本发明涉及一种治疗过敏性结膜炎的方法。 速尿是一种熟知的利尿剂。
此外速尿被认为是一种预防或治疗气喘的药物（参看The Lancet，July 30，1988，P252）。
现在，我们已发现，速尿是一种有价值的药物，它可用来治疗过敏性结膜炎。目前工艺水平既不能预测，又无法提出这个治疗方法。本发明涉及的治疗或预防过敏性结膜炎的方法是，用适量的速尿滴入眼睛的结膜穹窿中，为此目的涉及到速尿的使用;以及涉及速尿使用而生产一种治疗或预防过敏性结膜炎的药物。
患者：研究了10名受试对象，它们都有季节性过敏性结膜炎的临床病史，它们当中有的患过鼻炎或气喘，有的则没有。并且对草木花粉的皮肤试验都为阳性。这些病人的临床特征记录在表Ⅰ中。所有受试对象都未经医治，且实验全部在花粉时节之外进行。
检查方法：过敏性结膜试验是按BoniniS、BoniniS、BerrutoA、TomassiniM、CarlesimoS、BucciMG、BalsanoF。所叙述的方法进行的。结膜激发试验作为研究人类过敏性和炎症的一种模型。（Int Arch Allergy Appll Immunol 1989，88：144-148）。
简言之，在检查的前一天，用含0.03%人体血浆白蛋白的生理盐水（范围10.000到3放射变态原吸附试验单位ml1，Frazionialfa，Bayropharm Italiana，意大利米兰）将过敏原增加稀释度（稀释因子3.2）在前臂作皮肤过敏性的终点滴定试验。给药后的15到20分钟人，疹块潮红反应的直径与检验比阴性相对照物至少大2mm，出现这种情况给药的最低剂量作为以后过敏原结膜试验的第一剂量。
为了使结膜激发，病人要将头上部斜倚，用一滴过敏原或检验药液滴入一只眼睛的下结膜穹窿中。激发以后，借助光学连续模似标度〔0（无症状）～100%（可忍受的症状最高值）〕，病人和检查医务人员在5、10、15、20和30分钟时将自觉症状和他觉症状记录下来。自觉症状由病人记录，包括发痒、烧灼、流泪和畏光。由检查医务工作者记录地他觉症状是红、水肿、血管结膜充血和流泪。某些病例，在20分钟时拍摄了一张复制比为1∶1的大照片以此证实他觉检查的读数。
20分钟以后，拟定的参数中至少有两个反应未达到50%或更大的得分，则在检验的这只眼睛中使用另一种更浓的过敏原浓缩液重复这个试验。所有病人对第一或第二过敏原剂量都有反应。这个激发剂就用作以后实验时的结膜激发。
研究设计：结膜过敏性的初步试验制定后，每个病人在一星期内做二次结膜激发，用4滴速尿10毫克/毫升（，Hoechst）或安慰剂予先处理以后，按随机化的原则进行双盲的原始记录。二滴治疗药液在试验前5分钟滴入每一只眼睛中紧接着再滴一次以及用一种单一过敏原的激发剂量激发。然后按初步试验所述进行试验。
统计分析：目标准的非参数法对所得有模拟标度的数据作配对分析。尽管是用连续标度记录的，但不能假设成线性（Maatthews DE，Farewell WT.使用和了解医学统计学，第二版，Karger，Basel，1988）。方差分析是用作反复对照，而双尾试验的P值为0.05被认为是有效的。
检查结果
用安慰剂处理以后，过敏的受试对象对眼睛激发有反应，表现为发痒、灼热、结膜充血、红斑和流泪，眼睛感觉烧灼、畏光和水肿的病人分布更没有规律，两个病人也主诉打喷嚏和鼻溢，可能是由于过敏原通过鼻泪管漏入鼻子。各种受试对象对结膜激发反应，在自觉和他觉参数的强度和定时中，观察到相当大的变异性，由图1到10表示，图中报导了安慰剂和速尿在激发时获得的每一个受试对象的得分。说明统计参数的自觉得分，在表Ⅱ中报导，而他觉得分在表Ⅲ中报导。所有体征和症状通常是在激发后5分钟出现，而且到达20分钟的不同时间点，也没有显著的改变，激发期间，虽然自觉症状的出现在早期更明显，而他觉体征看来越发逐渐加重。与此相反，流泪的自觉得分出现的上升趋势比同样症状的他觉得分更迟些。具体反映在眼睑圈内开始积累泪的时候（自我感觉）和泪确实流出来的时候（客观评价）二者的时间不同。尽管这是事实，但是也发现，同一个受试对象，流泪的自觉和他觉得分之间是密切相关的，斯皮尔曼（Spear man r是0.79，p小于0.001），这表示一般的可靠性评价。
用速尿治疗以后，多数的体征和症状得分比安慰剂治疗要低，不过受试对象中不同的症状和不同的规定时间存在着不均匀的分布因而大大地限制了差异的统计评定，因为每一组存在各种各样的联系。尽管这是事实，Wilcoxon秩和试验表明，在15和20分钟内有关发痒和流泪的得分明显下降。
