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1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201410720445.7 (22)申请日 2014.12.01 A01G 1/00(2006.01) A01G 7/06(2006.01) (71)申请人 四川农业大学 地址 611131 四川省成都市温江区公平镇惠 民路 211 号 (72)发明人 廖明安 林立金 罗丽 任雅君 汪志辉 吕秀兰 邓群仙 汤福义 杨代宇 张潇 刘春阳 何静 马倩倩 (74)专利代理机构 成都九鼎天元知识产权代理 有限公司 51214 代理人 管高峰 吴彦峰 (54) 发明名称 提高少花龙葵修复果园镉污染土壤能力的方 法 (57) 摘要 本发明公开了一种。
2、提高少花龙葵修复果园镉 污染土壤能力的方法, 属于环境重金属污染的修 复领域, 包括以下步骤 : 采用直接移栽或者种子 直接撒播方式将矿山生态型少花龙葵种于镉污染 果园土壤中, 待矿山生态型少花龙葵进入快速生 长期后, 叶面喷施 1 20umol/L 的脱落酸溶液 ; 喷施至少 30 天后, 对矿山生态型少花龙葵的地上 部分进行收割。本发明是一种成本低、 可操作性 强、 环境友好且有效的提高富集植物修复果园重 金属镉污染的方法。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书8页 (10)申请公布号 CN 104472175 A (4。
3、3)申请公布日 2015.04.01 CN 104472175 A 1/1 页 2 1.一种提高少花龙葵修复果园镉污染土壤能力的方法, 其特征在于包括以下步骤 : 采用直接移栽或者种子直接撒播方式将矿山生态型少花龙葵种于镉污染果园土壤中, 待矿山生态型少花龙葵进入快速生长期后, 叶面喷施 1 20umol/L 的脱落酸溶液 ; 喷施至 少 30 天后, 对矿山生态型少花龙葵的地上部分进行收割。 2.如权利要求 1 所述的一种提高少花龙葵修复果园镉污染土壤能力的方法, 其特征在 于, 所述脱落酸溶液浓度为 20umol/L。 3.如权利要求 1 或 2 所述的一种提高少花龙葵修复果园镉污染土壤能。
4、力的方法, 其特 征在于, 采用直接移栽方式准备植物幼苗的方法如下 : 自然条件下, 将收集到的矿山生态型少花龙葵幼苗直接移植在镉污染果园土壤中, 控 制密度为 1515cm。 4.如权利要求 1 或 2 所述的一种提高少花龙葵修复果园镉污染土壤能力的方法, 其特 征在于, 种子直播方式准备幼苗的方法如下 : 在自然条件下, 将收集到的矿山生态型少花龙葵种子播种于镉污染果园土壤中, 幼苗 长出后匀苗, 密度控制在 1515cm。 权 利 要 求 书 CN 104472175 A 2 1/8 页 3 提高少花龙葵修复果园镉污染土壤能力的方法 技术领域 0001 本发明属于环境重金属污染的修复领域。
5、, 尤其涉及修复果园镉污染土壤的方法。 背景技术 0002 随着近年来工业污染、 农田灌溉、 农用物资等因素造成镉污染问题日趋严重。 我国 镉污染土壤面积已达 20 万平方公里, 占总耕地面积的 1/6。作为一种新兴和环保的修复方 法, 植物修复正在逐渐兴起, 植物修复就是利用特定植物对特定重金属的远超普通植物的 富集能力, 将重金属又土壤富集于植物内, 最终将植物收割即可将重金属从土壤中脱离。 0003 少花龙葵 (Solanum photeinocarpum) 为一年生茄科植物, 高可达 1 米, 是一种常 见果园杂草, 已知对镉具有较强的富集能力。 0004 但遗憾的是, 其只是一种潜在。
