说明书一种AKBA结构改造化合物及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及一种AKBA结构改造化合物及其制备方法与应用,属于有机化合物合成及医药技术领域。
背景技术
癌症是一种严重威胁人类生命的重大疾病。从天然资源中寻找毒副作用小、安全有效的的抗肿瘤化合物或对这些化合物进行结构改造成为近年来研究热点。乳香中许多五环三萜类化合物具有抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、诱导肿瘤细胞分化的作用，而对正常细胞毒性较小；此外这类化合物兼有抗炎等多种生物活性，可能在抗肿瘤作用中发挥了部分作用；其中，3-乙酰基-11-酮-β-乳香酸(AKBA)，其结构式为：
AKBA是乳香中抗肿瘤活性最好的一个五环三萜类化合物，对于AKBA的抗肿瘤活性日益受到重视，以AKBA作为先导化合物，对其进行结构修饰，以开发新的抗肿瘤药物是目前非常重要的研究课题。
发明内容
本发明的目的是一种AKBA结构改造化合物及其制备方法，以乳香提取分离物AKBA为先导化合物进行结构改造，得到的AKBA结构中A环变化的化合物，其抗肿瘤活性与AKBA类似，为该类化合物进入临床研究奠定了基础，为肿瘤治疗药物的研究提供了条件。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种AKBA结构改造化合物，其结构式如式I、式II或式III所示：
其中，式I中，R为氢、乙酰基、丙酰基或邻甲苯甲酰基；式II中，R为甲氧基、乙氧基、异丙氧基、吗啉、哌啶-4-甲酸甲酯、四氢吡咯、异丙胺、R-苯乙胺、甘氨酸甲酯。
优选的，该AKBA结构改造化合物，其式I结构的化合物选自以下化合物：
该AKBA结构改造化合物，其式II结构的化合物选自以下化合物：
式I结构化合物的制备方法，步骤如下：
(1)将AKBA的3-位酯基用碱水解得化合物1；
(2)将化合物1的4-位羧基用活性酯-硼氢化钠法还原为羟甲基得化合物2；
(3)将化合物2的伯醇用叔丁基二苯基氯硅烷(TBDPSCl)保护得化合物3；
(4)将化合物3的3-位羟基氧化为酮，得化合物4；
(5)将化合物4去硅醚保护得化合物5；
(6)化合物5经过拜耶尔-维力格氧化重排得化合物I-1。
其中，步骤(1)中，水解操作具体为：向AKBA中加入甲醇-10％(体积百分浓度)NaOH(1:1，v:v)混合溶液，AKBA和混合溶液加入量的比为1g:10-12mL，加热至回流，TLC检测反应完全后，用酸(2M HCl)调pH至2左右，抽滤，滤饼用50％MeOH洗涤，干燥，即得化合物1；
步骤(2)中，将化合物1先用HOBt/EDCI/TEA的方法，以二氯甲烷为溶剂做成活性酯，化合物1、TEA(三乙胺)、HOBt(1-羟基苯并三唑)、EDC(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)和二氯甲烷加入量的比为1mol:(1.1-1.2)mol:(1.2-1.3)mol:(2.5-2.6)mol:2000mL；再以四氢呋喃为溶剂，硼氢化钠为还原剂，对活性酯进行还原，四氢呋喃、硼氢化钠加入的量的比例为，硼氢化钠：四氢呋喃：化合物1＝3mol:2000mL:1mol；两步反应均在室温条件下进行，TLC检测反应完全；
步骤(3)中，将化合物2用TBDPSCl为硅烷化试剂对伯醇进行选择性保护，以三乙胺为缚酸剂，以4-二甲氨基吡啶(DMAP)为催化剂，以二氯甲烷为反应溶剂，化合物2、TEA、DMAP、二氯甲烷和TBDPSCl加入量的比为(0.32-0.33)mol：(0.39-0.40)mol:(0.13-0.14)mol:300mL:(1.31-1.32)mol；反应温度为0℃左右；
步骤(4)中，将化合物3用重铬酸吡啶鎓盐(PDC)为氧化剂，4A分子筛为载体，以二氯甲烷为溶剂，在室温条件下进行反应，TLC检测反应完全；化合物3、PDC和二氯甲烷加入量的比为(0.17-0.18)mol:(0.26-0.27)mol:1500mL。
