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1、(10)申请公布号 CN 102850820 A(43)申请公布日 2013.01.02CN102850820A*CN102850820A*(21)申请号 201210356006.3(22)申请日 2012.09.17C09B 61/00(2006.01)C09B 67/10(2006.01)C09B 67/08(2006.01)C09B 67/54(2006.01)A23L 1/275(2006.01)A61K 36/815(2006.01)A61P 39/06(2006.01)A61K 131/00(2006.01)(71)申请人塔里木大学地址 843300 新疆维吾尔自治区阿拉尔市虹桥。
2、南路1号(72)发明人白红进 王丽玲 向延菊 韩爱芝孟庆艳 张元德(54) 发明名称锐孔法制备黑果枸杞色素微胶囊的方法(57) 摘要本发明公开了一种锐孔法制备黑果枸杞色素微胶囊的方法,包括以下步骤:以黑果枸杞鲜果或黑果枸杞干果为原料,破碎,酸性乙醇浸提,微波提取仪中提取,过滤后将残渣用酸性乙醇再提取2-3次,合并提取液,减压浓缩得到色素浓缩液;将所述色素浓缩液经大孔树脂吸附、洗脱、解吸、减压浓缩后,按比例加入包埋剂,固化、过滤、复膜、过滤、返浸,在40-50的条件下常压干燥,得到黑果枸杞色素微胶囊。经此工艺制得的黑果枸杞色素微胶囊包埋率在7080,黑果枸杞色素经微胶囊化后,具有缓释作用,24h。
3、内可以释放色素在70以上,且保持形态完整,黑果枸杞色素微胶囊在75的相对湿度环境中的稳定性明显提高,微胶囊的吸湿增重小于10。(51)Int.Cl.权利要求书1页 说明书5页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 5 页1/1页21.一种锐孔法制备黑果枸杞色素微胶囊的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)以黑果枸杞鲜果或黑果枸杞干果为原料,破碎,酸性乙醇浸提12h20h,料液比为120160,微波提取仪中提取20min30min,过滤后将残渣用酸性乙醇再提取2-3次,合并提取液,减压浓缩得到色素浓缩液;所述的酸性乙醇为:含质量浓度0.1-0.3HCl。
4、的乙醇,乙醇采用浓度为45-95的乙醇;(2)将所述色素浓缩液经大孔树脂吸附、洗脱、解吸、减压浓缩后,色素浓缩液与包埋剂以11-13的质量比例充分搅拌均匀,用注射器将其注入15的氯化钙溶液,置于04条件下静置0.5h3h,然后将凝聚珠过滤到质量百分比浓度为13的壳聚糖水溶液中静置15min,200目过滤,将凝聚珠再一次浸入质量百分比浓度为15的海藻酸钠水溶液中静置5min,以中和表面电荷,过滤,去离子水洗涤,在4050的条件下常压干燥,得到黑果枸杞色素微胶囊。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,其中包埋剂是指用pH为3.0的磷酸盐缓冲液加热溶解海藻酸钠,配置成质量浓度为15的海藻酸钠溶液。
5、,充分溶解冷却至室温。3.根据权利要求2所述的方法,所述的pH为3.0的磷酸盐缓冲液配置方法为:取411ml浓度为0.2mol/L的磷酸氢二钠与1589ml浓度为0.1mol/L的柠檬酸溶液混合;0.2mol/L的磷酸氢二钠:称取71.6gNa2HPO4-12H2O,溶于1000ml水;0.2mol/L的磷酸氢二钠:称取35.01gNa2HPO4-2H2O,溶于1000ml水;0.1mol/L的柠檬酸溶液:称取21.01gC4H2O7-H2O,溶于1000ml水。权 利 要 求 书CN 102850820 A1/5页3锐孔法制备黑果枸杞色素微胶囊的方法技术领域0001 本发明涉及采用锐孔法制备。
