生产不饱和脂肪酸含量提高之乳的方法.pdf

1、(10)申请公布号 CN 103237442 A (43)申请公布日 2013.08.07 CN 103237442 A *CN103237442A* (21)申请号 201180055520.7 (22)申请日 2011.10.18 2005543 2010.10.18 NL A01K 67/00(2006.01) A23C 9/20(2006.01) A23K 1/16(2006.01) A23K 1/18(2006.01) C12Q 1/68(2006.01) (71)申请人 菲仕兰品牌有限公司 地址 荷兰阿默斯福特 (72)发明人 耶罗恩玛戈特莱昂赫克 特奥维克托尔塞尔 玛利亚海伦娜彼

2、得罗内拉威廉 明娜维斯科尔 (74)专利代理机构 北京集佳知识产权代理有限 公司 11227 代理人 彭鲲鹏 顾晋伟 (54) 发明名称 生产不饱和脂肪酸含量提高之乳的方法 (57) 摘要 本发明涉及不饱和脂肪酸含量提高并且反式 脂肪酸含量降低的乳组合物。此外， 本发明涉及 通过用富脂饲料 (fat-rich feed) 喂养具有基 因 GDAT1 之 AA 基因型的乳牛来得到这种乳的方 法。另外， 本发明涉及选择用于以富脂饲料添加 剂 (supplement) 喂养之乳牛的方法以及测试富 脂饲料添加剂的方法。在另一方面， 本发明涉及 减少在乳牛产乳期间甲烷排放和减少氨排放的方 法。 在另一方

3、面， 本发明涉及乳组合物在制备基于 乳之产品中的用途以及基于其的产品。 (30)优先权数据 (85)PCT申请进入国家阶段日 2013.05.17 (86)PCT申请的申请数据 PCT/NL2011/050712 2011.10.18 (87)PCT申请的公布数据 WO2012/053893 EN 2012.04.26 (51)Int.Cl. 权利要求书 2 页 说明书 9 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书2页 说明书9页 (10)申请公布号 CN 103237442 A CN 103237442 A *CN103237442A* 1/2 页 2 1.

4、 乳组合物， 其包含脂肪酸， 并且其优选为包含脂肪酸的乳牛之乳组合物， 所述组合物 每 100g 总脂肪酸包含 35 至 42g 不饱和脂肪酸、 0.7 至 8.0g C18:3顺式 9， 12， 15 脂肪酸和低 于 3.5g 的反式脂肪酸。 2.根据权利要求1所述的乳组合物， 其每100g总脂肪酸包含37至41g不饱和脂肪酸。 3. 根据权利要求 1 或 2 所述的乳组合物， 其每 100g 总脂肪酸包含 0.78 至 4.0g C18:3 顺式 9， 12， 15 脂肪酸。 4. 根据权利要求 1 至 3 中任一项所述的乳组合物， 其每 100g 总脂肪酸包含低于 2.9g 的反式脂肪酸

5、。 5.根据权利要求1至4中任一项所述的乳组合物， 其每100g总脂肪酸还包含量为0.60 至 4.00g 的共轭亚油酸 (CLA)。 6. 根据权利要求 1 至 5 中任一项所述的乳组合物， 其每 100g 乳还包含量为 16.0 至 28.5mg 的尿素。 7. 根据权利要求 1 至 6 中任一项所述的乳组合物， 其可根据权利要求 12 至 16 中任一 项所述的方法得到。 8. 根据权利要求 1 至 7 中任一项所述的乳组合物用于制备基于乳之产品的用途。 9. 食物产品， 其基于或包含根据权利要求 1 至 7 中任一项所述的乳组合物。 10. 包含至少 10 只乳牛的乳牛畜群， 其中至少

6、 60的所述乳牛具有基因 DGAT1 的 AA 基因型。 11. 根据权利要求 10 所述的乳牛畜群， 其中所述乳牛属于荷斯坦或娟姗品种。 12. 得到乳的方法， 其包括以下步骤 ： i) 用富含脂肪的饲料喂养具有 DGAT1 基因之 AA 基因型的乳牛， 和 ii) 对所述乳牛进行挤乳。 13. 根据权利要求 12 所述的方法， 其中所述饲料包含 4 至 6wt.的脂肪。 14. 根据权利要求 12 或 13 所述的方法， 其中所述饲料包含饲料添加剂， 所述饲料添加 剂包含量为总脂肪之 5 至 90wt.的不饱和脂肪酸。 15. 根据权利要求 14 所述的方法， 其中至少 30wt.的所述不