步骤(5)中，将化合物4用1M氟化四丁铵(n-Bu4NF)对硅醚进行脱保护，反应溶剂为四氢呋喃，在室温下反应；化合物4、氟化四丁铵和四氢呋喃加入量的比为(0.13-0.14)mol:(0.27-0.28)mol:300mL。
步骤(6)中，将化合物5用间氯过氧苯甲酸(MCPBA)进行氧化重排，用KHCO3作碱性催化剂，溶剂为二氯甲烷，在室温下进行反应；化合物5、MCPBA、KHCO3和二氯甲烷加入量的比为(0.13-0.14)mol:(0.27-0.28)mol:(0.20-0.21)mol:800mL。
其合成路线如下：
式I其他化合物通过酰氯试剂酰化法制备。
式II化合物的制备方法，步骤如下：
(1)以PDC为氧化剂，4A分子筛为载体，二氯甲烷为溶剂，在室温条件下进行反应，将化合物I-1氧化得到化合物6，化合物I-1、PDC和二氯甲烷加入量的比为2mmol:(4.1-4.2)mmol:5mL；
(2)以叔丁基过氧化氢(t-BuOOH)和氯化亚铜(CuCl)作为反应试剂，以乙腈为溶剂，在室温下进行反应，将化合物6经氧化重排得到化合物II-1，化合物6、氯化亚铜、叔丁基过氧化氢和乙腈的加入量的比为1.4mmol:(0.5-0.6)mmol:(4.2-4.3)mmol:3mL。
其合成路线如下：
式II其他化合物通过化合物II-1酰氯化与醇成酯或直接与胺通过活性酯法制备。
式III化合物的制备方法，步骤如下：
化合物6与羟胺缩合再脱水得到化合物III，其中化合物6与盐酸羟胺的缩合以醋酸钠为缚酸剂，以甲醇为溶剂，在室温条件下进行，化合物6、盐酸羟胺、醋酸钠和甲醇的加入量的比为(0.10-0.11)mmol:(0.12-0.13)mmol:(0.12-0.13)mmol:2ml；脱水试剂为羰基二咪唑(CDI)，以二氯甲烷为溶剂，在室温条件下进行，化合物6、CDI和二氯甲烷的加入量的比为(0.10-0.11)mmol:(0.30-0.31)mmol:2ml。
合成路线如下：
本发明还提供一种含有有效量的通式I、II或III化合物的抗肿瘤类药物组合物，尤其是抗前列腺癌和肺癌的药物组合物。
该种组合物可以和一种或多种药学上可接受载体和/或赋形剂混合，制成口服制剂和肠胃外给药制剂，可以为片剂、丸剂、胶囊剂或注射剂。
所述载体包括如生理盐水、缓冲盐水、葡萄糖、水、甘油、乙醇或它们的组合物；赋形剂可以选自磷酸钙，硬脂酸镁，滑石粉，糊精，淀粉，凝胶纤维素，甲基纤维素，羧甲基纤维素钠盐或聚乙烯吡咯烷酮。
本发明的有益效果：
本发明通过对天然产物AKBA进行结构改造，对A环进行开环、扩环改造后引入新的基团，高效合成了系列新型的AKBA结构改造化合物，药理活性实验证明该系列AKBA结构改造化合物具有较好的抗肿瘤活性，而且合成方法简单，通过该部位的结构改造，能更好的应用于抗肿瘤药物的开发。
附图说明：
图1为同样药物浓度(25uM)下，本发明制备的AKBA结构改造物与AKBA化合物对人前列腺癌细胞PC-3的抑制率结果；
图2为同样药物浓度(25uM)下，本发明制备的AKBA结构改造物与AKBA化合物对人肺腺癌细胞A549的抑制率结果。
具体实施方式
结合实施例对本发明作进一步的说明，应该说明的是，下述说明仅是为了解释本发明，并不对其内容进行限定。实施例中采用的条件可以根据现有的设备条件做进一步调整，未注明的实施条件通常为常规实验中的条件。
实施例1：化合物1的制备
向加有AKBA(5g，9.759mmol)的反应瓶中加入甲醇-10％NaOH(1:1，v:v，即甲醇和体积浓度为10％的氢氧化钠溶液按体积比1:1混合)混合溶液54ml，然后加热至回流。TLC检测反应完全后，用2M HCl调pH至2左右，抽滤，滤饼用50％MeOH洗涤，干燥，得白色粉末状固体4.6g，收率99.9％，即为化合物1。Data for 1:1H-NMR(CDCl3,600MHz):5.522(s,1H,H-12),4.026(brs,1H,H-3),2.433(m,1H),2.404(s,1H,H-9),1.292,1.253,1.156,1.105,0.942(s,3H)(5-CH3),0.817-.787(m,6H,2-CH3)；MS(m/z):471.7[M+H]+.
