取代的芳基噁唑和它们的应用 本申请涉及新的取代的芳基噁唑衍生物， 它们的制备方法， 它们对于治疗和 / 或 预防疾病的应用和它们对于制备用于治疗和 / 或预防疾病， 优选对于治疗和 / 或预防心血 管病和代谢疾病的药物的应用。
腺苷， 一种嘌呤核苷， 存在于所有的细胞中和通过大量生理学和病理生理学刺激 释放。腺苷作为在腺苷 5′ - 单磷酸酯 (AMP) 和 S- 腺苷高半胱氨酸降解期间的中间体胞内 形成， 但是它可以由细胞释放， 无论在哪种情况下它通过与特定的受体结合作为象荷尔蒙 的物质或者神经递质起作用。
在含氧量正常的条件下， 在细胞间隙中游离的腺苷的浓度是非常低的。 然而， 在局 部缺血或者含氧量低的条件下， 在受影响的脏器中腺苷的细胞外的浓度显著增加。 因此， 已 知， 例如， 腺苷抑制血小板凝聚并且增加对冠状动脉的供血。此外， 它对血压， 对心率， 对神 经递质的释放和对淋巴细胞分化起作用。 在脂肪细胞中， 腺苷能抑制脂解， 因此降低血中游 离脂肪酸和甘油三酯的浓度。
腺苷的这些作用的目的是增加受影响脏器的供氧和 / 或减少这些脏器的代谢作 用以便调整在局部缺血或者含氧量低的条件下脏器的代谢到脏器的供血。
腺苷的作用通过特定的受体调节。迄今为止， 亚型 A1， A2a， A2b 和 A3 是已知的。 根据本发明， “腺苷 - 受体 - 选择性的配体” 是选择性地与一种或者多种腺苷受体的亚型结 合的物质， 因此或者模仿腺苷的作用 ( 腺苷激动剂 ) 或者阻遏它的作用 ( 腺苷拮抗剂 )。
这些腺苷受体的作用通过信使 cAMP 胞内调节。在腺苷与 A2a 或者 A2b 受体结合 的情况下， 胞内 cAMP 通过与结合膜的腺苷酸环化酶的激活增加， 而通过抑制腺苷酸环化酶 腺苷与 A1 或者 A3 受体的结合导致胞内 cAMP 浓度的减少。
在心血管系统中， 腺苷受体的激活的主要的结果是 ： 心动过缓， 通过 A1 受体的心 抗缺血的减弱收缩和保护 (“预适应” )， 通过 A2a 和 A2b 受体的血管的扩张和通过 A2b 受 体成纤维细胞和平滑肌细胞增殖的抑制。
在 A1 激动剂 ( 优选通过 Gi 蛋白偶联 ) 情况下， 观察到胞内 cAMP 浓度的减少 ( 优 选通过毛喉素腺苷酸环化酶的直接预刺激后 )。相应地， A2a 和 A2b 激动剂 ( 优选通过 Gs 蛋 白偶联 ) 导致细胞中 cAMP 浓度的增加和 A2a 和 A2b 拮抗剂导致细胞中 cAMP 浓度的减少。 在 A2 受体情况下， 通过毛喉素腺苷酸环化酶直接预刺激无益。
在人类中， 通过特定的 A1 激动剂 A1 受体的激活导致依赖速率的心率的降低， 对血 压没有任何影响。因此， 选择性的 A1 激动剂可尤其对于治疗心绞痛和心房纤维性颤动适 合。
通过腺苷或者特定的 A2b 激动剂 A2b 受体的激活， 通过血管的扩张， 导致血压的降 低。血压的降低伴随有反射性的心率增加。增加的心率可以通过使用特定的 A1 激动剂激 活 A1 受体降低。
选择性的 A1/A2b 激动剂对血管系统和心率的联合作用因此导致全身血压降低， 没有相关的心率增加。 例如对于治疗人类中的高血压可以使用具有这种药理学性质的双重 A1/A2b 激动剂。
在脂肪细胞中， A1 和 A2b 受体的激活导致脂解的抑制。因此， A1 和 A1/A2b 激动剂 对脂类代谢的选择性或者联合作用导致游离脂肪酸和甘油三酯的降低。这样， 在遭受新陈 代谢的病人中和在糖尿病患者中， 降低的脂质导致较低的胰岛素抵抗力和改善的症状。
上面提到的受体选择性可以通过该物质对细胞系的作用测定， 该细胞系， 用相应 cDNA 稳定转染后， 表达所讨论的受体亚型 [ 参见出版物 M.E.Olah， H.Ren， J.Ostrowski， K.A.Jacobson， G.L.Stiles， “Cloning， expression， and characterization of the unique bovine A1adenosine receptor.Studies on the ligand binding site by site-directedmutagenesis” ， J.Biol.Chem.267(1992)， 10764-10770 页， 其公开在此全部 插入作为参考 ]。
该物质对这种细胞系的作用可以通过生化测定胞内信使 cAMP 监控 [ 看到出 版 物 K.N.Klotz， J.Hessling， J.Hegler， C.Owman， B.Kull， B.B.Fredholm， M.J.Lohse， “Comparative pharmacology of humanadenosine receptor subtypes-characterization of stably transfected receptorsin CHO cells“， Naunyn Schmiedebergs Arch. Pharmacol.357(1998)， 1-9 页， 其公开在此全部插入作为参考 ]。
由现有技术已知的 “腺苷 - 受体 - 特定的” 配体主要是基于天然的腺苷的衍生 物 [S.-A.Poulsen 和 R.J.Quinn， “Adenosine receptors ： Newopportunities for future drugs” ， Bioorganic and Medicinal Chemistry 6(1998)， 619-641 页 ]。然而， 具有这类结 构的腺苷配体中的大多数具有它们的作用不是真正地受体 - 特定的， 它们的活性小于天然 的腺苷的活性或者它们口服后仅仅具有非常弱的活性的缺点。因此， 它们主要仅仅用于实 验目的。
WO 01/25210， WO 02/070484 和 WO 02/070485 公开了作为腺苷受体配体用于治疗 病症的取代的 2- 硫代 - 或者 2- 氧基 -3， 5- 二氰基 -4- 苯基 -6- 氨基吡啶。WO 03/053441 具体描述了作为腺苷 A1 受体的选择性配体的特别取代的 2- 硫代 -3， 5- 二氰基 -4- 苯 基 -6- 氨基吡啶， 和 WO 2006/027142 要求保护作为双重腺苷 A1/A2b 激动剂用于治疗高血 压和其它的心血管病症的取代的苯基氨基噻唑衍生物。然而， 人们发现这些化合物的一些 具有缺点， 这些缺点相对它们的物理化学性质， 例如它们的溶解性和 / 或成配方能力， 或者 相对它们的体内性质， 例如它们的药效动力学性状， 它们的剂量 - 活性关系和 / 或它们的代 谢途径。
此外， WO 01/62233 公开了多种吡啶和嘧啶衍生物和它们作为腺苷受体调质的应 用。在 EP 1 302 463-A1 中要求保护作为依赖钙的钾通道开启工具用于治疗泌尿疾病的取 代的 3， 5- 二氰基吡啶。WO 2004/054505 要求保护作为 MK 2 抑制剂用于治疗 TNFa- 调节的 病症的氨基氰基吡啶衍生物的应用。在 US 2005/0182105 中描述了作为雄激素受体调质的 4- 芳基 - 或者 4- 杂芳基 - 取代的氨基氰基吡啶的应用。
本发明的目的是提供新的化合物， 其作为腺苷 A1 受体的选择性的激动剂或者作 为腺苷 A1 和 A2b 受体的选择性的双重激动剂并且其本身适于治疗和 / 或预防特别是心血 管疾病， 例如高血压， 心绞痛， 心肌梗死， 心力衰竭和心房纤维性颤动， 新陈代谢的综合征， 糖尿病和异常脂肪血症和适于在移植和外科手术期间保护脏器， 和其另外与由现有技术已 知的化合物相比具有改进的治疗性质。
本发明提供了具有下式 (I) 的化合物
其中 A 代表 O 或者 S， R1 代表氢或者 (C1-C4)- 烷基， R2 代表氢或者可以被羟基， (C1-C4)- 烷氧基或者最高被氟三次取代的 (C1-C4)- 烷基 或者
R1 和 R2 彼此连接和连同它们连接的碳原子形成环丙烷或者环丁烷环，
R3 代表氢， 卤素或者 (C1-C4)- 烷基， 4 5
R 和 R 是相同的或者不同的并且彼此独立地代表氢或者可以被相同的或者不 同的选自以下的取代基一 - 或者二取代的 (C1-C6)- 烷基 ： 羟基， (C1-C4)- 烷氧基， 氨基， 一 -(C1-C4)- 烷基氨基， 二 -(C1-C4)- 烷基氨基， 羧基， (C1-C4)- 烷氧基羰基和 4- ～ 7- 元杂 环，
其中提到的杂环包含一个或者两个选自 N， O 和 S 的环杂原子并且对它说来可 以被相同的或者不同的选自以下的取代基一 - 或者二取代 ： (C1-C4)- 烷基， 羟基， 氧代和 (C1-C4)- 烷氧基，
或者
R4 和 R5 连同它们连接的氮原子形成 4- ～ 7- 元杂环， 其包含进一步的选自 N， O 和 S 的环杂原子并且其可以被相同的或者不同的选自以下的取代基一 - 或者二取代 ： (C1-C4)- 烷基， 羟基， 氧代和 (C1-C4)- 烷氧基，
和 (i)
R6 代表 (C6-C10)- 芳基或者具有最高三个选自 N， O 和 S 的环杂原子的 5- ～ 10- 元 杂芳基， 该基团可以在每一种情况下被相同的或者不同的选自以下的取代基一 -- 三取代 ： 卤素， 硝基， 氰基， (C1-C4)- 烷基， 三氟甲基， 羟基， (C1-C4)- 烷氧基， 二氟甲氧基， 三氟甲氧 基， 一 -(C1-C4)- 烷基氨基羰基， (C1-C4)- 烷氧基羰基和羧基，
和
R7 代表氢， 氟， 氯， (C1-C4)- 烷基， 三氟甲基， (C1-C4)- 烷氧基羰基， 羧基或者苯基， 其中
(C1-C4)- 烷基可以被羟基或者 (C1-C4)- 烷氧基取代
和
苯基可以被卤素， 氰基， (C1-C4)- 烷基或者三氟甲基取代，
或者 (ii)
R6 代表氢或者 (C1-C4)- 烷基
和
R7 代表苯基或者具有最高两个选自 N， O 和 S 的环杂原子的 5- 或者 6- 元杂芳基， 该 基团可以在每一种情况下被相同的或者不同的选自以下的取代基一 - 或者二取代 ： 卤素， 氰基， (C1-C4)- 烷基和三氟甲基，
或者它们的盐， 溶剂化物和盐的溶剂化物。
根据本发明的化合物是具有式 (I) 的化合物， 和它们的盐， 溶剂化物和盐的溶剂 化物， 被式 (I) 包括并且在下式中提到的化合物和它们的盐， 溶剂化物和盐的溶剂化物， 和 被式 (I) 包括并且作为实施例实施方案提到的化合物， 和它们的盐， 溶剂化物和盐的溶剂 化物， 只要被式 (I) 包括并且以下提到的化合物还不是盐， 溶剂化物和盐的溶剂化物。
取决于它们的结构， 根据本发明的化合物可以以立体异构的形式 ( 对映异构体， 非对应异构体 ) 存在。因此， 本发明包括对映异构体或者非对应异构体和它们各自的混合 物。可以由这种对映异构体和 / 或非对应异构体的混合物以已知的方式分离立体异构纯的 组分。
如果根据本发明的化合物可以以互变异构形式存在， 则本发明包括所有的互变异 构形式。
为了本发明的目的优选的盐是根据本发明的化合物的生理可接受的盐。 还包括本 身不适于药用， 但是其可以例如用于分离或者提纯根据本发明的化合物的盐。
根据本发明的化合物的生理可接受的盐包括无机酸， 羧酸和磺酸的酸加成盐， 例 如盐酸， 氢溴酸， 硫酸， 磷酸， 甲烷磺酸， 乙烷磺酸， 甲苯磺酸， 苯磺酸， 萘二磺酸， 乙酸， 三氟 乙酸， 丙酸， 乳酸， 酒石酸， 苹果酸， 柠檬酸， 富马酸， 马来酸和苯甲酸的盐。
根据本发明的化合物的生理可接受的盐还包括常规碱的盐， 例如和优选， 碱金属 盐 ( 例如钠盐和钾盐 )， 碱土金属盐 ( 例如钙盐和镁盐 ) 和铵盐， 该铵盐衍生自氨或者具有 1 到 16 个碳原子的有机胺， 例如和优选， 乙胺， 二乙胺， 三乙胺， 乙基二异丙胺， 单乙醇胺， 二 乙醇胺， 三乙醇胺， 二环己胺， 二甲氨基乙醇， 普鲁卡因， 二苄胺， N- 甲基吗啉， 精氨酸， 赖氨 酸， 乙二胺和 N- 甲基哌啶。
为了本发明的目的溶剂化物指根据本发明的化合物的那些形式， 其通过与溶剂分 子配位形成以固态或者液态的形式的配合物。 水合物是其中其中配位与水发生的溶剂化物 的特殊形式。为了本发明的目的， 优选的溶剂化物是水合物。
此外， 本发明还包括根据本发明的化合物的药物前体。术语 “药物前体” 包括本身 可能是生物学活性的或者非活动性的但是它们在身体内停留时间期间转化 ( 例如代谢或 者水解 ) 成根据本发明的化合物的化合物。
为了本发明的目的， 取代基具有以下意思， 除非另外说明 ：
为了本发明的目的， (C1-C6)- 烷基和 (C1-C4)- 烷基是分别具有 1-6 和 1-4 个碳原 子的直链或者支链烷基基团。优选具有 1-4 歌碳原子的直链或者支链烷基基团。例如和优 选地可以提到以下基团 ： 甲基， 乙基， 正 - 丙基， 异丙基， 正 - 丁基， 异丁基， 仲 - 丁基， 叔-丁基， 1- 乙基丙基， 正 - 戊基和正 - 己基。
为了本发明的目的， (C1-C4)- 烷氧基代表具有 1-4 个碳原子的直链或者支链烷氧 基基团。例如和优选地可以提到以下基团 ： 甲氧基， 乙氧基， 正 - 丙氧基， 异丙氧基， 正-丁 氧基和叔 - 丁氧基。
为了本发明的目的， (C1-C4)- 烷氧基羰基代表具有 1-4 碳原子的直链或者支链烷 氧基基团， 其通过羰基连接。例如和优选地可以提到以下基团 ： 甲氧基羰基， 乙氧基羰基， 正 - 丙氧基羰基， 异丙氧基羰基和叔丁氧基羰基。
为了本发明的目的， 一 -(C1-C4)- 烷基氨基代表具有直链或者支链烷基取代基的 氨基， 该取代基具有 1-4 个碳原子。 例如和优选地可以提到以下基团 ： 甲基氨基， 乙基氨基， 正 - 丙基氨基， 异丙基氨基， 正 - 丁基氨基和叔 - 丁基氨基。
为了本发明的目的， 一 -(C1-C4)- 烷基氨基羰基代表通过羰基基团连接并且具有 直链或者支链烷基取代基的氨基， 该取代基具有 1-4 个碳原子。例如和优选地可以提到以 下基团 ： 甲基氨基羰基， 乙基氨基羰基， 正 - 丙基氨基羰基， 异丙基氨基羰基， 正 - 丁基氨基 羰基和叔 - 丁基氨基羰基。
为了本发明的目的， 二 -(C1-C4)- 烷基氨基代表具有两个相同的或者不同的直链 或者支链烷基取代基的氨基， 该取代基在每一种情况下具有 1-4 个碳原子。例如和优选 地可以提到以下基团 ： N， N- 二甲基氨基， N， N- 二乙基氨基， N- 乙基 -N- 甲基氨基， N- 甲 基 -N- 正 - 丙基氨基， N- 异丙基 -N- 正 - 丙基氨基， N， N- 二异丙基氨基， N- 正 - 丁基 -N- 甲 基氨基和 N- 叔 - 丁基 -N- 甲基氨基。 为了本发明的目的， (C6-C10)- 芳基代表具有 6 或者 10 个环碳原子的芳族碳环。优 选的芳基是苯基和萘基。
为了本发明的目的， 4- ～ 7- 元杂环代表具有总共 4-7 个环原子的饱和杂环， 其包 含一个或者两个选自 N， O 和 S 的环杂原子并且其通过环碳原子或者任选地通过环氮原子连 接。优选具有一个或者两个来自 N 和 O 的环杂原子的 4- ～ 6- 元杂环。例如可以提到以下 基团 ： 氮杂环丁烷基， 氧杂环丁烷基， 吡咯烷基， 吡唑烷基， 四氢呋喃基， 哌啶基， 哌嗪基， 四
氢吡喃基， 吗啉基， 硫代吗啉基， 六氢氮杂基和六氢化 1， 4- 二氮杂基。优选氮杂环丁烷基， 吡咯烷基， 四氢呋喃基， 哌啶基， 哌嗪基， 六氢吡喃基和吗啉基。
为了本发明的目的， 氮杂环丁烷子基 (azetidino)， 吡咯烷子基 (pyrrolidino)， 哌啶子基 (piperidino) 或者吗啉代基团分别是氮杂环丁烷环， 吡咯烷环， 哌啶环和吗啉 环， 其通过各自环氮原子连接。
为了本发明的目的， 5- ～ 10- 元杂芳基代表具有总共 5-10 个环原子的一 - 或者 任选地二环的芳族杂环 ( 杂芳基 )， 其包含最高达三个相同的或者不同的来自 N， O和S的 环杂原子并且其通过环碳原子或者任选地通过环氮原子连接。例如可以提到以下基团 ： 呋 喃基， 吡咯基， 噻吩基， 吡唑基， 咪唑基， 噻唑基， 噁唑基， 异噁唑基， 异噻唑基， 三唑基， 噁二 唑基， 噻二唑基， 吡啶基， 嘧啶基， 哒嗪基， 吡嗪基， 三嗪基， 苯并呋喃基， 苯并噻吩基， 苯并 咪唑基， 苯并噁唑基， 苯并噻唑基， 苯并三唑基， 吲哚基， 吲唑基， 喹啉基， 异喹啉基， 萘啶基 (Naphthyridinyl)， 喹唑啉基， 喹喔啉基， 酞嗪基， 吡唑并 [3， 4-b] 吡啶基。优选具有最高达 两个来自 N， O 和 S 的环杂原子的单环 5- 或者 6- 元杂芳基基团， 例如呋喃基， 噻吩基， 噻唑 基， 噁唑基， 异噻唑基， 异噁唑基， 吡唑基， 咪唑基， 吡啶基， 嘧啶基， 哒嗪基， 吡嗪基。为了本发明的目的， 卤素包括氟， 氯， 溴和碘。优选氯或者氟。
当在根据本发明的化合物中的基团被取代时， 基团可以是一或者多取代的， 除非 另外说明。为了本发明的目的， 不止一次出现的所有基团的意思彼此独立。优选被一个， 两 个或者三个相同的或者不同的取代基取代。 非常特别优选被一个或者两个相同的或者不同 的取代基取代。
为了本发明的目的， 优选具有下式 (I) 的化合物， 其中
A 代表 O 或者 S，
R1 代表氢或者甲基，
R2 代表氢， 甲基， 羟基甲基， 甲氧基甲基或者三氟甲基， 3
R 代表氢， 氟或者甲基， 4
R 代 表 氢 或 者 可 以 被 相 同 的 或 者 不 同 的 选 自 羟 基， (C1-C4)- 烷 氧 基， 氨 基， 一 -(C1-C4)- 烷基氨基， 二 -(C1-C4)- 烷基氨基， 羧基和 4- ～ 6- 元杂环的取代基一 - 或者二 取代的 (C1-C4)- 烷基，
其中提到的杂环包含一个或者两个选自 N 和 O 的环杂原子并且对它说来可以被相 同的或者不同的选自甲基， 羟基和甲氧基的取代基一 - 或者二取代， R5 代表氢或者甲基，
或者
R4 和 R5 连同它们连接的氮原子形成 4- ～ 6- 元杂环， 其可以包含进一步的选自 N 和 O 的环杂原子并且其可以被相同的或者不同的选自以下的取代基一 - 或者二取代 ： 甲基， 羟基和甲氧基，
和 (i)
R6 代表苯基， 吡啶基或者噻吩基， 其可以在每一种情况下被相同的或者不同的选 自以下的取代基一 -- 三取代 ： 氟， 氯， 氰基， (C1-C4)- 烷基， 三氟甲基， (C1-C4)- 烷氧基， 三氟 甲氧基， 一 -(C1-C4)- 烷基氨基羰基， (C1-C4)- 烷氧基羰基和羧基，
和
R7 代表氢， (C1-C4)- 烷基， 三氟甲基， (C1-C4)- 烷氧基羰基， 羧基或者可以被氟或者 氯取代的苯基，
或者 (ii)
R6 代表氢，
和
R7 代表可以被相同的或者不同的选自以下的取代基一 - 或者二取代的苯基 ： 氟， 氯， 氰基， 甲基和三氟甲基，
和它们的盐， 溶剂化物和盐的溶剂化物。
在本发明的上下文中， 特别优选具有式 (I) 的化合物， 其中
A 代表 O 或者 S，
R1 代表氢或者甲基，
R2 代表氢， 甲基， 羟基甲基或者三氟甲基， 3
R 代表氢或者氟，
R4 代表氢或者可以被相同的或者不同的选自羟基， 氨基， 甲基氨基， 乙基氨基， 二
甲基氨基和二乙基氨基的取代基一 - 或者二取代的 (C1-C4)- 烷基，
R5 代表氢或者甲基，
或者
R4 和 R5 连同它们连接的氮原子形成氮杂环丁烷子基， 吡咯烷子基或者哌啶子基 环， 其中每个可以被羟基取代， 或者形成吗啉代环， 6
R 代表苯基或者噻吩基， 其在每一种情况下可以被相同的或者不同的选自以下的 取代基一 - 或者二取代 ： 氟， 氯， 甲基， 三氟甲基， 甲氧基和羧基，
和
R7 代表氢， 甲基， 三氟甲基， 甲氧基羰基或者羧基，
和它们的盐， 溶剂化物和盐的溶剂化物。
在各个基团组合或者优选的基团组合中给出的具体的基团定义， 不依赖于各个给 出的基团的组合， 还任意地被其他组合的基团定义替换。
特别优选以上提到的两个或多个优选的范围的组合。
在本发明的上下文中， 以下提到的化合物是特别优选的
2- 氨 基 -6-({[2-(3- 氯 -4- 氟 苯 基 )-1， 3- 噁 唑 -4- 基 ] 甲 基 } 硫 烷 基 )-4-[4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈 ； 2- 氨基 -6-({[2-(3， 4- 二氟苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-[4-(2- 羟 基乙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2- 氨 基 -6-({[2-(4- 氟 -3- 甲 基 苯 基 )-1， 3- 噁 唑 -4- 基 ] 甲 基 } 硫 烷 基 )-4-[4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2- 氨基 -6-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-(4-{[(2S)-2， 3- 二羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2- 氨基 -6-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-(4-{[(2R)-2， 3- 二羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2- 氨 基 -4-(4-{[(2S)-2， 3- 二 羟 基 丙 基 ] 氧 基 } 苯 基 )-6-({[2-(4- 氟 苯 基 )-5- 甲基 -1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2- 氨 基 -6-({[2-(4- 氯 苯 基 )-5- 甲 基 -1， 3- 噁 唑 -4- 基 ] 甲 基 } 硫 烷 基 )-4-(4-{[(2S)-2， 3- 二羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2- 氨 基 -4-(4-{[(2S)-2， 3- 二 羟 基 丙 基 ] 氧 基 } 苯 基 )-6-({[2-(2- 氟 苯 基 )-5- 甲基 -1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2- 氨基 -4-(4-{[(2R)-2， 3- 二羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 )-6-({[2-(4- 甲氧基苯 基 )-5- 甲基 -1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2- 氨 基 -6-({[2-(4- 氯 -3- 甲 基 苯 基 )-1， 3- 噁 唑 -4- 基 ] 甲 基 } 硫 烷 基 )-4-(4-{[(2R)-2， 3- 二羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