6、的镉超富集植物, 因为其转运系数离1还比较远(评 价超富集植物的重要指标, 即地上部分的镉富集能力超过地下部分, 因为通常收割都是只 收割地上部分, 如果同时也收割地下部分, 虽然能够最充分地移除镉, 但由于工作量大为增 加, 难以具备现实修复意义 )。 0005 而且, 在高浓度镉污染条件下, 少花龙葵对镉的富集能力还进一步下降。 0006 因此如何提高少花龙葵对果园镉土壤污染修复能力是现有技术长久以来渴望解 决却没有解决的问题。 发明内容 0007 本发明实例的目的在于提供提高少花龙葵修复果园镉污染土壤能力的方法, 旨在 进一步提高少花龙葵修复果园镉污染土壤的能力。 0008 为了实现上述。
7、发明目的, 本发明采用的技术方案如下 : 0009 一种提高少花龙葵修复果园镉污染土壤能力的方法, 包括以下步骤 : 0010 采用直接移栽或者种子直接撒播方式将矿山生态型少花龙葵种于镉污染果园土 壤中, 待矿山生态型少花龙葵进入快速生长期后, 叶面喷施120umol/L的脱落酸溶液 ; 喷 施至少 30 天后, 对矿山生态型少花龙葵的地上部分进行收割。 0011 作为选择, 所述脱落酸溶液浓度为 20umol/L。 0012 作为进一步选择, 采用直接移栽方式准备植物幼苗的方法如下 : 0013 自然条件下, 将收集到的矿山生态型少花龙葵幼苗直接移植在镉污染果园土壤 中, 控制密度为 151。
8、5cm。 0014 作为另一进一步选择, 种子直播方式准备幼苗的方法如下 : 0015 在自然条件下, 将收集到的矿山生态型少花龙葵种子播种于镉污染果园土壤中, 幼苗长出后匀苗, 密度控制在 1515cm。 0016 上述方案中, 所述矿山生态型少花龙葵是指来源或生长于矿区的少花龙葵。所述 快速生长期通常在种植一个月后, 少花龙葵的栽培方式通常为 : 浇水确保田间土壤水分持 水量为 80, 进行矿山生态型少花龙葵的日常管理 ; 所述日常管理包括匀苗、 清除杂草。 说 明 书 CN 104472175 A 3 2/8 页 4 0017 脱落酸 (abscisic acid, ABA), 一种抑制。
9、生长的植物激素, 因能促使叶子脱落而得 名。 其主要作用有 : 促进脱落、 抑制生长、 促进休眠、 引起气孔关闭、 调节种子胚的发育、 增加 抗逆性和影响性分化。其中, 作为增加抗逆性的使用, 主要是增强植物抗寒抗冻的能力, 以 及提高植物的抗旱力和耐盐力。 0018 作用机理 : 脱落酸的生理作用主要是导致休眠及促进脱落。用脱落酸处理植物生 长旺盛的小枝, 可以引起与休眠相同的状态 ; 产生芽鳞状的叶子代替展开的营养叶 ; 减少 顶端分生组织的有丝分裂活动 ; 并能引起下面的叶子脱落和防止休眠的解除。用脱落酸处 理能萌发的种子, 可以使之休眠。这种对萌发的抑制作用可以用赤霉素或细胞分裂素处理。
10、 来抵消或逆转。脱落酸能拮抗赤霉素的代替长日照导致长日植物抽苔开花的作用。它还能 使少数短日植物在非诱导周期的条件下开花。 反之, 脱落酸的几种作用也可用赤霉素抵消。 例如使用赤霉素就能克服脱落酸对遗传性高秆玉米的伸长和对种子萌发及马铃薯发芽的 抑制作用。 此外, 脱落酸的作用也与细胞分裂素相反, 脱落酸在植物体内既有拮抗赤霉素的 作用, 也有拮抗细胞分裂素的作用。但是这些拮抗作用非常复杂。例如莴苣种子萌发需要 光, 赤霉素可以代替光。 而脱落酸可以抵消赤霉素的促进萌发的作用, 但继续提高赤霉素的 浓度却不能克服脱落酸的作用、 恢复对萌发的促进。 0019 其中, 由于脱落酸对于耐盐力的提高,。
