《包含糖类配体的分离材料.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《包含糖类配体的分离材料.pdf（37页完整版）》请在专利查询网上搜索。
1、10申请公布号CN104053462A43申请公布日20140917CN104053462A21申请号201280044201022申请日2012080711176769520110808EPA61M1/36200601B01J20/26200601B01J20/289200601B01J20/3220060171申请人甘布罗伦迪亚股份公司地址瑞典隆德72发明人M伦普佛W弗罗伊登曼M施托尔C温茨R弗利格M克洛茨S霍迈尔T克内尔74专利代理机构中国国际贸易促进委员会专利商标事务所11038代理人唐伟杰54发明名称包含糖类配体的分离材料57摘要本发明涉及分离材料，其包含经由连接体结合至基体的糖类，。
2、用于使得可以将物质从选择性结合至糖类部分的液体分离；涉及制备这种材料的方法；涉及将物质从选择性结合至糖类的液体分离的方法；和涉及包括用于将物质从选择性结合至糖类的液体分离的分离材料的装置。30优先权数据85PCT国际申请进入国家阶段日2014031286PCT国际申请的申请数据PCT/EP2012/0653882012080787PCT国际申请的公布数据WO2013/020964EN2013021451INTCL权利要求书3页说明书30页附图3页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书3页说明书30页附图3页10申请公布号CN104053462ACN104053462A1/3。
3、页21分离材料，包含通式I代表的糖类连接体基体糖类XR1R2R1RR3R1NEMF基体I其中X代表O，S，CH2或NR，其中R代表H，甲基或保护基团，所述保护基团选自乙酰基AC，三氟乙酰基TFA，三氯乙酰基，苯甲酰基BZ，苄基BN，叔丁氧基羰基BOC，苄氧羰基CBZ，对甲氧基苄基羰基MOZ，9芴基甲基氧基羰基FMOC，乙烯基氧基羰基VOC，烯丙氧基羰基ALLOC，对甲氧基苄基PMB，3,4二甲氧基苄基DMB，对甲氧基苯基PMP，三苯基甲基TR，甲苯磺酰基TS和硝基苯磺酰基NS，R1彼此独立地代表直链或支化的C1C10烷基，其中所述烷基可以是未经取代的，或用至少一个适宜取代基取代，所述取代基选自。
4、包含下述的取代基的组卤素，烷基，烷氧基，卤代烷基，氰基，硝基，氨基，羟基，硫醇，酰基氨基，烷氧羰基氨基，卤代烷氧羰基氨基或烷基磺酰基氨基，R2彼此独立地代表CONH，NHCO，CONHNH，NHNHCO，NCH，CHN，NHNCH，CHNNH或三唑基，R3彼此独立地代表O，CONH，NHCO，NCH或CHN，R代表0或110的整数，N代表0或1600的整数，E代表NH，CO，O，S，N，CH，NHNH，NHN或三唑基，F代表NH，N，CH，CO，CH2CHOH，NHCH2CHOH，NHNH，NNH，CONH，NHCO或三唑基，和M代表0或1。2根据权利要求1的分离材料，其中X代表O，S或NR，。
5、其中R代表氢，甲基或适宜的保护基团，R1彼此独立地代表未经取代的或取代的甲基，乙基，正或异丙基，正、异、仲或叔丁基，正戊基，正己基，正庚基，正辛基，正壬基或正癸基，其中取代基选自包含下述的取代基的组卤素，烷基，氨基，羟基或硫醇，R2彼此独立地代表CONH，NHCO，CONHNH，NHNHCO，NCH，或CHN，R3彼此独立地代表O，CONH，NHCO，NCH或CHN，R代表1，E代表NH，CO，O，或S，F代表NH，N，CO，CH2CHOH，NHCH2CHOH或CONHNH，和M代表1。3根据权利要求1或2的分离材料，其中所述连接体选自包含下述的连接体的组XCH2SNHCOCH2SCONH，X。
6、CH2SCONHCH2SNHCOCH2SCONH，XCH2SNHCOCH2OC2H4LOCH2CONH，XCH2SCONHCH2SNHCOCH2OC2H4LOCH2CONH，XCH2SCONH，XCH2SNHCOCH2SCONHCH2SNHCOCH2SCONH，权利要求书CN104053462A2/3页3XCH2SCONHCH2SNHCOCH2SCONHCH2SNHCOCH2SCONH，XCH2SCONHCH2SNHCOCH2SNHCH2CHOH，XCH2SNHCOCH2SNHCH2CHOH，XCH2SCONHCH2SNHCOCHNH2CH22CONHCHSHCONHCH2CONHCH2CHO。
