豆类接种合剂及其配制方法 本发明涉及一种用于豆科植物，特别是大豆、苜蓿和菜豆浓缩接种合剂的配制方法和用此方法获得的制剂。
众所周知，豆科植物，在一定条件下，可直接将空气中的氮固定并转化为有机化合物，，这样不仅给植物蛋白质的合成提供了氮素，还能使土壤肥沃，也给后续的耕作留下了氮素。这种固定能力是由大豆根瘤菌或慢生大豆根瘤菌细菌所产生，这些菌能与植物根茎形成根瘤。而这些植物根茎上的根瘤的职能就是固氮，因此计算根瘤的数量，可以用于确定接种剂的使用效率。所以，通过运用含有大量慢生根瘤菌属细菌的接种合剂对植物接种，就可获得更大的固氮能力。
作为慢生根瘤菌携带者的接种合剂本身，从泥炭、蛭石、珍珠岩、木炭等固态状到当前市场上大多数液态状的，其特征已经有所改进。
自从液态接种合剂出现后，首先要解决的问题提高慢生根瘤菌的成活率，因为在接种合剂中它的成活率越高，接种合剂发挥作用周期越长，初期，慢生根瘤菌在接种剂中中的存活期是一个月，目前，大多数为18个月，有的还达到2年。
液态接种合剂的优点是每毫升±1.00×1010的慢生根瘤菌高量和其实用性。另一方面，液态接种合剂的缺点是高敏感性，因此，当其面临诸如杀菌剂、干旱环境、温度、土壤PH值等引发的侵扰时，其慢生根瘤菌地成活率就会大大降低。
为了解决这个问题，已开始把经过消毒和中和处理的泥炭粉添加到已配好的大豆根瘤菌浓度为1×1010培养基的混合培养基中。
泥炭粉的消毒条件：121℃的水中30分钟。并用碳酸钙做中和处理。
一旦把经过消毒和中和处理的泥炭粉添加到大豆根瘤菌的浓度为1×1010培养基培养基中，就能提高在上述不良情况和条件侵袭下，大豆根瘤菌的成活率，就表现为一个改良的瘤。所加入进去的泥炭的自身酸性和培养基中PH值的不同，因此，在培养基中大豆根瘤菌不能被泥炭完全吸收。本发明已经足以解决这些问题，就像在本说明书中所叙述的，本发明所解决的问题是，在大豆根瘤菌受到前述不良环境和条件侵扰时，能够使其得到更好保护、更强的抵抗力和更高的成活率，使得以泥炭为载体的大豆根瘤菌得以大量繁育。
出于这种目的，向组成浓缩接种合剂的培养基中添加麦芽糖粉、麦芽糖液和乳糖，以及一种称为山梨酸钾的杀真菌剂，同不向培养基中加入如上添加剂时相比较，这些添加剂使大豆根瘤菌获得更高的成活率。
同理，如果将泥炭和其他原料同时加入到一般培养基中，菌种可以更好的抗御前述的不良影响且其自身也可以获得更好的繁育能力。这是因为当培养基一旦制成，菌种与培养基就会有更进一步的作用，使泥炭的酸度得到更好的中和，并与培养基结合在一起而获得与其相同的PH值。因此，这就使泥炭获得更好的吸附菌种的能力，因为在恒定的温度下，泥炭变得松软而多孔隙，而大大提高了与菌种相互作用的能力。培养基培养基。
本发明的内容涉及一种配制浓缩接种合剂的方法，包括将该接种剂接种到已经灭菌和冷却后的培养基中；大豆根瘤菌在28℃下培养繁殖46小时，然后接种在培养基上直至冷却到10到11℃之间，此方法的特征在于：完成上述步骤后，向培养基中加入麦芽糖粉、麦芽糖液和乳糖，以及一种称为山梨酸钾的杀真菌剂，培养基培养基培养基如上步骤的结果是得到一种作用于豆科植物，特别是大豆、苜蓿和菜豆的应用于工农业生产的浓缩接种合剂。
本发明的内容还涉及一种配制浓缩接种合剂的方法，包括将该接种剂接种到已经灭菌和冷却后的培养基中；大豆根瘤菌在28℃下培养繁殖46小时，然后接种在培养基上直至冷却到10到11℃之间，此方法的特征在于：培养基培养基培养基在配制一般培养基时，将泥炭作为培养基的一种成份添加到培养基中，完成上述步骤后，向培养基中加入麦芽糖粉、麦芽糖液和乳糖，以及一种称为山梨酸钾的杀真菌剂，培养基如上步骤的结果是得到一种作用于豆科植物，特别是大豆、苜蓿和菜豆的，应用于工农业生产的，以泥炭为另一种原料的含有菌种的浓缩接种合剂。
本发明的另一个内容是根据所述的两种方法，该浓缩接种合剂的制备。
在如以下的详细叙述中，将阐明本发明的优点和前景，它们的示例不仅仅局限于对本发明的说明。
