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一种利用鸡胚制作鸡传染鼻炎等细菌的培养基
    本发明涉及细菌培养基，准确说是一种利用鸡胚制作鸡传染鼻炎等细菌的培养基，即利用鸡胚浸出液制作细菌培养基。

    现在广泛制作细菌培养基的原料，一般采用牛肉、牛心、猪肉、猪心等。本领域的传统观念认为，鸡胚不适于制作细菌培养基，因而，鸡胚只用作病毒传代、增殖的材料，在病毒学的研究和疫苗生产中起重要作用。特别是部分实验室在利用鸡胚传毒或病毒增殖后，将其丢掉，造成浪费，并易造成病毒的扩散。本发明经检索，未发现利用鸡胚浸出液制作细菌培养基的报道。

    本发明的目的是，提供一种利用鸡胚制作鸡传染鼻炎等细菌的培养基，利用鸡胚浸出液制作细菌培养基，从而具有使鸡胚增加新的用途，并可减少浪费，不使病毒扩散等优点。

    本发明为完成发明目的，提出的技术方案是，提供一种利用鸡胚制作鸡传染鼻炎等细菌的培养基，利用鸡胚浸出液制作细菌培养基。细菌培养基是指对副鸡嗜血杆菌、大肠杆菌和沙氏菌的培养。制作鸡胚浸出液冷藏待用，再制作培养基将菌株分离为副鸡嗜血杆菌株、沙门氏菌菌株、大肠杆菌菌株保存待用，然后制备种子液，进行固体培养，进行液体培养，最后测定培养产物的细菌量。所述鸡胚浸出液，利用11日龄SPF鸡胚，与无菌蒸馏水按1∶2比例浸泡过夜，快速煮沸后，再温火煮1小时，冷却后，离心取上清即为实验所用鸡胚浸出液。采用鸡胚浸出液副鸡嗜血杆菌培养基用日本半合成培养基加10％鸡胚浸出液和2％鸡血清，普通副鸡嗜血杆菌培养基则去掉鸡胚浸出液，普通肉汤培养基和普通琼脂平板培养基按常规方法制备，鸡胚浸出液培养和鸡胚浸出液琼脂平板培养基用鸡胚浸出液代替牛肉汤，即：氯化钠0.5g、蛋白质1.0g，鸡胚液100ml，调P小时7.2-7.5，高压后分装试管备用，所述种子液的制备，将冻存的副鸡嗜血杆菌卵黄接种7日龄SPF鸡胚，孵化24小时后，取卵黄液按1％接种于半合成液体培养基中，37℃培养18小时作为种子液，大肠杆菌和沙门氏菌菌种则接种麦康凯琼脂平板，37℃培养24小时，挑取曲型菌落，接种普通琼脂斜面，37℃培养24小时，再接种于普通肉汤培养基，37℃培养18小时后即为大肠杆菌种子液和沙门氏菌种子液。

    本发明用鸡胚浸出液制作细菌培养中的固体培养是将副鸡嗜血杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌的种子液，分别接种于鸡胚浸出液固体培养基和普通固体培养基，37℃培养24小时，用生理盐水洗下菌苔，重复三次，并测其细菌含量。液体培养是将鸡胚浸出液培养基和普通培养基接每管5ml分别加入到各试管中，按每管0.5ml分别加入副鸡嗜血杆菌、大肠杆和沙门氏菌种子液，37℃培养24小时重复三次，测其细菌含量。本发明所述培养产物细菌量的测定方法，均采用本领域公知方法。

    本发明经试验证明，鸡胚完全可以制作细菌培养的基础培养基或某些细菌的特殊培养基，这就使鸡胚增加了新的用途，减少了鸡胚的浪费，并可以避免病毒的扩散。本发明通过副鸡嗜血杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌分别在鸡胚浸出液和普通培养基上地培养发现，副鸡嗜血杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌均可在鸡胚浸出液培养基上生长良好，与普通培养基相比，大肠杆菌在这两种培养基中生长无明显差异(P＞0.05)，副鸡嗜血杆菌在鸡胚浸出液半合成培养基上生长的数量是普通半合成培养基的3倍以上，差异显著(P＜0.05)；而在沙门氏菌的生长上，鸡胚浸出液培养基则是普通培养基的20倍以上，差异极为显著(P＜0.01)，鸡胚浸出液培养效果明显优于普通培养基培养效果。