7、H，其中X代表O，N，S或CH2；和S彼此独立地代表110的整数，和L代表1600的整数。4根据权利要求1至3中任一项的分离材料，其中所述基体是合成的聚合物，肽或多糖。5根据权利要求5的分离材料，其中所述基体制备自亲水和/或疏水性合成的聚合物，所述聚合物选自聚乙烯PE，聚甲醛POM，聚丙烯PP，聚氯乙烯PVC，聚乙酸乙烯酯PVA，聚偏二氯乙烯PVDC，聚苯乙烯PS，聚四氟乙烯PTFE，聚丙烯酸盐/酯，聚甲基丙烯酸甲酯PMMA，聚丙烯酰胺，聚甲基丙烯酸缩水甘油基酯PGMA，丙烯腈丁二烯苯乙烯ABS，聚丙烯腈PAN，聚酯，聚碳酸酯，聚对苯二甲酸乙二醇酯PET，聚酰胺，聚芳酰胺，聚乙二醇PEG，聚乙。
8、烯基吡咯烷酮PVP，聚砜PS，聚醚砜PES，聚芳基醚砜PAES，乙烯乙酸乙烯酯EVA，乙烯乙烯醇EVOH，聚酰胺酰亚胺，聚芳基醚酮PAEK，聚丁二烯PBD，聚丁烯PB，聚对苯二甲酸丁二醇酯PBT，聚己酸内酯PCL，聚羟基烷酸酯/盐，聚醚醚酮PEEK，聚醚酮酮PEKK，聚醚酰亚胺PEI，聚酰亚胺，聚乳酸PLA，聚甲基戊烯PMP，聚对亚苯基醚PPE，聚氨酯（氨基甲酸酯，氨基甲酸乙酯）PU，苯乙烯丙烯腈SAN，聚丁烯酸，聚4烯丙基苯甲酸，聚缩水甘油基丙烯酸盐/酯，聚甲基丙烯酸缩水甘油基酯PGMA，聚烯丙基缩水甘油基醚，聚乙烯基缩水甘油基醚，聚乙烯基缩水甘油基聚氨酯（聚乙烯基缩水甘油基氨基甲酸酯），聚。
9、烯丙基胺，聚乙烯胺，及前述物质的共聚物。6根据权利要求4或5的分离材料，其中所述基体制备自亲水和/或疏水性合成的聚合物，所述聚合物选自包含下述的组聚丙烯酸盐/酯PA，聚甲基丙烯酸甲酯PMMA或聚甲基丙烯酸缩水甘油基酯PGMA，聚乙烯基吡咯烷酮PVP，聚砜PS，聚醚砜PES，聚芳基醚砜PAES，及前述物质的组合。7根据权利要求4或5的分离材料，其中所述基体具有珠粒、平片膜或中空纤维膜的形式。8根据权利要求7的分离材料，其中所述平片或中空纤维膜在偶联连接体和糖类之前用气体等离子体处理。9根据权利要求1至8中任一项的分离材料，其中所述糖类是能够结合至另外的分子、蛋白质或细胞的单糖、二糖、三糖或低聚糖。
10、。10根据权利要求10的分离材料，其中所述糖类是血型A决定子或/和血型B决定子。11从液体选择性地分离具有结合至糖类的能力的物质的方法，其中使用根据权利要求1至10中任一项的分离材料。12根据权利要求11的方法，其中所述液体是全血或血液产品。权利要求书CN104053462A3/3页413包括根据权利要求1至12中任一项的分离材料的装置，用于从液体分离物质，所述液体具有对分离材料的糖类的亲和力。14制备根据权利要求1至10中任一项的分离材料的方法，包括下述步骤A提供式IV基体F1基体IV，其中F1代表H2N，N3，HOOC，OHC，NH2NH，CC或环氧；B提供通式V糖类糖类XR1R2R1RY。
11、V，其中X，R，R1和R2如权利要求1或2中所定义，和Y代表COOH，NH2，CC，N3，NHNH2或OH；和C将糖类偶联至基体。15根据权利要求14的方法，具有额外步骤B2提供式III化合物R3AR1R3R1NE1III，其中R1，R3和N如权利要求1或2所定义，R3A代表HOOC，H2N，CC，N3，NH2NH或OH，和E1代表COOH，CHO，NH2，SH，OH，N3，NHNH2或CC；其中在步骤C中首先将式III化合物偶联至式IV基体，随后将所得产物偶联至式V糖类。16根据权利要求15的方法，其中步骤C中糖类至基体的偶联在作为溶剂的甲醇或PEG200存在下进行。权利要求书CN10405。
12、3462A1/30页5包含糖类配体的分离材料技术领域0001本发明涉及分离材料，其包含经由连接体结合至糖类的基体，用于使得可以将物质从选择性结合至糖类部分的液体分离。本发明还涉及制备所述分离材料的方法，涉及将物质从选择性结合至糖类的液体分离的方法和涉及包括所述分离材料的装置，所述材料用于将糖类结合物质从液体分离。0002发明背景0003EP1165159B1是涉及处理全血或血浆的柱，涉及从全血或血浆体外除去血型A和血型B抗体的方法，涉及糖类连接体O基体产品和涉及在体外处理期间其在柱中的用途。所公开的糖类是血型决定子A或血液决定子B，而基体能够是高分子物质或多糖，特别是琼胶糖。连接体是能够带有芳。
