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对毒蕈碱受体具有亲和力的杂环类化合物
    技术领域 本发明涉及具有毒蕈碱受体亲和力的新型杂环类化合物， 包含所述化合物的药物 组合物， 以及所述化合物用于制备用于治疗、 缓解或预防毒蕈碱受体介导的疾病和病症的 药剂的用途。
     背景技术
     毒蕈碱胆碱能受体调节中枢和外周神经系统中神经递质乙酰胆碱的作用。 毒蕈碱 受体包含五种不同的亚型， 称为毒蕈碱 M1、 M2、 M3、 M4 和 M5 受体。各种亚型均在中枢和外周 神经系统中具有唯一的分布。M1 受体主要在大脑皮层中表达， 并且人们认为其涉及控制较 高的认知功能 ； M2 受体是在心脏中发现的主要亚型， 并且涉及控制心率 ； M3 受体在许多外 周组织中广泛表达， 并且人们认为其涉及胃肠道和泌尿道刺激以及出汗和流涎 ； M4 受体存 在于脑部， 并可涉及行进和抗精神病效应 ； M5 受体位于脑部， 并可涉及化合物加成和精神 病病症如精神分裂症。关于与各毒蕈碱受体亚型相关的主要生理学作用， 已进行了广泛努 力以产生显示有选择性激动或拮抗性质的新化合物 ( 参见， 例如 EP 0296721 ； EP 0316718 ； Sauerberg， P. 等人， J.Med.Chem.， 1992， Vol.35， No.22， 2274-2283 ； Ward， J.S. 等人， 1992， J.Med.Chem.， Vol.35， No.22， 4011-4019 ； US 5,527,813 ； Zlotos， D.P. 等 人， Exp.Opin. Ther.Patents， Vol.9， No.8， 1999， 1029-1053 ； Plate， R.， 等人， Bioorg.Med.Chem.4(1996)， 227-237 ； Plate， R. 等人， Bioorg.Med.Chem.8(2000)， 449-454 ； Del Guidice， M.R. 等人， Arch.Pharm.Med.Chem.2003， 336， 143-154)。
     优选的 M1/M4 毒蕈碱受体激动剂的公知的实例是噻二唑化合物呫诺美林， 其在 临床前研究中具有期望的特性， 然而在临床研究中显示了不利的副作用 ( 参见， 例如综述 Eglen， R.M.， Progress in MedicinalChemistry， 2005， 43， p.105-136 和 US 5,376,668)， 这似乎与 M2 受体介导的活性 ( 例如， 心率效应 ) 相关。另外， 呫诺美林具有相对低的 ( 体 外 ) 代谢稳定性。呫诺美林相关的化合物进一步公开于 US 5,527,813 中。然而， 代表性化 合物显示了不利的副作用， 其似乎与 M2 和 M3 受体介导的活性 ( 分别例如心率效应和流涎 ) 相关。
     尽管开发具有选择性 M1/M4 特性的治疗剂的进一步研究正在进行， 但是这仍旧没 有产生成功的候选化合物。因此， 需要具有期望性质的新型选择性化合物。 发明内容 现已发现， 式 (I) 的杂环类化合物或其药学上可接受的盐、 溶剂合物或水合物显 示对毒蕈碱受体的亲和力， 尤其是对 M1 和 / 或 M4 受体的亲和力， 具有毒蕈碱受体调节尤其 是 ( 部分 ) 激动性质
     其中
     - 所述杂环包含两个双键， 其可在几个位置存在， 由虚线 (---) 表示 ；
     - 所述杂环含有 2 个杂原子，
     -W 是 N 或 NH ；
     -Y 是 CH、 O 或 NH， 其中
     如果 Y 是 O， 则 X1 是 CH 且 X2 是残基 C-Z-R2 或 C-R3， 其中 Z 是 NH、 O或S； 并且
     如果 Y 是 CH 或 NH， 则 X1 和 X2 之一是 CH 或 N， 另一个是残基 C-Z-R2 或 C-R3， 其中 Z 是 NH 或 S ；
     -R1 选自结构 (a)、 (b) 和 (c) ：
     -R2 选自 (C1-C10) 烷基、 (C2-C10) 链烯基和 (C2-C10) 炔基， 其任选独立地被一个或多 个选自以下的取代基取代 ： 卤素、 羟基、 氰基、 氧代、 (C1-C6) 烷氧基、 (C1-C6) 烷硫基、 (C1-C6) 烯氧基、 (C1-C6) 烯硫基、 (C1-C4) 烷氧基 (C1-C4) 烷氧基、 (C5-C7) 环烷基、 5- 元不饱和杂环 ( 任选被卤素取代 )、 苯基、 苯氧基和苯硫基， 其中所述苯基任选被卤素取代 ； 或者
     -R2 是未分支的 (C2-C8) 烷基， 其在基团的 Za- 符号处被式 (Ia) 取代，
     其中， 如果 X1 是 CH 或 N， 则 X1a 是 CH 或 N 且 X2a 是 C-Za-， 或者
     如果 X1 是 C-Z-R2， 则 X1a 是 C-Za- 且 X2a 是 CH 或 N ； 并且
     符号 Wa、 Ya 和 Za 及取代基 R1a 具有与前述定义的符号 W、 Y 和 Z 及取代基 R1 相同 的含义， 并且不独立地选择， 符号 Wa、 Ya 和 Za 及取代基 R1a 各自分别表示与式 (I) 结构的 另一部分中符号 W、 Y 和 Z 及取代基 R1 相同的符号和取代基 ；
     -R3 选自 (C4-C10) 烷基、 (C2-C10) 链烯基和 (C2-C10) 炔基， 其任选独立地被一个或多 个选自以下的取代基取代 ： 卤素、 羟基、 氰基、 (C1-C6) 烷氧基、 (C1-C6) 烷硫基、 (C1-C6) 烯氧 基、 (C1-C6) 烯硫基、 (C1-C4) 烷氧基 (C1-C4) 烷氧基、 (C5-C7) 环烷基、 任选被卤素取代的 5- 元 不饱和杂环、 苯基、 苯氧基和苯硫基， 其中苯基任选被卤素取代。
     另外， 本发明的化合物显示比现有技术领域化合物呫诺美林高 ( 体外 ) 的代谢稳定性。
     本发明化合物可用于治疗、 缓解和预防毒蕈碱受体介导的疾病和病症。优选的化 合物是 M1 和 M4 受体激动剂， 并且可用于治疗毒蕈碱 M1/M4 介导的疾病和病症， 例如 - 但不 限于 - 阿尔茨海默病、 认知受损、 病、 精神分裂症和抗伤害感受。 特别地， 本发明化合物可用于治疗、 缓解或预防认知受损和精神障碍。
     在本发明的一个实施方案中， 所述化合物具有式 (I)， 其中 R2 选自 (C1-C10) 烷 基、 (C2-C10) 链烯基和 (C2-C10) 炔基， 其任选独立地被一个或多个选自以下的取代基取代 ： 卤素、 羟基、 氰基、 氧代、 (C1-C6) 烷氧基、 (C1-C6) 烷硫基、 (C1-C6) 烯氧基、 (C1-C6) 烯硫基、 (C1-C4) 烷氧基 (C1-C4) 烷氧基、 (C5-C7) 环烷基、 5- 元不饱和杂环 ( 任选被卤素取代 )、 苯基、 苯氧基和苯硫基， 其中苯基任选被卤素取代。优选地， R2 选自 (C1-C8) 烷基、 (C2-C8) 链烯基 和 (C2-C8) 炔基， 其任选独立地被一个或多个选自以下的取代基取代 ： 卤素、 羟基、 氰基、 氧 代、 (C1-C6) 烷氧基、 (C1-C4) 烷氧基 (C1-C4) 烷氧基、 (C5-C7) 环烷基、 四氢呋喃基和苯基， 其 中苯基任选被卤素取代。特别优选的是式 (I) 化合物， 其中 R2 选自 (C1-C8) 烷基、 (C2-C8) 链烯基， 其任选被一个或多个卤素或 (C1-C6) 烷氧基取代。 另 外， 在 本 发 明 的 一 个 实 施 方 案 中， R3 选 自 (C4-C10) 烷 基、 (C2-C10) 链 烯 基 和 (C2-C10) 炔基， 其任选被选自 (C5-C7) 环烷基或苯基的取代基取代， 其中苯基任选被卤素取 代。
     在本发明另外的实施方案中， R1 具有结构 (a) 或 (b)， 尤其是 (a)。
     在另一个实施方案中， 化合物具有式 (I)， 其中 W 是 N 且 Y 是 NH， 特别地， 当 X1 是 CH 且 X2 是残基 C-Z-R2 或 C-R3 且 Z 是 O 或 S， 并且优选 X2 是残基 C-Z-R2 时。Z 优选是 S。
     在另外的实施方案中， Y 是 O 和 Z 是 O 或 S， 并且优选 Z 是 S。
     术语卤素是指氟、 氯、 溴或碘。优选是氟。
     术语 (C1-C10) 烷基表示分支或未分支的具有 1-10 个碳原子的烷基， 例如甲基、 乙 基、 丙基、 异丙基、 丁基、 正戊基、 仲戊基、 己基、 辛基。特别地， 在残基 C-Z-R2 中， 当Z是O或 S 时， 未取代的正戊基是优选的烷基。优选的取代 R2 烷基当 Z 是 O 或 S 时是乙氧基乙基， 并 且当 Z 是 S 时是 -(CH2)3CF3。
     术语 (C1-C6) 烷氧基表示具有 1-6 个碳原子的烷氧基， 其中所述烷基部分如上定 义。术语 (C1-C6) 烷硫基具有相似的含义。术语 (C1-C4) 烷氧基 (C1-C4) 烷氧基表示 (C1-C4) 烷氧基， 其烷基部分依次被 (C1-C4) 烷氧基取代。
     术语 (C2-C8) 链烯基表示分支或未分支的具有 2-8 个碳原子的链烯基， 其中双键可 存在于基团的不同部分， 例如乙烯基、 烯丙基、 丁烯基、 正戊烯基、 仲戊烯基、 己烯基、 辛烯基 等。在残基 C-Z-R2 中， 当 Z 是 O 或 S 时， 优选的链烯基是 4- 戊烯基， 并且优选的取代链烯 基是 4， 4- 二氟 - 丁 -3- 烯基。
     术语 (C1-C6) 烯氧基表示具有 1-6 个碳原子的烯氧基， 其中所述链烯基部分如上定 义。术语 (C1-C6) 烯硫基具有相似的含义。
     术语 (C2-C8) 炔基表示分支的或未分支的具有 2-8 个碳原子的炔基， 其中三键可存 在于基团的不同部分， 例如乙炔基、 炔丙基、 1- 丁炔基、 2- 丁炔基等。
     术语 (C5-C7) 环烷基表示具有 5-7 个碳原子的环状烷基， 因此是环戊基、 环己基、 环
     庚基或环辛基。
     R2 定义中的术语 5- 元不饱和杂环表示含有 5 个原子的杂环， 其中至少一个原子是 选自 O、 N 和 S 的杂原子， 其它原子是碳原子， 其中所述杂环进一步至少包含一个双键。实例 是呋喃基和吡咯基。
     关于取代基， 术语″独立地″表示取代基可以是彼此相同或不同的。
     本发明化合物可通过本领域可用的方法和如本说明书中实验部分所例证适当地 制备。已发现一些新型和有用的中间体用于制备本发明的化合物。
     因此， 本发明的另一个实施方案是式 (II) 的杂环类化合物
     其中
     - 所述杂环包含两个双键， 其可在几个位置存在， 由虚线 (---) 表示 ；
     - 所述杂环含有 2 个杂原子，
     -W ＊是 N、 NH 或 N-2-( 三甲基硅烷基 ) 乙氧基甲基 ； ＊
     -Y 是 CH、 O、 N 或 NR4， 其中 R4 选自 H、 2-( 三甲基硅烷基 ) 乙氧基甲基、 -SO2N(CH3)2 和 -SO2 苯基 ； 其中
     如果 Y ＊是 O， 则 X1 ＊是 CH 且 X2 ＊是残基 C-Z ＊ -R2 ＊或 C-R3 ＊， 其中 Z ＊是 NH、 O或 S； 并且
     如果 Y ＊是 CH 或 NH， 则 X1 ＊和 X2 ＊之一是 CH 或 N， 另一个是残基 C-Z ＊ -R2 ＊或 C-R3 ＊ ， 其中 Z ＊是 NH 或 S ；
     -R2 ＊选自 (C1-C8) 烷基、 (C2-C8) 链烯基和 (C2-C8) 炔基， 其任选被一个或多个选自 以下的取代基取代 ： 卤素、 羟基、 氰基、 氧代、 (C1-C6) 烷氧基、 (C1-C6) 烷硫基、 (C1-C6) 烯氧 基、 (C1-C6) 烯硫基、 (C1-C4) 烷氧基 (C1-C4) 烷氧基、 (C5-C7) 环烷基、 5- 元不饱和杂环 ( 任选 被卤素取代 )、 苯基、 苯氧基或苯硫基， 其中苯基任选被卤素取代 ；
     或者
     -R2 ＊是未分支的 (C2-C8) 烷基， 其在基团的 Z ＊ a- 符号处被式 (IIa) 取代
     其中， 如果 X1 ＊是 CH 或 N， 则 X1 ＊ a 是 CH 或 N 且 X2 ＊ a 是 C-Z ＊ a-， 或者 ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊
     如果 X1 是 C-Z -R2 ， 则 X1 a 是 C-Z a- 且 X2 a 是 CH 或 N ； 并且 ＊ ＊ ＊ ＊ ＊ ＊
     符号 W a、 Y a 和 Z a 具有与上文定义的符号 W 、 Y 和 Z 相同的含义， 并且不 ＊ ＊ ＊ 独立地选择， 符号 W a、 Y a 和 Z a 各自分别表示与式 (II) 结构的另一部分中的符号 W ＊、 Y ＊和 Z ＊相同的含义 ； 并且 ＊
     -R3 选自 (C4-C10) 烷基、 (C2-C10) 链烯基和 (C2-C10) 炔基， 其任选独立地被一个或 多个选自以下的取代基取代 ： 卤素、 羟基、 氰基、 (C1-C6) 烷氧基、 (C1-C6) 烷硫基、 (C1-C6) 烯 氧基、 (C1-C6) 烯硫基、 (C1-C4) 烷氧基 (C1-C4) 烷氧基、 (C5-C7) 环烷基、 5- 元不饱和杂环 ( 任 选被卤素取代 )、 苯基、 苯氧基和苯硫基， 其中苯基任选被卤素取代，
     所述化合物可用于制备式 (I) 化合物， 其中 R1 具有结构 (a)。式 (II) 化合物中优 选的取代模式对应于式 (I) 化合物优选的取代模式。
     本发明的另一个实施方案是式 (III) 杂环类化合物
     其中 R5 是 H 且 R6 是 Br，
     或者 R5 是 -Si(CH3)3 且 R6 是 Br 或 -Si(CH3)3，
     此化合物用于制备式 (I) 化合物， 其中 R1 具有结构 (a)。
     本发明化合物可含有一个或多个不对称中心， 因此可以外消旋体和外消旋混合 物、 单个对映体、 非对映体混合物和各个非对映体存在。 根据分子中不同取代基的性质可存 在另外的不对称中心。各个这种不对称中心将独立地产生两个旋光异构体， 并且期望混合 物中所有可能的旋光异构体和非对映体以及纯净或部分纯净的化合物都包括在本发明的 范围之内。本发明意欲包括这些化合物的所有这种异构形式。这些非对映体的独立合成或 其色谱分离可如本领域已知的通过适当修改本文公开的方法来实现。 它们的绝对立体化学 可通结晶产物或其衍生的结晶中间体的 x- 射线晶体分析法确定， 如果需要， 使用含有已知 绝对构型的不对称中心的试剂。 如果期望， 化合物的外消旋混合物可被分离， 以便分离各个 对映体。分离可通过本领域公知的方法进行， 所述方法如化合物的外消旋混合物与对映体 纯的化合物偶合， 以形成非对映体混合物， 随后通过标准方法如分步结晶或色谱法分离各 个非对映体。
     化合物可以多晶型的形式存在， 并且这意欲包括在本发明中。 另外， 化合物可与水 ( 即水合物 ) 或普通的有机溶剂形成溶剂合物， 并且这类溶剂合物也意欲包含在本发明的 范围之内。
     同位素标记的式 (I) 化合物或其药学上可接受的的盐， 包括同位素标记以通过 PET 或 SPECT 检测的式 (I) 化合物， 也落在本发明的范围之内。 同样应用于用 [13C]-、 [14C]-、 [3H]-、 [18F]-、 [125I]- 或其它同位素富集的原子标记的式 (I) 化合物， 适于受体结合或代谢 研究。
     术语 “药学上可接受的盐” 是指那些在合理的医学判断范围之内适于与人类和低 级动物接触使用而没有异常毒性、 刺激、 过敏反应等， 并且与合理的利益 / 风险比相当的 盐。药学上可接受的盐在本领域内是公知的。当最后分离和纯化本发明化合物或通过它们 与药学上可接受的的无毒碱或酸反应分离时， 它们可被原位制备， 所述碱或酸包括无机或 有机碱和无机或有机酸。
     本发明化合物可肠内或胃肠外施用。 这些化合物及其组合物的确切剂量和给药方 案将取决于化合物本身的生物活性， 患者的年龄、 体重和性别， 所给予药剂的各个受试者的 需要， 病痛或需要的程度以及医学从业者的判断。 通常， 肠胃外给药需要的剂量低于其它更 依赖于吸收的给药方法。然而， 人类的剂量优选 0.001-10 毫克 / 千克体重， 更优选 0.01-1 毫克 / 千克体重。通常， 肠内和肠胃外的剂量将在每天总活性成分 0.1-1,000 毫克的范围 内。
     用本发明化合物制造的药剂还可用作治疗佐剂。在这种情况下， 药剂与其它用于 治疗这种疾病状态的化合物联合施用。 包含至少一种本发明化合物和至少一种其他药学活 性物质的药物组合制剂也在这方面考虑。
     与药学上合适的辅料， 例如描述于标准参考文献 “Remington， TheScience and Practice of Pharmacy” ( 第 21 版， Lippincott Williams &Wilkins， 2005， 尤其参见第 5 部分 ： Pharmaceutical Manufacturing) 中的辅料混合， 化合物可被压制成固体剂量单位， 如丸剂或片剂， 或者被制成胶囊或栓剂。通过药学上合适的液体， 化合物还可以溶液、 混悬 液或乳剂的形式应用。
     为制成剂量单位， 例如片剂， 考虑使用常规添加剂如填充剂、 着色剂、 聚合粘合剂 等。通常， 可使用不干扰活性化合物作用的任何药学上合适的添加剂。
     可与本发明化合物施用的合适载体包括， 例如适量使用的乳糖、 淀粉、 纤维素衍生 物等， 或其混合物。 静脉内施用的组合物可以是， 例如在无菌等渗水性缓冲液中的本发明化 合物溶液。如果需要， 静脉内组合物可包括， 例如增溶剂、 稳定剂和 / 或局部麻醉剂， 以减轻 注射部位的疼痛。
     本发明的药物组合物可制成用于任何给药途径的制剂， 并包含至少一种本发明化 合物和其药学上可接受的盐， 与任何药学上合适的成分、 辅料、 载体、 助剂或赋形剂。
     对于 “药学上合适的” ， 其表示载体、 稀释剂或赋形剂必须与制剂的其它成分相容， 并且对于其接受者不是有害的。
     在本发明的一个实施方案中， 提供药物包装或药盒， 其包含一个或多个装有一种 或多种本发明药物组合物的容器。 与这类容器相关的可能是各种书面材料， 如使用说明书， 或管理药品制造、 使用或销售的政府机构规定形式的通告， 此通告反映了机构批准制造、 使 用或销售， 用于人或兽给药。
     除非另外定义， 本文使用的所有技术和科学术语具有与本领域普通技术人员通常 理解相同的含义。尽管与本文所述相似或相同的方法和材料可用于实践或实验本发明， 但 是合适的方法和材料描述于本文件中。 本文提及的所有出版物、 专利申请、 专利和其它参考 文献均以其整体通过引用并入本文。如有冲突， 以本说明书 ( 包括定义 ) 为准。
     以下实施例仅意欲进一步更详细地例证本发明， 因此认为这些实施例不以任何方 式约束或限制本发明的范围。具体实施方式
     实施例
     §1. 材料和方法
     除非另外指出， 核磁共振谱 (1H NMR 和 13C NMR， APT) 在指定的溶剂中使用 Bruker 1 13 19 ARX 400( H ： 400MHz， C ： 100MHz) 在 300K 时测定。 F NMR 和 13C NMR 实验在 Varian Inova 13 19 500 分光计中， 于 11.74T(1H 499.9MHz ； C 125.7MHz ； F 50.7Mhz， 470.4MHz) 处操作， 使用 5mm SW 探针进行。 光谱在得自 Cambridge Isotope LaboratoriesLtd 的氘化氯仿或二氯甲 13 烷中测定。化学位移 (δ) 以四甲基硅烷 (1H， C) 或 CCl3F(19F) 低场的 ppm 给出。偶合常数 J 以 Hz 给出。NMR 谱中的峰形用符号 ‘q’ ( 四重峰 )、 ‘dq’ ( 双四重峰 )、 ‘t’ ( 三重峰 )、 ‘dt’ ( 双三重峰 )、 ‘d’ ( 双峰 )、 ‘dd’ ( 二双峰 )、 ‘s’ ( 单峰 )、 ‘bs’ ( 宽单峰 ) 和 ‘m’ (多 重峰 ) 表示。在将样品与一滴 D2O 混合后， 鉴别 NH 和 OH 信号。
     急骤色谱法是指使用指定的稀释剂和硅胶 (Acros ： 0.030-0.075mm 或 Merck 凝胶 60 ： 0.040-0.063mm) 纯化。
     柱色谱法使用硅胶 60(0.063-0.200mm， Merck) 进行。
     熔点在 Büchi B-545 熔点仪上记录。
     质谱 (MS) 在 Micromass QTOF-2 仪上使用 MassLynx 应用软件记录， 以采集和重 + 构数据。准确的质量测定以准分子离子 [M+H] 进行。精确的质量测定使用 JEOL JMS-SX/ SX 102 A 串联质谱仪， 使用快速原子轰击 (FAB) 进行。使用高分辨 FAB 质谱仪， 分辨率为 10,000(10％谷定义 )。
     涉及潮湿敏感化合物或条件的所有反应均在无水氮气氛下进行。
     反应通过使用薄层色谱法 (TLC) 在二氧化硅涂敷的塑料片材 (Merck 预涂敷硅胶 60 F254) 上用指定的洗脱液监测。点通过 UV 光 (254nm) 或 I2 显影。
     消光系数用 HP 8453 UV-Vis 分光光度计确定。
     分 析 型 高 效 液 相 色 谱 仪 (HPLC) 在 C18 柱 (Inertsil ODS-3， 粒 径 3mm ； 4.6mm 50mm) 上使用以下洗脱梯度进行 ： 线性梯度为含有 0.04％ HCO2H 的 5％ -95％ CH3CN 水溶液， 历经 5min， 然后是含有 0.04％ HCO2H 的 95％ CH3CN 水溶液， 历经 2min， 流速 2.0ml min-1。 产 物在 λ ＝ 254nm 处测定。
     液相色谱 - 质谱法 (LC-MS)， 方法 A
     LC-MS 系统包括 2 个 Perkin elmer 200 系列微量泵。这些泵通过 50μl T 形混合 器彼此连接， 其与 Gilson 215 自动进样器连接。此方法如下 ：
     步骤 总时间 流速 (ul/min) A(％ ) B(％ )
     0 0 2000 95 5
     1 1.8 2000 0 100
     2 2.5 2000 0 100
     3 2.7 2000 95 5
     4 3.0 2000 95 5
     A ＝ 100％水和 0.025％ HCOOH 和 10mmol NH4HCOO pH ＝ +/-3
     B ＝ 100％ ACN 和 0.025％ HCOOH自动进样器具有 2μl 注射环。 此自动进样器与具有 3μm 粒径的 Waters Atlantis C18 30 ＊ 4.6mm 柱连接。此柱在 40℃的 Perkin Elmer 系列 200 柱温箱中为恒温状态。此 柱与具有 2.7μl 流动池的 PerkinElmer 系列 200 UV 计连接。波长设置为 254nm。UV 计与 Sciex API150EX 质谱仪连接。质谱仪具有以下参数 ：
     扫描范围 ： 150-900 a.m.u. ； 极性 ： 阳极 ； 扫描方式 ： 特征 ； 分辨率 Q1 ： UNIT ； 步长 ： 0.10a.m.u. ； 每次扫描时间 ： 0.500sec ； NEB ： 10 ； CUR ： 10
     IS ： 5200 ； TEM ： 325 ； DF ： 30 ； FP ： 225 和 EP ： 10。
     光散射检测器与 Sciex API 150 连接。光散射检测器是 Sedere Sedex55， 于 50℃ 和 3bar N2 操作。
     整个系统由 G3 powermac 控制。
     液相色谱 - 质谱法 (LC-MS)， 方法 B
     LC-MS 系统包括 Agilent 1100 系列系统， 其包括以下组件 ：
     -G1379A 脱气器
     -G1312A 二元泵
     此泵与 G1313A ALS 自动进样器连接。 所述方法如下 ：
     步骤 总时间 (min) 流速 (ml/min) A(％ ) B(％ )
     0 0 1.0 2 98
     1 10.5 1.0 98 2
     2 18.0 1.0 98 2
     3 18.1 1.0 2 98
     4 24.0 1.0 2 98
     A： 乙腈与 0.1％ HCOOH 或者乙腈与 10mM NH3
     B： 水与 0.1％ HCOOH 或者水与 10mM NH3
     此自动进样器与具有 3.5um 粒径的 Zorbax Extend C18 柱 150×4.6mm 连接。
     此柱在 35℃的 G1316A Colcomm 柱温箱中为恒温状态。
     此柱与 G1315B DAD 二极管阵列检测器连接。波长范围设定为 220-320nm。UV 计 与 G1946D MSD 质谱仪连接， 在电子喷射模式中操作。
     此质谱仪具有以下参数 ：
     扫描范围 ： 100-800amu
     极性 ： 阳极和阴极
     模式 ： 扫描
     步长 ： 0.20
     循环时间 ： 1.04sec
     ％循环时间 ： 50％
     干气 ： 氮
     气体流速 ： 10l/min
     气体温度 ： 300℃
     Neb.Press. ： 30psi
     毛细管电压 ： 3000V Alltech ELSD 2000 检测器与 MSD 平行连接。DAD 后分割流量。 ELSD 具有以下参数 ： 干气 ： 氮 气体流速 ： 1.5l/min 漂移管温度 ： 39℃ 撞击体 ： 开 §2. 缩写 n-BuLi 正丁基锂 t-BuOH 叔丁醇 dba 二苯亚甲基丙酮 DCM 二氯甲烷 DMF N， N’ - 二甲基甲酰胺 DMF-DMA N， N’ - 二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛 DMSO 二甲基亚砜EtOH 乙醇
     Et2O 乙醚
     g 克
     h 小时
     Me 甲基
     MeI 碘甲烷
     MeOH 甲醇
     Mg 毫克
     min 分钟
     ml 毫升
     m.p. 熔点 c.q. 熔化范围
     NBS N- 溴代琥珀酰亚胺
     NIS N- 碘代琥珀酰亚胺
     PE 油醚 (40-65℃ )
     Rt 保留时间 (LC/MS)
     SEM-Cl (2- 氯甲氧基 - 乙基 )- 三甲基硅烷
     TBAF 氟化四丁铵
     THF 氢呋喃
     §3. 合成的一般方面
     描述了制备式 I 例证的本发明化合物的不同合成途径， 并且从易于得到的原料 容易制备。关于吡唑、 咪唑和异噁唑化学的更一般信息参见， 例如 J.A.Joule， K.Mills 和 G.F.Smith， “HeterocyclicChemistry” ， 第 三 版， Stanley Thornes(Publishers) Ltd.， Cheltenham， 1998。关于有机合成中保护基团的添加和随后除去的更多信息可在 T.W.Greene 和 P.G.M.Wuts， “Protecting groups in OrganicSynthesis” ， 第 三 版， JohnWiley & Sons， Inc.， 纽约， 1999 中发现。
     特定方法的选择取决于诸多因素， 如官能团和所用试剂的相容性、 使用保护基团、 催化剂、 活化试剂和偶合试剂的可能性以及所制备的最终化合物中存在的最终结构特征。
     在一般操作的实施例 ( 方案 1) 中， 在碱存在下， 将烟酰氯盐酸盐 (1) 转化为 N- 甲 基 -N- 甲氧酰胺 (2)， 并与己基 - 锂反应 (J.Med.Chem.， 35， 1992， 2392-2406)， 产生 1- 吡 啶 -3- 基 - 庚 -1- 酮 (3)。
     化合物 3 的温和 α- 亚甲基化 (J.Org.Chem.， 71， 2006， 2538-2541) 得到 2- 亚甲 基 -1- 吡啶 -3- 基 - 庚 -1- 酮 (4)， 其与肼反应 (Synthesis， 1989， 320-321)， 产生 1-(4- 戊 基 -3- 吡啶 -3- 基 -4， 5- 二氢吡唑 -1- 基 )- 乙酮 (5)。氧化 2- 吡唑啉为吡唑可使用本领 域技术人员公知的方法完成。具体条件是 ： 在二氯乙烷中活化 MnO2(EP0094555)， 产生化合 物 6， 其在碱性条件下脱保护， 得到化合物 7。3-(4- 戊基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四 氢 -1- 甲基吡啶衍生物 (9) 由化合物 8 通过用 CH3I 季铵化吡啶部分并用 NaBH4 还原相应的 吡啶鎓盐得到 (Arch.Pharm.Pharm.Med.Chem.， 336， 2003， 143-154)。
     方案 1
     在一般操作的另一个实施例 ( 方案 2) 中， 将易于得到的吡啶 -3- 基 - 乙酸 (10) 转化为 N- 甲基 -N- 甲氧酰胺衍生物 (12)， 其与 BuLi 反应产生 1- 吡啶 -3- 基 - 己烷 -2- 酮 (13)。用 N， N- 二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛处理 13， 得到烯胺 (14)， 将其转化为吡唑 (15)。 根据方案 1 所示的两个步骤顺序， 3-(4- 丁基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡 啶 (16) 的合成举例说明于方案 2 中。
     方案 2
     一般方法的再另一个实施例 ( 方案 3) 中， 3-(4- 溴 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (20A) 或其碘代类似物 (20B)(Bioorganic & Medicinal Chemistry， 4， 1996， 227-237) 用作合成 通式 I 化合物的前体。 20A 的二 - 锂衍生物 (Bioorganic & Medicinal Chemistry， 8， 2000， 2317-2335)， 其通过吡唑 -NH 脱质子和溴 - 锂交换 (2， 1 equiv.n-Buli， THF， -78℃， 2hr) 以 数克规模制备， 被二硫化物 ( 例如甲基二硫烷基甲烷 ) 捕获， 得到 3-(4- 甲基硫烷基 -1H- 吡 唑 -3- 基 )- 吡啶 21A， 根据方案 1 中所示的两个步骤顺序， 将其转化为 1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲 基吡啶衍生物 22A。
     用于本申请中描述的合成方法中在芳香系统邻位阴离子的产生根据称为直接邻 位金属化 (DOM) 的一般合成策略进行。在此领域内， 许多称为直接金属化基团 (DMG’ s) 的 官能团已用于此目的的研究。
     作为直接金属化基团 (DMG) 的二甲基磺酰胺， 在 3- 吡啶 -3- 基 - 吡唑 -1- 磺酸 二甲胺 (23) 的 N1- 位能锂化 5- 位， 并由此官能化 (Chem.Ber.， 124， 1991， 1639-1650)。23 的 5- 锂衍生物， 其通过 α- 金属化 (1,0equiv， t-Buli， THF， -78℃， 1hr) 以数克规模制备， 被二硫化物 ( 例如 1- 丁基二硫烷基丁烷 ) 捕获 (J.Org.Chem.， 64， 1999， 5366-5370)， 得到 5- 丁基硫烷基 -3- 吡啶 -3- 基 - 吡唑 -1- 磺酸二甲胺 24， 其脱保护 (25)， 并根据方案 1 中 所示的两个步骤顺序， 转化为 1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶衍生物 26。
     方案 3
     用于制备式 I 例证的本发明化合物的另一种合成途径描述于方案 4 中。引入作 为保护基团的 2-( 三甲基硅烷基 )- 乙氧基甲基 (SEM)(Tetrahedron Letters， 39， 1998， 5171-5174) 得到化合物 27A 和 27B 的混合物。后来的溴 - 锂交换 (1， 1 equiv.n-Buli， THF， -78℃， 1hr) 和 27A/B 的此 4- 锂衍生物与 S8 的反应生成 3- 吡啶 -3- 基 -1-(2- 三甲 基硅烷基 - 乙氧基甲基 )-1H- 吡唑 -4- 硫醇的中间体芳基硫醇锂 (J.Org.Chem.， 69， 2004， 3236-3239)。此中间体被 4- 溴 -1， 1， 1- 三氟 - 丁烷捕获， 得到 28A 和 28B 的混合物。随后 除去 SEM 保护基团， 得到期望的 3-[4-(4， 4， 4- 三氟 - 丁基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]- 吡 啶 21B， 根据方案 1 中所示的两个步骤顺序， 将其转化为 1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶衍生物 22B。
     方案 4
     在另一方面， 3-(4- 碘 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (20B， 方案 5) 用作式 I 所例证的 本发明化合物的原料。
     使 SEM 保护的衍生物 29A/B 的 4- 锂衍生物 ( 其根据对应的化合物 27A/B( 方案 4) 制备 ) 与硼酸三甲酯反应， 随后在原位过氧化氢氧化 (J.Heterocyclic Chem.， 31， 1994， 1377-1380)， 得到对应的 3- 吡啶 -3- 基 -1-(2- 三甲基硅烷基 -1- 乙氧基甲基 )-1H- 吡 唑 -4- 醇 (30， 一个指定的异构体 )。4- 羟基衍生物 30 的烷化可使用本领域已知的方法实 现， 例如通过化合物 30 与 K2CO3 在 DMF 中， 在各种 ( 芳基 ) 烷基卤化物例如 (3- 溴 - 丙基 )- 苯 存在下反应， 得到化合物 31A( 一个指定的异构体 )。随后除去 SEM 基团， 得到 3-[4-(3- 苯 基 - 丙氧基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]- 吡啶 (32A)， 根据方案 1 中所示的两个步骤顺序， 将其转化 为 1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶衍生物 33A。
     方案 5
     方案 6 列举了两种可替代的制备 3-(4- 烷氧基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四 氢 -1- 甲基吡啶化合物的方法。
     易于得到的 SEM 保护的吡唑 29A/B 混合物通过方案 1 中所述的有效两步顺序 ( 用 CH3I 季铵化吡啶部分和用 NaBH4 还原对应的吡啶鎓盐 ) 转化为 34A/B 混合物。
