新的2-〔(2，6-二氯苯基)氨基〕 苯基乙酰氧基乙酸与有机碱阳离子的盐 本发明涉及新的式I的2-〔(2，6-二氯苯基)氨基〕苯基乙酰氧基乙酸与有机碱阳离子的盐其中R1和R2独立地是低级烷基，或如果R1是氢，H-N(R1)(R2)为精氨酸或赖氨酸，或如果R1是甲基，H-N(R1)(R2)是N-甲基葡糖胺；本发明还涉及制备上述化合物的方法、含上述化合物的药物组合物和上述化合物作为药物活性组分的应用。
在上下文中，“低级”基团和化合物理解为，例如，其含至多并包括7个碳原子，优选至多并包括4个碳原子(阳离子)。
低级烷基是，例如，C1-C4烷基，如甲基、乙基、丙基或丁基。
EP-0119932公开了2-〔(2，6-二氯苯基)氨基〕苯基乙酰氧基乙酸和其与药物可接受的有机或无机阳离子形成的一价盐。这些化合物具有消炎和止痛药效的治疗用途，适于多种临床病症的治疗，如风湿性关节炎、类风湿性脊椎炎、腰痛、外伤、脱骱等。这些化合物还具有止痛活性。
然而，在EP-0119932中要求保护的盐没有描述或举例说明。
现在意想不到地发现，2-〔(2，6-二氯苯基)氨基〕苯基乙酰氧基乙酸与有机碱如精氨酸、赖氨酸、二乙基胺和N-甲基葡糖胺形成的盐在水溶液中至少稳定25小时和2-〔(2，6-二氯苯基)氨基〕苯基乙酰氧基乙酸的钾和钠盐在水溶液中不稳定性是与时间有关的。
本发明的盐可以用本身已知的方法通过2-〔(2，6-二氯苯基)氨基〕苯基乙酰氧基乙酸与大致等摩尔量的式Ia化合物反应制备其中R1和R2分别为低级烷基，或如果R1是氢，H-N(R1)(R2)是精氨酸或赖氨酸，或如果R1是甲基，H-N(R1)(R2)是N-甲基葡糖胺，反应在水溶液或在合适的质子传递或非质子传递有机溶剂如脂族或环脂族醚，例如二乙基醚、四氢呋喃或二噁烷，或低级醇，如甲醇或乙醇中，在0℃至溶剂沸点；优选在10℃至30℃进行。盐以常规方法回收，比如其在原介质中不溶，用过滤法，或如在原介质中溶解，通过蒸发溶剂或通过加入该盐的非溶剂将盐沉淀。
本发明化合物可以以水溶液形式通过非肠道形式或静脉内注射或者以油悬浮液通过肌内注射给药。
本发明化合物在水溶液中与碱金属盐，例如此处和下文中提到的钠盐和钾盐相比，其稳定性有惊人的改进。本发明化合物具有消炎活性，适于治疗以下症状，如类风湿性关节炎、类风湿性脊椎炎、腰痛、脱骱以及眼炎。这些化合物还具有止痛活性。
本发明特别涉及式I地盐，其中R1和R2分别是乙基，或如果R1是氢，H-N(R1)(R2)是L-精氨酸或L-赖氨酸，或如果R1是甲基，H-N(R1)(R2)是N-甲基葡糖胺。
本发明尤其涉及在下文实施例中提到的式I化合物。
用于肠内给药，如口服以及直肠给药，和对(a)温血动物非肠道给药的含本发明化合物的本发明药物组合物，含有其自身具有的药物活性组分或与药物可接受载体。活性组分的口服剂量取决于年龄和个体状况以及给药方式。
新药物组合物含有例如约10％至约80％，优选约20％至约60％活性组分。用于肠道和/或非肠道给药的本发明药物组合物是，例如单位剂量形式，如糖衣丸、片剂、胶囊或栓剂以及安瓿。这些组合物可用已知方法制备，例如通过常规混合、制粒、熬糖膏、溶解或低压冻干法。例如，用于口服给药和药物组合物可通过将活性组份与固体载体混合，也可将形成的混合物任选造粒，和如需要，将混合物制成颗粒，或需要时加入合适的赋形剂，制成片剂或糖衣丸。