本发明叙述了工业上配制浓缩接种剂的方法、工业用途、实用性和使用效率，在其成份上或者把泥炭作为培养基的一部分或者没有，培养基当其与杀菌剂混合以及所得到的菌种。
在本说明书中所有提到的培养基是一种一般培养基，每1000升含磷酸钾500克；磷酸铵300克；七水硫酸镁200克；硝酸钾800克；氯化钠100克；12.5公斤甘油12.5公斤；发酵剂提取物4公斤；浓度10％的三价氯化铁100毫升和抗泡沫剂200毫升。
在配制浓缩接种合剂的方法里，实现本发明首选的方式是：在所述通用培养基消毒和冷却之后，注入大豆根瘤菌。在这种培养基里，菌种在28℃下最多培养繁殖46小时。然后已经整合有菌种的培养基冷却到10或11℃。上述步骤完成后，向培养基中添加麦芽糖粉500克、麦芽糖液2.5公斤和乳糖500克，以及杀真菌剂山梨酸钾400克。为了将这些成分加到培养基中，要把其溶于100升水中，并在121℃下消毒30分钟，再冷却至20℃，而后将其倒入盛有所述培养基的容器中。以上述方式将各种添加物加入到培养基中，特别是同杀菌剂相混合时，可得到一种具有工业用途的、实用的有效的浓缩接种剂。
本发明包含的另一种方法是，把经过预先处理的泥炭100公斤作为一种成份添加到通用培养基中，上述泥炭的添加要与所述的组成培养基的其他化学成份一起添加到培养基中去。为此，泥炭需要的预先处理包括：用100℃的水蒸气加热40分钟，目的是蒸发掉泥炭中各种天然的挥发性物质。之后，把大约泥炭最终体积的10％倒入将配制培养基的发酵池内，也是添加先前叙述的其他物质的地方，PH值的调整根据大豆根瘤菌的发酵的一般常规进行。接下来，就是向培养基中添加500克麦芽糖粉、2.5公斤麦芽糖液和500克乳糖，还要添加400克杀真菌剂山梨酸钾。为了将这些成分加到培养基中，要把其溶于100升水中，并在121℃下消毒30分钟，再冷却至20℃，而后将其倒入盛有所述培养基的容器中。以上述方式将各种添加物加入到培养基中，特别是同杀菌剂相混合时，可得到一种具有工业用途的、实用的有效的浓缩接种剂。
泥炭的预先处理量最好达到培养基的5到20％。
在实验室中所做的下述分析说明了与先前技术相比较本发明的优点。
把细菌加入到通用培养基中，测定它的成活率，大约40天。然后，在通用培养基中添加500克麦芽糖粉、2.5公斤麦芽糖液和500克乳糖，还要添加400克杀真菌剂山梨酸钾，对于同一菌种，成活期达到18个月。麦芽糖液以及粉状麦芽糖糖化物可以用海藻糖代替。
另一个试验是将含有10％到20％泥炭成分的接种体和种子处理剂Tiram和多菌灵(30/30)混合。做如上处理8小时作出可行清单(R.V.)。然后，以0.4克比100克种子的比率与种子混合。以实验室里通用的方式(根据S.E.N.A.S.A.建议的方法)播种到试验田里。21天后，计算根瘤数量，得到如下面表I所列的结果：
R.V.初始值 R.V.8小时值 根瘤数量 观察A： 无泥炭接种 液+ 种子处理液 5×109 4×108 4根瘤/每株 观察B： 有泥炭接种 液+ 种子处理液 5×109 2×109 10根瘤/每株
也进行了大豆种子的实验，大豆种子的处理分为：接种液+种子处理剂和有泥炭接种液+种子处理剂。
把种子放置于培养箱中8小时，温度为38到40℃，然后在种子和根瘤上做R.V.记录用于确定菌种的存活数，得到如下面表II所列的结果： 初始值 8小时值 根瘤数 观察A： 150,000细菌/ 每粒种子 50,000细菌/ 每粒种子 2根瘤每株 观察B： 150,000细菌/ 每粒种子 90,000细菌/ 每粒种子 6根瘤每株
上列两表数据取自于所做超过50次分析的平均值，先前的技术不包括如上产品的植被方法，本发明把泥炭作为培养基的一种成份是独一无二的。
另一个实验是通过将接种剂离心分离，将培养基的固体(泥炭)和液体培养基分开，用蒸馏水洗涤，扔掉废液。取10g洗涤过的泥炭，作出可行清单，得到如下面表III所列的结果：
R.V.初始值 根瘤数最后把泥炭添加到培养基中 1×109 5根瘤/每株泥炭和其他成分同时添加入培养基中 9×109 12根瘤/每株
这些数据基于50次以上试验结果的平均数。