多西他赛PH敏感脂质体及其制备方法.pdf

1、(10)申请公布号 CN 102379849 A (43)申请公布日 2012.03.21 CN 102379849 A *CN102379849A* (21)申请号 201110340040.7 (22)申请日 2011.11.01 A61K 9/127(2006.01) A61K 31/337(2006.01) A61K 47/28(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (71)申请人 山东大学 地址 250061 山东省济南市历下区文化西路 44 号 (72)发明人 林贵梅 牟珍珍 路侠 李瑞莹 张芳 卢杉杉 (74)专利代理机构 济南圣达知识产权代理有限 公司 37

2、221 代理人 杨琪 (54) 发明名称 多西他赛 pH 敏感脂质体及其制备方法 (57) 摘要 本发明公开了一种多西他赛 pH 敏感脂质体， 是由以下原料组分制成的 ： 多西他赛， 磷脂酰乙 醇胺， 胆固醇和油酸， 所述 pH 敏感脂质体的粒径 为 2772nm 3031nm。所述多西他赛 pH 敏感 脂质体的制备方法为 ： 称取 30mg 磷脂酰乙醇胺、 20mg 胆固醇和 30mg 油酸， 溶于 15ml 有机溶剂中， 加压蒸干混合溶液至形成一层均匀的脂质薄膜 ； 然后加 2ml 的多西他赛溶液， 溶解后， 超声形成均 匀悬液， 37水浴条件下水合 30min， 即得多西他 赛 pH 敏

3、感脂质体。本发明的制备工艺简单， 脂质 体药物包封率较高、 性能稳定 ； 制备的 pH 敏感脂 质体具有被动靶向性、 智能控释等显著特征， 而且 具有储存稳定性好， 药物治疗指数高、 毒副作用低 等特点， 可用于治疗各种肿瘤性疾病。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 3 页 附图 2 页 CN 102379861 A1/1 页 2 1. 多西他赛 pH 敏感脂质体， 其特征在于， 是由以下原料组分制成的 ： 多西他赛， 磷脂酰 乙醇胺， 胆固醇和油酸， 它们之间的重量比为 ： 多西他赛磷脂酰乙醇胺胆固醇油酸 (0.2

4、 1) (0.5 3) (0.5 2) (0.5 3)。 2. 根据权利要求 1 所述的多西他赛 pH 敏感脂质体， 其特征在于 ： 所述 pH 敏感脂质体 的粒径为 275nm 304nm。 3. 权利要求 1 所述的多西他赛 pH 敏感脂质体的制备方法， 其特征在于 ： 称取 5 30mg 磷脂酰乙醇胺、 5 20mg 胆固醇和 5 30mg 油酸， 溶于 10 15ml 有机溶剂中， 加压蒸干混 合溶液至形成一层均匀的脂质薄膜 ； 然后加 0.4 2ml pH 7.4 的多西他赛溶液， 多西他 赛的浓度为 5mg/ml， 溶解后， 超声形成均匀悬液， 37水浴条件下水合 30min， 即

5、得多西他 赛 pH 敏感脂质体。 4. 根据权利要求 3 所述的制备方法， 其特征在于 ： 所述有机溶剂为氯仿。 权 利 要 求 书 CN 102379849 A CN 102379861 A1/3 页 3 多西他赛 pH 敏感脂质体及其制备方法 技术领域 0001 本发明涉及一种抗肿瘤药物多西他赛的 pH 敏感脂质体及其制备方法。 背景技术 0002 多西他赛 (Docetaxel)， 属于紫杉类化合物抗肿瘤药， 其作用机制是加强微管蛋白 聚合作用和抑制微管解聚作用， 导致形成稳定的非功能性微管束， 因而破坏肿瘤细胞的有 丝分裂， 使肿瘤细胞不能够增殖， 抑制肿瘤细胞生长， 从而起到抗肿瘤作