6、黑果枸杞色素微胶囊的方法。背景技术0002 黑果枸杞富含花色苷,是一种珍稀的天然花色苷类色素资源。黑果枸杞丰产性好,其色素既可染色,也有一定的医疗保健功能。现代医学研究证明黑果枸杞植物果实提取物具有降血脂、免疫调节、治疗心血管系统疾病、抗动脉硬化、抗肿瘤等功效,但黑果枸杞色素的稳定性较差,如易受潮,易氧化等,导致色素使用率下降。发明内容0003 本发明的目的是提供一种采用低温浓缩,常压干燥技术,开发营养成分高,具有显著稳定色素并提高色素抗氧化活性的黑果枸杞色素微胶囊制备方法。0004 本发明采用如下技术方案:0005 一种锐孔法制备黑果枸杞色素微胶囊的方法,包括以下步骤:0006 (1)以黑果。
7、枸杞鲜果或黑果枸杞干果为原料,破碎,酸性乙醇浸提12h20h,料液比为120160,微波提取仪中提取20min30min,过滤后将残渣用酸性乙醇再提取2-3次,合并提取液,减压浓缩得到色素浓缩液;所述的酸性乙醇为:含质量浓度0.1-0.3HCl的乙醇,乙醇采用浓度为45-95的乙醇;0007 (2)将所述色素浓缩液经大孔树脂吸附、洗脱、解吸、减压浓缩后,色素浓缩液与包埋剂以11-13的质量比例充分搅拌均匀,用注射器将其注入15的氯化钙溶液,置于04条件下静置0.5h3h,然后将凝聚珠过滤到质量百分比浓度为13的壳聚糖水溶液中静置15min,200目过滤,将凝聚珠再一次浸入质量百分比浓度为15的。
8、海藻酸钠水溶液中静置5min,以中和表面电荷,过滤,去离子水洗涤,在4050的条件下常压干燥,得到黑果枸杞色素微胶囊。0008 所述的方法,其中包埋剂是指用pH为3.0的磷酸盐缓冲液加热溶解海藻酸钠,配置成质量浓度为15的海藻酸钠溶液,充分溶解冷却至室温。0009 所述的方法,所述pH为3.0的磷酸盐缓冲液配置方法为:取411ml浓度为0.2mol/L的磷酸氢二钠与1589ml浓度为0.1mol/L的柠檬酸溶液混合;0010 0.2mol/L的磷酸氢二钠:称取71.6gNa2HPO4-12H2O,溶于1000ml水;0011 0.2mol/L的磷酸氢二钠:称取35.01gNa2HPO4-2H2。
9、O,溶于1000ml水;0012 0.1mol/L的柠檬酸溶液:称取21.01gC4H2O7-H2O,溶于1000ml水。0013 本发明一种黑果枸杞色素抗氧化活性微胶囊制备方法与现有技术相比较有如下有益效果:0014 1、由于本发明选用的原料为纯天然无污染的黑果枸杞果实,保证了色素的来源安全、可靠。0015 2、由于本发明采用溶剂常温和微波辅助浸提集合柱层析分离技术对色素进行提说 明 书CN 102850820 A2/5页4取分离,整个过程一直在常温下进行,因此,不但有效地缩短了提取分离的时间,减少了工艺过程中的能耗,而且所得到的产品纯度高、性能稳定,可应用于天然色素食品添加剂以及具有抗氧化。
10、作用的医药保健品原料。0016 3、由于本发明采用复凝聚凝胶法制备色素微胶囊,操作简单易行。0017 4、由于本发明采用天然多糖制备的海藻酸钠-壳聚糖微胶囊作为色素的载体,具有生物相容性好、制备条件温和及免疫源性低等优点。0018 5、由于本发明采用海藻酸钠对色素进行初次包埋,壳聚糖复膜对黑果枸杞色素进行微胶囊化,研究表明经过微胶囊化后的黑果枸杞色素的稳定性有明显的改善,在两个月内微胶囊前后色素的生物活性略有降低,试验证实微胶囊化后的黑果枸杞色素具有缓释作用,24h内可以释放色素在70以上,且保持形态完整,表明其可以作为缓释剂长时间释放色素,更适用于人体吸收。在湿度环境中的稳定性也有明显提高,。