7、饱和脂肪酸是 C18:3顺式 9， 12， 15 脂肪酸。 16. 根据权利要求 12 至 15 中任一项所述的方法， 其中所述乳牛属于荷斯坦或娟姗品 种。 17. 选择乳牛用于以富脂饲料喂养的方法， 其通过选择具有基因 DGAT1 之 AA 基因型的 乳牛来进行。 18. 根据权利要求 17 所述的方法， 其中所述饲料包含 4 至 6wt.的脂肪。 19. 根据权利要求 17 或 18 所述的方法， 其中所述饲料包含饲料添加剂， 所述饲料添加 剂包含 10 至 40wt.的脂肪， 其中 5 至 90wt.为不饱和脂肪酸。 20. 根据权利要求 19 所述的方法， 其中至少 30wt.的所述不

8、饱和脂肪酸是 C18:3顺式 9， 12， 15 脂肪酸。 21. 根据权利要求 17 至 20 中任一项所述的方法， 其中所述乳牛属于荷斯坦或娟姗品 种。 22. 测试用于乳牛之饲料添加剂的方法， 其包括以下步骤 ： 权 利 要 求 书 CN 103237442 A 2 2/2 页 3 i) 选择至少一只具有基因 DGAT1 之 AA 基因型的乳牛， ii) 用待测试的饲料添加剂喂养步骤 i) 中选择的所述一只或更多只乳牛， iii) 对所述一只或更多只乳牛进行挤乳， 和 iv) 分析所述乳的组成。 23. 根据权利要求 22 所述的方法， 其中所述饲料添加剂包含 10 至 40wt.的脂肪

9、， 其 中 5 至 90wt.为不饱和脂肪酸。 24. 根据权利要求 23 所述的方法， 其中至少 30wt.的所述不饱和脂肪酸是 C18:3顺式 9， 12， 15 脂肪酸。 25. 用于减少甲烷排放的方法， 其包括选择具有基因 DGAT1 之 AA 基因型的乳牛并用富 脂饲料喂养那些乳牛。 26. 根据权利要求 25 所述的方法， 其中所述饲料包含 4 至 6wt.的脂肪。 27. 用于减少氨排放的方法， 其包括选择具有基因 DGAT1 之 AA 基因型的乳牛并用富脂 饲料喂养那些乳牛。 28. 根据权利要求 27 所述的方法， 其中所述饲料包含 4 至 6wt.的脂肪。 权 利 要 求

10、书 CN 103237442 A 3 1/9 页 4 生产不饱和脂肪酸含量提高之乳的方法 0001 本发明涉及生产乳 ( 尤其是不饱和脂肪酸含量提高并且反式脂肪酸含量降低的 乳 ) 的方法。此外， 本发明涉及选择用于以富脂饲料喂养之乳牛的方法。在另一方面， 本发 明涉及测试饲料添加剂的方法。在另一方面， 本发明涉及减少在乳牛产乳期间甲烷排放的 方法。在另一方面， 本发明涉及乳组合物、 其用途和基于该乳组合物的产品。 0002 动物乳 ( 尤其是乳牛的乳 ) 是重要的营养物并且被广泛消费。乳可进一步被 加工成多种基于乳的产品， 例如奶油 (cream)、 乳酪、 黄油 (butter)、 酸乳

11、(yogurt)、 甜点 (dessert)、 冰激凌。原料乳包含大量的脂肪、 蛋白质和钙， 并且其组成在物种之间差别很 大。 0003 在乳牛的乳中， 多于 70wt.的总脂肪由饱和脂肪酸组成， 而不饱和脂肪酸构成 小于 30wt.的乳脂肪。已知不饱和脂肪酸， 尤其是长链多不饱和脂肪酸 (long-chain polyunsaturated fatty acid， LC-PUFA) 降低心血管疾病的风险。在现有技术中， 已描述 了乳组合物 ( 尤其是其脂肪酸组合物 ) 可适合用于提供对人类消费者更健康的组合物。 0004 例如， 在 EP-1106077 中， 描述了以下的乳牛之乳组合物 ：