13、族部分、肽、蛋白质或多糖的烷基。0004US7,700,746B2公开过滤材料，包含偶联至连接体的糖类，连接体又偶联至琼胶糖基体，其中所述连接体是烷基二胺或苯胺基烷基醇衍生物。0005虽然这些分离材料显示良好的结合和除去例如血液抗体的特性，仍然希望提供使得可以增强效力的新材料。发明概要0006本发明目的是提供新的分离材料，用于选择性地从液体，优选全血或血液组分比如血浆，分离物质。0007在本发明的一个实施方式中，所述材料设计用来从全血或血浆除去抗A和/或抗B抗体。0008根据本发明的一个方面，提供包含糖类连接体基体的分离材料。糖类糖苷式（通过糖苷键）偶联至连接体，连接体连接至基体。0009在本。
14、发明的一个实施方式中，糖类是血型决定子。在本发明的另外的实施方式中，糖类是血型抗体的配体。所述血型抗体是抗A或抗B抗体。在本发明的另外的实施方式中，基体是合成的聚合物物质、肽或多糖。0010根据本发明的另外的方面，提供用本发明的分离材料从液体选择性地分离或除去物质的方法。在本发明的一个实施方式中，液体是全血或血浆。0011根据本发明的另外的方面，提供用于从液体选择性地分开、除去或分离物质的装置，其包括根据本发明的分离材料。在本发明的一个实施方式中，所述装置用来从全血或血浆除去某些血液组分。在本发明的另外的实施方式中，所述血液组分是血型抗体。0012附图描述0013图10014图1B显示等离子体。
15、氨基官能化的壁厚50M的中空纤维膜的二光子激发显微技术图像。还显示相对荧光光谱图1A。氨基官能团与作为荧光团的4氟7硝基苯并2氧杂1,3二唑NBDF反应。图像面积是100MX50M。光谱X轴显示按M计的宽度，Y轴显示相对荧光强度。说明书CN104053462A2/30页60015图20016图2显示滴定度降低IGG和IGM对糖类量TSB_ANA和用式II连接体，6氨基己酸官能化初始基体的量的比例的依赖性也参见实例25。X轴显示基体上存在的糖类总量TSB_ANAMOL/G与基体上存在的连接体总量6AHSMMOL/G的比例，按计。图2A显示对于平均颗粒尺寸范围直径100300M的基体的结果MITS。
16、UBISHIRELIZYMETMEXE135。图2B显示对于平均颗粒尺寸范围直径2590M基体的结果MITSUBISHIRELIZYMETMEXE148。由此可见，对于所用基体存在涉及用6AHS官能化基体的量的某些优选范围，其不能通过增加固定化于材料上的糖类的量得以显著改善。相应地，对于各基体的最佳官能化范围能够得以确定。0017图30018图3显示根据本发明的分离材料的合成设计的典型实例。携带环氧乙烷官能团的基体被偶联至连接体基团，6氨基己酸。官能化的基体被偶联至官能化的糖类，TSB_ANA，产生最终的根据本发明的分离材料。0019发明详述0020本发明的一个方面是提供包含经由连接基团结合至。
17、基体的糖类的材料。该糖类连接体基体由通式I代表0021糖类XR1R2R1RR3R1NEMF基体I。0022糖类糖苷式地连接至相邻基团，相邻基团将糖类连接至基体。0023在本发明的一个实施方式中，R，N和M分别是1。在另外的实施方式中，R和M是1而N是0。在另外的实施方式中，R和M是1而N是2。在另外的实施方式中，R和M是1而N是3。0024措辞“连接体“，如本文所用，是指式I的部分，所述部分由通式II所代表0025XR1R2R1RR3R1NEMFII。0026X代表O，S，CH2或NR，其中R代表H，甲基或适宜的保护基团。0027胺的适宜的保护基团是乙酰基AC，三氟乙酰基TFA，三氯乙酰基，苯。
18、甲酰基BZ，苄基BN，叔丁氧基羰基BOC，苄氧羰基CBZ，对甲氧基苄基羰基MOZ，9芴基甲基氧基羰基FMOC，乙烯基氧基羰基VOC，烯丙氧基羰基ALLOC，对甲氧基苄基PMB，3,4二甲氧基苄基DMB，对甲氧基苯基PMP，三苯基甲基TR，甲苯磺酰基TS或硝基苯磺酰基NS。0028R1彼此独立地代表直链或支化的C1C10烷基比如甲基，乙基，正或异丙基，正、异、仲或叔丁基，正戊基，正己基，正庚基，正辛基，正壬基或正癸基，优选C1C6烷基，其中所述烷基可以是未经取代的，或用至少一个适宜的取代基取代，所述取代基选自包含下述的取代基的组卤素，烷基，烷氧基，卤代烷基，氰基，硝基，氨基，羟基，硫醇，酰基氨基。