合成路线如下：
实施例2：化合物2的制备
将化合物1(4.80g,0.01021mol)溶于20ml二氯甲烷，搅拌下向反应液依次加入三乙胺(1.58ml，0.01123mol)、HOBt(1.66g，0.01226mol)、EDC(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，4.89g，0.02553mol)，室温搅拌至TLC检测反应完全。经快速柱层析(EA：PE＝1:2)得白色粉末状固体。将以上固体用20ml四氢呋喃溶解，然后向反应液加入NaBH4(1.16g,0.03063mol),室温搅拌至TLC检测反应完全，经快速柱层析(EA：PE＝1:1)得白色固体3.63g，收率78％，即为化合物2。Data for 2：1H-NMR(CDCl3,600MHz):5.5544(s,1H,H-12),3.8710(brs,1H,H-3),3.7611-3.7428(d,1H,J＝10.98,HOCH2-),3.5778-3.5595(d,1H,J＝10.98,HOCH2-),2.5245-2.4894(m,1H),2.4755(s,1H,H-9),1.3360,1.1654,1.1635,1.1075,0.9542(s,3H)(5-CH3),0.8204-0.7993(m,6H,2-CH3)；MS(m/z):457.4[M+H]+.
合成路线如下：
实施例3：化合物3的制备
将化合物2(1.50g，0.003289mol)溶于3ml无水DCM(二氯甲烷)，搅拌下向反应液加入TEA(三乙胺，0.56ml，0.003947mol)和DMAP(二甲氨基吡啶，0.16g，0.001316mol),然后将反应液冷却至0℃,搅拌下向此反应液缓慢滴加叔丁基二苯基氯硅烷(3.5ml,0.01316mol)，加完后继续在0℃左右条件下搅拌至原料反应完全。经快速柱层析(EA：PE＝1：8，EA:PE＝1：7)得白色固体1.50g，收率66％，即为化合物3。Data for 3：1H-NMR(CDCl3,600MHz):7.6675-7.6561(dd,4H,2),7.4497-7.4376(m,2H,2),7.4214-7.4002(m,4H,2),5.5239(s,1H,H-12),3.9604(brs,1H,H-3),3.7301-3.7133(d,1H,J＝10.08,-CH2OH),3.4956-3.4787(d,1H,J＝10.14,-CH2OH),2.4223(s,1H,H-9),2.4039-2.3691(m,1H),1.3010,1.1883,1.0707,0.9506,0.8971(s,3H)(5-CH3),1.0777(s,9H,3-CH3),0.8000-0.7885(m,6H,2-CH3)；MS(m/z):733.6[M+K]+.
合成路线如下：
实施例4：化合物4的制备
将化合物3(1.24g，0.001787mol)溶于15ml二氯甲烷，并加入适量4A分子筛，搅拌下向反应液加入PDC(1.01g，0.002680mol)，然后室温搅拌至TLC检测反应完全。将反应液用硅藻土过滤，并用乙酸乙酯洗涤，经快速柱层析(EA：PE＝1：8)得白色固体0.96g，收率78％，即为化合物4。Data for 4：1H-NMR(CDCl3,600MHz):7.6327-7.6204(dd,4H,2),7.4635-7.4391(m,2H,2),7.4215-7.3961(m,4H,2),5.5473(s,1H,H-12),4.0541-4.0373(d,1H,J＝10.08,-CH2OH),3.6053-3.5883(d,1H,J＝10.20,-CH2OH),2.9632-2.9285(m,1H)，2.4584-2.4013(m,1H)，2.3321(s,1H,H-9),2.1343-2.0852(m,2H),1.9040-1.8361(m,1H),1.2766,1,2648,1.1240,1.1181,0.9518(s,3H)(5-CH3),1.0401(s,9H,3-CH3),0.8145-0.7883(m,6H,2-CH3)；MS(m/z):693.3[M+H]+.
合成路线如下：
实施例5：化合物5的制备
将化合物4(0.96g，0.001386mol)溶于3ml THF，然后向反应液中滴加1M n-Bu4NF(2.8ml，0.002772mol)，室温搅拌至TLC检测反应完全。经快速柱层析(EA:PE＝1:3)得白色固体0.62g，收率99％，即为化合物5。Data for 5：1H-NMR(CDCl3,600MHz):5.6079(s,1H,H-12),4.0226-3.9987(dd,1H,J1＝11.34,J2＝3.18,-CH2OH),3.5190-3.4854(dd,1H,J1＝11.28,J2＝8.88,-CH2OH),2.9365-2.8921(m,1H),2.8374-2.8167(m,1H),2.5611-2.5321(m,2H),2.4632(s,1H,H-9),2.1431-2.0894(m,1H),1.9387-1.8848(m,1H),1.3261,1.2948,1.2384,1.1894,0.9675(s,3H)(5-CH3),0.8444-0.8134(m,6H,2-CH3)；MS(m/z):455.6[M+H]+.
