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1、(10)申请公布号 CN 103113142 A(43)申请公布日 2013.05.22CN103113142A*CN103113142A*(21)申请号 201310037651.3(22)申请日 2013.01.30C05F 17/00(2006.01)(71)申请人重庆富博生物技术有限公司地址 404089 重庆市万州区小周镇国泰街53号(72)发明人陶仕达(74)专利代理机构云南派特律师事务所 53110代理人龚笋根(54) 发明名称畜禽粪便除臭发酵液及其制备方法(57) 摘要本发明目的是提供一种畜禽粪便除臭发酵液及其制备方法;畜禽粪便除臭发酵液,由以下重比的组分组成:甘蔗糖蜜1018。
2、%、鱼精膏0.51.8%、淀粉1020%;嗜粪乳杆菌、嗜热乳链球菌、酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌、嫌气纤维素分解菌种子液各0.61.5%;余量为纯净水。本发明的有益效果:本发明利用嫌气纤维素分解菌在高温嫌气条件下,将纤维素转化为有机酸、及醇类,而后再转化为甲烷及二氧化碳;彻底解决畜禽粪便的臭味;菌种巧妙组合,再经过特殊工艺发酵,可增加土壤中的有机质及农作物不可获缺的养分,进而促使农作物改善品质、增产增收。(51)Int.Cl.权利要求书1页 说明书7页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书7页(10)申请公布号 CN 103113142 ACN 10311。
3、3142 A1/1页21.一种畜禽粪便除臭发酵液,其特征在于:由以下重比的组分组成:甘蔗糖蜜1018%、鱼精膏0.51.8%、淀粉1020%;嗜粪乳杆菌、嗜热乳链球菌、酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌、嫌气纤维素分解菌种子液各0.61.5%;余量为纯净水。2.根据权利要求1所述的畜禽粪便除臭发酵液,其特征在于:所述的嗜粪乳杆菌、嗜热乳链球菌、酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌、嫌气纤维素分解菌种子液各为1%。3.根据权利要求1或2所述畜禽粪便除臭发酵液的制备方法,步骤包括:按比例称取甘蔗糖蜜、鱼精膏、淀粉置放于已灭菌处理的发酵罐中,注入纯净水,而后蒸煮至100;再冷却至3235;将嗜粪乳杆菌、嗜热乳链球菌、。
4、酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌、嫌气纤维素分解菌种子液放入,放入发酵罐以耗氧发酵方式培养28天,调整PH值保持在55.5,即完成发酵,得到畜禽粪便除臭发酵液。4.根据权利要求3所述畜禽粪便除臭发酵液的制备方法,其特征在于:所述的嫌气纤维素分解菌种子液的制备步骤包括:制备培养基:按每1000ML包括用于定量的蒸馏水和如下组分:蛋白胨811g、牛肉抽出物45g、氯化钠56g、磷酸钾57g备料;然后将各成分混合,溶解后将PH值调整至7.17.5,在121高温灭菌15min后分装于灭菌烧瓶中;将嫌气纤维素分解菌接种于所述的培养基中即得。5.根据权利要求4所述的畜禽粪便除臭发酵液的制备方法,其特征在于:所述。
5、的蛋白胨10g、牛肉抽出物4g、氯化钠5g、磷酸钾6g。6.利用权利要求1到5中任意一项所述的畜禽粪便除臭发酵液处理畜禽粪便的方法,其特征在于:将发酵液按重量比(0.81.5):1000的比例与发酵物混合;混匀后堆积呈长宽高均为至少1米的堆垛发酵;发酵物中心温度升至60时,立即翻堆降温;翻堆后,继续发酵直至发酵物无臭味即完成;发酵过程中水分控制在40%45%。7.根据权利要求6所述的处理畜禽粪便的方法,其特征在于:所述的比例为1:1000。权 利 要 求 书CN 103113142 A1/7页3畜禽粪便除臭发酵液及其制备方法技术领域0001 本发明涉及粪便等废弃物的除臭发酵制剂及其制备方法。背。
