《一种苯并吲哚半菁染料及其用途.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一种苯并吲哚半菁染料及其用途.pdf（16页完整版）》请在专利查询网上搜索。
1、(10)申请公布号 CN 104004378 A (43)申请公布日 2014.08.27 C N 1 0 4 0 0 4 3 7 8 A (21)申请号 201410258440.7 (22)申请日 2014.06.11 C09B 23/10(2006.01) C09K 11/06(2006.01) G01N 21/64(2006.01) (71)申请人南方医科大学 地址 510515 广东省广州市白云区沙太南路 1023号 (72)发明人刘瑞源 严轶琛 路新卫 (74)专利代理机构广州市天河庐阳专利事务所 44244 代理人胡济元 (54) 发明名称 一种苯并吲哚半菁染料及其用途 (57)。
2、 摘要 本发明属于有机化学领域，具体涉及含 氮杂环化合物。本发明所述的苯并吲哚半菁 染料其化学结构如下式(I)所示。本发明所 述的苯并吲哚半菁染料是将喹啉4-甲醛与 1,1,2-三甲基苯并e吲哚反应得到。本发 明所述的苯并吲哚半菁染料具有三价铁离子荧 光识别性能，可以用来检测双氧水和葡萄糖。 (51)Int.Cl. 权利要求书1页 说明书11页 附图3页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书11页 附图3页 (10)申请公布号 CN 104004378 A CN 104004378 A 1/1页 2 1.一种苯并吲哚半菁染料，其结构式为(I)所示：。
3、 2.权利要求1所述的苯并吲哚半菁染料检测三价铁离子中的应用，该应用中所述的检 测三价铁离子的方法由以下步骤组成： (1)将苯并吲哚半菁染料溶解在亲水性有机溶剂中，制备得到苯并吲哚半菁染料储备 液，取苯并吲哚半菁染料储备液用水稀释后得到含苯并吲哚半菁染料水溶液；所述的含苯 并吲哚半菁染料水溶液中，亲水性有机溶剂含量为0.1(v/v)，苯并吲哚半菁染料的浓度 为1050mM，所述的亲水性有机溶剂是乙腈、THF、DMF或者DMSO； (2)滴加待检测样品，在波长为365nm光激发下，观察水溶液荧光是否淬灭，如果溶液 荧光淬灭，则说明样品中含有三价铁离子。 3.权利要求1所述的苯并吲哚半菁染料检测双。
4、氧水中的应用，该应用中所述的检测双 氧水的方法由以下步骤组成： (1)将苯并吲哚半菁染料溶解在亲水性有机溶剂中，制备得到苯并吲哚半菁染料储备 液，将二氯化铁溶解在水中制备二价铁离子水溶液，分别取苯并吲哚半菁染料储备液和二 价铁离子水溶液混合均匀，然后用水稀释后得到含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子的水溶 液；所述的含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子的水溶液中，亲水性有机溶剂含量为0.1 (v/v)，苯并吲哚半菁染料的浓度为1050mM，二价铁离子与苯并吲哚半菁染料的摩尔比 为5:1；所述的亲水性有机溶剂是乙腈、THF、DMF或者DMSO； (2)滴加待检测样品，在波长为365nm光激发下，观察水溶液荧。
5、光是否发生变化，如果 水溶液荧光淬灭，则说明样品中含有双氧水。 4.权利要求1所述的苯并吲哚半菁染料检测葡萄糖中的应用，该应用中所述的检测葡 萄糖的方法由以下步骤组成： (1)将苯并吲哚半菁染料溶解在亲水性有机溶剂中，制备得到苯并吲哚半菁染料储备 液，将二氯化铁溶解在水中制备二价铁离子水溶液，分别取苯并吲哚半菁染料储备液、二价 铁离子水溶液和葡萄糖氧化酶混合均匀，然后用水稀释后得到含苯并吲哚半菁染料和二价 铁离子的水溶液；所述的含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子的水溶液中，亲水性有机溶剂 含量为0.1(v/v)，苯并吲哚半菁染料的浓度为1050mM，二价铁离子与苯并吲哚半菁 染料的摩尔比为5:1，。
6、葡萄糖氧化酶为520U/10mL；所述的亲水性有机溶剂是乙腈、THF、 DMF或者DMSO； (2)滴加待检测样品，在波长为365nm光激发下，观察水溶液荧光是否发生变化，如果 水溶液荧光淬灭，则说明样品中含有葡萄糖。 5.权利要求1所述的苯并吲哚半菁染料在制备细胞内荧光探针中的应用。 权 利 要 求 书CN 104004378 A 1/11页 3 一种苯并吲哚半菁染料及其用途 技术领域 0001 本发明属于有机化学领域，涉及含氮杂环化合物，具体涉及苯并吲哚半菁。 背景技术 0002 铁是有机体各项生理活动不可或缺的元素,参与血液中氧的转运,质子转移、DNA 和RNA的合成,是各种酶和血红蛋白。
