一种头孢唑肟钠脂质体注射剂 【技术领域】
本发明涉及医药技术领域，涉及到了一种头孢唑肟钠制剂，具体地说涉及到了以特定的原辅料和制备工艺制备头孢唑肟钠脂质体注射剂的方法。
技术背景
头孢唑肟钠，化学名称为：[6R-[6(，7((Z)]]-7[[2，3-二氢-2-亚氨基-4-噻唑基)(甲氧亚氨基)乙酰基]氨基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂二环[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸钠盐，分子式C13H12N5NaO5S2，分子量405.38，结构式为：
头孢唑肟钠属第三代头孢菌素，具广谱抗菌作用，对多种革兰阳性菌和革兰阴性菌产生的广谱内酰胺酶(包括青霉素酶和头孢菌素酶)稳定，对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌等肠杆菌科细菌有强大抗菌作用，铜绿假单胞菌等假单胞菌属和不动杆菌属对本品敏感性差。头孢唑肟钠对流感嗜血杆菌和淋病奈瑟球菌有良好抗菌作用。头孢唑肟钠对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的作用较第一、第二代头孢菌素为差，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和肠球菌属对本品耐药，各种链球菌对本品均高度敏感。消化球菌、消化链球菌和部分拟杆菌属等厌氧菌对本品多呈敏感，艰难梭菌对本品耐药。头孢唑肟钠作用机制为通过抑制细菌细胞壁粘肽的生物合成而达到杀菌作用。适用于敏感菌所致的下呼吸道感染、尿路感染、腹腔感染、盆腔感染、败血症、皮肤软组织感染、骨和关节感染、肺炎链球菌或流感嗜血杆菌所致脑膜炎和单纯性淋病。
上市销售的头孢唑肟钠制剂为原料直接无菌分装的粉末，稳定性差，长期放置有关物质明显增大，复溶不好，生物利用度低。
【发明内容】
本发明的目的旨在提供一种包裹率高、毒副作用小的头孢唑肟钠脂质体冻干制剂。面对现有技术所制备的本品种，生物利用度低，复溶性较差，用药安全性得不到保障，本发明人提出设想，利用脂质体基质对主药进行包裹，提高药物稳定性。通过参阅文献资料和大量的试验总结改进，实现了本发明。
本发明的技术方案如下：
本发明提供一种头孢唑肟钠脂质体冻干制剂，包含以下的组分：头孢唑肟钠、缓冲盐体系、脂质体基质、冻干赋形剂、抗氧化剂，其特征在于其中所述的缓冲盐体系是由磷酸二氢钠和磷酸氢二钠组成，所述的脂质体基质为磷脂和胆固醇的混合物。
本发明上述所述的头孢唑肟钠脂质体冻干制剂，其特征在于所述的缓冲盐体系是含有1～10％(mg/ml)磷酸二氢钠和5～30％(mg/ml)的磷酸氢二钠的磷酸盐溶液，缓冲盐体系的pH值为6.5～8.0；作为优选，上述所述的缓冲盐体系是含有5％(mg/ml)磷酸二氢钠和15％(mg/ml)的磷酸氢二钠的磷酸盐溶液，缓冲盐体系的pH值为6.5～8.0。
优选地，本发明上述所述的头孢唑肟钠脂质体冻干制剂，其特征在于所述的脂质体基质为磷脂∶胆固醇质量比为1～3∶2的混合物；更优选地，上述所述的脂质体基质为磷脂∶胆固醇质量比为1∶1的混合物。
优选地，上述所述的头孢唑肟钠脂质体冻干制剂，其特征在于所述的磷脂为蛋黄卵磷脂和/或大豆卵磷脂。
优选地，上述所述的头孢唑肟钠脂质体冻干制剂，其特征在于所述的冻干赋形剂可以选自甘露醇、海藻糖、山梨醇、甘氨酸、氯化钠、D-葡萄糖、乳糖中的一种或两种以上，最优选地，所述的冻干赋形剂选自甘露醇、氯化钠、乳糖。
优选地，上述所述的头孢唑肟钠脂质体冻干制剂，其特征在于所述的抗氧化剂可以选自硫脲、维生素E、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、二丁基羟基甲苯中的一种或两种以上，最优选地，所述的抗氧化剂选自硫脲或维生素E。