合适的载体特别是填充物，例如糖，例如乳糖、蔗糖、甘露糖醇或山梨醇，纤维素制备物和/或磷酸盐，例如磷酸三钙或磷酸氢钙，和粘合利，例如淀粉糊剂，例如玉米、小麦、稻谷或土豆淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素和/或聚乙烯吡咯烷酮；如需要，分解剂，如上述淀粉，以及羧甲基淀粉、交联的聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、藻酸和其盐，如藻酸钠。赋形剂特别是流动剂、流动调节剂和润滑剂，例如硅酸、滑石、硬脂酸或其盐，如硬脂酸镁或钙，和/或聚乙二醇。糖衣丸的芯包覆合适的肠溶包衣，特别使用浓糖溶液，其可以含有阿拉伯树胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化钛，或者在合适有机溶剂或溶剂混合物中的包衣溶液，或者为制备肠溶包衣，由合适的纤维素制备物，如邻苯二甲酸乙酰基纤维素酯或邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素酯。在片剂或糖衣丸中可以加入着色剂或色素，例如为辩认效用或指示活性成分的不同剂量。
其它口服药物组合物为含明胶的干充胶囊，以及含明胶和增塑剂，如甘油或山梨醇的软封闭胶囊。干充胶囊可含有粒状活性组分，例如与填充剂，如乳糖，粘合剂，如淀粉，和/或glidants，如滑石或硬脂酸镁，和，如需要，稳定剂形成的混合物。在软胶囊中，活性组分优选溶解于或悬浮于适当的液体，如脂油、石蜡油或液体聚乙二醇中，其中也可加入稳定剂。
合适的直肠给药药物组合物为，例如，含有活性组分与栓剂基质的栓剂。合适的栓剂基质为，例如，天然或合成的三甘油酯、烷烃、聚乙二醇或高级醇。也可使用明胶直肠胶囊，其含有活性组分和基质材料。合适的基质材料为、例如，液体三甘油酯、聚乙二醇或烷烃。
适于非肠道给药的组合物特别是活性组分的水溶液，例如可水溶的盐形式，以及活性组分的悬浮液，如相应的油性注射悬浮液，其中使用了适当的亲油溶剂或赋形剂，如脂油，例如，芝麻油，或合成脂酸酯，例如油酸乙酯或三甘油酯，或者含粘度增强物质的含水悬浮注射液，例如羧甲基纤维素钠，山梨醇和/或葡聚糖，和，任选稳定剂。
本发明还涉及式I化合物的使用，优选以药物组合物形式使用。活性组分的剂量取决于温血动物的种类、年龄和个体状况，以及给药方式。在通常情况下，对重约75Kg的病人的日给药大约剂量估计为约5mg至约1000mg，特别是约10mg至约200mg。药剂可一次给药或分成几次，例如2至4次给药。因此单位剂量的药物组合物含有约5mg至约250mg，特别是约20mg至约100mg活性组分。
实施例
实施例1：在搅拌下向在70.6ml水中的2.46g L-精氨酸溶液中加入5.0g 2-〔(2，6-二氯苯基)氨基〕苯基乙酰氧基乙酸。用玻璃纤维漏斗过滤。将含水滤液冻干。向白色残留物加60ml乙醇和0.5ml水。形成的浆液于搅拌下温热至50℃。形成的溶液于搅拌下冷却至5℃。该混合物于5℃放置1小时，将沉淀的结晶滤出，于40℃0.1mbar下干燥15小时。2-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯基乙酰氧基乙酸L-精氨酸盐的熔点为120-125℃。
实施例2：于搅拌下，向在20ml水中的0.29g L-赖氨酸溶液中加入0.70g 2-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯基乙酰氧基乙酸。经玻璃纤维漏斗过滤得到的滤液(PH6.0)，冻干，得到残留物，2-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯基乙酰氧基乙酸L-赖氨酸盐，为黄色无定形粉末。
实施例3：1.42g 2-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯基乙酰氧基乙酸溶解于60ml乙醚中。加入1.0ml二乙基胺，此后溶液于室温搅拌3分钟和于30℃和20mbar蒸发。白色残留物于5℃在10ml乙醚中搅拌。将沉淀的结晶滤出并用乙酸乙酯重结晶，得到2-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯基乙酰氧基乙酸二乙基胺盐，熔点115-128℃，分解。