7、的重要组成部分，一旦生物体内铁元素缺乏,就会发 生各种各样生理系统紊乱,引起疾病，而过量的铁也存在潜在的危害。研究表明体内铁贮 存过多与多种疾病如心脏和肝脏疾病、糖尿病以及某些肿瘤有关。因此设计合成选择性好、 灵敏度高的铁离子探针近年来受到了极大的关注。近年来发展起来的荧光成像技术具有快 速无损伤,直观,灵敏度高等特点,已广泛用于检测各种化合物，例如金属离子，阴离子， pH，葡萄糖，DNA，爆炸物等。例如黎俊波设计合成了罗丹明衍生物，用来检测铁离子(黎俊 波,李楠楠,余响林,王俊,曾艳,武汉工程大学学报,2010,32(5),11)。 0003 喹啉衍生物具有杀菌、抗高血压、抗抑郁、抗过敏、抗。
8、疟疾、抗肿瘤等生物活性和药 理活性，常被用作合成药物的先导化合物；另外，由于其具有优良的金属离子亲和性，常被 用作化学传感器中的识别基团，在合成荧光传感分子及生物成像等方面有重要作用。如郝 会娟等(郝会娟，周鑫，吴学，化学试剂，2011，33(6)，551)设计合成了吡喃并喹啉，发现该 喹啉衍生物对汞离子具有特异性识别作用。李晓波等(李晓波，常玲玲，陈梦霞，王恩举，化 学研究与应用，2014,26(1)，97)设计合成了磺酰氨基喹啉，发现发现该喹啉衍生物对锌离 子具有特异性识别作用，而对三价铁离子没有荧光响应。 0004 菁染料广泛应用于太阳能电池、光动力学疗法(PDT)、DNA测序、pH探针。
9、等领域。苯 并吲哚半菁染料作为功能菁染料的一类,由于其稳定性高、吸收波长可调谐范围大、摩尔 消光系数大等优点,在合成、性质研究及应用方面得到人们的广泛关注.吲哚菁染料是菁 染料的一个重要分支,由于其摩尔消光系数大、荧光性能良好、稳定性高等优点,所以近年 来在红外激光染料、光盘存储材料、生物分析、核酸标记等方面得到了广泛应用。例如，康琼 等设计合成了苯并吲哚半菁染料，研究了染料在不同溶剂中的吸收光谱性质,并且发现合 成的苯并吲哚半菁染料在生理条件下与鲑鱼精DNA、牛血清白蛋白、溶菌酶、淀粉酶和糜蛋 白酶的相互作用,发现其荧光强度随着DNA浓度的增加而增强(康琼，范芳丽，毕渭滨，黄 怡，付义乐，王。
10、兰英，有机化学,2012,32,567573)。 发明内容 0005 本发明的目的是提供一种苯并吲哚半菁染料，该苯并吲哚半菁染料可以检测三价 铁离子，双氧水和葡萄糖。 0006 本发明解决上述问题的技术方案是： 0007 一种苯并吲哚半菁染料，其结构式为(I)所示： 0008 说 明 书CN 104004378 A 2/11页 4 0009 本发明所述的苯并吲哚半菁染料采用本领域常用方法合成，如，将喹啉4-甲醛与 1,1,2-三甲基苯并e吲哚反应得到。 0010 本发明人推荐的方法由反应式()表示： 0011 0012 本发明所述的苯并吲哚半菁染料的荧光光谱在540nm处有一强荧光峰，在365。
11、nm 光激发下显示绿色荧光。加入三价铁离子后，荧光发生淬灭，而加入二价铁离子其荧光变化 较小。由于双氧水可以将二价铁离子氧化为三价铁离子，因此本发明所述的苯并吲哚半菁 染料和二价铁离子体系的荧光可以被双氧水淬灭。 0013 本发明所述的苯并吲哚半菁染料检测三价铁离子的方法由以下步骤组成： 0014 (1)将苯并吲哚半菁染料溶解在亲水性有机溶剂中，制备得到苯并吲哚半菁染料 储备液，取苯并吲哚半菁染料储备液用水稀释后得到含苯并吲哚半菁染料水溶液；所述的 含苯并吲哚半菁染料水溶液中，亲水性有机溶剂含量为0.1(v/v)，苯并吲哚半菁染料的 浓度为1050mM，所述的亲水性有机溶剂是乙腈、THF、DM。
12、F或者DMSO； 0015 (2)滴加待检测样品，在波长为365nm光激发下，观察水溶液荧光是否发生变化， 如果水溶液荧光颜色淬灭，则说明样品中含有三价铁离子。 0016 本发明所述的苯并吲哚半菁染料的荧光光谱在540nm处显示出一荧光峰，荧光颜 色为绿色；加入三价铁离子后，其荧光发生淬灭。其原理是，三价铁离子可以和苯并吲哚半 菁染料上的喹啉发生作用，影响苯并吲哚半菁染料的共轭效果，导致荧光淬灭。本发明所述 的苯并吲哚半菁染料对三价铁离子具有选择性，而其他金属离子如K + ,Na + ,Ca 2+ ,Cu 2+ ,Pb 2+ ,Z n 2+ ,Ag + ,Mg 2+ ,Hg 2+ ,Co 2+。
13、 ,Fe 2+ ,Mn 2+ 不能淬灭苯并吲哚半菁染料的荧光。 0017 三价铁离子和二价铁离子对本发明所述的苯并吲哚半菁染料的荧光产生不同的 作用。三价铁离子淬灭本发明所述的苯并吲哚半菁染料的荧光，而二价铁离子不会。由于 双氧水可以将二价铁离子氧化为三价铁离子，因此本发明所述的苯并吲哚半菁染料和二价 铁离子体系的荧光可以被双氧水淬灭。 0018 本发明所述的苯并吲哚半菁染料检测双氧水的方法由以下步骤组成： 0019 (1)将苯并吲哚半菁染料溶解在亲水性有机溶剂中，制备得到苯并吲哚半菁染料 储备液，将二氯化铁溶解在水中制备二价铁离子水溶液，分别取苯并吲哚半菁染料储备液 和二价铁离子水溶液混合均。