19、，烷氧羰基氨基，卤代烷氧羰基氨基或烷基磺酰基氨基。0029在本发明的一个实施方式中，R1彼此独立地代表式CH2110的直链或支化的未经取代的烷基。0030在本发明的另外的实施方式中，R1的取代基包含氨基，羟基，硫醇或氯。0031在本发明的另外的实施方式中，R1彼此独立地代表取代的或未经取代的甲基，乙基，1丙基，2丙基，1丁基，2丁基，2甲基1丙基，戊基，2戊基，3戊基，2甲说明书CN104053462A3/30页7基1丁基，3甲基1丁基，2乙基1丙基，己基，2己基，3己基，4甲基1戊基，庚基，2庚基，辛基，2辛基，2乙基1己基，其中所述取代基如前文所定义。在本发明的另外的实施方式中，R1彼此独。
20、立地代表直链未经取代的甲基，乙基，丙基，丁基，戊基，己基，庚基或辛基。0032R2彼此独立地代表CONH，NHCO，CONHNH，NHNHCO，CHNNH，NHNCH，NCH，CHN或三唑基。0033在本发明的一个实施方式中，R2彼此独立地代表CONH，NHCO，CONHNH，NHNHCO，CHNNH，NHNCH，NCH或CHN。在本发明的一个实施方式中，R2彼此独立地代表CONH，NHCO，CONHNH，NHNHCO，NCH或CHN。在本发明的另外的实施方式中，R2彼此独立地代表CONH或NHCO。0034R3彼此独立地代表O，S，CONH，NHCO，NCH或CHN。0035R代表0或110。
21、的整数。0036在本发明的一个实施方式中，R是0或1。0037N代表0或1600的整数。0038在本发明的一个实施方式中，N是0或1至5的整数。在本发明的另外的实施方式中，N是0。在本发明的另外的实施方式中，N代表500至600的整数。0039F代表NH，N，CH，CO，CH2COH，NHCH2COH，NHNH，NNH，CONH，NHCO或三唑基。0040在本发明的一个实施方式中，F代表NH，CO或CH2COH。0041M代表0或1。0042在本发明的一个实施方式中，M是1。0043E代表NH，CO，O，S，N，CH，NHNH，NHN或三唑基。0044在本发明的一个实施方式中，E代表CO或NH。
22、。0045式I的分离材料例如通过将官能化的基体和/或糖类与通式III化合物偶联而制备0046R3AR1R3R1NE1III,0047其中0048R1，R3和N如前文所定义，和0049R3A代表HOOC，H2N，HCC，N3，NH2NH或OH。0050E1代表COOH，CHO，NH2，SH，OH，N3，NHNH2或CCH。0051在本发明的一个实施方式中，R3A代表HOOC或H2N，E1代表COOH或NH2，和N代表0。0052在本发明的一个实施方式中，E1代表COOH，CHO或NH2。在本发明的另外的实施方式中，E1代表NH2或COOH。0053R3A和E1可以是相同或不同的。0054在本发明。
23、的一个实施方式中，N是0而式III变为通式IIIA0055R3AR1E1IIIA，0056其中0057R3A，R1和E1是如前文所定义。说明书CN104053462A4/30页80058在本发明的另外的实施方式中，在将其与式IV基体或式V糖类反应之前，式IIIA的一种化合物可以与式IIIA的至少另外的种化合物偶联所述式IIIA的一种化合物与式IIIA的至少另外的种化合物可以相同或不同。所得化合物还可以由通式III代表，其中R3A，R1，R3，N和E1如前文所定义。在本发明的特定实施方式中，N是2至10的整数。0059在本发明的一个实施方式中，式III化合物与通式IV基体反应0060F1基体IV。
24、，0061其中0062F1代表H2N，N3，HOOC，OHC，NH2NH，HCC或环氧。0063在本发明的一个实施方式中，F1是H2N，HOOC或环氧。在另外的实施方式中，F1是H2N或环氧。0064然后，可将所得产物与通式V糖类反应0065糖类XR1R2R1RYV，0066其中0067X，R，R1和R2如前文所定义，和0068Y代表COOH，NH2，CCH，N3，NHNH2或OH。0069在本发明的一个实施方式中，Y代表COOH或NH2。0070在本发明的另外的实施方式中，首先将式III化合物与式V糖类反应，而在第二步骤中偶联至式IV基体。0071在本发明的一个实施方式中，式III化合物选自。
25、包含下述的化合物的组通式HOOCRCOOH二羧酸，通式H2NRNH2二胺和通式H2NCHRCOOH或H2NCH2NCOOH氨基酸，其中N是1至10的整数。0072在本发明的另外的实施方式中，式III化合物选自包含下述的化合物的组2氨基乙醇，3氨基丙醇，4氨基丁醇，5氨基戊醇，6氨基己醇，7氨基庚醇，8氨基辛醇，9氨基壬醇，10氨基癸醇，1,2乙二胺，1,3丙二胺，1,4丁二胺，1,5戊二胺，1,6己二胺，1,7庚二胺，1,8辛二胺，1,9壬二胺，1,10癸二胺，2氨基乙硫醇，3氨基丙烷硫醇，4氨基丁烷硫醇，5氨基戊烷硫醇，6氨基己烷硫醇，7氨基庚烷硫醇，8氨基辛烷硫醇，9氨基壬烷硫醇，10氨基。