12、 其具有每 100g 总脂肪 酸 60.30 至 68.15g 的总饱和脂肪酸含量， 每 100g 总脂肪酸 32.85 至 39.70g 的总不饱和 脂肪酸含量。反式脂肪酸 (C18:1反式 11 和 C18:2反式 9， 12) 的总含量是每 100g 总脂肪酸 3 至 7g/100g 总脂肪酸。该乳获得于用这样的饲料添加剂喂养的乳牛， 所述饲料添加剂包含 50至 99的亚麻籽并且其具有 23至 30的总脂肪性物质 (fatty matter) 含量。 0005 在 WO2010/015708 中， 描述了每 100g 总脂肪具有 37.8 至 41.4g 总不饱和脂肪酸 含量和 3.12

13、 至 3.55g 反式脂肪酸含量 (C18:1 反式 10 和 C18:1 反式 11) 的乳牛的乳。该 乳获得于用这样的饲料添加剂喂养的乳牛， 所述饲料添加剂基于亚麻籽和还原性二糖。 0006 观察到了乳牛的乳中的不饱和脂肪酸主要来源于乳牛的饲料。但是， 用富含不饱 和脂肪酸的添加剂 ( 例如亚麻籽 ) 喂养乳牛通常导致乳中的反式脂肪酸含量提高， 其在乳 牛瘤胃 (rumen) 中因生物氢化作用而形成。反式脂肪酸被认为对人健康有害， 并且与患冠 心病的提高的风险有关。因此， 应限制乳中所述反式脂肪酸的量。 0007 本发明的一个目的是提供被认为对于大部分消费者而言更健康的乳组合物。 “更 健

14、康” 意指具有以下优点中的一个或更多个 ： 更高含量的不饱和脂肪酸 ( 特别是 -3 脂肪 酸)、 更低的反式脂肪酸含量、 更低的饱和脂肪酸含量、 更高含量的共轭亚油酸(conjugated linoleic acid， CLA)。 特别地， 本发明的一个目的是提供一种生产乳组合物的方法， 所述乳 组合物同时具有相对大量的不饱和脂肪酸和有限量的反式脂肪酸。 0008 本发明基于这样的发现 ： 乳牛的乳的组合物可通过基于乳牛基因型进行选择性喂 养来改变。更详细地， 相关基因是牛二酰基甘油 -o- 酰基转移酶 1 基因 ( 或 DGAT1(diacyl glycerol-o-acyltransfe

15、rase1)， 其与乳的脂肪酸组成有关。 由于多态性(polymorphism) (K232A)， 所以它有两种遗传变体 (genetic variant)K 和 A， 这导致了 DGAT1 蛋白质中的氨 基酸替换 ( 赖氨酸 - 丙氨酸 )。等位基因的两种类型 K 和 A 导致了三种基因型 KK、 AA 和 AK。 0009 本发明人出乎意料地发现， 用富脂饲料喂养之 AA 基因型乳牛生产的乳中的脂肪 酸组成与通过遗传选择或仅通过富脂饲料得到的乳之脂肪酸组成不同。此外， 根据本发明 说 明 书 CN 103237442 A 4 2/9 页 5 的乳比具有 AK 或 KK 基因型之乳牛的乳或不

16、具有饲料添加剂之乳牛的乳更健康， 原因是与 获得于 AK 和 KK 乳牛的乳相比， 它包含更多的不饱和脂肪酸和更少的饱和脂肪酸。 0010 因此， 本发明涉及得到乳的方法， 其包括以下步骤 ： 0011 i) 用富含脂肪的饲料喂养具有 DGAT1 基因之 AA 基因型的乳牛， 和 0012 ii) 对乳牛进行挤乳。 0013 优选地， 所述乳牛属于荷斯坦 (Holstein) 或娟姗 (Jersey) 品种。更优选地， 所述 乳牛是荷斯坦黑白花乳牛(Holstein Friesian)。 在荷兰， 荷斯坦黑白花乳牛种群中A等位 基因的频率为 0.6 并且 K 等位基因的频率为 0.4， 这使得

