含有烟酸、他汀类化合物和噻唑烷二酮类化合物的药物组合物.pdf

本发明涉及一种含有烟酸、HMG-CoA还原酶抑制剂、噻唑烷二酮类药物和药剂学可接受的载体的药物组合物，以及该组合物在制备用于预防或治疗糖尿病、预防或治疗糖尿病并发症的药物中的用途。本发明提供的药物组合物制成的药物，用于预防或治疗糖尿病、预防或治疗糖尿病并发症且优于单药，更方便患者服用。

1.  一种药物组合物，含有：
1)烟酸；
2)HMG-CoA还原酶抑制剂；
3)噻唑烷二酮类药物；及
4)可药用载体。

2.  如权利要求1中所述的药物组合物，其特征在于：所述的HMG-CoA还原酶抑制剂包含辛伐他汀、普伐他汀钠、氟伐他汀、洛伐他汀、阿托伐他汀钙、美伐他汀、罗苏伐他汀和匹伐他汀。

3.  权利要求2中所述的药物组合物，其特征在于：所述辛伐他汀含量为1mg-15mg、普伐他汀钠含量为2mg-10mg、氟伐他汀含量为2mg-20mg、洛伐他汀含量为3mg-20mg、阿托伐他汀钙含量为2mg-20mg、美伐他汀含量为10mg-40mg、罗苏伐他汀含量为1mg-10mg、匹伐他汀含量为0.5mg-4mg

4.  如权利要求1中所述的药物组合物，其特征在于：所述的噻唑烷二酮类药物包括：罗格列酮、吡格列酮。

5.  如权利要求4中所述的药物组合物，其特征在于：所述的罗格列酮含量为4mg-8mg、吡格列酮含量为15mg-45mg。

6.  如权利要求1中所述的药物组合物，其特征在于：所述的烟酸含量为25mg-1000mg。

7.  权利要求1至6中任一项所述的药物组合物制成普通片剂、双层片剂、多层片剂、缓释片剂、单室控释片剂、双室控释片剂、微孔型控释片剂、舌下含片、口腔速崩片、分散片、肠溶片、颗粒剂、丸剂、肠溶胶囊、延迟释放片、定时/位释放片、普通胶囊、缓释胶囊、控释胶囊、含有微丸或小片的胶囊、含有微丸或小片的pH依赖型胶囊、口服液、膜剂或贴剂。