26、癸烷硫醇，2羟基乙酸，3羟基丙酸，4羟基丁酸，5羟基戊酸，6羟基己酸，7羟基庚酸，8羟基壬酸，9羟基癸酸，2氨基乙酸，3氨基丙酸，4氨基丁酸，5氨基戊酸，6氨基己酸，7氨基庚酸，8氨基壬酸，9氨基癸酸，2硫代乙酸，3硫代丙酸，4硫代丁酸，5硫代戊酸，6硫代己酸，7硫代庚酸，8硫代壬酸，9硫代癸酸，以及它们的支化异构体和它们的不饱和衍生物。0073在本发明的另外的实施方式中，式III化合物选自包含下述的化合物的组2氨基乙酸，3氨基丙酸，4氨基丁酸，5氨基戊酸，6氨基己酸，7氨基庚酸，8氨基壬酸和9氨基癸酸。在本发明的另外的实施方式中，式III化合物是6氨基己酸。0074在本发明的另外的实施方式中。
27、，式III化合物选自包含下述的化合物的组1,2乙二胺，1,3丙二胺，1,4丁二胺，1,5戊二胺，1,6己二胺，1,7庚二胺，1,8辛二胺，1,9壬二胺和1,10癸二胺。0075在本发明的另外的实施方式中，式III化合物选自包含下述的化合物的组丙说明书CN104053462A5/30页9烷二酸丙二酸，丁烷二酸丁二酸，戊烷二酸戊二酸，己烷二酸己二酸，庚烷二酸庚二酸，辛烷二酸辛二酸，壬烷二酸壬二酸，癸烷二酸癸二酸，谷胱甘肽或二羧基PEGDCPEG。在本发明的一个特定实施方式中，式III化合物选自戊二酸或己二酸。在本发明的另外的特定实施方式中，式III化合物是谷胱甘肽。0076在本发明的一个实施方式中。
28、，式IV基体在其表面上携带氨基官能团F1。如果式III化合物的E1是羧基，则E将是式I所得物质中的酰胺。另选地，基体的氨基官能团可以与其中E1是羰基的式III化合物反应，且形成其中E是亚胺或SCHIFF碱的式I基体。0077在本发明的另外的实施方式中，初始基体的氨基官能团转化为F1，F1是叠氮化物官能团，叠氮化物适于与式III化合物的端炔E1发生CLICK化学反应，导致E是三唑基基团。0078在本发明的另外的实施方式中，式IV基体的F1代表羧基基团，其与式III化合物的胺官能团E1反应，导致E是酰胺基团。0079在一个实施方式中，式IV基体在其表面上携带炔部分。基体表面上的炔基团，经由与式II。
29、I化合物叠氮化物基团E1环加成，转化为E，所述E是三唑基。0080在一个实施方式中，式IV基体在其表面上携带肼官能团F1。然后,通过将肼与式III化合物的羧基官能团E1反应形成酰肼连接。另选地，肼基团能够作为E1存在于式III化合物上，而基体在其表面上携带可接触的羧基基团。0081在另外的实施方式中，式IV基体在其表面上携带肼官能团F1。然后，通过将肼与式III化合物的羰基官能团E1反应形成腙连接。另选地，肼基团能够作为E1存在于式III化合物上，而基体在其表面上携带可接触的羰基基团。0082在另外的实施方式中，式IV基体在其表面上携带环氧官能团F1。通过将基体上的环氧官能团和式III化合物的。
30、伯氨基官能团E1反应而形成仲胺官能团。0083另选地，式IV基体上的环氧官能团可以与E1硫醇官能反应，导致E是硫醚和F是CH2CHOH。0084带有官能团的基体偶联至基体的化合物产物1NH2HO2CNHCO2NH2OHCNCH3N3HCC三唑4CO2HH2NCONH5NHNH2HO2CNHNHCO6NHNH2OHCNHNCH7环氧H2NCOHCH2NH说明书CN104053462A6/30页100085表I式VI基体和式III化合物的各种组合的反应方案。符号“代表基体。偶联至基体的化合物是式III或IIIA化合物或所述化合物与式V糖类的偶联产品。相应地，仅显示E1，而剩余分子由符号“代表。本发。
31、明显示的各反应描述了形成式III或IIIA化合物或其糖类结合形式之间的连接的各种可能性。0086在本发明的一个实施方式中，式III化合物可以如下用来直接合成式I糖类连接体基体依次将其偶联，首先偶联至基体IV，然后偶联至糖类V，或者反之亦然表II。0087式III化合物可以通过使至少两种式IIIA化合物反应形成，其中R3A和E1是不同的并且加以选择而允许一种式IIIA化合物的R3A与另外的式IIIA化合物的E1之间的反应。式IIIA化合物可以是相同或不同的。0088在本发明的一个实施方式中，形成式III化合物，并随后分别经由剩余基团R3A和剩余基团E1偶联至式IV基体和式V糖类。0089在本发明。
