说明书黑三棱内酯B衍生物及其制备方法和用途
技术领域
本发明属于化学和药物发明技术领域，具体地说涉及黑三棱内酯B衍生物及其 制备方法和用途。
背景技术
黑三棱系黑三棱科植物黑三棱Sparganium stoloniferum Buch-Ham的块茎，其去 皮干燥块茎为中药三棱，味辛、苦，性平，具有祛瘀通经、破血消症、行气消积等 功效。梁侨丽等在三棱中发现了一种新型的氧杂蒽类的黑三棱内酯B(Sparstolonin B)，并且具有抗动脉粥样硬化的作用(中国专利，CN101899054A)，深入的分子生 物学研究表明，黑三棱内酯B是TLR2和TLR4选择性的拮抗剂(Qiao li Liang等，Jounal of biological chemistry,286(30),26470-26479)，具有很强的抗炎和免疫刺激抑制效果， 可用于减轻缺血再灌注、肿瘤、慢性炎性肠道疾病、糖尿病、阿尔兹海默病、慢性 阻塞性肺疾病、脓毒症、红斑狼疮、风湿性关节炎等炎症和自身免疫过强疾病(中国 专利，CN102218058A)，有望发展成为一种针对炎症疾病的新型药物。黑三棱内酯B 的天然含量低、提取分离困难，其来源受到很大的限制。先前我们发明了一种黑三 棱内酯B的全合成方法(中国专利，CN103483348A)，解决了其来源问题。以此为基 础，我们进一步以黑三棱内酯B为起始原料，合成了一系列黑三棱内酯B内酰胺衍 生物新分子，活性测试表明，这类化合物比黑三棱内酯B具有更高的抗肿瘤活性。
发明内容
本发明目的之一是提供一种黑三棱内酯B衍生物。
本发明目的之一是提供一种黑三棱内酯B衍生物的制备方法。
本发明目的之一是提供一种黑三棱内酯B衍生物的用途。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
本发明的黑三棱内酯B衍生物的结构如下所示：
其中，R为氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、C5-10芳基、吡啶基、CnH2nX、OR1或NR2R3， 其中，n为1-6，X为乙烯基、乙炔基、C5-10芳基、含1-4个氮原子和1-5个碳原子的 氮杂芳基、羟基、C1-4烷氧基、氨基、N,N-双C1-4烷基氨基、羧基、酰胺基、磺酰胺 基、C1-4烷基氧羰基、氰基或硝基，R1为氢、C1-4烷基、苄基或甲氧基苄基，R2和R3分别为氢、C1-4烷基、苄基、甲氧基苄基或R2、R3与N原子共同形成4-7元环。
更进一步的是，上面所述的黑三棱内酯B衍生物，其特征在于n为1-3，X为乙 烯基、苯基、吲哚基、羟基、叔丁氧基、氨基、N,N-二甲基氨基、吡咯啶基、羧基 或酰胺基，R1为氢、甲基、异丙基、叔丁基、苄基，R2和R3分别为氢、甲基或R2、R3与N原子共同形成5或6元环。
更进一步的是，上面所述的黑三棱内酯B衍生物，其特征在于R为氢、甲基、 异丙基、叔丁基、环丙基、环戊基、环己基、苯基、吡啶基、烯丙基、苄基、吲哚 亚甲乙基、羟基、羟基乙基、叔丁氧基、氰基乙基、氨基、氨基丙基、N,N-双甲基 氨基、吡咯啶基、哌啶基。
本发明的黑三棱内酯B衍生物可通过简便方法制备，并且易于放大，其通用制 备方法如下：
即黑三棱内酯B和1～3当量的伯胺或其常见的盐反应制备得到。
本发明中的黑三棱内酯B衍生物可用于制备抗肿瘤药物。例如，本发明中的化 合物10，结构式如下：
化合物10经抗肿瘤活性测试，其抗人肝癌细胞HepG2、BEL-7402、人宫颈癌细胞 Hala的活性分别为IC50＝0.65μmol/L、4.55μmol/L、0.87μmol/L。
本发明的优点：本发明化合物结构新颖，具有较高的抑制肿瘤细胞生长活性， 且具备一定成药性，有发展成为新型药物的潜力，其制备方法简单，易于操作。
下面结合实施例对本发明进行具体的描述。由技术常识可知，本发明可以通过 其他的不脱离其精神实质或必要特征的实施方案来实现。因此，下列实施方案，就 各方面而言，都只是举例说明，并不是仅有的。所有在本发明范围内或等同本发明 的范围内的改变均被本发明包含。
具体实施例
黑三棱内酯B衍生物的制备
实施例1：
将黑三棱内酯B 50mg加入到氨气的甲醇溶液中(自制，约10mol/L，2mL)， 回流8h,减压蒸干溶剂，柱层析分离(洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯＝3/1)得化合物 141mg，黄色固体，收率82％。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.32(s,1H),11.72(s,1H), 9.37(s,1H),7.40(s,1H),7.21(d,J＝8.7Hz,1H),7.11(s,1H),6.91(d,J＝8.7Hz,1H),6.81 (d,J＝8.2Hz,1H),6.71(d,J＝8.6Hz,1H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ163.3,157.1, 152.7,143.4,141.2,126.8,123.9,122.2,119.7,118.9,118.3,116.3,108.8,108.3,106.6；HRMS: C15H9O4N[M+Na]+的m/z理论值290.0424，实测值290.0431。