     形成 C-O 键的技术已有报道 ( 例如， J.Am.Chem.Soc.， 123， 2001， 10770)。更明确 地， 用 4- 碘 - 吡唑类似物 (34A/B) 有效的转化伯醇可使用 CuI/1， 10- 二氮菲催化的交叉偶 合方法 (Organic Letters， 4， 2002， 973-976) 实现。随后脱保护化合物 35A( 一个指定的异 构体 )， 得到 3-(4- 己氧基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶 (33B)。
     在另外的合成顺序 ( 方案 6) 中， C-O 键形成可使用前述 CuI/1， 10- 二氮菲催化的 交叉偶合方法完成， 得到化合物 31G。根据方案 5 说明的方法， 化合物 33G 的合成已在方案 6 中例证。
     方案 6
     本 发 明 的 一 个 方 面 涉 及 双 3-(4- 烷 基 硫 烷 基 -1H- 吡 唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四 氢 -1- 甲基吡啶衍生物 ( 例如， 化合物 22C， 方案 7)， 其结合并可激活毒蕈碱受体 (J.Med. Chem.， 44， 2001， 4563-4576)。
     引入作为保护基团的苯磺酰基 ( 从 20A 开始 ) 区域选择性地完成， 生成 3-(1- 苯 磺酰基 -4- 溴 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (36A， 从 20A)。
     脂 族 和 芳 族 硫 醇 及 芳 基 溴 的 交 叉 偶 合 可 通 过 Pd2(dba)3/Xantphos 催 化 系 统 在 回 流 二 甲 苯 中 调 节， 得 到 对 应 的 芳 基 硫 醚 (Organic Lettters， 6， 2004， 4587-4590， Tetrahedron， 61， 2005， 5253-5259)。
     使用此方法， 将 36A 转化为被保护的双 - 烷基硫烷基 - 吡唑衍生物 37。 除去 N1- 苯 磺酰基可使用本领域技术人员公知的方法实现， 所述方法例如， 任选将化合物 37 与氢氧化 钾在二甘醇中， 在肼存在下反应。用 CH3I 季铵化 ( 双 )- 吡啶部分并用 NaBH4 还原对应的 ( 双 )- 吡啶鎓盐， 得到吡唑衍生物 22C。
     方 案 7 列 举 了 另 一 种 制 备 3-(4- 烷 基 硫 烷 基 -1H- 吡 唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四 氢 -1- 甲基吡啶衍生物的方法， 于是可用于合成方案 3&4 中存在的化合物 ( 分别为 22A 和 22B)， 其主要特征是母体硫醇的可用性。
     方案 7
     另一个制备式 I 本发明化合物的实例显示于方案 8 中。
     吡唑衍生物 19 的直接硝化 (Chem.Ber.， 88， 1955， 1577) 得到 3-(4- 硝基 -1H- 吡 唑 -3- 基 )- 吡啶 (38)， 其被还原为对应的 3- 吡啶 -3- 基 -1H- 吡唑 -4- 基胺 (39)， 并与酰 基氯例如丁酰氯反应得到酰胺 (40)。随后转化为 1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶衍生物 41 根 据方案 1 中所示的两个步骤顺序进行。 随后， 酰胺的 LiAlH4 还原生成丁基 -[3-(1- 甲基 -1， 2， 5， 6- 四氢 - 吡啶 -3- 基 )-1H- 吡唑 -4- 基 ]- 胺 (42)。
     方案 8
     方案 9 列举了式 I 化合物 3-(4- 炔基 ( 和链烯基 )-1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四 氢 -1- 甲基吡啶衍生物的制备。
     3-(1- 苯磺酰基 -4- 溴 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (36A， 方案 7) 或其碘代类似物 36B( 方案 9) 是用于与末端乙炔 Sonogashira 偶合的优秀底物 (Tetrahedron Letters， 38， 1997， 7835-7838.， Eur J.Org.Chem.， 2006， 3283-3307)。在 CuI( 过量 Et3N， DMF， 80℃， 2hr)
     和 ( 例如 ) 己 -1- 炔存在下， 用 PdCl2(PPH3)2 催化生成化合物 43A。随后脱保护 ( 根据方案 7)， 随后按方案 1 中所示的两个步骤顺序， 得到 3-(4- 己 -1- 炔基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶 (45A)。
     化合物 36A( 或 36B) 的范围和反应性通过与 ( 例如 ) 烯基硼酸的 Suzuki-Miyaura 偶合反应进一步例证。与 Pd(OAc)2 催化和在 K3PO4 和 ( 例如 )(E)- 己烯 -1- 基硼酸存在下 有效的 S-Phos(J.Am.Chem.Soc.， 127， 2005， 4685-4696)， 得到链烯基 46A。随后脱保护， 随 后按方案 1 中所示的两个步骤顺序， 得到 3-(4- 己 -1- 烯基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四 氢 -1- 甲基吡啶 (47A)。
     方案 9
     在 另 一 方 面， 3-(4- 碘 -1H- 吡 唑 -3- 基 )-1- 氮 杂 二 环 [2.2.2] 辛 烷 (48， Bioorganic & Medicinal Chemistry 8， 2000， 449-454) 用作式 I 本发明化合物的原料 ( 方 案 10)。
     参照方案 3， 48 的二 - 锂衍生物 (Bioorganic & MedicinalChemistry， 8， 2000， 2317-2335)(2， 1 equiv.n-Buli， THF， -78℃， 2hr) 被二硫化物 ( 例如 1- 丁基二硫烷基 - 丁 烷 ) 捕获， 得到对应的 3-(4- 丁基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷 49A。
     方 案 10 列 举 了 另 一 种 - 但 是 也 是 一 般 的 - 制 备 3-(4- 烷 基 硫 烷 基 -1H- 吡 唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷衍生物的方法。于是， 化合物 48 可被 Pd2(dba)3/ Xantphos 催化系统 ( 与方案 7 类似， 但是在 DMF 中于 120℃下 ) 转化， 在单个步骤中而未保 护的情况下， 得到相应的芳基硫醚 49B。
     通过如方案 6 中所述的 CuI/1， 10- 二氮菲催化的交叉偶合方法， 然而使用不同的 条件， 将易于得到的 SEM 保护的吡唑 50( 一个指定的异构体 ) 混合物转化为 51A 的混合物。 随后脱保护 51A， 得到对应的 3-(4- 丁氧基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [2.2.2]- 辛烷 52A。
     方案 10
     另一个制备式 I 本发明化合物的实例显示于方案 11 中。
     将易于得到的 1- 氮杂 - 二环 [3.2.1] 辛 -6- 酮 (53)， (J.Med.Chem.， 36， 1993， 683-689) 转化为 6-(1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [3.2.1]-6- 醇 (55)， 类似于有效的两个 步骤顺序 (Bioorganic & Medicinal Chemistry8， 2000， 449-454)。尝试改善醇 (55) 脱水 作用的收率， 这通过酰化作用 (56)(Heterocycles， 24， 1986， 971-977) 和随后在热 (185℃ ) 中 消 除 实 现。还 原烯胺 (57)， 得 到预 期的内 1- 氮 杂二 环 [3.2.1] 衍生 物 (58)。碘 化 (Bioorganic & Medicinal Chemistry， 4， 1996， 227-237) 和通过 Pd2(dba)3/Xantphos 催化 系统引入戊烷 -1- 硫醇 ( 根据方案 7)， 得到内 -6-(4- 戊基硫烷基 -1-H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮 杂二环 [3.2.1] 辛烷 (60A)。
     方案 11
     在方案 12 中， 显示了另一个制备式 I 本发明化合物的实例。
     将 商 业 可 购 得 的 3- 吡 啶 醛 肟 (61) 转 化 为 其 氯 羟 基 亚 胺 基 衍 生 物 (US2004/0157900)， 其被 “原位” 转化为烟腈氧化物 (Tetrahedron， 61， 2005， 4363-4371)， 并与 1， 2- 二 - 三甲基硅烷基 - 乙炔反应 (Chem.Ber.， 107， 1974， 3717-3722)， 得到 1， 3- 双 极环加成产物 3-(4， 5- 二 - 三甲基硅烷基 - 异噁唑 -3- 基 )- 吡啶 (62)。卤素 - 诱导的本 位去甲硅烷基化 (ipsodesilylation) 产生 4- 溴 -5- 三甲基硅烷基衍生物 (63)。随后用 NH4OH 去甲硅烷基化 (Chem.Ber.， 112， 1979， 2829-2836) 产生 3-(4- 溴 - 异噁唑 -3- 基 )- 吡 啶 (64)。
     异噁唑 - 吡啶衍生物 62、 63 和 64 是新型化合物， 并且如此， 是本发明的实施方案。
     通过 Pd2(dba)3/Xantphos 催化系统， 将 ( 例如 ) 丁烷 -1- 硫醇引入化合物 64 中 ( 根据方案 7、 10 和 11)， 得到 3-(4- 丁基硫烷基 - 异噁唑 -3- 基 )- 吡啶 (65A)。季铵化吡 啶部分， 优先用硫酸二甲酯， 并且用 NaBH4 还原对应的吡啶鎓盐， 产生对应的 3-(4- 丁基硫 烷基 - 异噁唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶 (66A)。
     方案 12
     方案 13 举例说明了为式 I 化合物的 3-(4- 炔基 ( 和链烯基 )- 异噁唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶衍生物的制备。
     使用方案 9 中所述的方法的类似方法， 3-(4- 溴 - 异噁唑 -3- 基 )- 吡啶 (64) 是用 于与 ( 末端 ) 乙炔 Sonogashira 偶合的优秀底物。
     随后使用方案 12 中所述的季铵化和还原条件， 转化这些炔基衍生物 ( 方案 13， 例 如 69A)， 得到对应的 3-(4- 炔基 - 异噁唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶衍生物 ( 例 如 70A)。
     化合物 64 的范围和反应性进一步使用方案 9 中描述的方法通过与 ( 例如 ) 烯基 代硼酸的 Suzuki-Miyaura 偶合反应例证。使用方案 12 中所述的季铵化和还原条件， 随后 转化这些链烯基衍生物 ( 方案 13， 例如 67A) 得到对应的 3-(4- 烯基 - 异噁唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶衍生物 ( 例如 68A)。
     方案 13
     式 I 本发明化合物的制备进一步显示于方案 14 中。
     将 3- 三甲基锡烷基 - 吡啶 (71)， (Eur.J.Org.Chem.， 2002， 2126)( 使用 Knochel 方 法得自 3- 溴 - 吡啶 (Angew.Chem.， Int.Ed.， 39， 2000， 4414-4435)) 在 Stille 条件 ( 甲苯， 120℃， PdCl2(PPH3)2) 下与 4， 5- 二溴 -1-(2- 三甲基硅烷基 - 乙氧基甲基 )-1H- 咪唑 (72) 偶 合 (Tetrahedron Letters， 39， 1998， 5171-5174)， 得到 3-[5- 溴 -3-(2- 三甲基硅烷基 - 乙 氧基甲基 )-3H- 咪唑 -4- 基 ]- 吡啶 (73)。 通过 Pd2(dba)3/Xantphos 催化系统引入 ( 例如 ) 戊烷 -1- 硫醇 ( 根据方案 12) 得到对应的 5- 戊基硫烷基 - 异噁唑衍生物 (74A)。季铵化吡 啶部分 (CH3I) 并用 NaBH4 还原对应的吡啶鎓盐 (75A)， 随后除去 SEM 基团， 产生 3-[5- 戊基 硫烷基 -3H- 咪唑 -4- 基 ]-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶 (76A)。
     74A 向 76A 的另外的转化， 脱保护 74B( 方案 14， 化合物 77)， 随后季铵化和还原， 得 到期望的 3-[5- 己基硫烷基 -3H- 咪唑 -4- 基 ]-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶 (76B)。
     方案 14
     §4. 具体化合物的合成
     N- 甲氧基 -N- 甲基 - 烟酰胺
     ( 化合物 2， 方案 1)
     将 烟 酰 氯 盐 酸 盐 ( 化 合 物 1)(10g， 56mmol) 和 6.28g 的 N， O- 二 甲 基 - 羟 胺 .HCl(72.8mmol) 在 200ml 二氯甲烷中混合。向此混合物中添加 18.14ml 的吡啶 ( 在 15 分钟内， 于 0℃ )。随后将反应混合物于室温搅拌 4 小时。反应在真空中浓缩。将得到的残 余物置于二氯甲烷和 H2O(0℃ ) 中， 用 2N NaOH 溶液洗涤， 随后用盐水洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。经急骤色谱法纯化 (MeOH/ 三乙胺 97/3)， 得到化合物 2， 为油状物 1 (6.92g， 74％ )。 H-NMR(200MHz， CDCl3)δ8.96(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.69(d， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.04(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.41-7.32(m， 1H)， 3.56(s， 3H)， 3.40(s， 3H)。(TLCMeOH/ 三 乙 胺 Rf 0.19)。
     1- 吡啶 -3- 基 - 庚 -1- 酮
     ( 化合物 3， 方案 1)
     在 N2 下， 于 -78℃， 向含有化合物 2(1.0g， 6.02mmol) 的无水 THF(15ml) 溶液中逐 滴添加 3.08ml(7.66mmol) 的己基 - 锂 (2.5M， 在己烷中 )。添加后， 将得到的溶液于 -78℃ 搅拌 30 分钟。使混合物温热至室温， 并倾倒入 NH4Cl 溶液 (10g/50ml H2O， 0℃ ) 中。添加 乙酸乙酯， 并将有机层用 5％ NaHCO3 溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到 的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 /PE 1 ∶ 1)， 得到化合物 3， 为油状物 (0.91g， 78％ )。 1 H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ9.18(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.78(d， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.24(dt， J＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.47-7.37(m， 1H)， 2.99(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.84-1.65(m， 2H)， 1.47-1.25(m， 6H)， 0.90(bt， J ＝ 7Hz， 3H)。
     2- 亚甲基 -1- 吡啶 -3- 基 - 庚 -1- 酮
     ( 化合物 4， 方案 1)
     向溶解在 10ml MeOH 中的 1g(5.2mmol) 化合物 3 中添加 0.1ml 的哌啶、 0.1ml 的乙 酸和 3ml 的甲醛水溶液 ( 在水中的 37％的甲醛 )。将混合物加热至回流 48 小时。
     将混合物冷却并在真空中浓缩。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 5％ NaHCO3 溶液洗 涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。 得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 /PE 1/1)， 得到化合物 4， 为油状物 (1.05g， 95％ )。1H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.94(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.76(d， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.05(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.46-7.35(m， 1H)， 5.94(s， 1H)， 5.64(s， 1H)， 2.48(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.60-1.25(m， 6H)， 0.99-0.82(m， 3H)。
     1-(4- 戊基 -3- 吡啶 -3- 基 -4， 5- 二氢吡唑 -1- 基 )- 乙酮
     ( 化合物 5， 方案 1)
     将化合物 4(3.37g， 16.6mmol) 和 5.89ml 的肼水合物溶解于 50ml 的乙酸中， 并 加热至回流 1.5 小时。将混合物冷却并在真空中浓缩。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 5％ NaHCO3 溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 / 乙酸乙酯 1/1)， 得到化合物 4( 无定形， 2.92g， 68 ％ )。1H-NMR(600MHz， D6DMSO) ： δ8.92(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.67-8.64(m， 1H)， 8.07(bd， J ＝ 8Hz， 1H)， 7.39-7.36(m， 1H)， 4.04(t， J ＝ 10Hz， 1H)， 3.96(dd， J ＝ 10Hz， J ＝ 5Hz， 1H)， 3， 67-3.61(m， 1H)， 2.40(s， 3H)， 1.76-1.69(m， 1H)， 1.50-1.42(m， 1H)， 1.39-1.22(m， 6H)， 0.87(bt， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 戊基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶
     ( 化合物 7， 方案 1)
     将化合物 5(0.9g， 3.47mmol) 和 3.01g 的 MnO2(10eq.) 在二氯乙烷 (100ml) 中混 合， 并温热至回流 2 小时 (Dean Stark 条件 )。
     添加另外的 MnO2(6.02g)， 并将混合物回流另外的 12 小时。将混合物冷却， 过滤， 并将滤液用二氯乙烷 / 异丙醇 (1/1) 充分洗涤。 将混合物在真空中浓缩， 得到氧化产物 (6) (TLC 乙酸乙酯 Rf 0.20)， 其被一些原料 (5)(TLC 乙酸乙酯 Rf 0.27)， 和已经去乙酰化的产物 (7)(TLC 乙酸乙酯 Rf 0.12) 污染。此混合物 (0.64g) 无需进一步纯化即用于下一步骤中。
     将上述物质溶解于 5ml 的 EtOH 和 5ml 的 2N NaOH 中， 并将反应混合物回流 4 小时。 将混合物冷却并在真空中浓缩。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 5％ NaHCO3 溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 )， 得到标题 1 化合物 (7)， 为油状物 (344mg， 1.6mmol， 46％ ( 全部 ))。 H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.88(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.60(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 7.92(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.47(bs， 1H)， 7.38-7.33(m， 1H)， 2.62(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.64-1.55(m， 2H)， 1.36-1.28(m， 6H)， 0.85(bt， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 戊基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 9， 方案 1)
     将碘甲烷 (0.08ml， 1.28mmol) 添加到 7(130mg， 0.6mmol) 的丙酮 (10ml) 溶液中。 加热 12 小时后， 冷却反应混合物， 并将沉淀的结晶过滤， 用乙醚洗涤并干燥， 得到化合物 8。 向冷却的 (-30℃ ) 此碘化吡啶鎓衍生物 (8) 在 MeOH(15ml) 中的混悬液中， 以小部分添加四 氢化硼钠 (90mg， 2.4mmol)。使混合物温热至室温并倾倒入 NH4Cl 饱和溶液 (0℃ ) 中。减压 下 ( 部分 ) 除去溶剂。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 浓溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 (MeOH/ 三乙胺 97/3)， 得到标题化合 1 物 9( 无定形， 63mg， 45％ ( 全部 ))。H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ7.35(bs， 1H)， 6.07-6.00(bs， 1H)， 3.33-3.25(m， 2H)， 2.64-2.35(m， 6H)， 2.45(s， 3H)， 1.68-1.50(m， 2H)， 1.41-1.28(m， 4H)， 0.90(bt， J ＝ 7Hz， 3H)。
     N- 甲氧基 -N- 甲基 -2- 吡啶 -3- 基 - 乙酰胺
     ( 化合物 12， 方案 2)
     向 含 有 化 合 物 10(15.35g， 88.4mmol) 的 无 水 二 氯 甲 烷 (200ml) 溶 液 中 添 加 14.93ml(163.3mmol) 的草酰氯和数滴 DMF。将混合物在 N2 下温和回流 8 小时。将混合物 冷却并浓缩， 再溶解于二氯甲烷中并浓缩。将残余物溶解于 200ml 无水二氯甲烷中， 并添 加 11.09g(113.7mmol) 的 N， O- 二甲基 - 羟胺 .HCl。向此混合物 (0℃ ) 中添加 2.73ml 的 吡啶 (15 分钟内 )。随后于室温将反应混合物搅拌 4 小时。将反应在真空中浓缩。将得到 的残余物置于二氯甲烷和 H2O(0℃ ) 中， 用 2N NaOH 溶液， 随后用盐水洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 )， 得到化合物 12， 为油状物 (5.2g， 1 33％ )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ8.53-8.49(m， 2H)， 7.66(bd， J ＝ 8Hz， 1H)， 7.29-7.24(m， 1H)， 3.78(s， 2H)， 3.68(s， 3H)， 3.20(s， 3H)。
     1- 吡啶 -3- 基 - 己 -2- 酮
     ( 化合物 13， 方案 2)
     在 N2 下， 于 -50 ℃， 向含有化合物 12(1.0g， 5.5mmol) 的无水 THF(15ml) 溶液中 逐滴添加 2.6ml(6.5mmol) 的 n-Buli(2.5M， 在己烷中 )。添加后， 于 -50 ℃将得到的溶液 搅拌 30 分钟。使混合物温热至室温并倾倒入 NH4Cl 溶液 (10g/50ml H2O， 0 ℃ ) 中。添加 乙酸乙酯， 并将有机层用 5 ％ NaHCO3 溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得 到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 )， 得到化合物 13， 为油状物 (0.21g， 25 ％ )。 1 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ8.50(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.45(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 7.54(dt， J＝ 8Hz， J ＝ 2Hz， 1H)， 7.29-7.24(m， 1H)， 3.70(s， 2H)， 2.50(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.62-1.53(m， 2H)， 1.34-1.24(m， 2H)， 0.9(bt， J ＝ 7Hz， 3H)。
     1- 二甲氨基 -2- 吡啶 -3- 基 - 庚 -1- 烯 -3- 酮
     ( 化合物 14， 方案 2)
     在 N2 下， 将 13(2.0g， 11mmol) 和 DMFDMA(2.5ml， 14.6mmol) 在干燥 t-BuOH 中的溶 液回流 18 小时。使溶液达到室温， 随后在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 1 ( 乙酸乙酯 )， 得到化合物 14， 为油状物 (1.85g， 62％ )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ8.51(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.45(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 7.66(s， 1H)， 7.53(dt， J ＝ 8Hz， J ＝ 2Hz， 1H)， 7.28-7.24(m， 1H)， 2.72(bs， 6H)， 2.20(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.54-1.46(m， 2H)， 1.26-1.16(m， 2H)， 0.9(bt， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 丁基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶
     ( 化合物 15， 方案 2)
     将 化 合 物 14(0.95g， 4mmol) 和 0.46ml 肼 水 合 物 (9.4mmol) 溶 解 于 无 水 乙 醇 (25ml) 中， 并加热至回流 2 小时。将混合物冷却并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤 色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 )， 得到化合物 15( 无定形， 0.7g， 85％ )。1H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.65(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.52(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 7.72-7.67(m， 2H)， 7.35-7.31(m， 1H)，2.82(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.70-1.62(m， 2H)， 1.42-1.33(m， 2H)， 0.9(bt， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 丁基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 16， 方案 2)
     将碘甲烷 (0.9ml， 14mmol) 添加到 15(600mg， 3mmol) 的丙酮 (50ml) 溶液中。加热 12 小时后， 冷却反应混合物， 并将沉淀的结晶过滤， 用乙醚洗涤并干燥， 得到对应的碘化吡 啶鎓衍生物。向冷却的 (-30℃ ) 此碘化吡啶鎓衍生物在 MeOH(100ml) 中的混悬液中， 以小 部分添加四氢化硼钠 (0.5g， 18.9mmol)。使混合物温热至室温并倾倒入 NH4Cl 饱和溶液中 (0℃ )。在减压下 ( 部分 ) 除去溶剂。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 浓溶液洗涤， 干 燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 (MeOH/ 三乙胺 97/3)， 得到标题化合物 16( 无定形， 500mg， 70 ％ ( 全部 ))。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.40(bs， 1H)， 5.78-5.74(bs， 1H)， 3.15-3.05(m， 2H)， 2.71(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.56(t， J ＝ 6Hz， 2H)， 2.43(s， 3H)， 2.38-2.32(m， 2H)， 1.68-1.60(m， 2H)， 1.43-1.36(m， 2H)， 0.96(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 甲基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶
     ( 化合物 21A， 方案 3) 在 N2 下，于 -78 ℃，向 含 有 化 合 物 20A(3.0g， 13.4mmol，根 据 Bioorganic &Medicinal Chemistry， 4， 1996， 227-237 制备 ) 的无水 THF(150ml) 溶液中逐滴添加 2.1eq n-BuLi(11.2ml， 2.5M 在己烷中 )。添加后， 将得到的溶液于 -78℃搅拌 2 小时。在此温度 下， 添加 1.1eq 甲基二硫烷基甲烷 (1.33ml)， 并将得到的溶液于 -78℃搅拌 1 小时， 随后使 其温热至室温过夜。然后， 将混合物用 NH4Cl 饱和溶液于 0℃猝灭， 并在真空中浓缩。添加 乙酸乙酯， 并将有机层用 5％ NaHCO3 洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。经急骤色 谱法纯化 ( 乙酸乙酯 )， 得到化合物 21A( 油状物， 1.71g， 67％ )。1H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ9.18(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.60(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.28(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.70(s， 1H)， 7.42-7.33(m， 1H)， 2.38(s， 3H)
     3-(4- 甲基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 22A， 方案 3)
     将 2.5eq 碘 甲 烷 (1.39ml， 22.37mmol) 添 加 到 21A(1.71g， 8.95mmol) 的 丙 酮 (100ml) 溶液中， 并将混合物搅拌 18 小时。将沉淀的结晶过滤， 用乙醚洗涤并干燥， 得到对 应的碘化吡啶鎓衍生物。 向冷却的 (-30℃ ) 此碘化吡啶鎓衍生物在 MeOH(100ml) 中的混悬 液中， 以小部分添加四氢化硼钠 (1.35g， 35.5mmol)。 使混合物温热至室温并倾倒入 NH4Cl 饱 和溶液 (0℃ ) 中。在减压下 ( 部分 ) 除去溶剂。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 浓溶 液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法 (MeOH) 纯化， 得 到标题化合物 22A( 固体， 1.39g， 74％ ( 全部 ))。mp 131.5℃。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 0.96min， + 1 ([M+H] ＝ 210)。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.52(s， 1H)， 6.56-6.46(bs， 1H)， 3.40-3.36(m， 2H)， 2.62(bt， J ＝ 6Hz， 2H)， 2.46(s， 3H)， 2.45-2.38(m， 2H)， 2.30(s， 3H)。
     3-[4-(4， 4， 4- 三氟 - 丁基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡 啶
     ( 化合物 22B， 方案 4)
