一种治疗胃癌的药物组合物.pdf

1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201410628689.2 (22)申请日 2014.11.11 A61K 31/7048(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 1/00(2006.01) A61K 31/352(2006.01) A61K 31/365(2006.01) (71)申请人 济南星懿医药技术有限公司 地址 250101 山东省济南市济南高新区工业 南路 51 号 (72)发明人 孔倩倩 (54) 发明名称 一种治疗胃癌的药物组合物 (57) 摘要 本发明涉及一种治疗胃癌的药物组合物， 本 发明药物组合物是以穗花杉双黄酮、 蛇

2、鞭菊素、 酸 枣仁皂苷 A、 去甲基当药呫吨酮为原料药， 配比而 成， 可按常规制剂工艺制成各种剂型， 本发明所提 供的药物组合物对制备治疗胃癌药物具有重要意 义。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书5页 (10)申请公布号 CN 104473950 A (43)申请公布日 2015.04.01 CN 104473950 A 1/1 页 2 1.一种治疗胃癌的药物组合物， 其特征在于制成该药物组合物的原料药的组成和重量 份为 ： 穗花杉双黄酮 8-23 重量份 蛇鞭菊素 6-18 重量份 酸枣仁皂苷 A9-27 重量份 去

3、甲 基当药呫吨酮 25-50 重量份。 2.根据权利要求 1 所述 ： 一种治疗胃癌的药物组合物， 其特征在于制成该药物组合物 的原料药的组成和重量份为 ： 穗花杉双黄酮 8 重量份 蛇鞭菊素 18 重量份 酸枣仁皂苷 A9 重量份 去甲基当药呫吨 酮 50 重量份。 3.根据权利要求 1 所述 ： 一种治疗胃癌的药物组合物， 其特征在于制成该药物组合物 的原料药的组成和重量份为 ： 穗花杉双黄酮 23 重量份 蛇鞭菊素 6 重量份 酸枣仁皂苷 A27 重量份 去甲基当药呫 吨酮 25 重量份。 4.根据权利要求 1 所述 ： 一种治疗胃癌的药物组合物， 其特征在于制成该药物组合物 的原料药的

4、组成和重量份为 ： 穗花杉双黄酮 16 重量份 蛇鞭菊素 12 重量份 酸枣仁皂苷 A20 重量份 去甲基当药呫 吨酮 35 重量份。 5.根据权利要求 1 所述 ： 一种治疗胃癌的药物组合物， 其特征在于制成该药物组合物 的原料药的组成和重量份为 ： 穗花杉双黄酮 15 重量份 蛇鞭菊素 10 重量份 酸枣仁皂苷 A12 重量份 去甲基当药 呫吨酮 45 重量份。 6.根据权利要求 1 所述的一种治疗胃癌的药物组合物， 可以采用制剂学的常规方法制 备成片剂、 胶囊剂、 滴丸。 7.根据权利要求 1 所述的一种治疗胃癌的药物组合物， 其特征在于用于治疗胃癌。 权 利 要 求 书 CN 1044

5、73950 A 2 1/5 页 3 一种治疗胃癌的药物组合物 技术领域 0001 本发明属于医药领域， 涉及一种治疗胃癌的药物组合物。 背景技术 0002 胃癌是源自胃黏膜上皮的恶性肿瘤， 占全部恶性肿瘤的第 3 位， 占消化道恶性肿 瘤的首位， 占胃恶性肿瘤的95%。 可见胃癌是威胁人类健康的一种常见病。 恶性肿瘤胃癌起 源于胃壁最表层的粘膜上皮细胞， 可发生于胃的各个部位 （胃窦幽门区最多、 胃底贲门区次 之、 胃体部略少） ， 可侵犯胃壁的不同深度和广度。癌灶局限在粘膜内或粘膜下层的称为早 期胃癌， 侵犯肌层以深或有转移到胃以外区域者称为进展期胃癌。肉眼或胃镜观察胃癌有 多种形态， 如表

6、浅型、 肿块型、 溃疡型、 浸润型、 溃疡癌 （为慢性胃溃疡癌变） 。根据世界卫生 组织估计， 胃癌是全世界排名第四个最普遍被诊断的癌症， 而且是所有癌症死亡率排名第 二高， 被视为国际间重要的健康危机。在 2006 年统计中显示接近有 950,000 个案例发生， 而且大约将近 700,000 位病人死于这一种疾病。胃癌的高发生率包括东亚、 南美洲和东欧 国家。在台湾地区， 胃癌发生率尤其偏高， 每 100,000 人口约有 8.52 人至 9.68 人， 胃癌名 列 2006 年癌症死亡原因第 5 位， 约有 2500 人死于胃癌， 每 100,000 人口死亡率为 11.4% 。 胃癌也

