一种抑制海洋原甲藻和三角褐指藻的浒苔提取液制备方法 技术领域：
本发明涉及一种植物提取液制备方法，尤其涉及一种抑制海洋原甲藻和三角褐指藻的浒苔提取液的制备方法。
背景技术：
随着人口的迅速增长、工农业生产的迅速发展和人民生活水平的不断提高，陆源污染物对海洋环境的污染日趋加重，引起海水富营养化，由此造成世界各地沿海赤潮频发，规模不断扩大，不仅给渔业生产造成重大经济损失，而且危害着人类的生存环境。
为了有效地预防和控制赤潮，除了开展高频率、高密度监测活动，利用植物自身之间地生物抑制作用来治理赤潮不失为一条捷径。淡水生态系统中，高等植物与藻类，藻类与藻类间的竞争作用也已有较多报道。但在海洋藻类间，关于竞争作用的报道很少。
三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)是极具危害的赤潮藻之一。海洋原甲藻(Prorocentrum micans Ehrenb)是南海北部近岸水域常见种，也是形成赤潮的主要种类。两种赤潮都不易治理。浒苔(Enteromorpha)为大型绿藻，不仅可食用和药用，有巨大的经济价值；并且具有生长快、吸收营养物质多等特点，是较为理想的海洋生态修复海藻种类。若能利用大型绿藻浒苔作为除藻剂，则可以实现低成本控制微藻水华，尤其是三角褐指藻和海洋原甲藻引发的赤潮，尽快修复海域生态。
发明内容：
本发明的目的是要提供一种简单易行的方法，通过利用大型绿藻浒苔属浒苔作为除藻剂，实现低成本、高效率抑制由三角褐指藻和海洋原甲藻引发的赤潮。
本发明的目的是这样实现的：提供一种抑制海洋原甲藻和三角褐指藻的浒苔提取液制备方法，以新鲜浒苔为原料，加蒸馏水研磨或捣碎；再加经煮沸的海水，离心；所得上清再反复离心2-3次，以最终所得液为提取液。
所述的离心条件为：3000转/分，20分钟。
所述的浒苔提取液最佳浓度为0.6-1.0g/L。
所述的浒苔为条浒苔。
本发明具有以下优点：
1、采用研磨或捣碎法破碎藻体，无需大型仪器设备，适合实地操作，简单快捷；
2、藻液提取步骤简单，提取周期短(1-2个小时)，处理量根据需要随意控制；
3、原料丰富，价格便宜，浒苔作为大型经济藻类，我国沿海大量养殖；
4、浒苔本身生于水中，该方法中提取的藻液对水体没有二次污染；
5、该治理方法所需人工少，劳动力成本低；
6、对微藻抑制率高，最大可达到84％。
【附图说明】
图1：不同条浒苔抽提物浓度对海洋原甲藻生长的影响；
图2：不同浓度的条浒苔水溶性抽提液处理下三角褐指藻的生长状况。
具体实施方式：
以下将对本发明的一种抑制海洋原甲藻和三角褐指藻的浒苔提取液制备方法作进一步详细的描述，并提供实验证明其抑制作用。
实施例1
实验材料为海洋原甲藻(Prorocentrum micans Ehrenb.)，它是南海北部近岸水域常见种，是形成赤潮的主要种类，具体步骤如下：
取新鲜条浒苔(Enteromorpha clathrata)10g，加蒸馏水研磨成浆，用已过滤煮沸消毒的海水离心3次(离心条件：3000转/分，20分钟)，得上清液。将上清液按0.6，0.7，0.8，0.9，1.0(单位g/L)，5个浓度梯度，和阴性对照，加入到接种量为3000个/mL的海洋原甲藻溶液中，共培养10天，每2天取样记数，并记录其变化。
结果显示，相同海洋原甲藻接种量下(3000个/mL)加入浒苔抽提物的海洋原甲藻的生长显著下降，而且浒苔抽提物浓度越大，海洋原甲藻生长情况越差，当浒苔抽提物浓度为0.9g/L时，在第10天对海洋原甲藻抑制达到最大，抑制率为48.2％。不同条浒苔抽提物浓度对海洋原甲藻生长的影响见图1。
实施例2
实验材料为三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)，具体步骤如下：
取新鲜条浒苔10g，加蒸馏水研磨成浆，用已过滤煮沸消毒的海水离心4次(离心条件：3000转/分，20分钟)，得上清液。以此液为母液，用经煮沸消毒的海水作不同的稀释倍率，制得浒苔水溶性抽提液的浓度梯度为0，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7(单位g/L)，分别接种处于对数生长期的三角褐指藻(接种量1×104cells/mL)。
结果表明，在实验过程中，0.3-0.7g/L的浒苔水溶性抽提液对三角褐指藻的生长皆有显著抑制作用。在浒苔水溶性抽提液浓度为0.7g/L处理下，最大抑制效应表现在接种后的第8天，抑制率达到84.8％。不同浓度的条浒苔水溶性抽提液处理下三角褐指藻的生长状况见图2。