     在 N2 下， 将 NaH 在矿物油 (0.54g， 13.64mmol) 中的 60％分散液添加到含有化合物
     20A(2.79， 12.4mmol) 的 THF 无水溶液 (100ml) 中。得到的混合物于室温搅拌 2 小时， 随后 用 13.64mmol(2.41ml) 的 (2- 氯甲氧基 - 乙基 )- 三甲基甲硅烷 (SEM-Cl) 处理。得到的混 合物于室温搅拌 18 小时。向混合物中添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 饱和溶液洗涤 三次， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 /PE 1/1)， 得到 27A( 主要成分 ) 和 27B 的混合物， 为油状物 (3.19g， 73％ )。经急骤色谱法小心控制纯化 ( 乙醚 /PE 1/1)， 得到 27B， 随后得到 27A。化合物 27B( 油状物 )。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.15(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.60(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.20(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.71(s， 1H)， 7.38-7.34(m， 1H)， 5.44(s， 2H)， 3.64(t， J ＝ 8Hz， 2H)， 0.94(bt， J ＝ 8Hz， 2H)， 0.02(s， 1 9H)。化合物 27A( 油状物 )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ8.90(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.75(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 7.96(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.63(s， 1H)， 7.47-7.42(m， 1H)， 5.34(s， 2H)， 3.70(t， J ＝ 8Hz， 2H)， 0.92(bt， J ＝ 8Hz， 2H)， 0.02(s， 9H)。NOESYPHSW 和 HMBCGP 分析用于 确证这两个化合物。
     向含有 27A/B(0.92g， 2.6mmol) 混合物的无水 THF(50ml) 溶液中逐滴 (-78℃， 在 N2 下 ) 添加 1.14ml(1.1eq) 的 n-BuLi(2.5M， 在己烷中 )。添加后， 将得到的溶液于 -78℃搅 拌 60 分钟。在此温度下， 添加硫粉 (2.6mmol， 0.083g)， 并将反应混合物搅拌另外的 2 小时 (-78℃ )。反应通过薄层色谱法监测。添加 4- 溴 -1， 1， 1- 三氟 - 丁烷 (1.1eq， 0.54ml) 后， 使混合物温热至室温 ( 过夜 )， 并倾倒入 NH4Cl 饱和溶液 (0℃ ) 中。在减压下 ( 部分 ) 除去 溶剂。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 浓溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓 缩。 得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 /PE 1/1))， 得到 ( 主要的 )28A 和 28B 的混合物 1 ( 油状物， 0.49g， 45％ )。 H-NMR( 描述 28A 的数据， 400MHz， CDCl3) ： δ8.80(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.70(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 7.96(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.68(s， 1H)， 7.48-7.43(m， 1H)， 5.35(s， 2H)， 3.72(bt， J ＝ 8Hz， 2H)， 2.58(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.10-1.97(m， 2H)， 1.71-1.59(m， 2H)， 0.93(bt， J ＝ 8Hz， 2H)， 0.00(s， 9H)。
     在 N2 下， 向含有 28A/B(0.49g， 1.18mmol) 混合物的无水 THF(20ml) 的溶液中添 加 3.54ml(3.0eq) 的 TBAF(1.0Min THF)。添加后， 将得到的溶液回流 18 小时， 并且随后 在真空中浓缩。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 浓溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在 真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 )， 得到 3-[4-(4， 4， 4- 三氟 - 丁基 1 硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]- 吡啶 (21B)( 油状物， 0.32g， 95％ )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.20(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.65(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.28(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.73(s， 2H)， 2.19-2.08(m， 2H)， 1.75-1.65(m， 2H)。 1H)， 7.42-7.37(m， 1H)， 2.61(t， J ＝ 7Hz，
     将化合物 21B(0.3g， 1.49mmol) 转化为化合物 22B， 使用所述的用于将 21A 转化 为 22A 的方法。收率 0.131g( 无定形， 72 ％全部 )。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 1.64min， ([M+H]+ ＝ 306)。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.57(s， 1H)， 6.67-6.60(bs， 1H)， 3.43-3.39(m， 2H)， 2.71-2.62(m， 4H)， 2.49(s， 3H)， 2.48-2.43(m， 2H)， 2.28-2.19(m， 2H)， 1.81-1.75(m， 2H)。
     二 -[3-(1- 甲基 -1， 2， 5， 6- 四氢 - 吡啶 -3- 基 )-1H- 吡唑 -4- 基 )-2- 硫烷基乙 基 ]- 甲烷 ( 化合物 22C， 方案 7)
     在 N2 下， 将 NaH 在矿物油 (0.73g， 18.3mmol) 中的 60％分散液添加到含有化合物 20A(3.71， 16.6mmol) 的无水 THF(100ml) 溶液中。 得到的混合物于室温搅拌 2 小时， 随后用
     18.3mmol(2.33ml) 苯磺酰氯处理。得到的混合物于室温搅拌 18 小时。向混合物中添加乙 酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 饱和溶液洗涤三次， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。得到的残余 物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 )， 得到 3-(1- 苯磺酰基 -4- 溴 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (36A) (TLC 乙酸乙酯 Rf 0.7)( 无定形， 5.34g， 89％ )。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.1(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.65(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.24(s， 1H)， 8.16(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 8.10-8.05(m， 2H)， 7.70(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 7.62-7.56(m， 2H)， 7.39-7.34(m， 1H)。
     向 已 脱 气 的 含 有 36(0.7g， 1.92mmol) 的 二 甲 苯 (20ml) 溶 液 中 添 加 0.45eq(0.12ml， 0.86mmol) 的 戊 烷 -1， 5- 二 - 硫 醇 和 0.5eq 的 K2CO3(0.137g， 0.96mmol)。 得到的混合物在 N2 下搅拌另外的 2 小时。继续添加 0.192mmol 的 Pd2(dba)3(176mg) 和 0.384mmol 的 Xantphos(222mg)。添加后， 得到的溶液在 N2 下回流 18 小时。冷却至室温后， 将混合物用乙酸乙酯稀释， 用 NaHCO3 饱和溶液洗涤三次， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。得到 的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 )， 得到化合物 37， 为油状物 (0.46g， 68％ )(TLC 乙 酸乙酯 Rf 0.29)。
     化 合 物 37(0.46g， 0.65mmol)、 0.7g KOH 和 1ml NH2NH2.H2O 在 二 甘 醇 (10ml) 中 混合， 并在 N2 下温热至回流 1 小时。将混合物冷却， 浓缩， 并再溶解于 MeOH 中。经 5g 的 SCX-2(MeOH， 随后 1NNH3/MeOH) 过滤， 随后经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 )， 得到二 -[3- 吡 啶 -3- 基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-2- 硫烷基乙基 ]- 甲烷， 为 37 的脱保护类似物 ( 无定形， 1 0.23g， 83 ％ )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.15(d， J ＝ 2Hz， 2H)， 8.57(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 2H)， 8.31(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 2H)， 7.66(s， 2H)， 7.36-7.32(m， 2H)， 2.50-2.42(m， 4H)， 1.34-1.26(m， 6H)。
     使 用 所 述 的 转 化 21A 为 22A 的 方 法， 将 化 合 物 37 的 脱 保 护 类 似 物 (0.23g， 0.54mmol) 转化为化合物 22C。 收率 0.2g( 油状物， 80％全部 )。 LCMS( 方法 A) ； Rt ： 1.66min， + 1 ([M+H] ＝ 459)。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.50(s， 2H)， 6.92-6.85(bs， 2H)， 3.90-3.80(m， 4H)， 3.07(bt， J ＝ 7Hz， 4H)， 2.77(s， 6H)， 2.66-2.54(m， 8H)， 1.54-1.43(m， 6H)。
     3-(4- 乙基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶
     ( 化合物 21D)
     根据所述的合成化合物 21A 的方法 ( 参见方案 3)， 使用作为二硫化物的乙基二硫 烷基 - 乙烷和 3-(4- 溴 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 ( 化合物 20A)， 制备化合物 21D。
     收 率： 76 ％ ( 油 状 物 )。LCMS( 方 法 A) ； Rt ： 1.56min， ([M+H]+ ＝ 206)。 1 H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ9.11(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.64(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.18(dt， J＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.71(s， 1H)， 7.39-7.35(m， 1H)， 2.64(q， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.26(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 乙基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 22D)
     根据所述的合成化合物 22A( 从 21A) 的方法 ( 参见方案 3)， 由化合物 21D 制备化 合物 22D。
     收率 ： 73％ ( 固体 )。mp 95-97℃。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 1.15min， ([M+H]+ ＝ 224)。 1 H-NMR( 内旋转异构体的混合物 (3/1)， 描述了主要的一个， 400MHz， CDCl3) ： δ7.53(s， 1H)， 6.55-6.46(bs， 1H)， 3.40-3.37(m， 2H)， 2.67-2.60(m， 4H)， 2.46(s， 3H)， 2.43-2.36(m， 2H)， 1.19(3H)。3-(4- 丙基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶
     ( 化合物 21E)
     根据所述的合成化合物 21A 的方法 ( 参见方案 3)， 使用作为二硫化物的 1- 丙基二 硫烷基 - 丙烷和 3-(4- 溴 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 ( 化合物 20A)， 制备化合物 21E。( 急骤 色谱法条件乙酸乙酯 / 乙醚 5/1)。 1
     收率 ： 76％ .( 油状物 )。 H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ9.20(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.60(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.31(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.68(s， 1H)， 7.39-7.35(m， 1H)， 2.56(t， J＝ 7Hz， 2H)， 1.54-1.43(m， 2H)， 0.90(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 丙基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 22E)
     根据所述的合成化合物 22A( 从 21A) 的方法 ( 参见方案 3)， 从化合物 21E 制备化 合物 22E。
     收率 ： 77 ％ ( 固体 )。mp 111 ℃。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 1.39min， ([M+H]+ ＝ 238)。 1 H-NMR( 内旋转异构体的混合物 8/1)， 描述了主要的一个， 400MHz， CDCl3) ： δ7.55(s， 1H)， 6.61-6.55(bs， 1H)， 3.43-3.39(m， 2H)， 2.68-2.60(m， 4H)， 2.48(s， 3H)， 2.46-2.39(m， 2H)， 1.58(dq， J ＝ 7Hz， 7Hz， 2H)， 0.98(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 丁基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶
     ( 化合物 21F)
     根据所述的合成化合物 21A( 参见方案 3) 的方法， 使用作为二硫化物的 1- 丁基二 硫烷基 - 丁烷和 3-(4- 碘 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 ( 化合物 20B) 制备化合物 21F。( 急骤 色谱法条件乙酸乙酯 / 乙醚 3/1)。
     收 率： 18.4 ％ ( 油 状 物 )。1H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ9.20(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.60(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.31(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.68(s， 1H)， 7.39-7.34(m， 1H)， 2.58(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.48-1.40(m， 2H)， 1.36-1.25(m， 2H)， 0.90(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 丁基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 22F)
     根据所述的合成化合物 22A( 从 21A) 的方法 ( 参见方案 3)， 从化合物 21F 制备化 合物 22F。
     收率 ： 73 ％ ( 无定形 )。化合物 22A 与 1 当量的富马酸 /EtOH 反应并浓缩。从 EtOH/ 乙酸乙酯重结晶， 得到固体 ( 游离碱 / 富马酸 1/1)， mp120-121℃。LCMS( 方法 A) ； + Rt ： 1.16min， ([M+H] ＝ 252)。
     3-(4- 戊基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶
     ( 化合物 21G)
     根据如合成化合物 21A 所述的方法 ( 参见方案 3)， 使用作为二硫化物 1- 戊基二硫 烷基 - 戊烷和 3-(4- 溴 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 ( 化合物 20A)， 制备化合物 21G。 1
     收率 ： 71％ ( 油状物 )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.18(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.60(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.32(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.66(s， 1H)， 7.39-7.34(m， 1H)， 2.57(t， J＝ 7Hz， 2H)， 1.48-1.41(m， 2H)， 1.30-1.14(m， 4H)， 0.81(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 戊基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶( 化合物 22G)
     根据所述的合成化合物 22A( 从 21A) 的方法 ( 参见方案 3)， 由化合物 21G 制备化 合物 22G。
     收率： 77 ％ ( 固 体 )。mp 100-101 ℃。LCMS( 方 法 A) ； Rt ： 1.67min， ([M+H]+ ＝ 266) 。 1H-NMR(400MHz ， CDCl 3) ： δ 7.51(s ， 1H) ， 6.56-6.47(bs ， 1H) ， 3.40-3.36(m ， 2H) ， 2.65-2.59(m ， 4H) ， 2.45(s ， 3H) ， 2.44-2.38(m ， 2H) ， 1.57-1.47(m ， 4H) ， 1.39-1.24(m ， 4H)0.88(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 己基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶
     ( 化合物 21H)
     根据如合成化合物 21A 所述的方法 ( 参见方案 3)， 使用作为二硫化物的 1- 己基二 硫烷基 - 己烷和 3-(4- 碘 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 ( 化合物 20B)， 制备化合物 21H。 1
     收率 ： 37％ ( 油状物 )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.18(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.62(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.31(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.70(s， 1H)， 7.40-7.35(m， 1H)， 2.59(t， J＝ 7Hz， 2H)， 1.50-1.42(m， 2H)， 1.34-1.12(m， 6H)， 0.81(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 己基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 22H)
     根据所述的合成化合物 22A( 从 21A) 的方法 ( 参见方案 3)， 由化合物 21H 制备化 合物 22H。
     收 率： 49 ％ ( 无 定 形 )。LCMS( 方 法 A) ； Rt ： 1.81min， ([M+H]+ ＝ 280)。 1 H-NMR(400MHz ，CDCl 3 ) ： δ 7.51(s ， 1H) ， 6.60-6.50(bs ， 1H) ， 3.40-3.36(m ， 2H) ， 2.65-2.59(m ， 4H) ， 2.45(s ， 3H) ， 2.44-2.38(m ， 2H) ， 1.56-1.48(m ， 2H) ， 1.39-1.20(m ， 6H)0.88(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-[4-(3- 苯基 - 丙基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]- 吡啶
     ( 化合物 21I)
     根据如合成化合物 21A 所述的方法 ( 参见方案 3)， 使用作为二硫化物的 3- 苯 基 - 丙基二硫烷基 -3- 丙苯 ( 根据 Tetrahedron Letters， 42， 2001， 6741-6743 中所述的方 法制备 ) 和 3-(4- 溴 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 ( 化合物 20A)， 制备化合物 21I。( 急骤色谱 1 法条件 ( 乙酸乙酯 ))。收率 ： 22％ ( 油状物 )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.18(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.62(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.31(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.69(s， 1H)， 7.40-7.36(m， 1H)， 7.24(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 7.17(bt， J ＝ 7Hz， 1H)， 7.04(bd， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.65-2.57(m， 4H)， 1.84-1.75(m， 2H)。
     3-[4-(3- 苯基 - 丙基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 22I)
     根据所述的合成化合物 22A( 从 21A) 的方法 ( 参见方案 3)， 由化合物 21I 制备化 合物 22I。
     收率 ： 59％ ( 无定形 )。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.51(s， 1H)， 7.30-7.22(m， 2H)， 7.21-7.12(m， 3H)， 6.66-6.46(bs， 1H)， 3.39-3.34(m， 2H)， 2.70-2.55(m， 6H)， 2.44(s， 3H)， 2.43-2.36(m， 2H)， 1.89-1.80(m， 2H)。
     3-[4-(4， 4- 二氟 - 丁 -3- 烯基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]- 吡啶( 化合物 21J)
     根据如合成化合物 21A 所述的方法 ( 参见方案 3)， 使用作为二硫化物的 4-(4， 4- 二氟 - 丁 -3- 烯基二硫烷基 )-1， 1- 二氟 - 丁 -1- 烯 (TetrahedronLetters， 42， 2001， 6741-6743) 和 3-(4- 溴 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 ( 化合物 20A)， 制备化合物 21J。 ( 急骤色谱 1 法条件 ( 乙酸乙酯 ))。收率 ： 58％ ( 油状物 )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.18(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.62(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.31(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.72(s， 1H)， 7.42-7.36(m， 1H)， 4.19-4.06(m， 1H)， 2.59(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.18-2.09(m， 2H)。
     3-[4-(4， 4- 二氟 - 丁 -3- 烯基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲 基吡啶
     ( 化合物 22J)
     根据所述的合成化合物 22A( 从 21A) 的方法 ( 参见方案 3)， 从化合物 21H 制备化 合物 22J。 1
     收率 ： 90％ ( 无定形 )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.54(s， 1H)， 6.68-6.44(bs， 1H)， 4.27-4.15(m， 1H)， 3.40-3.36(m， 2H)， 2.66-2.60(m， 4H)， 2.47(s， 3H)， 2.45-2.38(m， 2H)， 2.22-2.14(m， 2H)。
     3-[4-(3- 苯基 - 烯丙基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]- 吡啶
     ( 化合物 21K)
     根据如合成化合物 21A 所述的方法 ( 参见方案 3)， 使用作为二硫化物的 3- 苯 基 - 烯 丙 基 二 硫 烷 基 -3- 烯 丙 基 苯 (Tetrahedron Letters， 42， 2001， 6741-6743) 和 3-(4- 溴 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 ( 化合物 20A)， 制备化合物 21K。( 急骤色谱法条件 ( 乙 酸乙酯 ))。收率 ： 22％ ( 油状物 )， (TLC 乙酸乙酯 Rf 0.45)。
     3-[4-(3- 苯基 - 烯丙基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 22K)
     根据所述的合成化合物 22A( 从 21A) 的方法 ( 参见方案 3)， 由化合物 21K 制备化 合物 22K。
     收率 ： 72％ ( 无定形 )。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.52(s， 1H)， 7.30-7.18(m， 5H)， 6.70-6.20(bs， 1H)， 6.20-6.07(m， 2H)， 3.37(d， J ＝ 7Hz， 2H)， 3.33-3.28(m， 2H)， 2.54(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.40(s， 3H)， 2.39-2.30(m， 2H)。
     3-[4- 戊 -4- 烯基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]- 吡啶
     ( 化合物 21L)
     化合物 21L 根据如合成化合物 21A 所述的方法 ( 参见方案 3)， 使用作为二硫化 物的 5- 戊 -4- 烯基二硫烷基 - 戊 -1- 烯 (Tetrahedron Letters， 42， 2001， 6741-6743) 和 3-(4- 碘 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 ( 化合物 20B)， 制备。( 急骤色谱法条件 ( 乙酸乙酯 )) 收率： 28 ％ ( 油 状 物 )。LCMS( 方 法 A) ； Rt ： 2.21min， ([M+H]+ ＝ 246)。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.20(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.62(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.31(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.71(s， 1H)， 7.41-7.35(m， 1H)， 5.73-5.59(m， 2H)， 4.97-4.89(m， 2H)， 2.59(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.10-2.03(m， 2H)， 1.61-1.54(m， 2H)。
     3-[4- 戊 -4- 烯基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 22L)根据所述的合成化合物 22A( 从 21A) 的方法 ( 参见方案 3)， 由化合物 21L 制备化 合物 22L。
     收 率： 61 ％ ( 无 定 形 )。LCMS( 方 法 A) ； Rt ： 1.84min， ([M+H]+ ＝ 264)。 1 H-NMR(400MHz ，CDCl 3 ) ： δ 7.52(s ， 1H) ， 6.70-6.40(bs ， 1H) ， 5.81-5.68(m ， 1H) ， 5.04-4.94(m， 2H)， 3.40-3.36(m， 2H)， 2.66-2.57(m， 4H)， `2.45(s， 3H)， 2.45-2.37(m， 2H)， 2.17-2.09(m， 2H)， 1.66-1.58(m， 2H)。
     3-[4-( 呋喃 -2- 基甲基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]- 吡啶
     ( 化合物 21M)
     根据如合成化合物 21A 所述的方法 ( 参见方案 3)， 使用二糠基 - 二硫化物和 3-(4- 碘 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 ( 化合物 20B)， 制备化合物 21M。 ( 急骤色谱法条件 ( 乙酸 1 乙酯 )) 收率 ： 54％ .( 油状物 )。H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ9.20(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.59(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.20(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.54(s， 1H)， 7.38-7.32(m， 1H)， 7.21-7.19(m， 1H)， 6.16-6.12(m， 1H)， 5.88-5.84(m， 1H)， 3.75(s， 2H)。
     3-[4-( 呋喃 -2- 基 - 甲基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡 啶 ( 化合物 22M)