4-{4-[({6- 氨 基 -3， 5- 二 氰 基 -4-[4-(2- 羟 基 -2- 甲 基 丙 氧 基 ) 苯 基 ] 吡 啶 -2- 基 } 硫代 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1， 3- 噁唑 -2- 基 } 苯甲酸 ；
2- 氨基 -4-(4-{[(2R)-2， 3- 二羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 )-6-({[2-(4- 氟苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2- 氨基 -6-{[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲氧基 }-4-[4-(2- 羟基乙氧基 )
苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2- 氨基 -6-{[2-(3， 4- 二氟苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲氧基 }-4-[4-(2- 羟基乙 氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-[4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ]-6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-[4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ]-6-[(2- 羟基乙基 ) 氨基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-6-{[(2R)-2， 3- 二羟基 丙基 ] 氨基 }-4-[4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-[4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ]-6-[(3R)-3- 羟基吡咯烷 -1- 基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2-{[2-(4- 氯 苯 基 )-1， 3- 噁 唑 -4- 基 ] 甲 氧 基 }-4-[4-(2- 羟 基 乙 氧 基 ) 苯 基 ]-6-[(2- 羟基乙基 ) 氨基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈
和
2-{[2-(4- 氯 苯 基 )-1， 3- 噁 唑 -4- 基 ] 甲 氧 基 }-6-(3- 羟 基 氮 杂 环 丁 烷 -1- 基 )-4-[4-(2- 羟基乙基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈
和它们的盐， 溶剂化物和盐的溶剂化物。
在本发明的上下文中， 非常特别优选以下提到的化合物
2- 氨基 -6-({[2-(3， 4- 二氟苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-[4-(2- 羟 基乙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2- 氨基 -6-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-(4-{[(2S)-2， 3- 二羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2- 氨基 -6-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-(4-{[(2R)-2， 3- 二羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2- 氨 基 -6-({[2-(4- 氯 苯 基 )-5- 甲 基 -1， 3- 噁 唑 -4- 基 ] 甲 基 } 硫 烷 基 )-4-(4-{[(2S)-2， 3- 二羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2- 氨基 -6-{[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲氧基 }-4-[4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-[4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ]-6-[(2- 羟基乙基 ) 氨基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈 ；
2-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-[4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ]-6-[(3R)-3- 羟基吡咯烷 -1- 基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈
和
2-{[2-(4- 氯 苯 基 )-1， 3- 噁 唑 -4- 基 ] 甲 氧 基 }-6-(3- 羟 基 氮 杂 环 丁 烷 -1- 基 )-4-[4-(2- 羟基乙基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈
和它们的盐， 溶剂化物和盐的溶剂化物。
本发明此外提供了制备具有根据本发明的式 (I) 的化合物的方法， 特征在于具有 下式 (II) 的化合物
其中 A， R1， R2， R3， R4 和 R5 每一个具有以上给出的意思， 和 R8 代表氢或者临时的羟基保护基 在惰性溶剂中在碱存在的情况下与具有下式 (III) 的化合物反应其中 R6 和 R7 具有以上给出的意思和
Q 代 表 合 适 的 离 去 基 团， 优 选 卤 素， 特 别 是 氯， 溴 或 者 碘， 或者代表甲磺酸根 (Mesylat)， 甲苯磺酸根 (Tosylat) 或者三氟甲磺酸根 (Triflat)，
或者， 如果 A 代表 O， 具有下式 (IV) 的化合物
其中 R1， R2， R3， R4， R5 和 R8 每一个具有以上给出的意思 在惰性溶剂中在碱存在的情况下与具有下式 (V) 的化合物反应其中 R6 和 R7 具有以上给出的意思，
然后除去任选存在的保护基并且产生的具有式 (I) 的化合物任选地用适当的 (i) 溶剂和 / 或 (ii) 碱或者酸转化成它们的溶剂化物， 盐和 / 或盐的溶剂化物。
在该方法中， 如果有利或者需要， 任何在具有式 (II) 和 (IV) 的化合物中或者在基 2 4 5 团R， R 和 / 或 R 中任选存在的官能团 - 例如， 特别是氨基， 羟基和羧基 - 还可以以临时保 护的形式存在。这里， 这种保护基的引入和除去通过所属领域技术人员所知的常见方法进 行 [ 参见， 例如 T.W.Greene 和 P.G.M.Wuts， Protective Groups in Organic Synthesis， Wiley， 纽 约， 1999 ； M.Bodanszky 和 A.Bodanszky， The Practice ofPeptide Synthesis， Springer-Verlag， 柏林， 1984]。如果存在多个保护基， 如合适， 除去可以同时在一锅反应 (Eintopf-Reaktion) 中， 或者在单独的反应步骤中进行。
优选的氨基保护基是叔 - 丁氧基羰基 (Boc) 或者苄氧基羰基 (Z)。对保护的羧基 基团适合的特别是相应的甲基， 乙基或者叔 - 丁基酯。对于羟基官能团， 使用的保护基优选 是苄基或者甲硅烷基基团， 例如三甲基甲硅烷基， 叔 - 丁基二甲基甲硅烷基或者二甲基苯 基甲硅烷基。如果存在 1， 2- 或者 1， 3- 二醇基团， 优选使用衍生自对称酮例如丙酮或者环 己酮的缩酮 (1， 3- 二氧戊环或者 1， 3- 二噁烷 ) 作为共同的保护基。
以作例证的方式， 以上描述的方法可以通过以下反应方案 1 和 2 说明 ：
方案 1
方案 2对于该反应 (II)+(III) 合适的溶剂是在反应条件下是惰性的所有有机溶剂。这 些包括酮， 例如丙酮和甲基乙基酮， 无环醚和环醚， 例如乙醚， 甲基叔丁基醚， 1， 2- 二甲氧基 乙烷， 四氢呋喃和二噁烷， 酯， 例如乙酸乙酯或者乙酸丁酯， 碳氢化合物， 例如苯， 甲苯， 二甲 苯， 己烷和环己烷， 氯代烃， 例如二氯甲烷， 三氯甲烷和氯苯， 或者其它的溶剂， 例如二甲基 甲酰胺 (DMF)， 二甲基亚砜 (DMSO)， N- 甲基吡咯烷酮 (NMP)， 乙腈或者吡啶。还可以使用以 上提到的溶剂的混合物。优选使用二甲基甲酰胺。
对于该反应合适的碱是常见的无机或者有机碱。这些优选包括碱金属氢氧化物， 例如氢氧化锂， 氢氧化钠或者氢氧化钾， 碱金属碳酸盐， 例如碳酸锂， 碳酸钠， 碳酸钾或者碳 酸铯， 碱金属碳酸氢盐， 例如碳酸氢钠或者碳酸氢钾， 碱金属醇盐， 例如甲醇钠或者甲醇钾， 乙醇钠或者乙醇钾或者叔丁醇钾， 氨化物， 例如氨基钠， 双 ( 三甲基甲硅烷基 ) 氨基锂， 双 ( 三甲基甲硅烷基 ) 氨基钠或者双 ( 三甲基甲硅烷基 ) 氨基钾或者二异丙基氨基锂， 有机金 属化合物， 例如丁基锂或者苯基锂， 或者有机胺， 例如三乙胺， 二异丙基乙胺， 吡啶， 1， 8- 二 氮杂双环 [5.4.0] 十一碳 -7- 烯 (DBU) 或者 1， 5- 二氮杂双环 [4.3.0] 壬 -5- 烯 (DBN)。优
选碱金属碳酸盐和碱金属碳酸氢盐， 例如碳酸钾和碳酸氢钠。
这里， 碱可以以每摩尔具有式 (II) 的化合物 1-10mol， 优选 1-5mol， 特别地 1-3mol 的量使用。
该反应 (II)+(III) 通常在 -78℃ -+140℃温度范围， 优选在 -20℃ -+100℃， 特别 地在 0℃ -+60℃ ( 对于 A ＝ S) 或者 +20℃ -+100℃ ( 对于 A ＝ O) 范围进行。反应可以在 常压， 升压或者降压 ( 例如在 0.5-5bar) 范围进行。通常， 反应在常压下进行。
对于该反应 (IV)+(V) 合适的惰性的溶剂是无环醚和环醚， 例如乙醚， 甲基叔丁基 醚， 1， 2- 二甲氧基乙烷， 四氢呋喃和二噁烷， 碳氢化合物， 例如苯， 甲苯， 二甲苯， 己烷和环己 烷， 或者偶极溶剂， 例如二甲基甲酰胺 (DMF)， 二甲基亚砜 (DMSO)， N- 甲基吡咯烷酮 (NMP) 和 吡啶。还可以使用这些溶剂的混合物。优选使用 1， 2- 二甲氧基乙烷。
对于该反应合适的碱是特别地碱金属醇盐， 例如甲醇钠或者甲醇钾， 乙醇钠或者 乙醇钾， 或者叔丁醇钠或者叔丁醇钾， 氨化物， 例如氨基钠， 双 ( 三甲基甲硅烷基 ) 氨基锂， 双 ( 三甲基甲硅烷基 ) 氨基钠或者双 ( 三甲基甲硅烷基 ) 氨基钾或者二异丙基氨基锂， 或 者有机金属化合物， 例如丁基锂或者苯基锂。优选使用叔丁醇钾。
这里， 碱通常以每摩尔具有式 (V) 的化合物 1-1.25mol， 优选以等摩尔的量使用。
反应 (IV)+(V) 通常在 -20℃ -+120℃， 优选在 +20℃ -+100℃温度范围进行。反应 可以在常压， 升压或者降压 ( 例如在 0.5-5bar 范围 ) 下进行。通常， 反应在常压下进行。
类似于由文献已知的方法， 可以例如通过具有下式 (VI) 的醛
其中 R1， R2， R3 和 R8 每一个具有以上给出的意思
在 碱 存 在 的 情 况 下 与 二 当 量 的 氰 基 硫 代 乙 酰 胺 反 应 制 备 具 有 式 (II) 的 化 合 物， 其 中 A 表 示 S 和 R4 和 R5 代 表 氢 [ 参 见 方 案 3 ； 参 见 例 如 Dyachenko 等， Russ. J.Chem.33(7)， 1014-1017(1997)， 34(4)， 557-563(1998)Dyachenko 等， Chemistry of Heterocyclic Compounds 34(2)， 188-194(1998) ； Qintela 等， Eur.J.Med.Chem.33， 887-897(1998) ； Kandeel 等， Z.Naturforsch.42b ， 107-111(1987) ； Reddy 等， J.Med. Chem.49， 607-615(2006) ； Evdokimov 等， Org.Lett.8， 899-902(2006)]。
方案 3具有式 (II) 的化合物， 其中 A 代表 S， 还可以由具有式 (IV) 的化合物通过与碱金 属硫化物的反应制备 ： 该制备方法通过以下式的方案说明 ：
方案 4
使用的碱金属硫化物优选是硫化钠， 以每摩尔具有式 (IV) 的化合物 1-10mol， 优 选 1-8mol， 特别地 1-5mol 的量。
对于该方法步骤合适的溶剂是在反应条件下是惰性的所有有机溶剂。这些包括 醇， 例如甲醇， 乙醇， 正 - 丙醇， 异丙醇， 正 - 丁醇和叔 - 丁醇， 酮， 例如丙酮和甲基乙基酮， 无 环醚和环醚， 例如乙醚， 1， 2- 二甲氧基乙烷， 四氢呋喃和二噁烷， 酯， 例如乙酸乙酯或者乙酸 丁酯， 碳氢化合物， 例如苯， 甲苯， 二甲苯， 己烷和环己烷， 氯代烃， 例如二氯甲烷， 1， 2- 二氯 乙烷和氯苯， 或者偶极溶剂， 例如乙腈， 吡啶， 二甲基甲酰胺， 二甲基亚砜， N- 甲基吡咯烷酮。 同样水用作溶剂是合适的。还可以使用以上提到的溶剂的混合物。优选的溶剂是二甲基甲 酰胺。
反 应 通 常 在 0 ℃ -+180 ℃ 温 度 范 围， 优 选 在 +20 ℃ -+120 ℃ 范 围， 特别地在 +40℃ -+100℃下进行。反应可以在常压， 升压或者降压 ( 例如在 0.5-5bar 范围 ) 下进行。 通常， 反应在常压下进行。
具有式 (IV) 的化合物， 其中两个基团 R4 和 R5 中的至少一个不代表氢， 可以通过具 有式 (IVa) 的化合物
其中 R1， R2， R3 和 R8 每一个具有以上给出的意思 最初用氯化铜 (II) 和亚硝酸异戊酯在合适的溶剂中转化成为具有下式 (VII) 的化合物
其中 R1， R2， R3 和 R8 每一个具有以上给出的意思 接着与具有下式 (VIII) 的化合物反应
其中 R4A 具有以上 R4 给出的意思， R5A 具有以上 R5 给出的意思， 但是两个基团中的至少一个不代表氢， 以产生具有下式 (IVb) 的化合物其中 R1， R2， R3， R4A， R5A 和 R8 每一个具有以上给出的意思 ；
任选地， 这些之后可以借助于以上描述的碱金属硫化物转化成相应的具有式 (II) 的化合物， 其中 A 代表 S 和两个基团 R4 和 R5 中的至少一个不代表氢。该方法可以通过以下 反应方案说明 ：
方案 5
[Ph ＝苯基 ]。
方法步骤 (IVa) → (VII) 通常使用每摩尔具有式 (IVa) 的化合物 2-12mol 氯化铜 (II) 和 2-12mol 亚硝酸异戊酯的摩尔比进行。
对于该方法步骤是合适的溶剂在反应条件下是惰性的所有有机溶剂。 这些包括无 环醚和环醚， 例如乙醚和四氢呋喃， 酯， 例如乙酸乙酯和乙酸丁酯， 碳氢化合物， 例如苯， 甲 苯， 二甲苯， 己烷和环己烷， 氯代烃， 例如二氯甲烷， 1， 2- 二氯乙烷和氯苯， 或者其它的溶剂，
例如二甲基甲酰胺， 乙腈或者吡啶。还可以使用这些溶剂的混合物。优选的溶剂是乙腈和 二甲基甲酰胺。
反 应 通 常 在 -78 ℃ -+180 ℃ 温 度 范 围， 优 选 在 +20 ℃ -+100 ℃ 范 围， 特别地在 +20℃ -+60℃下进行。反应可以在常压， 升压或者降压 ( 例如在 0.5-5bar 范围 ) 下进行。 通常， 反应在常压下进行。
方法步骤 (VII)+(VIII) → (IVb) 通常使用每摩尔具有式 (VII) 的化合物 1-8mol 具有式 (VIII) 的化合物的摩尔比进行。
对于该方法步骤合适的溶剂是在反应条件下是惰性的所有有机溶剂。这些包括 醇， 例如甲醇， 乙醇， 正 - 丙醇， 异丙醇， 正 - 丁醇和叔 - 丁醇， 酮， 例如丙酮和甲基乙基酮， 无 环醚和环醚， 例如乙醚， 1， 2- 二甲氧基乙烷， 四氢呋喃和二噁烷， 酯， 例如乙酸乙酯或者乙酸 丁酯， 碳氢化合物， 例如苯， 甲苯， 二甲苯， 己烷和环己烷， 氯代烃， 例如二氯甲烷， 1， 2- 二氯 乙烷和氯苯， 或者其它的溶剂， 例如二甲基甲酰胺， 乙腈， 吡啶或者二甲基亚砜。 水用作溶剂 同样是合适的。还可以使用这些溶剂的混合物。优选的溶剂是二甲基甲酰胺。
反 应 通 常 在 0 ℃ -+180 ℃ 温 度 范 围， 优 选 在 +20 ℃ -+120 ℃ 范 围， 特别地在 +20℃ -+100℃下进行。反应可以在常压， 升压或者降压 ( 例如在 0.5-5bar 范围 ) 下进行。 通常， 反应在常压下进行。 具有式 (IVa) 的化合物可以由具有式 (VI) 的化合物以类似于在文献中描述的方 法制备 [ 参见， 例如 Kambe 等， Synthesis， 531-533(1981) ； Elnagdi 等， Z.Naturforsch.47b， 572-578(1991) ； Reddy 等， J.Med.Chem.49， 607-615(2006) ； Evdokimov 等， Org.Lett.8， 899-902(2006)]。
具有式 (VIII) 的化合物可商购， 或者为所属领域技术人员所知或者可通过常见 方法制备。
任选地， 还可以类似于反应顺序 (IVa) → (VII) → (IVb) 转化具有式 (I) 的化合 4 5 物， 其中 R 和 R 均代表氢， 成为相应化合物， 其中两个基团 R4 和 R5 中的至少一个不代表氢， 其中， 任选地， 其它的官能团的临时保护是有利的。 这方法的变换方式在以下反应方案中说 明：
方案 6
对于该方法路线， 以上对于顺序 (IVa) → (VII) → (IVb) 描述的反应参数， 例如溶 剂， 反应温度和摩尔比以类似的方式使用。
具有式 (II) 的化合物， 其中 A 代表 O， 还可以由具有式 (IV) 的化合物通过与碱金 属氢氧化物加热获得。该制备方法通过以下反应方案说明 ：
方案 7
使用的碱金属氢氧化物优选是过量氢氧化钠或者氢氧化钾。 合适的溶剂是特别地 醇， 例如甲醇， 乙醇， 正 - 丙醇， 异丙醇， 正 - 丁醇和叔 - 丁醇， 和它们与水的混合物。反应通 常在 +20℃ -+120℃温度范围， 优选在 +50℃ -+100℃下进行。
具有式 (III) 的化合物可商购， 由文献已知或者可通过由文献已知的方法制备。
例如通过酰胺与 1， 3- 二卤丙酮反应， 可以获得 2- 取代的噁唑衍生物 ( 参见方案 8) ：
方案 8
根据式 (III)2， 5- 二取代的噁唑衍生物可以以类似于由文献已知的方法制备， 例 如如以作例证的方式在以下反应方案 9 中描述 ：
方案 9
[ 参见， 例如 Y.Goto 等， Chem.Pharm.Bull.1971， 19， 2050-2057]。
根据式 (III) 在 5- 位置取代的噁唑衍生物可以例如通过相应噁唑 -4- 羧酸酯的 还原和随后的卤化获得， 噁唑 -4- 羧酸酯本身可通过 α- 异氰酸基乙酸酯的酰化达到 ( 参 见方案 10) ：
方案 10
[ 参见， 例如 M.Suzuki 等， J.Org.Chem.1973， 38， 3571-3575]。
根据式 (III)2- 芳基噁唑衍生物还可以如同在方案 11 中以作例证的方式所示通 过钯催化的芳基硼酸与 2- 碘噁唑 -4- 羧酸酯的偶联获得 ：
方案 11
[ 参 见， 例 如 E.A.Krasnokutskaya 等， Synthesis 2007， 1， 81-84 ； J.Hassan 等， Chem.Rev.2002， 102， 1359-1469]。