实施例2：
将黑三棱内酯B 50mg加入到甲胺的乙醇溶液中(31-35％，2mL)，按照实施 例1的方法，制得化合物245mg，黄色固体，收率86％。1H NMR(400MHz,DMSO) δ12.29(s,1H),9.42(s,1H),7.74(s,1H),7.17(d,J＝8.7Hz,1H),7.08(d,J＝2.2Hz,1H), 6.91(d,J＝8.8Hz,1H),6.80(d,J＝8.7Hz,1H),6.72(dd,J＝8.8,2.2Hz,1H),3.52(s,3H)； 13C NMR(400MHz,DMSO)δ171.5,159.6,147.7,145.6,143.7,135.7,128.4,125.1,121.2, 119.2,119.4,117.0,113.8,108.6,105.6,36.9；HRMS:C16H11O4N[M+Na]+的m/z理论值 304.0580，实测值304.0589。
实施例3：
将正丁胺(21mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的异丙醇溶液中，按照实施例 1的方法，制得化合物347mg，淡黄色固体，收率78％。1H NMR(400MHz,DMSO) δ12.36(s,1H),9.38(s,1H),7.78(s,1H),7.21(d,J＝8.7Hz,1H),7.16(d,J＝2.4Hz,1H), 6.92(d,J＝8.8Hz,1H),6.82(d,J＝8.8Hz,1H),6.73(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),3.97(t,J＝ 7.3Hz,2H),1.77–1.67(m,2H),1.35(dd,J＝14.7,7.7Hz,2H),0.94(t,J＝7.4Hz,3H)； 13C NMR(400MHz,DMSO)δ170.1,158.9,150.6,144.2,140.1,127.8,126.4,123.3,119.8, 118.0,117.5,117.0,111.5,110.3,106.2,45.4,30.2,20.7,14.2；HRMS:C19H17NO4[M+Na]+的m/z理论值346.1050，实测值346.1055。
实施例4：
将异丙胺(17mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的异丙醇溶液中，参照实施例 1的方法，制得化合物445mg，淡黄色固体，收率78％。1H NMR(400MHz,DMSO) δ12.49(s,1H),9.35(s,1H),7.68(s,1H),7.38(d,J＝2.7Hz,1H),7.21(d,J＝8.8Hz,1H), 6.92(d,J＝8.8Hz,1H),6.83(d,J＝8.8Hz,1H),6.74(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),5.16(m,1H), 1.43(s,3H),1.41(s,3H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ165.7,155.0,153.6,143.8,143.2, 130.6,125.7,122.1,119.7,118.7,118.2,117.0,111.8,108.9,104.1,52.4,19.2,18.9；HRMS: C18H15NO4[M+Na]+的m/z理论值332.0893，实测值332.0899。
实施例5：
将苯甲胺(30mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的乙醇溶液中，参照实施例1 的方法，制得化合物551mg，黄色固体，收率77％。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.21 (s,1H),9.41(s,1H),7.91(s,1H),7.44–7.30(m,4H),7.24(d,J＝8.8Hz,1H),7.13(d,J＝ 2.7Hz,1H),6.94(d,J＝8.8Hz,1H),6.88(s,1H),6.86(d,J＝8.8Hz,1H),6.74(dd,J＝8.8, 2.7Hz,1H),5.19(s,2H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ173.0,154.9,152.7,143.5,141.5, 133.5,131.7,130.9,129.3,129.1,128.6,128.3,125.5,123.3,119.8,118.0,117.8,115.5,113.6, 111.7,107.2,52.1；HRMS:C22H15NO4[M+Na]+的m/z理论值380.0893，实测值380.0898。