为了避免症状不均匀分布这个难题，症状的平均得分被评定为每个时间点的所有自觉和他觉得分的平均值。（表Ⅳ，图11和12）。对自觉症状总得分进行方差分析，不考虑时间，表现出两种治疗方法之间明显的差别（p小于0.02）。作Wilcoxon秩和试验，激发了10、15和20分钟观察到有速尿治疗法的自觉症状总得分明显下降，而且为最大值。相反，尽管方差分析表现出两种治疗之间（p小于0.01）的明显差别，但在用速尿或安慰剂治疗以后在任何时间点他觉症状总得分之间没有发现有明显的区别。
为了使由于速尿对自觉症状得分的保护作用而引起的主要症状有特性，以避免由于不同受试对象中不均匀的症状时间问题，所以采用每个受试对象激发5到20分钟来评定平均得分，因为在这段时间里，方差分析对平均得分未能作出任何明显的区别（图13）。用速尿和安慰剂处理后，发现发痒和流泪的平均得分之间有明显的差别，而所有其他症状和体征得分并没有发现明显差别。
他觉得分的变异性大多是由于个别病人造成的（No5），反复分析后，这类例外病例应不予统计在内。标志Wilcoxon的秩和试验则表现出自觉（p大于0.02）和他觉（p大于0.05）二者得分的明显区别。影响他觉得分好象主要是与激发后（p小于0.05）15和20分钟时对红斑和结膜充血有关。
最后，为了确认他觉的体征得分，激发时，将在同一时间点记录到的他觉得分拍摄的幻灯片进行测试。总共48张照片，由三台独立的阅读器测定了与结膜激发有关的24张不同的照片，对每一张照片给出了一个单一总分。由三台阅读器读得的结果相关数良好，而且斯皮尔曼相关系数在3个配对的对照组中，变动于0.83到0.90之间（p小于106）。当照片的平均得分与相同试验记录到的他觉得分相比较时，可以观察到同平均的他觉得分有关的参数（r是0.636，p小于0.001）及其一致。激发时，记录到不同的他觉参数，其中结膜充血是与照片读数（r是0.639，p小于0.001）有关的参数中更精确的一个。包括安慰剂和速尿灵二种试验在内的一整套照片可以得到8个案例。照片上没有发现这组的二种治疗得分有明显的差别。
讨论
结膜试验广泛用于过敏性的诊断已经有多年的历史，也已发现适用于临床的检查（Moller C，BjiorkstenB，Nilsson G，Dreborg S.结膜激发试验的准确性。Allergy 1984，39：37-41）和适用于研究眼睛过敏性炎症的致病机理（Bonini S，Bonini S，Vecchione等，人体中过敏原激发后，结膜刮出物中炎症的变化，J Allergy Clin Immunol 1988，82：462-9;Bonini S，Bonini S，Berruto A，Tomassini M，Carleimo S，Bucei MG，Balsano F.结膜激发试验作为研究人类过敏性和炎症的一个模型。Int Arch Allergy Appll Immunol 1989，88：144-148）。按照本发明，我们使用特殊的结膜试验对过敏性结膜炎用速尿作局部治疗得到的潜在的治疗价值进行评价。尽管缺少仪器参数，加上受试对象之间相当大的变异性，在同族比较中产生了某些困难，但评价试验结果表明有关参数还是能再现的。与安慰剂相比，用速尿作局部处理大大地降低了他觉和自觉二者的得分，虽然对炎症的他觉得分影响不大，但对某些自觉得分的影响显得很明显，可能与这些参数的较大变异有关。按照本发明的数据显示了速尿对特定的结膜过敏原激发确有保护效果。
总起来说，数据表明了用速尿局部治疗耐药力非常好，而且在患有季节性过敏性结膜炎的受试对象身上，由特定的过敏原激发而引起的结膜反应显著降低。这些结果表明速尿是具有治疗过敏性眼疾的潜在价值。
表Ⅰ：被调查病人的临床特征
号 性别 年龄 症状 过敏原1剂量 其他皮
使用（AUR） 肤反应1
1 女 45 季节性的鼻-结膜炎 Pa 32
2 男 18 季节性的鼻-结膜炎 Gr 32
3 女 23 季节性的鼻-结膜炎 Pa 100 Gr Dp
4 男 17 季节性的鼻-结膜炎 Gr 100
5 男 37 季节性的鼻-结膜炎 Gr 320 Pa、Ol、Cy
6 男 27 季节性的鼻-结膜炎 Gr 100
7 男 49 季节性的鼻-结膜炎 Gr 32 Ol、Comp
和气喘
8 男 18 季节性的鼻-结膜炎 Gr 10
9 女 12 季节性的鼻-结膜炎 Gr 100
和气喘
10 男 22 季节性的鼻-结膜炎 Gr 32 Pa
1）Gr草木花粉 Pa墙草属药房常备药
Ol橄榄树 Cy柏树
Comp 菊科 Dp表皮螨属
表Ⅱ：速尿对过敏原激发后自觉得分的影响
发痒
安慰剂
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.0±0.0
5′ 14.0 27.80±9.05
10′ 11.0 18.50±5.69
15′ 10.0 14.70±4.65