具有式 (VI) 的化合物最后由文献已知或者可以通过常见的方法由相应 4- 羟基苯 甲醛制备 ( 参见方案 12) ：
方案 12
令人惊讶地， 根据本发明的化合物具有不可预见的有用的药理学活性谱和因此特 别适合于预防和 / 或治疗疾病， 特别是心血管疾病。
与由现有技术已知的物质相比， 根据本发明的化合物具有改进的性质概况， 例如 在与制剂相关的水 / 有机溶剂体系中增加的溶解性， 口服后比较久的药效动力学半衰期和 / 或增加的新陈代谢的稳定性。
根据本发明的化合物的药理学活性可以通过它们作为对腺苷 A1 和 / 或 A2b 受体 有效的、 选择性的配体的作用解释。这里， 它们作为选择性的 A1 激动剂或者作为选择性的 双重 A1/A2b 激动剂。
在本发明的上下文中， “对腺苷 A1 和 / 或 A2b 受体的选择性的配体” 是腺苷受体配 体， 其中可以观察到首先对 A1 和 / 或 A2b 腺苷受体亚型显著的活性和其次对 A2a 和 A3 腺 苷受体亚型没有或者有相当弱的活性 ( 以 10 分之一或更多 )， 其中相对于对于活性 / 选择性的试验方法， 涉及在段 B-1 中描述的试验。
取决于它们的各自的结构， 根据本发明的化合物作为完全或者作为部分腺苷受体 激动剂。这里， 部分腺苷受体激动剂定义为对少于通过完全激动剂引起的腺苷受体引起功 能反应的受体配体 ( 例如腺苷本身 )。 因此， 部分激动剂相对于受体激活比完全激动剂具有 较低的活性。
具有下 (I) 的化合物， 单独或者与一种或者多种其它的活性化合物结合， 适于预 防和 / 或治疗多种疾病， 例如特别是高血压和其它的心血管系统的疾病 ( 心血管病 )， 适于 心损伤后的保护心脏和适于代谢失调。
在本发明的上下文中， 心血管系统疾病或者心血管疾病被理解为包括， 除高血压 外， 还有例如以下疾病 ： 外周和心血管疾病， 冠心病， 冠状动脉再狭窄， 例如外周血管气囊扩 张后的再狭窄， 心肌梗死， 急性冠状动脉综合征， 伴随 ST 升高的急性冠状动脉综合征， 没有 ST 升高的急性冠状动脉综合征， 稳定型和不稳定型心绞痛， 心肌机能不全， 普林兹梅塔尔心 绞痛， 持续性缺血功能障碍 (“冬眠心肌” )， 短暂性缺血后功能障碍 (“顿抑心肌” )， 心力衰 竭， 心动过速， 房性心动过速， 心律不齐， 心房和心室纤颤， 持续性心房纤颤， 永久心房纤颤， 伴随正常左心室功能的心房纤颤， 伴随左心室功能损害的心房纤颤， 沃 - 帕 - 杯综合征， 外 周循环减低， 纤维蛋白原和具有低密度的 LDL 的水平上升和血纤蛋白溶酶原激活物抑制剂 1(PAI-1) 浓度上升， 特别是高血压， 冠心病， 急性冠状动脉综合征， 心绞痛， 心力衰竭， 心肌 梗死和心房纤颤。
在本发明的上下文中， 术语心力衰竭包括心力衰竭的急性和慢性表现， 和该疾病 的特定的或者相关的形式， 例如急性失代偿性的心力衰竭， 右侧心力衰竭， 左侧心力衰竭， 完全性衰竭， 缺血性心肌病， 膨胀性心肌病， 先天心脏缺陷， 心脏瓣膜缺陷， 作为心脏瓣膜的 缺陷结果的心力衰竭， 二尖瓣狭窄， 二尖瓣关闭不全， 主动脉瓣狭窄， 主动脉瓣闭锁不全， 三 尖瓣狭窄， 三尖瓣关闭不全， 肺动脉狭窄， 肺动脉瓣闭锁不全， 合并性心脏瓣膜缺陷， 心肌 炎， 慢性心肌炎， 急性心肌炎， 病毒性心肌炎， 糖尿病性心力衰竭， 醇中毒性心肌病， 心贮疾 病和心脏舒张和心脏收缩心力衰竭。
根据本发明的化合物此外还特别适合于降低受梗塞影响的心肌部位， 和适于预防 续发性梗塞。
此外， 根据本发明的化合物特别适合于预防和 / 或治疗血栓栓塞病， 缺血后的再 灌注损伤， 微和大血管损伤 ( 脉管炎 )， 动脉和静脉血栓形成， 水肿， 缺血， 例如心肌梗死， 中风和暂时性缺血发作， 适合于在冠状动脉旁路移植术 (CABG) 期间的保护心脏， 原发性经 皮 - 腔内冠状动脉成形术 (PTCAs)， 血栓溶解后的 PTCAs， 救护 -PTCA， 心脏移植术和直视心 外科手术， 和适于在移植术期间的器官保护， 捷径术， 导管检查和其它的外科手术。
根据本发明的化合物可以使用的进一步的适应症是， 例如预防和 / 或治疗泌尿生 殖系统疾病， 例如在刺激性膀胱， 勃起功能障碍和雌性性功能障碍中， 但是另外还预防和 / 或治疗炎性疾病， 例如哮喘和炎性皮肤病， 预防和 / 或治疗中枢神经系统的疾病和神经变 性疾病 ( 中风， 阿尔茨海默氏病， 帕金森氏病， 痴呆， 癫痫症， 抑郁症， 多发性硬化 )， 预防和 / 或治疗疼痛， 和预防和 / 或治疗肿瘤疾病和与癌症治疗有关的恶心和呕吐。
进一步的适应症是， 例如预防和 / 或治疗呼吸道疾病， 例如哮喘， 慢性 - 阻塞性肺 病 (COPD， 慢性支气管炎 )， 肺气肿， 支气管扩张， 囊性纤维化 ( 囊肿性纤维化 ) 和肺动脉高压， 特别是肺动脉高压。
最后， 根据本发明的化合物还适合于预防和 / 或治疗代谢失调， 例如糖尿病， 特别 是糖尿病 (diabetes mellitis) 的病， 妊娠糖尿病， 胰岛素依赖型糖尿病和非 - 依赖胰岛素 的糖尿病， 糖尿病后遗症， 例如视网膜病， 肾病和神经病， 代谢失调， 例如新陈代谢综合征， 高血糖， 高胰岛素血， 胰岛素抗性， 葡萄糖不耐受和肥胖 ( 肥胖症 )， 和动脉硬化和异常脂肪 血症 ( 高胆固醇血症， 高甘油三酯血症， 饭后血浆甘油三酯浓度升高， 低 α- 脂蛋白血症， 合 并性高脂血症， 特别是糖尿病， 新陈代谢综合征和异常脂肪血症。
本发明此外提供了根据本发明的化合物对于治疗和 / 或预防疾病， 特别是以上提 到的疾病的应用。
本发明还提供了根据本发明的化合物对于制备用于治疗和 / 或预防疾病， 特别是 以上提到的疾病的药物的应用。
本发明还提供了使用有效量的根据至少一种根据本发明的化合物治疗和 / 或预 防疾病， 特别是以上提到的疾病的方法。
根据本发明的化合物可以单独或者， 如果需要， 与其它的活性化合物结合使用。 本 发明此外提供了包含至少一种根据本发明的化合物和一种或者多种进一步的活性化合物， 特别是用于治疗和 / 或预防以上提到的疾病的药物。 用于结合的合适的活性化合物是， 例如和优选 ： 调整脂类代谢的活性化合物， 抗糖 尿病药， 降血压剂， 提高灌注和 / 或抗血栓的药剂， 抗氧化剂， 趋化因子受体拮抗剂， p38- 激 酶抑制剂， NPY 激动剂， 食欲激动剂， 减食欲剂， PAF-AH 抑制剂， 消炎剂 (COX 抑制剂， LTB4- 受 体拮抗剂 ) 和镇痛药， 例如阿斯匹林。
本发明特别地提供了包含至少一种根据本发明的化合物和至少一种调节脂类代 谢的活性化合物， 抗糖尿病药， 降血压活性化合物和 / 或抗血栓剂的结合。
优选地， 根据本发明的化合物可以与一种或者多种以下物质结合
●调节脂类代谢的活性化合物， 例如和优选 HMG-CoA- 还原酶抑制剂， HMG-CoA- 还 原酶表达抑制剂， 角鲨烯合成抑制剂， ACAT 抑制剂， LDL 受体诱导剂， 胆固醇吸收抑制剂， 聚 胆汁酸吸附剂， 胆汁酸再吸收抑制剂， MTP 抑制剂， 脂酶抑制剂， LpL 活化剂， 贝特类， 烟酸， CETP 抑制剂， PPAR-α， PPAR-γ 和 / 或 PPAR-δ 激动剂， RXR 调质， FXR 调质， LXR 调质， 甲 状腺激素类和 / 或甲状腺粉模拟物， ATP 柠檬酸裂解酶抑制剂， Lp(a) 拮抗剂， 大麻素受体 1 拮抗剂， 莱普亭受体激动剂， 铃蟾素受体激动剂， 组胺受体激动剂和抗氧化剂 / 自由基清除 分子 ；
●在 Rote Liste 2004/II， 第 12 章中提到抗糖尿病药， 例如和优选来自以下的那 些： 磺酰尿， 双胍， 美格列奈衍生物， 葡糖苷酶抑制剂， 二肽基 - 肽酶 IV 的抑制剂 (DDP-IV 抑制剂 )， 噁二唑烷酮， 噻唑烷二酮， GLP1 受体激动剂， 胰高血糖素拮抗剂， 胰岛素敏化剂， CCK1 受体激动剂， 莱普亭受体激动剂， 涉及糖质新生和 / 或糖原分解的刺激的肝酶抑制剂， 葡萄糖吸收的调质和钾通道开启工具， 例如在 WO 97/26265 和 WO 99/03861 中公开的那 些；
●降压活性化合物， 例如和优选钙拮抗剂， 血管紧张素 AII 拮抗剂， ACE 抑制剂， 血 管紧张肽原酶抑制剂， β- 受体阻滞剂， α- 受体阻滞剂， 利尿剂， 醛甾酮拮抗剂， 盐皮质素 类受体拮抗剂， ECE 抑制剂和血管肽酶抑制剂 ；
●抗血栓剂， 例如和优选血小板聚集抑制剂或者抗凝血剂 ；
●血管升压素受体拮抗剂 ；
●有机硝酸盐和 NO 供体 ；
●增强收缩力活性的物质 ；
●抑制环鸟苷酸 (cGMP) 和 / 或环腺苷酸 (cAMP) 降解的化合物， 例如磷酸二酯酶 (PDE)1， 2， 3， 4 和 / 或 5 的抑制剂， 特别是 PDE 5 抑制剂， 例如西地那非， 伐地那非和他达拉 非， 和 PDE 3 抑制剂， 例如米力农 ；
●钠尿肽， 例如 “心钠素” (ANP， 阿那立肽 )， “B 型钠尿肽” 或者 “脑钠尿肽” (BNP， 奈西立肽 )， “C 型钠尿肽” (CNP) 和尿舒张肽 ；
●前列环素受体激动剂 (IP 受体 )， 例如伊洛前列素， 贝前列素和西卡前列素 ；
●钙敏化剂， 例如和优选左西孟旦 ；
●钾添加物 ；
●不依赖 NO 和血红素的鸟苷酸环化酶活化剂， 例如， 特别是在 WO 01/19355， WO 01/19776， WO 01/19778， WO 01/19780， WO02/070462 和 WO 02/070510 中描述的化合物 ；
● 不 依 赖 NO， 但 是 依 赖 血 红 素 的 鸟 苷 酸 环 化 酶 激 活 剂， 例 如， 特 别 是 在 WO 00/06568， WO 00/06569， WO 02/42301 和 WO 03/095451 中描述的化合物 ；
●人嗜中性弹性酶 (HNE) 的抑制剂， 例如西维来司他和 DX-890(Reltran) ；
●抑制信号转导串联得化合物， 例如酪氨酸激酶抑制剂， 特别是索拉非尼， 伊马替 尼， 吉非替尼和厄洛替尼 ； 和/或
●缓和心的能量代谢的化合物， 例如乙莫克舍， 二氯乙酸盐， 雷诺嗪和三甲氧苄 嗪。
改 进 脂 类 代 谢 的 活 性 化 合 物 被 理 解 为 意 思 是， 优 选 地， 来自以下的化合物 ： HMG-CoA- 还原酶抑制剂， 角鲨烯合成抑制剂， ACAT 抑制剂， 胆固醇吸收抑制剂， MTP 抑制剂， 脂酶抑制剂， 甲状腺激素类和 / 或甲状腺粉模拟物， 烟酸受体激动剂， CETP 抑制剂， PPAR-α 激动剂， PPAR-γ 激动剂， PPAR-δ 激动剂， 聚胆汁酸吸附剂， 胆汁酸再吸收抑制剂， 抗氧化 剂 / 自由基清除分子和大麻素受体 1 拮抗剂。
在 本 发 明 的 优 选 的 实 施 方 案 中， 根据本发明的化合物与来自抑制素一类的 HMG-CoA- 还原酶抑制剂， 例如和优选洛弗斯特丁， 斯伐他汀， 普伐他汀， 氟伐他汀， 阿托伐他 汀， 罗苏伐他汀， 西立伐他汀或者匹伐他汀结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与角鲨烯合成抑制剂， 例如 和优选 BMS-188494 或者 TAK-475 结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与 ACAT 抑制剂， 例如和优选 阿伐麦布， 亚油甲苄胺， 帕替麦布， 伊鲁麦布或者 SMP-79 结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与胆固醇吸收抑制剂， 例如 和优选依泽麦布， 替奎安或者帕马奎苷结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与 MTP 抑制剂， 例如和优选 英普他派， BMS-201038， R-103757 或者 JTT-130 结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与脂酶抑制剂， 例如和优选 奥利司他结合服用。在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与甲状腺激素类和 / 或甲状 腺粉模拟物， 例如和优选 D- 甲状腺素或者 3， 5， 3′ - 三碘甲腺原氨酸 (T3) 结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与烟酸受体的激动剂， 例如 和优选烟酸， 阿西莫司， 阿昔呋喃或者酒石酸烟醇 (radecol) 结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与 CETP 抑制剂， 例如和优选 托塞匹布， JTT-705， BAY 60-5521， BAY 78-7499 或者 CETP 疫苗 (Avant) 结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与 PPAR-γ 激动剂， 例如和 优选吡格列酮或者罗格列酮结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与 PPAR-δ 激动剂， 例如和 优选 GW-501516 或者 BAY 68-5042 结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与聚胆汁酸吸附剂， 例如和 优选消胆胺， 考来替泊， colesolvam， 考来胶或者 colestimide 结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与胆汁酸再吸收抑制剂， 例 如和优选 ASBT( ＝ IBAT) 抑制剂， 例如 AZD-7806， S-8921， AK-105， BARI-1741， SC-435 或者 SC-635 结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与抗氧化剂 / 自由基清除分 子， 例如和优选普罗布考， AGI-1067， BO-653 或者 AEOL-10150 结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与大麻素受体 1 拮抗剂， 例 如和优选利莫纳班或者 SR-147778 结合服用。
抗糖尿病药被理解优选地为意思是胰岛素和胰岛素衍生物， 和口服有效的低血糖 的活性化合物。 这里， 胰岛素和胰岛素衍生物包括动物， 人或者生物工艺学起源的胰岛素和 它们的混合物。口服有效的血糖过低的活性化合物优选包括磺酰尿， 双胍， 美格列奈衍生 物， 葡糖苷酶抑制剂， DDP-IV 抑制剂和 PPAR-γ 激动剂。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与胰岛素结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与磺酰尿， 例如和优选甲苯 磺丁脲， 格列本脲， 格列美脲， 格列甲嗪或者格列齐特结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与双胍， 例如和优选二甲双 胍结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与美格列奈衍生物， 例如和 优选瑞格列奈或者内他列奈结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与葡糖苷酶抑制剂， 例如和 优选米格列醇或者阿卡波糖结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与 DPP-IV 抑制剂， 例如和优 选西格列汀或者维格列汀结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与例如来自噻唑烷二酮一类 的 PPAR-g 激动剂， 例如和优选吡格列酮或者罗格列酮结合服用。
降血压剂优选被理解为意思是来自以下的化合物 ： 钙拮抗剂， 血管紧张素 AII 拮 抗剂， ACE 抑制剂， 血管紧张肽原酶抑制剂， β- 肾腺素受体阻滞剂， α- 受体阻滞剂和利尿 剂。在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与钙拮抗剂， 例如和优选硝 结合服用。苯地平， 氨氯地平， 维拉帕米或者地尔硫
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与血管紧张素 AII 拮抗剂， 例如和优选氯沙坦， 缬沙坦， 坎地沙坦， 恩布沙坦， 奥美沙坦 (almesartan) 或者替米沙坦结 合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与 ACE 抑制剂， 例如和优选 依那普利， 卡托普利， 赖诺普利， 雷米普利， 地拉普利， 福辛普利， quinopril， 培哚普利或者 群多普利结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与血管紧张肽原酶抑制剂， 例如和优选阿利吉仑， SPP-600 或者 SPP-800 结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与 β- 肾腺素受体阻滞剂， 例如和优选普萘洛尔， 阿替洛尔， 噻吗洛尔， 吲哚洛尔， 阿普洛尔， 氧烯洛尔， 喷布洛尔， 布拉 洛尔， 美替洛尔， 纳多洛尔， 甲吲洛尔， 卡拉洛尔， 索他洛尔， 美托洛尔， 倍他索洛尔， 塞利洛 尔， 比索洛尔， 卡替洛尔， 艾司洛尔， 拉贝洛尔， 卡维地洛， 阿达洛尔， 兰地洛尔， 奈必洛尔， 依 泮洛尔或者布新洛尔结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与 α- 受体阻滞剂， 例如和 优选哌唑嗪结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与利尿药， 例如和优选呋 喃苯胺酸， 丁尿胺， 托塞米， 苄氟噻嗪， 氯噻嗪， 双氢氯噻嗪， 双氢氟噻嗪， 甲氯噻嗪， 多噻 嗪， 三 氯 噻 嗪， 氯 噻 酮 (chlorothalidone)， 吲 哒 帕 胺 (indapamide)， 美 托 拉 宗， 喹乙宗 (quinethazone)， 乙酸唑胺， 二氯苯磺胺， 甲醋唑胺， 甘油， 异山梨糖醇， 甘露糖醇， 氨氯吡脒 或者三氨蝶呤结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与醛甾酮或者盐皮质激素受 体拮抗剂， 例如和优选螺旋内酯或者依普利酮结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与血管升压素受体拮抗剂， 例如和优选 conivaptan， 托伐普坦 (tolvaptan)， lixivaptan 或者 SR-121463 结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与有机硝酸盐或者 NO 供体， 例如和优选硝普酸钠， 硝酸甘油酯， 单硝酸异山梨醇， 二硝酸异山梨醇酯， 吗斯酮胺或者 SIN-1 结合， 或者与吸入性 NO 结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与增强收缩力活性的活性化 合物， 例如和优选强心苷 ( 异羟洋地黄毒甙 )， β- 肾上腺素能药和多巴胺能药激动剂， 例如 异丙肾上腺素， 肾上腺素， 去甲基肾上腺素， 多巴胺或者多巴酚丁胺结合服用。
在 本 发 明 的 优 选 的 实 施 方 案 中， 根据本发明的化合物与抗交感神经药 (antisympathotonic)， 例如利血平， 氯压定或者 α- 甲基多巴结合， 或者与钾通道激动剂， 例如米诺地尔， 二氮嗪， 双肼酞嗪或者肼苯哒嗪结合服用。
抗血栓药被理解为意思是， 优选地， 来自血小板聚集抑制剂或者抗凝血剂的化合 物。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与血小板聚集抑制剂， 例如 和优选阿斯匹林， 氯吡格列， 噻氯匹定或者双嘧达莫结合服用。在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与凝血抑制因子， 例如和优 选希美加群， 美拉加群， 比伐卢定或者克赛结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与 GPIIb/IIIa 拮抗剂， 例如 和优选替罗非班或者阿昔单抗结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与因子 Xa 抑制剂， 例如和优 选 rivaroxaban(BAY 59-7939)， DU-176b， apixaban， otamixaban， 非德沙班 (fidexaban)， razaxaban， 磺达肝素， idraparinux， PMD-3112， YM-150， KFA-1982， EMD-503982， MCM-17， MLN-1021， DX 9065a， DPC 906， JTV 803， SSR-126512 或者 SSR-128428 结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与肝素或者低分子量 (LMW) 肝素衍生物结合服用。