14、匀，然后用水稀释后得到含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子 的水溶液；所述的含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子的水溶液中，亲水性有机溶剂含量为 0.1(v/v)，苯并吲哚半菁染料的浓度为1050mM，二价铁离子与苯并吲哚半菁染料的摩 尔比为5:1；所述的亲水性有机溶剂是乙腈、THF、DMF或者DMSO； 说 明 书CN 104004378 A 3/11页 5 0020 (2)滴加待检测样品，在波长为365nm光激发下，观察水溶液荧光是否发生变化， 如果水溶液荧光颜色淬灭，则说明样品中含有双氧水。 0021 本发明所述的苯并吲哚半菁染料检测葡萄糖的方法由以下步骤组成： 0022 (1)将苯并吲哚半菁染料溶。
15、解在亲水性有机溶剂中，制备得到苯并吲哚半菁染料 储备液，将二氯化铁溶解在水中制备二价铁离子水溶液，分别取苯并吲哚半菁染料储备液、 二价铁离子水溶液和葡萄糖氧化酶混合均匀，然后用水稀释后得到含苯并吲哚半菁染料和 二价铁离子的水溶液；所述的含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子的水溶液中，亲水性有机 溶剂含量为0.1(v/v)，苯并吲哚半菁染料的浓度为1050mM，二价铁离子与苯并吲哚 半菁染料的摩尔比为5:1，葡萄糖氧化酶为520U/10mL；所述的亲水性有机溶剂是乙腈、 THF、DMF或者DMSO； 0023 (2)滴加待检测样品，在波长为365nm光激发下，观察水溶液荧光是否发生变化， 如果水溶液荧。
16、光颜色淬灭，则说明样品中含有葡萄糖。 0024 以下以化学式(I)所示的苯并吲哚半菁染料为例，说明苯并吲哚半菁染料应用为 检测三价铁离子，双氧水和葡萄糖的荧光探针，以及在细胞内荧光成像的效果。 0025 一、荧光检测三价铁离子 0026 1.荧光检测三价铁离子的选择性 0027 (1)配制浓度为30mM的苯并吲哚半菁染料乙腈溶液，取10ml苯并吲哚半菁染料乙 腈溶液，用蒸馏水稀释到10ml，得到苯并吲哚半菁染料水溶液。 0028 (2)分别配制浓度为30mM的KCl,NaCl,CaCl 2 ,Cu(NO 3 ) 2 2H 2 O,Pb(NO 3 ) 2 ,Zn(NO 3 ) 2 ,H gCl 。
17、2 ,Ni(NO 3 ) 2 6H 2 O,Cd(NO 3 ) 2 4H 2 O,MnCl 2 4H 2 O,AgNO 3 ,CoCl 2 6H 2 O,FeCl 3 6H 2 O FeCl 2 4H 2 O的 水溶液。 0029 (3)取10ml苯并吲哚半菁染料水溶液，分别滴加0.1ml的KCl,NaCl,CaCl 2 ,Cu(NO 3 ),Pb(NO 3 ) 2 ,Zn(NO 3 ) 2 ,HgCl 2 ,Ni(NO 3 ) 2 ,Cd(NO 3 ) 2 ,MnCl 2 ,AgNO 3 ,CoCl 2 ,FeCl 3 ，FeCl 2 的水溶液， 混合均匀后，在365nm光激发下观察苯并吲哚。
18、半菁染料水溶液的荧光变化。 0030 结果发现，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光颜色是绿色，加入FeCl 3 水溶液后，苯 并吲哚半菁染料水溶液的荧光淬灭；而加入KCl,NaCl,CaCl 2 ,Cu(NO 3 ),Pb(NO 3 ) 2 ,Zn(NO 3 ) 2 , HgCl 2 ,Ni(NO 3 ) 2 ,Cd(NO 3 ) 2 ,MnCl 2 ,AgNO 3 ,CoCl 2 ,FeCl 2 的水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液 的荧光颜色保持不变。因此苯并吲哚半菁染料对三价铁离子显示出选择性和荧光识别能 力。 0031 检测上述溶液的荧光光谱图如图1所示。结果发现，加入三价铁离子，溶液的荧光 。
19、光谱中540nm处的荧光峰消失；而加入其他离子，溶液的荧光光谱变化较小。苯并吲哚半菁 染料对三价铁离子显示出良好的选择性。 0032 2.荧光滴定三价铁离子的工作曲线 0033 (1)配制浓度为30mM的苯并吲哚半菁染料乙腈溶液；配制浓度为30mM的FeCl 3 的 水溶液。 0034 (2)取10ml苯并吲哚半菁染料乙腈溶液，加入10mL容量瓶中；取不同体积的FeCl 3 的水溶液，加入上述容量瓶中，用蒸馏水稀释到10ml，配制成三价铁离子不同浓度的标准测 试溶液，在368m处激发，在540nm处测试其荧光强度。测试结果见附图2。用非线性最小二 乘法计算得到苯并吲哚半菁染料与三价铁离子的结合。
