1,4二取代基1,4二氢苯并吡喃4,3C吡唑类化合物.pdf

《1,4二取代基1,4二氢苯并吡喃4,3C吡唑类化合物.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《1,4二取代基1,4二氢苯并吡喃4,3C吡唑类化合物.pdf（16页完整版）》请在专利查询网上搜索。

1、(10)申请公布号 CN 102391272 A (43)申请公布日 2012.03.28 C N 1 0 2 3 9 1 2 7 2 A *CN102391272A* (21)申请号 201110297019.3 (22)申请日 2011.09.30 C07D 491/052(2006.01) A61K 31/4162(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/02(2006.01) (71)申请人浙江工业大学 地址 310014 浙江省杭州市下城区朝晖六区 潮王路18号 (72)发明人陈志卫 苏为科 王志华 (74)专利代理机构杭州天正专利事务所有限公 司 。

2、33201 代理人黄美娟 王兵 (54) 发明名称 1,4-二取代基-1,4-二氢苯并吡喃4,3-c 吡唑类化合物 (57) 摘要 本发明公开了一种1，4-二取代基-1，4-二氢 苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物，并公开了其制 备方法和用途：预先以双(三氯甲基)碳酸酯和 N，N-二甲基甲酰胺为原料制成Vilsmeier试剂， 在所述的Vilsmeier试剂中加入如黄烷酮化合物 I，经氯化甲酰化反应得到黄烷酮-4-氯-3-甲 酰基化合物II，所得黄烷酮-4-氯-3-甲酰 基类化合物与取代苯肼盐酸盐缩合制得黄烷 酮-4-氯-3-苯腙化合物III，苯腙化合物III在 氢化钠作用下环合制得目标化合物IV。

3、。本发明提 供的1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c 吡唑类化合物对肿瘤细胞株有体外抑制作用，其 中化合物IVb和IVf对人白血病细胞株HL60体外 抑制作用显著。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 3 页 说明书 12 页 CN 102391279 A 1/3页 2 1.如式(IV)所示的1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物： 式(IV)中，A环上的H被R 1 单取代、多取代或不被取代，取代基R 1 为CH 3 -；m表示取代 基R 1 的个数，m为04的整数； B环上的H被R 2 单取代、多取。

4、代或不被取代，取代基R 2 为Cl、CH 3 O-或CH 3 -；n表示取代 基R 2 的个数，n为04的整数； D环上的H被R 3 单取代、多取代或不被取代，取代基R 3 为Cl或CH 3 O-；p表示取代基R 3 的个数，n为05的整数； 式(IV)中的A、B、D用于描述不同位置的环，不表示任何化学含义。 2.如权利要求1所述的如式(IV)所示的1，4-二取代基-1，4二氢苯并吡喃4，3-c吡 唑类化合物的制备方法，其特征在于方法包括如下过程：以式(I)所示的黄烷酮化合物为 底物，加入到预先制备好的Vilsmeier试剂中，反应得到式(II)所示的黄烷酮-4-氯-3-甲 酰基化合物；所得式。

5、(II)所示的黄烷酮-4-氯-3-甲酰基化合物与式(V)所示的取代苯 肼盐酸盐缩合，制得式(III)所示的黄烷酮-4-氯-3-苯腙化合物；式(III)所示的黄烷 酮-4-氯-3-苯腙化合物在氢化钠作用下环合制得式(IV)所示的1，4-二取代基-1，4-二 氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物； 式(I)、式(II)或式(III)中，A环上的H被R 1 单取代、多取代或不被取代，取代基R 1 为CH 3 -； B环上的H被R 2 单取代、多取代或不被取代，取代基R 2 为Cl、CH 3 O-或CH 3 -； 式(V)或式(III)中，D环上的H被R 3 单取代、多取代或不被取代，取代基R 3 为Cl。

6、或 CH 3 O-； 式(I)、式(II)或式(III)中的A、B、D用于描述不同位置的环，不表示任何化学含义。 3.如权利要求2所述的1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物的 权 利 要 求 书CN 102391272 A CN 102391279 A 2/3页 3 制备方法，其特征在于所述方法包括以下步骤： (1)在05下将双(三氯甲基)碳酸酯缓慢加入N，N-二甲基甲酰胺中，加料完毕 后，升至室温，保温2040分钟制得Vilsmeier试剂，然后向Vilsmeier试剂中加入式(I) 所示的黄烷酮化合物，于3080反应15小时，所得反应液a后处理制得式(II)所示 的。