20′ 12.0 11.60±5.15
平均a11.0 15.40±4.17
最大b20.0 30.50±9.29
速尿
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.00±0.0
5′ 14.0 19.50±5.26
10′ 7.0 12.00±4.94
15′ 7.0 10.10±3.48
20′ 3.0 8.20±3.95
平均a6.0 10.00±3.12
最大b14.0 22.00±5.53
灼热感
安慰剂
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.0±0.00
5′ 8.0 18.50±7.37
10′ 2.5 11.80±4.67
15′ 1.5 12.60±5.60
20′ 1.0 12.90±6.20
平均 6.0 11.10±4.29
最大 12.0 22.70±8.00
速尿
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.00±0.0
5′ 1.5 5.80±2.60
10′ 0.0 7.90±4.26
15′ 0.0 9.40±6.24
20′ 0.0 10.90±7.38
平均 1.0 6.70±3.60
最大 6.0 15.20±7.04
表Ⅱ：接上页
畏光
安慰剂
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.0±0.0
5′ 0.0 10.10±5.96
10′ 1.0 6.00±3.44
15′ 1.0 7.20±4.54
20′ 1.0 6.60±5.08
平均 1.5 6.00±3.42
最大 4.5 13.30±6.29
速尿
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.00±0.0
5′ 0.0 4.10±2.16
10′ 0.0 4.80±3.08
15′ 0.0 3.10±2.19
20′ 0.0 3.30±2.89
平均 5 3.20±1.89
最大 1.5 6.40±3.25
流泪
安慰剂
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.0±0.0
5′ 6.0 10.20±3.84
10′ 7.5 12.50±4.78
15′ 7.5 16.30±7.49
20′ 4.5 18.60±8.96
平均 4.5 11.40±4.81
最大 13.5 27.70±8.43
速尿
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.00±0.0
5′ 2.5 6.80±2.60
10′ 1.0 9.10±3.72
15′ 0.0 10.20±6.59
20′ 0.0 11.40±7.72
平均 1.0 7.40±3.59
最大 3.5 16.40±7.48
表Ⅱ中的注释
a）：激发后5到20分钟记录的平均得分值。
b）：激发后5到20分钟记录的最大得分值。
表Ⅲ：过敏原激发后，速尿对他觉得分的影响
红斑
安慰剂
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.0±0.0
5′ 17.5 19.50±4.92
10′ 18.5 22.80±5.31
15′ 20.5 24.60±5.71
20′ 27.5 28.30±5.93
平均 15.5 18.90±4.06
最大 27.5 31.20±6.18
速尿
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.00±0.0
5′ 10.0 13.20±3.24
10′ 11.0 14.00±3.09
15′ 10.0 18.60±6.76
20′ 8.5 17.80±6.46
平均 8.5 12.60±3.32
最大 19.0 25.20±6.33
水肿
安慰剂
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.0±0.0
5′ 2.0 5.70±2.34
10′ 5.0 7.50±2.13
15′ 4.0 6.70±2.39
20′ 3.5 5.80±2.04
平均 3.0 5.20±1.71
最大 5.5 8.40±2.18
速尿
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.00±0.0
5′ 1.0 2.50±.96
10′ 1.5 3.90±1.73
