马来酸匹杉琼的结晶.pdf

本发明属于药物化学领域，具体而言涉及马来酸匹杉琼的结晶、所述结晶的制备方法、含所述结晶的药物组合物以及在医药领域的用途。本发明提供的结晶，不仅纯度高，而且在高温、高湿时稳定性好，具有很好的粉体流动性，满足药物制备、生产的要求。

权利要求书
1.  式I所示的马来酸匹杉琼的结晶，使用Cu-Kα辐射，其在X-射线粉末衍射图谱中，在2θ 度数约为8.65、9.49、10.30、17.42、18.70、26.37处有衍射峰，


2.  权利要求1所述的结晶，在2θ度数约为8.65、9.49、10.30、17.42、18.70、21.39、25.05、 26.37、28.38、28.83处有衍射峰。

3.  权利要求1所述的结晶，在2θ度数约为8.65、9.49、10.30、13.12、14.05、14.19、15.65、 16.31、17.42、18.70、19.89、21.39、22.48、25.05、26.37、28.38、28.83处有衍射峰。

4.  式I所示的马来酸匹杉琼的结晶，使用Cu-Kα辐射，其在X-射线粉末衍射图谱中，在2θ 度数约为9.95、10.95、15.52、16.51、18.94、19.76、26.80处有衍射峰，


5.  权利要求4所述的结晶，在2θ度数约为9.95、10.95、15.52、16.51、18.33、18.94、19.76、 21.77、26.40、26.80、27.46、28.08处有衍射峰。

6.  权利要求4所述的结晶，在2θ度数约为8.30、9.95、10.95、13.15、14.23、15.52、16.51、 18.33、18.94、19.76、21.77、26.40、26.80、27.46、28.08、31.53处有衍射峰。

7.  结晶组合物，其中权利要求1-6中任一项所述的马来酸匹杉琼的结晶占结晶组合物重量的 50%以上，优选在80%以上，更优选在90%以上，最优选在95%以上。

8.  药物组合物，其包含权利要求1-6中任一项所述的马来酸匹杉琼的结晶或权利要求7所述 的结晶组合物。

9.  权利要求1-6中任一项所述的马来酸匹杉琼的结晶、权利要求7所述的结晶组合物或权利 要求8所述的药物组合物在制备抗肿瘤的药物中的用途。

10.  权利要求9所述的用途，其中所述肿瘤为非霍奇金氏淋巴瘤。

说明书马来酸匹杉琼的结晶
技术领域
本发明属于药物化学领域，具体而言涉及马来酸匹杉琼的结晶、所述结晶的制备方法、 含所述结晶的药物组合物以及在医药领域的用途。
背景技术
马来酸匹杉琼，化学名为6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]-苯并[g]异喹啉-5,10-二酮二马来酸盐， 结构如式I所示，是由诺瓦斯制药公司开发并上市的第二代氮杂蒽醌类似物，2012年5月在 欧洲获批用于治疗非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)，并于2012年9月在瑞典、丹麦和芬兰上市。

A.Marini et al,Solid-State Characterization of a Novel Chemotherapeutic Drug,Journal of  Pharmaceutical Sciences,Vol.92,577-584(2003)公开了一种马来酸匹杉琼的结晶(以下称为Ⅰ 型结晶)的表征数据，其含有1.5个结晶水，并公开了其X-射线衍射图谱。
药用化合物晶型的变化通常导致化合物具有不同的熔点、溶解度、吸湿性、稳定性、生 物活性等，这些均是影响药物制备的难易、储存稳定性、制剂难易和生物利用度等的重要因 素。当化合物存在多晶型时，由于特定多晶型物具有特异性的热力学性质和稳定性，因此在 制备的过程中，了解在各个剂型中应用的化合物的晶型是重要的，以保证生产过程应用相同 形态的药物。因此，保证化合物是单一的晶型或是一些晶型的已知混和物是必要的。
在判断何种多晶型物是优选的时候，必须比较它们的许多性质并且优选的多晶型物是基 于许多物理性质作出选择的。完全可能的是一种多晶型在某些方面如制备的难易、稳定性等 被认为是关键性的条件下是优选的。在其它情况下，不同的多晶型物可能因更高的溶解度或 优良的药代动力学而优选。
药用化合物的新的多晶型物的发现提供了改善药物物理特性的机会，即扩展了物质的全 部性质，从而可以更好地指导化合物及其制剂的研究，因此本发明提供的马来酸匹杉琼的多 晶型物在药物的制造及其它应用中有商业价值。
发明内容
本发明一方面提供式I所示的马来酸匹杉琼的两种结晶固体形式，分别为Ⅱ型结晶和Ⅲ 型结晶。