6、景技术0002 我国人口众多,肉类制品是不可或缺的副食,每天都消费大量的肉制品。故全国各地饲养的鸡、鸭、猪、牛.数以亿万只;在满足国人营养需求的同时,其所产生的粪便、尿液废弃物,也严重污染水源、土壤,造成农作物减产,人类生活环境恶化。在当今全世界倡导环保的大前提下,如何处理畜禽粪尿污染,成为当今社会一大重要课题。0003 目前在欧美及日本等先进国家,为解决畜禽类粪便污染问题均投入大量人力、物力研究以生物制剂来解决此一棘手问题。截止目前为止,整体效益并不明显,主要是因为要发掘或创造合适的功能性微生物并不容易,同时存在众多技术困难。发明内容0004 本发明的主要目的是提供一种畜禽粪便除臭发酵液及其。
7、制备方法。0005 为实现上述发明目的,本发明所采用的技术方案是:0006 一种畜禽粪便除臭发酵液,其特征在于:由以下重比的组分组成:甘蔗糖蜜1018%、鱼精膏0.51.8%、淀粉1020%;0007 嗜粪乳杆菌、嗜热乳链球菌、酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌、嫌气纤维素分解菌种子液各0.61.5%;0008 余量为纯净水。0009 优选的,所述的嗜粪乳杆菌、嗜热乳链球菌、酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌、嫌气纤维素分解菌种子液各为1%。0010 所述畜禽粪便除臭发酵液的制备方法,步骤包括:按比例称取甘蔗糖蜜、鱼精膏、淀粉置放于已灭菌处理的发酵罐中,注入纯净水,而后蒸煮至100;再冷却至3235;将嗜粪乳。
8、杆菌、嗜热乳链球菌、酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌、嫌气纤维素分解菌种子液放入,放入发酵罐以耗氧发酵方式培养28天,调整PH值保持在55.5,即完成发酵,得到畜禽粪便除臭发酵液。0011 优选的,所述的嫌气纤维素分解菌种子液的制备步骤包括:制备培养基:按每1000ML包括用于定量的蒸馏水和如下组分:蛋白胨811g、牛肉抽出物45g、氯化钠56g、磷酸钾57g备料;然后将各成分混合,溶解后将PH值调整至7.17.5,在121高温灭菌15min后分装于灭菌烧瓶中;将嫌气纤维素分解菌接种于所述的培养基中即得。0012 优选的,所述的蛋白胨10g、牛肉抽出物4g、氯化钠5g、磷酸钾6g。0013 使用方法。
9、:本发明的产品按重量比(0.81.5):1000的比例与发酵物混合,优选比例为1:1000;混匀后堆积呈长宽高均为至少1米的堆垛发酵;发酵物中心温度升至60时,立即翻堆降温;翻堆后,继续发酵直至发酵物无臭味即完成;发酵过程中水分控制在40%45%。说 明 书CN 103113142 A2/7页40014 堆积高度和长度、宽度应不低于1米,且发酵堆越大越好,尽可能集中,并减少表外面积和触地面积。以温度计测量为准,发酵物中心温度升至60立即上下翻堆降温。翻堆方法是“内外相调、上下换位”。翻堆后,持续2-3天温度再次达到60以上时,通常发酵完成。发酵物发酵完成应是清爽、微香。如在散开时物料仍有氨气味。
10、代表仍未完全发酵完毕,让它继续发酵,直到完全无味为止。发酵过程中水分控制在40%45%初始混料时和翻堆时检查发酵物水分含量若发现湿度不够,应补充相应水分。这样优选的发酵操作工艺提高了发酵效率。0015 本发明的有益效果:0016 1、本发明利用嫌气纤维素分解菌在高温嫌气条件下,将纤维素转化为有机酸、及醇类,而后再转化为甲烷及二氧化碳;彻底解决畜禽粪便的臭味;0017 2、菌种巧妙组合,再经过特殊工艺发酵,以微生物网链模式复合在一起,形成稳定有效的互不抵抗,相互协同的高效的生态菌落,起到更好的分解效果;0018 3、具有分解数量庞大的有机复合物的功能,进而消灭有害病源菌,完全消除粪尿中的氨气、吲。
11、哚、硫化氢等有害物质,变废为宝;0019 4、使用于土壤中,可增加土壤中的有机质及农作物不可获缺的养分,进而促使农作物改善品质、增产增收。具体实施方式0020 为使本领域技术人员更清楚本发明的技术方案和技术效果,特提供一下优选实施例,但本发明的技术并不仅限于以下实施例。0021 所用菌种及来源:0022 嗜粪乳杆菌,活性含量:7.9107个/ml,生产厂家:嘉兴绿地生物环保有限公司;0023 嗜热乳链球菌,活性含量:7.9107个/ml,生产厂家:嘉兴绿地生物环保有限公司;0024 酿酒酵母菌,活性含量:2.6107个/ml,生产厂家:嘉兴绿地生物环保有限公司;0025 异常汉逊酵母菌,活性含。