32、的一个实施方式中表II，如前文所述，在第一步中，式III化合物经由R3A偶联至式IV糖类而第二式III化合物经由E1偶联至基体。在第二步中，连接体通过经由剩余末端官能团R3A和E1偶联各自产物而形成。在本发明的一个特定实施方式中，结合至糖类的式III化合物可以与结合至基体的式III化合物相同。在本发明的另外的特定实施方式中，结合至糖类的式III化合物可以不同于结合至基体的式III化合物。0090在本发明的另外的实施方式中，第一式III化合物偶联至糖类，随后将具有游离E1基团的连接的化合物与至少一种另外的式III化合物反应。然后，将所得分子与式IV基体反应表II。例如，第一式III化合物可以偶联。
33、至糖类，其中所得化合物在其游离端具有胺官能团。然后，可将该胺官能团与二羧酸反应，随后将偶联的二羧酸游离羧酸官能团连接至式IV基体的胺基团。0091说明书CN104053462A107/30页1100920093表II图示展示获得式I材料的偶联策略。术语“化合物1“或“化合物2“是指式III化合物。“化合物1“和“化合物2“可以是相同或不同的。术语“糖类“是指式V糖类化合物。术语“基体“是指式IV基体。0094在本发明的另外的实施方式中，已偶联至糖类的式III化合物具有游离羧基基团，所述游离羧基基团然后偶联至作为二胺的第二式III化合物，引起连接体伸长。然后，剩余游离氨基基团可以例如与二羧酸反应。
34、，得到末端羧基基团，其可以然后偶联至在表面上具有氨基基团的基体。另选地，游离氨基基团可以直接偶联至式IV基体，其中F1是羧基或环氧。0095在本发明的另外的实施方式中，至少两种式III化合物依次偶联至式IV基体，随后将所得产物偶联至糖类表II。至少两种式III化合物还可以在第一步中相互偶联，然后连接至式IV基体，随后是偶联式V糖类。0096在另外的实施方式中，式I产物如下形成将式III化合物与式V糖类反应，随后将所得分子与式IV基体反应或反之亦然表II。0097在本发明的另外的实施方式中，式I产物通过将式V糖类与式IV基体反应而形成。偶联通过将糖类V官能团Y与基体IV官能团F1反应而实现。00。
35、98在本发明的一个实施方式中，F1是氨基官能团而Y是羧基，产生作为F的酰胺。在另外的实施方式中，F1是叠氮化物而Y是炔，F是三唑。0099在本发明的一个实施方式中，提供包含式I糖类连接体基体的分离材料，其中糖类经由连接体连接至基体，所述连接体选自包含下述的连接体的组0100XCH2SNHCOCH2SCONH,0101XCH2SCONHCH2SNHCOCH2SCONH,0102XCH2SNHCOCH2OC2H4LOCH2CONH,0103XCH2SCONHCH2SNHCOCH2OC2H4LOCH2CONH,0104XCH2SCONH,0105XCH2SNHCOCH2SCONHCH2SNHCOCH。
36、2SCONH，0106XCH2SCONHCH2SNHCOCH2SCONHCH2SNHCOCH2SCONH,0107XCH2SCONHCH2SNHCOCH2SNHCH2CHOH,0108XCH2SNHCOCH2SNHCH2CHOH,0109XCH2SCONHCH2SNHCOCHNH2CH22CONHCHSHCONHCH2CONH说明书CN104053462A118/30页12CH2CHOH,0110其中0111X代表O，N，S或CH2；和0112S彼此独立地代表110的整数，和0113L代表1600的整数。0114在本发明的一个实施方式中，X是O或N。在本发明的另外的实施方式中X是O。0115在。
37、本发明的一个实施方式中，提供式I分离材料，其中糖类经由下述连接体连接至基体0116OCH23NHCOCH23CONH。0117在本发明的一个实施方式中，提供式I分离材料，其中糖类经由下述连接体连接至基体0118OCH23NHCOCH24CONH。0119在本发明的另外的实施方式中，提供式I分离材料，其中糖类经由下述连接体连接至基体0120OCH28CONHCH22NHCOCH23CONH。0121在本发明的另外的实施方式中，提供式I分离材料，其中糖类经由下述连接体连接至基体0122OCH28CONHCH22NHCOCH24CONH。0123在本发明的另外的实施方式中，提供式I分离材料，其中糖类。