     根据如合成化合物 22A 所述的方法 ( 参见方案 3)， 由化合物 21M 制备化合物 22M。
     收 率： 65 ％ ( 无 定 形 )。LCMS( 方 法 A) ； Rt ： 1.04min， ([M+H]+ ＝ 276)。 1 H-NMR(200MHz ，CDCl 3 ) ： δ 7.36(s ， 1H) ， 7.33-7.31(m ， 1H) ， 6.38-6.26(bs ， 1H) ， 6.24-6.20(m， 1H)， 5.93-5.90(m， 1H)， 3.78(s， 2H)， 3.30-3.22(m， 2H)， 2.60(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.44(s， 3H)， 2.41-2.33(m， 2H)。
     3-(4- 苄基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶
     ( 化合物 21N)
     根据如合成化合物 21A 所述的方法 ( 参见方案 3)， 使用二苯基 - 二硫化物和 3-(4- 碘 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 ( 化合物 20B)， 制备化合物 21N。( 急骤色谱法条件 ( 乙 1 酸乙酯 )) 收率 ： 33％ ( 油状物 )。H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.0(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.58(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.10(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.43(s， 1H)， 7.33-7.28(m， 1H)， 7.17-7.11(m， 3H)， 7.02-6.96(m， 2H)， 3.72(s， 2H)。
     3-(4- 苄基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 22N)
     根据所述的合成化合物 22A( 从 21A) 的方法 ( 参见方案 3)， 由化合物 21N 制备化 合物 22N。
     收率： 48 ％ ( 无 定 形 )。LCMS( 方 法 A) ； Rt ： 1.55min， ([M+H]+ ＝ 286)。 化 合 物 22N 与 1 当 量 在 EtOH 中 的 富 马 酸 反 应 并 浓 缩。1H-NMR(600MHz， D6DMSO) ： δ7.63(s， 1H)， 7.28(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 7.28(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 7.24(bt， J ＝ 7Hz， 1H)， 7.17(bd， J＝ 7Hz， 2H)， 6.82-6.79(bs， 1H)， 6.66(s， 2H)， 4.28(bd， J ＝ 15Hz， 1H)， 4.05(dd， J ＝ 16Hz， 6Hz， 2H)， 3.86-3.80(m， 1H)， 3.55-3.50(m， 1H)， 3.18-3.10(m， 1H)， 2.94 和 2.93(2xs， 3H)， 2.68-2.46(m， 2H)。
     3-[4-(2- 乙氧基 - 乙基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]- 吡啶( 化合物 21O)
     根据如合成化合物 21A 所述的方法 ( 参见方案 3)， 使用作为二硫化物的 1- 乙氧 基 -2-(2- 乙氧基 - 乙基二硫烷基 )- 乙烷 (Tetrahedron Letters， 42， 2001， 6741-6743) 和 3-(4- 碘 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 ( 化合物 20B)， 制备化合物 21O。 ( 急骤色谱法条件 ( 乙酸 + 1 乙酯 )) 收率 ： 28％ ( 油状物 )。 LCMS( 方法 A) ； Rt ： 2.21min， ([M+H] ＝ 246)。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.20(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.62(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.33(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.75(s， 1H)， 7.41-7.36(m， 1H)， 3.46(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 3.38(q， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.78(t， J＝ 7Hz， 2H)， 1.14(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-[4-(2- 乙氧基 - 乙基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 22O)
     根据所述的合成化合物 22A( 从 21A) 的方法 ( 参见方案 3)， 化合物 22O 由化合物 21O 制备。 1
     收率 ： 63％ ( 无定形 )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.56(s， 1H)， 6.70-6.50(bs， 1H)， 3.55-3.43(m， 4H)， 3.40-3.36(m， 2H)， 2.81(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.61(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.46(s， 3H)， 2.44-2.38(m， 2H)， 1.18(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-{4-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )- 乙基硫烷基 ]-1H- 吡唑 -3- 基 }- 吡啶
     ( 化合物 21P)
     根据如合成化合物 21a 所述的方法 ( 参见方案 3)， 使用作为二硫化物的 1- 甲 氧基 -2-{2-[2-((2- 甲氧基 - 乙氧基 )- 乙基二硫烷基 ]- 乙氧基 }- 乙烷 (Tetrahedron Letters， 42， 2001， 6741-6743) 和 3-(4- 碘 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 ( 化合物 20B)， 制备化 1 合物 21P。( 急骤色谱法条件 ( 乙酸乙酯 )) 收率 ： 36％ ( 油状物 )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.18(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.58(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.35(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.78(s， 1H)， 7.39-7.32(m， 1H)， 3.51-3.44(m， 6H)， 3.34(s， 3H)， 2.78(t， J ＝ 7Hz， 2H)。
     3-{4-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )- 乙基硫烷基 ]-1H- 吡唑 -3- 基 }-1， 2， 5， 6- 四 氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 22P)
     根据所述的合成化合物 22A( 从 21A) 的方法 ( 参见方案 3)， 由化合物 21P 制备化 合物 22P。 1
     收率 ： 33％ ( 无定形 )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.57(s， 1H)， 6.74-6.69(bs， 1H)， 3.59-3.51(m， 8H)， 3.38(s， 3H)， 2.83(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.77(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.55(s， 3H)， 2.52-2.45(m， 2H)。
     3-(4- 烯丙基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶
     ( 化合物 21Q)
     根据如合成化合物 21A 所述的方法 ( 参见方案 3)， 使用作为二硫化物的 3- 烯 丙 基 二 硫 烷 基 - 丙 烯 和 3-(4- 碘 -1H- 吡 唑 -3- 基 )- 吡 啶 ( 化 合 物 20B)， 制备化合物 1 21Q。( 急骤色谱法条件 ( 乙酸乙酯 )) 收率 ： 27 ％ ( 油状物 )。 H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ9.20(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.60(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.29(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.70(s， 1H)， 7.40-7.36(m， 1H)， 5.77-5.66(m， 1H)， 4.94(bdd， J ＝ 11Hz， 1Hz， 1H)， 4.83(bdd， J ＝ 17Hz， 1Hz， 1H)， 3.19(bd， J ＝ 8Hz， 2H)。3-(4- 烯丙基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 22Q)
     根据所述的合成化合物 22A( 从 21A) 的方法 ( 参见方案 3)， 由化合物 21Q 制备化 合物 22Q。
     收率 ： 17 ％ ( 无 定 形 )。1H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ7.52(s， 1H)， 6.62-6.48(bs， 1H) ， 5.84-5.74(m ， 1H) ， 4.98(bdd ，J ＝ 11Hz ， 1Hz ， 1H) ， 4.90(bdd ，J ＝ 17Hz ， 1Hz ， 1H)， 4.00-3.95(m， 2H)， 3.23(bd， J ＝ 8Hz， 2H)， 2.61(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.46(s， sH)， 2.44-2.39(m， 2H)。
     3-(3- 吡啶 -3- 基 -1H- 吡唑 -4- 基硫烷基 )- 丙腈
     ( 化合物 21R)
     根据如合成化合物 21A 所述的方法 ( 参见方案 3)， 使用作为二硫化物的 3-(2- 氰 基 - 乙基二硫烷基 )- 丙腈和 3-(4- 碘 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 ( 化合物 20B)， 制备化合 1 物 21R。( 急骤色谱法条件 ( 乙酸乙酯 )) 收率 ： 62％ ( 油状物 )。 H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ9.20(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.60(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.33(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.82(s， 1H)， 7.43-7.37(m， 1H)， 2.76(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.45(t， J ＝ 7Hz， 2H)。
     3-[3-(1- 甲基 -1， 2， 5， 6- 四氢 - 吡啶 -3- 基 )-1H- 吡唑 -4- 基硫烷基 ]- 丙腈
     ( 化合物 22R)
     根据所述的合成化合物 22A( 从 21A) 的方法 ( 参见方案 3)， 化合物 22R 由化合物 21R 制备。
     收率 ： 8％ ( 无定形 )。1H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ7.58(s， 1H)， 6.60-6.50(bs， 1H)， 3.40-3.36(m， 2H)， 2.79(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.66(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.50(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.47(s， 3H)， 2.45-2.38(m， 2H)。
     3-[4-(3- 甲基 - 丁基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]- 吡啶
     ( 化合物 21S)
     根据如合成化合物 21A 所述的方法 ( 参见方案 3)， 使用作为二硫化物的 3- 甲 基 -1-(3- 甲基 - 丁基二硫烷基 )- 丁烷和 3-(4- 碘 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 ( 化合物 20B)， 制备化合物 21S。( 急骤色谱法条件 ( 乙酸乙酯 )) 收率 ： 39％ ( 油状物 )。1H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ9.18(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.65(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.35(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.78(s， 1H)， 7.39-7.35(m， 1H)， 2.60(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.65-1.57(m， 1H)， 1.42-1.33(m， 2H)， 0.81(d， J ＝ 7Hz， 6H)。
     3-[4-(3- 甲基 - 丁基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 22S)
     根据所述的合成化合物 22A( 从 21A) 的方法 ( 参见方案 3)， 化合物 22S 由化合物 21S 制备。
     收率 ： 73％ ( 无定形 )。1H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ7.5(s， 1H)， 6.60-6.48(bs， 1H)， 3.40-3.36(m， 2H)， 2.66-2.59(m， 4H)， 2.45(s， 3H)， 2.44-2.39(m， 2H)， 1.72-1.62(m， 1H)， 1.45-1.39(m， 2H)， 0.86(d， J ＝ 7Hz， 6H)。
     3- 吡啶 -3- 基 - 吡唑 -1- 磺酸二甲酰胺
     ( 化合物 23， 方案 3)化合物 19(3.0g， 20.7mmol) 和 2.22ml 的苯磺酰氯 (20.7mmol) 在吡啶 (100ml) 中 混合， 并在回流下搅拌 18 小时。反应在真空中浓缩。将残余物置于乙酸乙酯中， 用 NaHCO3 饱和溶液洗涤三遍， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 /PE 2/1)， 得到化合物 23( 无定形， 2.86g， 55％ )。1H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ9.1(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.6(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.16(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 8.05(d， J ＝ 3Hz， 1H)， 7.39-7.34(m， 1H)， 6.75(d， J ＝ 3Hz， 1H)， 3.02(s， 6H)。
     5- 丁基硫烷基 -3- 吡啶 -3- 基 - 吡唑 -1- 磺酸二甲酰胺。
     ( 化合物 24， 方案 3)
     在 N2 下， 于 -78℃， 向含有化合物 24(1.0g， 4mmol) 的无水 THF(50ml) 溶液中逐滴 添加 1eq 的 n-BuLi(2.35ml， 1.7M 在戊烷中 )。添加后， 将得到的溶液于 -78C 搅拌 1 小时。 在此温度下， 添加 1.1eq 1- 丁基二硫烷基 - 丁烷 (0.79ml)， 并将得到的溶液于 -78C 搅拌 1 小时， 随后使其温热至室温过夜。然后， 将混合物用 NH4Cl 饱和溶液于 0℃猝灭， 并在真空中 浓缩。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 5％ NaHCO3 溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中 浓缩。经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 /PE5/1 至乙酸乙酯 / 乙醚 1/1)， 得到化合物 24( 油状物， 1 0.93g， 70％ )。 H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ9.1(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.6(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.15(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.39-7.34(m， 1H)， 6.50(s， 1H)， 3.02(s， 6H)， 3.02(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.82-1.67(m， 2H)， 1.60-1.42(m， 2H)， 0.97(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(5- 丁基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶
     ( 化合物 25， 方案 3)
     将化合物 24(0.92g， 2.71mmol) 溶解于 50ml 的 n-BuOH 中。向此溶液中添加 2g 溶 解于 50ml H2O 中的 KOH， 并将反应混合物于室温在 N2 下搅拌 18 小时。 反应混合物在真空中 浓缩。将得到的残余物置于乙酸乙酯中， 用 5％ NaHCO3 溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在 真空中浓缩。经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 /PE 4/1)， 得到化合物 25( 无定形， 0.44g， 70％ )。 (TLC 乙酸乙酯 Rf 0.34)。
     3-(5- 丁基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 26， 方案 3)
     化合物 26 根据如合成化合物 22A( 从 21A) 所述的方法制备。 1
     收率 ： 70％ ( 无定形 )。 H-NMR(200MHz， CDCl3) ： δ6.27(s， 1H)， 6.22-6.18(bs， 1H)， 3.31-3.27(m， 2H)， 2.82(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.58(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.44(s， 3H)， 2.39-2.32(m， 2H)， 1.62-1.54(m， 2H)， 1.44-1.37(m， 2H)， 0.86(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-[4-(3- 苯基 - 丙氧基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 33A， 方案 5)
     在 N2 下， 将 NaH 在 矿 物 油 (3g， 1.1eq) 中 的 60 ％ 分 散 液 添 加 到 含 有 化 合 物 20B(18.36g， 68.74mmol) 的无水 THF(100ml) 溶液中。得到的混合物于室温搅拌 2 小时， 随后用 13.37ml(1.1eq) 的 (2- 氯甲氧基 - 乙基 )- 三甲基甲硅烷 (SEM-Cl) 处理。得到的 混合物于室温搅拌 18 小时。向混合物中添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 饱和溶液洗 涤三遍， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 /PE1/1)， 得 1 到 ( 可变的 )29A 和 29B 混合物， 为油状物 (23.09g， 83 ％ )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： NMR 显示与 27A/B( 参见方案 4) 混合物的 NMR 的极大相似度， 给出主要异构体 ( 可能是 29A) ：δ9.15(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.65(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.17(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.74(s， 1H)， 7.39-7.34(m， 1H)， 5.46(s， 2H)， 3.71-3.62(m， 4H， 两个异构体 )， 0.98-0.84(m， 4H， 两个 异构体 )， 0.02( 两个异构体， Si(CH3)3)。
     向含有 29A/B(10g， 25mmol) 混合物的无水 THF(250ml) 溶液中逐滴 (-78 ℃， 在 N2 下 ) 添加 10.5ml(1.1eq) 的 n-BuLi(2.5M， 在己烷中 )。添加后， 将得到的溶液于 -78℃搅拌 60 分钟。在此温度下， 添加硼酸三甲酯 (3eq， 8.50ml)( 逐滴， 15 分钟内 )， 并将反应混合物 于 -78℃搅拌另外的 2 小时。然后使反应混合物温热至室温 ( 过夜 )。
     将反应混合物的温度降低至 -10 ℃， 并添加 2.2ml(1.5eq) 的乙酸。随后， 逐滴 添加 1.1eq 的 30 ％ H2O2 溶液 (2.93ml)， 同时维持温度＜ -5 ℃。使混合物温热至室温， 并 搅拌另外的 4 小时。向反应混合物中添加 10ml 的 H2O， 随后添加乙酸乙酯 (500ml)。将 有机层用 5 ％ NaHCO3 溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急 骤色谱法纯化 ( 乙醚， 随后乙酸乙酯 )， 得到 3- 吡啶 -3- 基 -1-(2- 三甲基硅烷基 -1- 乙 氧基甲基 )-1H- 吡唑 -4- 醇 (30)， 为 ( 可变的 )SEM 保护的产物异构体的混合物 ( 无定 1 形， 2.9g， 40 ％ )。 H-NMR(400MHz， CDCl3， 异构体的混合物～ 1/1) ： δ9.22 和 8.90(2xbs， 1H)， 8.47-8.18(m， 2H)， 7.45-7.34(m， 1H)， 7.36 和 7.31(2xs， 1H)， 5.36 和 5.35(2xs， 2H)， 3.74-3.69 和 3.64-3.59(2xm， 2H)， 0.99-0.90(m， 2H)， 0.02 和 0.01(2xs， 9H)。
     向 含 有 化 合 物 30(2.03g， 6.98mmol) 的 无 水 DMF(50ml) 溶 液 中 添 加 1.5eq 的 K2CO3(1.45g)， 并将混合物在 N2 下搅拌 1 小时。添加 3- 溴 - 丙基苯 (1,1eq， 1.17ml) 后， 将 得到的溶液于 45℃搅拌 18 小时， 并温热达到室温。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 溶 液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 )， 得到 31A， 为 SEM 异构体的混合物 ( 油状物， 1.92g， 67％ )。1H-NMR(400MHz， CDCl3， 给出主 要异构体 ) ： δ8.96(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.61(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.05(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.42-7.39(m， 1H)， 7.39(s， 1H)， 7.30-7.14(m， 5H)， 5.37(s， 2H)， 3.98(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 3.74-3.69(m， 2H)， 2.74(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.10-2.02(m， 2H)， 0.98-0.92(m， 2H)， 0.01(s， 9H)。
     在 N2 下，向 含 有 31A(1.93g， 4.71mmol) 的 无 水 THF(50ml) 溶 液 中 添 加 14.16ml(3.0eq) 的 TBAF(1.0M 在 THF 中 )。添加后， 得到的溶液回流 18 小时， 随后在真 空中浓缩。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 浓溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在 真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 )， 得到期望的 3-[4-(3- 苯 基 - 丙 氧 基 )-1H- 吡 唑 -3- 基 ]- 吡 啶 (32A)( 油 状 物， 1.32g， 73 ％ )。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.15(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.54(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.24(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.35-7.31(m， 1H)， 7.30-7.25(m， 2H)， 7.22-7.17(m， 3H)， 3.96(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.83(t， J＝ 7Hz， 2H)， 2.19-2.11(m， 2H)。
     使用描述的转化 21A 为 22A 的方法 ( 参见方案 3)， 将化合物 32A(0.3g， 1.49mmol) 转化为标题化合物化合物 3-[4-(3- 苯基 - 丙氧基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲 基吡啶 (33A)。
     收率： 70 ％ ( 无 定 形， 72 ％ )。LCMS( 方 法 A) ； Rt ： 1.52min， ([M+H]+ ＝ 298)。 1 H-NMR(400MHz ， CDCl 3) ： δ 7.31-7.25(m ， 2H) ， 7.22-7.17(m ， 3H) ， 7.16-7.11(bs ， 1H) ， 6.62-6.44(bs， 1H)， 3.87(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 3.41-3.36(m， 2H)， 2.79(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.58(t，J ＝ 7Hz， 2H)， 2.44(s， 3H)， 2.42-2.35(m， 2H)， 2.11-2.04(m， 2H)。
     3-(4- 己氧基 -1H- 吡唑 -3- 基 ]-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 33B， 方案 6)
     使 用 描 述 的 转 化 21A 为 22A 的 方 法 ( 参 见 方 案 3)， 将 化 合 物 29A/B 转 化 为 3-(4- 碘 -1-(2- 三甲基硅烷基 - 乙氧基甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基 吡啶 ( 化合物 34A/B)。
     收率： 47 ％ .( 无 定 形 )。LCMS( 方 法 A) ； Rt ： 2.66min， ([M+H]+ ＝ 420) 和 Rt ： 2.74min， ([M+H]+ ＝ 420)。
     将 化 合 物 34A/B(0.75g， 1.79mmol)、 CuI(34mg， 0.179mmol)、 Cs2CO3(1.18g， 3.58mmol)、 1， 10- 二氮菲 (0.07g， 0.358mmol) 和 1- 己醇 (5ml， 40mmol) 的混合物于 140℃ 加热 18 小时 ( 在空气下 )。
     将混合物冷却至室温。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 5％ NaHCO3 溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 /PE 1 ∶ 1)， 得到化合物 35A， 为油状物 (0.24g， 34 ％ )。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 2.50min， ([M+H]+ ＝ 394)。 (TLC 乙酸乙酯 /PE 1/1， Rf 0.07)。 在 N2 下，向 含 有 35A(0.24g， 0.6mmol) 混 合 物 的 无 水 THF(20ml) 中 添 加 1.52ml(2.5eq)TBAF(1.0M 在 THF 中 )。添加后， 将得到的溶液回流 18 小时， 随后在真空中 浓缩。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 浓溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓 缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 /MeOH(1/1))， 得到标题化合物 33B( 油状 + 物， 0.12g， 75％ )。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 1.99min， ([M+H] ＝ 264)。 1
     化合物 33B 与 1 当量在 EtOH 中的富马酸反应， 并浓缩 ( 无定形 )。 H-NMR(600MHz， D6DMSO) ： δ7.50(bs， 1H)， 6.58(s， 2H)， 6.50(bs， 1H)， 3.88(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 3.75(bs， 2H)， 3.02(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.69(s， 3H)， 2.48-2.42(m， 2H)， 1.75-1.67(m， 2H)， 1.45-1.38(m， 2H)， 1.36-1.28(m， 4H)， 0.89(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 丁氧基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶
     ( 化合物 32C)
     根 据 如 合 成 化 合 物 32A( 参 见 方 案 5) 所 述 的 方 法， 使用作为烷基卤化物的 1- 溴 - 丁烷和 3- 吡啶 -3- 基 -1-(2- 三甲基硅烷基 -1- 乙氧基甲基 )-1H- 吡唑 -4- 醇 (30)， 制备化合物 32C。
     后处理和急骤色谱法 ( 乙酸乙酯 / 乙醚 1/1)， 得到化合物 31C。收率 30％ ( 油状 1 物 )。 H-NMR( 给出主要异构体， 400MHz， CDCl3) ： δ8.9(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.6(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.05(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.42(s， 1H)， 7.41-7.37(m， 1H)， 5.37(s， 2H)， 3.98(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 3.74-3.68(m， 2H)， 1.74-1.66(m， 2H)， 1.49-1.39(m， 2H)， 0.92(t， J ＝ 7Hz， 3H)， 0.02(s， 9H)。