实施例6：
将烯丙胺(16mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的乙醇溶液中，参照实施例1 的方法，制得化合物645mg，黄色固体，收率79％。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.24 (s,1H),9.40(s,1H),7.71(s,1H),7.24(d,J＝8.8Hz,1H),7.11(d,J＝2.7Hz,1H),6.94(d,J ＝8.8Hz,1H),6.85(d,J＝8.8Hz,1H),6.74(dd,J＝8.8,2.7Hz,1H),6.09–5.97(m,1H), 5.24(m,2H),4.61(m,2H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ169.5,158.3,153.5,144.2,142.3, 134.9,129.8,126.5,121.3,119.8,118.0,117.8,117.0,116.4,112.5,109.8,107.2,47.2；HRMS: C18H13NO4[M+Na]+的m/z理论值330.0737，实测值330.0743。
实施例7：
将环己胺(28mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的乙醇溶液中，参照实施例1 的方法，制得化合物741mg，黄色固体，收率62％。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.45 (s,1H),9.32(s,1H),7.70(s,1H),7.40(d,J＝2.7Hz,1H),7.21(d,J＝8.8Hz,1H),6.91(d,J ＝8.8Hz,1H),6.82(d,J＝8.8Hz,1H),6.73(dd,J＝8.8,2.7Hz,1H),4.88–4.68(m,1H), 2.10–1.35(m,10H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ162.7,154.1,152.6,143.8,143.1, 129.6,126.5,122.0,119.4,118.6,118.1,115.8,110.9,110.5,107.3,57.1,33.5,33.1,25.9,24.7, 24.1；HRMS:C21H19NO4[M+Na]+的m/z理论值372.1206，实测值372.1214。
实施例8：
将环戊胺(32mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的乙醇溶液中，参照实施例1 的方法，制得化合物839mg，黄色固体，收率62％。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.56 (s,1H),9.42(s,1H),7.87(s,1H),7.45(d,J＝2.7Hz,1H),7.32(d,J＝8.8Hz,1H),6.98(d,J ＝8.8Hz,1H),6.92(d,J＝8.8Hz,1H),6.79(dd,J＝8.8,2.7Hz,1H),5.32–5.18(m,1H), 1.95–1.45(m,8H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ162.9,158.7,153.4,145.9,144.5,130. 9,126.1,123.8,120.7,119.2,118.2,117.4,110.2,109.1,106.8,60.5,34.6,34.1,25.8,25.2； HRMS:C20H17NO4[M+Na]+的m/z理论值358.1050，实测值358.1057。
实施例9：
将苯胺(35mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的异丙醇溶液中，参照实施例1 的方法，制得化合物954mg，黄色固体，收率84％。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.29 (s,1H),9.51(s,1H),7.88(s,1H),7.66–7.53(m,3H),7.47–7.39(m,2H),7.27(d,J＝8.8 Hz,1H),7.03(d,J＝8.8Hz,1H),6.95(dd,J＝8.8,2.7Hz,1H),6.78(d,J＝8.8Hz,1H), 6.65(d,J＝2.7Hz,1H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ165.7,157.9,151.0,143.1,143.9, 140.3,129.8,129.1,128.3,127.6,126.8,126.2,125.6,123.2,119.2,118.9,118.2,117.1,115.9, 109.9,105.1；HRMS:C21H13NO4[M+Na]+的m/z理论值366.0737，实测值366.0740。