38、经由下述连接体连接至基体0124OCH28CONHCH22NHCOCH25NHCH2CHOH。0125在本发明的一个实施方式中，提供式I分离材料，其中糖类经由下述连接体连接至基体0126OCH23NHCOCH25NHCH2CHOH。0127在本发明的另外的实施方式中，提供式I分离材料，其中，在水溶液中于升高的PH，氨基己酸偶联至环氧化物官能化的基体，所述基体基于含环氧乙烷基团的甲基丙烯酸盐/酯的交联共聚物例如MITSUBISHIRELIZYMETMEXE135或148，随后在PEG200中用NHS和EDC1乙基33二甲基氨基丙基碳二亚胺活化珠粒，并且其中然后将活化的珠粒与具有游离氨基官能团比如。
39、TSB_ANA或TSB_AP的式V糖类反应。0128在本发明的另外的实施方式中，可以有益的是提供分离材料，其具有存在于式I分离材料上的式V糖类与式II连接体的某种比率。如图2A和2B所示，基于这种比率，抗体滴定度减少IGG和IGM具有最佳效果，所述比例在某种程度上不依赖于结合至基体的糖类的总量。在使用15ML血浆实例25的测试中显示，对于具有中等平均颗粒尺寸的珠粒比如MITSUBISHIRELIZYMETMEXE135来说，最佳的是4至13的糖类每连接基团按MOL/G基体计的范围。对于具有较小平均颗粒尺寸的珠粒比如MITSUBISHIRELIZYMETMEXE148来说，最佳的是4至8的范围。。
40、0129在本发明的一个实施方式中，偶联反应通过将羧基与胺官能团连接来进行。如前文所定义的酰胺键的形成能够根据本领域技术人员已知的任意程序进行。一般方法包括用碳二亚胺活化羧酸，从而使得便于偶联至胺。用碳二亚胺形成酰胺是直接的，但具有造成复说明书CN104053462A129/30页13杂情况的数种副反应。羧酸与碳二亚胺反应产生关键中间体，O酰基脲，其可以称为具有活化的离去基团的羧酸酯。然后，O酰基脲与胺反应提供所希望的酰胺和作为副产物的脲。常常加入添加剂以增加产率和减少副反应。这些物质能够与O酰基脲反应以形成活性酯，其反应性更低并且更不易外消旋化。0130适宜的碳二亚胺的实例包括二环己基碳二亚胺。
41、DCC，二异丙基碳二亚胺DIC和1乙基33二甲基氨基丙基碳二亚胺EDC。0131适宜的添加剂的实例包括N羟基苯并三唑HOBT，1羟基7氮杂苯并三唑HOAT，N羟基琥珀酰亚胺NHS，和N羟基磺基琥珀酰亚胺磺基NHS。HOBT和HOAT的备择是2氰基2羟基亚氨基乙酸乙酯商品名OXYMAPURE，其无爆炸性且具有在HOBT与HOAT之间的反应性。0132最近的反应方案完全省略任何的碳二亚胺，以非亲核阴离子的脲鎓或鏻盐四氟硼酸盐或六氟磷酸盐的形式引入活性酯，比如21H苯并三唑1基1,1,3,3四甲基脲鎓六氟磷酸盐HBTU，27氮杂1H苯并三唑1基1,1,3,3四甲基脲鎓六氟磷酸盐HATU，26氯1H苯。
42、并三唑1基1,1,3,3四甲基铵六氟磷酸盐HCTU，21H苯并三唑1基1,1,3,3四甲基脲鎓四氟硼酸盐TBTU，O7氮杂苯并三唑1基N,N,N,N四甲基脲鎓四氟硼酸盐TATU，ON琥珀酰亚胺基1,1,3,3四甲基铀四氟硼酸盐TSTU，苯并三唑1基氧基三吡咯烷基鏻六氟磷酸盐PYBOP。两种脲鎓类型的OXYMAPURE的偶联添加剂也可作为COMU和TOTU试剂获得。0133在本发明的一个实施方式中，偶联反应通过三唑形成进行。从叠氮化物和炔形成三唑也称为炔叠氮化物HUISGEN环加成，其作为1,3环加成进行。0134HUISGEN1,3偶极环加成的显著变型是铜I催化的变型，其中联合有机叠氮化物和端。
43、炔以提供1,2,3三唑类的1,4区域异构体作为唯一产品。该反应称为铜I催化的叠氮化物炔环加成CUAAC。虽然反应能够用商业来源铜I比如溴化亚铜或碘化亚铜进行，但是用铜II例如铜II硫酸盐/酯和还原剂例如抗坏血酸钠的混合物以原位产生CUI进行的反应更佳得多。由于CUI在含水溶剂中不稳定，稳定化配体有效地改善反应结果，特别是如果使用三苄基三唑基甲基胺TBTA。反应能够在各种溶剂以及水和各种部分可混合的有机溶剂的混合物中进行，所述有机溶剂包括醇类，DMSO，DMF，TBUOH，二噁烷，丙酮及其混合物。0135此外，反应能够通过钌而不是铜进行催化。钌催化的1,3偶极叠氮化物炔环加成RUAAC产生1,5。
