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一种查找特定代谢通路MIRNA靶基因的方法.pdf

  • 上传人:111****112
  • 文档编号:1253801
  • 上传时间:2018-04-10
  • 格式:PDF
  • 页数:5
  • 大小:312.82KB
  • 摘要
    申请专利号:

    CN201010561656.2

    申请日:

    2010.11.25

    公开号:

    CN102321736A

    公开日:

    2012.01.18

    当前法律状态:

    撤回

    有效性:

    无权

    法律详情:

    发明专利申请公布后的视为撤回IPC(主分类):C12Q 1/68申请公布日:20120118|||实质审查的生效IPC(主分类):C12Q 1/68申请日:20101125|||公开

    IPC分类号:

    C12Q1/68

    主分类号:

    C12Q1/68

    申请人:

    上海聚类生物科技有限公司

    发明人:

    曾华宗

    地址:

    200333 上海市祁连山南路999弄80号801室

    优先权:

    专利代理机构:

    代理人:

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    内容摘要

    本发明设计了一种miRNA靶基因的分析方法,查找特定代谢通路下miRNA的靶基因,以实现在特定方向如癌症、细胞凋亡等方面的miRNA研究,它包括几个主要步骤:步骤一、靶基因分析;步骤二、靶基因Gene Ontology分析;步骤三、靶基因pathway分析;步骤四、结果分析。

    权利要求书

    1: 本发明所述的一种查找特定代谢通路 miRNA 靶基因的方法, 他包括如下几步主要特 征: 步骤一、 靶基因分析。 步骤二、 靶基因 Gene Ontology 分析 步骤三、 靶基因 pathway 分析 步骤四、 结果分析。

    说明书


    一种查找特定代谢通路 miRNA 靶基因的方法

        【技术领域】
         本发明属于生物技术领域, 涉及到特定代谢通路下查找 miRNA 靶基因的方面。背景技术 miRNA 或称为 MicroRNA, 即微小核糖核酸, 是一类由内源基因编码的长度约为 22 个核苷酸的非编码单链 RNA( 核糖核酸 ) 分子, 在动物和植物中广泛表达。miRNA 的大小约 为 21-23 个碱基, 已经被鉴别的 miRNA 大多是由具有发夹结构的约 70-90 个碱基大小的单 链 RNA 前体经过 Dicer( 核糖核酸酶 III 的一种 ) 酶加工后生成, 有 5’ 磷酸基和 3’ 羟基, 定位于 RNA 前体的 3’ 端或者 5’ 端, 广泛存在于高等生物细胞中。因之具有破坏目标特异 性基因的转录产物或者诱导翻译抑制的功能, miRNA 被认为在调控发育过程中有重要作用 miRNA 的作用机理区别于一般的 mRNA( 信使核糖核酸 ) 降解机制。 成熟的 miRNA 被引导进入 沉默复合体 (RISC) 中, 单链的 miRNA 已不完全互补的方式结合到靶基因转录的 mRNA 结合 位点上, 通过碱基的互补配对, 抑制蛋白质的翻译, 从而调控靶基因表达。 这种机制的 miRNA 结合位点通常在 mRNA 的 3’ 端非编码区段。
         miRNA 作为一种参与调控基因表达的分子, 广泛作用于真核生物的生理、 生化作用 过程中, 这些 miRNAs 通过影响靶基因的翻译表达过程, 调节了细胞生长, 组织分化, 因而与 生命过程中发育、 疾病有关。在 miRNA 的相关研究中, miRNA 靶基因研究显得十分重要, 目 前, 基于生物信息学计算方法的 miRNA 靶基因查找技术已经相当成熟, 利用分析软件可以 比较准确的得出目标 miRNA 的靶基因以及它们的相互调节通路。
         本发明设计了一种 miRNA 靶基因的分析方法, 查找特定代谢通路下 miRNA 的靶基 因。通过这种方法实现在特定方向如癌症、 细胞凋亡等方面的 miRNA 研究。
         发明内容 本发明所述方法主要用于特定代谢通路下的 miRNA 靶基因的查找, 通过应用几种 生物信息学数据分析软件以及两大数据库 :
         Gene Ontology(http://www.geneontology.org/) 和
         Pathway(http://www.genome.jp/kegg/pathway.html) 实 现 对 miRNA 的 准 确 查 找。该方法包括如下几个步骤 :
         步骤一、 靶基因分析。
         步骤二、 靶基因 Gene Ontology 分析
         步骤三、 靶基因 pathway 分析
         步骤四、 结果分析。
         附图说明
         图 1、 本发明所述一种查找特定代谢通路 miRNA 靶基因的方法的实施流程图。 实施方式本方法针对给定的目标 miRNA 进行分析, 其具体的实施方法有下面几个步骤 :
         步骤一、 靶基因分析。本方法中, 使用如下三种常用生物信息软件 :
         PicTar 2005 : http://pictar.mdc-berlin.de/cgi-bin/PicTar_vertebrate. cgimiRanda v5 : http://www.ebi.ac.uk/enright-srv/microcosm/htdocs/targets/v5/ TargetScan 5.1 : http://www.targetscan.org/
         对给定的 miRNA 进行靶基因预测, 综合三种软件的预测结果, 获得 miRNA 所有的靶 基因, 统计成列表。
         步骤二、 靶基因 Gene Ontology 分析。将步骤一中所得的靶基因分为上调基因和 下调基因两个集合, 使用 R(http://www.r-project.org/) 统计平台下的 GSEABase 软件包, 分别向 Gene ontology 数据库的各个节点进行映射, 计算各个节点的基因数目。
         步骤三、 靶基因 pathway 分析。将步骤一中所得的靶基因分为上调基因和下调基 因两个集合, 使用 GenMAPP v2.1(http://www.genmapp.org/) 软件, 分别向 KEGG pathway 数据库进行映射, 并统计基因在每个 pathway 中的富集程度 (enrichment p-value)。
         步骤四、 结果分析。 综合步骤三和步骤四的分析结果, 利用给定的代谢通路特征信 息如癌症 (Pathways in cancer)、 细胞凋亡 (apoptosis) 等, 标记出分析结果中对应的代谢 通路, 并依据代谢通路查找出结果中相关的 miRNA 靶基因。 以上是对本发明的描述而非限定, 基于本发明思想的其它实施方式, 均在本发明 的保护范围之中。
        

    关 键  词:
    一种 查找 特定 代谢 通路 MIRNA 基因 方法
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