其中Ⅱ型结晶是指基本上不含结晶水和/或其它溶剂的结晶，使用Cu-Kα辐射，其在X- 射线粉末衍射（XRD）图谱中，在2θ度数约为8.65、9.49、10.30、17.42、18.70、26.37处有 衍射峰，典型地在2θ度数约为8.65、9.49、10.30、17.42、18.70、21.39、25.05、26.37、28.38、 28.83处有衍射峰，进一步典型地在2θ度数约为8.65、9.49、10.30、13.12、14.05、14.19、 15.65、16.31、17.42、18.70、19.89、21.39、22.48、25.05、26.37、28.38、28.83处有衍射峰。
使用Cu-Kα辐射，Ⅱ型结晶的典型的XRD的谱图具有如下特征：
编号 2θ(度) 相对强度(%) 1 8.65 100.0 2 9.49 16.0 3 10.30 31.9 4 13.12 3.0 5 14.05 5.7 6 14.19 4.8 7 15.65 4.9 8 16.31 5.8 9 17.42 47.3 10 18.70 30.1 11 19.89 4.9 12 21.39 15.2 13 22.48 4.5 14 25.05 11.7 15 26.37 68.1 16 28.38 22.9 17 28.83 23.6
在本发明的一个实施方案中，Ⅱ型结晶具有基本上如图2所示的粉末X-射线衍射图谱。
Ⅱ型结晶可通过下述方法制备得到，其包括以下步骤：a)将马来酸匹杉琼与无水甲醇混 合，b)从无水甲醇中分离Ⅱ型结晶。
其中步骤a)中无水甲醇的量以能完全溶解马来酸匹杉琼为宜。视需要，可进行充分搅拌 析晶。在本发明的一个实施方案中，在20-40℃进行搅拌，搅拌时间优选为2-3小时。
步骤b)中分离得到结晶后，可进一步干燥。在本发明的一个实施方案中，在55～65℃进 行鼓风烘干，干燥时间优选为6-10小时。
Ⅲ型结晶是指基本上不含结晶水和/或其它溶剂的结晶，使用Cu-Kα辐射，其在X-射线 粉末衍射（XRD）图谱中，在2θ度数约为9.95、10.95、15.52、16.51、18.94、19.76、26.80 处有衍射峰，典型地在2θ度数约为9.95、10.95、15.52、16.51、18.33、18.94、19.76、21.77、 26.40、26.80、27.46、28.08处有衍射峰，进一步典型地在2θ度数约为8.30、9.95、10.95、 13.15、14.23、15.52、16.51、18.33、18.94、19.76、21.77、26.40、26.80、27.46、28.08、31.53 处有衍射峰。
使用Cu-Kα辐射，Ⅲ型结晶的典型的XRD的谱图具有如下特征：
编号 2θ(度) 相对强度(%) 1 8.30 2.9 2 9.95 30.0 3 10.95 29.2 4 13.15 3.7 5 14.23 4.4 6 15.52 23.0 7 16.51 46.4 8 17.05 3.2 9 18.33 8.3 10 18.94 24.9 11 19.76 21.0 12 21.04 2.1 13 21.77 18.4 14 25.39 2.2 15 26.40 22.0 16 26.80 100.0 17 27.46 23.1 18 28.08 31.2 19 31.53 10.3
在本发明的一个实施方案中，Ⅲ型结晶具有基本上如图3所示的粉末X-射线衍射图谱。
Ⅲ型结晶可通过下述方法制备得到，其包括以下步骤：a)将马来酸匹杉琼与无水乙醇混 合，b)从无水乙醇中分离Ⅲ型结晶。