实施例10：
将乙醇胺(17mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的异丙醇溶液中，参照实施例 1的方法，制得化合物1039mg，黄色固体，收率67％。1H NMR(400MHz,DMSO)δ 7.67(s,1H),7.20(d,J＝8.8Hz,1H),7.09(d,J＝2.7Hz,1H),6.92(d,J＝8.8Hz,1H),6.82 (d,J＝8.7Hz,1H),6.72(dd,J＝8.8,2.7Hz,1H),4.05(t,J＝5.5Hz,2H),3.73(t,J＝5.5Hz, 2H),3.56–3.16(m,3H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ168.7,155.3,151.8,144.2,141.5, 129.6,123.7,121.3,120.6,118.8,117.9,117.0,111.5,110.3,105.3,57.1,47.2.HRMS: C17H13NO5[M+Na]+的m/z理论值334.0686，实测值334.0694。
实施例11：
将色胺(45mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的异丙醇溶液中，参照实施例1 的方法，制得化合物1153mg，黄色固体，收率69％。1H NMR(400MHz,DMSO)δ 12.38(s,1H),10.89(s,1H),9.38(s,1H),7.76(s,1H),7.72(d,J＝7.8Hz,1H),7.36(d,J＝ 8.0Hz,1H),7.21(m,2H),7.09(m,2H),7.02(t,J＝7.0Hz,1H),6.92(d,J＝8.8Hz,1H), 6.84(d,J＝8.8Hz,1H),6.73(dd,J＝8.8,2.7Hz,1H),4.31–4.16(t,2H),3.28–3.09(t, 2H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ169.3,158.5,150.6,145.2,141.3,135.9,129.2,128.0, 125.9,124.9,122.9,121.5,120.5,119.4,118.9,118.1,117.7,117.1,112.0,111.4,110.8,110.1, 107.4,47.2,24.4；HRMS:C25H18N2O4[M+Na]+的m/z理论值433.1159，实测值433.1163。
实施例12：
将甘氨酸乙酯盐酸盐(39mg)、无水碳酸钾(51.5mg)加入到黑三棱内酯B(50 mg)的异丙醇溶液中，参照实施例1的方法，制得化合物1238mg，黄色固体，收 率58％。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.88(s,1H),9.46(s,1H),7.78(s,1H),7.27(d,J＝ 8.8Hz,1H),7.01(d,J＝2.7Hz,1H),6.95(d,J＝8.8Hz,1H),6.88(d,J＝8.8Hz,1H),6.75 (dd,J＝8.9,2.7Hz,1H),4.79(s,2H),4.21(q,J＝7.1Hz,2H),1.25(t,J＝7.1Hz,3H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ171.3,168.9,158.6,152.5,144.7,142.4,127.3,125.7,123.7, 119.7,118.6,117.8,117.0,111.9,111.3,107.4,61.8,48.9,14.8；HRMS:C19H15NO6[M+Na]+的m/z理论值376.0792，实测值376.0798。
实施例13：
将丙氨酸乙酯盐酸盐(86mg)、三乙胺(94mg)加入到黑三棱内酯B的乙醇 溶液中，参照实施例1的方法，制得羧酸酯中间体，然后将其加入到10％氢氧化锂 的THF/H2O(1:1)溶液中，室温反应过夜，乙酸乙酯萃取，柱层析分离(二氯甲烷/ 甲醇＝20:1)得1332mg，两步收率51％。1H NMR(400MHz,DMSO)δ7.78(s,1H),7.27 (d,J＝8.8Hz,1H),7.01(d,J＝2.7Hz,1H),6.95(d,J＝8.8Hz,1H),6.88(d,J＝8.8Hz, 1H),6.75(dd,J＝8.9,2.7Hz,1H),4.79(t,J＝9.2,2H),3.78–3.16(m,3H),2.63(t,J＝9.2 Hz,2H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ174.3,169.8,158.4,151.3,144.7,141.7,129.3, 125.3,121.9,119.5,118.3,117.8,117.1,112.4,110.8,106.3,41.8,35.6；HRMS:C18H13NO6[M+Na]+的m/z理论值362.0635，实测值362.0640。