20、常数为1.50310 6 M -1 。 说 明 书CN 104004378 A 4/11页 6 0035 3.三价铁离子的浓度检测 0036 采用上述制备的工作曲线，用待测试样品(本单位实验室制备)添加代替储备溶 液，在550nm处测定荧光强度，从工作曲线计算出三价铁离子含量量，在2.34mM以下。 0037 4.干扰离子共存检测三价铁离子实验 0038 (1)配制浓度为30mM的苯并吲哚半菁染料乙腈溶液，取10ml苯并吲哚半菁染料乙 腈溶液，用蒸馏水稀释到10ml，得到苯并吲哚半菁染料水溶液。 0039 (2)分别配制浓度为30mM的KCl,NaCl,CaCl 2 ,Cu(NO 3 ) 2 。
21、2H 2 O,Pb(NO 3 ) 2 ,Zn(NO 3 ) 2 ,H gCl 2 ,Ni(NO 3 ) 2 6H 2 O,Cd(NO 3 ) 2 4H 2 O,MnCl 2 4H 2 O,AgNO 3 ,CoCl 2 6H 2 O,FeCl 3 6H 2 O FeCl 2 4H 2 O的 水溶液。 0040 (3)取10ml苯并吲哚半菁染料水溶液，加入0.1mL的FeCl 3 水溶液，然后分别滴加 0.1ml的KCl,NaCl,CaCl 2 ,Cu(NO 3 ),Pb(NO 3 ) 2 ,Zn(NO 3 ) 2 ,HgCl 2 ,Ni(NO 3 ) 2 ,Cd(NO 3 ) 2 ,MnCl 2。
22、 ,AgN O 3 ,CoCl 2 ,FeCl 2 的水溶液，混合均匀后，在368nm激发，在540nm处检测荧光强度。测试结果 如图3。 0041 由图3可以知道其他金属离子对三价铁离子的荧光检测影响较小。 0042 二、荧光检测双氧水 0043 1.荧光滴定双氧水的工作曲线 0044 (1)配制浓度为30mM的苯并吲哚半菁染料DMSO溶液，配置浓度为30mM的二氯化 铁水溶液；配制浓度为30mM的双氧水溶液。 0045 (2)取10ml苯并吲哚半菁染料DMSO溶液和1mL二氯化铁水溶液加入10mL容量瓶 中；取不同体积的双氧水的水溶液，加入上述容量瓶中，用蒸馏水稀释到10ml，配制成双氧 。
23、水不同浓度的标准测试溶液，在368m处激发，在540nm处测试其荧光强度。测试结果见图 4。检测上述溶液的荧光光谱。结果发现，加入双氧水后，溶液的荧光光谱中540nm处的荧 光峰消失。用非线性最小二乘法计算得到双氧水对苯并吲哚半菁染料与二价铁离子体系的 淬灭常数为K a 3.73410 5 M -1 。 0046 2.双氧水的浓度检测 0047 采用上述制备的工作曲线，用待测试样品添加代替储备溶液，在550nm处测定荧 光强度，从工作曲线计算出双氧水含量，浓度为41.2mM。采用滴定法检测得到双氧水浓度为 44.6mM。 0048 三、荧光检测葡萄糖 0049 1.荧光滴定双氧水的工作曲线 0。
24、050 (1)配制浓度为30mM的苯并吲哚半菁染料THF溶液，配置浓度为30mM的二氯化铁 水溶液；配制浓度为30mM的葡萄糖溶液。 0051 (2)取10ml苯并吲哚半菁染料DMSO溶液，1mL二氯化铁水溶液和10U的葡萄糖氧 化酶加入10mL容量瓶中；取不同体积的葡萄糖的水溶液，加入上述容量瓶中，用蒸馏水稀 释到10ml，配制成葡萄糖不同浓度的标准测试溶液，在368m处激发，在540nm处测试其荧光 强度。测试结果见图5。检测上述溶液的荧光光谱。结果发现，加入葡萄糖后，溶液的荧光 光谱中540nm处的荧光峰消失。 0052 四、苯并吲哚半菁染料在体内外的荧光显像的应用 0053 1.MTT。
25、法检测细胞生长活性 说 明 书CN 104004378 A 5/11页 7 0054 将PC3细胞以每孔6X10 3 个细胞接种于96孔板,培养过夜,换用含有苯并吲哚 半菁染料浓度分别为5,10,15,20mmol/ml的培养液,继续培养24h后,吸弃上清液,每 孔加入200ml MTT试剂(5mg/ml，用PBS配制)，继续培养4h，弃去培养液，每孔加入150l DMSO，置于细胞摇床中10min，至蓝色颗粒完全溶解。用酶标仪(ELX800全自动酶标仪,美 国宝特仪器有限公司)在激发波长为490nm条件下，测定各孔吸光度值,以含有细胞的培 养液和MTT为对照组,以只加等量的培养液和MTT为空。
26、白孔。按照下述公式计算细胞存活 率:细胞存活率()(实验孔吸光度值-空白孔吸光度值)/(对照孔吸光度值-空白 孔吸光度值)100。每个浓度设置5个平行孔,实验重复3次。结果如图6所示。图6 显示苯并吲哚半菁染料的细胞毒性低。 0055 2.细胞培养和成像 0056 取对数生长期的PC3细胞接种于置有6孔板中,培养过夜,换用含有10mmol/ml 苯并吲哚半菁染料的1640培养液继续培养30min后,用磷酸盐缓冲液清洗6孔板3次, 除去过量的苯并吲哚半菁染料。细胞继续加入碘化丙啶(10mg/ml)的1640培养液继续培 养30min后，用磷酸盐缓冲液清洗6孔板3次,除去过量的碘化丙啶。将细胞置于。
