一种雏凤膏软膏及其在治疗产妇乳头皲裂中的应用.pdf

1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710957598.7 (22)申请日 2017.10.16 (71)申请人 浙江中医药大学 地址 310053 浙江省杭州市滨江区滨文路 548号 (72)发明人 杨波 赵华军 滕飞 朱智慧 (74)专利代理机构 杭州之江专利事务所(普通 合伙) 33216 代理人 张勋斌 (51)Int.Cl. A61K 36/185(2006.01) A61K 9/06(2006.01) A61K 47/44(2017.01) A61P 15/14(2006.01) A61P 17/

2、02(2006.01) A61K 35/57(2015.01) A61K 35/36(2015.01) (54)发明名称 一种雏凤膏软膏及其在治疗产妇乳头皲裂 中的应用 (57)摘要 本发明提供了一种雏凤膏软膏及其在治疗 产妇乳头皲裂中的应用。 所述雏凤膏软膏包括以 下重量份的组分： 蛋黄油提取物1份、 芝麻油0.5 1.5份、 纯天然羊毛脂1.52.5份， 其中， 所述 的蛋黄油提取物的制备方法如下： 将鸡蛋煮熟， 剥取蛋黄， 压碎， 用食品级乙酸乙酯冷浸或超声 提取， 得到的提取液减压回收乙酸乙酯， 得到所 述的蛋黄油提取物。 该方法制备得到的雏凤膏软 膏， 可用于产妇乳头皲裂的治疗， 该

3、方法系将中 医药典籍中具有悠久用药历史的土法， 以现代方 式呈现。 所述雏凤膏制备方法， 工艺简单， 适合母 婴这一特殊群体， 适合哺乳期这一特定阶段， 对 母婴无副作用， 不影响喂奶， 安全有效。 权利要求书1页 说明书6页 附图1页 CN 107648287 A 2018.02.02 CN 107648287 A 1.一种雏凤膏软膏， 其特征在于， 包括以下重量份的组分： 蛋黄油提取物 1份 芝麻油 0.51.5份 纯天然羊毛脂 1.52.5份 其中， 所述的蛋黄油提取物的制备方法如下： 将鸡蛋煮熟， 剥取蛋黄， 压碎， 用食品级乙酸乙酯冷浸或超声提取， 得到的提取液减压 回收乙酸乙酯，

4、得到所述的蛋黄油提取物。 2.根据权利要求1所述的雏凤膏软膏， 其特征在于， 食品级乙酸乙酯提取次数为2次， 每 次20min， 提取过程中时时搅拌， 振摇。 3.根据权利要求2所述的雏凤膏软膏， 其特征在于， 所述食品级乙酸乙酯的每次用量为 蛋黄质量的510倍。 4.根据权利要求1所述的雏凤膏软膏， 其特征在于， 所述的雏凤膏软膏的制备方法如 下： 将纯天然羊毛脂在4050水浴上加热， 使其熔化， 然后加入蛋黄油和芝麻油， 室温 下， 搅拌， 直至软膏成型。 5.根据权利要求4所述的雏凤膏软膏， 其特征在于， 所述蛋黄油提取物、 芝麻油和纯天 然羊毛脂的质量比为2： 1： 4。 6.一种如权

5、利要求15任一项所述的雏凤膏软膏在药物制备领域中的应用， 其特征在 于， 所述的药物用于治疗产妇乳头皲裂。 7.根据权利要求6所述的雏凤膏软膏在药物制备领域中的应用， 其特征在于， 所述的药 物用于促进人乳腺上皮细胞增殖。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 107648287 A 2 一种雏凤膏软膏及其在治疗产妇乳头皲裂中的应用 技术领域 0001 本发明属于药品、 保健品、 化妆品、 日用品领域， 具体涉及一种雏凤膏软膏及其在 治疗产妇乳头皲裂中的应用。 背景技术 0002 乳头皲裂是新生产妇常常被困扰的问题， 皲裂主要表现为乳腺上皮脱落， 乳头根 部裂口或周围溃疡， 多发生在母乳喂