合成路线如下：
实施例6：化合物I-1的制备
将化合物5(0.62g，0.001365mol)溶于8ml二氯甲烷，搅拌下依次向反应液加入MCPBA(0.47g，0.002730mol)、KHCO3(0.20g，0.002048mol)，然后室温搅拌至TLC检测反应完全。经快速柱层析(EA:PE＝1：2，EA:PE＝1：1)得白色固体0.58g，收率90％，即为化合物I-1。Data for I-1：1H-NMR(CDCl3,600MHz):5.6290(s,1H,H-12),4.0348-4.0153(d,1H,J＝11.7,-CH2OH),3.5121-3.4924(d,1H,J＝11.82,-CH2OH),2.7054-2.6543(m,1H),2.6054-2.5129(m,2H),2.5683,1H,H-9),2.1334-2.0801(m,1H),1.9295-1.8761(m,2H),1.5763,1.4044,1.3171,1.1897,0.9618(s,3H)(5-CH3),0.8420-0.7975(m,6H,2-CH3)；MS(m/z):471.7[M+H]+.
合成路线如下：
实施例7：化合物I-2的制备
将化合物I-1(50mg，0.1063mmol)溶于2ml二氯甲烷，并将三乙胺(90μl，0.6380mmol)和DMAP(5.3mg，0.04253mmol)加入反应液，然后搅拌下向反应液缓慢滴加乙酰氯(45μl，0.6380mmol)，室温搅拌至TLC检测反应完全。经薄层硅胶板分离(EA：PE＝1:2.5)得类白色固体37mg，收率68％，即为化合物I-2。Data for I-2：1H-NMR(CDCl3,600MHz):5.5905(s,1H,H-12),4.5869-4.5664(d,1H,J＝12.30,-CH2O-)，4.1436-4.1235(d,1H,J＝12.06,-CH2O-)，2.7764-2.7084(m,2H),2.6655-2.6212(m,1H),2.5412(s,1H,H-9),2.1370-2.0670(m,1H),2.1065(s,3H,CH3CO-),1.9152-1.8618(m,1H),1.5306,1.4060,1.3142,1.1955,0.9504(s,3H)(5-CH3),0.8241-0.7947(m,6H,2-CH3)；13C-NMR(CDCl3,400MHz):198.21,174.41,170.85,165.16,130.44,85.45,66.62,60.64,58.98,55.65,44.97,43.88,40.84,39.59,39.32,39.25,38.06,33.99,32.52,32.12,30.85,28.84,27.41,27.18,27.06,21.54,21.10,20.86,20.37,18.10,17.95,17.42；HRMS(m/z):513.3573[M+H]+.
合成路线如下：
实施例8：化合物I-3的制备
操作与收率同化合物I-2,得类白色固体。Data for I-3：1H-NMR(CDCl3,600MHz):5.5886(s,1H,H-12),4.6145--4.5941(d,1H,J＝12.24,-CH2O-),4.1433-4.1231(d,1H,J＝12.12,-CH2O-),2.7877-2.7214(m,2H),2.6652-2.6216(m,1H),2.5393(s,1H,H-9),2.4065-2.3690(dq,2H,J1＝7.38,J2＝2.28,CH3CH2CO-),2.1243-2.0683(m,1H),1.9136-1.8603(m,1H),1.5269,1.4054,1.3147,1.1965,0.9507(s,3H)(5-CH3),1.1691-1.1439(t,3H,CH3CH2CO-),0.8234-0.7952(m,6H,2-CH3)；13C-NMR(CDCl3,400MHz):198.26,174.43,174.26,165.16,130.44,85.58,66.42,60.60,58.98,55.78,44.99,43.89,40.84,39.63,39.32,39.26,37.94,33.99,32.57,32.09,30.85,28.84,27.51,27.42,27.20,21.52,21.09,21.09,20.37,18.13,17.83,17.42,9.05；HRMS(m/z):527.3723[M+H]+.