7、黄烷酮4-氯-3-甲酰基化合物；所述的式(I)所示的黄烷酮化合物、双(三氯甲基)碳 酸酯的物质的量比为10.52； (2)式(II)所示的黄烷酮-4-氯-3-甲酰基化合物在有机溶剂A中，在碱性试剂存在 下与式(V)所示的取代苯肼盐酸盐于2080下进行缩合反应26小时，所得反应液 b后处理制得式(III)所示的黄烷酮-4-氯-3-苯腙化合物；所述的式(II)所示的黄烷 酮-4-氯-3-甲酰基化合物与式(V)所示的取代苯肼盐酸盐的物质的量比为112； 所述有机溶剂A为甲醇、乙醇、四氢呋喃、乙腈中的任意一种；所述碱性试剂为碳酸钾、 碳酸钠、三乙胺、吡啶、乙酸钠中的任意一种； (3)式(III)所示的。

8、黄烷酮-4-氯-3-苯腙化合物在氮气保护下，以N，N-二甲基甲 酰胺为溶剂，氢化钠存在下，于100160反应56小时，反应完毕后，所得反应液后处 理制得式(IV)所示的1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物；所述式 (III)所示的黄烷酮-4-氯-3-苯腙类化合物、氢化钠的物质的量比为112。 4.如权利要求3所述的1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物 的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中，所述反应液a后处理方法为：反应结束后，反应 液a倒入冰水中，搅拌，用饱和NaHCO 3 溶液调pH值到中性，静置分层，水层用二氯甲烷萃 取，取有机层用饱和食盐。

9、水洗涤后干燥，过滤，取滤液减压浓缩，制得式(II)所示的黄烷 酮-4-氯-3-甲酰基化合物。 5.如权利要求3所述的1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物的 制备方法，其特征在于所述步骤(2)中，所述反应液b后处理方法为：反应结束后，反应液 b减压回收溶剂，蒸干后加入水，用二氯甲烷萃取，取有机层用饱和氯化钠溶液洗涤后干燥， 过滤，取滤液减压浓缩，制得式(III)所示的黄烷酮-4-氯-3-苯腙化合物。 6.如权利要求3所述的1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物的 制备方法，其特征在于所述步骤(3)中，所述反应液c后处理方法为：反应结束后，反应液 c中。

10、加入水，用二氯甲烷萃取，取有机层用饱和氯化钠溶液洗涤后干燥，过滤，取滤液减压浓 缩，所得粗品用硅胶柱层析，以石油醚、乙酸乙酯体积比为301的混合液为洗脱剂，洗脱 液蒸除溶剂制得式(IV)所示的1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物 纯品。 7.如权利要求1所述的1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物用 于制备抗肿瘤药物的应用。 8.如权利要求7所述的应用，其特征在于所述，其特征在于1，4-二取代基-1，4-二氢 苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物在制备抗白血病药物中的应用。 9.如权利要求8所述的应用，其特征在于所述1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃。

11、4， 3-c吡唑类化合物为下列之一： 权 利 要 求 书CN 102391272 A CN 102391279 A 3/3页 4 权 利 要 求 书CN 102391272 A CN 102391279 A 1/12页 5 1,4- 二取代基 -1,4- 二氢苯并吡喃 4,3-c 吡唑类化合物 ( 一 ) 技术领域 0001 本发明涉及一种含吡唑结构单元的黄酮类衍生物的合成方法，特别涉及1，4-二 取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物的制备方法，以其在制备抗肿瘤药物中 的应用。 ( 二 ) 背景技术 0002 黄酮类化合物是一类重要的天然产物，具有很多重要的生物和药理活性，除抗菌。

12、、 消炎、抗突变、降压、清热解毒、镇静、利尿等作用外，在抗氧化、抗癌、防癌、抑制脂肪酶等方 面也有显著效果。 0003 很多具有抗肿瘤活性的黄酮类衍生物被从植物中分离出来或被化学工作者合 成出来。例如，2009年陈道峰等人报道了从植物苦参中分离得到具有抗癌活性的二氢黄 酮类化合物，该类化合物对KB、A549、DU145及HCT-8等4种肿瘤细胞株有较强抑制作用 (CN102100689A)。2007年胡永洲等人报道了一种多取代黄烷并噻二唑啉类化合物的制备方 法及其对多种肿瘤细胞株的抑制作用(CN1793148A)。 0004 此外，很多含吡唑结构的化合物具有抗肿瘤活性。例如，2009年朱海亮等。