实施例4：向在50ml水中的1.77g 2-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯基乙酰氧基乙酸溶液加入0.98g N-甲基-D-葡糖胺。溶液被冻干。残留物用乙醇结晶，得到2-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯基乙酰氧基乙酸N-甲基-D-葡糖胺盐，熔点140-142℃。
实施例5：于搅拌下，向在135ml水中的6.0g 2-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯基乙酰氧基乙酸悬浮液中加入在33ml水中的1.76g碳酸氢钾溶液。形成的悬浮液(pH7.3)搅拌5小时。形成的不透明溶液用玻璃纤维滤器过滤。滤液冻干。残留物于50℃溶于25ml乙酸乙酯。形成的溶液冷却到10℃，于搅拌下加入100ml乙醚。通过倾析溶剂混合物将沉淀的树脂分离。向树脂中加20mg乙酸乙酯，混合物于10℃搅拌4小时。滤出生成的结晶并于室温和0.1mbar下干燥。2-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯基乙酰氧基乙酸钾盐熔点为122-130℃，分解。
实施例6：在3ml水中的0.1g 2-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯基乙酰氧基乙酸L-精氨酸盐溶液于室温保存25小时。用1N盐酸酸化。形成的悬浮液用乙酸乙酯萃取二次(2×20ml)。合并的有机萃取液用MgSO4干燥和于30℃和20mbar下蒸发。结晶的残留物于室温和0.1mbar下干燥15小时。在Varian VXR 400S质谱仪上以Me4Si作内标测定质子NMR谱。1H NMR(C6D6)：δ3.66(s，CH2-a)，4.08(s.CH2-b)
经用NMR谱和薄层色谱(TLC)确认的残留物为纯2-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯基乙酰氧基乙酸。用硅胶60 F254板(Merek)进行薄层色谱分析。TLC的展开系统为苯-乙酸乙酯-乙酸90∶5∶5，通过喷淋在80ml H2O中溶解0.5g K2Cr2O7并加入20ml浓H2SO4制备的溶液定斑位。实施例7：在3ml水中的0.1g 2-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯基乙酰氧基乙酸钾盐溶液于室温保存25小时。用1N盐酸酸化。形成的悬浮液用乙酸乙酯萃取二次(2×20ml)。合并的有机萃取液用MgSO4干燥和于30℃和20mbar下蒸发，残留物于室温和0.1mbar干燥15小时。质子NMR谱用与实施例6相同的方法测定。 1H NMR(C6D6)：δ3.66(s，CH2-a)，4.08(s，CH2-b)，3.488(s，CH2-c)，3.22(s，CH2-d)。残留物是以下混合物；其中化合物II是2-[(2，6-二氯苯基)氨基]乙酸，而化合物III是1-(2，6-二氯苯基)羟吲哚。根据NMR数据，混合物由95％化合物Ib，3％化合物II和2％化合物III组成。化合物II和III也可以用TLC检测。
实施例8：用与实施例6相同的方法进行样品制备和NMR分析，但用2-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯基乙酰氧基乙酸L-赖氨酸盐代替其L-精氨酸盐。NMR谱相当于100％化合物Ib。结果在表1中给出。
实施例9：用与实施例6相同的方法进行样品制备和NMR分析，但用2-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯基乙酰氧基乙酸二乙基胺盐代替其L-精氨酸盐。NMR谱相当于100％化合物Ib。结果在表1中给出。
