效分离方法，诸如ELISA等免疫测定，和/或利用能够特异性地结合分析物的结合性部分。
    15.如第7～14方面中任一方面所述的方法，其中，所述PCSK9抑制剂/沉默因子选自：
    (a)一种或多种针对PCSK9的抗体；
    (b)PCSK9的药物抑制剂；
    (c)抑制LDL受体与PCSK9的相互作用的小分子；
    (c)模仿LDL受体的与PCSK9相互作用的结构域的肽；
    (d)一种或多种对PCSK9 mRNA有特异性的siRNA；和/或
    (e)一种或多种对PCSK9 mRNA有特异性的反义寡核苷酸。
    16.如第8方面所述的方法，其中，所述一种或多种不良副作用是肝脏毒性。
    17.如第1～16方面中任一方面所述的方法，其中，所述方法是计算机执行的方法。
    18.如第17方面所述的方法，所述方法还包括：
    (i)用至少一个处理器获得反映出所述样品中的所述一种或多种脂质的浓度或所述一种或多种脂质-脂质浓度比的信息；
    (ii)用至少一个处理器确定所述样品中的所述一种或多种脂质的浓度或所述一种或多种脂质-脂质浓度比；和
    (iii)以用户可读的格式输出所述样品中的所述一种或多种脂质的浓度或所述一种或多种脂质-脂质浓度比。
    19.如第18方面所述的方法，所述方法还包括：
    (iv)用至少一个处理器确定所述样品中的所述一种或多种脂质的浓度或所述一种或多种脂质-脂质浓度比与对照之间的百分比差异；和
    (v)以用户可读的格式输出在确定步骤(iv)中获得的所述百分比差异。
    20.如第19方面所述的方法，所述方法还包括以下步骤：
    确定受试对象中的降脂药治疗是否具有功效；预测受试对象中的降脂药治疗是否具有功效；
    确定受试对象对降脂药治疗是否顺应；
    鉴定可用作降脂药或用于治疗心脏血管疾病及其并发症的化合物；或
    确定PCSK9抑制剂/沉默因子的特异性；
    以上步骤都基于在输出步骤中获得的所述百分比差异。
    21.如第1～19方面中任一方面所述的方法，所述方法还包括：在所述确定步骤之后，基于在所述确定步骤中获得的所述一种或多种脂质的浓度或所述一种或多种脂质-脂质浓度比，改变、补充或保持已经对所述受试对象实施的相同治疗。
    22.如第1～20方面中任一方面所述的方法，所述方法还包括：在所述确定步骤之后，基于在所述确定步骤中获得的所述一种或多种脂质的浓度或所述一种或多种脂质-脂质浓度比，治疗所述受试对象。
    23.如第1～22方面中任一方面所述的方法，其中，使用测定来确定所述一种或多种脂质的浓度或所述一种或多种脂质-脂质浓度比。
    本领域的技术人员将知晓或仅使用惯用实验手段就能够确定本文在实施例和整个专利说明书正文中所述的具体事项和实施方式的多种等价实施方式。认为此类等价实施方式在本发明的范围内并被权利要求所覆盖。

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