13、人报道了 一系列新型的含有吡唑环的硫脲类衍生物对人体口腔上表皮癌细胞株(KB)和人白血病细 胞株(K562)有明显的 抑制作用(CN101735150A)。 ( 三 ) 发明内容 0005 本发明的目的是提供一类具有抗肿瘤作用的含吡唑环的黄烷酮衍生物：1，4-二 取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物，结构通式如式(IV)所示： 0006 0007 式(IV)中，A环上的H被R 1 单取代、多取代或不被取代，取代基R 1 为CH 3 -；m表示 取代基R 1 的个数，m为04的整数；m为0时，表示A环上的H不被取代； 0008 B环上的H被R 2 单取代、多取代或不被取代，取代基R。

14、 2 为Cl、CH 3 O-或CH 3 -；n表示 取代基R 2 的个数，n为04的整数；n为0时，表示B环上的H不被取代； 0009 D环上的H被R 3 单取代、多取代或不被取代，取代基R 3 为Cl或CH 3 O-；p表示取代 基R 3 的个数，n为05的整数；p为0时，表示D环上的H不被取代； 0010 式(IV)中的A、B、C、D、E用于描述不同位置的环，不表示任何化学含义。 0011 本发明的另一个目的是提供1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类 说 明 书CN 102391272 A CN 102391279 A 2/12页 6 化合物的制备方法，本发明的合成路线如。

15、下式所示： 0012 0013 更具体的，如式(IV)所示的1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类 化合物的制备方法包括如下过程：以式(I)所示的黄烷酮化合物为底物，加入到预先制备 好的Vilsmeier试剂中，反应得到式(II)所示的黄烷酮-4-氯-3-甲酰基化合物；所得式 (II)所示的黄烷酮-4-氯-3-甲酰基化合物与式(V)所示的取代苯肼盐酸盐缩合，制得式 (III)所示的黄烷酮-4-氯-3-苯腙化合物；式(III)所示的黄烷酮-4-氯-3-苯腙化合 物在氢化钠作用下环合制得式(IV)所示的1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡 唑类化合物； 0014 00。

16、15 0016 式(I)、式(II)或式(III)中，A环上的H被R 1 单取代、多取代或不被取代，取代 基R 1 为CH 3 -； 0017 B环上的H被R 2 单取代、多取代或不被取代，取代基R 2 为Cl、CH 3 O-或CH 3 -； 说 明 书CN 102391272 A CN 102391279 A 3/12页 7 0018 式(V)或式(III)中，D环上的H被R 3 单取代、多取代或不被取代，取代基R 3 为Cl 或CH 3 O-； 0019 式(I)、式(II)或式(III)中的A、B、D用于描述不同位置的环，不表示任何化学 含义。 0020 更进一步，本发明所述的1，4-二。

17、取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合 物的制备方法包括以下步骤： 0021 (1)在05下将双(三氯甲基)碳酸酯缓慢加入N，N-二甲基甲酰胺中，加料 完毕后，升至室温，保温2040分钟制得Vilsmeier试剂，然后向Vilsmeier试剂中加入式 (I)所示的黄烷酮化合物，于3080反应15小时，所得反应液a后处理制得式(II) 所示的黄烷酮-4-氯-3-甲酰基化合物；所述的式(I)所示的黄烷酮化合物、双(三氯甲 基)碳酸酯的物质的量比为10.52； 0022 (2)式(II)所示的黄烷酮-4-氯-3-甲酰基化合物在有机溶剂A中，在碱性试剂 存在下与式(V)所示的取代苯肼盐酸盐于。

18、2080下进行缩合反应26小时，所得反应 液b后处理制得式(III)所示的黄烷酮-4-氯-3-苯腙化合物；所述的式(II)所示的黄烷 酮-4-氯-3- 甲酰基化合物与式(V)所示的取代苯肼盐酸盐的物质的量比为112； 0023 所述有机溶剂A为甲醇、乙醇、四氢呋喃、乙腈中的任意一种；所述碱性试剂为碳 酸钾、碳酸钠、三乙胺、吡啶、乙酸钠中的任意一种； 0024 (3)式(III)所示的黄烷酮-4-氯-3-苯腙化合物在氮气保护下，以N，N-二甲基 甲酰胺为溶剂，氢化钠存在下，于100160反应56小时，反应完毕后，所得反应液后 处理制得式(IV)所示的1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-。