实施例10：用与实施例6相同的方法进行样品制备和NMR分析，但用2-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯基乙酰氧基乙酸N-甲基-D-葡糖胺盐代替其L-精氨酸盐。NMR谱相当于100％化合物Ib。结果在表1中给出。
实施例11：用实施例7相同的方法进行样品制备和NMR分析，但用2-[(2，6-二氯苯基)氨基]苯基乙酰氧基乙酸钠盐代替其钾盐。NMR谱相当于含95％化合物Ib，3％化合物II和2％化合物III的混合物。结果在表1中给出。
表1
实施例12：片剂，每片含10mg活性组分，可按以下方法制备：组成成分(制10000片)活性组分 100.0g乳糖 450.0g马铃薯淀粉 350.0g明胶 10.0g滑石 60.0g硬脂酸镁 10.0g二氧化硅(高分散) 20.0g乙醇 适量
将活性组分与乳糖和292g马铃薯淀粉混合，该混合物用明胶乙醇溶液润湿并通过筛子形成颗粒。干燥后，将剩余的马铃薯淀粉、硬脂酸镁、滑石和二氧化硅混入，混合物挤压成片、每片重100.0mg并含10.0mg活性组分；如需要每片上可提供切痕以便得到更少剂量。
实施例13：含20mg活性组分的硬明胶胶囊可制备如下：组成成分(制1000个胶囊)活性组分 20.0g乳糖 240.0g微晶纤维素 30.0g十二烷基硫酸钠 2.0g硬脂酸镁 8.0g
将十二烷基硫酸钠通过筛目大小为0.2mm的筛子加至冻干的活性组分中。两种组分迅速混合。然后先将乳糖经筛目大小为0.6mm的筛子加入，将微晶纤维素经筛目大小为0.9mm的筛子加入。混合物迅速混合10分钟。最后经筛目大小为0.8mm的筛子加入硬脂酸镁。混合3分钟后，向0号硬明胶胶囊中装入300mg形成的混合物。
实施例14：含100mg活性组分的硬明胶胶囊可制备如下：组成组分(制1000个胶囊)活性组分 100.0g乳糖 250.0g微晶纤维素 30.0g十二烷基硫酸钠 2.0g硬脂酸镁 8.0g
将十二烷基硫酸镁经筛目为0.2mm的筛子加到冻干的活性组分中。将两种组分迅速混合。然后先将乳糖经筛目为0.6mm的筛子加入，和然后将微晶纤维素经筛目0.9mm的筛子加入。混合物迅速混合10分钟。最后将硬脂酸镁经筛目为0.8mm的筛子加入。经混合3分钟后，向每个0号硬明胶胶囊中装入390mg形成的混合物。
实施例15；每片含50mg活性组分的包膜片剂可制备如下：组成成分(制1000片薄膜包衣片剂)活性组分 50.0g乳糖 100.0g玉米淀粉 70.0g滑石 10.0g硬脂酸钙 2.0g羟丙基甲基纤维素 2.36g虫胶 0.64g水 适量氯甲烷 适量
将活性组分、乳糖和40g玉米淀粉混合和用由15g玉米淀粉和水(加热)制成的糊润湿并造粒。颗粒经干燥，将剩余的玉米淀粉、滑石和硬脂酸钙加入并与上述颗粒混合。将混合物挤压成片(重量：240mg)，然后用在二氯甲烷中的羟丙基甲基纤维素和虫胶包膜；经包膜的药片最后重量：283mg。实施例16：0.2％的活性组分注射液或输注液制备如下：组成成分(制1000个安瓿)活性组分 5.0g氯化钠 22.5g磷酸盐缓冲液PH＝7.4 300.0g软化水 2500.0ml
将活性组分和氯化钠溶1000ml水中并经微量过滤器过滤。加入缓冲液并用水调到2500ml。为制成单位剂量型，按每份1.0ml或2.5ml注入玻璃安瓿中，每支含有2.0mg或5.0mg活性组分。
实施例17：含1％活性组分的软膏(油/水乳剂)，具有如下组成：活性组分 1.0gCatyl醇 3.0g甘油 6.0g羟苯甲酸甲酯 0.18g羟苯甲酸丙酯 0.005gArlacel 60 0.6g吐温60 4.4g硬脂酸 9.0g棕榈酸异丙酯 2.0g石蜡油，粘滞的 10.0g软化水， 100.0g
实施例18：含1％活性组分的凝胶，具有如下组成：活性组分 1.0gCarbopol 934p 1.0g甘油 3.0g异丙醇 25.0g Softigen767 0.2g软化水 100.0g