实施例14：
将1,3-丙二胺(21mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的异丙醇溶液中，参照实 施例1的方法，制得化合物1441mg，淡黄色固体，收率68％。1H NMR(400MHz, DMSO)δ7.79(s,1H),7.22(d,J＝8.8Hz,1H),7.14(s,1H),6.93(d,J＝8.8Hz,1H),6.83 (d,J＝8.8Hz,1H),6.77–6.72(m,1H),4.04(t,J＝6.4Hz,2H),3.41–3.27(m,4H),2.71 (t,J＝6.8Hz,2H),1.95–1.88(m,2H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ170.1,158.9, 150.7,144.5,141.8,129.3,126.3,122.3,119.7,118.8,117.9,117.1,112.6,111.8,105.7,44.6, 40.8,28.4；HRMS:C18H16N2O4[M+Na]+的m/z理论值347.1002，实测值347.1011。
实施例15：
将3-氨基丙氰(39mg)加入到黑三棱内酯B的乙醇溶液中，参照实施例1的方 法，制得化合物1540mg,黄色固体，收率67％。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.67 (s,1H),9.46(s,1H),7.89(s,1H),7.12(d,J＝8.8Hz,1H),7.09(d,J＝2.7Hz,1H),6.99(d,J ＝8.8Hz,1H),6.88(d,J＝8.8Hz,1H),6.64(dd,J＝8.9,2.7Hz,1H),4.98(t,2H),3.62(t, 2H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ171.7,159.6,152.3,144.9,141.3,128.5,126.9,121.3, 119.7,119.2,118.8,117.4,117.0,113.6,110.9,108.9,46.8,17.8；HRMS:C18H12N2O4[M+Na]+的m/z理论值343.0689，实测值343.0692。
实施例16：
将2-(哌啶基)乙胺(47.8mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的乙醇溶液中， 参照实施例1的方法，制得化合物1645mg，淡黄色固体，收率64％。1H NMR(400MHz, DMSO)δ12.01(s,1H),9.68(s,1H),7.91(s,1H),7.43(d,J＝8.7Hz,1H),7.23(d,J＝2.6 Hz,1H),6.99(d,J＝8.8Hz,1H),6.80(d,J＝8.8Hz,1H),6.79(dd,J＝8.8,2.7Hz,1H), 4.23(t,J＝7.0Hz,2H),3.36–3.11(m,6H),1.98–1.65(m,6H)；13C NMR(400MHz, DMSO)δ171.2,159.9,153.9,145.7,143.3,129.1,127.3,123.8,119.8,118.2,118.9,117.5, 111.5,110.9,105.8,55.9,54.8,53.6,43.8,26.8,25.4,24.7；HRMS:C22H22N2O4[M+Na]+的 m/z理论值401.1472，实测值401.1477。
实施例17：
将盐酸羟胺(69.5mg)、三乙胺(101mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的异 丙醇溶液中，参照实施例1的方法，制得化合物1740mg，淡黄色固体，收率76％。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ7.89(s,1H),7.45(d,J＝8.8Hz,1H),7.11(d,J＝2.7Hz, 1H),7.08(d,J＝8.8Hz,1H),6.98(d,J＝8.7Hz,1H),6.88(dd,J＝8.8,2.7Hz,1H),3.67– 3.23(m,3H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ171.8,161.9,158.4,148.4,146.3,134.6,126.8, 124.2,119.9,118.3,118.0,117.3,112.6,109.2,107.3；HRMS:C15H9NO5[M+Na]+的m/z理 论值306.0373，实测值306.0376。