6、养早期， 乳头皲裂时， 常 “痛彻心扉” ， 国内产妇乳头疼 痛占78， 多发生在产后2472小时。 研究显示： 乳头皲裂引起的疼痛， 是产妇早期放弃纯 母乳喂养的主要原因之一。 0003 临床目前有用于乳头皲裂治疗的一些化学药物或中草药制备的软膏剂、 乳膏剂、 凝胶剂等， 如： 生肌玉红纱条、 鹿角霜、 羊毛脂乳膏、 胶原酶等。 但由于哺乳期的特殊性， 年轻 母亲怕乳头上涂敷药物影响婴儿健康， 往往放弃药物的使用； 有些产妇即使使用了药物， 给 婴儿哺乳前又需擦拭干净乳头上残留的药物， 亦或会加重乳头皲裂的程度或引发乳头感 染。 0004 蛋黄油是从鸡蛋的蛋黄中煎取的油。 因为蛋黄油含有丰富

7、的维生素A、 D和卵磷脂 等， 这些物质对人体皮肤的再生和代谢有着重要作用。 蛋黄油治病， 历史久远。 明代 本草纲 目 曰 “鸡卵炒取油， 和粉敷头疮” 。 又云 “鸡卵黄熬油搽之， 治杖疮已破， 甚妙” 。 0005 中医验方蛋黄油， 古籍中称为 “雏凤膏” ， 性平， 味甘， 具有解毒消肿， 敛疮生肌之 效。“雏凤膏” 用于治疗乳头皲裂具有悠久的用药历史， 安全有效， 在民间广为流传。 0006 古法制备 “雏凤膏” 系家庭作坊性质， 工艺操作不可控， 冒黑烟， 所得蛋黄油褐色至 焦黑， 易破坏蛋黄油品质， 且操作麻烦， 不适宜现代人快节奏的生活， 故虽然 “雏凤膏” 安全 有效， 但依

8、然不被现代社会所接受。 0007 用现代方法工业化提取蛋黄油， 建立简单、 安全的蛋黄油中间体制备方法， 确保蛋 黄油的品质； 通过现代制剂工艺， 添加合适软膏剂基质， 充分考虑哺乳期使用药膏的安全 性， 建立现代 “雏凤膏” 软膏制备工艺非常迫切。 0008 目前， 在蛋黄油的提取工艺方面， 中国专利 “一种精制蛋黄油的制备方法” 公布了 一种高纯度蛋黄油的制备方法， 包括蛋黄粉超临界流体萃取， 得到粗蛋黄油， 粗蛋黄油经有 机溶剂萃取， 萃取物再经氧化铝柱层析， 有机溶剂洗脱， 得到精制蛋黄油。 该方法能制备得 到纯度较高的蛋黄油， 但蛋黄油中的维生素、 卵磷脂等极性较大， 超临界流体萃取

9、时需使用 甲醇、 乙醇等极性较大的夹带剂， 另外， 该工艺多次使用了有机溶剂， 使用了氧化铝， 所以， 该方法制备得到的蛋黄油， 可能存在有机溶剂等残留， 不太适合母婴这一群体及哺乳这一 特定时期。 0009 在蛋黄油的提取工艺方面，中国畜产与食品 2000年第7卷第5期 “蛋黄油的提取 及成分分析” 公布了一种利用乙醇渗漉提取来制备蛋黄油的方法， 该方法工艺亦较简单， 且 使用食品级乙醇渗漉， 但蛋黄油理化性质为油状， 用极性较大的乙醇渗漉提取， 容易提取出 一些极性较大的杂质， 影响蛋黄油的品质。 说 明 书 1/6 页 3 CN 107648287 A 3 0010 充分保留古法 “雏凤

10、膏” 中蛋黄油的品质， 以蛋黄油为中间体， 加适宜基质， 制备软 膏， 应用于产妇乳头皲裂， 充分考虑哺乳这一特殊时期， 充分考虑母婴这一特殊群体， 现代 “雏凤膏” 相关制剂制备方法的文献及专利还未见报道。 发明内容 0011 本发明的目的是针对中医药典籍中安全、 有效的， 古法制备的 “雏凤膏” 不能推广， 不能被工业化生产， 使用不方便这一问题， 提供一种科学合理， 工艺操作简单， 接近古法， 又 能被新生产妇认可的工业化制备的现代 “雏凤膏” 软膏的方法。 以古法 “雏凤膏” ， 即： 蛋黄油 为中间体， 加入中药油膏剂常用的芝麻油， 纯天然羊毛脂为基质， 并探索调节蛋黄油及基质 比例