在本发明的优选的实施方案中， 根据本发明的化合物与维生素 K 拮抗剂， 例如和 优选香豆素结合服用。
为了本发明的目的， 特别优选包含至少一种根据本发明的化合物和一种或者多种 进一步的选自以下的活性化合物的组合 ： HMG-CoA- 还原酶抑制剂 ( 抑制素 )， 利尿剂， β受 体阻滞剂， 有机硝酸盐和 NO 供体， ACE 抑制剂， 血管紧张素 AII 拮抗剂， 醛甾酮和盐皮质激 素受体拮抗剂， 血管升压素受体拮抗剂， 血小板聚集抑制剂和抗凝血剂， 和特别优选它们对 于治疗和 / 或预防以上提到的疾病的应用。
本发明此外提供了包含至少一种根据本发明的化合物， 通常连同一种或者多种惰 性的、 无毒的、 药理学合适的助剂的药物， 和它们对于以上提到的目的的应用。
根据本发明的化合物可以全身和 / 或局部起作用。为此目的， 它们可以以合适的 方式， 例如通过口， 肠外， 肺， 鼻， 舌下， 舌， 颊， 直肠， 真皮， 经皮， 结膜， 耳或者作为植入物或 者支架服用。
为了这些给药途径， 根据本发明的化合物可以以合适的服用形式服用。
适合于口服的是根据现有技术起作用并且迅速地和 / 或以改进的方式释放根据 本发明的化合物和包含以结晶的和 / 或无定形的和 / 或溶解的形式的根据本发明的化合物 的服用形式， 例如片剂 ( 无涂层的或者糖衣片剂， 例如具有以延迟方式溶解的或者不能溶 解的和控制释放根据本发明的化合物释放的肠溶衣或者涂层 )， 在口中迅速地溶解的膜 / 薄膜或者片剂， 膜 / 冻干物， 胶囊 ( 例如硬的或者软的明胶胶囊 )， 糖衣片， 颗粒， 丸， 粉末， 乳 剂， 悬浮液， 烟雾剂或者溶液。
肠胃外投药可以通过避免生物吸收步骤 ( 例如静脉内， 动脉内， 心内， 脊柱内或者 腰内 )， 或者伴随生物吸收吸收 ( 例如肌内注射， 皮下， 皮内， 经皮或者腹内 ) 进行。适合于 肠胃外投药的服用形式尤其是用于注射的制剂或者以溶液形式的浸剂， 悬浮液， 乳剂， 冻干 物或者无菌粉末。
适合于其它的给药途径的是， 例如适合于吸入 ( 尤其是粉末吸入器， 喷雾器 ) 的药 物， 滴鼻剂， 溶液或者喷雾剂 ； 舌， 舌下或者颊服用的片剂， 膜 / 薄膜或者胶囊， 栓剂， 耳或者 眼服用的制剂， 阴道胶囊， 水悬浮液 ( 洗液， 摇动混合物 )， 亲油性的悬浮液， 软膏， 乳膏， 经 皮吸收剂型 ( 例如膏药 )， 乳剂， 糊剂， 泡沫， 用于倾倒的粉末， 植入物或者支架。
优选口或者肠胃外服用， 特别是口和静脉内服用。
根据本发明的化合物可以转变为提到的服用形式。 这可以以本身已知的方式通过与惰性的、 无毒的、 药学合适的助剂混合进行。这些助剂尤其包括载体 ( 例如微晶纤维素， 乳糖， 甘露糖醇 )， 溶剂 ( 例如液体聚乙二醇 )， 乳化剂和分散剂或者润湿剂 ( 例如十二烷基 硫酸钠， 聚氧失水山梨糖醇油酸酯 )， 粘合剂 ( 例如聚乙烯吡咯烷酮 )， 合成和天然聚合物 ( 例如白蛋白 )， 稳定剂 ( 例如抗氧化剂， 例如抗坏血酸 )， 着色剂 ( 例如无机颜料， 例如铁氧 化物 ) 和香味和 / 或气味矫正药。
通 常， 已 经 发 现 在 肠 胃 外 投 药 量 的 情 况 下 大 约 0.001-1mg/kg， 优选大约 0.01-05mg/kg 体重的服用量是有利的以获得有效的结果。在口服情况下， 剂量是从大约 0.01-100mg/kg， 优选从大约 0.01-20mg/kg， 和非常特别优选从 0.1-10mg/kg 体重。
尽管这样， 偏离提到的量可能是必要的， 即取决于体重， 给药途径， 个体对于活性 化合物的反应， 制剂的种类和服用发生的时间或者间隔。 因此， 有时服用小于以上提到的最 低量可能是足够的， 而在其它情况下必须超过提到的上限。 在大量服用情况下， 一天过程中 将这些划分成许多独立的剂量服用可能是有利的。
以下示范性的实施例解释本发明。本发明不局限于该实施例。
除非另外指明， 在以下试验和实施例中百分比是重量百分比 ； 份是重量份。液体 / 液体溶液的溶剂比， 稀释比和浓度在每一种情况下基于体积。
A. 实施例 使用的缩写 ： Ex. 实施例 DBU 1， 8- 二氮杂双环 [5.4.0] 十一碳 -7- 烯 TLC 薄层色谱 DCI 直接化学电离 ( 在 MS 中 ) DME 1， 2- 二甲氧基乙烷 DMF N， N- 二甲基甲酰胺 DMSO 二甲基亚砜 EA 乙酸乙酯 EI 电子碰撞电离 ( 在 MS 中 ) ESI 电喷射离子化作用 ( 在 MS 中 ) Et 乙基 EtOH 乙醇 m.p. 熔点 sat. 饱和的 h 小时 HOAc 乙酸 HPLC 高压 -， 高效液相色谱 conc. 浓的 t KO Bu 叔丁醇钾 LC-MS 液相色谱 - 质谱联用 LDA 二异丙基氨基锂 lit. 文献 ( 参考 )sol. 溶液 min 分钟 MS 质谱 NMM N- 甲基吗啉 NMR 核磁共振波谱法 PBS 磷酸缓冲盐水 PEG 聚乙二醇 Ph 苯基 RP-HPLC 反相 HPLC RT 室温 Rt 驻留时间 ( 在 HPLC 中 ) THF 四氢呋喃 dil. 稀的 aq. 含水的 HPLC 和 LC-MS 方法 ：方法 1(HPLC) ：
仪 器： Hewlett Packard Series 1050 ； 柱： Symmetry TM C18 3.9x150mm ； 流 速： 1.5ml/min ； 流动相 A ： 水， 流动相 B ： 乙腈 ； 梯度 ： → 0.6min 10 ％ B → 3.8min 100 ％ B → 5.0min 100％ B → 5.5min 10％ B ； 停止时间 ： 6.0min ； 注射体积 ： 10μl ； 二极管阵列检 测器信号 ： 214 和 254nm。
方法 2(LC-MS) ：
MS 仪 器 类 型 ： Micromass ZQ ； HPLC 仪 器 类 型 ： Waters Alliance2795 ； 柱： Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 100mm x 4.6mm ； 流动相 A ： 水 +500μl 50％浓度甲酸 /l， 流 动相 B ： 乙腈 +500μl 50％浓度甲酸 /l ； 梯度 ： 0.0min 10％ B → 7.0min 95％ B → 9.0min 95％ B ； 烘箱 (Ofen) ： 35℃； 流速 ： 0.0min 1.0ml/min → 7.0min 2.0ml/min → 9.0min2.0ml/ min ； UV 检测 ： 210nm。
方法 3(LC-MS) ：
MS 仪 器 类 型 ： Micromass ZQ ； HPLC 仪 器 类 型 ： HP 1100 Series ； UV DAD ； 柱： Phenomenex Gemini 3μ 30mm x 3.00mm ； 流动相 A ： 1l 水 +0.5ml 50％浓度甲酸， 流动相 B： 1l 乙腈 +0.5ml 50％浓度甲酸 ； 梯度 ： 0.0min 90％ A → 2.5min 30％ A → 3.0min 5％ A → 4.5min 5％ A ； 流速 ： 0.0min 1ml/min → 2.5min/3.0min/4.5min 2ml/min ； 烘箱 ： 50℃； UV 检测 ： 210nm。
方法 4(LC-MS) ：
仪 器 ：具 有 HPLC Agilent Serie 1100 的 Micromass Quattro LCZ ；柱 ： Phenomenex Onyx Monolithic C18， 100mm x 3mm ； 流动相 A ： 1l 水 +0.5ml 50％浓度甲酸， 流动相 B ： 1l 乙腈 +0.5ml 50％浓度甲酸 ； 梯度 ： 0.0min 90％ A → 2min 65％ A → 4.5min 5％ A → 6min 5％ A ； 流速 ： 2ml/min ； 烘箱 ： 40℃ ； UV 检测 ： 208-400nm。
方法 5(LC-MS) ： MS 仪 器 类 型 ： Waters ZQ ； HPLC 仪 器 类 型 ： Waters Alliance2795 ； 柱： MerckChromolith RP-18e， 100mm x 3mm ； 流动相 A ： 1l 水 +0.5ml 50％浓度甲酸， 流动相 B ： 1l 乙 腈 +0.5ml 50％浓度甲酸 ； 梯度 ： 0.0min 90％ A → 2min 65％ A → 4.5min 5％ A → 6min 5％ A； 流速 ： 2ml/min ； 烘箱 ： 40℃ ； UV 检测 ： 210nm。
方法 6(LC-MS) ：
仪 器 ：具 有 HPLC Agilent Serie 1100 的 Micromass Quattro LCZ ；柱 ： Phenomenex Synergi 2.5μMAX-RP 100A Mercury 20mm x 4mm ； 流动相 A ： 1l 水 +0.5ml 50％浓度甲酸， 流动相 B ： 1l 乙腈 +0.5ml 50％浓度甲酸 ； 梯度 ： 0.0min 90％ A → 0.1min 90％ A → 3.0min 5％ A → 4.0min5％ A → 4.1min 90％ A ； 流速 ： 2ml/min ； 烘箱 ： 50℃； UV 检 测： 208-400nm。
方法 7(LC-MS) ：
MS 仪 器 类 型 ： Micromass ZQ ； HPLC 仪 器 类 型 ： Waters Alliance2795 ；柱 ： Phenomenex Synergi 2.5μMAX-RP 100A Mercury 20mm x4mm ； 流动相 A： 1l 水 +0.5ml 50 ％浓度甲酸， 流动相 B ： 1l 乙腈 +0.5ml50 ％浓度甲酸 ； 梯度 ： 0.0min 90 ％ A → 0.1min 90％ A → 3.0min5％ A → 4.0min 5％ A → 4.01min 90％ A ； 流速 ： 2ml/min ； 烘箱 ： 50℃ ； UV 检测 ： 210nm。
方法 8(LC-MS) ：
仪器 ： 具有 HPLC Agilent Serie 1100 的 Micromass Platform LCZ ； 柱： Thermo Hypersil GOLD 3μ 20mm x 4mm ； 流动相 A ： 1l 水 +0.5ml50％浓度甲酸， 流动相 B ： 1l 乙腈 +0.5ml 50％浓度甲酸 ； 梯度 ： 0.0min100％ A → 0.2min 100％ A → 2.9min 30％ A → 3.1min 10％ A → 5.5min 10％ A ； 流速 ： 0.8ml/min ； 烘箱 ： 50℃ ； UV 检测 ： 210nm。
方法 9(LC-MS) ：
仪 器 ：具 有 HPLC Agilent Serie 1100 的 Micromass Quattro LCZ ；柱 ： Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20mm x 4mm ； 流动相 A ： 1l 水 +0.5ml 50％ 浓度甲酸， 流动相 B ： 1l 乙腈 +0.5ml 50％浓度甲酸 ； 梯度 ： 0.0min 90％ A → 2.5min 30％ A → 3.0min 5％ A → 4.5min 5％ A ； 流速 ： 0.0min 1ml/min → 2.5min/3.0min/4.5min 2ml/ min ； 烘箱 ： 50℃ ； UV 检测 ： 208-400nm。
方法 10(LC-MS) ：
MS 仪 器 类 型 ： Micromass ZQ ； HPLC 仪 器 类 型 ： HP 1100Series ； UV DAD ； 柱： Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20mm x4mm ； 流动相 A ： 1l 水 +0.5ml 50％ 浓度甲酸， 流动相 B ： 1l 乙腈 +0.5ml50 ％浓度甲酸 ； 梯度 ： 0.0min 90 ％ A → 2.5min 30 ％ A → 3.0min5％ A → 4.5min 5％ A ； 流速 ： 0.0min 1ml/min → 2.5min/3.0min/4.5min2ml/ min ； 烘箱 ： 50℃ ； UV 检测 ： 210nm。
方法 11(LC-MS) ：
MS 仪 器 类 型 ： Micromass ZQ ； HPLC 仪 器 类 型 ： HP 1100 Series ； UV DAD ； 柱： Phenomenex Synergi 2.5μ MAX-RP 100A Mercury20mm x 4mm ； 流动相 A ： 1l 水 +0.5ml 50％浓度甲酸， 流动相 B ： 1l 乙腈 +0.5ml 50％浓度甲酸 ； 梯度 ： 0.0min 90％ A → 0.1min 90％ A → 3.0min5％ A → 4.0min 5％ A → 4.1min 90％ A ； 流速 ： 2ml/min ； 烘箱 ： 50℃； UV 检 测： 210nm。
方法 12(LC-MS) ：MS 仪 器 类 型 ： Micromass ZQ ； HPLC 仪 器 类 型 ： Waters Alliance2795 ； 柱： Merck Chromolith SpeedROD RP-18e 100mm x 4.6mm ； 流动相 A ： 水 +500μl 50％浓度甲酸 /l ； 流 动相 B ： 乙腈 +500μl 50％浓度甲酸 /l ； 梯度 ： 0.0min 10％ B → 7.0min 95％ B → 9.0min 95％ B ； 流速 ： 0.0min 1.0ml/min → 7.0min 2.0ml/min → 9.0min 2.0ml/min ； 烘箱 ： 35℃ ； UV 检测 ： 210nm。
方法 13(LC-MS) ：
MS 仪 器 类 型 ： M-40DCI(NH3) ； HPLC 仪 器 类 型 ： 具 有 DAD 检 测 的 HP 1100 ； 柱： Kromasil 100RP-18， 60mm x 2.1mm， 3.5μm ； 流动相 A ： 5ml HClO4(70％浓度 )/ 升水， 流动 相B： 乙腈 ； 梯度 ： 0min2％ B → 0.5min 2％ B → 4.5min 90％ B → 6.5min 90％ B → 6.7min 2％ B → 7.5min2％ B ； 流速 ： 0.75ml/min ； 柱温 ： 30℃ ； UV 检测 ： 210nm。
方法 14(LC-MS) ：
仪器： 具 有 Waters UPLC Acquity 的 Micromass QuattroPremier ； 柱： Thermo Hypersil GOLD 1.9μ 50mm x 1mm ； 流动相 A ： 1l 水 +0.5ml 50 ％浓度甲酸， 流动相 B ： 1l 乙腈 +0.5ml 50 ％浓度甲酸 ； 梯度 ： 0.0min 90 ％ A → 0.1min 90 ％ A → 1.5min 10 ％ A → 2.2min 10％ A ； 流速 ： 0.33ml/min ； 烘箱 ： 50℃ ； UV 检测 ： 210nm。
方法 15(LC-MS) ：
仪器： 具 有 HPLC Agilent Serie 1100 的 Micromass Quattro MicroMS ； 柱： Thermo Hypersil GOLD 3μ 20mm x 4mm ； 流动相 A ： 1l 水 +0.5ml 50％浓度甲酸， 流动相 B： 1l 乙腈 +0.5ml 50％浓度甲酸 ； 梯度 ： 0.0min 100％ A → 3.0min 10％ A → 4.0min 10％ A → 4.01min 100％ A( 流速 2.5ml/min) → 5.00min 100％ A ； 烘箱 ： 50℃ ； 流速 ： 2ml/min ； UV 检测 ： 210nm。
方法 16( 制备 HPLC) ：
HPLC 仪 器 类 型 ： Abimed/Gilson Pump 305/306 ； ManometricModule 806 ； UV Knauer Variable Wavelength Monitor ； 柱： GromsilC18， 10nm， 250mm x 30mm ； 流动相 A ： 1l 水 +0.5ml 99 ％浓度三氟醋酸， 流动相 B ： 1l 乙腈 ； 梯度 ： 0.0min 2 ％ B → 10min 2 ％ B → 50min90％ B ； 流速 ： 20ml/min ； 体积 ： 628ml A 和 372ml B。
方法 17(HPLC) ：
HPLC 仪器类型 ： 具有 DAD 检测的 Agilent 1100 ； 柱： MerckChromolith SpeedROD RP-18e， 50mm x 4.6mm ； 流动相 A ： 0.05 ％ 浓 度 H3PO4， 流动相 B ： 乙腈 ； 梯度 ： 0min 5 ％ B → 2.5min 95％ B → 3.0min95％ B ； 流速 ： 5ml/min ； 柱温 ： 40℃ ； UV 检测 ： 210nm。
起始化合物和中间体 ：
实施例 1A
2- 氨基 -4-[4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ]-6- 巯基吡啶 -3， 5- 二腈
开 始 向 280ml 乙 醇 中 加 入 14.90g(89.66mmol)4-(2- 羟 基 乙 氧 基 ) 苯 甲 醛 和 17.96g(179.33mmol) 氰基硫代乙酰胺。然后添加 18.14g(179.33mmol)4- 甲基吗啉。反应 混合物在回流下加热 4h 和然后在 RT 下再搅拌 20h。伴随抽吸滤掉产生的沉淀， 再用大约 20ml 乙醇洗涤并干燥。
产率 ： 9.90g( 理论的 35％ )
LC-MS( 方法 10) ： Rt ＝ 1.63min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 313[M+H]+.
实施例 2A
4-(2- 羟基 -2- 甲基丙氧基 ) 苯甲醛开 始 向 50ml 干 燥 的 DMF 中 加 入 5.00g(40.94mmol)4- 羟 基 苯 甲 醛， 4.44g(40.94mmol)1- 氯 -2- 甲基 -2- 丙醇和 6.08g(57.32mmol) 碳酸钠并且在回流下搅拌 24h。冷却到 RT 后， 添加 20ml 乙酸乙酯和 20ml 饱和碳酸氢钠水溶液。相分离， 并且有机相 通过硫酸镁干燥。除去溶剂后， 残余物通过在硅胶 60 上柱层析提纯 ( 流动相梯度 ： 环己烷 / 乙酸乙酯 5 ∶ 1 → 1 ∶ 1)。这产生微红的固体， 其没有进一步提纯地用于随后的步骤。
产率 ： 4.40g( 理论的 50％， 纯度 90％ )
LC-MS( 方法 2) ： Rt ＝ 1.37min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 195[M+H]+.
实施例 3A
2- 氨基 -4-[4-(2- 羟基 -2- 甲基丙氧基 ) 苯基 ]-6- 巯基吡啶 -3， 5- 二腈
开 始 向 50ml 乙 醇 中 加 入 3.38g(15.49mmol) 来 自 实 施 例 2A 的 化 合 物 和 3.26g(32.52mmol) 氰基硫代乙酰胺。然后添加 3.13g(30.98mmol)4- 甲基吗啉。伴随搅拌， 混合物在回流下加热 6h。冷却到 RT 后， 混合物在该温度下搅拌 20h。然后添加 50ml 饱和 碳酸氢钠水溶液， 并且混合物在每一种情况下用 50ml 乙酸乙酯提取四次。合并的有机相通 过硫酸镁干燥。除去溶剂后， 残余物通过在硅胶 60 上柱层析提纯 ( 流动相梯度 ： 环己烷 / 乙酸乙酯 2 ∶ 1 → 1 ∶ 4)。获得的产物没有进一步提纯地用于随后的步骤。
产率 ： 0.92g( 理论的 16％， 纯度 90％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 13.00-12.91(br.s， 1H)， 8.09-7.78(br.s， 2H)， 7.46(d， 2H)， 7.09(d， 2H)， 4.68(s， 1H)， 3.79(s， 2H)， 1.22(s， 6H).
LC-MS( 方法 2) ： Rt ＝ 1.46min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 341[M+H]+.
实施例 4A
(2S)-1- 氯丙 -2- 醇
开 始 向 100ml THF 中 加 入 32.50g(766.66mmol) 氯 化 锂。 然 后 缓 慢 添 加 18.75ml(92.97mmol)4.96M 盐 酸。 混 合 物 冷 却 到 -30 ℃， 并 且 滴 加 5.40g(92.97mmol) S-(-)- 环氧丙烷在 10ml THF 中的溶液。添加结束后， 混合物暖到 RT 并且再搅拌 20h。伴 随抽吸滤掉形成的沉淀， 并且滤液经过分馏 (61mbar， 30-40℃塔头温度 )。用这样的方式获 得的产物混合物没有进一步提纯地用于随后的步骤。
产率 ： 4.50g( 理论的 16％， 纯度 32％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 5.01(d， 1H)， 3.85-3.74(m， 1H)， 3.49(d， 2H)， 1.12(d， 3H).