19、c吡唑类化合物；所述 式(III)所示的黄烷酮-4-氯-3-苯腙类化合物、氢化钠的物质的量比为112。 0025 进一步，所述步骤(1)中，所述反应液a后处理方法为：反应结束后，反应液a 倒入冰水中，搅拌，用饱和NaHCO 3 溶液调pH值到中性，静置分层，水层用二氯甲烷萃取， 取有机层用饱和食盐水洗涤后干燥，过滤，取滤液减压浓缩，制得式(II)所示的黄烷 酮-4-氯-3-甲酰基化合物。 0026 进一步，所述步骤(2)中，所述反应液b后处理方法为：反应结束后，反应液b减压 回收溶剂，蒸干后加入水，用二氯甲烷萃取，取有机层用饱和食盐水洗涤后干燥，过滤，取滤 液减压浓缩，制得式(III)所示的黄。

20、烷酮-4-氯-3-苯腙化合物。 0027 进一步，所述步骤(3)中，所述反应液c后处理方法为：反应结束后，反应液c中 加入水，用二氯甲烷萃取，取有机层用饱和食盐水洗涤后干燥，过滤，取滤液减压浓缩，所得 粗品用硅胶柱层析，以石油醚、乙酸乙酯体积比为301的混合液为洗脱剂，洗脱液蒸除溶 剂制得式(IV)所示的1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物纯品。 0028 所述步骤(1)中，N，N-二甲基甲酰胺的用量通常以双(三氯甲基)碳酸酯的物质 的量计为0.55mL/mmol。 0029 所述步骤(2)中，有机溶剂A的用量通常以式(II)所示的黄烷酮-4-氯-3-甲酰 基化合物的物。

21、质的量计为210mL/mmol。 0030 所述的式(II)所示的黄烷酮-4-氯-3-甲酰基化合物与碱性试剂的物质的量之 比通常为112。 0031 所述步骤(3)中，N，N-二甲基甲酰胺的用量通常以式(III)所示的黄烷 说 明 书CN 102391272 A CN 102391279 A 4/12页 8 酮-4-氯-3-苯腙化合物的物质的量计为210mL/mmol。 0032 本发明提供1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物可用于制 备抗肿瘤药物。 0033 进一步，所述的应用为1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物 在制备抗白血病药物中的应用。。

22、 0034 更进一步，1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物可用于制备 抗白血病药物，所述1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合物为下列之 一： 0035 0036 初步活性测试表明式(IV)所示化合物对人白血病细胞株HL60和人乳腺癌细胞株 MCF-7肿瘤细胞株均有抑制增殖作用，其中4-(4- 氯苯基)-1-苯基-1，4-二氢苯并吡喃 4，3-c吡唑(化合物IVb)、4-(4-甲基苯基)-1-苯基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑 (化合物IVf)对人白血病细胞株HL60抑制作用显著，其抗肿瘤活性大于阳性对照药物顺 铂。 0037 本发明有益效果主。

23、要体现在：以具有抗肿瘤活性的黄烷酮化合物为先导化合物， 在黄烷酮的C环引入吡唑环制得1，4-二取代基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑类化合 物。这是一类结构全新的化合物，初步的药理活性筛选试验表明多数化合物对肿瘤细胞有 体外抑制作用，特别是对人白血病细胞株HL60抑制作用显著，从而为抗肿瘤药物筛选提供 了更多的选择。 ( 四 ) 具体实施方式 ： 0038 下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于 此： 0039 实施例1 1，4-二苯基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑(IV a)的制备 0040 在05下将双(三氯甲基)碳酸酯(1.49g，5mmol)缓。

