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一种三叶青的干燥方法.pdf

  • 上传人:111****112
  • 文档编号:206309
  • 上传时间:2018-02-02
  • 格式:PDF
  • 页数:5
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  • 摘要
    申请专利号:

    CN201410418719.7

    申请日:

    2014.08.25

    公开号:

    CN104138403A

    公开日:

    2014.11.12

    当前法律状态:

    实审

    有效性:

    审中

    法律详情:

    实质审查的生效IPC(主分类):A61K 36/48申请日:20140825|||公开

    IPC分类号:

    A61K36/48; A61P35/00; F26B5/06; A61K127/00(2006.01)N

    主分类号:

    A61K36/48

    申请人:

    济南康众医药科技开发有限公司

    发明人:

    张为胜; 李诗标; 周宝艳; 李强

    地址:

    250014 山东省济南市历下区科院路19号山东省科学院西楼4号

    优先权:

    专利代理机构:

    代理人:

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    内容摘要

    本发明涉及一种三叶青的干燥方法,取鲜三叶青,冷冻后干燥。制备的三叶青主要活性成分含量高,抗癌效果好。

    权利要求书

    1.  一种三叶青的干燥方法,其特征在于:取鲜三叶青,冷冻后干燥。

    2.
      根据权利要求1的一种三叶青的干燥方法,其特征在于:冷冻是冷冻至冻结。

    3.
      根据权利要求1的一种三叶青的干燥方法,其特征在于:冷冻是冷冻至-5℃以下。

    4.
      根据权利要求1的一种三叶青的干燥方法,其特征在于:冷冻后干燥是冷冻后晒干或烘干或晾干。

    说明书

    一种三叶青的干燥方法
    发明领域
    本发明涉及药品制法,特别涉及一种三叶青的干燥方法,属医药技术领域
    背景技术
      三叶青(Tetrastigmatis hemsleyani)为葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤(Tetrastigma  hemsleyanum Diels et Gilg)其块根名为蛇附子,异名有石猴子、石抱子、拦山虎、雷胆子、破石珠、土经丸、搜夹风、三叶对、小扁藤、阴灵子、三叶扁藤、金丝吊葫芦、丝线吊金钟、金线吊葫芦、金线吊马铃薯。三叶青以块根或全草入药,具有清热解毒、祛风化痰、活血止痛的功能。其内服可治疗小儿高热惊厥、痢疾、支气管炎、肺炎、咽喉炎、肝炎及病毒性脑膜炎,外敷可治疗毒蛇咬伤、扁桃体炎、蜂窝织炎、跌打损伤。
    中药干燥在我国有很长的历史,经干燥的中草药可保持一定的药用成分以及不易腐败变质,干燥作为保证中草药品质的重要措施,是中草药加工中一个必不可少的工艺过程,干燥与中药生产的关系密切,干燥的方法将直接影响产品的质量。
    发明专利CN200910156906,公开了一种中药三叶青真空冷冻干燥保留药效活性成分的工艺,包括三叶青原料选取、清洗切片、预干燥、装盘预冻、升华干燥、解析干燥后出料。制备的三叶青,可以最大限度地保存原药的药效成分和还原生药的性能,主要抗肿瘤成分总黄酮是传统加工方法的3.6倍,总皂甙是传统加工方法的2.5倍。缺点是能耗高,饮片疏松易碎,运输贮存不便。
    发明内容
    本发明的目的是提供一种三叶青的干燥方法,该方法干燥三叶青,主要有效成分含量高,抗癌效果好。
    本发明的目的是这样实现的:
    一种三叶青的干燥方法,其特征在于:取鲜三叶青,冷冻后干燥。
    本发明的一种三叶青的干燥方法,其特征在于:冷冻是冷冻至冻结。
    本发明的一种三叶青的干燥方法,其特征在于:冷冻是冷冻至-5℃以下。
    本发明的一种三叶青的干燥方法,其特征在于:冷冻后干燥是冷冻后晒干或烘干或晾干。
    至此完成了本发明,本发明制备的三叶青主要活性成分含量高,抗癌效果好。
    下面通过试验例进一步说明本发明的有益之处,试验例旨在进一步说明本发明的有益之处,而非对本发明的限制。
    将同一批鲜三叶青,按以下方法进行加工。
    1)晾干:鲜三叶青,切厚片,放于阴凉通风处,摊开晾干;
    2)烘干:鲜三叶青,切厚片,60℃以下烘干;
    3)冷冻后烘干:鲜三叶青,切厚片,冷冻至-5℃至全部冻结,取出,60℃以下烘干。
    一、不同方法干燥三叶青总黄酮的含量侧定比较
    1、仪器与试药
    仪器:紫外一可见分光光度仪;电子天平;芦丁对照品。
    2、检测波长的确定
    芦丁对照品硝酸铝显色后在500-510nm波长处有最大吸收,结合文献,试验选择500nm为检测波长。
    3、对照品溶液的制备
    精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品10mg,置50mL量瓶中,加70%乙醇35mL,置水浴上微热使溶解,放冷,加70%乙醇至刻度,摇匀,即得(每mL中含无水芦丁0.2mg)。
    4、供试品制备和含量测定
    取以上制备的三叶青药材各0.1g,精密称定,置l00mL容量瓶中,加70%乙醇70mL,振摇后加乙醇至刻度,放置lh,用干燥滤器迅速滤过,精密量取续滤液6mL,置25mL容量瓶中, 加5%亚硝酸钠溶液1mL,混匀,放置6min;加10%硝酸铝溶液lmL,摇匀,放置6min;加氢氧化钠试液10mL,再加水至刻度,摇匀,放置15min。
    5、测定
    照分光光度法在500nm波长处测定吸收度,计算,即得。结果见表1。
    表1  不同方法干燥三叶青总黄酮的含量