11、 主要是由于脱落酸能够通过保卫细胞膜上 的信号转导, 促使气孔关闭, 并诱导抗逆性蛋白质的合成, 同时能够调控部分基因的表达, 以此增强植物抵抗逆境的能力。 因此, 在盐碱地中, 对普通植物喷洒脱落酸可以抑制高浓度 钠离子的吸收 : 一方面抑制过多钠离子进入植物体内, 另一方面抑制高浓度钠离子对其他 土壤营养元素的竞争抑制, 使得其他营养元素可以较顺畅地被植物吸收。最终的结果是提 高植物在盐碱地的生物量。 0020 而重金属离子对植物的毒害作用, 也类似盐碱地, 因为都是较高浓度的金属离子 : 一方面是重金属离子进入植物体内后对植物的毒害, 另一方面也是重金属离子对其他土壤 营养元素的竞争抑制。
12、。 0021 而对于重金属富集植物而言, 却要求该植物能够尽可能地将重金属富集于体内, 显然由已知知识可知, 脱落酸会抑制该过程。 0022 因此, 现有技术中虽然常见在农业生产上, 通过喷施脱落酸以提高普通植物的高 浓度盐的抗逆性, 但如前所述的原因, 从未有人想过通过对重金属富集植物喷洒脱落酸, 以 提高其对重金属离子的富集能力, 特别是提高其转运系数, 显然这与现有知识相背离。 0023 本发明的有益效果 : 本发明人在研究中意外地发现, 对特定的植物(少花龙葵)的 特定类型 ( 矿山生态型 ) 喷洒特定浓度的脱落酸 (1 20umol/L) 能够特定地提高其对特 定的重金属离子(镉)的。
13、富集能力, 特别更意料外地提高了其转运系统, 使得原本并不具有 显著镉污染修复意义的少花龙葵具备了现实的实用价值。 具体实施方式 0024 为了使本发明的目的、 技术方案及优点更加清楚明白, 以下结合实施例, 对本发明 进行进一步详细说明。 应当理解, 此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明, 并不用于 限定本发明。 0025 一种提高少花龙葵修复果园镉污染土壤能力的方法, 包括以下步骤 : 说 明 书 CN 104472175 A 4 3/8 页 5 0026 采用直接移栽或者种子直接撒播方式将矿山生态型少花龙葵种于镉污染果园土 壤中, 待矿山生态型少花龙葵进入快速生长期后, 叶面喷施 1。
14、 20umol/L 的脱落酸溶液 (优选脱落酸溶液浓度为20umol/L) ; 喷施至少30天后, 对矿山生态型少花龙葵的地上部分 进行收割。 0027 其中, 采用直接移栽方式准备植物幼苗的方法如下 : 0028 自然条件下, 将收集到的矿山生态型少花龙葵幼苗直接移植在镉污染果园土壤 中, 控制密度为 1515cm。 0029 其中, 种子直播方式准备幼苗的方法如下 : 0030 在自然条件下, 将收集到的矿山生态型少花龙葵种子播种于镉污染果园土壤中, 幼苗长出后匀苗, 密度控制在 1515cm。 0031 为了便于说明, 仅仅示出了与本发明相关的部分。 0032 实例 1 : ( 矿山生态。
15、型少花龙葵试验 ) 0033 本发明实施例的实施地点 : 设在四川农业大学雅安校区农场。 0034 材料 : 矿山生态型少花龙葵, 其种子取自四川汉源县唐家山铅锌矿。 四川汉源县唐 家铅锌矿区(东经 : 10238, 北纬 : 2924)位于四川省雅安市汉源县唐家乡, 平均海 拔 890m。现保有铅锌矿储量为 145.8 万 t, 年采矿 10 万 t, 已连续开采了 15 年, 已零星堆积 了约60多万m3废矿渣。 矿区地处北温带与季风带之间的山地亚热带气候区, 具有典型的干 热河谷气候特点, 多年平均气温 17.9, 多年平均降雨量为 741.8mm, 多年平均日照 1475.8 小时, 。