11、， 制备现代 “雏凤膏” 软膏剂。 0012 一种雏凤膏软膏， 包括以下重量份的组分： 0013 蛋黄油提取物 1份 0014 芝麻油 0.51.5份 0015 纯天然羊毛脂 1.52.5份 0016 其中， 所述的蛋黄油提取物的制备方法如下： 0017 将鸡蛋煮熟， 剥取蛋黄， 压碎， 用食品级乙酸乙酯冷浸或超声提取， 得到的提取液 减压回收乙酸乙酯， 得到所述的蛋黄油提取物。 0018 芝麻油： 味甘、 性凉， 具有解毒生肌之功效。 据 本草纲目 记载： 麻油具有 “润燥、 解 毒、 止痛、 消肿之功” 。 纯麻油含丰富的维生素E， 具有促进细胞分裂等功能。 0019 纯天然羊毛脂无臭、

12、无味， 具有良好吸水性， 能促进药物渗透、 吸收， 纯羊毛脂膏亦 被世界各国推荐为预防、 治疗乳头皲裂用药， 纯天然羊毛脂无副作用、 亦可食用， 本 “雏凤 膏” 软膏中加入羊毛脂， 亦能调节软膏的稠度和硬度。 0020 采用食品级乙酸乙酯作为提取溶剂， 非常适合于提取蛋黄中卵磷脂、 维生素类成 分， 能够更加高效、 完全地获取古法雏凤膏中的药效物质， 且能避免大量极性较大的杂质被 提取出来。 乙酸乙酯安全， 适合工业生产； 香酯类溶剂作为蛋黄油提取溶剂， 安全性高， 也易 于被年轻妈妈所接受。 0021 本发明所用提取方法为冷浸法或超声提取法， 两种提取方法均具有能耗低， 安全， 绿色、 环

13、保， 且蛋黄油中间体提取效率高等优点。 0022 作为优选， 食品级乙酸乙酯提取次数为2次， 每次20min， 提取过程中时时搅拌， 振 摇。 0023 作为优选， 所述食品级乙酸乙酯的每次用量为蛋黄质量的510倍。 0024 作为优选， 所述的雏凤膏软膏制备方法如下： 0025 将纯天然羊毛脂在45水浴上加热， 使其熔化， 然后加入蛋黄油和芝麻油， 室温 下， 搅拌， 直至软膏成型。 0026 该成型工艺以蛋黄油为中间体， 所选基质为中药软膏剂常用基质： 芝麻油和纯天 然羊毛脂。 蛋黄油-芝麻油-纯天然羊毛脂以质量分数2:1:4的比例熔合。 为了得到更稳定、 均匀的软膏剂， 先将纯羊毛脂熔化

14、， 再加入液态蛋黄油、 芝麻油， 不断搅拌， 直至冷却至半固 体状黄色、 透明软膏。 0027 该制备方法具体包括以下步骤： 说 明 书 2/6 页 4 CN 107648287 A 4 0028 (1)取新鲜鸡蛋， 煮熟， 剥取蛋黄， 蛋黄压碎， 以食品级乙酸乙酯浸泡， 冷浸或超声 提取2次， 20min/次， 时时搅拌， 振摇， 过滤， 收集提取液； 所述食品级乙酸乙酯用量为蛋黄质 量510倍/次(即乙酸乙酯用量为510mL/g蛋黄)； 冷浸法常温提取能耗低， 安全、 简便易 行， 亦不会造成热敏性有效成分的破坏或降解。 0029 (2)步骤(1)提取液减压浓缩回收乙酸乙酯， 即得蛋黄油中