6、用。临床主要用于 先期化疗失败的晚期或转移乳腺癌的治疗以及使用以顺铂为主的化疗失败的晚期或转移 性非小细胞肺癌的治疗。但是该药物经静脉注射后， 毒副作用比较大， 常见的为骨髓抑制、 水肿、 脱发、 无力、 黏膜炎、 关节痛、 肌肉痛、 低血压以及注射部位反应等。 这些毒副作用使多 西他赛的临床应用受到了很大限制， 因此寻求一种更加有效的药物新剂型， 使药物可以在 不增加剂量的情况下， 延长药物在体内的半衰期及循环时间， 提高药物的抗肿瘤效果， 减少 药物的毒副作用， 增强药物的临床应用性迫在眉睫。 0003 脂质体是一种靶向药物载体， 属于靶向给药系统的一种新剂型。脂质体可以使其 包封的药物被

7、巨噬系统吞噬， 从而激活机体的自身免疫功能， 并改变被包封药物的体内分 布， 使药物主要在肝、 脾、 肺和骨髓等组织器官中积蓄， 从而提高药物的治疗指数， 减少药物 的治疗剂量， 降低药物的毒副作用以及延长药物在体内的循环时间。脂质体的制备为多西 他赛药物所面临的问题提供了良好的解决方案， 这不仅使得多西他赛药物良好的抗肿瘤性 得以保留， 还使得该药物在体内靶向不好、 不稳定等问题得到了有效的解决。 0004 另外， 患者的肿瘤组织在局部缺血时， 肿瘤间质液会出现异常酸化现象。因此， 可 以利用肿瘤组织 pH(pH 为 5.0 6.5) 比正常组织 PH 低的特性， 制备在生理范围内稳定而 在

8、 pH 偏低的环境中不稳定的一种 pH 敏感型脂质体， 以进一步提高该脂质体的靶向性以及 实现药物的智能控制释放， 使得多西他赛药物的药效被显著提高。 发明内容 0005 针对上述现有技术， 本发明提供了一种多西他赛的 pH 敏感脂质体， 并提供了其制 备方法。 0006 本发明是通过以下技术方案实现的 ： 0007 一种多西他赛 pH 敏感脂质体， 是由以下原料组分制成的 ： 多西他赛， 磷脂酰乙 醇胺， 胆固醇和油酸， 它们之间的重量比为 ： 多西他赛磷脂酰乙醇胺胆固醇油酸 (0.2 1) (0.5 3) (0.5 2) (0.5 3)。 0008 所述 pH 敏感脂质体的粒径为 275n

9、m 304nm。 0009 所述多西他赛 pH 敏感脂质体的制备方法为 ： 称取 5 30mg 磷脂酰乙醇胺、 5 20mg 胆固醇和 5 30mg 油酸， 溶于 10 15ml 有机溶剂中， 加压蒸干混合溶液至形成一层 均匀的脂质薄膜 ； 然后加0.42ml pH7.4的多西他赛溶液， 多西他赛的浓度为5mg/ml， 溶解后， 超声形成均匀悬液， 37水浴条件下水合 30min， 即得多西他赛 pH 敏感脂质体。 说 明 书 CN 102379849 A CN 102379861 A2/3 页 4 0010 所述有机溶剂为氯仿。 0011 本发明的发明人经过实验筛选， 找到了既能使脂质体中药

10、物持续释放、 提高血药 浓度、 延长药物在血液中循环时间、 提高药物的生物利用度， 同时又可以降低药物的毒副作 用、 增强病人的顺应性的有效的药物配方。实际应用时， 可将本发明的 pH 敏感脂质体制成 注射液、 冻干粉针剂和喷雾剂进行应用。 本发明的制备工艺简单， 制备的制剂能使脂质体中 药物持续释放， 提高血药浓度、 延长药物在血液中循环时间， 提高药物的生物利用度， 同时 又可以降低药物的毒副作用， 增强病人的顺应性， 可用于治疗各种肿瘤性疾病。 本发明的脂 质体药物包封率较高、 性能稳定， 具有被动靶向性、 智能控释等显著特征， 而且具有储存稳 定性好， 药物治疗指数高、 毒副作用低等特