16、多年平均蒸发量为 1248.2mm。 0035 本发明实施例采用盆栽模拟土壤重金属污染的方法, 将取自果园的土壤风干、 压 碎、 过 5mm 筛后, 分别称取 4.0kg 装于 18cm21cm( 高 直径 ) 的塑料盆内, 加入分析纯 CdCl22.5H2O 溶液, 使其镉浓度为 10mg/kg, 并与土壤充分混匀, 自然放置平衡 4 周后再次 混合备用。将矿山生态型少花龙葵种子撒播于农田中, 待矿山生态型少花龙葵长出 2 片真 叶后移栽至盆中, 每盆种植 2 株。待矿山生态型少花龙葵进入快速生长期 ( 种植一个月 ) 后, 叶面喷施脱落酸溶液。 试验设置6个浓度处理, 分别为 : 0、 1。
17、、 5、 10、 20、 40umol/L, 每个处 理重复 3 次, 共计 18 盆, 每盆喷施 50mL 脱落酸溶液。矿山生态型少花龙葵整个生长期均放 置于透明遮雨棚内, 根据土壤水分实际情况不定期浇水确保土壤水分保持在田间持水量的 80左右, 喷施脱落酸一个月后矿山生态型少花龙葵处于盛花期, 整株收获。 0036 本发明实施结果如下 : 0037 脱落酸对矿山生态型少花龙葵镉积累量的影响见表 1 : 0038 表 1 脱落酸对矿山生态型少花龙葵镉积累量的影响 0039 说 明 书 CN 104472175 A 5 4/8 页 6 0040 随脱落酸浓度的增加, 矿山生态型少花龙葵根系镉积。
18、累量也随着升高 ( 表 1), 最 高为脱落酸浓度为 40umol/L 时, 相比对照高出 97.93。随脱落酸浓度的增加, 矿山生态 型少花龙葵茎杆、 叶片及地上部分镉积累量呈先增后降的趋势, 均以脱落酸浓度为 20umol/ L时最高, 分别比对照提高了60.60、 68.36和63.94。 从整株镉积累量来看, 喷施不同 浓度的脱落酸均提高了矿山生态型少花龙葵的镉积累量, 当脱落酸浓度为 20umol/L 时最 大, 其次为 40umol/L, 分别比对照提高了 67.50和 66.20。 0041 脱落酸对矿山生态型少花龙葵镉含量影响见表 2 : 0042 表 2 脱落酸对矿山生态型少。
19、花龙葵镉含量影响 0043 0044 注 : 转运系数地上部分镉含量 / 根系镉含量。 0045 由表 2 可得, 当脱落酸浓度在 0umol/L-20umol/L 之间时, 矿山生态型少花龙葵根 系、 茎杆、 叶片和地上部镉含量都随脱落酸浓度的增加而增加 ; 当脱落酸浓度达 40umol/L 时, 较脱落酸浓度为 20umol/L 时有所降低, 但仍然显著高于对照。叶面喷施不同浓度的脱 落酸后, 矿山生态型少花龙葵根系镉含量差别不大 ; 茎杆和叶片的镉含量均以脱落酸浓度 为 20umol/L 时最高, 分别比对照提高了 34.39、 32.46。不同脱落酸浓度处理的矿山生 态型少花龙葵地上部。
20、分镉含量的大小顺序为 : 20umol/L10umol/L40umol/L5umol/ L 1umol/L 0umol/L。从转运系数来看, 仍以脱落酸浓度为 20umol/L 时最高。 说 明 书 CN 104472175 A 6 5/8 页 7 0046 实例结论 : 综上可知, 脱落酸浓度为 20umol/L 时, 矿山生态型少花龙葵的镉富集 能力得到大幅提升, 特别是转运系数更是显著提升, 已极为接近 1 的超富集植物的标准。 0047 对比实例 1 : ( 农田生态型少花龙葵试验 ) 0048 本发明实施例的实施地点 : 设在四川农业大学雅安校区农场。 0049 材料 : 农田生态型。