12、量:2.6107个/ml,生产厂家:嘉兴绿地生物环保有限公司;0026 嫌气纤维素分解菌,活性含量:生产厂家:2.6107个/ml,生产厂家:嘉兴绿地生物环保有限公司。0027 实施例10028 1、嫌气纤维素分解菌的活化培养基:0029 嫌气纤维素分解菌的活化培养基:包括如下组分:蛋白胨8g、牛肉抽出物4g、氯化钠5g、磷酸钾5g;蒸馏水定量到1000ML。0030 活化培养基的制备方法,按比例将各成分混合,溶解后将PH值调整至7.17.5,在121高温灭菌15min后分装于灭菌烧瓶中。将嫌气纤维素分解菌接种于所述的培养基中即得嫌气纤维素分解菌种子液。0031 2、将嗜粪乳杆菌接种于活化培养。
13、基:说 明 书CN 103113142 A3/7页50032 蛋白胨(Proteose peptone)8g,0033 牛肉抽取物(Beet extract)8g,0034 酵母抽取物(Yeast extract)5g,0035 葡萄糖(Dextrose)20g,0036 醋酸钠(Sodium acetacte)5g,0037 硫酸锰(Manganese sulfate)0.03g,0038 磷酸钾(Dipotassium phosphate)1g,0039 蒸馏水(Distilled water)100ml,0040 上述材料搅拌溶解后,调整PH值至6.06.5、在120温度下灭菌15min。
14、;然后,将培养基冷却至60或以下,加入经过滤膜过滤、杀菌的醣类,使培养基中醣类最终浓度为1.2%或以下,分装入已灭菌试管中,在40以下培养14天,即为嗜粪乳杆菌种子液。0041 3、嗜热乳酸链球菌接种于活化培养基:0042 蛋白胨5g,0043 牛肉抽取物1g0044 氯化钠5g,0045 溴甲酚紫0.01g,0046 蒸馏水100ml,0047 上述材料搅拌溶解后,调整PH值至6.06.5,在120温度下灭菌15min,待培养基冷却至60或以下,加入经过滤膜过滤、杀菌的糖类,使培养基中糖类浓度为1.2%或以下,分装于已灭菌试管中,在40以下培养14天,即为嗜热乳杆链球菌种子液。0048 4、。
15、制备酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌接种于活化培养基:0049 马铃薯200g,0050 葡萄糖6g,0051 琼脂6g,0052 蕨根粉15g,0053 酵母抽取物5g,0054 啤酒花15g,0055 蒸馏水1000ml;0056 上述材料备妥后,将马铃薯去皮切块,加入蒸馏水煮沸10min20min,用纱布过滤,再加蒸馏水,而后按前述配量加入葡萄糖、球脂、蕨根粉、酵母抽取物、啤酒花,加热溶化、PH值调整至6.57.0,分装后在130温度下灭菌15min,即得到培养基;0057 将酿酒酵母和异常汉逊酵母分别接种该培养基中,得到酿酒酵母菌种子液和异常汉逊酵母菌种子液。0058 5、制备畜禽粪便除臭发。
16、酵液:0059 按甘蔗糖蜜10%、鱼精膏0.5%、淀粉10%;嗜粪乳杆菌、嗜热乳链球菌、酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌、嫌气纤维素分解菌种子液各1.1%;余量为纯净水的比例称取甘蔗糖蜜、鱼精膏、淀粉置放于已灭菌处理的发酵罐中,注入纯净水,而后蒸煮至100;再冷却至32;将嗜粪乳杆菌、嗜热乳链球菌、酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌、嫌气纤维素分解菌种子液放入,放入发酵罐以耗氧发酵方式培养28天,调整PH值保持在55.5,即完成发酵,得说 明 书CN 103113142 A4/7页6到畜禽粪便除臭发酵液。0060 实施例20061 1、嫌气纤维素分解菌的活化培养基:0062 嫌气纤维素分解菌的活化培养基:包。
17、括如下组分:蛋白胨10g、牛肉抽出物4g、氯化钠5g、磷酸钾6g。0063 活化培养基的制备方法,按比例将各成分混合,溶解后将PH值调整至7.17.5,在121高温灭菌15min后分装于灭菌烧瓶中。将嫌气纤维素分解菌接种于所述的培养基中即得嫌气纤维素分解菌种子液。0064 2、将嗜粪乳杆菌接种于活化培养基:0065 蛋白胨(Proteose peptone)10g,0066 牛肉抽取物(Beet extract)10g,0067 酵母抽取物(Yeast extract)5g,0068 葡萄糖(Dextrose)20g,0069 醋酸钠(Sodium acetacte)5g,0070 硫酸锰(M。
