一种提高滇重楼根状茎中多种甾体皂苷含量的方法.pdf

本发明公开了一种提高滇重楼根状茎中多种甾体皂苷含量的方法，采用以下步骤：用质量百分比浓度≥75％的酒精将二氢茉莉酮酸甲酯溶解，然后加水稀释配成浓度为30～60mg/L的二氢茉莉酮酸甲酯溶液；在一个自然年度的7～8月份对展叶完全的滇重楼叶片均匀喷施一次二氢茉莉酮酸甲酯溶液，直到叶片上的二氢茉莉酮酸甲酯溶液将要滴落时停止喷施。可在每年的7～8月份喷施一次，直至滇重楼的根状茎可以入药。本发明方法所需药品、仪器设备简单便宜，因此投入少，成本低。实施过程简单易行，能显著增加皂苷含量，且本方法对人畜无毒害，对环境无污染，具有广阔的应用前景。

1.  一种提高滇重楼根状茎中多种甾体皂苷含量的方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)用质量百分比浓度≥75％的酒精将二氢茉莉酮酸甲酯溶解，然后加水稀释配成浓度为30～60mg/L的二氢茉莉酮酸甲酯溶液；
(2)在一个自然年度的7～8月份对展叶完全的滇重楼叶片均匀喷施一次二氢茉莉酮酸甲酯溶液，直到叶片上的二氢茉莉酮酸甲酯溶液将要滴落时停止喷施。

2.  根据权利要求1所述的提高滇重楼根状茎中多种甾体皂苷含量的方法，其特征在于：步骤(1)中是用质量百分比浓度≥75％的酒精将二氢茉莉酮酸甲酯溶解，然后加水稀释配成浓度为45mg/L的二氢茉莉酮酸甲酯溶液。

3.  根据权利要求1或2所述的提高滇重楼根状茎中多种甾体皂苷含量的方法，其特征在于：步骤(2)中是于傍晚时分，对展叶完全的滇重楼叶片均匀喷施一次二氢茉莉酮酸甲酯溶液。

4.  根据权利要求1～3中任一项所述的提高滇重楼根状茎中多种甾体皂苷含量的方法，其特征在于：步骤(2)中是对展叶完全的滇重楼叶片的正反两面均匀喷施一次二氢茉莉酮酸甲酯溶液。

5.  根据权利要求1～4中任一项所述的提高滇重楼根状茎中多种甾体皂苷含量的方法，其特征在于：步骤(2)中是在每年的7～8月份对展叶完全的滇重楼叶片均匀喷施一次二氢茉莉酮酸甲酯溶液，直至其根状茎可以入药。