7、是中国最常见的恶性肿瘤之一， 在中国其发病率居各类肿瘤的首位， 每年约有 17 万 人死于胃癌， 几乎接近全部恶性肿瘤死亡人数的 1/4， 且每年还有 2 万以上新的胃癌病人产 生出来， 胃癌确实是一种严重威胁人民身体健康的疾病。 0003 中医专家分析说， 中医理论认为虚证是肿瘤发生发展的重要原因和病机， 正气不 足， 气血虚弱， 导致脏腑功能失调， 因而出现气滞、 血瘀、 湿聚、 痰结等一系列病理变化， 最终 形成肿瘤， 胃癌亦是如此。因此， 胃癌的治疗， 应以扶正抑瘤为原则。专家指出， 中医对胃癌 的治疗先分清邪正虚实， 辨其邪正盛衰。早期大多以邪实为主， 治宜攻邪以辅正 ; 晚期大多

8、以正虚为主， 治以扶正祛邪 ; 由于胃癌病因病机错综复杂， 宜根据局部与整体的观点把辨 证论治与辨病治疗相结合， 扶正与抗癌治疗相结合的方法， 在改善胃癌患者症状， 延长生存 期等方面取得了可喜的疗效。如 ： 肝胃不和型方药， 胃癌主方合逍遥散加减 ； 脾胃虚寒型方 药， 胃癌主方 ； 胃热伤阴型方药， 麦门冬合胃癌主方减去炮附子、 补骨脂、 炮姜等温阳药物 ； 痰湿凝结型方药， 胃癌主方合二陈汤加减 ； 瘀毒内阻型方药， 胃癌主方合膈下逐瘀汤加减 ； 气血双亏型方药， 胃癌主方合八珍汤加减。 以上 6 型之间是相互关联的， 各个证型亦不一 定典型地出现。随着胃癌病情的发展， 证型亦随之变化，

9、 临床上应根据病情变化辨证论治。 0004 穗花杉双黄酮 （amentoflavone） ： CAS 号 1617-53-4 ， 分子式 C30H18O10， 分子量 538.46 ， 抗真菌 ( 烟曲霉菌 , 灰葡萄孢和粉绿木霉菌 ) ； 核苷酸二磷酸酶抑制剂。 0005 蛇鞭菊素 （liatrin） ： CAS 号 34175-79-6， 分子式 C22H26O8， 分子量 418.43704。具有 抑制癌细胞作用。 0006 酸枣仁皂苷 A（jujuboside A） : CAS 号 55466-04-1， 分子式 C58H94O26， 分子量 1207.35， 物理化学性质 ： 密度

10、1.50， 熔点 222-225 C。 0007 去甲基当药呫吨酮 （norswertianin） ： 分子式 C13H8O6， CAS 号 22172-15-2， 分子量 说 明 书 CN 104473950 A 3 2/5 页 4 260.20。 0008 本发明药物组合物的 4 种药物结构如下 ： 穗花杉双黄酮 （amentoflavone） 蛇鞭菊素 （liatrin） 酸枣仁皂苷 A（jujuboside A） 去甲基当药呫吨酮 （norswertianin） 。 发明内容 0009 本发明的目的是克服背景技术的不足， 提供一种治疗胃癌的药物组合物。 0010 本发明是通过如下技术方

11、案实现的 ： 本发明的一种治疗胃癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为 ： 穗花杉双黄酮 8-23 重量份 蛇鞭菊素 6-18 重量份 酸枣仁皂苷 A9-27 重量份 去甲 说 明 书 CN 104473950 A 4 3/5 页 5 基当药呫吨酮 25-50 重量份。 0011 本发明的一种治疗胃癌的药物组合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂、 胶 囊剂、 滴丸。 0012 本发明的一种治疗胃癌的药物组合物， 其特征在于用于治疗胃癌。 0013 本发明药物组合物能够抑制人胃癌细胞 (BGC823) 的增殖， MTT 法显示本发明药物 组合物对人胃癌细胞 (BGC823) 的抑制作用呈时间和