24、慢加入N，N-二甲基甲 酰胺(5mL)中，加料完毕后，撤去冰浴，升至室温，保温半小时制得Vilsmeier试剂。加入 2-苯基苯并吡喃-4-酮I a(1.12g，5mmol)，反应混合物升温至60，保温反应2小时，反应 结束后，将反应液倒入20mL冰水中，搅拌，然后用饱和NaHCO 3 溶液调pH值到中性，静置分 层，水层用二氯甲烷萃取三次(15mL3)，合并二氯甲烷层，饱和食盐水洗涤(15mL3)，再 用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩回收溶剂，得到黄色固体(化合物II a)1.28g，收 率95。 0041 将化合物II a(1.08g，4mmol)、苯肼盐酸盐(0.58g，4mmol)。

25、、乙醇(15mL)、三乙胺 (0.40g，4mmol)加至反应瓶中，回流3小时，反应结束后，减压回收乙醇至蒸干，再加入水 说 明 书CN 102391272 A CN 102391279 A 5/12页 9 15mL，用二氯甲烷萃取三次(20mL3)，合并有机层，饱和食盐水洗涤(20mL3)，再用无水 硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩回收溶剂，得到黄色固体(化合物IIIa)1.32g，收率92。 0042 将化合物IIIa(1.08g，3mmol)和氢化钠(0.07g，3mmol)依次加入N，N-二甲基 甲酰胺(10mL)中，氮气保护下回流5小时，反应完毕后加入水15mL，用二氯甲烷萃取三次 (。

26、20mL3)，合并有机层，饱和食盐水洗涤(20mL3)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩 回收溶剂，所得粗品经硅胶柱层析(洗脱剂：石油醚乙酸乙酯301；VV)分离，洗 脱液蒸除溶剂得到黄色固体(化合物IVa)0.41g，收率42，三步反应总收率为37。 0043 熔点：110-111； 1 H NMR(400MHz，CDCl 3 )：7.567.48(m，7H)，7.44 7.36(m，3H)，7.30(s，1H)，7.177.10(m，1H)，7.02(d，J8.0Hz，1H)，6.85(d，J8.0Hz， 1H)，6.766.72(m，1H)，6.38(s，1H)； 13 CNMR(10。

27、0MHz，CDCl 3 )：153.4，140.3，139.6， 136.1，133.7，129.8，129.4，129.0，128.9，128.8，127.7，126.2，122.6，121.5，118.2， 118.0，115.9，77.0；MS(ESI)：325.3(M + +1). 0044 实施例2 1，4-二苯基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑(IVa)的制备 0045 在05下将双(三氯甲基)碳酸酯(1.49g，5mmol)缓慢加入N，N-二甲基甲 酰胺(5mL)中，加料完毕后，撤去冰浴，升至室温，保温半小时制得Vilsmeier试剂。加入 2-苯基苯并吡喃-4-酮I a(1。

28、.12g，5mmol)，反应混合物升温至70，保温反应2小时，反应 结束后，将反应液加入20mL冰水中，搅拌，然后用饱和NaHCO 3 溶液调pH值到中性，静置分 层，水层用二氯甲烷萃取三次(15mL3)，合并二氯甲烷层，饱和食盐水洗涤(15mL3)，再 用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩回收溶剂，得到黄色固体(化合物II a)1.28g，收 率95。 0046 将化合物II a(1.08g，4mmol)、苯肼盐酸盐(0.58g，4mmol)、乙醇(15mL)、乙酸 钠(0.33g，4mmol)加至反应瓶中，回流3小时，反应结束后，减压回收乙醇至蒸干，加入水 15mL，用二氯甲烷萃取三次(2。

29、0mL3)，合并有机层，饱和食盐水洗(20mL3)，无水硫酸钠 干燥，滤液减压浓缩回收溶剂，得到黄色固体(化合物IIIa)1.32g，收率92。 0047 将化合物IIIa(1.08g，3mmol)和氢化钠(0.07g，3mmol)依次加入N，N-二甲基 甲酰胺(10mL)中，氮气保护下回流5小时，反应完毕后加入水15mL，用二氯甲烷萃取三次 (20mL3)，合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩回收溶剂，所得粗品经硅胶 柱层析(洗脱剂：石油醚乙酸乙酯301；VV)分离，洗脱液蒸除溶剂得到黄色固体 (化合物IV a)0.41g，收率42，三步反应总收率为37，物性数据同实施例1。 00。