合成路线如下：
实施例9：化合物I-4的制备
向加有2ml二氯甲烷的反应瓶中依次加入异丁酸(30μl，0.3190mmol)、TEA(44μl，0.3190mmol)、HOBt(44mg，0.3190mmol)、EDC(122mg，0.6380mmol)和化合物I-1(50mg，0.1063mmol)，室温搅拌至TLC检测反应完全。经薄层硅胶板分离(EA：PE＝1:2.5)得白色固体41mg，收率72％。Data for I-4：1H-NMR(CDCl3,400MHz):5.5883(s,1H,H-12),4.6416-4.6112(d,1H,J＝12.16,-CH2O-),4.1254-4.0951(d.1H,J＝12.12,-CH2O-),2.8046-2.7235(m,2H),2.6794-2.5765(m,2H),2.5449(s,1H,H-9),2.1383-2.0593(m,1H),1.9260-1.8469(m,1H),1.5276,1.4021,1.3184,1.2071-1.1788,0.9511(s,3H)(5-CH3),1.2071-1.1788(m,6H,(CH3)2CH-),0.8222-0.7908(m,6H,2-CH3)；13C-NMR(CDCl3,400MHz):198.41,176.90,174.59,165.36,130.37,85.76,66.29,60.56,58.97,55.85,45.00,43.89,40.83,39.65,39.30,39.24,37.80,33.98,32.58,32.02,30.84,28.83,27.40,27.28,27.17,21.49,21.08,20.36,18.92,18.87,18.81,18.13,17.69,17.41；HRMS(m/z):541.3883[M+H]+.
合成路线如下：
实施例10：化合物6的制备
将化合物I-1(982mg，2.088mmol)溶于5ml二氯甲烷，向反应液加入适量4A分子筛后将PDC(1.571g，4.176mmol)加入反应液，室温搅拌至TLC检测反应完全。经快速柱层析(EA：PE＝1:3，EA：PE＝1：2)得白色粉末状固体780mg，收率80％，即为化合物6。Data for 6：Data for 6：1H-NMR(CDCl3,400MHz):9.6671(s,1H,-CHO),5.5781(s,1H,H-12),2.8941-2.8309(m,1H),2.6153-2.5846(m,2H),2.5267(s,1H,H-9),2.1434-2.0643(m,1H),1.9302-1.8495(m,2H),1.5428,1.3288,1.2780,1.2089,0.9526(s,3H)(5-CH3),0.8220-0.7941(m,6H,2-CH3).
合成路线如下：
实施例11：化合物III的制备
将化合物6(47mg，0.1004mmol)溶于2ml甲醇，向反应液加入盐酸羟胺(8.5mg，0.1204mmol)和NaOAc·3H2O(16.5mg，0.1204mmol)，然后加热至回流直至TLC检测反应完全。旋干溶剂，加入DCM，水洗，饱和NaHCO3洗，有机相用无水硫酸钠干燥。将上述反应所得物质溶于2ml二氯甲烷，然后加入CDI(51mg，0.3012mmol)，室温搅拌直至TLC检测反应完全。经薄层硅胶板分离(EA：PE＝1:3)得白色固体30mg，收率65％。Data for III：1H-NMR(CDCl3,400MHz):5.5874(s,1H,H-12),3.2366-3.1213(m,2H),2.6719-2.6092(m,1H),2.4718(s,1H,H-9),2.1386-2.0592(m,1H),1.9370-1.8252(m,1H),1.8646,1.6022,1.3099,1.2393,0.9526(s,3H)(5-CH3),0.8258-0.7919(m,6H,2-CH3)；13C-NMR(CDCl3,400MHz):197.95,172.63,165.32,130.28,119.17,74.30,59.85,58.96,56.27,44.86,43.94,40.80,39.74,39.27,39.25,36.29,33.98,32.24,30.92,30.83,30.03,28.83,27.38,27.18,21.09,20.93,20.40,18.46,17.42,14.80；HRMS(m/z):466.3305[M+H]+.
合成路线如下：
实施例12：化合物II-1的制备
将化合物6(657mg，1.403mmol)溶于3ml乙腈，然后向反应液加入CuCl(56mg，0.5612mmol)和t-BuOOH(0.8ml，4.209mmol)，室温搅拌直至TLC检测反应完全。经快速柱层析(EA:PE＝1：1)得白色固体312mg，收率46％。Data for II-1：1H-NMR(DMSO-d6,400MHz):1H-NMR(DMSO-d6,400MHz):12.0157(brs,1H,-COOH),5.4589(s,1H,H-12),2.5692-2.4775(m,3H),2.4395-2.3644(m,1H),2.5088(s,1H,H-9),2.1263(s,3H,CH3CO-),2.1263-2.0216(m,2H),1.8447-1.6934(m,3H),1.3073,1.1745,1.1290,0.9331(s,3H)(4-CH3),0.7981-0.7736(m,6H,2-CH3).13C-NMR(DMSO-d6,400MHz):211.73,198.17,175.13,165.22,129.86,58.62,55.11,51.55,44.64,44.18,40.86,39.13,38.91,38.14,35.94,33.98,32.29,30.84,30.41,29.37,28.93,27.23,27.25,21.40,20.91,20.53,19.58,18.56,17.68；MS(m/z):455.6[M-H]-.