     SEM- 异 构 体 的 混 合 物 脱 保 护 (TBAF/THF)，得 到 3-(4- 丁 氧 基 -1H- 吡 唑 -3- 基 )- 吡啶 (32C)。
     收率 ： 70％ ( 无定形 )。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.25(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.53(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.23(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.35-7.31(m， 1H)， 7.30(s， 1H)， 3.77(t， J＝ 7Hz， 2H)， 1.84-1.77(m， 2H)， 1.57-1.47(m， 2H)， 0.98(t， J ＝ 7Hz， 3H)。3-(4- 丁氧基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 33C)
     使用描述的转化 21A 为 22A 的方法 ( 参见方案 3)， 将化合物 32C 转化为标题化合 物 (33C)。
     收 率： 77 ％ ( 无 定 形 )。LCMS( 方 法 A) ； Rt ： 1.48min， ([M+H]+ ＝ 236)。 1 H-NMR(400MHz ， CDCl 3) ： δ 7.19(bs ， 1H) ， 6.52-6.42(bs ， 1H) ， 3.88(t ， J ＝ 7Hz ， 2H) ， 3.38-3.34(m， 2H)， 2.57(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.44(s， 3H)， 2.41-2.36(m， 2H)， 1.79-1.71(m， 2H)， 1.53-1.43(m， 2H)， 0.97(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 丁 -3- 烯氧基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶
     ( 化合物 32D)
     根 据 如 合 成 化 合 物 32A( 参 见 方 案 5) 所 述 的 方 法， 使用作为烷基卤化物的 4- 溴 - 丁 -1- 烯和 3- 吡啶 -3- 基 -1-(2- 三甲基硅烷基 -1- 乙氧基甲基 )-1H- 吡唑 -4- 醇 (30)， 制备化合物 32D。
     后处理和急骤色谱法 ( 乙醚 )， 得到化合物 31D。收率 43％ ( 油状物， TLC 乙醚 Rf 0.37)， 随后将其脱保护 (TBAF/THF)， 得到 3-(4- 丁 -3- 烯氧基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (32D)。 1
     收率 ： 75％ ( 无定形 )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.15(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.58(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.24(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.35-7.30(m， 1H)， 7.32(s， 1H)， 5.96-5.85(m， 1H)， 5.22-5.11(m， 2H)， 4.02(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.62-2.55(m， 2H)。
     3-(4- 丁 -3- 烯氧基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 33D)
     使用描述的转化 21A 为 22A 的方法 ( 参见方案 3)， 将化合物 32D 转化为标题化合 物 (33D)。
     收 率： 94 ％ ( 无 定 形 )。LCMS( 方 法 A) ； Rt ： 1.33min， ([M+H]+ ＝ 234)。 1 H-NMR(400MHz ，CDCl 3 ) ： δ 7.20(bs ， 1H) ， 6.60-6.42(bs ， 1H) ， 5.94-5.83(m ， 1H) ， 5.19-5.07(m， 2H)， 3.94(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 3.38-3.33(m， 2H)， 2.59-2.50(m， 4H)， 2.44(s， 3H)， 2.41-2.36(m， 2H)。
     3-(4- 庚氧基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 33E)
     将 化 合 物 34A/B(0.75g， 1.79mmol)( 参 见 方 案 6)、 CuI(34mg， 0.179mmol)、 Cs2CO3(1.18g， 3.58mmol)、 1， 10- 二氮菲 (0.07g， 0.358mmol) 和 1- 庚醇 (5ml) 的混合物于 140℃加热 18 小时 ( 在空气下 )。
     将混合物冷却至室温。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 5％ NaHCO3 溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 /PE 1/1)， 得到化合物 35E(35A 的庚基类似物， 方案 6)， 为油状物 (0.22g， 30％ )。LCMS( 方法 A) ； Rt ： + 2.60min， ([M+H] ＝ 408)。
     在 N2 下， 向 含 有 35E(0.22g， 0.54mmol) 混 合 物 的 无 水 THF(20ml) 溶 液 中 添 加 1.35ml(2.5eq) 的 TBAF(1.0Min THF)。添加后， 将得到的溶液回流 18 小时， 随后在真空中 浓缩。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 浓溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 /MeOH 1/1)， 得到标题化合物 33E( 油状 + 物， 0.08g， 53％ )。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 2.23min， ([M+H] ＝ 278)。 1
     化合物 33E 与 1 当量在 EtOH 中的富马酸反应， 并浓缩 ( 无定形 )。 H-NMR(600MHz， D6DMSO) ： δ7.37(bs， 1H)， 6.58(s， 2H)， 6.43(bs， 1H)， 3.84(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 3.51(bs， 2H)， 2.77(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.52(s， 3H)， 2.39-2.33(m， 2H)， 1.72-1.66(m， 2H)， 1.45-1.22(m， 8H)， 0.87(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 戊 -4- 烯氧基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 33F)
     化 合 物 34A/B(0.75g， 1.79mmol)( 参 见 方 案 6)、 CuI(34mg， 0.179mmol)、 Cs2CO3(1.18g， 3.58mmol)、 1， 10- 二氮菲 (0.07g， 0.358mmol) 和戊 -4- 烯 -1- 醇 (5ml) 的混 合物于 140℃加热 18 小时 ( 在空气下 )。
     将混合物冷却至室温。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 5％ NaHCO3 溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 /PE 1 ∶ 1)， 得到化合物 35F(35A 的戊 -4- 烯基类似物， 方案 6)， 为油状物 (0.41g， 60％ )。LCMS( 方法 + A) ； Rt ： 2.33min， ([M+H] ＝ 378)。
     在 N2 下， 向 含 有 35F(0.22g， 0.54mmol) 混 合 物 的 无 水 THF(20ml) 溶 液 中 添 加 1.35ml(2.5eq) 的 TBAF(1.0M in THF)。 添加后， 将得到的溶液回流 18 小时， 冷却， 随后在真 空中浓缩。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 浓溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空 中浓缩。 得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 /MeOH 1/1)， 得到标题化合物 33F( 油 + 状物， 0.08g， 53％ )。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 1.83min， ([M+H] ＝ 248)。
     化合物 33F 与 1 当量在 EtOH 中的富马酸反应并浓缩 ( 无定形 )。1H-NMR(600MHz， D6DMSO) ： δ7.38(bs， 1H)， 6.56(s， 2H)， 6.48-6.44(m， 1H)， 5.88-5.80(m， 1H)， 5.06-4.95(m， 2H)， 3.86(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 3.60(bs， 2H)， 2.86(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.58(s， 3H)， 2.42-2.37(m， 2H)， 2.20-2.15(m， 2H)， 1.83-1.77(m， 2H)。
     3-(4- 戊氧基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 33G， 方案 6)
     化 合 物 29A/B(1.0g， 2.49mmol)( 参 见 方 案 5)、 CuI(0.05g， 0.249mmol)、 Cs2CO3(1.62g， 4.98mmol)、 1， 10- 二 氮 菲 (0.09g， 0.498mmol) 和 戊 醇 (7ml) 的 混 合 物 于 140℃加热 18 小时 ( 在空气下 )。
     将混合物冷却至室温。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 5％ NaHCO3 溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 /PE 1 ∶ 2)， 得到化合物 31G， 为油状物 (0.24g， 27 ％ )。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 2.76min， ([M+H]+ ＝ 362)。 1 H-NMR(400MHz， 异构体混合物， CDCl3) ： δ9.25 和 8.90(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.61 和 8.52(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.28 和 8.06(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.43 和 7.29(s， 1H)， 7.41-7.37 和 7.35-7.31(m， 1H)， 5.39 和 5.37(s， 2H)， 4.0-3.92(m， 2H)， ， 3.71 和 3.60(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.88-1.80 和 1.76-1.69(m， 2H)， 1.52-1.25(m， 6H)， 0.97-0.90(m， 3H)。
     在 N2 下，向 含 有 31G(0.23g， 0.63mmol) 的 无 水 THF(25ml) 溶 液 中 添 加 1.59ml(2.5eq) 的 TBAF(1.0M 在 THF 中 )。 添加后， 将得到的溶液回流 18 小时， 随后在真空中 浓缩。 添加乙酸乙酯， 将有机层用 NaHCO3 浓溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 )， 得到 3-(4- 戊氧基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 32G( 油状物， 0.14g， 95％ )。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 2.27min， ([M+H]+ ＝ 232)。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.25(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.53(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.23(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.36-7.29(m， 2H)， 3.96(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.87-1.78(m， 2H)， 1.51-1.34(m， 6H)， 0.94(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     使用描述的转化 21A 为 22A 的方法 ( 参见方案 3)， 将化合物 32G 转化为标题化合 物 (33G)。
     收 率： 85 ％ ( 无 定 形 )。LCMS( 方 法 A) ； Rt ： 1.83min， ([M+H]+ ＝ 250)。 1 H-NMR(400MHz ， CDCl 3) ： δ 7.19(bs ， 1H) ， 6.54-6.50(bs ， 1H) ， 3.88(t ， J ＝ 7Hz ， 2H) ， 3.40-3.36(m， 2H)， 2.59(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.45(s， 3H)， 2.43-2.37(m， 2H)， 1.81-1.75(m， 2H)， 1.46-1.34(m， 4H)， 0.93(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     丁基 -[3-(1- 甲基 -1， 2， 5， 6- 四氢 - 吡啶 -3- 基 )-1H- 吡唑 -4- 基 ]- 胺
     ( 化合物 42， 方案 8)
     于 -10℃， 在 N2 下， 向含有化合物 19(0.725g， 5mmol) 的 (10ml) 浓 H2SO4 溶液中逐 滴添加 5ml H2SO4 和 5ml HNO3 的混合物。添加后， 将得到的溶液于室温搅拌 3 小时。将混合 物倾倒入冰中， 随后添加 2NNaOH。 添加乙酸乙酯， 并将有机层用盐水洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过 滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 )， 得到化合物 38， 为油状 1 物 (0.57g， 60％ )。 H-NMR(200MHz， CDCl3andD6DMSO 1/1) ： δ8.9(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.7(d， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.05(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.60(s， 1H)， 7.48-7.40(m， 1H)。
     将化合物 38(0.37g， 1.9mmol) 溶解于 MeOH( 包含 Pd(OH)2/C(0.03g)) 中。氢化于 室温在 3 小时 (1atm) 之内完成。将反应混合物过滤， 用乙酸乙酯 /MeOH(1/1) 洗涤， 并在真 空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯， 随后乙酸乙酯 /MeOH 1/1)， 得到 1 化合物 39， 为油状物 (0.29g， 95％ )。 H-NMR(200MHz， CDCl3 和 D6DMSO1/1) ： δ9.05(d， J＝ 2Hz， 1H)， 8.51(d， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.09(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.43(s， 1H)， 7.37-7.32(m， 1H)。
     在 N2 下， 向含有化合物 39(0.21g， 1.3mmol) 和 0.27ml(1.5eq) 三乙胺的混合物的 无水 CH3CN(15ml) 溶液中添加 0.14ml 的丁酰氯。添加后， 将得到的溶液于室温搅拌 3 小 时， 随后在真空中浓缩。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 浓溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 )， 得到 N-(3- 吡 啶 -3- 基 -1H- 吡唑 )- 丁酰胺 40( 油状物， 0.19g， 77％ )。(TLC 乙酸乙酯 Rf0.16)。
     使用描述的转化 21A 为 22A 的方法 ( 参见方案 3)， 将化合物 40 转化为化合物 41。
     收 率： 65 ％ ( 无 定 形 )。LCMS( 方 法 A) ； Rt ： 0.73min， ([M+H]+ ＝ 249)。 1 H-NMR(600MHz ， CDCl 3) ： δ 8.4(bs ， 1H) ， 7.5(bs ， 1H) ， 6.0-5.96(m ， 1H) ， 3.27(bs ， 2H) ， 2.63(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.43(s， 3H)， 2.43-2.37(m， 2H)， 2.32(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.76-1.70(m， 2H)， 0.98(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     在 N2 下， 向 含 有 化 合 物 41(0.27g， 1.09mmol) 的 无 水 THF(25ml) 溶 液 中 添 加 0.04g(1.0eq)LiAlH4。 添加后， 将得到的溶液回流 18 小时， 并使其温热至室温。 向反应混合 物中添加 0.04ml 的 H2O， 随后添加 0.08ml 的 2N NaOH 和 0.04ml 的 H2O。将得到的混合物温 热 10 分钟 (60℃ )， 冷却至室温并过滤。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 浓溶液洗涤，干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 /MeOH 1/1)， 得到标题化合物 42( 油状物， 0.21g， 95％ )。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 1.05min， ([M+H]+ ＝ 235)。1H-NMR(600MHz， CDCl3) ： δ7.1(bs， 1H)， 6.17-6.14(m， 1H)， 3.4-3.37(m， 2H)， 2.99(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.64(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.48(s， 3H)， 2.47-2.42(m， 2H)， 1.66-1.60(m， 2H)， 1.47-1.40(m， 2H)， 0.97(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 己 -1- 炔基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶
     ( 化合物 44A， 方案 9)。
     使 用 描 述 的 转 化 20A 为 36A 的 方 法 ( 参 见 方 案 7)， 将 化 合 物 20B(10.49g， 38.6mmol) 转化为 3-(1- 苯磺酰基 -4- 碘 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (36B)。收率 11.65g( 无 定形， 74％ )。 (TLC 乙醚 Rf 0.4)1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.05(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.65(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.27(s， 1H)， 8.12(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 8.10-8.06(m， 2H)， 7.73-7.67(m， 1H)， 7.58(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 7.39-7.34(m， 1H)。
     向 含 有 36B(0.97g， 2.36mmol) 的 三 乙 胺 (10ml) 和 DMF(4ml) 中 添 加 3eq 的 己 -1- 炔 (0.81ml)。将得到的混合物在 N2 下搅拌另外的 2 小时。连续添加 10mol ％的 CuI(45mg)、 5mol ％的 PdCl2(PPH3)2(83mg) 和 18mol ％的 PPH3(111mg)。添加后， 将得到的 溶液于 70℃在 N2 下温热 18 小时。冷却至室温后， 将混合物用乙酸乙酯稀释， 用 NaHCO3 饱 和溶液洗涤三遍， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 / PE(1/1))， 得到 3-(1- 苯磺酰基 -4- 己 -1- 炔基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (43A)， 为油状物 1 (0.66g， 77 ％ )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.5-9.2(bs， 1H)， 8.8-8.4(bs， 1H)， 8.34(bd， J ＝ 8Hz， 1H)， 8.21(s， 1H)， 8.08-8.04(m， 2H)， 7.67(bt， J ＝ 7Hz， 1H)， 7.57(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 7.41-7.32(bs， 1H)， 2.42(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.62-1.53(m， 2H)， 1.49-1.39(m， 2H)， 0.93(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     将化合物 43A(0.66g， 1.81mmol)、 1.3g 的 KOH 和 2ml 的 NH2NH2.H2O 在二甘醇 (20ml) 中混合， 并在 N2 下温热至回流 1 小时。将混合物冷却， 浓缩并再溶解于 MeOH 中。经 25g 的 SCX-2(MeOH， 随后 1N NH3/MeOH) 过滤， 随后经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 )， 得到标题化合 1 物 44A。收率 0.37g(90％ )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.25(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.60(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.34(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.73(s， 1H)， 7.39-7.34(m， 1H)， 2.43((t， J＝ 7Hz， 2H)， 1.64-1.56(m， 2H)， 1.52-1.42(m， 2H)， 0.94(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 己 -1- 炔基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 45A， 方案 9)。
     使用描述的转化 21A 为 22A 的方法 ( 参见方案 3)， 将化合物 44A 转化为化合物 45A。收率 ： 90％ ( 无定形 )。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 1.79min， ([M+H]+ ＝ 244)。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.57(s， 1H)， 6.78-6.66(bs， 1H)， 3.42-3.38(m， 2H)， 2.59(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.45(s， 3H)， 2.44-2.37(m， 2H)， 1.62-1.43(m， 4H)， 0.94(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 庚 -1- 炔基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶
     ( 化合物 44B)。
     根据如合成化合物 44A 所述的方法 ( 参见方案 9)， 使用庚 -1- 炔和 3-(1- 苯磺 酰基 -4- 溴 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (36A)， 制备化合物 44B。( 急骤色谱法， 用乙醚 )， 得到 3-(1- 苯磺酰基 -4- 庚 -1- 炔基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (43B)， 为油状物 (90 ％ )。47101939311 A CN 1019393141说明书41/64 页H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.25(bs， 1H)， 8.6(bs， 1H)， 8.34(bd， J ＝ 8Hz， 1H)， 8.21(s， 1H)， 8.06(bd， J ＝ 8Hz， 2H)， 7.67(bt， J ＝ 7Hz， 1H)， 7.57(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 7.36-7.30(m， 1H)， 2.42(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.63-1.55(m， 2H)， 1.44-1.28(m， 4H)， 0.89(t， J ＝ 7Hz， 3H)。使用描 述的转化 43A 为 44A 的方法 ( 参见方案 9)， 将化合物 43B 转化为标题化合物 44B。收率 ： 1 98％ ( 油状物 )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.25(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.59(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.37(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.72(s， 1H)， 7.38-7.33(m， 1H)， 2.42((t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.65-1.57(m， 2H)， 1.46-1.30(m， 4H)， 0.90(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 庚 -1- 炔基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 45B)。
     使用描述的转化 21A 为 22A 的方法 ( 参见方案 3)， 将化合物 44B 转化为化合物 45B。收率 ： 44％ ( 无定形 )。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 1.84min， ([M+H]+ ＝ 258)。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.57(s， 1H)， 6.78-6.66(bs， 1H)， 3.42-3.38(m， 2H)， 2.59(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.45(s， 3H)， 2.44-2.37(m， 2H)， 1.62-1.43(m， 4H)， 0.94(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 壬 -1- 炔基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶
     ( 化合物 44C)。
     根据如合成化合物 44A 所述的方法 ( 参见方案 9)， 使用壬 -1- 炔和 3-(1- 苯磺酰 基 -4- 碘 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (36B)， 制备化合物 44C。 ( 急骤色谱法， 用乙醚 /PE 1/1)， 得到 3-(1- 苯磺酰基 -4- 壬 -1- 炔基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (43C)， 为油状物 (80 ％ )。 (TLC 乙醚 Rf 0.44)。
     使用描述的转化 43A 为 44A 的方法 ( 参见方案 9)， 将化合物 43C 转化为标题化合 1 物 44C。收率 ： 78％ ( 油状物 )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.25(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.61(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.35(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.73(s， 1H)， 7.39-7.34(m， 1H)， 2.42((t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.65-1.56(m， 2H)， 1.47-1.38(m， 2H)， 1.37-1.22(m， 6H)， 0.90(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 壬 -1- 炔基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 45C)。
     使用描述的转化 21A 为 22A 的方法 ( 参见方案 3)， 将化合物 44C 转化为化合物 45C。收率 ： 79％ ( 无定形 )。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 2.17min， ([M+H]+ ＝ 286)。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.57(s， 1H)， 6.74-6.69(bs， 1H)， 3.40-3.36(m， 2H)， 2.58(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.44(s， 3H)， 2.43-2.36(m， 2H)， 1.63-1.55(m， 2H)， 1.48-1.39(m， 2H)， 1.36-1.23(m， 6H)， 0.89(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-[4-(5- 苯基 - 戊 -1- 炔基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]- 吡啶
     ( 化合物 44D)。