12、剂量依赖关系， 即随着本发明药物组 合物浓度的增加， 抑制率逐渐增加 ； 同时随着作用时间的延长， 抑制率相应增加。电子显微 镜超微结构观察， 进一步证实本发明药物组合物对体外培养的人胃癌细 (BGC823) 有抑制 和诱导凋亡的作用。用本发明药物组合物处理后的人胃癌细胞 (BGC823) 出现染色质浓缩， 边集， 核固缩， 线粒体肿胀， 空泡样变， 胞浆出现大量空泡。 由此可见本发明药物组合物可能 是通过诱导肿瘤细胞凋亡而达到抑制其增殖的目的。 具体实施方式 0014 下面通过具体实验例和实施例对本发明的一种治疗胃癌的药物组合物做进一步 说明， 但不限于本发明。 0015 实施例 1 ： 治

13、疗胃癌的药物组合物 治疗胃癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为 ： 穗花杉双黄酮 8 重量份 蛇鞭菊素 18 重量份 酸枣仁皂苷 A9 重量份 去甲基当药呫吨 酮 50 重量份。 0016 实施例 2 ： 治疗胃癌的药物组合物 治疗胃癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为 ： 穗花杉双黄酮 23 重量份 蛇鞭菊素 6 重量份 酸枣仁皂苷 A27 重量份 去甲基当药呫 吨酮 25 重量份。 0017 实施例 3 ： 治疗胃癌的药物组合物 治疗胃癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为 ： 穗花杉双黄酮 16 重量份 蛇鞭菊素 12 重量份 酸枣仁皂苷 A20 重量份 去甲基当药呫 吨酮 35 重

14、量份。 0018 实施例 1 ： 治疗胃癌的药物组合物 治疗胃癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为 ： 穗花杉双黄酮 15 重量份 蛇鞭菊素 10 重量份 酸枣仁皂苷 A12 重量份 去甲基当药 呫吨酮 45 重量份。 0019 实施例 5 ： 片剂的制备 取实施例 1 组合物 150g， 加入淀粉 75g， 混匀， 制粒， 干燥， 加微晶纤维素 20g， 硬脂酸镁 2.5g， 混匀， 压制成 1000 片 , 即得本发明组合物片剂。 0020 实施例 6 ： 胶囊的制备 取实施例 2 组合物 165g， 加入淀粉 65g， 混匀， 制粒， 干燥， 整粒， 加入适量硬脂酸镁， 混 匀， 装胶

15、囊 1000 粒， 即得本发明组合物胶囊。 0021 实施例 7 ： 滴丸的制备 称取聚乙二醇 6000 200g 水浴 (80 ) 加热煮熔， 加入实施例 3 组合物 50g， 充分 说 明 书 CN 104473950 A 5 4/5 页 6 搅拌均匀， 以液体石蜡为冷却剂， 置玻璃管 （4*80cm） 中， 冷却温度为 10， 滴口内外径为 7.0/2.0(mm/mm)， 滴口距液面为 2cm， 滴速以每分 50 滴为最佳条件， 用棉布吸干滴丸表面的 冷凝剂， 即得本发明组合物滴丸。 0022 实验例 1 ： 药物组合物诱导人胃癌 BGC823 细胞凋亡试验 1. 材料与方法 人胃癌细胞

16、系 ： 人胃癌细胞株(BGC823)由河北北方学院药理教研室提供， 我公司实验 中心细胞室保存。 0023 主要试剂 ： RPMI1640 培养液、 胎牛血清为杭州四季青公司产品 ； 二甲基亚砜 (DMSO) 为 BBI 公司产品 ； MTT 为 sigma 公司产品 ； Annexin V 细胞凋亡试剂 ( 北京宝赛公 司 )。 0024 主要仪器 ： 美国 SHELLAB2300 型 CO2细胞培养箱 ； 日本 Nikon 倒置相差显微镜 ； 美 国 FACScan 流式细胞仪等。 0025 药品 ： 本发明实施例 3 制备的药物组合物， 调浓度为 10 mg/mL， 4保存。 0026

17、细胞培养 : 人胃癌肿瘤细胞株 (BGC823) 培养在 RPMI1640 培养液 ( 含 10-20 ) 胎牛血清， 青霉素和链霉素各 100U/mL 及 0.03 谷氨酰胺 ) 中， 置 37饱和湿度、 5%CO2的培 养箱中， 隔日换液， 待细胞进入对数生长期后， 贴壁细胞弃去上清， 磷酸盐缓冲液冲洗 2 遍， 用 0.25% 的胰蛋白酶消化细胞 ( 悬浮生长的细胞直接收集 )， 再用磷酸盐缓冲液冲洗 2 遍， 并用 RPMI1640 完全培养基调整浓度为 1105个 /mL 的细胞悬液实验时备用。 0027 药物组合物对人胃癌细胞 BGC823 细胞增殖的影响 ： 将肿瘤细胞株悬液接种