21、少花龙葵, 其种子取自四川农业大学雅安校区农场。 四川农业大 学新区农场(北纬3023, 东经10348), 位于四川省雅安市雨城区, 平均海拔620m, 属亚热带湿润季风气候区, 多年平均气温 16.2, 多年平均降雨量为 1743.3mm, 多年平均 日照 1035 小时, 多年平均蒸发量为 1011.2mm。 0050 本发明实施例采用盆栽模拟土壤重金属污染的方法, 将取自果园的土壤风干、 压 碎、 过 5mm 筛后, 分别称取 4.0kg 装于 18cm21cm( 高 直径 ) 的塑料盆内, 加入分析纯 CdCl22.5H2O 溶液, 使其镉浓度为 10mg/kg, 并与土壤充分混匀,。
22、 自然放置平衡 4 周后再次 混合备用。将农田生态型少花龙葵种子撒播于农田中, 待农田生态型少花龙葵长出 2 片真 叶后移栽至盆中, 每盆种植 2 株。待农田生态型少花龙葵进入快速生长期 ( 种植一个月 ) 后, 叶面喷施脱落酸溶液。 试验设置6个浓度处理, 分别为 : 0、 1、 5、 10、 20、 40umol/L, 每个处 理重复 3 次, 共计 18 盆, 每盆喷施 50mL 脱落酸溶液。农田生态型少花龙葵整个生长期均放 置于透明遮雨棚内, 根据土壤水分实际情况不定期浇水确保土壤水分保持在田间持水量的 80左右, 喷施脱落酸一个月后农田生态型少花龙葵处于盛花期, 整株收获。 0051。
23、 本发明实施结果如下 : 0052 脱落酸对农田生态型少花龙葵镉积累的影响见表 3。 0053 表 3 脱落酸对农田生态型少花龙葵镉积累的影响 0054 0055 随脱落酸浓度的增加, 农田生态型少花龙葵根系镉积累量呈增加的趋势, 但茎杆、 叶片、 地上部分和整株镉积累量呈先增后降的趋势 ( 表 1)。农田生态型少花龙葵茎杆和 叶片镉积累量均在脱落酸浓度为 20umol/L 时达到最大, 分别比各自对照提高了 34.02、 49.85 ; 而根系镉积累在脱落酸浓度为 40umol/L 时最大, 比对照提高了 44.35, 但只略 高于脱落酸浓度为 20umol/L 的镉积累量。就地上部镉积累量。
24、来看, 脱落酸浓度为 20umol/ L 时镉积累量最大, 较对照提高了 42.60。农田生态型少花龙葵整株镉积累量的大小顺序 为 : 20umol/L 40umol/L 10umol/L 5umol/L 1umol/L 0umol/L。 说 明 书 CN 104472175 A 7 6/8 页 8 0056 脱落酸对农田生态型少花龙葵镉含量影响见表 4 : 0057 表 4 脱落酸对农田生态型少花龙葵镉含量影响 0058 0059 注 : 转运系数地上部分镉含量 / 根系镉含量。 0060 由表 4 可知, 当脱落酸浓度在 0umol/L-20umol/L 之间时, 农田生态型少花龙葵根 系。
25、、 茎杆、 叶片和地上部镉含量均随脱落酸浓度的增加而增加, 在脱落酸浓度达到 20umol/ L 时达到最大值, 分别比各自对照提高了 23.20、 17.82、 30.13、 24.71 ; 当浓度达到 40umol/L 时, 各部分镉含量较脱落酸浓度为 20umol/L 有所降低, 但均显著高于对照。就于 转运系数而言, 以脱落酸浓度为 10umol/L 时最大, 其次为脱落酸浓度为 20umol/L, 最低为 脱落酸浓度为 40umol/L 处理。 0061 实例结论 : 综上可知, 脱落酸浓度为 20umol/L 时, 农田生态型少花龙葵的镉富集 能力最高, 而转运系数也有所提升。但与。