     根据如合成化合物 44A 所述的方法 ( 参见方案 9)， 使用戊 -4- 炔基 - 苯和 3-(1- 苯 磺酰基 -4- 碘 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (36B)， 制备化合物 44C。( 急骤色谱法， 用乙醚 /PE(1/1))， 得 到 3-[1- 苯 磺 酰 基 -4-(5- 苯 基 - 戊 -1- 炔 基 )-1H- 吡 唑 -3- 基 ]- 吡 啶 (43D)， 为油状物 (80％ )。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.3(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.6(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.33(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 8.22(s， 1H)， 8.09-8.05(m， 2H)， 7.68(bt， J ＝ 8Hz， 1H)， 7.57(bt， J ＝ 8Hz， 2H)， 7.35-7.25(m， 3H)， 7.21-7.15(m， 3H)， 2.74((t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.42((t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.96-1.87(m， 2H)。(TLC 乙醚 Rf 0.56)。使用描述的转化 43A 为 44A 的方法 ( 参见方案 9)， 将化合物 43D 转化为标题化合 1 物 44D。收率 ： 86％ ( 油状物 )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.25(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.6(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.35(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.74(s， 1H)， 7.40-7.17(m， 6H)， 2.77((t， J＝ 7Hz， 2H)， 2.44((t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.99-1.89(m， 2H)。
     3-[4-(5- 苯基 - 戊 -1- 炔基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 45D)。
     使用描述的转化 21A 为 22A 的方法 ( 参见方案 3)， 将化合物 44D 转化为化合物 45D。收率 ： 95％ ( 无定形 )。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 1.99min， ([M+H]+ ＝ 306)。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.58(s， 1H)， 7.31-7.18(m， 5H)， 6.79-6.73(bs， 1H)， 3.43-3.40(m， 2H)， 2.78(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.60(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.45-2.37(m， 7H)， 1.95-1.87(m， 2H)。
     3-[4-(5- 环己基 - 戊 -1- 炔基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]- 吡啶
     ( 化合物 44E)。
     根据如合成化合物 44A 所述的方法 ( 参见方案 9)， 使用戊 -4- 炔基 - 环己烷和 3-(1- 苯磺酰基 -4- 碘 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (36B)， 制备化合物 44E。( 急骤色谱法， 用 乙醚 /PE 1/1)， 得到 3-[1- 苯磺酰基 -4-(5- 环己基 - 戊 -1- 炔基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]- 吡 啶 (43E)， 为油状物 (90 ％ )。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.25(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.6(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.33(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 8.21(s， 1H)， 8.08-8.04(m， 2H)， 7.68(bt， J＝ 8Hz， 1H)， 7.57(bt， J ＝ 8Hz， 2H)， 7.35-7.31(m， 1H)， 2.38(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.72-1.55(m， 6H)， 1.31-1.10(m， 7H)， 0.95-0.8(m， 2H)。
     使用描述的转化 43A 为 44A 的方法 ( 参见方案 9)， 将化合物 43E 转化为标题化合 1 物 44E。收率 ： 94％ ( 油状物 )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.25(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.6(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.35(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.72(s， 1H)， 7.39-7.34(m， 1H)， 2.40(t， J＝ 7Hz， 2H)， 1.73-1.57(m， 6H)， 1.35-1.10(m， 7H)， 0.93-0.75(m， 2H)。
     3-[4-(5- 环己基 - 戊 -1- 炔基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 45E)。
     使用描述的转化 21A 为 22A 的方法 ( 参见方案 3)， 将化合物 44E 转化为化合物 45E。收率 ： 90％ ( 无定形 )。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 2.28min， ([M+H]+ ＝ 312)。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.57(s， 1H)， 6.76-6.71(bs， 1H)， 3.41-3.37(m， 2H)， 2.59(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.45-2.35(m， 7H)， 1.75-1.55(m， 6H)， 1.35-1.10(m， 7H)， 0.94-0.8(m， 2H)。
     3-(4- 己 -1- 烯基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 47A， 方案 9)。
     向 含 有 36A(0.67g， 1.84mmol)( 参 见 方 案 7) 的 甲 苯 (20ml) 中 添 加 1.5eq 的 (E)- 己烯 -1- 基硼酸 (0.35g)。将得到的混合物在 N2 下搅拌 2 小时。连续添加 2eq 的 K3PO4(0.78g)、 4mol％的 Pd(OAc)2(16.5mg) 和 8mol％的 S-Phos(60.4mg)。添加后， 在 N2 下 将得到的溶液于 90 ℃温热 18 小时。冷却至室温后， 将混合物用乙酸乙酯稀释， 用 NaHCO3 饱和溶液洗涤三遍， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 / PE 1/1)， 得到 3-(1- 苯磺酰基 -4- 己 -1- 烯基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (46A)， 为油状物 1 (0.38g， 61％ )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ8.8(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.6(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.15(s， 1H)， 8.10-8.05(m， 2H)， 7.94(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.70-7.64(m， 1H)， 7.56(bt，J ＝ 8Hz， 2H)， 7.37-7.33(m， 1H)， 6.19-6.02(m， 1H)， 2.2-2.13(m， 2H)， 1.45-1.29(m， 4H)， 0.90(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     化合物 46A(0.34g， 0.97mmol)、 0.7g 的 KOH 和 1ml 的 NH2NH2.H2O 在二甘醇 (10ml) 中混合， 并在 N2 下温热至回流 1 小时。将混合物冷却， 浓缩并再溶解于 MeOH 中。经 25g 的 SCX-2(MeOH， 随 后 1N NH3/MeOH) 过 滤， 随 后 经 急 骤 色 谱 法 纯 化 ( 乙 酸 乙 酯 )， 得到 3-(4- 己 -1- 烯基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (46A 的脱保护类似物 )。收率 0.18g(86％ )。 (TLC 乙醚 Rf 0.18)。
     使用描述的转化 21A 为 22A 的方法 ( 参见方案 3)， 将 3-(4- 己 -1- 烯基 -1H- 吡 唑 -3- 基 )- 吡 啶 转 化 为 标 题 化 合 物 47A。 收 率 ： 50 ％ ( 无 定 形 )。LCMS( 方 法 A) ； Rt ： + 1 2.30min， ([M+H] ＝ 246)。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.59(s， 1H)， 6.22(bd， J ＝ 16Hz， 1H)， 6.03-5.98(bs， 1H)， 5.98-5.88(m， 1H)， 3.26-3.21(m， 2H)， 2.63(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.44(s， 3H)， 2.43-2.36(m， 2H)， 2.19-2.11(m， 2H)， 1.46-1.29(m， 4H)， 0.91(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-{4-2[-(3- 氟 - 苯基 )- 乙烯基 ]-1H- 吡唑 -3- 基 }-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡 啶
     ( 化合物 47B)。
     向 含 有 36A(0.48g， 1.32mmol)( 参 见 方 案 7) 的 甲 苯 (20ml 中 添 加 1.5eq 的 (E)-2-(3- 氟苯基 )- 乙烯基硼酸 (0.33g)。将得到的混合物在 N2 下搅拌 2 小时。连续添加 2eq 的 K3PO4(0.56g)、 4mol％的 Pd(OAc)2(8.8mg) 和 8mol％的 S-Phos(32mg)。添加后， 在 N2 下将得到的溶液于 90℃温热 18 小时。冷却至室温后， 将混合物用乙酸乙酯稀释， 用 NaHCO3 饱和溶液洗涤三遍， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 / PE 1/1)， 得到 3-(1- 苯磺酰基 -4-[2-(3- 氟 - 苯基 )- 乙烯基 ]-1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 1 (46B)， 为油状物 (0.39g， 73％ )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ8.85(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.65(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.36(s， 1H)， 8.13-8.08(m， 2H)， 7.95(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.72-7.67(m， 1H)， 7.58(bt， J ＝ 8Hz， 2H)， 7.41-7.37(m， 1H)， 7.33-7.27(m， 1H)， 7.16(bd， J ＝ 7Hz， 1H)， 7.12-7.07(m， 1H)， 7.0-6.94(m， 1H)， 6.92(d， J ＝ 16Hz， 1H)， 6.82(d， J ＝ 16Hz， 1H)。
     化 合 物 46B(1.06g， 2.62mmol)、 1.3g 的 KOH 和 2mlNH2NH2.H2O 在 二 甘 醇 (25ml) 中混合， 并在 N2 下温热至回流 1 小时。将混合物冷却， 浓缩并再溶解于 MeOH 中。经 25g 的 SCX-2(MeOH， 随 后 1N NH3/MeOH) 过 滤， 随 后 经 急 骤 色 谱 法 纯 化 ( 乙 酸 乙 酯 )， 得到 3-{4-[2-(3- 氟 - 苯基 )- 乙烯基 ]-1H- 吡唑 -3- 基 }- 吡啶 (46B 的脱保护类似物 )。收 率 0.42g(60.4 ％ )。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ8.85(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.65(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz ， 1H) ， 7.95-7.90(m ， 2H) ， 7.45-7.41(m ， 1H) ， 7.32-7.27(m ， 1H) ， 7.20-7.16(m ， 1H) ， 7.14-7.09(m， 1H)， 6.99(d， J ＝ 16Hz， 1H)， 6.96-6.86(m， 2H)。
     使用描述的转化 21A 为 22A 的方法 ( 参见方案 3)， 将 3-{4-[2-(3- 氟 - 苯基 )- 乙 烯基 ]-1H- 吡唑 -3- 基 }- 吡啶转化为标题化合物 47B。收率 ： 67％ ( 无定形 )。LCMS( 方 + 1 法 A) ； Rt ： 1.79min， ([M+H] ＝ 284)。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.78(s， 1H)， 7.31-7.25(m， 1H) ， 7.20-7.10(m ， 2H) ， 7.0-6.88(m ， 2H) ， 6.81(d ， J ＝ 16Hz ， 1H) ， 6.07-6.01(m ， 1H) ， 3.33-3.25(m， 2H)， 2.69(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.50-2.42(m， 5H)。
     3-(4- 辛 -1- 烯基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 47C)。向含有 36A(0.91g， 2.5mmol)( 参见方案 7) 的甲苯 (20ml) 中添加 1.5eq(E)- 辛 烯 -1- 基硼酸 (0.59g)。 将得到的混合物在 N2 下搅拌 2 小时。 连续添加 2eq 的 K3PO4(1.06g)、 4mol ％的 Pd(OAc)2(22.4mg) 和 8mol ％的 S-Phos(82mg)。添加后， 在 N2 下将得到的溶液 于 90℃温热 18 小时。冷却至室温后， 将混合物用乙酸乙酯稀释， 用 NaHCO3 饱和溶液洗涤 三遍， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 /PE 1/1)， 得到 3-(1- 苯磺酰基 -4- 辛 -1- 烯基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (46C)， 为油状物 (0.31g， 32％ )。 1 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ8.85(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.65(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.15(s， 1H)， 8.08-8.05(m， 2H)， 7.93(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.69-7.64(m， 1H)， 7.59-7.52(m， 2H)， 7.37-7.33(m， 1H)， 6.19(d， J ＝ 16Hz， 1H)， 6.10-6.03(m， 1H)， 2.19-2.12(m， 2H)， 1.45-1.37(m， 2H)， 1.36-1.23(m， 6H)， 0.90(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     化合物 46C(0.35g， 0.89mmol)、 0.7g 的 KOH 和 1ml 的 NH2NH2.H2O 在二甘醇 (10ml) 中混合， 并在 N2 下温热至回流 1 小时。将混合物冷却， 浓缩并再溶解于 MeOH 中。经 25g 的 SCX-2(MeOH， 随 后 1N NH3/MeOH) 过 滤， 随 后 经 急 骤 色 谱 法 纯 化 ( 乙 酸 乙 酯 )， 得到 3-(4- 辛 -1- 烯基 -1H- 吡唑 -3- 基 )- 吡啶 (46C 的脱保护类似物 )。收率 0.19g(95％ )。 1 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ8.85(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.65(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 7.91(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.71(s， 1H)， 7.41-7.36(m， 1H)， 6.27(d， J ＝ 16Hz， 1H)， 6.07-5.98(m， 1H)， 2.19-2.12(m， 2H)， 1.46-1.38(m， 2H)， 1.37-1.23(m， 6H)， 0.89(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     使用描述的转化 21A 为 22A 的方法 ( 参见方案 3)， 将 3-(4- 辛 -1- 烯基 -1H- 吡 唑 -3- 基 )- 吡 啶 转 化 为 标 题 化 合 物 47C。 收 率 ： 95 ％ ( 无 定 形 )。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.58(s， 1H)， 6.24(bd， J ＝ 16Hz， 1H)， 6.07-6.02(m， 1H)， 5.98-5.89(m， 1H)， 3.29-3.25(m， 2H)， 2.63(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.46(s， 3H)， 2.44-2.38(m， 2H)， 2.18-2.12(m， 2H)， 1.46-1.38(m， 2H)， 1.38-1.24(m， 6H)， 0.91(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 丁基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷
     ( 化合物 49A， 方案 10)
     向 含 有 化 合 物 48(0.5g， 1.65mmol)( 根 据 Biorganic &MedicinalChemistry， 8， 2000， 449-454 制 备 ) 的 无 水 THF(150ml) 溶 液 中， 于 -78 ℃ 在 N2 下， 逐 滴 添 加 2.1eq 的 n-BuLi(1.39ml， 2.5M， 在己烷中 )。 添加后， 将得到的溶液于 -78℃搅拌 1.5 小时。 在此温度 下， 添加 1.1eq 的乙基二硫烷基乙烷 (0.35ml)， 并将得到的溶液于 -78℃搅拌 1 小时， 随后 使其温热至室温过夜。 然后， 于 0℃将混合物用 NH4Cl 饱和溶液猝灭， 并在真空中浓缩。 添加 乙酸乙酯， 并将有机层用 2N NaOH 洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。 经急骤色谱法 纯化 (MeOH)， 得到标题化合物 49A( 无定形， 0.15g， 35％ )。 化合物 49A 与 1 当量在 EtOH 中的 富马酸反应并浓缩。 ( 固体 )。 mp 162-164℃。 LCMS( 方法 A) ； Rt ： 1.62min， ([M+H]+ ＝ 266)。 1 H-NMR(400MHz， D6DMSO) ： δ7.83(s， 1H)， 6.43(s， 2H)， 3.60-3.39(m， 3H)， 3.25-3.00(m， 4H)， 2.58(bt， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.10-2.05(m， 1H)， 1.98-1.83(m， 2H)， 1.78-1.68(m， 1H)， 1.48-1.30(m， 4H)， 0.84(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 戊基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷
     ( 化合物 49B， 方案 10)
     将 化 合 物 48(2.50g ； 8.25mmol)、 K2CO3(1.82g ； 13.2mmol) 和 戊 烷 -1- 硫 醇 (1.53ml， 12.4mmol) 溶解于 30ml 的 DMF 中， 并将溶液用氩脱气 45 分钟。向此溶液中添加Pd2(dba)3(755mg ； 0.83mmol) 和 Xantphos(953mg ； 1.65mmol)。 添 加 后， 将反应混合物加 热至 120℃， 并在 N2 下搅拌 20 小时。将混合物冷却， 浓缩并再溶解于 MeOH 中。经 25g 的 SCX-2(MeOH， 随后 1N NH3/MeOH) 过滤， 随后经急骤色谱法纯化 (EtOH)， 得到标题化合物 49B， 为油状物。收率 395mg(17％ )。化合物 49B 与 1 当量在 EtOH 中的富马酸反应并浓缩 ( 固 体 )。mp 142-145 ℃ .1H-NMR(600MHz， D6DMSO) ： δ7.83(s， 1H)， 6.48(s， 2H)， 3.58-3.51(m， 1H) ， 3.48-3.41(m ， 2H) ， 3.25-3.15(m ， 3H) ， 3.11-3.03(m ， 1H) ， 2.61-2.53(m ， 2H) ， 2.11-2.06(m， 1H)， 1.97-1.85(m， 2H)， 1.77-1.69(m， 1H)， 1.59-1.52(m， 1H)， 1.48-1.41(m， 2H)， 1.34-1.22(m， 4H)， 0.83(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 甲基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷
     ( 化合物 49C)
     将化合物 48(2.50g ； 8.25mmol)( 参见方案 10) 溶解于 30ml 的 DMF 中， 并将溶液 用氩脱气 45 分钟。向此溶液中添加 NaSMe(867mg， 12.4mmol)、 Pd2(dba)3(755mg ； 0.83mmol) 和 Xantphos(953mg ； 1.65mmol)。添加后， 将反应混合物加热至 120℃， 并在 N2 下搅拌 20 小 时。将混合物冷却， 浓缩并再溶解于 MeOH 中。经 25g 的 SCX-2(MeOH， 随后 1N NH3/MeOH) 过 滤， 随后经急骤色谱法纯化 (EtOH)， 得到化合物 49C( 油状物 )。从乙醚结晶， 得到标题化合 1 物 ( 固体 )。mp 145-147℃收率 ： 290mg(16％ )。 H-NMR(600MHz， D6DMSO) ： δ7.70(s， 1H)， 3.21-3.12(m， 1H)， 3.10-3.01(m， 2H)， 2.92-2.85(m， 1H)， 2.81-2.73(m， 2H)， 2.68-2.61(m， 1H)， 2.21(s， 3H)， 1.81-1.78(m， 1H)， 1.68-1.55(m， 3H)， 1.25-1.18(m， 1H)。
     3-(4- 乙基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷
     ( 化合物 49D)
     使用乙硫醇作为试剂， 化合物 49D 根据如合成化合物 49B 所述的方法 ( 参见方案 10)， 制备。随后经急骤色谱法纯化 (EtOH 至 EtOH/ 三乙胺 99/1)， 得到化合物 49D。 1
     收率 ： 30％ ( 油状物 )。H-NMR(600MHz， D6DMSO) ： δ7.69(s， 1H)， 3.16-2.99(m， 3H)， 2.92-2.84(m， 1H)， 2.80-2.71(m， 2H)， 2.67-2.60(m， 1H)， 2.56-2.51(m， 2H)， 1.78-1.75(m， 1H)， 1.66-1.54(m， 3H)， 1.25-1.18(m， 1H)， 1.08(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 丙基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷
     ( 化合物 49E)
     使用丙烷 -1- 硫醇作为试剂， 化合物 49E 根据如合成化合物 49B 所述的方法 ( 参 见方案 10)， 制备。随后经急骤色谱法纯化 (EtOH ～ EtOH/ 三乙胺 99/1)， 得到化合物 49E。 1
     收 率： 25 ％ ( 无 定 形 )。 H-NMR(600MHz， D6DMSO) ： δ7.72-7.64(bs， 1H)， 3.16-2.99(m， 3H)， 2.93-2.84(m， 1H)， 2.80-2.71(m， 2H)， 2.67-2.60(m， 1H)， 2.54-2.48(m， 2H+DMSO) ， 1.78-1.75(m ， 1H) ， 1.66-1.54(m ， 3H) ， 1.47-1.40(m ， 2H) ， 1.25-1.18(m ， 1H) ， 0.90(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 己基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷
     ( 化合物 49F)
     使用己烷 -1- 硫醇作为试剂， 化合物 49F 根据如合成化合物 49B 所述的方法 ( 参 见方案 10)， 制备。随后经急骤色谱法纯化 (EtOH)， 得到化合物 49F。
     收率 ： 25％ ( 油状物 )。化合物 49F 与 1 当量在 EtOH 中的富马酸反应并浓缩 ( 固 体 )。mp 130 ℃ .1H-NMR(600MHz， D6DMSO) ： δ7.81(s， 1H)， 6.46(s， 2H)， 3.55-3.49(m， 1H)，3.45-3.39(m， 2H)， 3.22-3.13(m， 3H)， 3.08-3.02(m， 1H)， 2.60-2.52(m， 2H)， 2.09-2.05(m， 1H) ， 1.95-1.83(m ， 2H) ， 1.75-1.68(m ， 1H) ， 1.57-1.51(m ， 1H) ， 1.46-1.40(m ， 2H) ， 1.35-1.29(m， 2H)， 1.27-1.17(m， 4H)， 0.83(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 苯乙基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷
     ( 化合物 49G)
     使用 3- 苯基 -1- 丙硫醇作为试剂， 化合物 49G 根据如合成化合物 49B 所述的方法 ( 参见方案 10)， 制备。随后经急骤色谱法纯化 (EtOH)， 得到化合物 49G。
     收率 ： 11 ％ ( 油状物 )。化合物 49G 与 1 当量在 EtOH 中的富马酸反应并浓缩 1 ( 无定形 )。 H-NMR(600MHz， D6DMSO) ： δ7.86(s， 1H)， 7.26(t， J ＝ 8Hz， 2H)， 7.19-7.14(m， 3H)， 6.49(s， 2H)， 3.56-3.50(m， 1H)， 3.46-3.39(m， 2H)， 3.24-3.14(m， 3H)， 3.10-3.03(m， 1H)， 2.66(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.60-2.53(m， 2H)， 2.03-2.00(bs， 1H)， 1.94-1.82(m， 2H)， 1.77-1.68(m， 3H)， 1.56-1.50(m， 1H)。
     3-[4-(3- 甲基 - 丁基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷
     ( 化合物 49H)
     使用 3- 甲基 -1- 丁硫醇作为试剂， 化合物 49H 根据如合成化合物 49B 所述的方法 ( 参见方案 10)， 制备。随后经急骤色谱法纯化 (EtOH)， 得到化合物 49G。
     收率 ： 20％ ( 油状物 )。化合物 49G 与 1 当量在 EtOH 中的富马酸反应并浓缩 ( 固 体 )。mp 157-159 ℃ .1H-NMR(600MHz， D6DMSO) ： δ7.83(s， 1H)， 6.47(s， 2H)， 3.56-3.50(m， 1H) ， 3.46-3.40(m ， 2H) ， 3.24-3.15(m ， 3H) ， 3.09-3.03(m ， 1H) ， 2.58(t ， J ＝ 7Hz ， 2H) ， 2.09-2.06(bs， 1H)， 1.96-1.84(m， 2H)， 1.76-1.68(m， 1H)， 1.67-1.59(m， 1H)， 1.58-1.52(m， 1H)， 1.38-1.30(m， 2H)， 0.83(d， J ＝ 7Hz， 6H)。
     3-[4-(4， 4- 二氟 - 丁 -3- 烯基硫烷基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷
     ( 化合物 49I)
     化合物 49I 根据如合成化合物 21A 所述的方法 ( 参见方案 3)， 使用作为二硫化物 的 3- 苯基 - 丙基二硫烷基 -3- 丙基苯 ( 根据 TetrahedronLetters， 42， 2001， 6741-6743 中 所述的方法制备 ) 和 3-(4- 碘 -1H- 吡唑 -3- 基 ]-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷 ( 化合物 48， 参见方案 10)， 制备。 纯化条件是 ： PrepHPLC( 系统 CHSLCPO2)， 柱： Inertsil ODS-3， 8um。 洗 + 脱液 10％ /90％ CH3CN/H2O+HCOOH， 50ml/min。LCMS( 方法 A) ： Rt ： 1.16min， ([M+H] ＝ 300)。 1 收率 ： 4.5 ％ .( 油状物 )。 H-NMR(600MHz， CDCl3) ： δ7.63(s， 1H)， 4.24 和 4.17(ddt， J＝ 7Hz， 26Hz， 3Hz， 1H)， 3.91-3.84(m， 1H)， 3.51-3.37(m， 3H)， 3.32-3.19(m， 2H)， 3.12-3.03(m， 1H) ， 2.57(t ， J ＝ 7Hz ， 2H) ， 2.23-2.15(m ， 3H) ， 2.12-2.01(m ， 1H) ， 2.01-1.89(m ， 2H) ， 1.61-1.51(m， 1H)。
     3-(4- 丁氧基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷
     ( 化合物 52A， 方案 10)
     在 N2 下， 将 NaH 在 矿 物 油 (1.5g， 38mmol) 中 的 60 ％ 分 散 液 添 加 到 含 有 3-(4- 碘 -1H- 吡唑 -3- 基 ]-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷 ( 化合物 48， 9.6g， 31.7mmol) 的无 水 THF(300ml) 溶液中。 得到的混合物于室温搅拌 2 小时， 直至所有固体都溶解。 随后， 反应 混合物用 38.4mmol(6.74ml) 的 2- 氯甲氧基 - 乙基 - 三甲基甲硅烷 (SEM-Cl) 处理。 得到的混合物于室温搅拌 20 小时。因为期望产物 (50) 的部分季铵化， 添加 TBAF(1M 的 THF 溶液， 45ml， 45mmol)， 并将混合物于室温搅拌 20 小时。将乙酸乙酯添加到混合物中， 并将有机层 用 2N NaOH 溶液洗涤， 随后用盐水洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩， 得到 3-[4- 碘 -1-(2- 三 甲基硅烷基 - 乙氧基甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷 (50)。 收率 ： 11.6g， + 26.7mmol， 84％。LCMS( 方法 B) ； Rt ： 3.11min， ([M+H] ＝ 434)。
     将化合物 50(2.5g， 5.77mmol)、 CuI(1.37g， 7.19mmol)、 Cs2CO3(3.90g， 12mmol)、 1， 10- 二氮菲 (2.60g， 14.4mmol) 和丁醇 (25ml) 的混合物在微波中于 150℃加热 4 小时。
     将混合物冷却至室温。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 2N NaOH 溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 梯度 EtOH ～ EtOH/ 三 乙胺 300/1)， 随后再次使用急骤色谱法 (EtOH/ 乙酸乙酯 / 三乙胺 25/75/1)， 得到化合物 + 51A， 为油状物 (0.33g， 15％ )。LCMS( 方法 B) ； Rt ： 3.27min， ([M+H] ＝ 380)。