18、anganese sulfate)0.05g,0071 磷酸钾(Dipotassium phosphate)3g,0072 蒸馏水(Distilled water)100ml,0073 上述材料搅拌溶解后,调整PH值至6.06.5、在130温度下灭菌15min;然后,将培养基冷却至60或以下,加入经过滤膜过滤、杀菌的醣类,使培养基中醣类最终浓度为1.2%或以下,分装入已灭菌试管中,在40以下培养14天,即为嗜粪乳杆菌种子液。0074 3、嗜热乳酸链球菌接种于活化培养基:0075 蛋白胨10g,0076 牛肉抽取物1g0077 氯化钠5g,0078 溴甲酚紫0.02g,0079 蒸馏水100ml。
19、,0080 上述材料搅拌溶解后,调整PH值至6.06.5,在130温度下灭菌15min,待培养基冷却至60或以下,加入经过滤膜过滤、杀菌的糖类,使培养基中糖类浓度为1.2%或以下,分装于已灭菌试管中,在40以下培养14天,即为嗜热乳杆链球菌种子液。0081 4、制备酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌接种于活化培养基:0082 马铃薯400g,0083 葡萄糖12g,0084 琼脂12g,0085 蕨根粉25g,0086 酵母抽取物5g,0087 啤酒花20g,0088 蒸馏水1500ml;0089 上述材料备妥后,将马铃薯去皮切块,加入蒸馏水煮沸20min,用纱布过滤,再加蒸馏水,而后按前述配量加入葡。
20、萄糖、球脂、蕨根粉、酵母抽取物、啤酒花,加热溶化、PH值调说 明 书CN 103113142 A5/7页7整至6.57.0,分装后在130温度下灭菌15min,即得到培养基;0090 将酿酒酵母和异常汉逊酵母分别接种该培养基中,得到酿酒酵母菌种子液和异常汉逊酵母菌种子液。0091 5、制备畜禽粪便除臭发酵液:0092 按甘蔗糖蜜15%、鱼精膏1.5%、淀粉12%;嗜粪乳杆菌、嗜热乳链球菌、酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌、嫌气纤维素分解菌种子液各1%;余量为纯净水的比例称取甘蔗糖蜜、鱼精膏、淀粉置放于已灭菌处理的发酵罐中,注入纯净水,而后蒸煮至100;再冷却至32;将嗜粪乳杆菌、嗜热乳链球菌、酿酒酵。
21、母菌、异常汉逊酵母菌、嫌气纤维素分解菌种子液放入,放入发酵罐以耗氧发酵方式培养28天,调整PH值保持在55.5,即完成发酵,得到畜禽粪便除臭发酵液。0093 实施例30094 1、嫌气纤维素分解菌的活化培养基:0095 嫌气纤维素分解菌的活化培养基:包括如下组分:蛋白胨9g、牛肉抽出物5g、氯化钠6g、磷酸钾6g;蒸馏水定量到1000ML。0096 活化培养基的制备方法,按比例将各成分混合,溶解后将PH值调整至7.17.5,在121高温灭菌15min后分装于灭菌烧瓶中。将嫌气纤维素分解菌接种于所述的培养基中即得嫌气纤维素分解菌种子液。0097 2、将嗜粪乳杆菌接种于活化培养基:0098 蛋白胨。
22、10g,0099 牛肉抽取物10g,0100 酵母抽取物6g,0101 葡萄糖25g,0102 醋酸钠5g,0103 硫酸锰0.05g,0104 磷酸钾3g,0105 蒸馏水100ml,0106 上述材料搅拌溶解后,调整PH值至6.06.5、在110130温度下灭菌15min;然后,将培养基冷却至60或以下,加入经过滤膜过滤、杀菌的醣类,使培养基中醣类最终浓度为1.2%或以下,分装入已灭菌试管中,在40以下培养14天,即为嗜粪乳杆菌种子液。0107 3、嗜热乳酸链球菌接种于活化培养基:0108 蛋白胨10g,0109 牛肉抽取物1g0110 氯化钠5g,0111 溴甲酚紫0.02g,0112 。
23、蒸馏水120ml,0113 上述材料搅拌溶解后,调整PH值至6.06.5,在110130温度下灭菌15min,待培养基冷却至60或以下,加入经过滤膜过滤、杀菌的糖类,使培养基中糖类浓度为1.2%或以下,分装于已灭菌试管中,在40以下培养14天,即为嗜热乳杆链球菌种子液。0114 4、制备酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌接种于活化培养基:说 明 书CN 103113142 A6/7页80115 马铃薯300g,0116 葡萄糖10g,0117 琼脂10g,0118 蕨根粉25g,0119 酵母抽取物5g,0120 啤酒花25g,0121 蒸馏水1500ml;0122 上述材料备妥后,将马铃薯去皮切块,。