26、矿山生态型少花龙葵相比却显现出了明显的不一 致 : 该脱落酸浓度下的镉富集能力低于矿山生态型少花龙葵, 最大的差别是, 脱落酸对农田 生态型少花龙葵的转运系数意外地并不具备实质提升, 在40umol/L最高, 且在20umol/L时 几乎无提升。 0062 对比实例 2 : 脱落酸对少花龙葵生物量影响 ( 处理方式如前 ) : 0063 脱落酸对农田生态型少花龙葵生物量影响见表 5。 0064 表 5 脱落酸对农田生态型少花龙葵生物量影响 0065 0066 说 明 书 CN 104472175 A 8 7/8 页 9 0067 随脱落酸浓度的升高, 农田生态型少花龙葵根系生物量、 茎杆生物量。
27、、 叶片生物 量、 地上部生物量及总生物量均随脱落酸浓度的升高而显著增加 ( 表 5)。当脱落酸浓度为 40umol/L 时, 农田生态型少花龙葵根系生物量、 地上部生物量及整株生物量均达到最大值, 分别比各自对照增加了 18.62、 16.96、 17.33。就农田生态型少花龙葵根系和茎杆生 物量而言, 当脱落酸浓度超过 20umol/L 时增加趋势缓慢。从农田生态型少花龙葵根冠比来 看, 各处理间差别不大, 但均高于对照。 0068 脱落酸对矿山生态型少花龙葵生物量影响结果见表 6 : 0069 表 6 脱落酸对矿山生态型少花龙葵生物量影响 0070 0071 由表 6 可知, 随着脱落酸。
28、浓度的增加, 矿山生态型少花龙葵根系生物量显著增加, 当脱落酸浓度达到 40umol/L 时, 根系生物量比对照增加了 82.05。矿山生态型少花龙葵 茎杆、 叶片、 地上部分生物量及整株生物量与根系变化趋势相同, 这与农田生态型少花龙葵 的表现一致。单就茎杆生物量来看, 脱落酸低浓度时 (1umol/L) 时与对照差别不大, 生物量 仍然在脱落酸浓度达到40umol/L时最大, 较对照增加了31.07。 就叶片生物量来看, 仍然 在脱落酸低浓度 (1umol/L) 时变化不显著, 而随脱落酸浓度的增加而增大。矿山生态型少 花龙葵整株生物量在脱落酸浓度为 1umol/L、 5umol/L、 1。
29、0umol/L、 20umol/L、 40umol/L 分别 比对照增加了 4.15、 14.92、 23.98、 29.49、 42.20。 0072 实例结论 : 脱落酸对少花龙葵生物量的影响与脱落酸对普通植物基本一致, 不管 是农田生态型还是矿山生态型, 随着浓度的提高, 生物量基本线性提高。但是, 其表现与脱 落酸对不同生态类型的少花龙葵的镉富集能力和转运系数的影响却意外地截然不同。 0073 由此可知, 虽然脱落酸提高少花龙葵的镉富集能力和转运系数的原因不明, 但可 说 明 书 CN 104472175 A 9 8/8 页 10 以确认的是, 与脱落酸带来的生物量提升无关, 即公知的脱落酸对普通植物的可以提高耐 盐性的特性并无教导意义。 0074 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已, 并不用以限制本发明, 凡在本发明的精 神和原则之内所作的任何修改、 等同替换和改进等, 均应包含在本发明的保护范围之内。 说 明 书 CN 104472175 A 10 。