11、在75的相对湿度环境中,微胶囊的吸湿增重小于10。具体实施方式0019 以下结合具体实施例,对本发明进行详细说明。0020 实施例1锐孔法制备黑果枸杞色素微胶囊及色素微胶囊的质量评定,包括以下步骤:0021 (1)将黑果枸杞干果(或者黑果枸杞植物的鲜果实在室温下晾干粉碎,或在40120下烘烤248小时)对其进行除杂后粉碎,称取10g,用盐酸浓度为0.3的75的乙醇溶剂常温下浸提20h,料液比为150(v/v),然后放入微波提取仪中提取20min,微波辐射功率为70W,提取液经8000r/min离心机过滤20min后收集上清液,并将残渣再用盐酸浓度为0.3的75的乙醇溶液在微波提取仪中萃取3次,。
12、每次料液比为130(v/v),微波辐射功率均为70W,并将得到的提取液经8000r/min离心机过滤20min后收集上清液,合并提取液,减压浓缩,回收乙醇,得到黑果枸杞色素浓缩液。0022 将黑果枸杞色素的浓缩液经大孔树脂吸附,用去离子水洗至无糖、酸,再用含盐酸浓度为0.3的75的乙醇溶液洗树脂柱,至洗脱液无色,将洗脱液减压浓缩,回收乙醇,色素浓缩液与包埋剂(pH为3.0的磷酸盐缓冲液加热溶解海藻酸钠,配置成质量浓度为2的海藻酸钠溶液,充分溶解后冷却至室温得包埋剂)以13的质量比例充分搅拌均匀,用注射器将色素浓缩液与包埋剂混合液注入质量百分比浓度为2的氯化钙水溶液,置于3条件下静置0.5h,然。
13、后将凝聚珠过滤到质量百分比浓度为1的壳聚糖水溶液中静置15min,经200目的滤布过滤,将凝聚珠再一次浸入质量百分比浓度为2的海藻酸钠水溶液中静置5min,以中和表面电荷,经200目的滤布过滤,去离子水洗涤,在50的条件下常压干燥,得到黑果枸杞色素微胶囊,。0023 黑果枸杞色素微胶囊质量评定的方法如下:0024 (1)黑果枸杞色素含量的测定方法是:0025 制备样品溶液:0026 精密称取0.337g黑果枸杞色素微胶囊样品,用pH3.0的75乙醇定容至100mL,混合均匀,即配制成黑果枸杞色素微胶囊待测样品溶液。0027 制备标准曲线说 明 书CN 102850820 A3/5页50028 。
14、精密称取黑果枸杞色素0.3000g,用pH3.0的75乙醇定容至100mL,从中取2、4、6、8、10、12、14mL分别移入50mL容量瓶中,用pH3.0的75乙醇定容至刻度,混合均匀,即配制成浓度为0.12、0.24、0.36、0.48、0.60、0.72、0.84mg/mL的黑果枸杞色素标准溶液。以pH3.0的75乙醇为参比,在波长525nm下用Cary-200紫外可见分光光度计测得其吸光值A,以浓度C对吸光度A进行回归,得回归方程为A0.59923C-0.01238,R0.9994。0029 测定样品溶液中黑果枸杞色素的含量0030 以pH3.0的75乙醇为参比,在波长525nm下用C。
15、ary-200紫外可见分光光度计测得黑果枸杞色素微胶囊待测样品溶液的吸光值0.23,在标准曲线上查得黑果枸杞色素的含量0.404mg/ml,样品中黑果枸杞色素含量12g/100g。0031 (2)微胶囊的包埋率与包埋效率的测定方法是0032 包埋率()(微胶囊产品中黑果枸杞色素含量/黑果枸杞色素的加入量100,由(1)中测得的微胶囊中黑果枸杞色素含量12g/100g,黑果枸杞色素的加入量为0.209g,带入包埋率公式即得包埋率为57。0033 包埋效率()微胶囊中的色素总量/微胶囊的总重量100,由(1)中测得的微胶囊中黑果枸杞色素含量12g/100g,微胶囊的总重量为0.337g,包埋效率为。