17、基因型 AA、 AK 和 KK 的频率分别为 0.36、 0.48 和 0.16。可通过技术人员已知方法测定乳牛的基因型， 例如每种待检测等位基 因使用两种引物和两种探针的聚合酶链式反应 (Polymerase Chain Reaction， PCR)( 所谓 的 Taqman 测定 )。为此通常使用乳牛的血液。 0014 已知 AA 基因型乳牛比其他乳牛生产更多的乳。但是与 AK 和 KK 乳牛的乳相比， 该 乳具有更低含量的脂肪和蛋白质。对于农民， 这使得 AA 乳牛的乳出售的价值较小， 并且由 于体积较大而在运输方面也相对昂贵。相比之下， 得于 AK 和 KK 乳牛的乳包含相对多的脂 肪

18、和蛋白质， 并因此在以往具有更高价值。因此， 经常选择具有 K 等位基因的基因型用于乳 生产。但是根据本发明， 与其他乳牛的乳相比， AA 乳牛的乳可为人类消费者提供相当大的 健康优势。 0015 根据本发明， 用富含脂肪的饲料喂养 AA 乳牛。所述饲料一般包含基础粗饲料 (base roughage)和/或基础浓缩物(base concentrate)和富含脂肪的饲料添加剂。 所述 基础粗饲料可， 例如， 由玉米青贮饲料(maize silage)或牧草青贮饲料(grass silage)组 成， 也可同样地使用其他合适的基础组合物。牧草和玉米青贮饲料是荷兰乳牛冬季饲料的 典型组分。 所述基

19、础浓缩物可以是任何类型， 并且是通常干物质含量高于80wt.且粗脂肪 含量低于 10的常规饲料。 0016 饲料优选地富含脂肪， 这意指所述饲料包含多于 4wt.的脂肪， 通常包含 4 至 6wt.的脂肪。饲料中较高量的脂肪 ( 尤其是未经保护的油 (unprotected oil) 较不优 选， 原因是它们可导致乳牛的胃失调。 0017 饲料通常包含8至14wt.， 优选10至12wt.的饲料添加剂。 适用于本发明的饲 料添加剂通常包含 10 至 40wt.的脂肪， 优选地 20 至 30wt.的总干物质。所述添加剂优 选包含添加剂中总脂肪酸的 5 至 90wt.， 更优选 10 至 80w

20、t.的量的不饱和脂肪酸。优 选地， 存在于所述饲料添加剂中至少 20wt.， 更优选至少 30wt.的不饱和脂肪酸是 C18:3 顺式 9， 12， 15 脂肪酸。 0018 不饱和脂肪酸优选以甘油三酯的形式(例如， 作为脂肪或油)供应。 不饱和脂肪酸 的合适来源是包含至少 2wt.不饱和脂肪酸 ( 优选至少 5wt. ) 的油， 例如种子油 (seed oil)， 如下述的种子油 ： 亚麻籽、 油菜籽、 大豆、 核桃、 向日葵、 棉籽、 红花、 鼠尾草种子(clary sage seed)、 紫苏(perilla)、 芡欧鼠尾草(chia)和chemp。 鱼油(fish oil)、 海藻油(

21、algae oil)、 玉米油和花生油也是合适的。优选地， 使用亚麻籽油。合适的饲料添加剂是， 例如， EP1106077 中描述的 0019 一般来说， 饲料添加剂以每只乳牛每天 1.6 至 2kg 干物质 ( 通常约 1.8kg) 的量喂 养乳牛。虽然给出的添加剂的量取决于特定的乳牛、 使用的基础粗饲料和 / 或浓缩物等， 但 说 明 书 CN 103237442 A 5 3/9 页 6 是本领域技术人员能够确定饲料添加剂的合适量以实施本发明。 0020 还可保护饲料添加剂中的不饱和脂肪酸免受瘤胃的生物氢化作用， 使得这些不饱 和脂肪酸不被转化为反式脂肪酸。这些保护通常通过另外的化学处理来

22、实现， 因此是较不 期望的。 但是， 本发明的一个优点是添加剂中的不饱和脂肪不需要化学保护， 原因是根据本 发明也可实现低的反式脂肪酸含量。 0021 在另一方面， 本发明涉及包含脂肪酸的乳组合物， 所述组合物每 100g 总脂肪酸包 含 35 至 42g 不饱和脂肪酸， 0.7 至 8.0g C18:3顺式 9， 12， 15 脂肪酸和低于 3.5g 的反式脂肪 酸。优选地， 本发明的乳来源于泌乳动物， 尤其是乳畜， 例如乳牛。 0022 与正常乳相比， 得于 AA 乳牛的本发明之乳组合物的特征在于高含量的不饱和脂 肪酸。虽然反式脂肪酸的含量也提高， 但是与 AK 和 KK 乳牛中的乳相比，