27、激光共 聚焦显微镜下观察。苯并吲哚半菁染料处理后的细胞在细胞质中出现绿色荧光。结果表明 苯并吲哚半菁染料具有良好的细胞穿透性，可以应用为细胞内的荧光探针。 附图说明 0057 图1苯并吲哚半菁染料的荧光光谱图，其中苯并吲哚半菁染料浓度为20M，离子 浓度为200M。 0058 图2添加不同浓度三价铁离子后苯并吲哚半菁染料的荧光光谱图，其中苯并吲哚 半菁染料浓度为20M。 0059 图3添加三价铁离子和其他金属离子后苯并吲哚半菁染料的540nm处的荧光强 度，其中苯并吲哚半菁染料浓度为20M，三价铁离子浓度为200M，其他金属离子浓度为 200M。 0060 图4添加不同浓度双氧水后苯并吲哚半菁。
28、染料和二价铁离子混合体系的荧光光 谱图，其中苯并吲哚半菁染料浓度为20M，二价铁离子浓度为200M。 0061 图5添加不同浓度葡萄糖后苯并吲哚半菁染料，二价铁离子和葡萄糖氧化酶混合 体系的荧光光谱图，其中苯并吲哚半菁染料浓度为20M，二价铁离子浓度为200M，葡萄 糖氧化酶为10U。 0062 图6苯并吲哚半菁染料的细胞毒性。 具体实施方式 0063 下面用具体实施例来进一步详细描述本发明的制备方法及其效果。 0064 实施例1 0065 1.苯并吲哚半菁染料的制备 0066 在100ml烧瓶中加入2.09g(10.00mmol)1,1,2-三甲基-1H-苯并e吲哚， 1.57g(10.00。
29、mmol)4-喹啉甲醛和0.05g醋酸铵，然后加入50ml无水乙醇。室温下反应12小 时后，减压蒸馏除去溶剂，残留固体用硅胶柱在洗脱液组成为乙酸乙酯：正己烷1:1(v/ 说 明 书CN 104004378 A 6/11页 8 v)下纯化得到黄色固体2.05g。产率59。 0067 2.化合物的表征 0068 1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )(ppm)8.99(d,J4.5Hz,1H),8.61(d,J 15.9Hz,1H),8.40(d,J8.4Hz,1H),8.21(d,J8.4Hz,1H),8.12(s,1H),8.10(s,1H) ,8.06(d,J8.2Hz,1H),。
30、8.00(d,J8.5Hz,1H),7.89(d,J8.5Hz,1H),7.84(t,J 7.5Hz,1H),7.76(s,1H),7.72(d,J5.9Hz,1H),7.65(t,J7.5Hz,1H),7.54(t,J 7.5Hz,1H),1.70(s,6H). 0069 13 C NMR(100MHz,DMSO-d 6 )184.33,150.73,150.29,148.28,140.55,139.90,1 32.26,130.44,129.68,129.62,129.49,129.11,128.06,127.21,126.80,125.58,125.38,1 24.97,123.51,1。
31、23.09,120.27,117.87,54.28,21.85. 0070 IR(v -1 ,LiBr):3452,2961,2915,2851,2024,1639,1568,1498,1458,1386,1115,96 1,818,756,608. 0071 MS(MALDI-Cl):C 25 H 20 N 2 m/z348.1626forM+H + 349.1699. 0072 Elemental Analysis:Calcd C,86.17；H,5.79；N,8.04.Found C,86.11；H,5.82； N,8.07. 0073 mp:246.5-247.0. 0074 上述检测。
32、结果证实制备的化合物为化学式(I)所示的苯并吲哚半菁染料。 0075 实施例2 0076 苯并吲哚半菁染料检测三价铁离子 0077 (1)配制浓度为30mM的苯并吲哚半菁染料DMSO溶液，分别取10l苯并吲哚半菁 染料DMSO溶液，加入蒸馏水稀至10ml，得到苯并吲哚半菁染料水溶液； 0078 (2)配制浓度为30mM的硝酸铁水溶液，浓度为100mM的硫酸亚铁水溶液，浓度为 30mM的硫酸铜水溶液； 0079 (3)在10ml苯并吲哚半菁染料水溶液中分别滴加步骤(2)所配制的一种水溶液 0.1ml，混合均匀后，在365nm光激发下观察苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光变化。 0080 结果显示，加入。
33、硝酸铁水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光淬灭，而加入硫 酸亚铁和硫酸铜的水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光保持不变。此结果表明，苯并 吲哚半菁染料对三价铁离子显示出选择性和荧光识别能力。 0081 实施例3 0082 苯并吲哚半菁染料检测三价铁离子 0083 (1)配制浓度为20mM的苯并吲哚半菁染料THF溶液，分别取10l苯并吲哚半菁 染料THF溶液，加入蒸馏水稀至10ml，得到苯并吲哚半菁染料水溶液； 0084 (2)配制浓度为15mM的氯化铁水溶液，浓度为100mM的硫酸亚铁水溶液，浓度为 30mM的硫酸镁水溶液； 0085 (3)在10ml苯并吲哚半菁染料水溶液中分别滴加步骤(。