15、间体。 乙酸乙酯极性大 于石油醚、 乙醚、 氯仿、 二氯甲烷等， 能较大限度提取出蛋黄中维生素A、 D和卵磷脂等活性成 分， 更重要的是所用乙酸乙酯为食品级， 有特殊香味， 即使有极少量溶剂残留， 也易为新生 产妇接受； 乙酸乙酯工业生产也符合绿色、 环保等理念。 0030 (3)取纯羊毛脂4份， 置于容器中， 加热至约45， 将羊毛脂熔化， 再加入2份蛋黄油 中间体， 1份芝麻油基质， 熔合， 不断搅拌， 冷却至室温， 即得。 蛋黄油及芝麻油常温下均为液 态， 作为软膏剂使用不便， 纯羊毛脂为中药软膏剂常用基质， 纯羊毛脂的加入， 能改善雏凤 膏软膏的硬度， 且纯羊毛脂膏亦有一定的乳头皲裂的

16、预防、 治疗作用。 0031 本发明还提供了一种所述的雏凤膏软膏在药物制备领域中的应用， 所述的药物用 于治疗产妇乳头皲裂。 0032 该雏凤膏软膏， 可用于治疗新生产妇乳头皲裂。 蛋黄油， 系将中医药典籍中用于治 疗新生产妇乳头皲裂的临床验方， 用现代、 简单的方法呈现。 该提取方法简单、 安全， 质量可 控； 所加入的软膏剂基质： 芝麻油， 可食用， 是软膏剂常用基质之一； 纯天然羊毛脂， 可调节 软膏剂硬度， 安全， 不影响哺乳。 预示该雏凤膏软膏可用于新生产妇乳头皲裂的治疗， 且安 全， 适用于母婴这一特定群体， 及哺乳期这一特定时期。 0033 更具体地说， 该软膏剂将古法雏凤膏(即

17、： 土法制备的蛋黄油)以现代提取工艺、 制 剂工艺呈现， 有利于工业化大生产， 且有利于将传统中医药典籍中的优秀传统药物、 治疗方 法发扬光大； 该制备方法充分考虑了土法制备所得蛋黄油的理化性质， 以食品级香酯型溶 媒将古法雏凤膏中的药效物质萃取出来， 乙酸乙酯提取蛋黄油符合相似相溶原则， 且工业 生产绿色、 环保、 安全， 在不得不使用有机溶剂的前提下， 食品级乙酸乙酯作为提取溶剂， 也 易于被新生产妇所接受。 提取所得蛋黄油中间体为黄色、 透明、 油状液体， 使用不便， 故加入 了中药软膏剂常用基质： 芝麻油及纯天然羊毛脂， 二者据文献记载， 亦有一定的预防、 治疗 新生产妇乳头皲裂的作用

18、， 或能改善患者症状， 更重要的是基质的加入， 能促进现代雏凤膏 软膏的成型、 调节软膏剂硬度， 更有利于软膏剂的方便使用。 0034 按照本发明方法制备得到的现代雏凤膏软膏， 工艺简单， 安全， 绿色、 环保， 适合母 婴这一特殊群体， 适合哺乳期这一特定阶段， 有效成分含量高， 能填补或补充市场上治疗新 生产妇乳头皲裂药物或母婴产品的短缺， 亦能在一定程度上推动 “母乳喂养” 这一被医学界 普遍认同的婴幼儿喂养方式。 附图说明 0035 图1为实施例7中不同药物对人正常乳腺细胞MCF 10A相对细胞活力的影响结果 图。 具体实施方式 0036 下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述， 但

19、本发明的保护范围并不仅限于 说 明 书 3/6 页 5 CN 107648287 A 5 此： 0037 实施例1 0038 本实施例的现代雏凤膏制备方法， 包括下述步骤： 0039 A、 蛋黄油提取： 取新鲜鸡蛋， 煮熟， 剥取蛋黄。 取200g蛋黄， 压碎， 以8倍量食品级乙 酸乙酯浸泡， 冷浸提取2次， 20min/次， 时时搅拌， 振摇， 过滤， 收集提取液。 提取总溶剂体积 相当于蛋黄质量的16倍量(总计用去食品级乙酸乙酯3.2L)。 0040 B、 提取液浓缩： 合并步骤(1)两次所得提取液， 减压浓缩回收乙酸乙酯， 即得蛋黄 油中间体， 得到蛋黄油中间体48.54g。 乙酸乙酯能