     在 N2 下， 向含有化合物 51A(0.33g， 0.86mmol) 的无水 THF(5ml) 溶液中添加 3.5ml 的 TBAF(1.0M， 在 THF 中 )。添加后， 将得到的溶液于室温搅拌 20 小时， 随后在真空中浓 缩。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 浓溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓 缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 梯度 EtOH ～ EtOH/ 三乙胺 97/3)， 随后经制备 型 HPLC 纯化 ： PrepHPLC( 系统 CHSLCPO2)， 柱： Inertsil ODS-3， 8um。洗脱液 10 ％ /90 ％ CH3CN/H2O+HCOOH， 50ml/min， 得到标题化合物 52A( 油状物， 0.1g， 45 ％ )。LCMS( 方法 A) ： + 1 Rt ： 1.0min， ([M+H] ＝ 250)。 H-NMR(600MHz， D6DMSO+ 几 滴 HCOOH) ： δ8.63(s，～ 1H)， 7.2(s， 1H)， 3.99-3.93(m， 1H)， 3.85(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 3.54-3.26(m， 5H)， 3.19-3.12(m， 1H)， 2.36-2.32(m， 1H)， 2.12-1.95(m， 3H)， 1.76-1.70(m， 2H)， 1.67-1.60(m， 1H)， 1.50-1.42(m， 2H)， 0.98(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 丙氧基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷
     ( 化合物 52B)
     根据如合成化合物 52A 所述的方法 ( 参见方案 10)， 使用丙醇和 3-[4- 碘 -1-(2- 三 甲基硅烷基 - 乙氧基甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷 (50)， 制备化合物 52B。后处理和使用急骤色谱法 ( 梯度 EtOH ～ EtOH/ 三乙胺 300/1)， 随后再次使用急骤色 谱法 (EtOH/ 乙酸乙酯 / 三乙胺 25/75/1)， 得到化合物 51B， 为油状物 (14％ )。LCMS( 方法 + B) ： Rt ： 7.15min， ([M+H] ＝ 366)。随后将化合物 51A 脱保护 (TBAF/THF)， 并经急骤色谱法 ( 梯度 EtOH ～ EtOH/ 三乙胺 97/3) 纯化， 随后经制备型 TLC 纯化 (CH3CN/H2O)， 得到标题化 + 1 合物 52B， 为油状物 (51％ )。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 0.91min， ([M+H] ＝ 236)。 H-NMR(600MHz， D 6DMSO) ： δ 7.34(s ， 1H) ， 3.74(t ， J ＝ 7Hz ， 2H) ， 3.24-3.19(m ， 1H) ， 3.03-2.96(m ， 1H) ， 2.92-2.87(m， 1H)， 2.86-2.74(m， 3H)， 2.69-2.62(m， 1H)， 1.88-1.84(m， 1H)， 1.67-1.55(m， 5H)， 1.26-1.20(m， 1H)， 0.92(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 戊氧基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛烷
     ( 化合物 52C)
     根 据 如 合 成 化 合 物 52A 所 述 的 方 法 ( 参 见 方 案 10)， 使 用 戊 醇 (25ml) 和 3-[4- 碘 -1-(2- 三甲基硅烷基 - 乙氧基甲基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ]-1- 氮杂二环 [2.2.2] 辛 烷 (50)(2g， 4.61mmol)， 制备化合物 52C。后处理和使用急骤色谱法 ( 梯度 EtOH ～ EtOH/ 三乙胺 300/1)， 随后再次使用急骤色谱法 (EtOH/ 乙酸乙酯 / 三乙胺 25/75/1)， 得到化合物51C， 为油状物 (0.46g， 15％ )。LCMS( 方法 B) ； Rt ： 3.30min， ([M+H]+ ＝ 394)。
     向 SEM- 脱 保 护 的 吡 唑 51C(0.46g， 1.2mmol) 在 EtOH(5ml) 中 的 溶 液 中 添 加 HCl(4M 在二氧杂环己烷中， 1ml， 4mmol)， 并将反应混合物于 75 ℃搅拌 20 小时。随后经急 骤色谱法纯化 ( 梯度 EtOH ～ EtOH/ 三乙胺 97/3)， 随后经制备型 HPLC 纯化 ： PrepHPLC( 系 统 CHSLCPO2)，柱 ： Inertsil ODS-3， 8um。 洗 脱 液 10 ％ /90 ％ CH3CN/H2O+HCOOH， 50ml/ 1 min， 得到标题化合物 52C( 油状物， 60mg， 19 ％ )。 H-NMR(600MHz， D6DMSO+ 几滴 HCOOH) ： δ8.65(s， ～ 1H)， 7.2(s， 1H)， 3.96-3.90(m， 1H)， 3.84(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 3.54-3.46(m， 1H)， 3.45-3.26(m， 4H)， 3.19-3.12(m， 1H)， 2.36-2.32(m， 1H)， 2.12-1.95(m， 3H)， 1.79-1.74(m， 2H)， 1.67-1.60(m， 1H)， 1.45-1.35(m， 4H)， 0.95(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     外 -6-(1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [3.2.1] 辛 -6- 醇
     ( 化合物 55， 方案 11)
     在 N2 下， 于 -10 ℃， 将 丙 炔 醛 乙 缩 醛 (14.62g， 114mmol) 和 t-BuOK(14.92g， 133mmol) 在 350ml 无水 THF 中的混悬液搅拌 1 小时。然后， 添加 1- 氮杂 - 二环 [3.2.1] 辛 -6- 酮 (53， J.Med.Chem.， 36， 1993， 683-689)(11.92g， 95mmol) 在 100ml THF 中的混悬液， 并将得到的均质反应混合物于 0℃搅拌另外的 2 小时。 然后将混合物于 0℃用乙酸水溶液猝 灭， 并在真空中浓缩。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 2N NaOH 洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在 真空中浓缩。经急骤色谱法纯化 ( 二氯甲烷 /MeOH/NH4OH 93/7/0.5)， 得到 6-(3， 3- 二乙氧 基 - 丙 -1- 炔基 )-1- 氮杂二环 [3.2.1] 辛 -6- 醇 (54)， 为油状物 (20.87g， 86％ )。 LCMS( 方 + 1 法 A) ： Rt ： 1.18min， ([M+H] ＝ 254)。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ5.28(s， 1H)， 3.74-3.65(m， 2H) ， 3.61-3.52(m ， 2H) ， 3.45(d ， J ＝ 13Hz ， 1H) ， 3.12-3.04(m ， 1H) ， 3.0-2.82(m ， 4H) ， 2.22-2.18(m， 1H)， 2.17-2.02(m， 1H)， 1.98-1.89(m， 1H)， 1.71-1.61(m， 1H)， 1.39-1.30(m， 1H)， 1.22(t， J ＝ 7Hz， 6H)。
     化合物 54(15.39g， 60.7mmol) 和 7.02g 的肼二盐酸盐在 EtOH/H2O(3/2， 250ml) 中 混合， 并在 N2 下温热至回流 18 小时。 将混合物冷却， 浓缩并再溶解于 MeOH 中。 向反应混合物 中添加 AmberlyteIRA-95( 碱性 )， 随后于室温搅拌 18 小时。 将混合物过滤， 浓缩并再溶解于 MeOH 中。 经 100g 的 SCX-2(MeOH， 随后 1N NH3/MeOH) 过滤， 得到标题化合物 55( 无定形 )。 收 1 率 8.45g(72％ )。 H-NMR(600MHz， D6DMSO+ 几滴 CF3COOH) ： δ7.70(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 6.42(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 4.24-4.20(m， 1H)， 3.41-3.31(m， 4H)， 3.25-3.21(m， 1H)， 2.45-2.42(m， 1H)， 2.40-2.30(m， 1H)， 2.10-2.04(m， 1H)， 1.74-1.64(m， 2H)， 使用的技术是 DEPT、 HSQC、 COSY、 HMBC、 ROESY 和 NOESY。
     内 -6-(1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [3.2.1] 辛烷
     ( 化合物 58， 方案 11)
     化合物 55(7.83g， 41mmol) 和 9.81ml(120mmol) 的吡啶在苯 (150ml) 中化合。添 加醋酸酐 (11.48ml， 120mmol)， 并在 N2 下将反应混合物温热至 40℃， 在此温度下温热 72 小 时。 将混合物冷却， 浓缩并再溶解于 MeOH 中。 经 100g 的 SCX-2(MeOH， 随后 1N NH3/MeOH) 过 滤， 得到化合物 56( 无定形， 9.6g， ～ 100％ )， LCMS( 方法 A) ： Rt ： 0.98min， ([M+H]+ ＝ 236)， 其无需进一步纯化即使用。
     化合物 56(1.2g， 5.1mmol) 在减压下 (23mbar) 于 200℃加热 ( 在净条件中 )5min， 随后冷却至室温。经急骤色谱法纯化 ( 二氯甲烷 /MeOH/NH4OH 85/15/1)， 得到 6-(1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [3.2.1] 辛 -6- 烯 (57)， 为油状物 (0.49g， 49％ )。LCMS( 方法 A) ； + 1 Rt ： 1.27min， ([M+H] ＝ 176)。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.56(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 6.43(s， 1H)， 6.36(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 3.50-3.45(m， 1H)， 3.06-2.97(m， 1H)， 2.93(d， J ＝ 10Hz， 1H)， 2.86-2.79(m， 2H)， 2.06-1.93(m， 1H)， 1.78-1.72(m， 1H)， 1.49-1.41(m， 1H)。
     化合物 57(3.84g， 21.9mmol)、 6.9g 的甲酸铵 (110mmol) 和 20％ Pd(OH)2/C(340mg) 在 MeOH(150ml) 中混合， 并温热至回流 1 小时。将混合物冷却， 过滤， 浓缩并再溶解于 MeOH 中。经 40g 的 SCX-2(MeOH， 随后 1N NH3/MeOH) 过滤， 随后经急骤色谱法纯化 (MeOH/ 三乙 胺 90/3)， 得到内 -6-(1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [3.2.1] 辛烷 (58)( 无定形， 2.8g， + 1 73％ )。 LCMS( 方法 A) ； Rt ： 0.80min， ([M+H] ＝ 178)。 H-NMR(600MHz， D6DMSO/CDCl3(1/1)) ： δ7.54(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 6.16(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 3.98-3.92(m， 1H)， 3.90-3.84(m， 1H)， 3.82-3.77(m， 1H)， 3.53-3.48(m， 1H)， 3.32-3.24(m， 3H)， 2.82-2.77(m， 1H)， 2.03-1.94(m， 1H)， 1.68-1.60(m， 1H)， 1.58-1.52(m， 1H)， 1.51-1.47(m， 1H)， 使 用 的 技 术 是 DEPT、 HSQC、 COSY、 HMBC、 ROESY 和 NOESY。
     内 -6-(4- 戊基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [3.2.1] 辛烷
     ( 化合物 60A， 方案 11)
     于 -10C，向 58(1.49g， 8.41mmol) 在 无 水 DMF(60ml) 中 的 溶 液 中 添 加 2.68g(10.93mmol) 的 N- 碘代琥珀酰亚胺。将反应混合物于 -10 ℃搅拌 2 小时， 并于室 温搅拌 1 小时。在减压下 ( 部分 ) 除去溶剂。添加 MeOH， 得到的反应混合物经 120g 的 SCX-2(MeOH， 随 后 1NNH3/MeOH) 过 滤， 得 到 内 -6-(4- 碘 -1H- 吡 唑 -3- 基 )-1- 氮 杂 二 环 [3.2.1] 辛烷 (59)( 无定形， 1.73g， 67％ )。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 1.25min， ([M+H]+ ＝ 304)。 1 H-NMR(600MHz， D6DMSO+CF3COOH) ： δ7.72(s， 1H)， 4.08-4.03(m， 1H)， 3.80-3.75(m， 1H)， 3.73-3.68(m， 1H)， 3.50-3.45(m， 1H)， 3.34-3.25(m， 3H)， 3.04-3.0(m， 1H)， 2.24-2.14(m， 1H)， 1.64-1.57(m， 1H)， 1.50-1.42(m， 1H)， 1.22-1.17(m， 1H)， 使 用 的 技 术 是 DEPT、 HSQC、 COSY、 HMBC、 ROESY 和 NOESY。
     将化合物 59(0.50g ； 1.65mmol)、 K2CO3(0.3g ； 2.14mmol) 和戊烷 -1- 硫醇 (0.26ml， 2.06mmol) 溶解于 20ml 的二甲苯 /DMF(9/1) 中， 并将溶液用氩脱气 45 分钟。向此溶液中添 加 Pd2(dba)3(150mg ； 0.165mmol) 和 Xantphos(190mg ； 0.33mmol)。添加后， 将反应混合物加 热最高至 130℃并在 N2 下搅拌 20 小时。将混合物冷却， 浓缩并再溶解于 MeOH 中。经 75g 的 SCX-2(MeOH， 随后 1N NH3/MeOH) 过滤， 随后经急骤色谱法纯化 (MeOH/ 三乙胺 (97/3))， 得到标题化合物 60A， 为油状物。收率 150mg(32％ )。化合物 60A 与 1 当量在 EtOH 中的富 马酸反应并浓缩 ( 无定形 )。
     LCMS( 方法 A) ； Rt ： 1.39min， ([M+H]+ ＝ 280)。1H-NMR(600MHz， D6DMSO) ： δ7.85(s， 1H)， 6.43(s， 2H)， 3.80-3.70(m， 2H)， 3.63-3.58(m， 1H)， 3.28-3.22(m， 1H)， 3.20-3.19(m， 3H) ， 2.82-2.78(m ， 1H) ， 2.63-2.55(m ， 2H) ， 2.12-2.01(m ， 1H) ， 1.65-1.56(m ， 1H) ， 1.50-1.44(m， 2H)， 1.37-1.15(m， 6H)， 0.85(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     内 -6-(4- 丁基硫烷基 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [3.2.1] 辛烷
     ( 化合物 60B)
     根 据 如 合 成 化 合 物 60A 所 述 的 方 法 ( 参 见 方 案 11)， 使 用 丁 烷 -1- 硫 醇 和 内 -6-(4- 碘 -1H- 吡唑 -3- 基 )-1- 氮杂二环 [3.2.1]- 辛烷 (50)， 制备化合物 60B。化合物 60B 与 1 当量在 EtOH 中的富马酸反应并浓缩。收率 ： 49 ％ ( 无定形 )。LCMS( 方法 + 1 A) ； Rt ： 1.71min， ([M+H] ＝ 266)。 H-NMR(600MHz， D6DMSO) ： δ7.80(s， 1H)， 6.46(s， 2H)， 3.94-3.89(m， 1H)， 3.86-3.81(m， 1H)， 3.79-3.74(m， 1H)， 3.45-3.41(m， 1H)， 3.31-3.22(m， 3H) ， 2.93-2.89(m ， 1H) ， 2.62-2.55(m ， 2H) ， 2.21-2.11(m ， 1H) ， 1.66-1.59(m ， 1H) ， 1.49-1.42(m， 2H)， 1.40-1.33(m， 2H)， 1.26-1.20(m， 2H)， 0.86(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 溴 - 异噁唑 -3- 基 )- 吡啶
     ( 化合物 64， 方案 12)。
     向含有 3- 吡啶乙醛肟 (61)(18.87g， 154.7mmol) 的无水 THF(250ml) 溶液中添 加 20.57g(1.0eq) 的 N- 氯代琥珀酰亚胺。添加后， 将得到的溶液于 65 ℃搅拌 18 小时。 然后将反应混合物的温度降低至 -30 ℃， 并添加 1， 2- 二 - 三甲基硅烷基 - 乙炔 (26.4g， 170.4mmol)， 随后添加三乙胺 (2eq， 42ml， 逐滴 )， 同时保持温度＜ -25℃。 搅拌另外的 30 分 钟后， 使混合物温热至室温， 用乙酸乙酯稀释， 用 NaHCO3 饱和溶液洗涤三遍， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 /PE 1/1)， 得到 3-(4， 5- 二 - 三 1 甲 基 硅 烷 基 - 异 噁 唑 -3- 基 )- 吡 啶 (62)， 为 油 状 物 (4.45g， 17 ％ )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ8.70(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.68(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 7.76(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.41-7.37(m， 1H)， 0.46(s， 9H)， .011(s， 9H)。
     向 含 有 化 合 物 62(4.45g， 15.4mmol) 的 无 水 CCl4(80ml) 溶 液 中 添 加 (1.1eq， 1.04ml)Br2。 添加后， 将得到的溶液于 40℃搅拌 18 小时。 冷却反应混合物并在真空中浓缩。 添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 饱和溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。 经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 )， 得到 3-(4- 溴 -5- 三甲基硅烷基 - 异噁唑 -3- 基 )- 吡啶 (63)， 为油状物 (4.5g， ～ 100％ )。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.08(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.73(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.14(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.46-7.41(m， 1H)， 0.40(s， 9H)。
     向含有化合物 63(4.5g， 15.4mmol) 的 EtOH(20ml) 溶液中添加 5ml 的 25％ NH4OH。 添加后， 将得到的溶液于室温搅拌 10 分钟。 反应混合物在真空中浓缩。 添加乙酸乙酯， 并将 有机层 NaHCO3 饱和溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。经急骤色谱法纯化 ( 乙 醚 )， 得到标题化合物 (64)， 为油状物 (2.76g， 82％ )。(TLC 乙醚 Rf 0.4)。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.14(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.76(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.58(s， 1H)， 8.19(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.48-7.43(m， 1H)。
     3-(4- 丁基硫烷基 - 异噁唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 66A， 方案 12)。
     向含有 64(1.0g， 4.44mmol) 的脱气的二噁烷 (40ml) 溶液中添加 1.2eq(0.62ml) 的丁烷 -1- 硫醇和 2eq 的三乙胺 (1.52ml)。将得到的混合物在 N2 下搅拌另外的 2 小时。 连续添加 2.5mol ％的 Pd2(dba)3(100mg) 和 5mol ％的 Xantphos(128mg)。添加后， 在 N2 下 将得到的溶液于 95℃搅拌 18 小时。冷却至室温后， 将混合物用乙酸乙酯稀释， 用 NaHCO3 饱 和溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 )， 得到 3-(4- 丁基硫烷基 - 异噁唑 -3- 基 )- 吡啶 (65A)， 为油状物 (0.26g， 25％ )。(TLC 乙醚 Rf 1 0.54)。H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.24(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.72(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.49(s， 1H)， 8.31(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.45-7.41(m， 1H)， 2.61(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.52-1.43(m， 2H)， 1.39-1.29(m， 2H)， 0.83(t， J ＝ 7Hz， 3H)。将 1Eq 的 硫 酸 二 甲 酯 (0.14ml， 1.5mmol) 添 加 到 65A(0.35g， 1.5mmol) 的 丙 酮 (20ml) 溶液中， 并将混合物于室温搅拌 18 小时。将沉淀的结晶过滤， 用乙醚充分洗涤并干 燥， 得到对应的吡啶鎓硫酸单甲酯衍生物。 向冷却 (-30℃ ) 的此化合物在 MeOH(25ml) 中的 混悬液中以小部分添加四氢化硼钠 (0.17g， 4.5mmol)。 使混合物温热至室温并倾倒入 NH4Cl 饱和溶液中 (0℃ )。 在减压下 ( 部分 ) 除去溶剂。 添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 饱和 溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 (MeOH)， 得到标题化合物 66A( 无定形， 1.09g， 73％ ( 全部 ))。 LCMS( 方法 A) ： Rt ： 1.58min， ([M+H]+ ＝ 1 253)。 H-NMR(600MHz， CDCl3) ： δ8.23(s， 1H)， 7.06-7.04(m， 1H)， 3.40-3.38(m， 2H)， 2.68(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.59(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.48-2.42(m， 5H)， 1.57-1.51(m， 2H)， 1.44-1.37(m， 2H)， 0.90(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 己基硫烷基 - 异噁唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 66B)。
     向含有 64(0.6g， 2.66mmol)( 参见方案 12) 的脱气的二噁烷 (30ml) 溶液中添加 1.2eq(0.62ml) 的己烷 -1- 硫醇和 2eq 的三乙胺 (0.92ml)。将得到的混合物在 N2 下搅拌另 外的 2 小时。连续添加 2.5mol％ Pd2(dba)3(61mg) 和 5mol％ Xantphos(77mg)。添加后， 在 N2 下将得到的溶液于 95℃搅拌 18 小时。 冷却至室温后， 将混合物用乙酸乙酯稀释， 用 NaHCO3 饱和溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 )， 得到 1 3-(4- 己基硫烷基 - 异噁唑 -3- 基 )- 吡啶 (65B)， 为油状物 (0.25g， 37％ )。H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.24(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.73(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.49(s， 1H)， 8.31(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.45-7.41(m， 1H)， 2.61(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.52-1.43(m， 2H)， 1.35-1.13(m， 6H)， 0.85(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     将 1Eq 的硫酸二甲酯 (0.09ml， 0.95mmol) 添加到 65A(0.25g， 0.95mmol) 的丙酮 (20ml) 溶液中， 并将混合物于室温搅拌 18 小时。将沉淀的结晶过滤， 用乙醚充分洗涤并干 燥， 得到对应的吡啶鎓硫酸单甲酯衍生物。 向冷却 (-30℃ ) 的此化合物在 MeOH(25ml) 中混 悬液中以小部分添加四氢化硼钠 (0.144g， 4eq.)。 使混合物温热至室温并倾倒入 NH4Cl 饱和 溶液 (0℃ ) 中。在减压下 ( 部分 ) 除去溶剂。添加乙酸乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 饱和溶 液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 (MeOH)， 得 + 到标题化合物 66B( 无定形， 0.72g， 65％ ( 全部 ))。LCMS( 方法 A) ； Rt ： 1.92min， ([M+H] ＝ 1 281)。H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ8.23(s， 1H)， 7.06-7.04(m， 1H)， 3.40-3.38(m， 2H)， 2.67(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.59(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.48-2.42(m， 5H)， 1.59-1.51(m， 2H)， 1.41-1.21(m， 6H)， 0.85(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 己 -1- 烯基 - 异噁唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 68A， 方案 13)。
     向含有化合物 64(0.64g， 2.84mmol) 的无水 THF(30ml) 中添加 1.5eq 的 (E)- 己 烯 -1- 基硼酸 (0.55g)。得到的混合物在 N2 下搅拌 2 小时。连续添加 2eq 的 K3PO4(1.2g)、 2mol％的 Pd(OAc)2(13mg) 和 4mol％ S-Phos(47mg)。 添加后， 在 N2 下得到的溶液于 65℃温热 18 小时。 冷却至室温后， 将混合物用乙酸乙酯稀释， 用 NaHCO3 饱和溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 /PE1/1)， 得到 3-(4- 己 -1- 烯基 - 异 噁 唑 -3- 基 )- 吡 啶 ( 化 合 物 67A)， 为 油 状 物 (0.47g， 69 ％ )。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ：δ8.9(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.72(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.49(s， 1H)， 8.0(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.45-7.41(m， 1H)， 6.11-5.99(m， 2H)， 2.22-2.14(m， 2H)， 1.46-1.29(m， 4H)， 0.91(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     使用所述的转化 65A 为 66A 的方法 ( 参见方案 12)， 将 3-(4- 己 -1- 烯基 -1H- 吡 唑 -3- 基 )- 吡啶 (67A) 转化为标题化合物 68A。收率 ： 95 ％ ( 无定形 )。LCMS( 方法 A) ： + 1 Rt ： 1.68min， ([M+H] ＝ 247)。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ8.28(s， 1H)， 6.36-6.30(m， 1H)， 6.09-5.93(m， 2H)， 3.46-3.41(m， 2H)， 2.70(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.52(s， 3H)， 2.51-2.45(m， 2H)， 2.21-2.14(m， 2H)， 1.47-1.31(m， 4H)， 0.92(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 辛 -1- 烯基 - 异噁唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 68B)。
     向 含 有 64(0.49g， 2.17mmol)( 参 见 方 案 13) 的 无 水 THF(20ml) 中 添 加 1.5eq 的 (E)- 辛烯 -1- 基硼酸 (0.51g)。得到的混合物在 N2 下搅拌 2 小时。连续添加 2eq 的 K3PO4(0.92g)、 2mol ％ 的 Pd(OAc)2(10mg) 和 4mol ％ 的 S-Phos(36mg)。 添 加 后， 在 N2 下 得 到的溶液于 65℃温热 18 小时。冷却至室温后， 将混合物用乙酸乙酯稀释， 用 NaHCO3 饱和 溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 /PE 1/1)， 得到 3-(4- 辛 -1- 烯基 - 异噁唑 -3- 基 )- 吡啶 ( 化合物 67B)， 为油状物 (0.19g， 34 ％ )。 1 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ8.9(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.72(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.49(s， 1H)， 7.9(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.45-7.40(m， 1H)， 6.11-5.99(m， 2H)， 2.21-2.13(m， 2H)， 1.46-1.38(m， 2H)， 1.37-1.21(m， 6H)， 0.91(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     使用所述的转化 65A 为 66A 的方法 ( 参见方案 12)， 将 3-(4- 辛 -1- 烯基 -1H- 吡 唑 -3- 基 )- 吡啶 (67B) 转化为标题化合物 68B。收率 ： 54 ％ ( 无定形 )。LCMS( 方法 A) ； + 1 Rt ： 2.0min， ([M+H] ＝ 275)。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ8.28(s， 1H)， 6.32-6.27(m， 1H)， 6.09-5.93(m， 2H)， 3.37-3.33(m， 2H)， 2.61(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.45(s， 3H)， 2.44-2.39(m， 2H)， 2.20-2.12(m， 2H)， 1.48-1.38(m， 2H)， 1.37-1.24(m， 6H)， 0.85(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(4- 庚 -1- 炔基 - 异噁唑 -3- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 70A， 方案 13)。