34、2)所配制的一种水溶液 0.1ml，混合均匀后，在365nm光激发下观察苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光变化。 0086 结果显示，加入硝酸铁水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光淬灭，而加入硫 酸亚铁和硫酸镁的水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光保持不变。此结果表明，苯并 吲哚半菁染料对三价铁离子显示出选择性和荧光识别能力。 说 明 书CN 104004378 A 7/11页 9 0087 实施例4 0088 苯并吲哚半菁染料检测三价铁离子 0089 (1)配制浓度为40mM的苯并吲哚半菁染料DMF溶液，分别取10l苯并吲哚半菁 染料DMF溶液，加入蒸馏水稀至10ml，得到苯并吲哚半菁染料水溶。
35、液； 0090 (2)配制浓度为30mM的氯化铁水溶液，浓度为150mM的氯化亚铁水溶液，浓度为 30mM的硝酸锌水溶液； 0091 (3)在10ml苯并吲哚半菁染料水溶液中分别滴加步骤(2)所配制的一种水溶液 0.1ml，混合均匀后，在365nm光激发下观察苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光变化。 0092 结果显示，加入硝酸铁水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光淬灭，而加入氯 化亚铁和硝酸锌的水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光保持不变。此结果表明，苯并 吲哚半菁染料对三价铁离子显示出选择性和荧光识别能力。 0093 实施例5 0094 苯并吲哚半菁染料检测双氧水 0095 (1)配制浓度为。
36、30mM的苯并吲哚半菁染料乙腈溶液；配制浓度为30mM的二氯化 铁水溶液； 0096 (2)分别取10l苯并吲哚半菁染料乙腈溶液和50l二氯化铁水溶液，加入 10mL容量瓶中，用蒸馏水稀至10ml，得到含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子的水溶液； 0097 (3)配制浓度为30mM的双氧水水溶液； 0098 (3)在10ml含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子的水溶液中分别滴加步骤(2)所配 制的一种水溶液0.1ml，混合均匀后，在365nm光激发下观察苯并吲哚半菁染料水溶液的荧 光变化。 0099 结果显示，加入双氧水水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光淬灭。我们依 据上述方法配制含苯并吲哚半菁染料。
37、和锌离子的水溶液和含苯并吲哚半菁染料和镍离子 的水溶液，在上述水溶液中加入双氧水水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光保持不 变。此结果表明，苯并吲哚半菁染料和二价铁离子体系对双氧水显示出选择性和荧光识别 能力。 0100 实施例6 0101 苯并吲哚半菁染料检测双氧水 0102 (1)配制浓度为50mM的苯并吲哚半菁染料DMSO溶液；配制浓度为25mM的硫酸化 铁水溶液，分别取10l苯并吲哚半菁染料DMSO溶液和100l二氯化铁水溶液，加入10mL 容量瓶中，用蒸馏水稀至10ml，得到含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子的水溶液； 0103 (2)配制浓度为10mM的双氧水水溶液； 0104 (3。
38、)在10ml含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子的水溶液中分别滴加步骤(2)所配 制的一种水溶液0.1ml，混合均匀后，在365nm光激发下观察苯并吲哚半菁染料水溶液的荧 光变化。 0105 结果显示，加入双氧水水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光淬灭。我们依 据上述方法配制含苯并吲哚半菁染料和铜离子的水溶液和含苯并吲哚半菁染料和钙离子 的水溶液，在上述水溶液中加入双氧水水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光保持不 变。此结果表明，苯并吲哚半菁染料和二价铁离子体系对双氧水显示出选择性和荧光识别 说 明 书CN 104004378 A 8/11页 10 能力。 0106 实施例7 0107 苯并吲哚。