8.  权利要求1至7中任一项所述的药物组合物在制备预防或治疗糖尿病的药物中的用途。

9.  权利要求1至7中任一项所述的药物组合物在制备预防或治疗糖尿病并发症的药物中的用途。

含有烟酸、他汀类化合物和噻唑烷二酮类化合物的药物组合物
技术领域
本发明涉及一种含有药用剂量的烟酸、他汀类化合物、噻唑烷二酮类化合物和可药用载体的药物组合物，以及该药物组合物用于预防或治疗糖尿病、预防或治疗糖尿病并发症的药物中的用途。本发明属于药学领域。
背景技术
糖尿病(diabetes mellitus，DM)是由多种病因引起的代谢紊乱，其特点是慢性高血糖，伴有胰岛素分泌不足和/或作用障碍，导致碳水化合物、脂肪、蛋白质代谢紊乱，造成多种器官的慢性损伤、功能障碍衰竭。随着糖尿病的发展，在年龄、糖尿病病程、血糖控制质量、饮食控制、血压水平、吸烟以及遗传易感性等多种因素的影响下，糖尿病患者易形成各种血管并发症，包括大血管并发症和微血管并发症。糖尿病并发症是糖尿病及糖尿病状态而发生的涉及全身的急性或慢性病变，是由于糖尿病及糖尿病属血糖状态而继发的急性或慢性疾病以及临床症状，糖尿病并发症是左右患者预后的主要因素。
烟酸也称作维生素B3，或维生素PP，是一种水溶性维生素，属于维生素B族。烟酸在人体内转化为烟酰胺，再与核糖腺嘌呤等组成烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(辅酶I)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(辅酶II)，为脂质氨基酸、蛋白、嘌呤代谢，组织呼吸的氧化作用和糖原分解所必需。
他汀类药物(statins)是羟甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂，为常用的调解血脂的药物。此类药物通过竞争性抑制内源性胆固醇合成限速酶(HMG-CoA)还原酶，阻断细胞内羟甲戊酸代谢途径，使细胞内胆固醇合成减少，从而反馈性刺激细胞膜表面(主要为肝细胞)低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)受体数量和活性增加、使血清胆固醇清除增加、水平降低。他汀类药物分为天然化合物(如洛伐他丁、辛伐他汀、普伐他汀、美伐他汀)和完全人工合成化合物(如氟伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、罗伐他汀、匹伐他汀)。
噻唑烷二酮类(TZDs)是治疗II型糖尿病的药物。特点是能明显增强机体组织对胰岛素的敏感性，改善胰岛β细胞功能。该类药物与体内受体结合后激活，从而改善II型糖尿病患者的胰岛素抵抗、高胰岛素血症和高糖血症代谢紊乱。最先开发成功的噻唑烷二酮类药物是环格列酮、恩格列酮和曲格列酮。目前临床使用的有吡格列酮和马来酸罗格列酮。
发明内容
本发明的目的就在于提供一种药物组合物，以及该药物组合物在在制备用于预防或治疗糖尿病、预防或治疗糖尿病并发症的药物中的用途。
本发明提供的一种药物组合物，包括：
(1)烟酸；
(2)HMG-CoA还原酶抑制剂；
(3)噻唑烷二酮类药物；
(4)药剂学上可接受的载体。
根据本发明，所述HMG-CoA还原酶抑制剂包括辛伐他汀(Simvastatin)、普伐他汀(Pravastatin)、氟伐他汀(Fluvastatin)、洛伐他汀(Lovastatin)、阿托伐他汀(Atovastatin)、美伐他汀(Mevastatin)、罗苏伐他汀(Rosuvastatin)和匹伐他汀(Pitavastatin)等。上述药物的盐类、酯类、药用前体或活性代谢产物等也在本发明公开的范围内。
根据本发明，所述噻唑烷二酮类药物包括罗格列酮(Rosiglitazone)、吡格列酮(Pioglitazone)。罗格列酮、吡格列酮的盐类、酯类、药用前体或活性代谢产物等也在本发明公开的范围内。
根据本发明，烟酸的含量为25mg-1000mg。
根据本发明，HMG-CoA还原酶抑制剂及其可药用盐中，辛伐他汀含量为1mg-15mg、普伐他汀钠含量为2mg-10mg、氟伐他汀含量为2mg-20mg、洛伐他汀含量为3mg-20mg、阿托伐他汀钙含量为2mg-20mg、美伐他汀含量为10mg-40mg、罗苏伐他汀含量为1mg-10mg、匹伐他汀含量为0.5mg-4mg。
根据本发明，噻唑烷二酮类药物中，罗格列酮含量为4mg-8mg、吡格列酮含量为15mg-45mg。