合成路线如下：
实施例13：化合物II-2的制备
将化合物II-1(50mg，0.1032mmol)溶于1ml二氯甲烷，向反应液加入草酰氯(53μl，0.6192mmol)，室温搅拌2h。旋干溶剂与过量的草酰氯，重新将残留物溶于1ml二氯甲烷，并向反应液加入无水甲醇(50μl，1.238mmol)，室温搅拌直至TLC检测反应完全。经薄层硅胶板分离(EA:PE＝1:3)得类白色固体50mg，收率98％，即为化合物II-2。Data for II-2：1H-NMR(CDCl3,400MHz):5.5696(s,1H,H-12),3.6373(s,3H,CH3O-),2.7670-2.6868(m,1H)，2.6269(s,1H,H-9),2.5027-2.3984(m,2H)，2.2299-2.1502(m,1H),2.1906(s,3H,CH3CO-),2.1357-2.0562(m,1H),1.9550-1.8500(m,3H),1.3157,1.3157,1.2296,0.9533(s,3H)(4-CH3),0.8271-0.8053(m,6H,2-CH3).13C-NMR(CDCl3,400MHz):211.45,198.32,173.99,165.07,130.26,59.04,56.62,51.89,51.66,44.65,44.11,40.87,39.32,39.25,38.37,35.77,33.94,32.00,30.88,30.75,29.46,28.85,27.44,27.34,21.12,21.09,20.39,19.19,18.46,17.49；HRMS(m/z):471.3465[M+H]+.
合成路线如下：
实施例14：化合物II-3的制备
操作与收率同化合物II-2,得白色固体。Data for II-3：1H-NMR(CDCl3,400MHz):5.5696(s,1H,H-12),4.1186-4.0651(q,2H,J＝10.74,CH3CH2O-),2.7660-2.6851(m,1H),2.6213(s,1H,H-9),2.4825-2.4061(m,2H),2.1989(s,3H,CH3CO-),2.1989-2.1568(m,1H),2.1291-2.0549(m,1H),1.9548-1.8484(m,3H),1.3155,1.3155,1.2285,0.9532(s,3H)(4-CH3),1.2552-1.2195(t,3H,CH3CH2O-),0.8267-0.8062(m,6H,2-CH3).13C-NMR(CDCl3,400MHz):211.47,198.28,173.53,165.01,130.26,60.44,59.03,56.50,51.89,44.64,44.09,40.87,39.31,39.24,38.38,35.81,33.93,32.13,30.87,30.74,29.67,28.84,27.43,27.33,21.11,21.08,20.42,19.16,18.44,17.49,14.18；HRMS(m/z):485.3622[M+H]+.
合成路线如下：
实施例15：化合物II-4的制备
操作与收率同化合物II-2，得类白色固体。Data for II-4：1H-NMR(CDCl3,400MHz):5.5700(s,1H,H-12),4.9897-4.9271(m,1H,J＝6.24,(CH3)2CHO-),2.7524-2.6710(m,1H),2.6126(s,1H,H-9),2.4773-2.3732(m,2H),2.2069(s,3H,CH3CO-),2.1721-2.0546(m,2H),1.9533-1.8465(m,2H),1.3159,1.3114,1.2265,0.9538(s,3H)(4-CH3),1.2191-1.2033(d,6H,J＝6.32,(CH3)2CHO-),0.8264-0.8093(m,6H,2-CH3).13C-NMR(CDCl3,400MHz):211.57,198.29,173.05,165.00,130.28,67.76,59.04,56.43,51.91,44.65,44.09,40.88,39.34,39.26,38.42,35.90,33.94,32.29,30.88,30.76,29.98,28.85,27.45,27.34,21.83,21.78,21.12,21.09,20.46,19.13,18.44,17.53；HRMS(m/z):499.3779[M+H]+.
合成路线如下：
实施例16：化合物II-5的制备
将化合物II-1(50mg，0.1032mmol)溶于2ml二氯甲烷，然后依次向反应液加入TEA(22μl，0.1548mmol)、HOBt(21mg，0.1548mmol)、EDC(59mg，0.3096mmol)和吗啉(14μl，0.1548mmol)，室温搅拌直至TLC检测反应完全。经薄层硅胶板分离(EA:PE＝1:1)得白色固体40mg，收率70％。Data for II-5：1H-NMR(CDCl3,400MHz):1H-NMR(CDCl3,400MHz):5.5553(s,1H,H-12),3.6761-3.5974(m,4H,),3.4968-3.4460(m,4H,),2.7268(s,1H,H-9),2.6663-2.5881(m,1H),2.5483-2.5199(m,1H),2.2857-2.1968(m,1H),2.2567(s,3H,CH3CO-),2.1396-2.0609(m,1H),1.9088-1.8442(m,3H),1.3315,1.2954,1.2299,0.9519(s,3H)(4-CH3),0.8334-0.7965(m,6H,2-CH3).13C-NMR(CDCl3,400MHz):212.01,198.93,172.06,165.55,130.21,66.80,66.80,59.07,56.50,52.24,46.43,44.60,44.17,41.93,40.86,39.31,39.23,38.77,36.90,33.94,32.45,30.87,30.69,29.58,28.88,27.45,27.39,21.21,21.13,20.43,19.17,18.48,17.46；HRMS(m/z):526.3891[M+H]+.