作为本发明优选方案，上述所述的头孢唑肟钠脂质体冻干制剂，其特征在于按重量份计算，头孢唑肟钠10份、脂质体基质18～92份、冻干赋形剂8～36份、抗氧化剂3～14份。
作为本发明另一发明目的，还提供了上述所述的头孢唑肟钠脂质体冻干制剂的制备方法，其包括如下步骤：
1)把磷酸二氢钠和磷酸氢二钠溶解在注射用水中，配成磷酸盐缓冲液，用pH值调节剂调节pH值为6.5～8.0；
2)把磷脂和胆固醇在有机溶剂中熔融，加入pH值为6.5～8.0的磷酸盐缓冲液，搅拌混合均匀，待有机溶剂挥发完全，转移至组织捣碎器中高速搅拌10～30min，过滤，灭菌；
3)向步骤2)所得物料中加入头孢唑肟钠、冻干赋形剂和抗氧化剂后进行乳匀研磨，过滤，灌装于西林瓶中，进行冻干，获得了头孢唑肟钠脂质体冻干制剂成品。
其中，上述所述的制备方法，所述的有机溶剂选自乙醚或异丙醇。
作为优选，上述所述的制备方法，其中所述的pH值调节剂可以选自氢氧化钠、氢氧化钾、盐酸、磷酸、碳酸钠、碳酸氢钠、枸橼酸、枸橼酸钠、乙二胺、二乙胺、乙醇胺、三乙醇胺、三醇胺，优选地，所述的pH值调节剂为氢氧化钠或磷酸。
本发明在研究过程中，令人意外地发现，选用磷酸盐缓冲液体系，所制备得到的脂质体，在成形和包裹率上具有很好的效果，而其他缓冲盐溶液，如枸橼盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液，但是脂质体的成形和包裹率明显不如磷酸盐。
对本发明所制备的脂质体在电镜下进行观察，发现颗粒均匀，呈现出圆形或椭圆形。对包封率进行考察，得出包封率较高，达到了92.3％，对残余有机溶剂考察，结果符合中国药典规定。
对本发明所制备的头孢唑肟钠脂质体冻干制剂进行影响因素、加速试验、长期试验考察，均无明显变化。
对本发明所制备的头孢唑肟钠脂质体制剂进行急性毒理、热源、不溶性微粒进行检测，各项检查指标符合药典要求，证明了本品的安全性。
通过与现有技术和现有技术所制备的本类产品进行比较，可以得知本发明具有以下优点：
1本发明所涉及的原辅料常见易得、价格廉价，制备工艺过程操作简单、切实可行。
2本发明所制备头孢唑肟钠脂质体制剂，包裹率高，具有一定的靶向性，释放速度理想。
3本发明所制备头孢唑肟钠脂质体制剂，稳定性较好，提高了用药安全性。
4本发明所制备的头孢唑肟钠脂质体制剂，生物利用度高复溶性好，更利用在临床上的使用。
【具体实施方式】
实施例一头孢唑肟钠脂质体冻干制剂的制备
处方(规格0.05g)
头孢唑肟钠 5g
大豆卵磷脂 23g
胆固醇 23g
磷酸二氢钠 5g
磷酸氢二钠 15g
山梨醇 18g
维生素E 7g
乙醚 200ml
制备工艺：
A把5g磷酸二氢钠和15g磷酸氢二钠溶解在100ml注射用水中，配成磷酸盐缓冲液，用0.1mol/L的氢氧化钠溶液和1％磷酸溶液调节pH值为7.0；
B把23g的大豆卵磷脂和23g地胆固醇在200ml的乙醚中70℃熔融，加入pH值为7.0的磷酸盐缓冲液，搅拌混合均匀，待有机溶剂挥发完全，转移至组织捣碎器中高速搅拌10～30min，过滤，灭菌；
C在该溶液中加入5g头孢唑肟钠、18g山梨醇、7g维生素E在乳匀机内充分进行乳匀研磨，灌装于西林瓶中，过滤，进行冻干，获得了头孢唑肟钠脂质体制剂成品。
实施例二头孢唑肟钠脂质体冻干制剂的制备
处方(规格0.1g)
头孢唑肟钠 10g
蛋黄卵磷脂 27g
胆固醇 27g
磷酸二氢钠 15g
磷酸氢二钠 45g
氯化钠 32g
亚硫酸钠 9g
异丙醇 400ml
制备工艺：
A把15g磷酸二氢钠和45g磷酸氢二钠溶解在300ml注射用水中，配成磷酸盐缓冲液，用0.1mol/L的氢氧化钠溶液和1％磷酸溶液调节pH为6.5；
B把27g的蛋黄卵磷脂和27g的胆固醇在400ml的异丙醇中70℃熔融，加入pH值为6.5的磷酸盐缓冲液，搅拌混合均匀，待有机溶剂挥发完全，转移至组织捣碎器中高速搅拌10～30min，过滤，灭菌；
C在该溶液中加入10g头孢唑肟钠、32g氯化钠、9g 硫酸钠后转移至乳匀机内进行乳匀研磨，灌装与西林瓶中，过滤，进行冻干，获得了头孢唑肟钠脂质体制剂成品。