39、半菁染料检测双氧水 0108 (1)配制浓度为10mM的苯并吲哚半菁染料DMF溶液；配制浓度为50mM的二氯化铁 水溶液，分别取10l苯并吲哚半菁染料DMF溶液和10l二氯化铁水溶液，加入10mL容 量瓶中，用蒸馏水稀至10ml，得到含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子的水溶液； 0109 (2)配制浓度为100mM的双氧水水溶液； 0110 (3)在10ml含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子的水溶液中分别滴加步骤(2)所配 制的一种水溶液0.1ml，混合均匀后，在365nm光激发下观察苯并吲哚半菁染料水溶液的荧 光变化。 0111 结果显示，加入双氧水水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光淬灭。我们依。
40、 据上述方法配制含苯并吲哚半菁染料和银离子的水溶液和含苯并吲哚半菁染料和钠离子 的水溶液，在上述水溶液中加入双氧水水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光保持不 变。此结果表明，苯并吲哚半菁染料和二价铁离子体系对双氧水显示出选择性和荧光识别 能力。 0112 实施例8 0113 苯并吲哚半菁染料检测双氧水 0114 (1)配制浓度为40mM的苯并吲哚半菁染料乙腈溶液；配制浓度为40mM的二氯化 铁水溶液，分别取10l苯并吲哚半菁染料乙腈溶液和50l二氯化铁水溶液，加入10mL 容量瓶中，用蒸馏水稀至10ml，得到含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子的水溶液； 0115 (2)配制浓度为20mM的双氧水。
41、水溶液； 0116 (3)在10ml含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子的水溶液中分别滴加步骤(2)所配 制的一种水溶液0.1ml，混合均匀后，在365nm光激发下观察苯并吲哚半菁染料水溶液的荧 光变化。 0117 结果显示，加入双氧水水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光淬灭。我们依据 上述方法配制含苯并吲哚半菁染料和二价锰离子的水溶液和含苯并吲哚半菁染料和钾离 子的水溶液，在上述水溶液中加入双氧水水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光保持 不变。此结果表明，苯并吲哚半菁染料和二价铁离子体系对双氧水显示出选择性和荧光识 别能力。 0118 实施例9 0119 苯并吲哚半菁染料检测葡萄糖 0120 。
42、(1)配制浓度为30mM的苯并吲哚半菁染料乙腈溶液；配制浓度为30mM的二氯化 铁水溶液，分别取10l苯并吲哚半菁染料乙腈溶液，50l二氯化铁水溶液，10U的葡萄糖 氧化酶，加入10mL容量瓶中，用蒸馏水稀至10ml，得到含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子 的水溶液； 0121 (2)配制浓度为30mM的葡萄糖水溶液； 0122 (3)在10ml含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子的水溶液中分别滴加步骤(2)所配 制的一种水溶液0.1ml，混合均匀后，在365nm光激发下观察苯并吲哚半菁染料水溶液的荧 光变化。 说 明 书CN 104004378 A 10 9/11页 11 0123 结果显示，加入葡萄。
43、糖水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光淬灭。我们依 据上述方法配制含苯并吲哚半菁染料和汞离子的水溶液和含苯并吲哚半菁染料和锌离子 的水溶液，在上述水溶液中加入双氧水水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光保持不 变。此结果表明，苯并吲哚半菁染料和二价铁离子体系对双氧水显示出选择性和荧光识别 能力。 0124 实施例10 0125 苯并吲哚半菁染料检测葡萄糖 0126 (1)配制浓度为30mM的苯并吲哚半菁染料乙腈溶液；配制浓度为30mM的二氯化 铁水溶液，分别取10l苯并吲哚半菁染料乙腈溶液,50l二氯化铁水溶液和20U的葡萄 糖氧化酶，加入10mL容量瓶中，用蒸馏水稀至10ml，得到含苯并吲。