合成路线如下：
实施例17：化合物II-6的制备
操作与收率同化合物II-5，得白色固体。Data for II-6：1H-NMR(CDCl3,400MHz):5.5608-5.5517(d,1H,J＝3.64,H-12),4.3750-4.2867(m,1H),3.7848-3.7544(m,1H),3.6939(s,3H,-OCH3),3.1387-3.0560(m,1H),2.8128-2.3996(m,6H),2.7347(s,1H,H-9),2.2872-2.2259(m,1H),2.2580(s,3H,CH3CO-),2.1399-2.0465(m,1H),1.9169-1.8380(m,3H),1.3372,1.2915,1.2251,0.9521(s,3H)(4-CH3),0.8315-0.8022(m,6H,2-CH3).13C-NMR(CDCl3,400MHz):212.07,198.96,174.68,171.77,165.42,130.21,59.05,56.34,52.18,51.80,45.33,44.59,44.16,40.92,40.87,39.30,39.23,38.80,36.89,33.93,32.57,30.87,30.69,29.96,29.74,28.87,28.64,27.78,27.45,27.37,21.20,21.13,20.40,19.16,18.46,17.44；HRMS(m/z):582.4159[M+H]+.
合成路线如下：
实施例18：化合物II-7的制备
操作与收率同化合物II-5，得白色固体。Data for II-7：1H-NMR(CDCl3,400MHz):1H-NMR(CDCl3,400MHz):5.5653(s,1H,H-12),3.4070(brs,4H,),2.7196(s,1H,H-9),2.6667-2.5408(m,3H),2.3937-2.2859(m,2H),2.2859(s,3H,CH3CO-),2.1894-2.0679(m,3H),1.9483-1.8273(m,9H),1.3269,1.3044,1.2299,0.9515(s,3H)(4-CH3),2.1894-1.6120(m.,4H,),0.8331-0.7972(m,6H,2-CH3).13C-NMR(CDCl3,400MHz):212.19,198.79,171.79,165.20,130.27,59.04,56.57,52.50,46.69,45.74,44.65,44.14,40.87,39.29,39.24,38.65,36.57,33.93,32.74,30.90,30.87,30.75,28.87,27.46,27.35,26.20,24.37,21.24,21.13,20.49,18.84,18.46,17.47；HRMS(m/z):510.3937[M+H]+.
合成路线如下：
实施例19：化合物II-8的制备
操作与收率同化合物II-5，得白色固体。Data for II-8：1H-NMR(CDCl3,400MHz):5.8017(brs,1H,-NHCO-),5.5718(s,1H,H-12),4.0646-3.9794(m,1H,J＝6.64,(CH3)2CHNH-),2.7126-2.6306(m,1H),2.5975(s,1H,H-9),2.4772-2.4398(m,1H),2.3668-2.2951(m,1H),2.2471(s,3H,CH3CO-),2.1346-1.8388(m,5H),1.3013,1.3013,1.2343,0.9536(s,3H)(4-CH3),1.1539-1.1345(dd,6H,J1＝6.48,J2＝1.28,(CH3)2CHNH-),0.8294-0.8028(m,6H,2-CH3)；13C-NMR(CDCl3,400MHz):212.42,198.59,172.27,165.48,130.21,59.08,56.36,51.90,44.58,44.11,41.31,40.87,39.31,39.25,38.72,37.07,33.95,32.33,31.95,30.86,30.67,28.84,27.42,27.34,22.73,22.62,21.10,21.07,20.41,19.23,18.44,17.53；HRMS(m/z):498.3936[M+H]+.