11、点。 附图说明 0012 图 1 为 pH 敏感脂质体的电镜照片， 其中， A 为 pH 在 5.0 下的透射电镜照片， B 为 pH 在 7.4 下的透射电镜照片。 0013 图 2 为 pH 敏感脂质体的粒径分布图。 0014 图 3 为 pH 敏感脂质体在不同 pH 的 PBS 缓冲液中多西他赛的渗漏曲线。 0015 图 4 为载药脂质体和游离药在同一 pH 缓冲液中的释放曲线。 具体实施方式 0016 下面结合实施例对本发明作进一步的说明。 0017 下面通过实施例对本发明进行具体描述， 有必要指出的是下述实施例只用于对本 发明做进一步说明， 不能理解为对本发明保护范围的限制， 该领域

12、的技术人员根据下述说 明的内容做出的一些非本质的改进和调整都在本发明的保护范围内。 0018 实施例 1 0019 称取 30mg 磷脂酰乙醇胺、 20mg 胆固醇、 30mg 油酸溶于 15ml 有机溶剂氯仿中， 加压 蒸干混合溶液至形成一层均匀的脂质薄膜。 加2ml pH7.4的多西他赛的药物溶液(药物 浓度为 5mg/ml) 溶解， 超声形成均匀悬液， 用 pH7.4 的 PBS 缓冲液补充使最终体积为 20ml， 37水浴条件下水合 30min 后即得多西他赛 pH 敏感脂质体。所制得的多西他赛 pH 敏感脂 质体粒径在 2772nm 3031nm， 平均粒径为 286.4nm， 透射

13、电镜照片如图 1 所示， 粒径分 布如图 2 所示。 0020 实施例 2 0021 按上述实施例 1 制得多西他赛 pH 敏感脂质体。利用动态膜透析法， 考察制剂在不 同 pHPBS 中的释放规律， 所得释放曲线如图 3 所示， 可见脂质体所包封药物在不同 pH 环境 中释放速率不同， 在偏酸性环境中药物释放较快。 0022 实施例 3 0023 利用上述实施例 1 制得的多西他赛 pH 敏感脂质体以及以多西他赛原料药配制成 的对照液， 采用动态膜透析法， 考察它们在同一 pH 缓冲液中的释放， 其释放规律如图 4 所 示， 可见将药物制备成脂质体能延缓药物的释放， 提高其生物利用度。 00

14、24 实施例 4 0025 称取 5mg 磷脂酰乙醇胺、 5mg 胆固醇、 5mg 油酸溶于 10ml 有机溶剂氯仿中， 加压蒸 说 明 书 CN 102379849 A CN 102379861 A3/3 页 5 干混合溶液至形成一层均匀的脂质薄膜。 加0.4ml pH7.4的多西他赛的药物溶液(药物 浓度为 5mg/ml) 溶解， 超声形成均匀悬液， 用 pH7.4 的 PBS 缓冲液补充使最终体积为 13ml， 37水浴条件下水合 30min 后即得多西他赛 pH 敏感脂质体。 0026 实施例 5 0027 称取 20mg 磷脂酰乙醇胺、 15mg 胆固醇、 20mg 油酸溶于 15ml 有机溶剂氯仿中， 加 压蒸干混合溶液至形成一层均匀的脂质薄膜。加 1.5ml pH 7.4 的多西他赛的药物溶液 ( 药物浓度为 5mg/ml) 溶解， 超声形成均匀悬液， 用 pH7.4 的 PBS 缓冲液补充使最终体积为 20ml， 37水浴条件下水合 30min 后即得多西他赛 pH 敏感脂质体。 说 明 书 CN 102379849 A CN 102379861 A1/2 页 6 图 1 图 2 说 明 书 附 图 CN 102379849 A CN 102379861 A2/2 页 7 图 3 图 4 说 明 书 附 图 CN 102379849 A