20、较大限度提取出蛋黄中维生素A、 D和卵磷 脂等活性成分。 0041 C、 雏凤膏软膏制备： 称取纯羊毛脂20g， 置容器中， 于水浴上45加热， 使其熔化， 另称取蛋黄油10g， 芝麻油5g， 将两者与纯羊毛脂熔合， 立即快速搅拌， 至软膏剂冷却至室温 成型， 即得到黄色、 透明状软膏剂。 0042 实施例2 0043 A、 蛋黄油提取： 取新鲜鸡蛋， 煮熟， 剥取蛋黄。 取200g蛋黄， 压碎， 以8倍量食品级乙 酸乙酯浸泡， 超声提取2次， 20min/次， 过滤， 收集提取液。 提取总溶剂体积相当于蛋黄质量 的16倍量(总计用去食品级乙酸乙酯3.2L)。 0044 B、 提取液浓缩： 合

21、并步骤(1)两次所得提取液， 减压浓缩回收乙酸乙酯， 即得蛋黄 油中间体， 得到蛋黄油中间体47.54g。 0045 C、 软膏剂制备： 称取纯羊毛脂20g， 置容器中， 于水浴上45加热， 使其熔化， 另称 取蛋黄油10g， 芝麻油5g， 将两者与纯羊毛脂熔合， 立即快速搅拌， 至软膏剂冷却至室温成 型， 即得到黄色、 透明状软膏剂。 0046 实施例2采用超声提取法， 超声提取法亦有能耗低， 有效成分提取得率高等优点。 与实施例1比较， 蛋黄油提取得率与冷浸法几乎无差异。 按照超声提取法制备所得蛋黄油， 在制备软膏剂时， 理化性质亦与实施例无差异， 故蛋黄油提取， 亦可采用超声提取法。 0

22、047 实施例3 0048 A、 蛋黄油提取： 取新鲜鸡蛋， 煮熟， 剥取蛋黄。 取200g蛋黄， 压碎， 以适量食品级乙 酸乙酯浸泡， 装柱渗漉提取， 由于乙酸乙酯渗透性较弱， 乙酸乙酯作为提取溶剂， 很难流出 渗漉柱， 故渗漉法不适合蛋黄油的提取。 0049 实施例4 0050 A、 蛋黄油提取： 取新鲜鸡蛋， 煮熟， 剥取蛋黄。 取200g蛋黄， 压碎， 以8倍量食品级乙 酸乙酯浸泡， 回流提取2次， 20min/次， 过滤， 收集提取液。 提取总溶剂体积相当于蛋黄质量 的16倍量(总计用去食品级乙酸乙酯3.2L)。 0051 B、 提取液浓缩： 合并步骤(1)两次所得提取液， 减压浓缩

23、回收乙酸乙酯， 即得蛋黄 油中间体， 得到蛋黄油中间体52.39g。 0052 C、 软膏剂制备： 称取纯羊毛脂20g， 置容器中， 于水浴上45加热， 使其熔化， 另称 取蛋黄油10g， 芝麻油5g， 将两者与纯羊毛脂熔合， 立即快速搅拌， 至软膏剂冷却至室温成 型， 即得到软膏剂。 0053 实施例4采用回流提取法， 回流提取法能耗较高， 工业级多功能提取罐提取蛋黄 油， 安全性、 环保性需有一定考量。 与实施例1比较， 蛋黄油提取得率较冷浸法、 超声提取法 说 明 书 4/6 页 6 CN 107648287 A 6 略高， 但所得中间体蛋黄油颜色略深， 呈黄褐色。 按照回流提取法制备所