产物包含大约 10％区域异构体 (2S)-2- 氯丙 -1- 醇 ： 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 5.18-5.12(m， 1H)， 4.11-4.03(m， 1H)， 3.49(d， 2H)， 1.41(d， 3H).
实施例 5A
4-{[(2S)-2- 羟基丙基 ] 氧基 } 苯甲醛
6.30g(51.62mmol)4- 羟基苯甲醛和来自实施例 4A 的 4.88g(51.62mmol) 产物溶于 100ml 干燥的 DMF。 向该溶液中加入 16.41g(154.85mmol) 碳酸钠， 并且混合物在 130℃下搅 拌 20h。冷却到 RT 后， 向混合物中加入 100ml 乙酸乙酯和 50ml 饱和碳酸氢钠水溶液。混合 物在每一种情况下用 50ml 乙酸乙酯提取三次。合并的有机相通过硫酸镁干燥。除去溶剂 后， 残余物通过在硅胶 60 上柱层析提纯 ( 流动相梯度 ： 环己烷 / 乙酸乙酯 5 ∶ 1 → 2 ∶ 1)。
产率 ： 2.40g( 理论的 26％ ) 1
H-NMR(400MHz ，DMSO-d 6 ) ： δ ＝ 7.86(d ， 2H) ， 7.13(d ， 2H) ， 4.95(d ， 1H) ， 4.02-3.92(m， 1H)， 3.91(d， 2H)， 1.16(d， 3H).
LC-MS( 方法 2) ： Rt ＝ 1.19min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 181[M+H]+. 产物包含大约 10％区域异构体 4-[(1S)-2- 羟基 -1- 甲基乙氧基 ] 苯甲醛。 实施例 6A 4-{[(2S)-2-{[ 叔 - 丁基 ( 二甲基 ) 甲硅烷基 ] 氧基 } 丙基 ] 氧基 } 苯甲醛开始向 60ml 干燥的 DMF 中加入 2.40g(13.32mmol) 来自实施例 5A 的化合物， 并且 添加 2.81g(18.65mmol) 叔 - 丁基二甲基甲硅烷基氯和 1.72g(25.30mmol) 咪唑。反应混合 物在 RT 下搅拌 20h。然后向混合物中加入大约 30ml 乙醚和 30ml 饱和碳酸氢钠水溶液。相 分离并且含水相在每一种情况下用 30ml 乙醚提取两次。合并的有机相通过硫酸镁干燥并 且溶剂在旋转蒸发器上除去。残余物通过在硅胶 60 上柱层析提纯 ( 流动相梯度 ： 环己烷 / 乙酸乙酯 50 ∶ 1 → 10 ∶ 1)。
产率 ： 1.95g( 理论的 50％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 7.82(d， 2H)， 7.07(d， 2H)， 4.18-4.11(m， 1H)， 3.98(dd， 1H)， 3.87(dd， 1H)， 1.13(d， 3H)， 0.81(s， 9H)， 0.3(s， 3H)， 0.1(s， 3H). +
LC-MS( 方法 9) ： Rt ＝ 3.30min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 295[M+H] .
产物包含大约 10％区域异构体 4-[(1S)-2-{[ 叔 - 丁基 ( 二甲基 ) 甲硅烷基 ] 氧 基 }-1- 甲基 } 乙氧基 ] 苯甲醛。
实施例 7A
2- 氨基 -4-(4-{[(2S)-2-{[ 叔 - 丁基 ( 二甲基 ) 甲硅烷基 ] 氧基 } 丙基 ] 氧基 } 苯基 )-6- 巯基吡啶 -3， 5- 二腈
开 始 向 27ml 乙 醇 中 加 入 1.95g(6.62mmol) 来 自 实 施 例 6A 的 化 合 物 和 1.39g(13.91mmol) 氰基硫代乙酰胺， 并且添加 1.34g(13.24mmol)4- 甲基吗啉。混合物 在回流下加热 6h( 油浴温度 100 ℃ )。混合物然后在 RT 下再搅拌 20h。在旋转蒸发器 上除去溶剂后， 残余物直接通过在硅胶 60 上柱层析提纯 ( 流动相梯度 ： 二氯甲烷 / 乙醇 50 ∶ 1 → 5 ∶ 1)。
产率 ： 1.30g( 理论的 29％， 纯度 65％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 7.68-7.48(br.s， 2H)， 7.42(d， 2H)， 7.06(d， 2H)， 4.23-4.15(m ， 1H) ， 3.96(dd ， 1H) ， 3.88(dd ， 1H) ， 1.20(d ， 3H) ， 0.89(s ， 9H) ， 0.09(s ， 3H) ， 0.07(s， 3H).
LC-MS( 方法 2) ： Rt ＝ 2.79min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 441[M+H]+.
产物包含大约 10％区域异构体 2- 氨基 -4-{4-[(1S)-2-{[ 叔 - 丁基 ( 二甲基 ) 甲 硅烷基 ] 氧基 }-1- 甲基乙氧基 ] 苯基 }-6- 巯基吡啶 -3， 5- 二腈。
实施例 8A
4-{[(4R)-2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧戊环 -4- 基 ] 甲氧基 } 苯甲醛
开始向 400ml 干燥的 DMF 中加入 31.2g(255.4mmol)4- 羟基苯甲醛， 并且在 RT 下 添加 105.7g(766.1mmol) 碳酸钾和 50.0g(332.0mmol)(S)-(-)-3- 氯 -1， 2- 丙二醇丙酮化 物。混合物在 160℃下搅拌 16h。然后添加 4000ml 水， 并且混合物在每一种情况下用 500ml 乙酸乙酯提取三次。合并的有机相在每一种情况下用 500ml 水和 500ml 饱和氯化钠水溶液 洗涤一次。通过硫酸镁干燥后， 溶剂在旋转蒸发器上除去并且残余物通过在硅胶 60 上柱层
析提纯 ( 流动相梯度 ： 乙酸乙酯 / 石油醚 1 ∶ 9 → 2 ∶ 8)
产率 ： 40.4g( 理论的 63％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 9.90(s， 1H)， 7.85(d， 2H)， 7.03(d， 2H)， 4.50(q， 1H)， 4.22-4.09(m， 2H)， 4.04(dd， 1H)， 3.92(dd， 1H)， 1.48(s， 3H)， 1.41(s， 3H).
LC-MS( 方法 13) ： Rt ＝ 3.97min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 254[M+NH4]+.
实施例 9A
4-{[(4S)-2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧戊环 -4- 基 ] 甲氧基 } 苯甲醛
标题化合物类似于实施例 8A 由适当的起始化合物制备。
产率 ： 理论的 79％ 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 9.89(s， 1H)， 7.85(d， 2H)， 7.03(d， 2H)， 4.50(q， 1H)， 4.22-4.09(m， 2H)， 4.04(dd， 1H)， 3.92(dd， 1H)， 1.48(s， 3H)， 1.41(s， 3H).
LC-MS( 方法 13) ： Rt ＝ 4.02min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 254[M+NH4]+.
实施例 10A
2- 氨基 -4-(4-{[(4R)-2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧戊环 -4- 基 ] 甲氧基 } 苯基 )-6- 巯 基吡啶 -3， 5- 二腈
开 始 向 700ml 乙 醇 中 加 入 40.4g(171.0mmol) 来 自 实 施 例 8A 的 化 合 物 和 34.2g(342.0mmol) 氰基硫代乙酰胺。 反应混合物中添加 34.5g(342.0mmol)4- 甲基吗啉， 并 且伴随搅拌反应混合物在回流下加热 3h。冷却到 RT 后， 混合物在该温度下再搅拌 16h。产 生的沉淀伴随抽吸滤掉， 用大约 100ml 乙醇洗涤并在干燥箱中干燥。产物没有进一步提纯 地用于随后的反应。
产率 ： 19.5g( 理论的 29％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 7.63-7.31(br.s， 2H)， 7.41(d， 2H)， 7.09(d， 2H)， 4.49-4.38(m， 1H)， 4.15-3.99(m， 2H)， 3.78(dd， 1H)， 3.66(dd， 1H)， 2.77-2.68(br.s， 1H)，
1.37(s， 3H)， 1.32(s， 3H).
LC-MS( 方法 9) ： Rt ＝ 1.95min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 424[M+H+CH3CN]+.
实施例 11
2- 氨基 -4-(4-{[(4S)-2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧戊环 -4- 基 ] 甲氧基 } 苯基 )-6- 巯 基吡啶 -3， 5- 二腈
标题化合物类似于实施例 10A 由来自实施例 9A 的化合物制备。
产率 ： 理论的 32％ 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 7.69-7.37(br.s， 2H)， 7.42(d， 2H)， 7.10(d， 2H)， 4.48-4.39(m， 1H)， 4.15-4.02(m， 2H)， 3.78(dd， 1H)， 3.66(dd， 1H)， 2.77-2.68(br.s， 1H)， 1.37(s， 3H)， 1.31(s， 3H).
LC-MS( 方法 2) ： Rt ＝ 1.75min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 383[M+H]+.
实施例 12A
3- 氟 -4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯甲醛
5.00g(35.69mmol)3- 氟 -4- 羟 基 苯 甲 醛 溶 于 50ml 干 燥 的 DMF。 添 加 5.35g(42.82mmol)2- 溴乙醇和 19.73g(142.74mmol) 碳酸钾。反应混合物在 150℃下搅拌 10h。然后过滤混合物， 并且滤液在旋转蒸发器上除去溶剂。残余物在 30ml 乙酸乙酯中吸 收， 并且添加 20ml 饱和碳酸氢钠水溶液。相分离并且有机相通过硫酸镁干燥。在旋转蒸发 器上除去溶剂。获得的产物没有进一步提纯地用于随后的反应。
产率 ： 4.45g( 理论的 67％ )
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 1.39min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 185[M+H]+.
实施例 13A
2- 氨基 -4-[3- 氟 -4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ]-6- 硫烷基吡啶 -3， 5- 二腈
开 始 向 54ml 乙 醇 中 加 入 4.45g(24.16mmol) 来 自 实 施 例 12A 的 粗 产 物 和 4.84g(48.33mmol) 氰基硫代乙酰胺并且添加 4.89g(48.33mmol)4- 甲基 - 吗啉。反应混合 物在 +80℃下搅拌 4h。混合物然后在 RT 下搅拌 8h。在旋转蒸发器上除去溶剂， 并且残余物 直接通过在硅胶 60 上柱层析提纯 ( 流动相梯度 ： 二氯甲烷 / 乙醇 15 ∶ 1 → 5 ∶ 1)。获得 的产物没有进一步提纯地用于随后的反应。
产率 ： 2.65g( 理论的 28％， 纯度大约 90％ )
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 1.62min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 331[M+H]+.
实施例 14A
4-(3， 3， 3- 三氟 -2- 羟基丙氧基 ) 苯甲醛
标题化合物类似于实施例 12A 由 4- 羟基苯甲醛和 3- 溴 -1， 1， 1- 三氟丙 -2- 醇制 产率 ： 理论的 84％ LC-MS( 方法 6) ： Rt ＝ 1.58min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 235[M+H]+. 实施例 15A 2- 氨基 -6- 硫烷基 -4-[4-(3， 3， 3- 三氟 -2- 羟基丙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈备。
标题化合物类似于实施例 10A 由来自实施例 14A 的化合物制备。获得的产物没有 进一步提纯地用于随后的反应。
产率 ： 理论的 26％ ( 纯度 56％ )
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 1.98mm ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 381[M+H]+.
实施例 16A
4-( 氯甲基 )-2-(4- 氟 -3- 甲基苯基 )-1， 3- 噁唑
2.00g(12.80mmol)4- 氟 -3- 甲基苯甲酰胺和 1.79g(14.08mmol)1， 3- 二氯丙酮在 130℃下搅拌 2 天。形成熔体。混合物然后冷却到 RT， 小心地在该温度下添加 3.0ml 浓硫酸 并且混合物搅拌 15min。产生的悬浮液倒入到 20ml 冰 - 水中并且在 RT 下搅拌过夜。滤掉 形成的沉淀并且在 40℃下在真空干燥箱中干燥过夜。
产率 ： 2.05g( 理论的 64％， 纯度 90％ )
LC-MS( 方法 7) ： Rt ＝ 2.05min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 226[M+H]+.
在表 1 中列出的化合物类似于实施例 16A 由适当的起始材料制备 ：
表1
实施例 23A [2- 苯基 -5-( 三氟甲基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲醇500mg(1.94mmol)2- 苯基 -5-( 三氟甲基 )-1， 3- 噁唑 -4- 羧酸溶于 40ml 干燥的 THF 并且冷却到 -10℃。添加 197mg(1.94mmol)4- 甲基吗啉和 211mg(1.94mmol) 氯甲酸乙 酯。反应溶液在 -10℃下搅拌 1h。然后缓慢地滴加 3.9ml(3.89mmol) 氢化铝锂在 THF 中的 1M 溶液。反应混合物搅拌过夜并且缓慢地使得暖到 RT。混合物然后再次冷却到 0℃， 并且 小心地添加 0.6ml 水和 1.2ml 1N 氢氧化钠水溶液。 混合物然后在 RT 下搅拌过夜。 过滤后， 在旋转蒸发器上除去溶剂。残余物没有进一步提纯地用于随后的反应。
产率 ： 359mg( 理论的 58％， 纯度 76％ )
LC-MS( 方法 8) ： Rt ＝ 3.34min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 244[M+H]+.
实施例 24A
4-( 氯苯基 )-2- 苯基 -5-( 三氟甲基 )-1， 3- 噁唑
开始在 0.63ml(8.64mmol) 亚硫酰氯中加入 359mg(1.137mmol， 纯度 76％ ) 来自实 施例 23A 的化合物。反应混合物在 RT 下搅拌 48h。在旋转蒸发器上浓缩后， 残余物在 10ml 乙酸乙酯中吸收并用 5ml 饱和碳酸氢钠水溶液洗涤一次。 有机相通过硫酸镁干燥。 过滤后， 溶剂在旋转蒸发器上除去。残余物通过在硅胶 60 上柱层析提纯 ( 流动相梯度 ： 环己烷 / 乙 酸乙酯 400 ∶ 1 → 60 ∶ 1)。这产生淡褐色的固体。
产率 ： 148mg( 理论的 50％ )
LC-MS( 方法 7) ： Rt ＝ 2.34min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 262[M+H]+.
实施例 25A
2- 碘 -1， 3- 噁唑 -4- 羧酸乙基酯
向 8.00g(38.43mmol) 对 - 甲 苯 磺 酸 二 水 合 物 在 48ml 乙 腈 中 的 溶 液 中 添 加 2.00g(12.81mmol)2- 氨基 -1， 3- 噁唑 4- 羧酸乙基酯。悬浮液冷却到 0 ℃， 并且之后添加 1.77g(25.62mmol) 亚硝酸钠和 5.32g(32.02mmol) 碘化钾在 7.2ml 水中的溶液。混合物 在 0℃下搅拌 10min 并且， 暖到 RT 后， 进一步过夜。混合物之后用 200ml 水稀释。通过添 加 1M 碳酸氢钠水溶液， pH 调整到 9。之后添加 24ml 2M 硫代硫酸钠溶液。含水相在每一 种情况下用 30ml 乙酸乙酯提取三次。合并的有机相通过硫酸镁干燥。过滤后， 溶剂在旋 转蒸发器上除去。残余物通过在硅胶 60 上柱层析提纯 ( 流动相梯度 ： 环己烷 / 乙酸乙酯 300 ∶ 1 → 2 ∶ 1)。产率 ： 0.97g( 理论的 28％ ) LC-MS( 方法 6) ： Rt ＝ 1.41min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 268[M+H]+. 实施例 26A 2-(4- 氯 -3- 甲基苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 羧酸乙基酯开始在 12.7ml 干燥的 N- 甲基 -2- 吡咯烷酮中加入 385mg(1.44mmol) 来自实施例 25A 的化合物和 319mg(1.87mmol)4- 氯 -3- 甲基苯基硼酸。之后添加 105mg(0.14mmol) 双 ( 二苯基膦基 ) 二茂铁氯化钯 (II)， 0.33ml 水和 940mg(2.88mmol) 碳酸铯。反应混合物在 50℃下搅拌 4h。混合物之后冷却到 RT， 并且添加 20ml 乙酸乙酯和 10ml 水。含水相在每一 种情况下用 20ml 乙酸乙酯提取两次。合并的有机相用 10ml 饱和氯化钠水溶液洗涤一次并 通过硫酸镁干燥。过滤后， 溶剂在旋转蒸发器上除去。残余物用制备 HPLC 提纯 ( 柱 ： YMC GEL ODS-AQ S-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。
产率 ： 162mg( 理论的 42％ ) LC-MS( 方法 7) ： Rt ＝ 2.19min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 266[M+H]+. 实施例 27A [2-(4- 氯 -3- 甲基苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲醇开始在 8.0ml THF 中加入 46mg(1.22mmol) 氢化铝锂并冷却到 0 ℃。之后滴加 161mg(0.61mmol) 来自实施例 26A 的化合物在 2.5ml THF 中的溶液。混合物在 RT 下搅拌 2h。反应溶液之后再次冷却到 0℃， 并且添加 0.2ml 水和 0.4ml 1N 氢氧化钠水溶液。混合 物在 RT 下搅拌过夜。滤掉形成的沉淀， 并且滤液使用旋转蒸发器除去溶剂。残余物没有进 一步提纯地用于随后的反应。
产率 ： 137mg( 理论的 70％， 纯度 70％ )
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 2.14min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 224[M+H]+.
实施例 28A
4-( 氯甲基 )-2-(4- 氯 -3- 甲基苯基 )-1， 3- 噁唑
136mg(0.61mmol) 来自实施例 27A 的化合物悬浮在 2ml 二氯甲烷中。悬浮液冷却到 0℃， 并且缓慢添加 49μl(0.67mmol) 亚硫酰氯。反应溶液在 RT 下搅拌过夜。然后在旋 转蒸发器上除去溶剂。残余物没有进一步提纯地用于随后的反应。
产率 ： 178mg( 理论的 42％， 纯度 35％ )
LC-MS( 方法 7) ： Rt ＝ 2.56min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 242[M+H]+.
实施例 29A
2-(4- 氯苯基 )-5- 乙基 -4- 甲基 -1， 3- 噁唑 3- 氧化物
开 始 向 2ml(34.94mmol) 冰 醋 酸 中 加 入 1.00g(8.69mmol)2， 3- 戊 二 酮 2- 肟 和 1.34g(9.55mmol)4- 氯苯甲醛。伴随反应混合物的冰 - 冷却， 然后加入氯化氢气体 30min。 然后向反应混合物中加入 10ml 乙醚。形成沉淀， 其伴随抽吸滤掉并且在每一种情况下用 2ml 乙醚洗涤两次。该沉淀再悬浮在大约 5ml 水中， 并且使用氨使悬浮液呈碱性。然后悬浮 液在每一种情况下用 10ml 二氯甲烷提取四次。合并的有机相通过硫酸镁干燥并且在旋转 蒸发器上除去溶剂。残余物没有进一步提纯地用于随后的反应。
产率 ： 1.6g( 理论的 76％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.42(d， 2H)， 7.63(d， 2H)， 2.76(q， 2H)， 2.10(s， 3H)， 1.24(t， 3H).
LC-MS( 方法 6) ： Rt ＝ 1.67min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 238[M+H]+.
实施例 30A
4-( 氯甲基 )-2-(4- 氯苯基 )-5- 乙基 -1， 3- 噁唑
1.00g(4.21mmol) 来 自 实 施 例 29A 的 化 合 物 溶 于 15ml 氯 仿， 并且小心地添加 1.4ml(15.15mmol) 磷酰氯。混合物加热至回流并且在该温度下搅拌 30min。混合物然后冷 却到 0℃并且使用氨使稍微呈碱性。反应混合物在每一种情况下用 20ml 乙酸乙酯提取三 次。合并的有机相用 10ml 水洗涤一次并随后用硫酸镁干燥。在旋转蒸发器上除去溶剂并 且残余物在真空干燥箱中干燥。产物没有进一步提纯地用于随后的反应。
产率 ： 1.2g( 理论的 84％， 纯度 74％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 7.96(d， 2H)， 7.60(d， 2H)， 4.77(s， 2H)， 2.85(q， 2H)， 1.23(t， 3H).
LC-MS( 方法 6) ： Rt ＝ 2.56min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 256[M+H]+.
实施例 31A
2-(4- 氯苯基 )-4， 5- 二甲基 -1， 3- 噁唑 3- 氧化物
开 始 向 2ml(34.94mmol) 冰 醋 酸 中 加 入 1.00g(9.89mmol) 双 乙 酰 一 肟 和 1.53g(10.88mmol)4- 氯苯甲醛。伴随反应混合物的冰 - 冷却， 然后加入氯化氢气体 30min。 然后向反应混合物中加入 10ml 乙醚。形成沉淀， 其伴随抽吸滤掉并且在每一种情况下用 2ml 乙醚洗涤两次。该沉淀再悬浮在大约 5ml 水中， 并且使用氨使悬浮液呈碱性。然后悬浮 液在每一种情况下用 10ml 二氯甲烷提取四次。合并的有机相通过硫酸镁干燥并且在旋转 蒸发器上除去溶剂。残余物没有进一步提纯地用于随后的反应。
产率 ： 1.85g( 理论的 84％ )
LC-MS( 方法 5) ： Rt ＝ 2.29min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 224[M+H]+.