16、36。0034 (3)微胶囊在胃液模拟液中释放率的测定方法0035 在50mL胃液模拟液(含0.09mol/LNaCl的0.01mol/LHCl溶液,pH2.0)中加入50g微胶囊,在37的条件下,以每分钟60转的速度离心,分别在1h、2h、4h、8h、12h、24h、48h小时取样,按(1)黑果枸杞色素含量的测定方法检测色素含量,按照以下公式计算释放率,结果见表1。0036 释放率()胃液模拟液中释放的色素量/加入的微胶囊重量载药量1000037 表1胃液模拟液中释放率结果0038 0039 0040 从表1数据可以看出色素微胶囊在胃液模拟液中的释放率随时间的延长而增加,色素在48h之内释放。
17、率为1.38。说 明 书CN 102850820 A4/5页60041 (4)微胶囊在肠液模拟液中释放率的测定方法0042 在50mL肠液模拟液(含76.5mmol/NaCl的29mmol/LpH7.4的磷酸缓冲液)中加入50g微胶囊,在37的条件下,以每分钟60转的速度离心,分别在1h、2h、4h、8h、12h、24h、48h小时取样,按(1)黑果枸杞色素含量的测定方法检测色素含量,按照以下公式计算释放率,结果见表2。0043 释放率()肠液模拟液中释放的色素量/加入的微胶囊重量载药量1000044 表2肠液模拟液中释放率结果0045 0046 从表2数据可以看出色素微胶囊在肠液模拟液中的释。
18、放率随时间的延长而增加,色素在48h之内释放率为0.64。0047 (5)黑果枸杞色素微胶囊耐湿性测定方法0048 取色素微胶囊54g置于试管中放入密封的棕色广口瓶中,置于25,相对湿度75的环境中,分别于第5、10、15天测定色素含量(按(1)黑果枸杞色素含量的测定方法检测色素含量),其结果见表3。0049 表3耐湿试验0050 0051 黑果枸杞色素微胶囊在75的相对湿度条件下,微胶囊的吸湿增重约为7,符合生产制备要求。说 明 书CN 102850820 A5/5页70052 实施例2一种黑果枸杞色素抗氧化活性微胶囊制备方法,包括以下步骤:0053 (1)将黑果枸杞干果对其进行除杂后粉碎,。
19、称取10g,用含0.1HCl的95的乙醇溶剂常温下浸提12h,料液比为130,然后放入微波提取仪中提取15min,微波辐射功率为80W,提取液经6000r/min离心机过滤15min后收集上清液,并将残渣再用含0.1HCl的95的乙醇溶液在微波提取仪中萃取2次,每次料液比为130,微波辐射功率均为80W,并将得到的提取液经6000r/min离心机过滤15min后收集上清液,合并提取液,减压浓缩,回收乙醇,得到黑果枸杞色素浓缩液。0054 将黑果枸杞色素的浓缩液经大孔树脂吸附,用去离子水洗至无糖、酸,再经含0.1HCl的95的乙醇溶液洗树脂柱,至洗脱液无色,将洗脱液减压浓缩,得到色素浓缩液,色素浓缩液与2的海藻酸钠包埋剂以11的比例充分搅拌均匀,用注射器将其注入3的氯化钙溶液,置于4条件下静置0.5h,然后将凝珠过滤到2的壳聚糖溶液中静置15min,经200目的滤布过滤,将凝聚珠再一次浸入2的氯化钙溶液中静置5min,以中和表面电荷,经200目的滤布过滤,去离子水洗涤,在50的条件下常压干燥,得到黑果枸杞色素微胶囊,经测定黑果枸杞色素微胶囊的包埋率为75。0055 应当理解的是,对本领域普通技术人员来说,可以根据上述说明加以改进或变换,而所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。说 明 书CN 102850820 A。