23、 根据与不饱和脂肪 酸的比例其增加较少。这通过不饱和 / 反式比 (unsat/trans ratio)( 总不饱和脂肪酸与 总反式脂肪酸之比 ) 证实。不饱和 / 反式比优选地高于 12.2， 更优选地高于 13.0 并且甚至 更优选地高于 13.5， 例如高于 13.7。具有高不饱和 / 反式比的乳对人类健康有益， 因为它 与对于相同水平不饱和脂肪的较低反式脂肪酸摄入有关。因此， 当消费者摄取日推荐量的 不饱和脂肪酸 ( 特别是 C18:3) 时， 反式脂肪酸的摄入在 AA 乳牛乳的情况下远远低于其他乳 牛乳的情况。 0023 如上所述， 在普通乳牛的乳中， 多于 70wt.的脂肪酸是饱和

24、的， 因此低于 30wt.的脂肪酸是不饱和的。 本发明的乳组合物具有量低得多的饱和脂肪酸， 这对血脂质 量具有良好作用并且对胆固醇相关疾病和其他心血管疾病具有相应的积极作用。 乳中的饱 和脂肪酸在这里是C4:0+C5:0+C6:0+C7:0+C8:0+C9:0+C10:0+C11:0+C12:0+C13:0+C14:0+C14:0异+C15:0+C15:0异 +C15:0反 (ante) 异 +C16:0+C16:0异 +C17:0+C17:0异 +C17:0反异 +C18:0+C20:0的总和。 0024 在一个优选实施方案中， 每100g总脂肪酸中， 饱和脂肪酸的总量为55.0至64.0g

25、， 优选 56.0 至 62.0g， 更优选 57.0 至 60.0g。每 100g 总脂肪酸中， C12:0脂肪酸的含量为 1.8 至 3.4g， 优选 2.0 至 3.0g， 更优选 2.4 至 2.8g。每 100g 总脂肪酸中， C14:0脂肪酸的含量为 7.0 至 11.0g， 优选 8.0 至 9.5g。每 100g 总脂肪酸中， C16:0脂肪酸的含量为 18 至 28g， 更优 选 19 至 25g， 最优选 21 至 24g。 0025 C4:0(丁酸)是与抗致癌作用相关的脂肪酸， 每100g总脂肪酸中优选以3.0至4.3g 的量存在。 0026 多种脂肪酸可存在于本发明的乳

26、组合物中， 而既没有特别的有益作用也没有任何 副作用。以下脂肪酸属于这组脂肪酸 ： C6:0、 C8:0、 C10:0和 C18:0。 0027 不饱和脂肪酸是脂肪酸链中具有至少一个不饱和键的那些。具有一个不饱和键 的脂肪酸称为单不饱和脂肪酸 (mono-unsaturated fatty acid， MUFA)， 链中具有两个和更 多个不饱和键的那些称为多不饱和脂肪酸 (polyunsaturated fatty acid， PUFA)。在一个 优选实施方案中， 本发明的乳的特征在于， 每 100g 总脂肪酸中， 不饱和脂肪酸的总量高于 33g， 优选 35 至 42g， 更优选 37 至

27、41g。 0028 本发明的乳组合物的特征还在于高量的 -3 脂肪酸。所述 -3 脂肪酸特别地是 C18:3顺式 9， 12， 15(ALA)、 C20:5顺式 5， 8， 11， 14， 17(EPA)、 C22:5顺式 7， 10， 13， 16， 19(DPA) 和 C22:6顺式4， 7， 10， 13， 16， 19(DHA)。 优选地， 本发明的乳组合物包含C18:3顺式9， 12， 15(ALA)， 在每 100g 总脂肪酸中其量高于 0.6g， 优选 0.7g 至 8.0g， 更优选 0.78g 至 4.0g。 说 明 书 CN 103237442 A 6 4/9 页 7 00