其中步骤a)中无水乙醇的量以能完全溶解马来酸匹杉琼为宜。视需要，可进行搅拌析晶。 在本发明的一个实施方案中，在20-40℃进行搅拌，搅拌时间优选为8-12小时。
步骤b)中分离得到结晶后，可进一步干燥。在本发明的一个实施方案中，在55～65℃进 行鼓风烘干，干燥时间优选为6-10小时。
本发明所述的粉末X-射线衍射测试按照如下条件进行：
采用Bruker D8ADVANCE仪测定。测试条件如下：光源，CuKα40kV40mA，石墨单色 器，发散狭缝(DS)：1°；防散射狭缝(SS)：1°；LynxEye阵列探测器，扫描方式：θ/θ，连 续扫描；扫描范围：5°-40°，扫描速度8°/min。
需要说明的是，在XRD中，由结晶化合物得到的衍射谱图对于特定的晶型往往是特征性 的，其中谱带（尤其是在低角度）的相对强度可能会因为结晶条件、粒径和其它测定条件的 差异而产生的优势取向效果而变化。因此，衍射峰的相对强度对所针对的晶型并非是特征性 的，判断是否与已知的晶型相同时，更应该注意的是峰的相对位置而不是它们的相对强度。 在XRD图谱中通常用2θ角或晶面距d表示峰位置，由于2θ角与入射X射线的波长有关， 两者之间具有简单的换算关系：d＝λ/2sinθ，其中d代表晶面距，λ代表入射X射线的波 长（对于Cu-Ka，），θ为衍射角。对于同种化合物的同种晶型，其XRD谱图 在整体上具有相似性，表征峰位置的2θ角误差一般在±2％之内，例如由于分析样品时温度 的变化、样品移动或仪器的标定等，峰的位置可能移动；相对强度误差可较大，但变化趋势 一致。另外，判断晶型是否一样时应注意保持整体观念，因为并不是一条衍射线代表一个物 相，而是一套特定的“d-I/I1”数据才代表某一物相。还应指出的是，在混合物的鉴定中，由 于含量下降等因素会造成部分衍射线的缺失，此时，无需依赖高纯试样中观察到的全部谱带， 甚至几条谱带也可能对给定的结晶是特征性的。
本发明另一方面提供上述Ⅱ型结晶或Ⅲ型结晶的结晶组合物。其中Ⅱ型结晶的结晶组合 物是指，组合物中Ⅱ型结晶占组合物重量的50％以上，优选在80％以上，更优选在90％以 上，最优选在95％以上，该组合物中可含有少量式I化合物的其它结晶或无定型物，包括但 不限于式I化合物的Ⅰ型结晶、Ⅲ型结晶或无定型物。
Ⅲ型结晶的结晶组合物是指，组合物中的式I化合物的Ⅲ型结晶占组合物重量的50％以 上，优选在80％以上，更优选在90％以上，最优选在95％以上，该组合物中可含有少量式I 化合物的其它结晶或无定型物，包括但不限于式I化合物的Ⅱ型结晶、Ⅰ型结晶或无定型物。
本发明再一方面提供一种药物组合物，其包含上述结晶或结晶组合物。任选的，所述药 物组合物还可包括药学上可接受的辅料。
本发明的药物组合物可选自多种剂型，例如片剂、胶囊剂、粉针剂、注射剂等。适合这 些具体剂型的辅料是本领域公知的，例如片剂通常包括稀释剂(例如淀粉、乳糖、微晶纤维素、 甘露醇)、润湿剂与黏合剂(例如羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素、聚维酮)、崩解剂(例如羧甲淀 粉钠、低取代羟丙基纤维素、交联聚维酮)、润滑剂(例如硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉)；粉 针剂通常包括支撑剂(例如甘露醇、乳糖、右旋糖酐、氯化钠)、pH调节剂(例如盐酸、氢氧化 钠)。此外，制备这些具体剂型的方法也是本领域公知的，例如片剂可采用湿法制粒压片法、 干法制粒压片法、粉末直接压片法等进行制备；粉针剂的制备方法通常包括配制、过滤、灌 装、预冻、升华干燥、再干燥等步骤。