作为本发明的一种组合形式，本发明提供的药物组合物由烟酸、辛伐他汀和罗格列酮作为活性成分。其中，烟酸的含量为25mg-1000mg；辛伐他汀含量为1mg-15mg；罗格列酮含量为4mg-8mg。
作为本发明的一种组合形式，本发明提供的药物组合物由烟酸、普伐他汀钠和罗格列酮作为活性成分。其中，烟酸的含量为25mg-1000mg；普伐他汀钠含量为2mg-10mg；罗格列酮含量为4mg-8mg。
作为本发明的一种组合形式，本发明提供的药物组合物由烟酸、氟伐他汀和罗格列酮作为活性成分。其中，烟酸的含量为25mg-1000mg；氟伐他汀含量为2mg-20mg；罗格列酮含量为4mg-8mg。
作为本发明的一种组合形式，本发明提供的药物组合物由烟酸、洛伐他汀和罗格列酮作为活性成分。其中，烟酸的含量为25mg-1000mg；洛伐他汀含量为3mg-20mg；罗格列酮含量为4mg-8mg。
作为本发明的一种组合形式，本发明提供的药物组合物由烟酸、阿托伐他汀钙和罗格列酮作为活性成分。其中，烟酸的含量为25mg-1000mg；阿托伐他汀钙含量为2mg-20mg；罗格列酮含量为4mg-8mg。
作为本发明的一种组合形式，本发明提供的药物组合物由烟酸、美伐他汀和罗格列酮作为活性成分。其中，烟酸的含量为25mg-1000mg；美伐他汀含量为10mg-40mg；罗格列酮含量为4mg-8mg。
作为本发明的一种组合形式，本发明提供的药物组合物由烟酸、罗苏伐他汀和罗格列酮作为活性成分。其中，烟酸的含量为25mg-1000mg罗苏伐他汀含量为1mg-10mg；罗格列酮含量为4mg-8mg。
作为本发明的一种组合形式，本发明提供的药物组合物由烟酸、匹伐他汀和罗格列酮作为活性成分。其中，烟酸的含量为25mg-1000mg；匹伐他汀含量为0.5mg-4mg；罗格列酮含量为4mg-8mg。
作为本发明的一种组合形式，本发明提供的药物组合物由烟酸、辛伐他汀和吡格列酮作为活性成分。其中，烟酸的含量为25mg-1000mg；辛伐他汀含量为1mg-15mg；吡格列酮含量为15mg-45mg。
作为本发明的一种组合形式，本发明提供的药物组合物由烟酸、普伐他汀钠和吡格列酮作为活性成分。其中，烟酸的含量为25mg-1000mg；普伐他汀钠含量为2mg-10mg；吡格列酮含量为15mg-45mg。
作为本发明的一种组合形式，本发明提供的药物组合物由烟酸、氟伐他汀和吡格列酮作为活性成分。其中，烟酸的含量为25mg-1000mg；氟伐他汀含量为2mg-20mg；吡格列酮含量为15mg-45mg。
作为本发明的一种组合形式，本发明提供的药物组合物由烟酸、洛伐他汀和吡格列酮作为活性成分。其中，烟酸的含量为25mg-1000mg；洛伐他汀含量为3mg-20mg；吡格列酮含量为15mg-45mg。
作为本发明的一种组合形式，本发明提供的药物组合物由烟酸、阿托伐他汀钙和吡格列酮作为活性成分。其中，烟酸的含量为25mg-1000mg；阿托伐他汀钙含量为2mg-20mg；吡格列酮含量为15mg-45mg。
作为本发明的一种组合形式，本发明提供的药物组合物由烟酸、美伐他汀和吡格列酮作为活性成分。其中，烟酸的含量为25mg-1000mg；美伐他汀含量为10mg-40mg；吡格列酮含量为15mg-45mg。
作为本发明的一种组合形式，本发明提供的药物组合物由烟酸、罗苏伐他汀和吡格列酮作为活性成分。其中，烟酸的含量为25mg-1000mg；罗苏伐他汀含量为1mg-10mg；吡格列酮含量为15mg-45mg。
作为本发明的一种组合形式，本发明提供的药物组合物由烟酸、匹伐他汀和吡格列酮作为活性成分。其中，烟酸的含量为25mg-1000mg；匹伐他汀含量为0.5mg-4mg；吡格列酮含量为15mg-45mg。
术语“药用剂量”是指为达到有效治疗、预防或延缓疾病的目的，临床医生根据患病个体病情严重程度对患病个体施与药物的剂量。应当理解本发明提供的药物药用剂量不是对本发明的限制，而是对本发明的优选。通常情况下，在该剂量优选范围内，该药物能够对患者所患疾病产生有效的治疗、预防或延缓效果。患病个体是指患有疾病的独立存在的生命体，在本发明中，生命体尤指人类。应当理解，现有技术中，人类药用剂量或药用剂量范围可与哺乳动物，如大鼠、小鼠等，进行换算以得出适合相应动物适用的药用剂量或剂量范围。
根据本发明，药物组合物中的活性成分是组合物中的基本组分，其中一个活性成分来自于烟酸，第二个活性成分来自HMG-CoA还原酶抑制剂或其可药用盐中的一种，第三个活性成分来自噻唑烷二酮类药物或其药用盐中的一种。