44、三唑类。不同于其中仅端炔发生反应的CUAAC，在RUAAC中末端炔和内炔均能够参与反应。0136叠氮化物官能团能够根据标准程序获得。例如，叠氮化物官能团能够通过将胺官能团与偶氮转移化合物比如三氟甲磺酰基叠氮化物或咪唑1磺酰基叠氮化物反应而获得。另选地，叠氮化物能够通过在水溶液中且施加微波将烷基氯或苄基氯，烷基溴或苄基溴或甲苯磺酸烷基或苄基酯与叠氮化钠反应而形成。0137炔能够根据标准程序获得。特制地，炔通过连位烷基二卤化物或乙烯基卤化物的脱氢卤化而制备。金属炔化物能够与伯烷基卤化物偶联。经由FRITSCHBUTTENBERGWIECHELL重排，炔制备自乙烯基溴化物。炔能够用COREYFUCH。
45、S反应制备自醛和通过SEYFERTHGILBERT同系化反应制备自醛或酮。在炔拉链反应（ZIPPER说明书CN104053462A1310/30页14REACTION）中，用强碱处理从内炔产生端炔。0138在本发明的一个实施方式中，各反应步骤的反应溶剂是单一溶剂或两种或更多种溶剂的混合物，所述溶剂选自水，醇，DMSO，DMF，TBUOH，丙酮，1,4二噁烷，甲醇，PEG200或其混合物。0139在本发明的一个实施方式中，式III连接体化合物与式IV基体的偶联反应在水溶液中，优选于约10至13的高PH完成。在本发明的另外的实施方式中，式III化合物与式IV基体的所述偶联在硼酸盐KCL缓冲剂中完成。
46、。0140在本发明的一个实施方式中，式V糖类与式III化合物的偶联在甲醇或PEG200中完成，所述式III化合物可以又偶联至式IV基体。在另外的实施方式中，所述偶联反应在PEG200中完成。0141术语“糖类“如本发明中所用单独或在式V中是指单糖，二糖，低聚糖，或多糖。在本发明的上下文中，术语可以进一步定义为含有分子或其衍生物的碳水化合物，所述分子或其衍生物具有生物学或任意其它类型的与另外的分子、蛋白质或细胞的亲和力。在本发明的一个实施方式中，术语“糖类“是指二糖，三糖，四糖或戊糖。0142糖类根据本发明还可以包含另外连接至糖蛋白中的蛋白、至糖脂中的脂质的糖类。此外，根据本发明的糖类可以通过酶。
47、促合成、化学合成，重组技术产生，分离自天然来源，或者通过这些方法的组合产生。0143在本发明的一个实施方式中，糖类可以是单糖比如，例如，阿拉伯糖，来苏糖，核糖，核酮糖，木糖，木酮糖，阿洛糖，阿卓糖，葡萄糖，甘露糖，古罗糖，艾杜糖，半乳糖，塔罗糖，阿洛酮糖，果糖，山梨糖，塔格糖，它们各自的糖醛酸，N乙酰基半乳糖胺，N乙酰基氨基葡萄糖，岩藻糖，墨角藻糖FUCULOSE，脱氧核糖，鼠李糖或其组合或修饰的形式。修饰可以存在于糖类羟基基团或N乙酰基基团中的一个或多个上。此外，二、三、四和戊糖以及较高低聚糖可以通过组合上文所列的单糖形成，其中糖苷式地偶联至连接体的糖类具有连接至连接体部分的或构型。0144。
48、在本发明的另外的实施方式中，术语“糖类“如本文所用单独或在式V中是二糖比如，例如，蔗糖，乳果糖，乳糖，麦芽糖，海藻糖，异麦芽糖，或纤维二糖。0145在本发明的另外的实施方式中，术语“糖类“如本文所用单独或在式V中是三糖。三糖是由通过两个糖苷键连接的三个单糖组成的低聚糖。类似于二糖，各糖苷键能够在所述单糖的任何羟基基团之间形成。不同的键组合区域化学和立体化学或是可能的，在相同单糖部分之间也是如此，这得到三糖，其是具有不同化学和物理特性的非对映异构体。0146在本发明的一个实施方式中，糖类是GAL13GAL类型的糖类。在本发明的特定实施方式中，糖类是血型决定子。所述糖类的实例是GAL13GAL类型。
49、糖类，尤其包含血型决定子ALFUC12DGALNAC13DGAL和BLFUC12DGAL13DGAL。这些类型的糖类能够用于结合各自的血型抗体，例如在移植之前或在移植之后，从而降低患者血液或血浆中的抗体浓度，或用于从血液分离所述抗体。0147在本发明另外的实施方式中，术语“糖类“单独或在式V中意指碳水化合物结构，其对毒素、病毒、细菌和/或细胞具有特异性且可用于制备分离材料，其用于除去或分离任何所述物质。所述特异于病原体，毒素，病毒，细菌和细胞的糖类已在之前描述于文献说明书CN104053462A1411/30页15中并且能够同样有效地偶联至根据本发明的基体。然后，分离材料可以用来从全血、血浆、培养基、食品、水或其它物质纯化、分离或消除蛋白、肽、毒素、病毒、细胞和/或细菌。0148在本发明的另外的实施方式中，可以根据本发明制备式I糖类连接体基体，其包含衍生自细胞表面糖脂和糖蛋白的碳水化合物结构，一般称为肿瘤或癌抗原。所述抗原可以被抗体识别，例如针对前列腺、乳腺、肠或皮肤癌。然后，所述物质可以例如用于，从全血、血浆、从细胞培养基或需要自其分离抗体的任何其它媒介，分离所述肿瘤抗原结合抗体。在从分离材料洗脱之后，抗体能够用于治疗所述癌症疾病，例如癌。