30、48 实施例3 1，4-二苯基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑(IVa)的制备 0049 在05下将双(三氯甲基)碳酸酯(1.49g，5mmol)缓慢加入N，N-二甲基甲 酰胺(5mL)中，加料完毕后，撤去冰浴，升至室温，保温半小时制得Vilsmeier试剂。加入 2-苯基苯并吡喃-4-酮Ia(1.12g，5mmol)，反应混合物升温至60，保温反应2小时，反应 结束后，将反应液加入20mL冰水中，搅拌，然后用饱和NaHCO 3 溶液调pH值到中性，静置分 层，水层用二氯甲烷萃取三次(15mL3)，合并二氯甲烷层，饱和食盐水洗涤(15mL3)，再 用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩回收溶。

31、剂，得到黄色固体(化合物IIa)1.28g，收率 95。 0050 将化合物II a(1.08g，4mmol)、苯肼盐酸盐(0.58g，4mmol)、四氢呋喃(15mL)、三 乙胺(0.40g，4mmol)加至反应瓶中，回流3小时，反应完毕后减压回收乙醇至蒸干，加入水 说 明 书CN 102391272 A CN 102391279 A 6/12页 10 15mL，用二氯甲烷萃取三次(20mL3)，合并有机层，饱和食盐水洗(20mL3)，无水硫酸钠 干燥，过滤，滤液减压浓缩回收溶剂，得到黄色固体(化合物IIIa)1.32g，收率92。 0051 将化合物IIIa(1.08g，3mmol)和氢化。

32、钠(0.07g，3mmol)依次加入N，N-二甲基 甲酰胺(10mL)中，氮气保护下回流5小时，反应完毕后加入水15mL，用二氯甲烷萃取三次 (20mL3)，合并有机层，饱和食盐水洗(20mL3)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩回 收溶剂，所得粗品经硅胶柱层析(洗脱剂：石油醚乙酸乙酯301； VV)分离，洗 脱液蒸除溶剂得到黄色固体(化合物IVa)0.41，收率42，总收率37，物性数据同实施例 1。 0052 实施例4 4-(4-氯苯基)-2-苯基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑(IVb)的制 备 0053 操作过程与实施例1同，只是用2-(4-氯苯基)苯并吡喃-4-酮(1.29g，。

33、5mmol) 代替2-苯基苯并吡喃-4-酮，得到黄色固体IVb 0.53g，总收率39。 0054 熔点：113-115； 1 H NMR(400MHz，CDCl 3 )：7.517.50(m，6H)，7.44(d，J 8.0Hz，2H)，7.37(d，J8.0Hz，2H)，7.29(s，1H)，7.187.10(m，1H)，7.00(d，J8.0Hz， 1H)，6.876.81(d，J8.0Hz，1H)，6.74(m，1H)，6.35(s，1H)； 13 C NMR(100MHz，CDCl 3 )： 152.9，140.0，137.9，135.6，134.4，133.5，129.6，129.。

34、2，128.8，128.7，125.9，122.4， 121.4，117.9，117.2，115.5，76.2；MS(ESI)：359.4(M + +1). 0055 实施例5 1，4-二(4-氯苯基)-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑(IVc)的制备 0056 操作过程与实施例1同，只是用2-(4-氯苯基)苯并吡喃-4-酮(1.29g，5mmol) 代替2-苯基苯并吡喃-4-酮，对氯苯肼盐酸盐代替苯肼盐酸盐(0.72g，4mmol)，得到黄色固 体IVc 0.51g，总收率38。 0057 熔点：161-162； 1 H NMR(400MHz，CDCl 3 )：7.46(m，4H)，7.4。

35、2(d，J8.0Hz， 2H)，7.36(d，J8.0Hz，2H)，7.29(s，1H)，7.197.11(m，1H)，7.00(d，J8.0Hz，1H)， 6.87(d，J8.0Hz，1H)，6.78(m，1H)，6.33(s，1H)； 13 C NMR(100MHz，CDCl 3 )：152.9， 138.5，137.8，136.0， 134.6，134.5，133.6，129.9，129.4，128.8，127.1，122.3，121.5， 118.1，117.7，115.3，76.1；MS(ESI)：393.4(M + +1). 0058 实施例6 4-(4-氯苯基)-1-(4-甲氧苯。