该药物组合物的剂型包括但不限于普通片剂、双层片剂、多层片剂、缓释片剂、单室控释片剂、双室控释片剂、微孔型控释片剂、舌下含片、口腔速崩片、分散片、肠溶片、颗粒剂、丸剂、肠溶胶囊、延迟释放片、定时/位释放片、普通胶囊、缓释胶囊、控释胶囊、含有微丸或小片的胶囊、含有微丸或小片的pH依赖型胶囊、口服液、膜剂或贴剂，应该特别指出的是，将含有烟酸、HMG-CoA还原酶抑制剂和噻唑烷二酮类药物组合物制成片剂或胶囊。
该药物组合物中还含有药剂学可接受的载体，可制成普通口服制剂，包括普通片剂、普通胶囊、颗粒剂等，制成片剂时所述药剂学可接受的载体包括有助于将活性化合物配制成药用制剂的赋形剂和辅料，如淀粉、蔗糖、糊精、微晶纤维素、无机盐类、乳糖、氯化钠、柠檬酸和亚硫酸钠等的一种或几种物质的组合物，属于本领域常识。
该组合物中还含有药剂学可接受的载体，可制成舌下含片、口腔速崩片或分散片等；包括赋形剂和辅料等。所述的赋形剂和辅料有甘露醇、山梨醇、麦芽糖醇、低取代羟丙基甲基纤维素、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联羧甲纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、处理琼脂、环糊精、甘草酸、甜菊苷、柠檬酸、薄荷油、桉叶油、丁香油、柠檬油、桔子油以及其它一些用微囊包裹的矫味剂等。
该药物组合物中还含有药剂学可接受的载体，可制成缓释胶囊、控释胶囊，含有微丸或小片的胶囊，含有微丸或小片的pH依赖型胶囊等，包括赋形剂和辅料，所述的赋形剂和辅料有淀粉、微晶纤维素、无机盐类、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、聚丙烯酸树脂类、聚羧乙烯类、海藻酸的可溶性/不溶性盐类、十八醇、十八酸、氯化钠、半胱氨酸、柠檬酸和亚硫酸钠等的一种或几种物质的组合物，包衣材料包括：虫胶、醋酸纤维素酞酸酯、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、丙烯酸树脂类(如Eudragit L和S型等)、聚醋酸乙烯苯二甲酸酯、邻苯二甲酸羟丙甲纤维素酯、琥珀酸醋酸羟丙甲基纤维素、聚醋酸乙烯苯二甲酸酯、以及增塑剂(如邻苯二甲酸二乙酯、聚乙二醇、丙二醇、甘油三乙酸酯、邻苯二甲酸二甲酯、癸二酸二丁酯、柠檬酸三乙酯、柠檬酸三丁酯、乙酰基柠檬酸三乙酯、蓖麻油和各种百分比的乙酰化单酸甘油酯等)与致孔剂(如PEG6000)等多种药剂学辅料。
该药物组合物中还含有药剂学可接受的载体，可制成颗粒剂、口服液、膜剂、贴剂等剂型。
本发明提供的药物组合物中的化合物在相同的制剂中可以同时施与患病个体，也可分别地相继施与患病个体。若是相继施与患病个体，则第二个(或附加的)、第三个活性成分施与的延迟不应当导致活性成分联合带来的有益效果的损失。若是同时施与患病个体，组合物中的化合物可以混合存在于同一个药物制剂形式中，也可以以同样的制剂形式分别独立存在。若是以同样的制剂形式分别独立存在，则药物组合物可以变通的以“组合药盒”，形式存在。“组合药盒”是一种盒状容器，内置一种或多种剂量形式的药物组合，及其使用说明书。在本发明中优选所述的烟酸、所述的HMG-CoA还原酶抑制剂或其可药用盐中的一种和所述的噻唑烷二酮类药物或其可药用盐中的一种组成的复方片剂。
本发明提供的药物组合物中的化合物在不相同的制剂中可以同时施与患病个体，也可分别地相继施与患病个体。若是相继施与患病个体，则第二个(或附加的)、第三个活性成分施与的延迟不应当导致活性成分联合带来有益效果的损失。若是同时施与患病个体，组合物中的化合物以不同的制剂形式独立存在，药物组合物也可以变通的以“组合药盒，，形式存在。“组合药盒”是一种盒状容器，内置一种或多种剂量形式的药物组合，及其使用说明书。
本发明的另一个目的是提供含有烟酸、HMG-CoA还原酶抑制剂、药用剂量的噻唑烷二酮类药物和可药用载体的药物组合物在制备用于预防或治疗糖尿病、预防或治疗糖尿病并发症的药物中的用途。其中，HMG-CoA还原酶抑制剂选自辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、阿托伐他汀、美伐他汀、罗苏伐他汀和匹伐他汀及其可药用盐中的一种，优选阿托伐他汀、辛伐他汀；噻唑烷二酮类药物选自罗格列酮或吡格列酮。