实施例18：
将水合肼(28mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的异丙醇溶液中，参照实施例 1的方法，制得化合物1838mg，淡黄色固体，收率72％。1H NMR(400MHz,DMSO) δ7.76(s,1H),7.12(d,J＝8.8Hz,1H),7.01(d,J＝2.7Hz,1H),6.95(d,J＝8.8Hz,1H), 6.87(d,J＝8.7Hz,1H),6.63(dd,J＝8.8,2.7Hz,1H),3.67–3.23(m,4H)；13C NMR(400 MHz,DMSO)δ170.9,158.3,153.9,145.7,143.5,134.5,127.2,123.5,119.2,118.6,117.3, 116.3,114.3,112.8,107.9；HRMS:C15H10N2O4[M+Na]+的m/z理论值305.0533，实测值 305.0537。
实施例19：
将N,N-二甲基肼(34mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的乙醇溶液中，参照 实施例1的方法，制得化合物1945mg，黄色固体，收率78％。1H NMR(400MHz, DMSO)δ11.23(s,1H),9.87(s,1H),8.02(s,1H),7.56(d,J＝8.7Hz,1H),7.43(d,J＝2.6 Hz,1H),7.12(d,J＝8.8Hz,1H),6.81(d,J＝8.8Hz,1H),6.75(dd,J＝8.8,2.7Hz,1H), 3.31(s,3H),3.28(s,3H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ169.8,153.4,150.0,146.6,144.8, 128.3,126.5,123.8,118.9,118.3,117.6,116.9,113.5,112.8,105.3,45.7,44.9；HRMS: C17H14N2O4[M+Na]+的m/z理论值333.0846，实测值333.0852。
实施例20
将己氨酸甲酯盐酸盐(95mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的乙醇溶液中，参 照实施例1的方法，制得化合物2048mg，淡黄色固体，收率65％。1H NMR(400MHz, DMSO)δ12.42(s,1H),9.41(s,1H),7.82(s,1H),7.40(d,J＝8.7Hz,1H),7.09(d,J＝2.4 Hz,1H),6.98(d,J＝8.8Hz,1H),6.87(d,J＝8.8Hz,1H),6.81(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H), 6.72(t,J＝7.3Hz,1H),3.68(s,3H),1.77–1.67(m,2H),1.45-1.38(m,4H),0.94(t,J＝7.4 Hz,3H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ175.8,168.5,157.5,153.3,145.2,144.3,133.5, 127.8,123.4,120.8,119.7,119.2,118.6,113.4,110.9,106.7,59.3,51.5,29.3,27.3,24.4,14.9； HRMS:C22H21NO6[M+Na]+的m/z理论值418.1261，实测值418.1266。
实施例21
将N,N-二甲基甘氨酰胺(38mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的异丙醇溶液中， 参照实施例1的方法，制得化合物2155mg，淡黄色固体，收率84％。1H NMR(400MHz, DMSO)δ12.45(s,1H),9.44(s,1H),7.80(s,1H),7.45(d,J＝8.7Hz,1H),7.12(d,J＝2.4 Hz,1H),6.95(d,J＝8.8Hz,1H),6.82(d,J＝8.8Hz,1H),6.80(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H), 4.92(s,2H),3.02(s,3H),3.08(s,3H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ175.4,172.8,158.4, 151.2,143.3,142.1,128.7,125.2,122.6,119.8,118.4,117.7,117.2,111.6,110.9,105.8,51.8, 36.9,36.2；HRMS:C19H16N2O5[M+Na]+的m/z理论值375.0951，实测值375.0958。