一种提高滇重楼根状茎中多种甾体皂苷含量的方法
技术领域
本发明涉及一种提高植物体地下根状茎部分中多种甾体皂苷含量的方法，具体的说，涉及一种利用二氢茉莉酮酸甲酯促进滇重楼根状茎中多种甾体皂苷含量的方法。
背景技术
滇重楼是延龄草科重楼属的多年生草本植物，主要分布于中国西南部，特别是云南、四川及贵州等地。滇重楼是名贵的药用植物，其根状茎中含有的甾体皂苷类化合物主要包括偏诺皂苷和薯蓣皂苷，是其主要活性成分，具有抗癌、止血、消炎、镇痛、止咳平喘和免疫调节等活性。滇重楼生长发育的物候特点表现在：4～6月份根状茎顶芽出土(出苗)，随后展叶、展花、花粉囊开放(或叶、花、花粉囊同时展放)，5～7月份生长停止，9～10月份果实开裂，11～12月份地上部分枯萎、倒苗。滇重楼植物的生理特征表现为：光合面积小，一二年生幼苗只有1片叶，4年生有4～6片叶，5年成熟后也只有5～11枚叶片；叶片光能利用率低，光合能力弱；生长期短，仅6～7个月时间。
由此可以看出，滇重楼每年生物量积累较少，致使从幼苗到根状茎入药至少需要7～10年的时间。近年来，随着市场对其需求量的迅速增长，人们在野外肆意地掠夺性采挖、生态环境的人为破坏、滇重楼资源分布破碎化，加之滇重楼本身繁殖率低等因素严重影响了其在原产地的生长和繁衍，导致滇重楼已逐步步入濒危植物行列，重楼的工业药用原料出现严重紧缺。从实施可持续发展战略和保存滇重楼自然资源的角度出发，对其进行人工栽培是一条必然之路，因此进行滇重楼的人工驯化栽培已迫在眉睫。
二氢茉莉酮酸甲酯是茉莉酸类衍生物。近期发现茉莉酸类物质在植物细胞的多种逆境反应中起信号介导的作用，引起细胞抗逆反应产物的表达，对多种次生代谢产物的合成具有诱导作用，被认为是非常有效的诱导子。
目前尚未出现利用二氢茉莉酮酸甲酯来提高滇重楼根状茎部分中甾体皂苷含量的报道。
发明内容
本发明的目的在于弥补现有技术的不足，提供一种提高滇重楼根状茎中多种甾体皂苷含量的方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：一种提高滇重楼根状茎中多种甾体皂苷含量的方法，包括以下步骤：
(1)用质量百分比浓度≥75％的酒精将二氢茉莉酮酸甲酯溶解，然后加水稀释配成浓度为30～60mg/L的二氢茉莉酮酸甲酯溶液；
(2)在一个自然年度的7～8月份对展叶完全的滇重楼叶片均匀喷施一次二氢茉莉酮酸甲酯溶液，直到叶片上的二氢茉莉酮酸甲酯溶液将要滴落时停止喷施。
上述步骤(1)中是用质量百分比浓度≥75％的酒精将二氢茉莉酮酸甲酯溶解，然后加水稀释配成浓度为45mg/L的二氢茉莉酮酸甲酯溶液。
上述步骤(2)中是于傍晚时分，对展叶完全的滇重楼叶片均匀喷施一次二氢茉莉酮酸甲酯溶液。
上述步骤(2)中是对展叶完全的滇重楼叶片的正反两面均匀喷施一次二氢茉莉酮酸甲酯溶液。
上述步骤(2)中是在每年的7～8月份对展叶完全的滇重楼叶片均匀喷施一次二氢茉莉酮酸甲酯溶液，直至其根状茎可以入药。
实验结果表明，本发明中在每年的7～8月份于傍晚时分，对展叶完全的滇重楼植株的叶片正反两面均匀喷施一次浓度为45mg/L的二氢茉莉酮酸甲酯溶液，直至其根状茎可以入药，能够达到最佳效果。
本发明具有以下优点：
(1)所需药品、仪器设备简单便宜，因此投入少，成本低。
(2)实施过程简单易行，使当年生和往年生根状茎中总的皂苷含量分别提高了15％和38％，对人畜无毒害，对环境无影响。该方法对于提高滇重楼大田种植的产量和质量具有重要的意义。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
用质量百分比浓度≥75％的酒精将二氢茉莉酮酸甲酯溶解，酒精用量使二氢茉莉酮酸甲酯能完全溶解即可，再加水稀释配成浓度为30mg/L的二氢茉莉酮酸甲酯溶液，在每年的7～8月份于傍晚时分，对滇重楼叶片正反两面均匀喷施二氢茉莉酮酸甲酯溶液，另取与上述喷施量等量的水，对未喷施二氢茉莉酮酸甲酯溶液的滇重楼植株上的叶片正反两面进行均匀喷施，以作为对照。每年喷施一次，直到其根状茎可以入药。如遇下雨，可进行补喷。待滇重楼倒苗后，用RP-HPLC方法检测根状茎中甾体皂苷含量。计算得出其当年生和往年生根状茎中总的皂苷含量增长率分别为10％和26％。
实施例2
采用与实施例1相似的方法进行实验，不同之处在于采用浓度为45mg/L的二氢茉莉酮酸甲酯溶液进行喷施。计算得出其当年生和往年生根状茎中总的皂苷含量增长率分别为15％和38％。
实施例3
采用与实施例1相似的方法进行实验，不同之处在于采用浓度为60mg/L的二氢茉莉酮酸甲酯溶液进行喷施。计算得出其当年生和往年生根状茎中总的皂苷含量增长率分别为10％和11％。
本发明方法效果显著，为增加滇重楼根状茎中甾体皂苷含量、改善根状茎质量提供了一条简单可行的途径。