根据本发明，糖尿病并发症是糖尿病及糖尿病状态而发生的涉及全身的急性或慢性病变，它们都是糖尿病在发生发展过程中，整体病变的组成部分，病变可涉及一个脏器、也可涉及多个脏器、多个系统。本发明并发症包括：慢性并发症：大血管改变造成的冠心病、中风、下肢血管病变；微血管病变造成的糖尿病肾病、糖尿病视网膜病、糖尿病心肌病、神经病变、眼部病变、皮肤和其他病变；急性并发症：酮症酸中毒、高渗性非酮症糖尿病昏迷、乳酸酸中毒等。
本发明的优点是：
本发明提供了含有烟酸、HMG-CoA还原酶抑制剂、噻唑烷二酮类药物和可药用载体的药物组合物。烟酸、HMG-CoA还原酶抑制剂和噻唑烷二酮类药物的联合效果并不是各个活性物质的各自作用的简单加和，而是在预防或治疗糖尿病、预防或治疗糖尿病并发症方面具有更加显著的效果。也就是说，烟酸、HMG-CoA还原酶抑制剂和噻唑烷二酮类药物联合给药取得了协同效果。本发明提供的药物组合物在降低血糖的有效治疗效果上，具有明显的预防或治疗糖尿病并发症的有益效果，因此是更适宜的预防或治疗糖尿病、预防或治疗糖尿病并发症药物。
下面结合具体实施方式对本发明做进一步说明，并非对本发明的限定，凡依照本发明内容进行的任何本领域的等同替换，均属于本发明的保护范围。
具体实施方式
以下药物制剂实施例的制剂过程和制剂所用物质或制剂所用物质的用量不限于文字表述，凡含有本发明提供的药物组合物的制剂方法，均属于本发明的保护范围，具体的实验方法可参考药物制剂常用参考书，如《药剂辅料应用与制备》、《药剂学》、《生物药剂学与药物动力学》等。
实施例1：制备复方烟酸辛伐他汀罗格列酮缓释片(1000片量)
处方：
烟酸                         300g
辛伐他汀                     10g
罗格列酮                     4g
微晶纤维素                   10g
羧甲基淀粉钠                 20g
羟丙基纤维素(K15-M)          50g
5％聚维酮K-30(95％乙醇溶液)  适量
硬脂酸镁                     1％
制备方法：
(1)取处方量的烟酸、辛伐他汀和罗格列酮分别过100目筛后按等量递增法混合均匀备用；
(2)将其它辅料分别过100目筛后，于75℃干燥约2h；
(3)取处方量的微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、羟丙基纤维素(K15-M)混匀，然后与混好的原料药按等量递增法混合均匀；
(4)加入5％聚维酮K-3095％乙醇溶液适量制成软材，24目筛制粒，40℃干燥，控制颗粒的含水量为2-3％，20目筛整粒；
(5)将干燥后的颗粒与硬脂酸镁混合均匀，含量测定后压片，铝塑泡罩包装。
实施例2：制备复方烟酸普伐他汀钠罗格列酮缓释片(1000片量)
处方：
烟酸                            300g
普伐他汀钠                      10g
罗格列酮                        4g
微晶纤维素                      10g
羧甲基淀粉钠                    20g
羟丙基纤维素(K15-M)             50g
5％聚维酮K-30(95％乙醇溶液)     适量
硬脂酸镁                        1％
制备方法：同实施例1。
实施例3：制备复方烟酸阿托伐他汀钙罗格列酮片(1000片量)
处方：
烟酸                                    500g
阿托伐他汀钙                            10g
罗格列酮                                4g
微晶纤维素                              10g
羧甲基淀粉钠                            20g
低取代羟丙基纤维素                      20g
5％聚维酮K-30(95％乙醇溶液)             适量
硬脂酸镁                                1％
制备方法：
(1)取处方量的烟酸、阿托伐他汀钙和罗格列酮分别过100筛后按等量递增法混合均匀备用；
(2)将其它辅料分别过100目筛后，于75℃干燥约2h；