24、得蛋黄油， 在制备 软膏剂时， 理化性质亦与实施例1无较大差异， 但所得软膏剂颜色亦略深， 视觉观感较实施 例1略差。 0054 实施例5 0055 以实施例1所得蛋黄油中间体制备雏凤膏软膏剂。 称取蛋黄油10g， 芝麻油10g， 纯 羊毛脂20g， 置容器中， 于水浴上40加热， 快速搅拌使其熔合， 至软膏剂冷却至室温成型， 即得软膏剂。 该法所得软膏剂不透明， 蛋黄油中间体与基质不能充分熔合， 且所得软膏剂呈 半流体状。 0056 实施例6 0057 以实施例1所得蛋黄油中间体制备雏凤膏软膏。 称取纯羊毛脂40g， 置容器中， 于水 浴上45加热， 使其熔化， 另称取蛋黄油10g， 芝麻油

25、10g， 将两者与纯羊毛脂熔合， 立即快速 搅拌， 至软膏剂冷却至室温成型， 即得到软膏剂。 该法所得软膏剂亦为黄色透明状， 但所得 软膏剂呈半流体状。 0058 对比例1 0059 鸡蛋煮熟后,剥取蛋黄备用， 锅中加香油适量， 加热后,放入捣碎的蛋黄， 文火煎熬 至蛋黄成渣， 析出褐色透明状流体。 0060 实施例7 0061 对实施例1得到的雏凤膏软膏和对比例1得到的土法雏凤膏， 进行体外促进人乳腺 上皮细胞增殖实验研究。 0062 选正常人乳腺上皮细胞MCF 10A(购自于中国科学院上海细胞库)为研究对象。 取 对数生长期的MCF 10A细胞， 用PBS洗涤2次， 加入0.05胰酶消化，

26、 消化完全后， 加入0.1 大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化， 离心， 去上清。 加入人乳腺上皮细胞MCF 10A完全培养液 (MEGM培养基)， 调整细胞浓度后， 接种于96孔细胞培养板， 每孔加入2103个细胞， 总体积 为100 L， 分别以0、 5、 10、 20、 40、 80、 160 g/mL雏凤膏软膏或土法雏凤膏处理细胞(其中， 雏 凤膏软膏的量以整个软膏计量， 包括基质)。 96小时后， 每孔加入20 L 5mg/mL的MTT溶液， 混 匀， 置37、 5CO2饱和湿度培养箱中培养4小时。 加入100 L三联液(10十二烷基硫酸钠- 5异丁醇-0.012M盐酸)， 使蓝紫色甲臜沉淀

27、完全溶解。 置于酶标仪中， 于570nm检测吸光度 值， 试验重复三次。 结果如附图1所示。 0063 实验结果显示， 实施例1所制雏凤膏软膏和对比例1所制土法雏凤膏均有促进MCF 10A增殖活性。 给药96小时后， 检测细胞活力， 药物剂量与细胞活力具有量-效依赖关系。 给 药96小时后， 当给药剂量为160 g/mL时， 所述雏凤膏软膏和土法雏凤膏， 对乳腺上皮细胞增 殖分别促进了约1.5倍和0.6倍。 0064 土法雏凤膏的有效性， 进一步确证了中医典籍记载的雏凤膏在治疗产妇乳头皲裂 方面的有效性。 治疗产妇乳头皲裂与促进正常乳腺上皮细胞增殖息息相关， 本发明通过现 代实验方法， 阐明了

28、古法雏凤膏应用的科学内涵， 也提示本发明是对中医药典籍中优秀成 果的继承与创新。 0065 对比例1土法制备雏凤膏， 属家庭作坊性质， 难以规范化操作， 且质量不可控， 难以 推广。 土法所制雏凤膏呈褐色， 观感略差。 用食用油煎出蛋黄油， 由于受热时间长， 可能导致 维生素等有效成分破坏， 故实施例1虽然加了2.5倍量于蛋黄油的基质， 实施例1雏凤膏软膏 说 明 书 5/6 页 7 CN 107648287 A 7 促进乳腺上皮细胞增殖活性仍然远优于对比例1所述土法雏凤膏。 0066 本发明中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神作举例说明。 本发明所属技术 领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式 替代， 但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。 说 明 书 6/6 页 8 CN 107648287 A 8 图1 说 明 书 附 图 1/1 页 9 CN 107648287 A 9