    药材晾干烘干冷冻后烘干总黄酮含量(%)0.330.320.47

    由表1看出,三叶青冷冻后烘干,总黄酮含量均较高。
    二、冷冻后不同方法干燥三叶青总黄酮的含量侧定比较
    将同一批鲜三叶青,切厚片,冷冻至-10℃至全部冻结,取出,分别晾干、晒干,60℃以下烘干。测定冷冻后不同方法干燥三叶青总黄酮的含量,结果见表2。
    表2  冷冻后不同方法干燥三叶青总黄酮的含量
    药材晾干烘干冷冻后烘干总黄酮含量(%)0.470.460.47

    三、不同方法干燥三叶青抗癌活性比较
    1、制备三叶青提取物  分别取晾干、烘干、冷冻后烘干粉碎,各加水煎煮两次,第一次加水8倍量,煎煮2小时,第二次加水8倍量,煎煮1小时,合并药液,药液滤过,取滤液,浓缩至相对密度为1.10(60℃)时,加入乙醇使含醇量达到75%,沉淀,静置36小时,吸取上清液,回收乙醇,浓缩,干燥,粉碎,得不同方法干燥的三叶青提取物。
    2、肿瘤细胞株 人肺源腺癌细胞SPCA-1、人肝癌细胞系HepG2和人慢性髓系白血病细胞K562,用RPMI-1649培养液, 37℃,5%CO2,相对湿度100%培养,贴壁细胞0.25%胰蛋白酶消化传代。
    3、方法  MTT比色法测定提取物对肿瘤细胞生长的抑制作用。取对数生长期细胞,用新鲜的RPMI-1640培养液配制成细胞悬液,悬浮细胞1×105个/ml贴壁细胞0.8×105个/ml。悬浮细胞分别加入不同浓度实验药物后接种于96孔培养板中;贴壁细胞先接种于96孔培养板中,每孔90μl24h后分别加入不同浓度实验药物。终体积为每孔100μl且每组设3个平行孔,分组:受试药组(培养液+细胞悬液+不同浓度受试药)、阴性对照组(培养液+细胞悬液)、药物颜色对照组(培养液+不同浓度受试药)、空白对照组(培养液+生理盐水)。受试药浓度依次为10μg/ml、30μg/ml、50μg/ml。置37℃,5%CO2培养箱中培养72h后,向每孔加入MTT溶液10μl震荡混匀后,继续培养4h,加入SDS90μl终止培养,37℃过夜,然后室温下在微量振荡器上震荡10min,酶标仪测定570nm波长处的吸光度(OD值),实验重复3次。
    按以下公式计算生长抑制率:
    生长抑制率(%)=(N组OD均值-B组OD均值)—(T组OD均值-TC组OD均值)/N组OD均值-B组OD均值×100%。
    4、抑制率结果见表3、表4、表5。
    表3  对SPCA-1的抑制率结果
    抑制率(%)10(μg/ml)30(μg/ml)50(μg/ml)晾干43.6458.6366.68烘干42.7558.7166.52冷冻后烘干51.3564.3881.64

    表4  对HepG2的抑制率结果
    抑制率(%)10(μg/ml)30(μg/ml)50(μg/ml)晾干46.59 50.74 61.20烘干47.0650.63 62.14冷冻后烘干57.38 64.9676.81

    表5  对K562的抑制率结果
    抑制率(%)10(μg/ml)30(μg/ml)50(μg/ml)晾干50.3567.21 73.52烘干51.6367.22 73.54冷冻后烘干67.3778.41 86.59

    结果表明,冷冻后烘干三叶青对SPCA-1、HepG2、K562细胞的增殖均较晾干、烘干三叶青有较强的抑制作用。
    具体实施方式
    实施例1
    鲜三叶青,切厚片,冷冻至-5℃至全部冻结,取出,60℃以下烘干。
    实施例2
    鲜三叶青,切厚片,冷冻至-10℃至全部冻结,取出,60℃以下烘干。
    实施例3
    鲜三叶青,切厚片,冷冻至-20℃至全部冻结,取出,晾干。
    实施例4
    鲜三叶青,切厚片,冷冻至-30℃至全部冻结,取出,晒干。
    实施例5
    鲜三叶青,切厚片,冷冻至-15℃至全部冻结,取出,晒干。
    实施例6
    鲜三叶青,切厚片,冷冻至-28℃至全部冻结,取出,晾干。

    关 键  词:
    一种 三叶青 干燥 方法
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