28、29 术语 “-6 脂肪酸” 在这里表示 C18:2顺式 9， 12( 亚油酸 ) 和 C22:2顺式 13， 16。C18:2 顺式 9， 12 的含量在每 100g 总脂肪酸中优选为 1.0g 至 4.0g， 更优选 1.5g 至 2.5g。 0030 乳中 -6/-3 脂肪酸的比例不应该太高， 因为它可促进许多疾病 ( 包括心血管 疾病、 癌症、 炎性疾病和自身免疫病 ) 的发病。在一个优选实施方案中， 根据本发明的乳组 合物的 -6/-3 脂肪酸重量比低于 3.0， 优选低于 2.85， 更优选低于 2.7。 0031 在另一个优选实施方案中， 根据本发明的乳组合物包含共轭亚油酸 (C

29、LA ； C18:2反 式 11 顺式 9)， 在每 100g 总脂肪酸中优选地其量为 0.45g 至 8.0g， 优选 0.6g 至 4.0g， 更优 选 0.7g 至 3.0g。虽然 CLA 包含一个反式键， 但是在本申请中它不包含在反式脂肪酸量中。 已知 CLA 具有抗炎性和抗致癌作用。 0032 反式脂肪酸不被认为是特别健康的， 并且这些脂肪酸的含量应保持被限制。本说 明书和权利要求书中的术语 “总反式脂肪酸” 意指 C16:1反式 9+C18:1反式 (4+5+6+7+8)+C18:1 反式 9+C18:1反式 10+C18:1反式的总和。总反式脂肪酸优选低含量， 即在每 100g

30、总脂肪酸中 低于 4.0g， 优选在每 100g 总脂肪酸中低于 3.5g， 更优选低于 3g， 而最优选低于 2.9g。 0033 可使用常规气相色谱技术容易地确定乳中多种脂肪酸的特性和量。特别地， 本 发明人使用以下方法。从乳样品中提取乳脂肪。如 ISO 标准 15884(ISO-IDF2002b) 所述 由脂肪级分制备脂肪酸甲酯。使用 Varian Fame Select 柱 (100m0.25mm ID ； Varian Inc.)， 在 Trace GC Ultra 色 谱 仪 (Thermo Electron Corporation) 上 根 据 ISO 标 准 15885(ISO

31、-IDF2002a)分析甲酯。 最初温度在70下维持1分钟， 以3/分钟升高至225 并在 225下维持 5 分钟。注射体积为 1l。使用纯甲酯样品 (Sigma-Aldrich ； Larodan) 鉴定并定量每个峰。脂肪酸含量表示为总脂肪重量的一部分。 0034 除了改良的脂肪酸组成之外， AA 乳牛之乳的特征还在于降低的尿素含量。由表 2 可以看出， AA 乳牛的乳可包含 27.4mg 尿素 /100g 乳， 而 AK 乳牛和 KK 乳牛的乳可分别包含 29.1 和 31.9mg 尿素 /100g 乳。本发明的乳组合物优选包含 16.0 至 28.5mg 尿素 /100g 乳， 更优选

32、18.0 至 28.0mg 尿素 /100g 乳。 0035 由于用特定添加剂 ( 例如， 实施例中示范的 ) 喂养乳牛而得到的乳组合物因个体 乳牛而不同并且在季节期间变化。乳牛的健康状态、 泌乳期、 产次 (parity) 和遗传背景也 决定了脂肪酸组成。此外， 由除添加剂之外的饲料提供的脂肪酸的组成和量也取决于乳牛 饲料 ( 例如， 所述粗饲料或所述浓缩物 ) 中其他组分的脂肪酸组成和脂肪百分比。尤其是， 粗饲料的组成在季节期间有很大不同。 但是， 根据提供的信息， 本领域技术人员将能够制备 根据本发明的乳组合物。 0036 在另一方面， 本发明涉及选择乳牛用于以富脂饲料喂养的方法， 其通

33、过选择具有 基因 DGAT1 之 AA 基因型的乳牛来进行。 0037 在该方法的一个实施方案中， 在不知道基因型的情况下可预先测试乳牛以确定乳 牛的基因型， 并进一步选择具有 AA 基因型的乳牛用于以高脂添加剂喂养。这种选择可容易 地实施 ( 例如， 在自动送料系统 (automated feeding system) 或在挤奶机器人系统 (milk robot system) 中， 其中通过电子芯片鉴定并识别乳牛 )。仅向具有 AA 基因型的乳牛 ( 而 不是所有乳牛 ) 提供饲料添加剂还节约了成本， 因为饲料添加剂一般比常规饲料更昂贵。 0038 通过以下方法也可实践本发明 ： 用富脂饲