15′ 1.0 7.10±3.67
20′ 0.0 8.30±5.78
平均 2.0 4.40±2.15
最大 5.0 10.6±5.71
表Ⅲ：接上页
血管充血
安慰剂
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.0±0.0
5′ 26.5 27.80±4.58
10′ 30.5 31.70±3.61
15′ 35.0 32.50±5.19
20′ 35.5 35.50±5.32
平均 27.0 25.60±3.17
最大 38.0 40.70±5.17
速尿
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.00±0.0
5′ 18.0 21.80±2.98
10′ 21.0 22.60±4.46
15′ 18.5 22.80±5.97
20′ 21.5 23.60±6.77
平均 14.5 18.20±3.54
最大 31.0 31.70±5.17
流泪
安慰剂
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.0±0.0
5′ 11.5 10.00±2.42
10′ 9.0 11.60±3.15
15′ 3.0 10.20±4.36
20′ 3.5 15.00±5.98
平均 7.0 9.30±2.74
最大 14.0 19.50±5.69
速尿
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.00±0.0
5′ 3.0 8.20±4.11
10′ 2.0 7.20±4.83
15′ .5 9.20±6.68
20′ 2.0 7.00±4.22
平均 1.5 6.30±3.86
最大 6.5 12.40±6.37
表Ⅳ：过敏原激发后，速尿对总平均得分的影响
总自觉得分
安慰剂
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.0±0.0
5′ 12.0 16.70±5.40
10′ 9.0 12.20±3.62
15′ 7.0 12.80±4.52
20′ 5.5 13.50±5.39
平均 7.5 11.00±3.38
最大 12.5 20.90±5.96
速尿
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.00±0.0
5′ 7.0 8.90±1.89
10′ 6.5 8.50±3.20
15′ 2.0 8.30±3.62
20′ .5 8.40±4.90
平均 3.0 6.70±2.47
最大 8.0 13.60±4.29
总的他觉得分
安慰剂
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.0±0.0
5′ 13.5 15.80±2.88
10′ 16.5 18.40±2.88
15′ 20.0 18.50±3.58
20′ 19.5 21.20±4.08
平均 14.0 14.80±2.58
最大 20.0 22.40±4.09
速尿
时间 中值 平均数±标准误差
0 0.0 0.00±0.0
5′ 9.0 11.40±2.09
10′ 8.5 12.00±3.01
15′ 6.5 14.40±5.35
20′ 8.5 14.20±5.38
平均 7.0 10.30±2.90
最大 13.0 18.70±4.91
【附图说明】
图1～10是：病人在特定的过敏原激发时，用安慰剂（未涂黑的符号、直线）或用速尿（涂黑符号、点线）处理后，记录得到从1号到10号每个病人的自觉（左边）和他觉（右边）症状得分的各个数值。自觉症状为发痒（园圈）、灼热感（菱形）、畏光（三角形）、流泪（倒三角形）。他觉体征：红斑（园圈）、水肿（菱形）、血管充血（三角形）、流泪（倒三角形）;画出得分对激发后时间的关系曲线。
图11是：激发期的病人用安慰剂（空白符号Ⅰ）或速尿（涂满的符号Ⅰ）处理后，记录到的自觉总得分的平均值和标准误差。方差分析揭示了两种处理（p小于0.02）的显著差别，但时间超过5到20分钟的规定间隔，没有显著的变化。
图12是：激发期的病人用安慰剂（空白符号）或速尿（充填的符号Ⅰ）处理后，记录到的他觉总得分的平均值和标准误差。方差分析揭示了两种处理（p小于0.01）的显著差别，但时间超过5到20分钟的规定间隔，没有显著的变化。
图13是：激发后5到20分钟记录到的每种自觉和他觉参数的平均得分中的中值。分别是用安慰剂（空的）或速尿（填满的）处理后的。＊）p小于0.05 Wilcoxon秩和试验