36、基)-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑 (IV d)的制备 0059 操作过程与实施例1同，只是用2-(4-氯苯基)苯并吡喃-4-酮(1.29g，5mmol) 代替2-苯基苯并吡喃-4-酮，对甲氧基苯肼盐酸盐(0.70g，4mmol)代替苯肼盐酸盐，得到 黄色固体IVd 0.46g，总收率34。 0060 熔点：195-197； 1 H NMR(400MHz，CDCl 3 )：7.477.39(m，4H)，7.38(s，1H)， 7.35(s，1H)，7.26(s，1H)，7.177.10(m，1H)，7.026.98(m，3H)，6.82(d，J8.0Hz， 1H)，6.786.70(m，。

37、1H)，6.35(s，1H)，3.89(s，3H)，1.25(s，2H)； 13 C NMR(100MHz，CDCl 3 )： 159.7，152.9，138.0，135.3，134.4，133.5，133.0，129.5，128.8，128.7，127.3，122.3， 121.4，117.8，116.6，115.6，114.4，76.2，55.6；MS(ESI)：389.2(M + +1). 0061 实施例7 4-(4-甲氧苯基)-1-苯基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑(IVe)的 制备 0062 操作过程与实施例1同，只是用2-(4-甲氧基苯基)苯并吡喃-4-酮(1.27g， 说。

38、 明 书CN 102391272 A CN 102391279 A 7/12页 11 5mmol)代替2-苯基苯并吡喃-4-酮，得到黄色固体IVe 0.37g，总收率30。 0063 熔点：166-168； 1 H NMR(400MHz，CDCl 3 )：7.577.41(m，5H)，7.29(s，1H)， 7.167.09(m，1H)，6.99(d，J8.0Hz，1H)，6.956.90(m，2H)，6.866.83(m，1H)， 6.756.71(m，1H)，6.32(s，1H)，3.82(s，3H)； 13 C NMR(100MHz，CDCl 3 )：159.8，153.2， 140.1。

39、，135.9， 133.6，131.4，129.5，129.2，129.1，128.7，125.9，122.4，121.2，117.9， 115.7，113.9，76.8，55.3；MS(ESI)：355.2(M + +1). 0064 实施例8 4-(4-甲基苯基)-1-苯基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑(IVf)的 制备 0065 操作过程与实施例1同，只是用2-(4-甲基苯基)苯并吡喃-4-酮(1.19g，5mmol) 代替2-苯基苯并吡喃-4-酮，得到黄色固体IVf 0.47g，总收率40，熔点：108-109 0066 1 H NMR(400MHz，CDCl 3 )：7.567。

40、.45(m，5H)，7.40(d，J8.0Hz，2H)， 7.30(s，1H)，7.22(d，J8.0Hz，1H)，7.157.11(m，1H)，7.016.99(m，1H)，6.85(d， J8.0Hz，1H)，6.766.70(m，1H)，6.34(s，1H)，2.38(s，3H)； 13 C NMR(100MHz，CDCl 3 )： 153.5，140.7，138.4，137.0，136.0，133.7，129.7，129.5，129.4，129.2，129.2，128.9， 128.7，127.7，127.4，126.2，122.5，122.4，121.1，118.0，115.8，77。

41、.0，21.2；MS(ESI)： 339.3(M + +1). 0067 实施例9 1-(4-氯苯基)-4-对甲基苯基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑(IVg) 的制备 0068 操作过程与实施例1同，只是用2-(4-甲基苯基)苯并吡喃-4-酮(1.19g，5mmol) 代替2-苯基苯并吡喃-4-酮，对氯苯肼盐酸盐代替苯肼盐酸盐(0.72g，4mmol)，得到黄色固 体IVg 0.40g，总收率31. 0069 熔点：148-150； 1 H NMR(400MHz，CDCl 3 )：7.48(s，4H)，7.38(d，J8.0Hz， 2H)，7.29(s，1H)，7.21(d，J8.0Hz。

42、，1H)，7.187.11(m，1H)，7.036.97(m，1H)， 6.87(d，J8.0Hz，1H)，6.816.73(m， 1H)，6.31(s，1H)，2.37(s，3H)； 13 C NMR(100MHz， CDCl 3 )：153.4，138.9，138.5，136.5，136.3，134.5，133.7，129.7，129.4，129.2，127.4， 127.2，122.3，121.2，118.3，118.1，115.5，76.9，21.3；MS(ESI)：373.2(M + +1). 0070 实施例10 8-甲基-1，4-二苯基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑(IVh。