34、料喂养所有的乳牛， 然后挤乳， 从而收集 AA 乳牛的乳并分开储存。 说 明 书 CN 103237442 A 7 5/9 页 8 0039 在另一方面， 本发明涉及测试用于乳牛之饲料添加剂的方法， 其包括以下步骤 ： 0040 i) 选自至少一只具有基因 DGAT1 之 AA 基因型的乳牛， 0041 ii) 用待测试的饲料添加剂喂养步骤 i) 中选择的乳牛， 0042 iii) 对一只或更多只所述乳牛进行挤乳， 和 0043 iv) 分析乳的组成。 0044 根据本发明， 具有AA基因型的乳牛是用于测试多种饲料添加剂(尤其是富含脂肪 的那些 ) 的最佳选择。第一， 这些乳牛生产不饱和脂肪酸

35、含量较高的乳并因此对饲料添加 剂中存在的脂肪酸更敏感。第二， 与其中使用任何基因型之乳牛的测试结果相比， 仅对 AA 乳牛进行的测试结果更统计学均匀。因此， 为得到统计可信任的结果需要较小的群体。 0045 因此， 本发明还涉及乳牛畜群， 其中至少 60， 优选至少 80并且更优选至少 90的乳牛具有基因 DGAT1 之 AA 基因型。更优选地， 所述畜群仅由 AA 乳牛组成。畜群定 义为为了特定目的饲养在一起的单一种类的一组牲畜或其他家畜。为了本发明的目的， 所 述畜群包含至少 10 只乳牛， 喂养它们以得到它们所产的乳。如上所述， 在荷兰， 荷斯坦黑白 花乳牛的典型畜群的 AA 基因型频率

36、为约 36。根据本发明， 畜群中 AA 乳牛的频率可通过 选择而增加， 目的是得到主要为 AA 乳牛的畜群。优选地， 畜群中的乳牛属于荷斯坦或娟姗 品种。更优选地， 乳牛是荷斯坦黑白花乳牛。 0046 根据本发明来生产乳还具有减少由乳牛导致的甲烷排放的优点， 因为与其他基因 型的乳牛相比， AA 乳牛排放更少的甲烷。因此， 本发明在另一方面涉及一种减少甲烷排放 的方法， 其包括选择具有基因 DGAT1 之 AA 基因型的乳牛， 并喂养那些乳牛。当用富脂饲料 喂养乳牛时， 减少的甲烷排放尤其显著。 0047 以产生的每体积乳计算甲烷排放。认为 AA 乳牛的甲烷排放的减少部分地归因于 产生的相对更

37、大量的乳， 且部分地归因于乳的改良之脂肪酸组成。根据 WO2009/156453 中 描述的方法估算的甲烷排放对于 AA 基因型是 9.6g 甲烷 /1L 乳， 对于 AK 是 10.3g 甲烷 /1L 乳， 并且对于 KK 基因型为 11.6g 甲烷 /1L 乳。 0048 除了甲烷排放之外， 由乳牛导致的氨排放吸引了许多注意。氨排放的指标之一是 乳牛乳中的尿素含量。由表 2 可以看出， 与其他基因型的乳牛相比， AA 乳牛产生的乳具有 最低水平的尿素， 并因此排放更少的氨。因此， AA 乳牛还因较低的氨排放而比其他基因型 更为优选。因此， 本发明提出减少由乳牛导致的氨排放的方法， 其包括选

38、择具有基因 DGAT1 之 AA 基因型的乳牛， 并喂养那些乳牛。当用富脂饲料喂养乳牛时， 减少的氨排放尤其显著。 0049 在另一方面， 本发明涉及本发明的乳组合物用于制备基于乳的组合物的用途， 所 述基于乳的组合物例如乳酪、 酸乳、 奶油组合物、 甜点产品， 还包括由乳组分制备的组合物 ( 如乳粉、 乳清蛋白质、 乳脂 (milk fat) 等 )。此外， 本发明涉及使用乳组合物生产的产品 ( 例如， 基于或包含本发明之乳组合物 )。尤其是， 它涉及在最终产品中基本上保持其中乳 组合物的脂肪酸组成的产品。 这些产品， 例如， 适用于食物和饲料应用或适用于食物和饲料 添加剂。 0050 现将