(3)取处方量的微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素混匀，然后与混好的原料药按等量递增法混合均匀；
(4)加入5％聚维酮K-3095％乙醇溶液适量制成软材，24目筛制粒，40℃干燥，控制颗粒的含水量为2-3％，20目筛整粒；
(5)将干燥后的颗粒与硬脂酸镁混合均匀，含量测定后压片，铝塑泡罩包装。
实施例4：制备复方烟酸氟伐他汀吡格列酮片(1000片量)
处方：
烟酸                          500g
氟伐他汀                      10g
吡格列酮                      15g
微晶纤维素                    10g
羧甲基淀粉钠                  20g
低取代羟丙基纤维素            20g
5％聚维酮K-30(95％乙醇溶液)   适量
硬脂酸镁            1％
制备方法：同实施例3。
实施例5：制备复方烟酸美伐他汀罗格列酮片(1000片量)
处方：
烟酸                           500g
美伐他汀                       8g
罗格列酮                       8g
微晶纤维素                     10g
羧甲基淀粉钠                   20g
低取代羟丙基纤维素             20g
5％聚维酮K-30(95％乙醇溶液)    适量
硬脂酸镁                       1％
制备方法：同实施例3。
实施例6：制备复方烟酸辛伐他汀吡格列酮胶囊(1000粒量)
处方：
烟酸                           250g
辛伐他汀                       2.5g
吡格列酮                       7.5g
乳糖                           5g
微晶纤维素                     5g
羧甲基淀粉钠                   10g
5％聚维酮K-30(95％乙醇溶液)    适量
硬脂酸镁                       1％
制备方法：
(1)取处方量的烟酸、辛伐他汀和吡格列酮分别过100筛后按等量递增法混合均匀备用；
(2)将其它辅料分别于70℃干燥约2h后，过100目筛；
(3)取处方量的微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、乳糖混匀，然后与混好的原料药按等量递增法混合均匀；
(4)加入5％聚维酮K-3095％乙醇溶液适量制成软材，24目筛制粒，40℃干燥，控制颗粒的含水量为2-3％，20目筛整粒；
(5)将干燥后的颗粒与硬脂酸镁混合均匀，含量测定后装入空心胶囊，铝塑泡罩包装。
实施例7：烟酸阿托伐他汀钙吡格列酮组合物对糖尿病大鼠心肌纤维化及TGF-β₁表达的影响
动物模型制备、分组及给药：90只Wistar雄性大鼠给予普通饲料喂养，10d后尾静脉取血，测定空腹血糖值。选取空腹血糖值小于7.8mmol/L的大鼠87只，随机抽取15只大鼠作为空白对照组。其余大鼠停食24h后，均按0.3g/kg腹腔内注射四氧嘧啶生理盐水溶液1次，恢复正常喂食，继续饲养10d后测定空腹血糖值，从中选取血糖值在11.1～16.8mmol/L之间的糖尿病大鼠60只，随机分成4组，即模型组、烟酸+阿托伐他汀钙组、吡格列酮组、烟酸+阿托伐他汀钙+吡格列酮组，每组15只。空白对照组、模型组大鼠每日按10ml/kg灌服1次生理盐水溶液；烟酸+阿托伐他汀钙组大鼠每日灌服烟酸100mg/kg阿托伐他汀钙10mg/kg 1次；吡格列酮组大鼠每日灌服阿卡波糖100mg/kg 1次；烟酸+阿托伐他汀钙+吡格列酮组每日灌服烟酸100mg/kg、阿托伐他汀钙10mg/kg和阿卡波糖100mg/kg。各组存活大鼠给药8周后断头取血，再次测定血糖值。
检测指标及方法：血糖采用改良的邻甲苯胺法进行测定；心肌胶原(Coll)浓度采用放射免疫法测定；心肌总胶原容积分数(t-CVF)，转化生长因子-β₁(TGF-β₁)免疫组化法测定。统计方法所有数据采用x±s表示，采用单因素方差分析方法，P＜0.05差异有统计学意义。
实验结果
1、大鼠血糖的比较：与空白对照组比较，模型组大鼠血糖试验前后均显著升高，表明造模成功。
表1空白组和模型组的血糖比较