     向含有化合物 64(1.08g， 4.8mmol) 的无水 DMF(20ml) 中添加 1.5eq 的庚 -1- 炔 基 - 三甲基 - 甲硅烷 (1.21g)、 3eq 的 KOAc(1.41g) 和 1eq 的 TBAF(1.0M， 在 THF 中 )。将得 到的混合物在 N2 下搅拌另外的 2 小时。 连续添加 10mol％的 Pd(OAc)2(108mg) 和 20mol％的 PPH3(251mg)。添加后， 在 N2 下得到的溶液于 90℃温热 18 小时。冷却至室温后， 将混合物用 乙酸乙酯稀释， 用 NaHCO3 饱和溶液洗涤三遍， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。得到的残余物经 急骤色谱法纯化 ( 乙醚 /PE1/1)， 得到 3-(4- 庚 -1- 炔基 - 异噁唑 -3- 基 )- 吡啶 (69A)， 为 1 油状物 (0.34g， 30％ )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.3(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.7(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.58(s， 1H)， 8.34(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.44-7.39(m， 1H)， 2.42(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.65-1.57(m， 2H)， 1.45-1.29(m， 4H)， 0.91(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     使 用 所 述 的 转 化 65A 为 66A 的 方 法 ( 参 见 方 案 12)，将 3-(4- 庚 -1- 炔 基 -1H- 吡 唑 -3- 基 )- 吡 啶 (69A) 转 化 为 标 题 化 合 物 70A。 收 率 ： 50 ％ ( 无 定 形 )。 + 1 LCMS( 方 法 A) ： Rt ： 1.78min， ([M+H] ＝ 259)。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ8.40(s， 1H)， 7.18-7.13(m， 1H)， 3.41-3.36(m， 2H)， 2.59(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.45(s， 3H)， 2.45-2.38(m，2H)， 1.64-1.55-2.12(m， 2H)， 1.46-1.30(m， 4H)， 0.91(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-[5- 溴 -3-(2- 三甲基硅烷基 - 乙氧基甲基 )-3H- 咪唑 -4- 基 ]- 吡啶
     ( 化合物 73， 方案 14)
     向 含 有 3- 溴 - 吡 啶 (3.29g， 20.82mmol) 的 无 水 THF(100ml) 中 添 加 1.2eq 的 iPrMgCl(12.49ml， 2M 在 THF 中 )， 并将得到的混合物在 N2(10 ℃ ) 下搅拌 2 小时。随后添 加 1.2eq 的 (CH3)3SnCl， 并将反应混合物于室温 ( 在 N2 下 ) 搅拌 18 小时。反应混合物用 NH4Cl 饱和溶液猝灭， 用乙酸乙酯洗涤， 用 NaHCO3 饱和溶液洗涤三遍， 干燥 (Na2SO4)， 过滤 并浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚 /PE 1/1)， 得到 3- 三甲基锡烷基 - 吡啶 + (71)(3.32g， 66％ )。LCMS( 方法 A) ： Rt ： 2.09min， ([M+H] ＝ 242)。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ8.62(bs， 1H)， 8.52(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 7.76(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.25-7.21(m， 1H)， 0.33(s， 9H)， Sn 出现在 0.41 和 0.27。
     向 71(0.82g， 3.4mmol) 的 无 水 甲 苯 (50ml) 溶 液 中 添 加 0.9eq(1.10g) 的 4， 5- 二溴 -1-(2- 三甲基硅烷基 - 乙氧基甲基 )-1H- 咪唑 ( 化合物 72， LCMS( 方法 A) ： Rt ： + 3.60min， ([M+H] ＝ 357))， 并将得到的混合物在 N2( 室温 ) 下搅拌 2 小时。向此反应混 合物中添加 10mol％的 PdCl2(PPH3)2(240mg)。添加后， 将温度升至 100℃， 并将得到的溶液 在 N2 下搅拌 18 小时。将反应混合物冷却， 用乙酸乙酯稀释， 用 NaHCO3 饱和溶液洗涤三遍， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。得到的残余物经急骤色谱法纯化 ( 乙醚， 随后乙酸乙酯 )， 得 到 3-[5- 溴 -3-(2- 三甲基硅烷基 - 乙氧基甲基 )-3H- 咪唑 -4- 基 ]- 吡啶 (73)， 为油状 + 1 物 (385mg， 36％ )。LCMS( 方法 A) ： Rt ： 3.40min， ([M+H] ＝ 355)。 H-NMR(400MHz， CDCl3 和 HMBC) ： δ8.79(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.66(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 7.91(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.66(s， 1H)， 7.44-7.40(m， 1H)， 5.17(s， 2H)， 3.56-3.50(m， 2H)， 0.94-0.87(m， 2H)， 0.0(s， 9H)。
     3-(5- 戊基硫烷基 -3H- 咪唑 -4- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 76A， 方案 14)。
     向 含 有 73(1.82g， 5.16mmol) 的 脱 气 的 二 甲 苯 (100ml) 溶 液 中 添 加 1.25eq(0.80ml) 的戊烷 -1- 硫醇和 1.25eq 的 K2CO3(0.8g)。将得到的混合物在 N2 下搅拌 另外的 2 小时。 连续添加 10mol％的 Pd2(dba)3(470mg) 和 20mol％ mmol Xantphos(600mg)。 添加后， 在 N2 下， 于 130℃将得到的溶液搅拌 18 小时。冷却至室温后， 将混合物用乙酸乙 酯稀释， 用 NaHCO3 饱和溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。得到的残余物经急骤色谱 法纯化 ( 乙醚， 随后乙酸乙酯 )， 得到 3-[5- 戊基硫烷基 -3-(2- 三甲基硅烷基 - 乙氧基甲 基 )-3H- 咪唑 -4- 基 ]- 吡啶 (74A)， 为油状物 (530mg， 30 ％ ) 和原料 (73， 380mg， 21 ％ )。 1 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.38(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.53(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.42(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.82(s， 1H)， 7.35-7.30(m， 1H)， 5.43(s， 2H)， 3.59-3.54(m， 2H)， 2.66(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.47-1.38(m， 2H)， 1.28-1.10(m， 4H)， 0.96-0.89(m， 2H)， 0.80(t， J ＝ 7Hz， 3H)， 0.0(s， 9H)。
     使用描述的转化 21A 为 22A 的方法 ( 参见方案 3)， 将 3-[5- 戊基硫烷基 -3-(2- 三 甲 基 硅 烷 基 - 乙 氧 基 甲 基 )-3H- 咪 唑 -4- 基 ]- 吡 啶 (74A) 转 化 为 3-[5- 戊 基 硫 烷 基 -3-(2- 三甲基硅烷基 - 乙氧基甲基 )-3H- 咪唑 -4- 基 ]-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶 1 (75A)。收率 ： 75％ ( 无定形 )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7-68(s， 1H)， 6.75-6.71(m， 1H)，5.37(s， 2H)， 3.54-3.46(m， 4H)， 2.67(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.57(t， J ＝ 6Hz， 2H)， 2.46(s， 3H)， 2.44-2.38(m， 2H)， 1.55-1.46(m， 2H)， 1.37-1.24(m， 4H)， 0.94-0.85(m， 5H)， 0.0(s， 9H)。
     在 N2 下， 向含有 75A(0.42g， 1.06mmol) 的无水 THF(20ml) 溶液中添加 3.18ml(3eq) 的 TBAF(1.0M in THF)。添加后， 将得到的溶液回流 18 小时， 随后在真空中浓缩。添加乙 酸乙酯， 并将有机层 NaHCO3 浓溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残 余物经急骤色谱法纯化 (MeOH)， 随后在 (25g)SCX-2(MeOH， 随后 1N NH3/MeOH) 上进一步纯 化， 得到标题化合物 76A.( 油状物， 0.2g， 73 ％ )。LCMS( 方法 A) ： Rt ： 1.0min， ([M+H]+ ＝ 1 266)。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.54(s， 1H)， 6.36-6.31(m， 1H)， 3.49-3.46(m， 2H)， 2.75(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 2.64(t， J ＝ 6Hz， 2H)， 2.47(s， 3H)， 2.43-2.38(m， 2H)， 1.55-1.49(m， 2H)， 1.35-1.23(m， 4H)， 0.85(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     3-(5- 己基硫烷基 -3H- 咪唑 -4- 基 )-1， 2， 5， 6- 四氢 -1- 甲基吡啶
     ( 化合物 76B， 方案 14)。
     向 含 有 化 合 物 73(0.6g， 1.70mmol) 的 脱 气 的 二 甲 苯 (30ml) 溶 液 中 添 加 1.25eq(0.30ml) 的己烷 -1- 硫醇和 1.25eq 的 K2CO3(0.29g)。将得到的混合物在 N2 下搅 拌另外的 2 小时。连续添加 10mol％的 Pd2(dba)3(160mg) 和 20mol％的 Xantphos(200mg)。 添加后， 在 N2 下， 于 130 ℃将得到的溶液搅拌 18 小时。冷却至室温后， 将混合物用乙酸 乙酯稀释， 用 NaHCO3 饱和溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。得到的残余物经急骤色 谱法纯化 ( 乙醚 )， 得到 3-[5- 己基硫烷基 -3-(2- 三甲基硅烷基 - 乙氧基甲基 )-3H- 咪 唑 -4- 基 ]- 吡 啶 (74B)， 为 油 状 物 (120mg， 18 ％ ) 和 原 料 (73， 380mg)。1H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.38(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 8.53(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.42(dt， J ＝ 8Hz， 2Hz， 1H)， 7.82(s， 1H)， 7.35-7.30(m， 1H)， 5.43(s， 2H)， 3.59-3.54(m， 2H)， 2.66(t， J ＝ 7Hz， 2H)， 1.46-1.37(m， 2H)， 1.28-1.06(m， 8H)， 0.96-0.89(m， 2H)， 0.80(t， J ＝ 7Hz， 3H)， 0.0(s， 9H)。
     在 N2 下， 向含有 74B(0.29g， 0.74mmol) 的无水 THF(30ml) 溶液中添加 2.2ml(3eq) 的 TBAF(1.0M in THF)。添加后， 将得到的溶液回流 18 小时， 随后在真空中浓缩。添加乙酸 乙酯， 并将有机层用 NaHCO3 浓溶液洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并在真空中浓缩。得到的残余 物经急骤色谱法纯化 ( 乙酸乙酯 )， 得到 3-(5- 己基硫烷基 -3H- 咪唑 -4- 基 )- 吡啶 (77)， 1 为油状物 (0.14g， 71％ )。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ9.25(bs， 1H)， 8.53(dd， J ＝ 5Hz， 2Hz， 1H)， 8.42-8.35(m， 1H)， 7.78(s， 1H)， 7.38-7.34(m， 1H)， 2.79-2.69(m， 2H)， 1.53-1.44(m， 2H)， 1.33-1.09(m， 6H)， 0.80(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     使用描述的转化 21A 为 22A 的方法 ( 参见方案 3)， 将 3-(5- 己基硫烷基 -3H- 咪 唑 -4- 基 ]- 吡啶 (77) 转化为标题化合物 (76B)( 然而于室温用稍微过量的 CH3I 进行季铵 1 化 )。 收率 ： 70％ ( 油状物 )。 LCMS( 方法 A) ； Rt ： 1.21min， ([M+H]+ ＝ 280)。 H-NMR(400MHz， CDCl3) ： δ7.53(s， 1H)， 6.40-6.29(m， 1H)， 3.45-3.41(m， 2H)， 2.79-2.72(m， 2H)， 2.59(t， J ＝ 6Hz ， 2H) ， 2.45(s ， 3H) ， 2.41-2.37(m ， 2H) ， 1.55-1.49(m ， 2H) ， 1.38-1.31(m ， 2H) ， 1.30-1.19(m， 4H)， 0.85(t， J ＝ 7Hz， 3H)。
     §5. 药理学实验
     (I) 毒蕈碱受体配体筛选的测定方法
     ( 体外 ； 功能测定 )
     实验物质将化合物溶解于 DMSO(10mM) 中， 并在测定缓冲液中稀释至实验浓度。最初的实验 采用 1μM ； 对于在拮抗剂模式中的活性 (PI， 相对于参比激动剂和空白的百分抑制＞ 30％ ) 以及在激动剂模式中的活性 (PS， 关于参比激动剂和空白的百分刺激＞ 30 ％ )， 实验在以 10- 倍稀释的较低浓度下继续 ： 0.1μM、 0.01μM 等。
     测定特征 ： 靶标、 物种、 组织
     测定 毒蕈碱 M1 毒蕈碱 M1 毒蕈碱 M2 毒蕈碱 M3 毒蕈碱 M4
     靶标 GPCR-A-MA-ACH M1 GPCR-A-MA-ACH M1 GPCR-A-MA-ACH M2 GPCR-A-MA-ACH M3 GPCR-A-MA-ACH M4物种 人 兔 豚鼠 豚鼠 人组织 CHO 细胞 输精管 ( 场刺激 ) 左心房 ( 电刺激 ) 回肠 CHO 细胞测定特征 ： 配体 (Kd， 浓度 )， 非特异性结合 ( 化合物， 浓度 )配体 EC50测定参比激动剂 (nM)配体浓度 L(nM)参比拮抗剂反应100( 激动模式 ) 毒蕈碱 M1 乙酰胆碱 0.8 3( 拮抗模式 ) 3000( 激动模式 ) 毒蕈碱 M1 McN-A-343 250 1000( 拮抗模式 ) 毒蕈碱 M2 卡巴胆碱 150 配体 EC50 测定 参比激动剂 (nM) 1000( 拮抗模式 ) 3000( 激动模式 ) 毒蕈碱 M3 卡巴胆碱 125 1000( 拮抗模式 ) 4-DAMP 配体浓度 L(nM) 参比拮抗剂 3000( 激动模式 ) 美索曲明 哌仑西平 哌仑西平Ca2+-FLIPR 荧光测定法抑制单收缩负性变力性效应反应收缩62101939311 A CN 101939314说40明书哌仑西平56/64 页Ca2+- 水母发光 蛋白发光10000( 激动模式 ) 毒蕈碱 M4 氧化震颤素 10000( 拮抗模式 )
     测定特征 ： 方法， 参考文献 测定 毒蕈碱 M1 毒蕈碱 M1 毒蕈碱 M2 毒蕈碱 M3 毒蕈碱 M4 方法 ( 如下 ) 基于细胞的测定法 离体器官 离体器官 离体器官 基于细胞的测定法 参考文献 ( 如下 ) Sur 等人 (2003) Eltze(1988) Eglen at al.(1988) Clague 等人 (1985) Stables 等人 (1997)测定方法和计算
     测定方法
     分离的器官测定法， 激动剂模式 ：
     将组织暴露于最高浓度的各个参比激动剂中， 以证实反应性并获得对照反应。充 分冲洗和初始状态恢复后， 将组织暴露于实验化合物或相同的激动剂中。在 M1 和 M2 受体 测定中， 使化合物与组织接触， 直至获得稳定的反应或最长接触 15 分钟。当试验几种浓度 时， 累积添加它们。在 M3 受体测定中， 使化合物与组织接触足够的时间， 以获得峰反应或最 长接触 10 分钟， 然后洗涤。当试验几种浓度时， 以 40 分钟的间隔连续添加它们。当获得类 激动剂反应时， 则试验各参比拮抗剂抗化合物的最高浓度， 以证实涉及在此反应中研究的 受体。
     分离的器官测定法， 拮抗剂模式 ：
     将组织暴露于次于最高浓度的各个参比激动剂中， 以获得对照反应。在 M1 和 M2 受体测定中， 在激动剂诱发的反应稳定后， 添加试验化合物或参比拮抗剂， 然后使其与组织 接触直至获得稳定的效应或最长接触 15 分钟。当试验几个浓度时， 累积添加各浓度。在 M3 受体测定中， 试验化合物或参比拮抗剂于再暴露于激动剂中之前 30 分钟添加， 所述激动剂 以 40 分钟的间隔添加。如果存在， 由化合物产生的抑制激动剂诱发反应的作用表明对所研 究的受体的拮抗剂活性。 在三个测定法中， 以一种或几种浓度， 在三种分离组织中研究各化 合物的激动剂和拮抗剂活性。在各测定法中， 在三种分离组织中以几种浓度试验参比激动 剂和拮抗剂， 以获得浓度 - 反应曲线。
     基于细胞的测定法 ：
     细胞与化合物孵育， 并且测定所示反应。
     反应及结果的计算
     分离的器官测定法 ：
     测定的参数是电诱发的收缩 (M1 和 M2 受体测定 ) 或由各化合物浓度诱发的收缩 (M3 受体测定 ) 幅度中的最大变化。结果以对照激动剂诱发的反应百分比表述。参比激动 剂的 EC50 值 ( 产生最大反应一半的浓度 ) 和参比拮抗剂的 IC50 值 ( 对激动剂诱发效应产 生最大抑制的一半的浓度 ) 通过其浓度 - 效应曲线的线性回归分析计算。
     基于细胞的测定法 ：
     以在试验化合物存在下相对于参比激动剂值和空白的百分比表述结果， 对于激动 剂模式， 采用百分刺激 ； 对于拮抗剂模式 ( 参比激动剂存在下的试验化合物 )， 以百分抑制 表述。 使用希尔方程曲线拟合， 通过浓度 - 效应曲线的非线性回归分析， 测定 EC50 值 ( 引起 对照数值最大刺激作用一半的浓度 )、 IC50 值 ( 引起对照数值最大抑制作用一半的浓度 )。
     参考文献
     CLAGUE， R.U.， EGLEN， R.M.， STRACHAN， A.C. 和 WHITING， R.L.(1985)Action of agonists and antagonists atmuscarinic receptors present on ileum and atria in vitro.Brit.J.Pharmacol.， 86 ： 163-170。
     EGLEN， R.M.， MONTGOMERY， W.W.， DAINTY， I.A.， DUBUQUE， L.K. 和 WHITING， R.L.(1988)The interaction ofmethoctramine and himbacine at atrial， smooth muscle and endothelialmuscarinic receptors in vitro.Brit.J.Pharmacol.， 95 ： 1031-1038。
     ELTZE， M.(1988)Muscarinic M1-and M2-receptors mediatingopposite effects on neuro-muscular transmission in rabbit vas deferens.Eur.J.Pharmacol.， 151 ： 205-221。
     STABLES， J.， GREEN， A.， MARSHALL， F.， FRASER， N.， KNIGHT， E.， SAUTEL， M.， MILLIGAN， G.， LEE， M.， andREES， S.(1997)A bioluminescent assay for agonist activity atpotentially any G-Protein-Coupled Receptor.Anal.Biochem.252 ： 115-126。
     SUR ， C. ， MALLORGA ， P.J. ， WITTMANN ， M. ， JACOBSON ， M.A. ， PASCARELLA ， D. ， WILLIAMS， J.B.， BRANDISH， P.E.， PETTIBONE， D.J.， SCOLNICK， E.M. 和 CONN， P.J.(2003) N-desmethylclozapine， an allosteric agonist at muscarinic 1receptor， potentiates N-methyl-D-aspartate receptor activity.PNAS， 100 ： 13674-13679。
     (II) 毒蕈碱受体配体筛选的测定方法
     ( 体外 ； 受体结合试验 )
     试验物质
     将化合物溶解于 DMSO(10mM) 中， 并在测定缓冲液中稀释为试验浓度。最初的试验 采用 10μM ； 对于活性 (PI， 相对于总的和非特异性结合的抑制百分数＞ 40％ )， 试验在以 10- 倍稀释的较低浓度下继续 ： 1μM、 0.1μM 等。
     测定特征 ： 靶标、 物种、 组织
     测定法 非选择性毒蕈碱 M靶标 GPCR-A-MA-ACH M物种 大鼠组织 大脑皮层64101939311 A CN 101939314说明书人 人 人 人 CHO 细胞 CHO 细胞 CHO 细胞 CHO 细胞58/64 页毒蕈碱 M1 毒蕈碱 M2 毒蕈碱 M3 毒蕈碱 M4
     GPCR-A-MA-ACH M1 GPCR-A-MA-ACH M2 GPCR-A-MA-ACH M3 GPCR-A-MA-ACH M4测定特征 ： 配体 (Kd， 浓度 )， 非特异性结合 ( 化合物， 浓度 )配体 Kd 配体浓度 L (nM) 0.05 2 2 0.2 6 0.2 非特异性结合 化合物 阿托品 阿托品 阿托品 阿托品 阿托品 阿托品 非特异性结合 浓度 (μM) 1μM 1μM 1μM 1μM 1μM 1μM测定法配体 (nM)非选择性毒蕈碱 M 毒蕈碱 M1 毒蕈碱 M2 毒蕈碱 M3 毒蕈碱 M4 毒蕈碱 M43H-QNB 3H- 哌仑西平 3H-AFDX384 3H-4DAMP 3H- 氧化震颤素 3H-4DAMP0.01 13 4.3 0.5 4.5 0.332
     测定特征 ： 孵育条件 ( 时间 / 温度 )， 参考文献测定方法和计算
     测定方法
     化合物和受体制备物 ( 来自 ‘组织’ ) 及配体在所示时间和温度下孵育后， 受体制 备物在真空下通过玻璃纤维滤器快速过滤 ； 此过滤器使用采集器 (harvester) 用冰冷的缓
     冲液充分洗涤。结合放射性使用液体闪烁混合液通过闪烁计数法测定。
     反应和结果的计算
     结果按照所试验化合物的浓度 ( 双份 ) 以总的配体结合百分数和非特异性结合百 分数表述 ； 由浓度 - 置换曲线， 使用希尔方程曲线拟合， 通过非线性回归分析计算 IC50 值。 抑制常数 (Ki) 由 Cheng-Prushoff 方程 Ki ＝ IC50/(1+L/Kd) 计算， 其中 L 是测定法中放射 性配体的浓度， 并且 Kd 是放射性配体与受体的亲和力。结果以 pKi’ s， 至少 2 个独立实验 的平均值 ±SD 表述 ； 即排除不符值 ( 位于平均值 +/-1std 以外 ) 和界外值。断定在 10μM 和更高浓度下没有明显亲和力的化合物是 “无活性的” ， 由 pKi“＜ 5.0” 表示。
     参考文献
     F.， WESS， J.， LAMBRECHT， G.， TACKE， R.， MUTSCHLER， E. 和 BRANN，M.R.(1991)Antagonist binding profilesof five cloned human muscarinic receptors subtypes.J.Pharmacol.Exp.Ther.， 256 ： 727-733。
     RICHARDS， M.H.(1990)Rat hippocampal muscarinic autoreceptorsare similar to the M2(cardiac)subtype ： comparison with hippocampalM1， atrial M2and ileal M3receptors.Brit.J.Pharmacol.， 99 ： 753-761。 PERALTA， E.G.， ASHKENAZI， A.， WINSLOW， J.W.， SMITH， D.H.， RAMACHANDRAN， J. 和 CAPON， D.J.(1987)Distinct primary structures， ligand-binding properties and tissue-specific expression of four human muscarinic acetylcholine receptors. EMBO.J.， 6： 3923-3929。
     代谢稳定性的测定 ( 体外 )
     使用的方法根据由 DI， L. 等人， Journal of BiomolecularScreening， Vol.8， No.4， 453-462(2003) 所述的方法。
     §6. 药理学数据
     表 1. 与 M1 和 M4 受体的亲和力和效应。
     (RB ＝受体结合 ； n.d. ＝未做 )
     化合物 编号RB 毒蕈碱 M4 3H-DAMP pKi 6.5 n.d. 7.4 6.4 6.7RB 毒蕈碱 M4 3H- 氧化震颤素 pKi 6.4 n.d. 7.2 6.6 6.6细胞功能 毒蕈碱 M4 激动作用 pEC50 ＜ 5.0 ＜ 5.0 6.9 ＜ 5.0 ＜ 5.0RB 毒蕈碱 M1 3H- 哌仑西平 pKi 5.9 n.d. 6.5 6.3 6.8细胞功能 毒蕈碱 M1 激动作用 pEC50 6.9 n.d. 6.7 n.d. n.d.9 16 22F 22M 2666101939311 A CN 101939314说7.6 6.6 6.4 ＜5 6.6 7 5.4 6.7 6.5 5.8 6.9 5.7 6.8 6.3 6.9 5.8 6.8 7.1 6.1 6.6 6.6 6.2 6.3明7.4书6.9 6.4 6.3 ＜5 5.8 6.4 5.1 6.7 5.8 5.9 6.1 4.9 6.9 5.9 6.7 5.6 6.2 6.6 5.3 6.0 5.6 5.8 5.7 8.0 n.d. 7.1 n.d. n.d. n.d. n.d. 7.4 n.d. 6.9 n.d. n.d. 6.4 6.9 6.9 7.0 n.d. n.d. 6.1 6.6 6.8 6.7 6.960/64 页49A 22N 22B 41 22A 22E 42 22G 22D 33C 22Q 22R 22S 33A 22H 33D 66B 66A 68B 70A 47A 68A 45B7.8 6.6 6.9 ＜5 6.4 6.5 5.3 7.3 6.4 6.5 6.3 5.4 7.3 6.6 7.2 6.0 7.0 7.4 6.0 6.7 6.1 6.6 5.9＜ 5.0 6.3 ＜ 5.0 ＜ 5.0 ＜ 5.0 ＜ 5.0 6.5 ＜ 5.0 5.9 ＜ 5.0 ＜ 5.0 ＜ 5.0 6.1 8.0 5.9 6.3 ＜ 5.0 6.1 6.2 6.3 6.1 6.567101939311 A CN 101939314说6.9 6.6 7.1 6.3 6.4 6.8 5.8 6.8 6.3 6.6 7.0 7.2 6.4 7.9 8.1 7.5 6.7 6.9 6.9 7.2 6.4 6.8 6.5明6.8书6.1 6.4 6.5 6.1 5.8 6.1 5.8 6.6 5.7 6.1 6.1 6.2 5.9 6.6 6.8 6.8 6.0 5.8 6.0 6.1 5.1 6.0 5.4 7.4 ＜ 6.0 8.0 ＜ 6.0 6.9 n.d. ＜ 6.0 ＜ 6.0 6.1 6.1 7.0 7.4 7.0 6.1 8.0 7.3 7.0 7.6 7.1 8.0 7.5 6.7 7.461/64 页49D 60B 49E 45C 45A 47B 45E 22C 45D 47C 22I 22J 22K 49F 49B 49H 33B 33G 49C 22L 22O 33E 33F7.0 6.8 7.4 6.1 6.2 6.5 5.8 7.2 6.2 6.1 6.6 6.6 6.2 7.3 7.6 7.4 6.5 6.7 6.9 7.0 6.1 6.5 6.3＜ 5.0 7.1 5.7 6.1 ＜ 5.0 ＜ 5.0 ＜ 5.0 5.9 6.2 6.6 6.6 5.9 7.9 8.2 ＜ 5.0 6.3 6.2 6.3 7.2 6.2 6.2 6.168101939311 A CN 101939314说6.7 7.6 7.2 6.9 7.2 7.9 5.2 6.0 6.2 7.2明书6.0 6.2 6.0 6.1 6.2 6.5 ＜ 5.0 5.4 5.6 6.4 7.1 7.3 7.9 7.7 8.1 8.5 6.4 7.1 6.9 n.d.62/64 页59 49G 52C 52A 52B 49I 22P 76B 76A 60A
     7.0 7.0 6.6 6.6 6.9 7.2 5.2 6.3 6.5 6.6＜ 5.0 8.0 n.d. n.d. 7.0 7.7 5.9 6.0 5.1 ＜ 5.0表 2. 与 M2 和 M3 受体的亲和力和效应。 (RB ＝受体结合 ) 细胞功能 RB 毒蕈碱 细胞功能 RB 毒蕈碱 毒蕈碱 M2 M2 激动作用 美索曲明 pEC50 pA2 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜669细胞功能 毒蕈碱 M3 M3 激动作用 4-DAMP pEC50 6.5 6.1 6.4 6.5 6.0 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6细胞功能 毒蕈碱 M3 激动作用 pA2 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6化合物 编号毒蕈碱 M2 激动作用22J 33G 33B 22L 33F5.5 5.4 5.9 5.7 5.3＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6101939311 A CN 101939314说5.0 6.1 5.4 5.6 5.9 5.2 5.3 6.3 5.7 6.4 6.4 6.2 7.5 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 6.1 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6明7.7 ＜6 ＜6 ＜6 7.6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 7.9书5.6 6.5 6.1 6.2 6.5 5.6 6.1 6.9 7.3 7.5 7.0 7.2 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜663/64 页22O 49G 52A 52C 52B 76B 76A 49E 22S 22C 49F 49B 美索曲明 4-DAMP 卡巴胆碱 McN-A-343 哌仑西平＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 ＜6 7.0 ＜6 ＜6 ＜69.4 6.8 6.9 8.9表 3. 在人肝组织匀浆中的稳定性 / 选择的化合物化合物 22B 22G 22J 22L 22O 33F 33G 呫诺美林 ( 参比 ) t1/2( 分钟 ) 52 50 129 56 245 230 56 1771