39、通过以下非限制性实施例举例说明本发明。 0051 实施例 1( 比较 ) 0052 用具有根据表 1 的组成的标准配给量 (standard ration) 喂养 1762 只乳牛， 其中 644 只乳牛具有 DGAT1 的 AA 基因型， 829 只具有 AK 基因型， 289 只具有 KK 基因型。表 1 中 说 明 书 CN 103237442 A 8 6/9 页 9 的量以每天每只乳牛给出。饲料的脂肪百分比为约 3wt.。 0053 表 1 0054 配给量 牧草青贮饲料， kg 干物质4.66 玉米青贮饲料， kg 干物质9.40 小麦 (83干物质 )， kg 产品1.25 啤酒糟

40、 (25干物质 )， kg 干物质0.71 甜菜粕 (27干物质 )， kg 产品1.32 大豆 (48)(87 DM)， kg 产品2.44 LINEX(AVEVE)1(88干物质 )， kg 产品1 GLUCOLAC2(960/110/16)(88干物质 )， kg 产品1.6 矿物质 3(88干物质 )， kg 产品 0.27 0055 1 来自亚麻籽的浓缩物 0056 2 具有 960VEM、 110DVE、 14RE 的浓缩物 0057 3 商购产品 Rindavit71ASS-CO， 其包含 (wt. ) ： 39.6碳酸钙、 23.6氯化钠、 16.5磷酸钙钠、 13.7氧化镁、

41、 3糖蜜 (molasses)、 0.55硫酸铜、 1000000IU 维生素 A、 80000IU 维生素 D、 1350mg 铜、 100000g 生物素、 3000mg 维生素 E。 0058 如表 1 所述的常规饲料的脂肪百分比为约 3。 0059 表 2 示出从用如上所述标准饲料喂养的不同基因型乳牛得到的乳的组成。 0060 表 2 0061 说 明 书 CN 103237442 A 9 7/9 页 10 0062 对于总不饱和脂肪酸含量， 标准偏差在表 2 中的括号中给出。 0063 实施例 2 0064 用具有根据表 3 的组成的富含脂肪之配给量喂养 73 只乳牛， 其中 34

42、只乳牛为基 因 DGAT1 的 AA 基因型， 34 只为 AK 基因型， 5 只为 KK 基因型。表 3 中的量以每天每只乳牛 给出。饲料的脂肪百分比为 5.1wt.。 0065 表 3 说 明 书 CN 103237442 A 10 8/9 页 11 0066 0067 1 EP1106077 中描述的基于亚麻籽的可商购饲料添加剂。 0068 2 商购产品 Rindavit71ASS-CO， 其包含 (wt. ) ： 39.6碳酸钙、 23.6氯化钠、 16.5磷酸钙钠、 13.7氧化镁、 3糖蜜、 0.55硫酸铜、 1000000IU 维生素 A、 80000IU 维 生素 D、 135

43、0mg 铜、 100000g 生物素、 3000mg 维生素 E。 0069 表 4 示出从用如上所述的添加饲料喂养的不同基因型乳牛得到的乳的组成。 0070 表 4 0071 说 明 书 CN 103237442 A 11 9/9 页 12 0072 对于总不饱和脂肪酸含量， 标准偏差在表 4 中的括号中给出。对于 AA 乳牛， 在用 高脂添加剂的实验期间和用常规配给量喂养期间， 它与AK和KK组都显著不同(p0.05)。 另外， 当与用常规配给量喂养的结果相比时， 用脂肪添加剂喂养的具有 AA 基因型的乳牛示 出显著不同的结果 (p 0.05)。 0073 由表 4 可以看出， 与其他基因型的乳牛的乳相比， 具有 AA 基因型之乳牛的乳组成 具有降低的量的脂肪。与其他基因型相比， AA 乳牛的乳还具有较低含量的饱和酸。它还具 有显著增加的量的不饱和脂肪酸， 特别是 -3 脂肪酸 C18:3顺式 9， 12， 15。反式脂肪酸的含 量限制在低于每 100g 总脂肪酸 3g。此外， 相对于其他乳牛的乳， AA 乳包含较少的尿素。此 外， 可估计 AA 乳牛的甲烷排放低于其他乳牛的甲烷排放。 说 明 书 CN 103237442 A 12