43、)的制 备 0071 操作过程与实施例1同，只是用6-甲基-2-苯基-苯并吡喃-4-酮(1.19g，5mmol) 代替2-苯基苯并吡喃-4-酮，得到黄色固体IVh 0.46g，总收率39。 0072 熔点：122-124； 1 H NMR(400MHz，CDCl 3 )：7.587.45(m，7H)，7.44 7.33(m，3H)，7.29(s，1H)，6.986.89(m，2H)，6.64(s，1H)，6.32(s，1H)，2.07(s，3H)； 13 C NMR(100MHz，CDCl 3 )：151.1，140.2，139.5，135.8，133.7，130.4，130.1，129.1，。

44、 128.7，128.5，128.5，127.4，125.9，122.9，117.9，117.6，115.4，76.8，20.8；MS(ESI)： 339.2(M + +1). 0073 实施例11 1-(4-氯苯基)-8-甲基-4-苯基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑 (IVi)的制备 0074 操作过程与实施例1同，只是用6-甲基-2-苯基-苯并吡喃-4-酮(1.19g，5mmol) 代替2-苯基苯并吡喃-4-酮，对氯苯肼盐酸盐代替苯肼盐酸盐(0.72g，4mmol)，得到黄色固 说 明 书CN 102391272 A CN 102391279 A 8/12页 12 体IVi 0.40。

45、g，总收率31。 0075 熔点：131-133； 1 H NMR(400MHz，CDCl 3 )：7.527.45(m，6H)，7.43 7.33(m，3H)，7.29(s，1H)，6.986.91(m，2H)，6.69(s，1H)，6.29(s，1H)，2.12(s，3H)； 13 C NMR(100MHz，CDCl 3 )：151.4，139.6， 139.0，136.6，134.7，134.1，131.0，130.7， 129.6，128.9，128.8，127.7，127.3，123.0，118.7，118.2，115.5，77.1，21.2；MS(ESI)： 373.1(M + +。

46、1). 0076 实施例12 4-(4-氯苯基)-8-甲基-1-苯基-1，4二氢苯并吡喃4，3-c吡唑 (IVj)的制备 0077 操作过程与实施例1同，只是用2-(4-氯苯基)-6-甲基-苯并吡喃-4-酮(1.36g， 5mmol)代替2-苯基苯并吡喃-4-酮，得到黄色固体IVj 0.41g，总收率32。 0078 熔点：136-138； 1 H NMR(400MHz，CDCl 3 )7.50(m，5H)，7.42(d，J8.0Hz， 2H)，7.35(d，J8.0Hz，2H)，7.28(s，1H)，6.94(d，J8.0Hz，1H)，6.89(d，J8.0Hz，1H)， 6.62(s，1H。

47、)，6.29(s，1H)，2.06(s，3H)； 13 C NMR(100MHz，CDCl 3 )：150.7，139.9，137.9， 135.6，134.3，133.6，130.6，130.1，129.1，128.8，128.6，125.8，122.9，117.6，117.4， 115.2，76.0，20.9；MS(ESI)：373.2(M + +1). 0079 实施例13 1，4-二(4-氯苯基)-8-甲基-1，4-二氢苯并吡喃4，3-c吡唑(IVk) 的制备 0080 操作过程与实施例1同，只是用2-(4-氯苯基)-6-甲基-苯并吡喃-4-酮(1.36g， 5mmol)代替2-苯基苯。

48、并吡喃-4-酮，对氯苯肼盐酸盐代替苯肼盐酸盐(0.72g，4mmol)，得 到黄色固体IVk 0.48g，总收率35。 0081 熔点：176-178； 1 H NMR(400MHz，CDCl 3 )：7.48(m，4H)，7.41(d，J8.0Hz， 2H)，7.35(d，J8.0Hz，2H)，7.28(s，1H)，6.96(d，J8.0Hz，1H)，6.90(d，J8.0Hz，1H)， 6.68(s，1H)，6.27(s，1H)，2.11(s，3H)； 13 C NMR(100MHz，CDCl 3 )：150.7，138.5，137.7， 136.0，134.4，133.7，130.9，130.4，129.27，128.7，128.7，126.9，122.7，117.9，117.8， 115.1，76.0，21.0；MS(ESI)：407.2(M + +1). 0082 将化合物IVaIVk进行抗肿瘤活性测试，具体测试方法为：将肿瘤细胞用。