24、加入蒸馏水煮沸15min,用纱布过滤,再加蒸馏水,而后按前述配量加入葡萄糖、球脂、蕨根粉、酵母抽取物、啤酒花,加热溶化、PH值调整至6.57.0,分装后在120温度下灭菌15min,即得到培养基;0123 将酿酒酵母和异常汉逊酵母分别接种该培养基中,得到酿酒酵母菌种子液和异常汉逊酵母菌种子液。0124 5、制备畜禽粪便除臭发酵液:0125 按甘蔗糖蜜15%、鱼精膏1.3%、淀粉15%;嗜粪乳杆菌、嗜热乳链球菌、酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌、嫌气纤维素分解菌种子液各0.9%;余量为纯净水的比例称取甘蔗糖蜜、鱼精膏、淀粉置放于已灭菌处理的发酵罐中,注入纯净水,而后蒸煮至100;再冷却至35;将嗜粪乳。
25、杆菌、嗜热乳链球菌、酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌、嫌气纤维素分解菌种子液放入,放入发酵罐以耗氧发酵方式培养28天,调整PH值保持在55.5,即完成发酵,得到畜禽粪便除臭发酵液。0126 实施例40127 1、嫌气纤维素分解菌的活化培养基:0128 嫌气纤维素分解菌的活化培养基:包括如下组分:蛋白胨11g、牛肉抽出物5g、氯化钠6g、磷酸钾7g;蒸馏水定量到1000ML。0129 活化培养基的制备方法,按比例将各成分混合,溶解后将PH值调整至7.17.5,在121高温灭菌15min后分装于灭菌烧瓶中。将嫌气纤维素分解菌接种于所述的培养基中即得嫌气纤维素分解菌种子液。0130 2、将嗜粪乳杆菌接种于。
26、活化培养基:0131 蛋白胨15g,0132 牛肉抽取物15g,0133 酵母抽取物8g,0134 葡萄糖32g,0135 醋酸钠8g,0136 硫酸锰0.1g,0137 磷酸钾5g,0138 蒸馏水200ml,0139 上述材料搅拌溶解后,调整PH值至6.06.5、在110温度下灭菌15min;然后,将培养基冷却至60或以下,加入经过滤膜过滤、杀菌的醣类,使培养基中醣类最终浓度为1.2%或以下,分装入已灭菌试管中,在40以下培养14天,即为嗜粪乳杆菌种子液。0140 3、嗜热乳酸链球菌接种于活化培养基:说 明 书CN 103113142 A7/7页90141 蛋白胨15g,0142 牛肉抽取。
27、物2g0143 氯化钠8g,0144 溴甲酚紫0.025g,0145 蒸馏水200ml,0146 上述材料搅拌溶解后,调整PH值至6.06.5,在110130温度下灭菌15min,待培养基冷却至60或以下,加入经过滤膜过滤、杀菌的糖类,使培养基中糖类浓度为1.2%或以下,分装于已灭菌试管中,在40以下培养14天,即为嗜热乳杆链球菌种子液。0147 4、制备酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌接种于活化培养基:0148 马铃薯500g,0149 葡萄糖15g,0150 琼脂15g,0151 蕨根粉30g,0152 酵母抽取物8g,0153 啤酒花30g,0154 蒸馏水2000ml;0155 上述材料备妥。
28、后,将马铃薯去皮切块,加入蒸馏水煮沸15min,用纱布过滤,再加蒸馏水,而后按前述配量加入葡萄糖、球脂、蕨根粉、酵母抽取物、啤酒花,加热溶化、PH值调整至6.57.0,分装后在130温度下灭菌15min,即得到培养基;0156 将酿酒酵母和异常汉逊酵母分别接种该培养基中,得到酿酒酵母菌种子液和异常汉逊酵母菌种子液。0157 5、制备畜禽粪便除臭发酵液:0158 按甘蔗糖蜜18%、鱼精膏1.5%、淀粉20%;嗜粪乳杆菌、嗜热乳链球菌、酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌、嫌气纤维素分解菌种子液各1.3%;余量为纯净水的比例称取甘蔗糖蜜、鱼精膏、淀粉置放于已灭菌处理的发酵罐中,注入纯净水,而后蒸煮至100;再冷却至35;将嗜粪乳杆菌、嗜热乳链球菌、酿酒酵母菌、异常汉逊酵母菌、嫌气纤维素分解菌种子液放入,放入发酵罐以耗氧发酵方式培养28天,调整PH值保持在55.5,即完成发酵,得到畜禽粪便除臭发酵液。说 明 书CN 103113142 A。