在表 2 中列出的化合物类似于实施例 31A 由适当的起始材料制备 ：
表2
实施例 34A 4-( 氯甲基 )-2-(4- 氯苯基 )-5- 甲基 -1， 3- 噁唑
开始向 15ml 氯仿中加入 1.00g(4.47mmol) 来自实施例 31A 的化合物， 并且小心地 添加 1.5ml(16.10mmol) 磷酰氯。伴随搅拌， 反应混合物在回流下加热 30min。混合物然后 冷却到 0℃并且通过添加氨使呈弱碱性。混合物在每一种情况下用 20ml 乙酸乙酯提取三次。合并的有机相在每一种情况下用 5ml 水洗涤两次和然后通过硫酸镁干燥。在旋转蒸发 器上除去溶剂。残余物没有进一步提纯地用于随后的步骤。
产率 ： 1.33g( 理论的 96％， 纯度 78％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 7.95(d， 2H)， 7.60(d， 2H)， 4.77(s， 2H)， 2.44(s， 3H).
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 2.80min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 242[M+H]+.
在表 3 中列出的实施例类似于实施例 34A 由适当的起始化合物制备 ：
表3
实施例 37A 5-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 羧酸甲基酯
1.40g(8.00mmol)4- 氯苯甲酰氯， 1.00g(10.09mmol) 异氰酸根合乙酸甲基酯和 5.9ml(42.39mmol) 三乙胺溶于 15ml 干燥的 THF 并且在 RT 下搅拌 48h。然后在旋转蒸发器 上除去溶剂。 残余物在 20ml 乙酸乙酯中吸收并且用 5ml 水洗涤一次。 有机相通过硫酸镁干 燥并且在旋转蒸发器上除去溶剂。残余物悬浮在 10ml 环己烷中并滤掉。然后由大约 10ml 甲醇再结晶。这产生针状的晶体， 其在干燥箱中在 50℃下干燥。重结晶后通过再沉淀再获 得产物部分。产率 ： 0.85g( 理论的 45％ ) 1 H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.61(s， 1H)， 8.02(d， 2H)， 7.62(d， 2H)， 3.82(s， LC-MS( 方法 14) ： Rt ＝ 1.09min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 238[M+H]+. 实施例 38A [5-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲醇3H).
开始向 10ml 干燥的 THF 中加入 166mg(4.38mmol) 氢化铝锂并冷却到 0℃。滴加 260mg(1.09mmol) 来自实施例 37A 的化合物在 10ml 干燥的 THF 中的溶液。添加已经结束 后， 反应溶液缓慢地暖到 RT 并且在该温度下搅拌 1h。伴随搅拌， 混合物然后在回流下加热 2h。混合物然后再次冷却到 0℃， 小心地添加 0.4ml 水和 0.8ml 1N 氢氧化钠水溶液并且混 合物在 RT 下搅拌 3h。滤掉形成的沉淀， 并且滤液在旋转蒸发器上除去溶剂。残余物没有进 一步提纯地用于随后的反应。 产率 ： 219mg( 理论的 82％， 纯度 86％ ) LC-MS( 方法 15) ： Rt ＝ 1.74min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 210[M+H]+. 实施例 39A 4-( 氯甲基 )-5-(4- 氯苯基 )-5- 甲基 -1， 3- 噁唑
开始向 0.43ml(5.85mmol) 亚硫酰氯中加入 269mg(0.77mmol) 来自实施例 38A 的 化合物。反应混合物在 RT 下搅拌 12h， 然后在减压下除去过量亚硫酰氯。残余物在 5ml 乙 酸乙酯中吸收并且用 2ml 饱和碳酸氢钠水溶液洗涤一次。有机相通过硫酸镁干燥并且在旋 转蒸发器上除去溶剂。获得的产物没有进一步提纯地用于随后的反应。
产率 ： 145mg( 理论的 62％， 纯度 76％ )
LC-MS( 方法 14) ： Rt ＝ 1.21min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 228[M+H]+.
实施例 40A
2-(4- 氯苯基 )-4-[( 甲氧基甲氧基 ) 甲基 ]-1， 3- 噁唑
开 始 向 18.5ml 干 燥 的 THF 中 加 入 1.32g(7.54mmol)[2-(4- 氯 苯 基 )-1， 3- 噁 唑 -4- 基 ] 甲醇 ( 实施例 100A) 并冷却到 0℃， 并且添加 0.33g(8.29mmol) 氢化钠 ( 在矿物 油中浓度 60％ )。混合物在 0℃下搅拌 10min 和然后在 RT 下 1h。反应混合物再次冷却到 0℃， 并且滴加 0.69ml(9.04mmol) 氯二甲醚。混合物在 0℃下搅拌 10min 和然后在 RT 下搅 拌 2h。然后添加 5ml 水， 并且反应混合物在每一种情况下用 25ml 乙酸乙酯提取三次。合并 的有机相通过硫酸镁干燥并在旋转蒸发器上除去溶剂。 获得的产物没有进一步提纯地用于 随后的反应。
产率 ： 1.70g( 理论的 87％， 纯度 85％ )
LC-MS( 方法 7) ： Rt ＝ 1.58min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 220[M+H]+.
实施例 41A
2-(4- 氯苯基 )-4-[( 甲氧基甲氧基 ) 甲基 ]-1， 3- 噁唑 -5- 甲醛
开始向 3.5ml 干燥的乙醚中加入 200mg(0.91mmol) 来自实施例 40A 的粗产物并且 冷却到 -78℃。缓慢地滴加 0.63ml(1.00mmol) 正 - 丁基锂在己烷中的 1.6M 溶液。反应混 合物在 -78℃下搅拌 1h。然后缓慢地滴加 0.21ml(2.74mmol)N， N- 二甲基甲酰胺。使混合 物暖到 RT 并且在 RT 下再搅拌 1h。然后混合物倒入大约 3ml 水中。混合物在每一种情况下 用 10ml 乙醚提取三次。合并的有机相通过硫酸镁干燥并且在旋转蒸发器上除去溶剂。残 余物通过在硅胶 60 上柱层析提纯 ( 流动相梯度 ： 环己烷 / 乙酸乙酯 20 ∶ 1 → 2 ∶ 1)。
产率 ： 161mg( 理论的 56％， 纯度 79％ )
LC-MS( 方法 6) ： Rt ＝ 1.74min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 248[M+H]+.
实施例 42A
2-(4- 氯苯基 )-4-[( 甲氧基甲氧基 ) 甲基 ]-1， 3- 噁唑 -5- 羧酸
向 802mg(4.72mmol) 硝酸银 (I) 在 2ml 水中的悬浮液中加入 556mg(2.25mmol) 来 自实施例 41A 的化合物和 14.7ml 二噁烷。然后缓慢地添加 193mg(4.84mmol) 氢氧化钠在 7.8ml 水中的溶液。混合物在 RT 下搅拌 3h。混合物然后通过 Celite 过滤， 其再用温水洗 涤。获得的滤液通过添加 1N 盐酸酸化并且在每一种情况下用 20ml 乙醚提取三次。合并的
有机相通过硫酸镁干燥并且在旋转蒸发器上除去溶剂。 残余物通过制备 HPLC 提纯 ( 柱 ： YMC GEL ODS-AQ S-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。
产率 ： 138mg( 理论的 21％， 纯度 92％ )
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 1.93min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 286[M+Na]+.
实施例 43A
2-(4- 氯苯基 )-4-[( 甲氧基甲氧基 ) 甲基 ]-1， 3- 噁唑 -5- 羧酸甲基酯
138mg(0.52mmol) 来自实施例 42A 的化合物溶于 3ml 甲苯和 2.5ml 甲醇。然后滴 加 0.4ml(0.79mmol) 三甲基甲硅烷基重氮甲烷在己烷中的 2M 溶液。混合物在 RT 下搅拌 10min 和然后在旋转蒸发器上除去溶剂。残余物没有进一步提纯地用于随后的反应。
产率 ： 144mg( 理论的 90％， 纯度 91％ )
LC-MS( 方法 15) ： Rt ＝ 1.98min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 300[M+Na]+.
实施例 44A
2-(4- 氯苯基 )-4-( 羟甲基 )-1， 3- 噁唑 -5- 羧酸甲基酯
开始向 0.5ml 甲醇中加入 144mg(0.52mmol) 来自实施例 43A 的化合物， 并且添加 0.13ml 4N 盐酸。然后添加 3 滴浓盐酸。反应混合物在 RT 下搅拌 8h。混合物然后用大约 5ml 水稀释并在每一种情况下用 10ml 乙醚提取三次。 合并的有机相通过硫酸镁干燥并且在 旋转蒸发器上除去溶剂。获得的产物没有进一步提纯地用于随后的反应。
产率 ： 100mg( 理论的 81％， 纯度 84％ )
LC-MS( 方法 7) ： Rt ＝ 1.29min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 234[M+H]+.
实施例 45A
2-( 氯甲基 )-2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -5- 羧酸甲基酯
100mg(0.43mmol) 来自实施例 44A 的化合物， 连同 0.24ml(3.24mmol) 亚硫酰氯， 在 RT 下搅拌 8h。在减压下除去过量亚硫酰氯并且残余物在大约 5ml 乙酸乙酯中吸收。混合 物用 2ml 饱和碳酸氢钠水溶液洗涤一次。有机相通过硫酸镁干燥并且在旋转蒸发器上除去 溶剂。获得的产物没有进一步提纯地用于随后的反应。
产率 ： 99mg( 理论的 92％， 纯度 98％ )
LC-MS( 方法 7) ： Rt ＝ 1.96min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 252[M+H]+.
实施例 46A
2- 氨基 -6-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-(4-{[(4R)-2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧戊环 -4- 基 ] 甲氧基 } 苯基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈
70mg(0.18mmol) 来自实施例 10A 的化合物和 46mg(0.20mmol) 来自实施例 17A 的 化合物， 连同 46mg(0.55mmol) 碳酸氢钠， 悬浮在 1.9ml 干燥的 DMF 中。反应混合物在 RT 下搅拌 20h。在旋转蒸发器上， 混合物除去溶剂， 并且残余物通过制备 HPLC 提纯 ( 柱 ： YMC GELODS-AQ S-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。
产率 ： 79mg( 理论的 75％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.37(s， 1H)， 8.30-8.01(br.s， 2H)， 7.97(d， 2H)， 7.60(d， 2H)， 7.48(d， 2H)， 7.12(d， 2H)， 4.48-4.40(m， 1H)， 4.42(s， 2H)， 4.16-4.03(m， 3H)， 3.78(dd， 1H)， 1.37(s， 3H)， 1.31(s， 3H).
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 2.99min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 574[M+H]+.
实施例 47A
2- 氨基 -6-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-(4-{[(4S)-2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧戊环 -4- 基 ] 甲氧基 } 苯基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈
150mg(0.39mmol) 来自实施例 11A 的化合物和 98mg(0.43mmol) 来自实施例 17A 的 化合物， 连同 99mg(1.18mmol) 碳酸氢钠， 悬浮在 2ml 干燥的 DMF 中。反应混合物在 RT 下搅 拌 20h。混合物然后直接通过制备 HPLC 提纯 ( 柱 ： YMC GEL ODS-AQ S-5/15μm ； 流动相梯 度： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。
产率 ： 147mg( 理论的 65％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.37(s， 1H)， 8.29-7.91(br.s， 2H)， 7.97(d， 2H)， 7.61(d， 2H)， 7.47(d， 2H)， 7.12(d， 2H)， 4.48-4.39(m， 1H)， 4.42(s， 2H)， 4.16-4.03(m， 3H)， 3.77(dd， 1H)， 1.37(s， 3H)， 1.31(s， 3H).
LC-MS( 方法 4) ： Rt ＝ 4.23min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 574[M+H]+.
在表 4 中列出的实施例类似于实施例 46A 和 47A 由适当的起始化合物制备 ：
表4
实施例 95A
2- 氨基 -4-(4-{[(2S)-2-{[ 叔 - 丁基 ( 二甲基 ) 甲硅烷基 ] 氧基 } 丙基 ] 氧基 } 苯基 )-6-({[2-(4- 氟苯基 )-5- 甲基 -1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫代 ) 吡啶 -3， 5- 二腈
在 2ml 干 燥 的 DMF 中 的 100mg(0.18mmol) 来 自 实 施 例 7A 的 化 合 物， 45mg(0.20mmol)4-( 氯甲基 )-2-(4- 氟苯基 )-5- 甲基 -1， 3- 噁唑和 46mg(0.55mmol) 碳酸 氢钠在 RT 下搅拌 20h。混合物直接通过制备 HPLC 提纯 ( 柱 ： YMC GEL ODS-AQ S-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。在旋转蒸发器上除去溶剂产生作为白色固体 的产物。
产率 ： 65mg( 理论的 57％ ) LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 3.53min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 630[M+H]+. 在表 5 中列出的实施例类似于实施例 95A 由适当的起始化合物制备 ： 表5
实施例 98A
2- 氨基 -4-(4-{[(4S)-2， 2- 二甲基 -1， 3- 二氧戊环 -4- 基 ] 甲氧基 } 苯基 )-6-( 苯 基硫代 ) 吡啶 -3， 5- 二腈
开始向 25ml 无水乙醇中加入 1.63g(6.90mmol) 来自实施例 9A 的化合物， 并顺次 添加 957mg(14.49mmol) 丙二腈， 798mg(7.24mmol) 苯硫酚和 21mg(0.21mmol) 三乙胺。 反应 混合物在回流下加热 2h。 冷却到 RT 后， 在旋转蒸发器上除去溶剂并且残余物直接通过在硅 胶 60 上柱层析提纯 ( 流动相 ： 二氯甲烷 / 甲醇 60 ∶ 1)。通过制备 HPLC 进行进一步提纯 (柱： YMC GEL ODS-AQ S-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。
产率 ： 850mg( 理论的 27％ )
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 2.63min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 459[M+H]+. 实施例 99A 2- 氨基 -4-[4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ]-6-( 苯基硫烷基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈标题化合物类似于实施例 98A 由 4-(2- 羟基乙氧基 )- 苯甲醛制备。
产率 ： 理论的 21％ 1
H-NMR(400MHz ， DMSO-d 6) ： δ ＝ 7.83-7.19(br.s ， 2H) ， 7.64-7.58(m ， 2H) ， 7.53-7.48(m， 5H)， 7.12(d， 2H)， 5.10-4.75(br.s， 1H)， 4.10(t， 2H)， 3.75(t， 2H). +
LC-MS( 方法 7) ： Rt ＝ 1.76min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 389[M+H] .
实施例 100A
[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲醇
2.00g(8.77mmol) 来自实施例 17A 的化合物悬浮在 175ml(17.54mmol)0.1N 氢氧化 钠水溶液中。反应混合物在回流下搅拌 2h。使用冰， 混合物然后冷却到 0℃， 并且缓慢地形 成沉淀。向混合物中加入大约 100ml 二氯甲烷和 5ml 乙醇。相分离。含水相调整到 pH 7 并且在每一种情况下用 50ml 二氯甲烷 ( 在每一种情况下用 3ml 乙醇 ) 提取两次。合并的 有机相通过硫酸镁干燥。在旋转蒸发器上除去溶剂后。残余物在减压下干燥。
产率 ： 1.20g( 理论的 65％ )
LC-MS( 方法 8) ： Rt ＝ 3.05min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 210[M+H]+.
实施例 101A
2- 氨基 -6-{[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲氧基 }-4-(4-{[(4S)-2， 2- 二 甲基 -1， 3- 二氧戊环 -4- 基 ] 甲氧基 } 苯基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈
122mg(1.09mmol) 叔 - 丁醇钾悬浮在 2ml 干燥的 1， 2- 二甲氧基乙烷中。然后先 后添加 229mg(1.09mmol) 来自实施例 100A 的化合物和 100mg(0.22mmol) 来自实施例 98A 的化合物。反应混合物在 60℃下搅拌 2h 和， 冷却后， 进一步在 RT 下搅拌 10h。然后向混合 物中加入 5ml 水。伴随抽吸滤掉形成的沉淀并大约 2ml 冷水洗涤一次。这继之以通过制备 HPLC 提纯 ( 柱 ： YMC GEL ODS-AQ S-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。产率 ： 70mg( 理论的 58％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.47(s， 1H)， 8.18-7.89(br.s， 2H)， 8.01(d， 2H)， 7.62(d， 2H)， 7.48(d， 2H)， 7.12(d， 2H)， 5.41(s， 2H)， 4.48-4.41(m， 1H)， 4.15-4.04(m， 3H)， 3.79(dd， 1H)， 1.37(s， 3H)， 1.31(s， 3H).
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 2.82min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 558[M+H]+.
实施例 102A
6- 氨基 -4-[4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ]-2- 氧代 -1， 2- 二氢吡啶 -3， 5- 二腈
开 始 向 6.4ml 乙 醇 中 加 入 500mg(1.29mmol) 来 自 实 施 例 99A 的 化 合 物。 添 加 2.57g(28.96mmol) 氢氧化钠后， 混合物在 80℃下搅拌 30min， 并形成透明溶液。冷却到 RT 后， 在旋转蒸发器上除去溶剂。残余物在 3ml 水中吸收并用 1N 盐酸酸化直到形成淡黄色的 沉淀。悬浮液在 RT 下搅拌 3h。滤掉该沉淀， 用大约 5ml 水和少许乙醇洗涤和然后由大约 10ml 乙醇重结晶。用这样的方式获得的产物没有进一步提纯地用于随后的反应。
产率 ： 153mg( 理论的 36％， 纯度 89％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 11.85-11.72(br.s， 1H)， 7.87-7.60(br.s， 2H)， 7.43(d， 2H)， 7.10(d， 2H)， 5.08-4.52(br.s， 1H)， 4.08(t， 2H)， 3.74(t， 2H).
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 1.29min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 297[M+H]+.
实施例 103A
2- 氯 -6-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫代 )-4-(4-{[(2S)-2， 3- 二羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈
开 始 向 20ml 干 燥 的 乙 腈 中 加 入 569mg(4.86mmol) 亚 硝 酸 异 戊 酯 和 653mg(4.86mmol) 氯化铜 (II)， 并添加 465mg(0.81mmol) 来自实施例 58A 的化合物。反应 混合物在 60℃下搅拌 3h。冷却到 RT 后， 向混合物中加入 20ml 1N 盐酸。含水相在每一种 情况下用 30ml 乙酸乙酯提取两次。合并的有机相在每一种情况下用 10ml 饱和碳酸氢钠 水溶液和 10ml 饱和氯化钠水溶液洗涤一次。通过硫酸镁干燥后， 在旋转蒸发器上除去溶 剂。残余物通过制备 HPLC 提纯 ( 柱 ： YMC GEL ODS-AQS-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。在旋转蒸发器上除去溶剂产生产物， 其没有进一步提纯地用于随后的 反应。
产率 ： 108mg( 理论的 18％， 纯度 73％ )
LC-MS( 方法 5) ： Rt ＝ 3.85min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 553[M+H]+.
在表 6 中列出的实施例类似于实施例 46A 由适当的起始化合物制备 ：
表6
在表 7 中列出的化合物可以类似于实施例 16A 和 34A 的步骤由适当的起始材料制 表7备：
实施例 123A
2- 氯 -6-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-[4-(2- 羟基乙 氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈
开 始 向 17ml 干 燥 的 乙 腈 中 加 入 156mg(1.33mmol) 亚 硝 酸 异 戊 酯 和 179mg(1.33mmol) 氯化铜 (II)， 并添加 336mg(0.67mmol) 来自实施例 15 的化合物。反应混 合物在 60℃下搅拌 3h。然后添加 17ml 1N 盐酸， 并且混合物在每一种情况下用 30ml 乙酸 乙酯提取两次。合并的有机相通过硫酸镁干燥。除去溶剂后， 粗产物没有进一步提纯地用 于随后的反应。
产率 ： 410mg( 理论的 78％， 纯度 67％ )。
85mg 部分粗产物通过制备 HPLC 提纯 ( 柱 ： YMC GEL ODS-AQS-5/15μm ； 流动相梯 度： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。这产生 14mg 纯的目标化合物。 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.18(s， 1H)， 7.98(d， 2H)， 7.62(dd， 4H)， 7.19(d， 1H)， 4.58(s， 2H)， 4.11(t， 2H)， 3.79-3.71(br.s， 2H). 2H)， 4.98-4.88(br.s，
LC-MS( 方法 14) ： Rt ＝ 1.46min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 523[M+H]+.
实施例 124A
2- 氯 -6-{[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲氧基 }-4-[4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈
标题化合物类似于实施例 123A 的方式从实施例 110 开始制备。
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 2.76min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 507[M+H]+.
实施例 125A
2- 氯 -6-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-[3- 氟 -4-(2- 羟 基乙基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈
开始向 20ml 乙腈中加入 150mg(0.287mmol)2- 氨基 -6-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁 唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-[3- 氟 -4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈 ( 实施 例 20)， 添加 258μl(1.724mmol) 亚硝酸异戊酯和 232mg(1.724mmol) 氯化铜 (II) 并且混合 物在室温下搅拌过夜。然后向饱和氯化铵溶液中加入反应混合物并用乙酸乙酯提取。用饱 和氯化钠溶液洗涤有机相， 通过硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过制备 HPLC 提纯 ( 流动相梯 度： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。这产生 25mg( 理论的 16％ ) 目标化合物。
LC-MS( 方法 7) ： Rt ＝ 2.43min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 541[M+H]+.