44、哚半菁染料，二价铁离子 和葡萄糖氧化酶的水溶液； 0127 (2)配制浓度为30mM的双氧水水溶液，浓度为150mM的果糖水溶液，浓度为30mM 的半乳糖水溶液； 0128 (3)在10ml含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子的水溶液中分别滴加步骤(2)所配 制的一种水溶液0.1ml，混合均匀后，在365nm光激发下观察苯并吲哚半菁染料水溶液的荧 光变化。 0129 结果显示，加入葡萄糖水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光淬灭，而加入果 糖和半乳糖的水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光保持不变。苯并吲哚半菁染料，二 价铁离子和葡萄糖氧化酶体系对葡萄糖显示出选择性和荧光识别能力。 0130 实施例。
45、11 0131 苯并吲哚半菁染料检测葡萄糖 0132 (1)配制浓度为50mM的苯并吲哚半菁染料DMSO溶液；配制浓度为25mM的硫酸化 铁水溶液，分别取10l苯并吲哚半菁染料DMSO溶液，100l二氯化铁水溶液和5U的葡萄 糖氧化酶，加入10mL容量瓶中，用蒸馏水稀至10ml，得到含苯并吲哚半菁染料，二价铁离子 和葡萄糖氧化酶的水溶液； 0133 (2)配制浓度为10mM的葡萄糖水溶液，浓度为150mM的半乳糖水溶液，浓度为 30mM的果糖水溶液； 0134 (3)在10ml含苯并吲哚半菁染料，二价铁离子和葡萄糖氧化酶的水溶液中分别滴 加步骤(2)所配制的一种水溶液0.1ml，混合均匀后，在。
46、365nm光激发下观察苯并吲哚半菁 染料水溶液的荧光变化。 0135 结果显示，加入葡萄糖水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光淬灭，而加入果 糖和半乳糖的水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光保持不变。苯并吲哚半菁染料，二 价铁离子和葡萄糖氧化酶体系对葡萄糖显示出选择性和荧光识别能力。 0136 实施例12 0137 苯并吲哚半菁染料检测双氧水 0138 (1)配制浓度为10mM的苯并吲哚半菁染料DMF溶液；配制浓度为50mM的二氯化 铁水溶液，分别取10l苯并吲哚半菁染料DMF溶液，10l二氯化铁水溶液和15U的葡萄 糖氧化酶，加入10mL容量瓶中，用蒸馏水稀至10ml，得到含苯并吲哚半菁。
47、染料，二价铁离子 和葡萄糖氧化酶的水溶液； 说 明 书CN 104004378 A 11 10/11页 12 0139 (2)配制浓度为100mM的葡萄糖水溶液，浓度为150mM的果糖水溶液，浓度为 150mM的半乳糖水溶液； 0140 (3)在10ml含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子的水溶液中分别滴加步骤(2)所配 制的一种水溶液0.1ml，混合均匀后，在365nm光激发下观察苯并吲哚半菁染料水溶液的荧 光变化。 0141 结果显示，加入葡萄糖水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光淬灭，而加入果 糖和半乳糖的水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光保持不变。此结果表明，苯并吲哚 半菁染料，二价铁。
48、离子和葡萄糖氧化酶体系对葡萄糖显示出选择性和荧光识别能力。 0142 实施例13 0143 苯并吲哚半菁染料检测双氧水 0144 (1)配制浓度为20mM的苯并吲哚半菁染料DMF溶液；配制浓度为20mM的二氯化 铁水溶液，分别取10l苯并吲哚半菁染料DMF溶液，50l二氯化铁水溶液和20U的葡萄 糖氧化酶，加入10mL容量瓶中，用蒸馏水稀至10ml，得到含苯并吲哚半菁染料，二价铁离子 和葡萄糖氧化酶的水溶液； 0145 (2)配制浓度为80mM的葡萄糖水溶液，浓度为200mM的果糖水溶液，浓度为200mM 的半乳糖水溶液； 0146 (3)在10ml含苯并吲哚半菁染料和二价铁离子的水溶液中分别滴加步骤(2)所配 制的一种水溶液0.1ml，混合均匀后，在365nm光激发下观察苯并吲哚半菁染料水溶液的荧 光变化。 0147 结果显示，加入葡萄糖水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光淬灭，而加入果 糖和半乳糖的水溶液后，苯并吲哚半菁染料水溶液的荧光保持不变。此结果表明，苯并吲哚 半菁染料，二价铁离子和葡萄糖氧化酶体系对葡萄糖显示出选择性和荧光识别能力。 0148 实施例14 0149 苯并吲哚半菁染料检测。