实施例三头孢唑肟钠脂质体冻干制剂的制备
处方(规格0.2g)
头孢唑肟钠 20g
大豆卵磷脂 18g
胆固醇 18g
磷酸二氢钠 5g
磷酸氢二钠 15g
甘露醇 16g
硫脲 6g
乙醚 200ml
制备工艺：
A把5g磷酸二氢钠和15g磷酸氢二钠溶解在100ml注射用水中，配成磷酸盐缓冲液，用0.1mol/L的氢氧化钠溶液和1％磷酸溶液调节pH为7.8；
B把18g的大豆卵磷脂和18g的胆固醇在200ml的乙醚中70℃熔融，加入pH值为7.8的磷酸盐缓冲液，搅拌混合均匀，待有机溶剂挥发完全，转移至组织捣碎器中高速搅拌10～30min，过滤，灭菌；
C在该溶液中加入20g头孢唑肟钠、16g甘露醇、6g硫脲后转移至乳匀机内充分乳匀研磨，灌装与西林瓶中，过滤，进行冻干，获得了头孢唑肟钠脂质体制剂成品。
试验例一头孢唑肟钠脂质体冻干制剂的质量考察
参照中国药典(2005版)附录对上述实施例中所制备的本品和上市样品(重庆市庆余堂制药有限公司生产，批号20080301)进行影响因素、加速试验和长期稳定性考察，针对性状、酸碱度、澄明度、含量、有关物质项目检验并统计结果。
表1影响因素结果
表2加速试验结果
表3长期试验结果
从以上试验结果可以看出，本发明实施例制备的头孢唑肟钠脂质体冻干制剂各考察项均无明显变化；上市样品在加速6月和长期18月试验后，碱度下降明显、含量降低、有关物质增大很多、澄明度不符合规定。说明了本发明中脂质体对头孢唑肟钠的包裹起到了保护作用，稳定了自身的性质，保障了制剂的质量合格和用药安全。
试验例二头孢唑肟钠脂质体的考察
处方(规格0.05g)
头孢唑肟钠 5g
大豆卵磷脂 23g
胆固醇 23g
磷酸二氢钠 5g
磷酸氢二钠 15g
山梨醇 18g
维生素E 7g
乙醚 200ml
制备工艺：
A把5g磷酸二氢钠和15g磷酸氢二钠溶解在100ml注射用水中，配成磷酸盐缓冲液，用0.1mol/L的氢氧化钠溶液和1％磷酸溶液调节pH值为7.0；
B把23g的大豆卵磷脂和23g的胆固醇在200ml的乙醚中70℃熔融，加入pH值为7.0的磷酸盐缓冲液，搅拌混合均匀，待有机溶剂挥发完全，转移至组织捣碎器中高速搅拌10～30min，过滤，灭菌；
C在该溶液中加5g头孢唑肟钠、18g山梨醇、7g维生素E在乳匀机内充分进行乳匀研磨，灌装于西林瓶中，过滤，进行冻干，获得了头孢唑肟钠脂质体制剂成品。
对比例头孢唑肟钠脂质体的考察
处方(规格0.05g)
头孢唑肟钠 5g
卵磷脂 23g
胆固醇 7g
枸橼酸 8g
枸橼酸钠 15g
山梨醇 18g
维生素E 7g
乙醚 200ml
制备工艺：
A把15g枸橼酸钠和8g枸橼酸钠溶解在100ml注射用水中，配成枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液，用0.1mol/L的氢氧化钠溶液和10％枸橼酸溶液调节pH值为pH值为7.0；
B把23g的卵磷脂和7g的胆固醇在200ml的乙醚中70℃熔融，加入pH值为7.0的枸橼酸盐缓冲液，搅拌混合均匀，待有机溶剂挥发完全，转移至组织捣碎器中高速搅拌10～30min，过滤，灭菌；
C在该溶液中加入5g头孢唑肟钠、18g山梨醇、7g维生素E在乳匀机内充分进行乳匀研磨，灌装于西林瓶中，过滤，进行冻干，获得了头孢唑肟钠脂质体制剂成品。
将上面试验例二和对比例中所制备的脂质体制剂分别取0.4g溶解在500ml5％的葡萄糖溶液中，获得了0.8mg/ml的混悬溶液，对脂质体的粒径和包封率进行考察，考察结果如下：
试验例中所制备的脂质体制剂，性状规则多呈圆形或椭圆性，平均粒径为94nm，包封率达到92％，在12小时后放在显微镜下观察，无结晶析出。
对比例中所制备的脂质体制剂，在电镜下观察，性状无规则，排列杂乱无章，包封率为55％，在12小时后放在显微镜下观察，有结晶物质析出。
本试验说明了本发明所优选出的缓冲液和脂质体基质比例所制备的脂质体包封率高，脂质体比较稳定。