操作实施例 ：
实施例 1
2- 氨 基 -6-({[2-(4- 氯 -3- 甲 基 苯 基 )-1， 3- 噁 唑 -4- 基 ] 甲 基 } 硫 代 )-4-[4-(2- 羟基乙基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈
52mg(0.17mmol) 来自实施例 1A 的化合物和 89mg(0.18mmol) 来自实施例 28A 的化 合物， 连同 42mg(0.50mmol) 碳酸氢钠， 悬浮在 1.8ml 干燥的 DMF 中。 反应混合物在 RT 下搅拌 12h。混合物然后过滤并且滤液直接通过制备 HPLC 提纯 ( 柱 ： YMC GEL ODS-AQ S-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90(95 ∶ 5)。在旋转蒸发器上除去溶剂后， 获得作为白色固体 的产物。
产率 ： 16mg( 理论的 38％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.36(s ， 1H) ， 8.30-7.90(br.s ， 2H) ， 7.96(s ， 1H) ， 7.79(d ， 1H) ， 7.58(d ， 1H) ， 7.47(d ， 2H) ， 7.10(d ， 2H) ， 4.91(t ， 1H) ， 4.41(s ， 2H) ， 4.12-4.05(m， 2H)， 3.73(dt， 2H)， 2.41(s， 3H).
LC-MS( 方法 6) ： Rt ＝ 2.36min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 518[M+H]+.
在表 8 中列出的实施例类似于实施例 1 由适当的起始化合物制备 ：
表8
实施例 44
(+)-2- 氨基 -6-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-[4-(3， 3， 3- 三氟 -2- 羟基丙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈
来自实施例 33 的外消旋化合物 (67mg) 通过在手性相上 HPLC 色谱分离成两种对 映异构体 ( 也参见实施例 45)[ 柱 ： Daicel ChiralpakAD-H， 5μm， 250mm x 20mm ； 流动相 ： 乙醇 ； 流速 ： 10ml/min ； 温度 ： 35℃ ； 检测 ： 220nm]。
(+)- 对映异构体
产率 ： 33mg
Rt ＝ 6.86min[ 柱 ： Daicel Chiralpak AD-H， 5μm， 250mm x4.6mm ； 流动相 ： 乙醇 ； 流速 ： 1ml/min ； 温度 ： 40℃ ]
比旋光度 ： +1.2° (c ＝ 0.43g/100ml， 甲醇， n ＝ 589nm， T ＝ 20.4℃ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.37(s ， 1H) ， 8.28-7.91(br.s ， 2H) ， 7.98(d ， 2H)， 7.61(d， 2H)， 7.49(d， 2H)， 7.15(d， 2H)， 6.70(d， 1H)， 4.49-4.39(m， 1H)， 4.43(s， 2H)， 4.28(dd， 1H)， 4.16(dd， 1H).
LC-MS( 方法 7) ： Rt ＝ 2.34min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 572[M+H]+.
实施例 45
(-)-2- 氨基 -6-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-[4-(3， 3， 3- 三氟 -2- 羟基丙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈
来自实施例 33 的外消旋化合物 (67mg) 通过在手性相上 HPLC 色谱分离成两种对 映异构体 ( 也参见实施例 44)[ 柱 ： Daicel ChiralpakAD-H， 5μm， 250mm x 20mm ； 流动相 ： 乙醇 ； 流速 ： 10ml/min ； 温度 ： 35℃ ； 检测 ： 220nm]。
(-)- 对映异构体
产率 ： 33mg
Rt ＝ 8.73min[ 柱 ： Daicel Chiralpak AD-H， 5μm， 250mm x4.6mm ； 流动相 ： 乙醇 ； 流速 ： 1ml/min ； 温度 ： 40℃ ] 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.37(s ， 1H) ， 8.29-7.90(br.s ， 2H) ， 7.98(d ， 2H)， 7.61(d， 2H)， 7.49(d， 2H)， 7.16(d， 2H)， 6.70(d， 1H)， 4.49-4.39(m， 1H)， 4.43(s， 2H)，
4.28(dd， 1H)， 4.16(dd， 1H).
LC-MS( 方法 7) ： Rt ＝ 2.35min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 572[M+H]+.
实施例 46
(+)-2- 氨 基 -6-({[2-(4- 氯 苯 基 )-5- 甲 基 -1， 3- 噁 唑 -4- 基 ] 甲 基 } 硫 烷 基 )-4-[4-(3， 3， 3- 三氟 -2- 羟基丙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈
来自实施例 34 的外消旋化合物 (87mg) 通过在手性相上 HPLC 色谱分离成两种对 映异构体 ( 也参见实施例 47)[ 柱 ： Daicel ChiralpakAD-H， 5μm， 250mm x 20mm ； 流动相 ： 异己烷 / 异丙醇 1 ∶ 1(v/v) ； 流速 ： 15ml/min ； 温度 ： 40℃ ； 检测 ： 220nm]。
(+)- 对映异构体 ：
产率 ： 30mg
Rt ＝ 4.58min[ 柱 ： Daicel Chiralpak AD-H， 5μm， 250mm x4.6mm ； 流动相 ： 异己烷 / 异丙醇 1 ∶ 1(v/v) ； 流速 ： 1ml/min ； 温度 ： 40℃ ]
比旋光度 ： +11.1° (c ＝ 0.435g/100ml， DMF， n ＝ 589nm， T ＝ 19.6℃ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.20-7.88(br.s， 2H)， 7.92(d ， 2H) ， 7.58(d， 2H)， 7.49(d， 2H)， 7.15(d， 2H)， 6.70(d， 1H)， 4.52(s， 2H)， 4.48-4.37(m， 1H)， 4.28(dd， 1H)， 4.17(dd， 1H)， 2.48(s， 3H).
LC-MS( 方法 7) ： Rt ＝ 2.43min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 586[M+H]+.
实施例 47
(-)-2- 氨 基 -6-({[2-(4- 氯 苯 基 )-5- 甲 基 -1， 3- 噁 唑 -4- 基 ] 甲 基 } 硫 烷 基 )-4-[4-(3， 3， 3- 三氟 -2- 羟基丙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈
来自实施例 34 的外消旋化合物 (87mg) 通过在手性相上 HPLC 色谱分离成两种对 映异构体 ( 参见实施例 46)[ 柱 ： Daicel ChiralpakAD-H， 5μm， 250mm x 20mm ； 流动相 ： 异 己烷 / 异丙醇 1 ∶ 1(v/v) ； 流速 ： 15ml/min ； 温度 ： 40℃ ； 检测 ： 220nm]。
(-)- 对映异构体 ：
产率 ： 31mg
Rt ＝ 5.56min[ 柱 ： Daicel Chiralpak AD-H， 5μm， 250mm x4.6mm ； 流动相 ： 异己烷 / 异丙醇 1 ∶ 1(v/v) ； 流速 ： 1ml/min ； 温度 ： 40℃ ] 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.21-7.89(br.s， 2H)， 7.92(d ， 2H) ， 7.58(d ， 2H)， 7.50(d， 2H)， 7.16(d， 2H)， 6.70(d， 1H)， 4.52(s， 2H)， 4.48-4.39(m， 1H)， 4.29(dd， 1H)， 4.17(dd， 1H)， 2.48(s， 3H).
LC-MS( 方法 7) ： Rt ＝ 2.43min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 586[M+H]+.
实施例 48
2- 氨基 -6-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-(4-{[(2S)-2， 3- 二羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈
开始在 17ml 乙酸中加入 400mg(0.70mmol) 来自实施例 46A 的化合物， 并之后 小心地添加 8.6ml 水。混合物在 RT 下搅拌 12h。反应混合物在旋转蒸发器上浓缩后， 残 余物直接通过制备 HPLC 提纯 ( 柱 ： YMCGEL ODS-AQ S-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。在旋转蒸发器上除去溶剂后， 获得作为白色固体的产物。
产率 ： 340mg( 理论的 91％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.37(s， 1H)， 8.27-7.91(br.s， 2H)， 7.98(d， 2H)， 7.60(d， 2H)， 7.47(d， 2H)， 7.10(d， 2H)， 5.00(d， 1H)， 4.70(t， 1H)， 4.42(s， 2H)， 4.09(dd， 1H)， 3.96(dd， 1H)， 3.70(q， 1H)， 3.46(t， 2H).
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 2.48min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 534[M+H]+.
实施例 49
2- 氨基 -6-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-(4-{[(2R)-2， 3- 二羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈
开始在 23.5ml 乙酸中加入 403mg(80％纯， 0.56mmol) 来自实施例 47A 的化合物， 并之后小心地添加 23.5ml 水。反应混合物在 RT 下搅拌过夜和之后在旋转蒸发器上浓缩。 残余物在少许 DMF 中吸收并用制备 HPLC 提纯 ( 柱 ： YMC GEL ODS-AQ S-5/15μm ； 流动相梯 度： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。在旋转蒸发器上除去溶剂后， 获得作为白色固体的产物。
产率 ： 259mg( 理论的 86％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.37(s， 1H)， 8.30-7.89(br.s， 2H)， 7.98(d， 2H)， 7.61(d， 2H)， 7.48(d， 2H)， 7.10(d， 2H)， 5.00(d， 1H)， 4.70(t， 1H)， 4.42(s， 2H)， 4.09(dd， 1H)， 3.98-3.92(m， 1H)， 3.81(q， 1H)， 3.50-3.43(m， 2H).
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 2.51min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 534[M+H]+. 在表 9 中列出的实施例类似于实施例 48 和 49 由合适的起始化合物制备 ： 表9
实施例 95
4-{4-[({6- 氨 基 -3， 5- 二 氰 基 -4-[4-(2- 羟 基 -2- 甲 基 丙 氧 基 ) 苯 基 ] 吡 啶 -2- 基 } 硫代 ) 甲基 ]-5- 甲基 -1， 3- 噁唑 -2- 基 } 苯甲酸
40mg(0.07mmol) 来 自 实 施 例 17 的 化 合 物 和 11mg(0.28mmol) 氢 氧 化 钠 溶 于 12.8ml1， 2- 二甲氧基乙烷， 0.7ml 甲醇和 2.8ml 水。反应溶液在 RT 下搅拌 3h。混合物之 后在旋转蒸发器上浓缩。向残余物中添加 5ml 水。通过添加 1N 盐酸， pH 调整到 4。滤掉 产生的沉淀并用制备 HPLC 提纯 ( 柱 ： YMC GEL ODS-AQ S-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。在旋转蒸发器上除去溶剂后， 获得作为白色固体的产物。
产率 ： 19mg( 理论的 47％ ) 1
H-NMR(400MHz ，DMSO-d 6 ) ： δ ＝ 13.19(s ， 1H) ， 8.23-7.96(br.s ， 2H) ， 8.09-8.02(m ， 4H) ， 7.48(d ， 2H) ， 7.10(d ， 2H) ， 4.69(s ， 1H) ， 4.53(s ， 2H) ， 3.80(s ， 2H) ， 2.50(s， 3H)， 1.21(s， 6H).
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 2.41min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 556[M+H]+.
在表 10 中列出的实施例类似于实施例 95 由合适的起始化合物制备 ：
表 10
实施例 98
4-[4-({[6- 氨基 -3， 5- 二氰基 -4-(4-{[(2S)-2， 3- 二羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 ) 吡 啶 -2- 基 ] 硫代 } 甲基 )-5- 甲基 -1， 3- 噁唑 -2- 基 ] 苯甲酸
63mg(0.11mmol) 来 自 实 施 例 57 的 化 合 物 溶 于 3ml THF，并 添 加 220μl(0.22mmol)1M 氢氧化锂水溶液。在微波中， 反应混合物加热到 140 ℃， 并且混合 物在该温度下搅拌 15min。之后在旋转蒸发器上除去溶剂。残余物在 3ml 水中吸收并使 用大约 0.5ml 1N 盐酸调整到 pH4。形成沉淀， 其滤掉并用制备 HPLC 提纯 ( 柱 ： YMC GEL ODS-AQS-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。在旋转蒸发器上除去溶剂 后， 获得作为白色固体的产物。
产率 ： 3mg( 理论的 5％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 13.19(br.s， 1H)， 8.19-7.91(m， 6H)， 7.49(d， 2H)， 7.11(d， 2H)， 5.00(d， 1H)， 4.70(t， 1H)， 4.53(s， 2H)， 4.09(dd， 1H)， 3.95(dd， 1H)， 3.82(q， 1H)， 3.46(t， 2H)， 2.50(s， 3H).
LC-MS( 方法 11) ： Rt ＝ 1.56min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 558[M+H]+.
实施例 99
2- 氨基 -4-(4-{[(2S)-2， 3- 二羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 )-6-({[2-(3- 氟苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫代 ) 吡啶 -3， 5- 二腈
75mg(0.17mmol) 来自实施例 10A 的化合物和 38mg(0.18mmol) 来自实施例 21A 的 化合物溶于 2ml 干燥的 DMF， 添加 50mg(0.36mmol) 碳酸钾并且混合物在 RT 下搅拌 8h。之 后滴加 0.82ml(1.65mmol)2N 盐酸， 并且混合物在 RT 下再搅拌 1h。 过滤后， 在旋转蒸发器上 除去溶剂。残余物用制备 HPLC 提纯 ( 柱 ： YMC GEL ODS-AQ S-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。在旋转蒸发器上除去溶剂后， 获得作为白色固体的产物。
产率 ： 17mg( 理论的 20％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.39(s， 1H)， 8.27-7.89(br.s， 2H)， 7.81(d， 1H)， 7.70(d， 1H)， 7.59(q， 1H)， 7.46(d， 2H)， 7.39(dt， 1H)， 7.09(d， 2H)， 5.00(d， 1H)， 4.69(t， 1H)， 4.42(s， 2H)， 4.09(dd， 1H)， 3.94(dd， 1H)， 3.81(q， 1H)， 3.47(t， 2H).
LC-MS( 方法 2) ： Rt ＝ 2.06min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 518[M+H]+.
在表 11 中列出的实施例类似于实施例 99 由合适的起始化合物制备 ：
表 11
实施例 104
2- 氨 基 -6-({[2-(4- 氟 苯 基 )-5- 甲 基 -1， 3- 噁 唑 -4- 基 ] 甲 基 } 硫 代 )-4-(4-{[(2S)-2- 羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈
65mg(0.10mmol) 来自实施例 95A 的化合物溶于 4ml 甲醇， 并且添加 1.5ml 1N 盐 酸。混合物在 RT 下搅拌 12h。然后在旋转蒸发器上除去溶剂， 并且残余物通过制备 HPLC 提 纯(柱： YMC GEL ODS-AQS-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。在旋转蒸 发器上除去溶剂后， 获得作为白色固体的产物。
产率 ： 48mg( 理论的 91％ ) 1
H-NMR(400MHz ，DMSO-d 6 ) ： δ ＝ 8.20-7.91(br.s ， 2H) ， 7.49(d ， 2H) ， 7.35(pseudo-t ， 2H) ， 7.09(d ， 2H) ， 4.91(d ， 1H) ， 4.50(s ， 2H) ， 4.02-3.94(m ， 1H) ， 3.92-3.86(m， 2H)， 2.48(s， 3H)， 1.18(s， 3H).
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 2.67min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 516[M+H]+.
在表 12 中列出的实施例类似于实施例 104 由适当的起始化合物制备 ：
表 12
实施例 107
4-({[6- 氨基 -3， 5- 二氰基 -4-(4-{[(2R)-2， 3- 二羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 ) 吡 啶 -2- 基 ] 硫烷基 } 甲基 )-2- 苯基 -1， 3- 噁唑 -5- 羧酸
30mg(0.05mmol) 来自实施例 103 的化合物和 0.22ml(0.22mmol)1N 氢氧化钠水溶 液溶于 2ml1， 2- 二甲氧基乙烷， 2ml 水和 0.5ml 甲醇并且在 RT 下搅拌 3h。然后在旋转蒸发 器上除去溶剂并且残余物在 2ml 水中吸收。通过添加 1N 盐酸 pH 调整到 4。形成白色沉淀， 其伴随抽吸滤掉并且在减压下干燥。
产率 ： 8mg( 理论的 26％ ) 1
H-NMR(400MHz ， DMSO-d 6) ： δ ＝ 14.15-13.93(br.s ， 1H) ， 8.08-7.92(br.s ， 2H) ， 8.04(d ， 2H) ， 7.67-7.57(m ， 3H) ， 7.50(d ， 2H) ， 7.11(d ， 2H) ， 5.05-4.97(br.s ， 1H) ， 4.71(s， 2H)， 4.74-4.66(br.s， 1H)， 4.09(dd， 1H)， 3.99-3.89(m， 1H)， 3.87-3.79(br.s， 1H)， 3.51-3.43(m， 2H).
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 2.19min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 544[M+H]+.
实施例 108
N-[6-({[2-(4- 氯 苯 基 )-1， 3- 噁 唑 -4- 基 ] 甲 基 } 硫 代 )-3， 5- 二 氰 基 -4-(4-{[(2S)-2， 3- 二羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 ) 吡啶 -2- 基 ]-N- 甲基甘氨酸甲基酯
108mg(0.20mmol) 来 自 实 施 例 103A 的 化 合 物 溶 于 3ml 干 燥 的 DMF， 并添加 54mg(0.39mmol)N- 甲基甘氨酸甲基酯盐酸盐和 59mg(0.59mmol) 三乙胺。反应混合物在 RT 下搅拌 8h。然后在旋转蒸发器上除去溶剂并且残余物直接通过制备 HPLC 提纯 ( 柱 ： YMC GELODS-AQ S-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。在旋转蒸发器上除去
溶剂后， 获得作为白色固体的产物。
产率 ： 13mg( 理论的 11％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.19(s， 1H)， 7.98(d， 2H)， 7.62(d， 2H)， 7.55(d， 2H) ， 7.11(d ， 2H) ， 5.01(d ， 1H) ， 4.71(t ， 1H) ， 4.61(s ， 2H) ， 4.41(s ， 2H) ， 4.09(dd ， 1H) ， 3.97(dd， 1H)， 3.87-3.78(m， 1H)， 3.65(s， 3H)， 3.51-3.43(m， 5H).
LC-MS( 方法 5) ： Rt ＝ 3.65min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 620[M+H]+.
实施例 109
2- 氨基 -6-{[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲氧基 }-4-(4-{[(2R)-2， 3- 二 羟基丙基 ] 氧基 } 苯基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈
65mg(0.12mmol) 来自实施例 101A 的化合物溶于 6ml 乙酸， 并添加 3ml 水。混合物 在 RT 下搅拌 30min。混合物然后加热到 70℃并在该温度下再搅拌 30min。形成透明溶液。 混合物之后在旋转蒸发器上除去溶剂并且残余物通过制备 HPLC 提纯 ( 柱 ： YMC GEL ODS-AQ S-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。在旋转蒸发器上除去溶剂后， 获得 作为白色固体的产物。
产率 ： 60mg( 理论的 100％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.48(s， 1H)， 8.25-7.80(br.s， 2H)， 8.01(d， 2H)， 7.61(d， 2H)， 7.47(d， 2H)， 7.10(d， 2H)， 5.42(s， 2H)， 5.01(d， 1H)， 4.70(t， 1H)， 4.09(dd， 1H)， 3.95(dd， 1H)， 3.87-3.77(m， 1H)， 3.48(t， 2H).
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 2.30min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 518[M+H]+.
实施例 110
2- 氨基 -6-{[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲氧基 }-4-[4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈
72mg(0.64mmol) 叔 - 丁醇钾悬浮在 1ml 干燥的 1， 2- 二甲氧基乙烷中。然后顺次 地添加 270mg(1.29mmol) 来自实施例 100A 的化合物和 50mg(0.13mmol) 来自实施例 99A 的 化合物。反应混合物在 60℃下搅拌 2h 和然后冷却到 RT 并且在该温度下再搅拌 8h。然后 向混合物中加入 5ml 水和 1ml 2N 乙酸。形成沉淀， 其伴随抽吸滤掉并且通过制备 HPLC 提 纯(柱： YMC GEL ODS-AQ S-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。在旋转 蒸发器上除去溶剂产生作为黄色固体的产物。
产率 ： 44mg( 理论的 70％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.48(s， 1H)， 8.18-7.85(br.s， 2H)， 8.00(d， 2H)， 7.62(d， 2H)， 7.48(d， 2H)， 7.11(d， 2H)， 5.41(s， 2H)， 4.91(t， 1H)， 4.08(t， 2H)， 3.73(q， 2H). +
LC-MS( 方法 14) ： Rt ＝ 1.22min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 488[M+H] .