实施例22
将2-氨基-N,N-二甲基乙基磺酰胺(57mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的异丙 醇溶液中，参照实施例1的方法，制得化合物2251mg，淡黄色固体，收率68％。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.35(s,1H),9.34(s,1H),7.70(s,1H),7.40(d,J＝8.7Hz,1H), 7.16(d,J＝2.4Hz,1H),6.99(d,J＝8.8Hz,1H),6.86(d,J＝8.8Hz,1H),6.84(dd,J＝8.8, 2.6Hz,1H),4.92(t,J＝8.2Hz,2H),4.72(t,J＝8.2Hz,2H),3.22(s,3H),3.18(s,3H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ175.6,160.4,154.4,145.4,143.8,129.3,124.2,123.5,120.4, 119.2,118.1,117.7,116.8,112.8,105.3,51.4,41.5,35.6,35.0；HRMS:C19H18N2O6S[M+Na]+的m/z理论值425.0778，实测值425.0782。
实施例23
将2-氨基-1,3,5-三嗪(36mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的甲醇溶液中，参 照实施例1的方法，制得化合物2352mg，黄色固体，收率81％。1H NMR(400MHz, DMSO)δ12.28(s,1H),9.56(s,1H),9.53(s,1H),9.49(s,1H),7.76(s,1H),7.45(d,J＝8.7 Hz,1H),7.19(d,J＝2.4Hz,1H),6.98(d,J＝8.8Hz,1H),6.88(d,J＝8.8Hz,1H),6.86(dd, J＝8.8,2.6Hz,1H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ169.6,168.8,168.4,162.3,156.6,151.9, 143.2,143.7,128.3,125.9,123.7,123.8,118.3,118.1,118.0,117.3,109.2,105.6；HRMS: C18H10N4O4[M+Na]+的m/z理论值369.0594，实测值369.0598。
实施例24
将1-氨基吡咯烷盐酸盐(45mg)、三乙胺(56mg)加入到黑三棱内酯B的甲醇 溶液中，按照实施例1的方法，制得化合物2448mg，黄色固体，收率77％。1H NMR (400MHz,DMSO)δ12.56(s,1H),9.42(s,1H),7.87(s,1H),7.45(d,J＝2.7Hz,1H),7.32 (d,J＝8.8Hz,1H),6.98(d,J＝8.8Hz,1H),6.92(d,J＝8.8Hz,1H),6.79(dd,J＝8.8,2.7 Hz,1H),4.12–3.90(m,4H),1.95–1.81(m,4H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ170.3, 155.5,153.6,146.4,144.7,129.6,125.5,122.7,118.3,118.203,117.2,115.8,115.2,111.4, 105.3,51.6,51.4,24.6,24.2；HRMS:C19H16N2O4[M+Na]+的m/z理论值359.1002，实测 值359.1010。
实施例25
将1-甲氧基-2-丙胺(33mg)加入到黑三棱内酯B(50mg)的异丙醇溶液中，参 照实施例1的方法，制得化合物2551mg，淡黄色固体，收率81％。1H NMR(400MHz, DMSO)δ12.30(s,1H),9.52(s,1H),7.84(s,1H),7.21(d,J＝8.7Hz,1H),7.11(d,J＝2.2 Hz,1H),6.95(d,J＝8.8Hz,1H),6.87(d,J＝8.7Hz,1H),6.79(dd,J＝8.8,2.2Hz,1H), 5.62–5.51(m,1H),3.87–3.79(m,2H),3.54(s,3H),1.41–1.38(m,3H)；13C NMR(400 MHz,DMSO)δ169.5,158.2,151.3,144.2,143.2,130.5,126.2,124.6,119.2,118.6,118.2, 117.3,110.6,109.3,107.8,75.3,58.8,53.3,15.9；HRMS:C19H17NO5[M+Na]+的m/z理论 值362.0999，实测值362.1004。