合成路线如下：
实施例20：化合物II-9的制备
操作与收率同化合物II-5，得白色固体。Data for II-9：1H-NMR(CDCl3,400MHz):7.3277-7.2385(m,5H,5-Ph-H),6.3011-6.2833(brs,1H,-NHCO-),5.5684(s,1H,H-12),5.0889-5.0545(m,1H,PhCH),2.7612-2.6828(m,1H)，2.6036(s,1H,H-9),2.4449-2.3235(m,2H),2.2138(s,3H,CH3CO-),2.1300-1.8378(m,6H),1.3011,1.2923,1.2311,0.9512(s,3H)(4-CH3),1.4783-1.4612(d,3H,J＝6.84,),0.8272-0.8026(m,6H,2-CH3).13C-NMR(CDCl3,400MHz):212.58,198.54,172.28,165.46,143.52,130.20,128.58,128.58,127.15,126.16,126.16,59.09,56.43,51.83,48.72,44.57,44.14,40.88,39.33,39.26,38.77,36.89,33,96,32.30,31.75,30.88,30.66,28.86,27.43,27.35,21.95,21.13,21.05,20.40,19.30,18.45,17.55；HRMS(m/z):560.4100[M+H]+.
合成路线如下：
实施例21：化合物II-10的制备
操作与收率同化合物II-5，得白色固体。Data for II-10：1H-NMR(CDCl3,400MHz):6.4267(brs,1H,-NHCO-),5.5710(s,1H,H-12),4.0276-4.0069(m,2H,-CH2NH-),3.7535(s,3H,-COOMe),2.7838-2.7017(m,1H)，2.6005(s,1H,H-9),2.4593-2.3822(m,2H),2.2251(s,3H,CH3CO-),2.1371-2.0440(m,2H),1.9812-1.8420(m,3H),1.3112,1.3013,1.2378,0.9560(s,3H)(4-CH3),0.8293-0.8056(m,6H,2-CH3).13C-NMR(CDCl3,400MHz):212.44,198.43,173.46,170.45,165.39,130.20,59.06,56.51,52.25,51.88,44.58,44.12,41.26,40.87,39.31,39.26,38.70,36.67,33.95,31.76,31.68,30.87,30.66,28.85,27.42,27.34,21.11,21.05,20.39,19.24,18.46,17.53；HRMS(m/z):528.3680[M+H]+.
合成路线如下：
实施例22：AKBA结构改造化合物和AKBA的细胞活性对照实验
1.实验材料
对照药物：化合物AKBA；
实验药物：本发明实施例制备的化合物I1～I4，化合物II-1、II-2，化合物II-4～II-10。
细胞培养：PC-3细胞株，A549细胞株：山东大学医学院；RPMI-1640培养液,胎牛血清：美国Hyclone公司；胰蛋白酶：美国Amresco公司；MTT(四甲基偶氮唑)，DMSO(二甲基亚砜)：美国Sigma公司；青霉素-链霉素溶液(100×，过滤除菌)：中国赛尔斯公司；PBS(磷酸盐缓冲液)：鼎国昌盛有限公司。
仪器：酶联免疫检测仪：美国Bio-Rad；移液器：法国Gilson；生物安全柜1300series A2，二氧化碳培养箱：美国Thermo公司；灭菌锅：日本松下。
2.实验方法
将人前列腺癌细胞PC-3和人肺腺癌细胞A549在含10％胎牛血清，100U/ml青霉素和100mg/ml链霉素的RPMI-1640培养液中，37℃，5％CO2培养箱中培养。
收集对数生长期细胞，用含10％胎牛血清的RPMI-1640培养液配成浓度为2×104/mL细胞悬液，接种在96孔培养板,每孔0.1mL，生长16-24h待细胞完全贴壁后每孔加入0.1ml不同浓度的化合物，每个浓度设3个对照。培养24h后，每孔加入10μlMTT溶液(0.5mg/ml，1％MTT),继续培养4h。终止培养，轻轻吸掉孔内上清液。每孔加入100μl二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪OD570nm处测量各孔的吸光值(630nm校准)。按公式：lgIC50＝Xm-I*(sigP-(3-Pm-Pn)/4)，计算出IC50，其中Xm:药物最高浓度的对数值；sigP:所有抑制率的总和；I:lg(药物最高浓度/与最高浓度相邻的药物浓度)；Pm:最大杀伤率；Pn:最小杀伤率。
3.实验结果
活性对照实验结果见表1。
表1AKBA结构改造物与AKBA的IC50(μmol)对比表
由表1可以看出：本发明制备的AKBA结构改造物对人前列腺癌细胞PC-3和人肺腺癌细胞A549大部分表现出与AKBA相似的抗增值活性。
同样药物浓度(25uM)下，本发明制备的AKBA结构改造物与AKBA化合物对人前列腺癌细胞PC-3和人肺腺癌细胞A549的抑制率结果见图1和图2。
由1和图2可以看出，同等药物浓度下，本发明制备的AKBA结构改造物与AKBA化合物对人前列腺癌细胞PC-3和人肺腺癌细胞A549具有相似的抑制活性，其中化合物II-5、II-6、II-7的药理活性甚至优于化合物AKBA。