在表 13 中列出的实施例类似于实施例 110 由适当的起始化合物制备 ：
表 13
实施例 113
2- 氨基 -6-{[2-(4- 氟苯基 )-5- 甲基 -1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲氧基 }-4-[4-(2- 羟 基乙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈
开始向 8.6ml 干燥的 DMF 中加入 250mg(0.81mmol) 来自实施例 102A 的化合物， 228mg(1.013mmol)4-( 氯甲基 )-2-(4- 氟苯基 )-5- 甲基 -1， 3- 噁唑和 224mg(1.62mmol) 碳酸钾并在 70℃下搅拌 2h。然后在旋转蒸发器上除去溶剂并且残余物通过制备 HPLC 提纯 (柱： YMC GELODS-AQ S-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。产物然后再 次通过 HPLC 提纯 ( 柱 ： Waters Sunfire C18 5μm， 250mm x 20mm ； 流动相梯度 ： 水 / 乙醇
55 ∶ 45 → 5 ∶ 95 ； 流速 ： 25ml/min ； 温度 ： 30℃ ； 检测 ： 210nm)。
产率 ： 56mg( 理论的 14％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.07-7.87(br.s， 2H)， 8.03-7.98(m， 2H)， 7.48(d， 2H)， 7.37(t， 2H)， 7.10(d， 2H)， 5.40(s， 2H)， 4.91(t， 1H)， 4.08(t， 2H)， 3.74(q， 2H)， 2.49(s， 3H).
LC-MS( 方法 14) ： Rt ＝ 1.18min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 486[M+H]+.
在表 14 中列出的实施例类似于实施例 113 由适当的起始化合物制备 ：
表 14
实施例 116
2-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-[4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ]-6-( 吡咯烷 -1- 基 ) 吡啶 -3， 5- 二腈
开始向 2ml 干燥的 THF 中加入 80mg(0.15mmol) 来自实施例 123A 的化合物， 并 添加 22mg(0.31mmol) 吡咯烷。反应混合物在 RT 下搅拌 10h。然后添加大约 2ml 水， 并且 混合物直接通过制备 HPLC 提纯 ( 柱 ： YMC GEL 0DS-AQ S-5/15μm ； 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。在旋转蒸发器上除去溶剂后， 获得作为白色固体的产物。
产率 ： 26mg( 理论的 30％ ) 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.20(s， 1H)， 7.97(d， 2H)， 7.61(d， 2H)， 7.49(d，
2H)， 7.11(d， 2H)， 4.91(t， 1H)， 4.51(s， 2H)， 4.09(t， 2H)， 3.91-3.81(br.s， 4H)， 3.74(q， 2H)， 2.02-1.91(br.s， 4H).
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 3.02mm ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 558[M+H]+.
在表 15 中列出的实施例类似于实施例 116 由适当的起始化合物制备 ：
表 15
在表 16 中列出的实施例类似于实施例 48 由适当的起始化合物制备 ： 表 16实施例 122
2-({[2-(4- 氯苯基 )-1， 3- 噁唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-[3- 氟 -4-(2- 羟基乙 氧基 ) 苯基 ]-6-[(2- 羟基乙基 ) 氨基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈
开 始 向 1ml THF 中 加 入 25mg(0.046mmol)2- 氯 -6-({[2-(4- 氯 苯 基 )-1， 3- 噁 唑 -4- 基 ] 甲基 } 硫烷基 )-4-[3- 氟 -4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -3， 5- 二腈 ( 实施 例 125A)， 添加 6μl 2- 氨基乙醇并且混合物在室温下搅拌 30 分钟。反应混合物然后直接 通过制备 HPLC 提纯 ( 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。这产生 24mg( 理论的 94％ ) 目标化合物。 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.20(s， 1H)， 8.08(t， 1H)， 7.98(d， 2H)， 7.61(d， 2H)， 7.51(dd， 1H)， 7.39-7.31(m， 2H)， 4.51(s， 2H)， 4.16(t， 2H)， 3.76(t， 2H)， 3.67-3.62(m， 2H)， 3.58-3.55(m， 2H).
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 2.52min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 566[M+H]+.
实施例 123
4-[({6- 氨基 -3， 5- 二氰基 -4-[4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -2- 基 } 硫烷基 ) 甲基 ]-2- 苯基 -1， 3- 噁唑 -5- 羧酸
开 始 向 6ml THF 中 加 入 100mg(0.190mmol)4-[({6- 氨 基 -3， 5- 二 氰 基 -4-[4-(2- 羟基乙氧基 ) 苯基 ] 吡啶 -2- 基 } 硫烷基 ) 甲基 ]-2- 苯基 -1， 3- 噁唑 -5- 羧 酸甲基酯 ( 实施例 36)， 添加 379μl(0.379mmol)1N 氢氧化锂水溶液并且混合物在室温下 搅拌 30 分钟。反应混合物然后浓缩， 向残余物中加入水并且混合物用 1N 盐酸酸化。滤掉 沉淀固体并且通过制备 HPLC 提纯 ( 流动相梯度 ： 乙腈 / 水 10 ∶ 90 → 95 ∶ 5)。这产生
23mg( 理论的 23％ ) 目标化合物。 1
H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ： δ ＝ 8.03(dd， 2H)， 7.98-7.95(m， 2H)， 7.63-7.56(m， 3H)， 7.50(d， 2H)， 7.11(d， 2H)， 4.80(s， 2H)， 4.08(t， 2H)， 3.74(t， 2H).
LC-MS( 方法 3) ： Rt ＝ 2.38min ； MS(ESIpos) ： m/z ＝ 514[M+H]+.
在表 17 中列出的实施例类似于实施例 116 由适当的起始化合物制备 ：
表 17
* 反应在作为溶剂的 DMF( 代替 THF) 中进行 B. 评价药理学和生理活性 根据本发明的化合物的药理学和生理活性可以在以下试验中显示 ：B-1. 通过基因表达腺苷激动的间接测定
CHO( 中国仓鼠卵巢 ) 细胞永久细胞系细胞系用 cDNA 稳定地转染用于腺苷受体亚 型 A1， A2a 和 A2b。腺苷 A1 受体通过 Gi 蛋白偶联到腺苷酸环化酶上， 而腺苷 A2a 和 A2b 受体通过 Gs 蛋白偶联。与这一致， 分别抑制或者刺激细胞中的 cAMP 的形成。然后， 荧光素酶 的表达通过依赖于 cAMP 的促进剂调节。为了高灵敏度和可再现性， 低差异和在自动控制系 统上实施的优良适合性， 通过改变几个试验参数， 例如细胞密度， 生长期的持续时间和试验 培养， 毛喉素浓度和培养基组成优化荧光素酶试验。以下试验规程用于药理学特征细胞和 用于机器人帮助的物质筛选 ：
储用培养物在 37℃下和在 5％ CO2 下， 在包含 10％ FCS( 胎儿小牛血清 ) 的 DMEM/ F12 培养基中生长并且每一种情况下 2-3 天后 1 ∶ 10 分离。该试验培养物在 384- 孔板中 用每孔 2000 个细胞接种并且在 37℃下生长大约 48 小时。培养基然后用生理氯化钠溶液 (130mM 氯化钠， 5mM 氯化钾， 2mM 氯化钙， 20mM HEPES， 1mM 氯化镁六水合物， 5mM 碳酸氢钠， pH -11 -6 7.4) 替换。 要试验的物质， 其溶于 DMSO， 以从 5×10 M 到 3×10 M( 最后浓度 ) 的稀释系列 移液到试验培养物 ( 在试验混合物中 DMSO 的最大最后浓度 ： 0.5％ ) 中。 10 分钟过后， 向 A1 细胞中加入毛喉素并且所有的培养物随后在 37℃下培养四小时。然后， 向试验培养物中加 入 35μl 由 50％溶胞试剂 (30mM 磷酸氢二钠， 10％甘油， 3％ TritonX100， 25mM TrisHCl， 2mM 二硫苏糖醇 (DTT)， pH 7.8) 和 50％荧光素酶底物溶液 (2.5mM ATP， 0.5mM 莹光素， 0.1mM 辅 酶 A， 10mM 曲辛， 1.35mM 硫酸镁， 15mM DTT， pH 7.8) 组成的溶液， 其振荡大约 1 分钟并且使用 即， 在 A1 细胞情况下 50％荧光素酶响应被抑 照相机系统测定荧光素酶活性。测定 EC50 值， 制的浓度， 并且， 分别在 A2b 和 A2a 细胞情况下获得用相应物质最大刺激的 50％。腺苷 - 类 似的化合物 NECA(5-N- 乙基甲酰胺腺苷 )， 其与所有的具有高亲合力的腺苷受体亚型结合 并且具有对抗作用， 作为参考化合物用于这些实验 [Klotz， K.N.， Hessling， J.， Hegler， J.， Owman， C.， Kull， B.， Fredholm， B.B.， Lohse， M.J.， “Comparative pharmacology ofhuman adenosine receptor subtypes characterization of stably transfectedreceptors in CHO cells” ， Naunyn Schmiedebergs Arch.Pharmacol.， 357(1998)， 1-9)。
以下表 18 列出了用于对腺苷 A1， A2a 和 A2b 受体亚型的受体刺激的代表性操作实 施例的 EC50 值 ：
表 18
EC50A1[nM] 实施例号 (1μM 毛喉素 ) 10 11 31 48 49 50 0.5 0.3 0.9 0.3 0.4 0.4 [nM] 1130 703 467 138 300 3000 [nM] 922 845 315 4.4 100 118 EC50A2a EC50A2b165101939317 A CN 10193932057 60 61 66 80 81 93 95 101 106 110 114 116 117 119 122 0.2 0.3 0.7 0.9 0.8 0.3 8.9 0.5 0.4 0.3 0.3 0.2 0.4 0.2 0.3 4.1 EC50A1[nM] 实施例号说明525书44 236 221 370 89 20 336 3000 226 48 95 969 698 1090 3000 2250 EC50A2b [nM] 78 283 237 3000 245161/164 页3000 439 575 461 64 522 3000 72 318 497 1970 3000 1440 1950 3000 EC50A2a [nM] 684 984 1050 3000 3000(1μM 毛喉素 ) 126 127 128 129 130 0.5 0.4 0.1 0.4 0.6
B-2. 对离体血管的研究 切除麻醉大鼠的尾动脉并且装在常规仪器上用于测定离体血管。 在热浴中灌注血管并且使用去氧肾上腺素收缩。使用收缩仪测定收缩的程度。向预收缩的血管中加入试验 物质， 并且测定血管收缩的减少。收缩的减少相当于血管的扩张。血管收缩减少 50％时的 浓度作为试验物质相对于其松驰性质的 EC50 值给出。
B-3. 对醒觉大鼠血压和心率的测定
口服各种剂量的试验物质以唤醒携带能够永久测定血压和心率的内部发射器的 SHR 大鼠 ( 自发高血压大鼠 )( 遥测监控血液动力学参数 )。然后在 24 小时期间内记录血 压， 心率和它们的变化。
B-4. 对醒觉绒猴血压和心率的测定
口服各种浓度的试验物质以唤醒携带能够测定血压和心率的内部发射器的绒猴 ( 遥测监控血液动力学参数 )。然后在 6-24 小时期间内记录血压， 心率和它们的变化。
B-5. 静脉内服用和口服后药效动力学参数的测定
作为给动物 ( 例如小鼠， 大鼠， 狗 ) 的溶液静脉内服用要试验的物质， 并且口服作 为溶液或者悬浮液通过填喂法进行。服用该物质后， 在固定时间由动物身上采血并且肝素 化， 然后从此通过离心作用获得血浆。该物质通过 LC/MS-MS 在血浆中量化分析。通过确 认的药效动力学计算机程序以这种方法发现的血浆浓度 / 时间过程用于计算药效动力学 T1/2( 半衰期 ) 和 CL( 廓清 参数， 例如 AUC( 在量时曲线下的面积 )， Cmax( 最大血浆浓度 )， (clearance))。
B-6. 溶解性的测定
需要的试剂 ：
● PBS 缓 冲 液 pH 6.5 ： 90.00g NaCl p.a.( 例 如 来 自 Merck，物 品 编 号 1.06404.1000)， 13.61g KH2PO4 p.a.( 例如来自 Merck， 物品编号 1.04873.1000) 和 83.35g 1N 氢氧化钠水溶液 ( 例如来自 Bernd Kraft 有限公司， 物品编号 01030.4000) 称重加入到 1 升容量瓶中， 该容量瓶用蒸馏水加满到 1 升并且混合物搅拌 1 小时。之后使用 1N 盐酸 ( 例 如来自 Merck， 物品编号 1.09057.1000) 将 pH 调整到 6.5。
● PEG/ 水溶液 (70 ∶ 30v/v) ： 在 100ml 容量瓶中均化 70ml 聚乙二醇 400( 例如 来自 Merck， 物品编号 8.17003.1000) 和 30ml 蒸馏水。
● PEG/PBS 缓冲液 pH 6.5(20 ∶ 80v/v) ： 在 100ml 容量瓶中均化 20ml 聚乙二醇 400( 例如来自 Merck， 物品编号 8.17003.1000) 和 80mlPBS 缓冲液 pH 6.5。
●二甲基亚砜 ( 例如来自 Baker， 物品编号 7157.2500)
●蒸馏水
起始溶液 ( 原始溶液 ) 的制备 ：
精确称量至少 4mg 试验物质到具有装配螺帽和隔膜的广颈 10mm 螺旋 V 管瓶 ( 来 自 Glastechnik 有限公司， 物品编号 8004-WM-H/V15μ) 中， 在自动移液装置 中 DMSO 添加到 50mg/ml 浓度并且混合物振荡 10 分钟。
[1000] 校准溶液的制备 ：
[1001] 用于校准溶液的起始溶液 ( 储备溶液 ) 的制备 ： 借助于自动移液装置， 10μl 原始 溶液转移到微量滴定板中并且用 DMSO 配制到 600μg/ml 浓度。振荡样品直到所有东西已 经溶解。
[1002] 校准溶液 1(20μg/ml) ： 向 34.4μl 储备溶液中添加 1000μlDMSO， 并且均化混合物。
[1003] 校准溶液 2(2.5μg/ml) ： 向 100μl 校准溶液 1 中添加 700μlDMSO， 并且均化混合物。 样品溶液的制备 ：
[1005] 在 PBS 缓冲液 pH 6.5 中最多 5g/ 升溶解度的样品溶液 ： 10μl 原始溶液转移到微 量滴定板中， 并且添加 1000μl PBS 缓冲液 pH 6.5。
[1006] 在 PEG/ 水 (70 ∶ 30) 中最多 5g/ 升溶解度的样品溶液 ： 10μl 原始溶液转移到微 量滴定板中， 并且添加 1000μl PEG/ 水 (70 ∶ 30)。
[1007] 在 PBS/PBS 缓冲液 pH 6.5(20 ∶ 80) 中最多 5g/ 升溶解度的样品溶液 ： 10μl 原 始溶液转移到微量滴定板中， 并且添加 1000μl PEG/PBS(20 ∶ 80) 缓冲液 pH 6.5。
[1008] 实践 ：
[1009] 在 20℃下用这样的方式制备的样品溶液在温度可调的振动器 ( 例如具有可互换 的部件物品编号 5362.000.019 的 Eppendorf Thermomixercomfort 物品编号 5355000.011) 中在 1400rmp 下振荡 24 小时。在每一种情况下由这些溶液取 180μl 并且转移到 Beckman PolyallomerCentrifuge Tubes( 物品编号 343621) 中。这些溶液在大约 223000xg 下离 心一个小时 ( 例如在 42000rmp 下具有 Type 42.2 Ti Rotor 的 Beckman Optima L-90K Ultracentrifuge)。由样品溶液中的每一个， 除去 100μl 上清液并且用 DMSO 1 ∶ 5 和 1 ∶ 100 稀释。由每个稀释液， 样品转移到容器中用于 HPLC 分析。
[1010] 分析 ：
[1011] 通过 RP-HPLC 分析样品。 在 DMSO 中使用试验化合物的两点校准曲线进行量化。 溶 解度用 mg/ 升表示。分析顺序 ： 1) 校准溶液 2.5mg/ml ； 2) 校准溶液 20μg/ml ； 3) 样品溶液 1∶5； 4) 样品溶液 1 ∶ 100。
[1012] 用于酸的 HPLC 方法 ：
[1013] 具有 DAD(G1315A) 的 Agilent 1100， 定量泵 (G1311A)， 自动取样器 CTC HTS PAL， 脱气装置 (G1322A) 和柱恒温箱 (G1316A) ； 柱： Phenomenex Gemini C18， 50mm x 2mm， 5μ ； 温度 ： 40 ℃ ； 流动相 A ： 水 / 磷酸 pH 2 ； 流动相 B ： 乙腈 ； 流速 ： 0.7ml/min ； 梯度 ： 0-0.5min 85 ％ A， 15 ％ B ； 坡度 (ramp) ： 0.5-3min 10 ％ A， 90 ％ B ； 3-3.5min 10 ％ A， 90 ％ B ； 坡度 ： 3.5-4min 85％ A， 15％ B ； 4-5min85％ A， 15％ B。
[1014] 用于碱的 HPLC 方法 ：
[1015] 具有 DAD(G1315A) 的 Agilent 1100， 定量泵 (G1311A)， 自动取样器 CTC HTS PAL， 脱 气 装 置 (G1322A) 和 柱 恒 温 箱 (G1316A) ； 柱： VDSoptilab Kromasil 100 C18， 60mm x 2.1mm， 3.5μ ； 温度 ： 30 ℃ ； 流动相 A ： 水 +5ml 高氯酸 / 升 ； 流动相 B ： 乙腈 ； 流速 ： 0.75ml/ min ； 梯度 ： 0-0.5min 98 ％ A， 2％ B ； 坡度 ： 0.5-4.5min 10 ％ A， 90 ％ B ； 4.5-6min 10 ％ A， 90％ B ； 坡度 ： 6.5-6.7min 98％ A， 2％ B ； 6.7-7.5min 98％ A， 2％ B。
[1016] B-7. 新陈代谢稳定性的测定
[1017] 为了测定试验化合物的新陈代谢稳定性， 该化合物用肝微体或者优选用多种动物 种类 ( 例如来自大鼠和狗 ) 和人起源的初级新生肝细胞离体培养以获得和以比较尽可能完 全的肝相 I 和相 II 代谢作用的代谢物概貌。
[1004] 试验化合物在 10-20μM 浓度下培养。为此， 制备在乙腈中 1-2mM 浓度的该物质的储备溶液和之后在 1 ∶ 100 的稀释度下移液到培养混合物中。 肝微体在 37℃下在 50mM 磷酸 + 钾缓冲液 (pH 7.4) 中有和没有由 1mM NADP ， 10mM 葡糖 -6- 磷酸盐和 1 单位葡糖 -6- 磷酸 脱氢酶组成的 NADPH- 生成系统地培养。初级肝细胞同样在 37℃下在悬浮液中在 Williams E 培养基中培养。0-4 小时培养时间后， 培养混合物用乙腈 ( 最后浓度大约 30％ ) 停止并且 在大约 15000xg 下离心掉蛋白质。用这样的方式抑制的样品直接分析或者在 -20℃下存储 直到分析。
[1019] 分析使用具有紫外线和质谱检测的高效液相色谱 (HPLC-UV-MS/MS) 进行。为此， 培养样品的上清液使用合适的 C18 反相柱和乙腈和 10mM 甲酸铵水溶液的可变流动相混合 物层析。UV 色谱与质谱测定的 MS/MS 数据结合用来识别代谢物和以解释它们的结构。
[1020] C. 药物组合物的操作实施例
[1021] 本发明的化合物可以以以下方法转变成药物制剂 ：
[1022] 片剂 ：
[1023] 组合物 ：
[1024] 100mg 本发明的化合物， 50mg 乳糖 ( 一水化物 )， 50mg 玉米淀粉 ( 国产 )， 10mg 聚 乙烯吡咯烷酮 (PVP 25)( 来自 BASF， Ludwigshafen， 德国 ) 和 2mg 硬脂酸镁。
[1025] 片剂重量 212mg， 直径 8mm， 曲率半径 12mm。
[1026] 生产 ：
[1027] 本发明的化合物， 乳糖和淀粉的混合物用水中 PVP 的 5％浓度溶液 (m/m) 制粒。 干 燥颗粒并且与硬脂酸镁混合 5 分钟。该混合物在常规压片机中压缩 ( 对于片剂的形式参见 上面 )。对于压缩指导压力是 15kN。
[1028] 可以口服的悬浮液 ：
[1029] 组合物 ：
[1030] 1000mg 本发明的化合物， 1000mg 乙醇 (96 ％ )， 400mg( 来自 FMC 的黄原胶， 宾夕法尼亚， 美国 ) 和 99g 水。 10ml 口服悬浮液相当于具有 100mg 本发明的化合物的单剂量。
[1032] 生产 ：
[1033] Rhodigel 悬浮在乙醇中， 并且向悬浮液中加入本发明的化合物。 添加水同时搅拌。 混合物搅拌大约 6h 直到 Rhodigel 的溶胀结束。
[1034] 可以口服的溶液 ：
[1035] 组合物 ：
[1036] 500mg 本发明的化合物， 2.5g 聚山梨酸酯和 97g 聚乙二醇 400。20g 口服溶液相当 于具有 100mg 本发明的化合物的单剂量。
[1037] 生产 ：
[1038] 伴随搅拌， 本发明的化合物悬浮在聚乙二醇和聚山梨酸酯的混合物中。继续搅拌 过程直到本发明的化合物已经完全溶解。
[1039] 体内溶液 ：
[1031] 本发明的化合物以低于在生理耐受的溶剂 ( 例如等渗盐水， 5％葡萄糖溶液和 / 或 30％ PEG 400 溶液 ) 中的饱和溶解度的浓度溶解。溶液通过过滤杀菌并且用于灌装无菌的 和无热原的注射容器。
[1040] 169