本发明的药物组合物可通过多种方式给药，给药方式包括但不限于静脉内、腹膜内、皮 下、肌内或口服给药，优选采用静脉内给药或口服给药的方式。给药频率为每天一次、每周 一次、两周一次或每月一次，优选以单剂量形式的药物组合物给药，所述单剂量形式的药物 组合物包含1mg-250mg的马来酸匹杉琼Ⅱ型结晶或Ⅲ型结晶。
在本发明的一个具体实施方案中，单剂量形式的药物组合物为粉针剂，其包含50mg的 马来酸匹杉琼Ⅱ型结晶，氯化钠、乳糖和pH调节剂。
在本发明的另一个具体实施方案中，单剂量形式的药物组合物为粉针剂，其包含50mg 的马来酸匹杉琼Ⅲ型结晶，氯化钠、乳糖和pH调节剂。
本发明再一方面提供上述结晶、结晶组合物或者药物组合物在制备抗肿瘤的药物中的用 途，尤其是在制备抗非霍奇金氏淋巴瘤的药物中的用途。
本发明提供的结晶，不仅纯度高，而且在高温、高湿时稳定性好，具有很好的粉体流动 性，满足药物制备、生产的要求。
附图说明
图1：本发明实施例1制备的马来酸匹杉琼Ⅰ型结晶的粉末X-射线衍射图谱。
图2：本发明实施例2制备的马来酸匹杉琼Ⅱ型结晶的粉末X-射线衍射图谱。
图3：本发明实施例3制备的马来酸匹杉琼Ⅲ型结晶的粉末X-射线衍射图谱。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步的描述，然而，本发明中这些实施例和其他实施方 式仅用于阐明而不限制本发明的范围。
实施例1马来酸匹杉琼Ⅰ型结晶的制备
根据CN1145028的实施例1中公开的方法制备马来酸匹杉琼。
粉末X-射线衍射图谱如图1所示，该谱图与外文文献Solid-State Characterization of a  Novel Chemotherapeutic Drug的Figure4中的(a)基本相同，为Ⅰ型结晶。
实施例2马来酸匹杉琼Ⅱ型结晶的制备
将3g马来酸匹杉琼Ⅰ型结晶溶于30ml无水甲醇中，在30℃充分搅拌3小时，过滤，将 滤饼于60℃鼓风干燥6小时，得2.5g深蓝色结晶粉末。
HPLC面积归一化法测定的纯度为99.88%。
粉末X-射线衍射图谱如图2所示。
实施例3马来酸匹杉琼Ⅲ型结晶的制备
将5g马来酸匹杉琼Ⅰ型结晶溶于60ml无水乙醇中，在35℃充分搅拌10小时，过滤， 将滤饼于60℃鼓风干燥6小时，得4.4g深蓝色结晶粉末。
HPLC面积归一化法测定的纯度为99.85%。
粉末X-射线衍射图谱如图3所示。
实施例4稳定性实验
参照中国药典2010年版二部附录XIX C的加速实验和长期实验的方法，取适量实施例 1所得的Ⅰ型结晶、实施例2所得的Ⅱ型结晶和实施例3所得的Ⅲ型结晶，进行长期和加速 实验后，按以下HPLC条件对有关物质进行测定。
仪器：Agilent1100；色谱柱：C18，4.6×150mm，5μm；柱温：25℃；检测波长：245nm； 流速：1.0ml/min；流动相：以20mM庚烷磺酸钠溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，按下 表进行线性梯度洗脱，
时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B(%) 0 80 20 5 80 20 40 70 30 55 50 50 60 50 50
实验结果：
加速和长期试验结果

且经测定，试验前和试验后的Ⅱ型结晶、Ⅲ型结晶，止休角θ均≤30°，具有很好的流动性， 满足生产以及制剂过程中的需求。