18、于 96 孔培养板 ( 美国 Costar 公司产品 )， 每孔 100l( 含 1104个细胞 )， 分别加入阴性对 照剂 (50 % 乙醇 ) 和阳性对照顺铂 (DDP， 200g/mL) 以及不同浓度药物组合物提取液各 101， 每组均设 3 个复孔。置于饱和湿度、 37、 5%CO2培养箱中培养 72 h， 于培养结束前 4h， 各培养孔加入5 mg/mL 四氮唑蓝(MTT)10l， 培养结束后， 离心弃去上清， 每孔加入15% SDS1001， 过夜。次日用酶联免疫检测仪检测各孔吸光度 (OD) 值， 测定波长 =570 nm， 参考波长 =630 nm， 并计算抑制率。计算公式为

19、： 抑制率 ( %)=( 对照组 OD 值 - 实验组 OD 值 ) 对照组 OD 值。 0028 药物组合物对人胃癌细胞 (BGC823) 超微结构的观察 ： 取胃癌细胞 (1105个细胞 /mL)5mL， 接种到 50mL 培养瓶中， 加入终浓度分别为 10、 1 和 0.1umoL 的药物组合物。收集 与药物组合物共同温育 24h 和 48h 的 BGC823 细胞， 1000rpm 离心， 弃上清， 4戊二醛固定 ； 制备电镜标本， 透射电镜观察细胞超微结构的变化。 0029 统计学方法 ： 应用 SPSS13.0 软件进行数据处理。所得数据以表示， 采用 t 检验或 单因素方差分析。

20、以 P 0.05 为有统计学差异。 0030 2. 结果 药物组合物对 BGC823 细胞增殖的影响 ： 结果如表 1 所示。与对照组比较， 本发明药物 组合物对 BGC823 有抑制作用， 并有良好量效关系。对本发明药物组合物敏感的最低有效浓 度是 15g/mL ； IC50是 58g/mL。 0031 表 1 本发明药物组合物对 BGC823 增殖的抑制作用 OD 值抑制率 组别剂量 （g/mL）OD 值 (Xs)抑制率 (%) 阴性对照组-1.8020.031 顺铂对照组2000.3290.02881.74 说 明 书 CN 104473950 A 6 5/5 页 7 药物组合物4800

21、.4320.04776.03 药物组合物2400.5710.03868.31 药物组合物1200.7130.02060.43 药物组合物600.8670.02951.89 药物组合物301.1880.04234.07 药物组合物151.4180.03420.75 IC50(g/mL) 58 注 ： 与阴性对照组比较， P0.01 本发明药物组合物对 BGC823 细胞超微结构的影响 ： 电子显微镜观察细胞超微结构， 进 一步证实本发明药物组合物对体外培养的 BGC823 细胞的增殖有抑制和诱导凋亡的作用。 用本发明药物组合物处理后的 BGC823 细胞出现核染色质浓缩， 边集， 核固缩， 线粒

22、体肿胀， 空泡样变， 胞浆出现大量空泡。 0032 在我们的实验中， 采用 BGC823 肿瘤细胞为研究对象， 以促进胃癌细胞凋亡为作用 靶点， 应用 MTT 法和电子显微镜技术观察本发明药物组合物对 BGC823 胃癌细胞的作用。发 现本发明药物组合物能够抑制人胃癌细胞 (BGC823) 的增殖， MTT 法显示本发明药物组合物 对人胃癌细胞 (BGC823) 的抑制作用呈时间和剂量依赖关系， 即随着本发明药物组合物浓 度的增加， 抑制率逐渐增加 ； 同时随着作用时间的延长， 抑制率相应增加。电子显微镜超微 结构观察， 进一步证实本发明药物组合物对体外培养的人胃癌细 (BGC823) 有抑制和诱导 凋亡的作用。用本发明药物组合物处理后的人胃癌细胞 (BGC823) 出现染色质浓缩， 边集， 核固缩， 线粒体肿胀， 空泡样变， 胞浆出现大量空泡。由此可见本发明药物组合物可能是通 过诱导肿瘤细胞凋亡而达到抑制其增殖的目的。 说 明 书 CN 104473950 A 7