实施例26
将O-叔丁基羟胺盐酸盐(47mg)、三乙胺(56mg)加入到黑三棱内酯B(50mg) 的甲醇溶液中，参照实施例1的方法，制得化合物2550mg，淡黄色固体，收率80％。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.40(s,1H),9.58(s,1H),7.80(s,1H),7.29(d,J＝8.7Hz, 1H),7.15(d,J＝2.2Hz,1H),6.90(d,J＝8.8Hz,1H),6.89(d,J＝8.7Hz,1H),6.89(dd,J＝ 8.8,2.2Hz,1H),1.28–1.24(m,9H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ168.7,158.6,152.7, 144.8,142.4,126.7,125.3,122.2,119.2,119.2,118.5,117.2,111.8,109.2,105.2,77.2,29.6, 29.4,29.2；HRMS:C19H17NO5[M+Na]+的m/z理论值362.0999，实测值362.1003。
实施例27
将O-(4-甲氧基苄基)羟胺盐酸盐(70mg)、三乙胺(56mg)加入到黑三棱内酯 B(50mg)的乙醇溶液中，参照实施例1的方法，制得化合物2762mg，黄色固体， 收率83％。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.20(s,1H),9.40(s,1H),7.89(s,1H),7.42– 7.30(m,3H),7.21(d,J＝8.8Hz,1H),7.10(d,J＝2.7Hz,1H),6.98(d,J＝8.8Hz,1H),6.85 (s,1H),6.81(d,J＝8.8Hz,1H),6.72(dd,J＝8.8,2.7Hz,1H),5.10(s,2H),3.91(s,3H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ168.4,159.4,157.3,151.7,143.8,142.2,130.1,129.7,128.2, 126.2,125.7,122.4,119.9,119.6,118.2,117.9,113.2,112.8,111.3,107.8,105.3,75.8,56.2； HRMS:C23H17NO6[M+Na]+的m/z理论值426.0948，实测值426.0952。
实施例28
将苄基肼(46mg)加入到黑三棱内酯B的甲醇溶液中，参照实施例1的方法， 制得化合物2850mg，黄色固体，收率72％。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.21(s,1H), 9.41(s,1H),7.91(s,1H),7.44–7.30(m,4H),7.24(d,J＝8.8Hz,1H),7.13(d,J＝2.7Hz, 1H),6.94(d,J＝8.8Hz,1H),6.88(s,1H),6.86(d,J＝8.8Hz,1H),6.74(dd,J＝8.8,2.7Hz, 1H),5.19(s,2H),4.81(s,1H)；13C NMR(400MHz,DMSO)δ172.1,154.3,151.2,142.5, 140.1,134.6,131.5,130.1,129.4,129.0,128.4,128.0,126.7,123.2,119.9,118.2,117.8,114.7, 113.7,112.9,108.3,52.1；HRMS:C22H16N2O4[M+Na]+的m/z理论值395.1002，实测值 395.1009。
实施例29抗癌活性测定：
说明书中所列出的化合物的抗癌活性(IC50值)分别在人肝癌细胞HepG2、 BEL-7402及人宫颈癌细胞Hela中测得，采用CCK-8法。将处于对数生长期的细胞以 5×103个/孔接种至96孔细胞培养板，设3个复孔，24h后，加入不同浓度的化合物， 共设8个药物浓度梯度，分别为0.1％(v/v)DMSO、0.3125μmol/L、0.625μmol/L、 1.25μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L与20μmol/L，药物处理48h后 加入以新鲜培养基稀释的CCK-8(2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑 单钠盐)溶液并于37℃温育2h，多功能酶标仪Varioskan Flash(Thermo)读取450nm (检测波长)和630nm(参考波长)波长的吸光度值。0.1％DMSO(v/v)作为阴性 对照，计算该化合物对细胞生长的抑制率与半数抑制浓度IC50值，每一样品重复实验 3次，并将3次实验结果取平均值。
本发明的代表性化合物1、2、4、10的抗癌活性测试结果见下表：
表1代表化合物的活性测试结果