一种从银杏叶中提取黄酮类化合物的方法.pdf

1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710719630.8 (22)申请日 2017.08.21 (71)申请人 信阳师范学院 地址 464000 河南省信阳市浉河区南湖路 237号 (72)发明人 马稳 (74)专利代理机构 北京中政联科专利代理事务 所(普通合伙) 11489 代理人 曹军 (51)Int.Cl. A61K 36/16(2006.01) (54)发明名称 一种从银杏叶中提取黄酮类化合物的方法 (57)摘要 本发明公开了一种从银杏叶中提取黄酮类 化合物的方法， 包括以下步骤： 干燥与粉碎：

2、取银 杏叶洗净、 晾干， 放在干燥箱中干燥至恒重， 取出 干燥后的银杏叶粉碎、 过筛密封保存； 回流： 取银 杏叶于圆底烧瓶中， 加入乙醇， 放在80-85的恒 温水浴锅中回流1-2h； 抽滤： 用真空泵抽滤经回 流的液体； 蒸馏： 抽滤的液体在80-85的恒温水 浴下进行蒸馏； 蒸发： 将蒸馏后溶液倒入蒸发皿 中进行蒸发； 干燥： 将蒸发皿移至干燥箱中， 温度 设置为45度， 干燥至恒重， 即得黄酮类化合物 粉末。 本发明简单高效的实现了从银杏叶中提取 黄酮类化合物。 权利要求书1页 说明书3页 附图1页 CN 107456469 A 2017.12.12 CN 107456469 A 1.

3、一种从银杏叶中提取黄酮类化合物的方法， 包括以下步骤： 1)干燥与粉碎： 取银杏叶洗净、 晾干， 放在干燥箱中干燥至恒重， 取出干燥后的银杏叶 粉碎、 过筛密封保存； 2)回流： 取银杏叶于圆底烧瓶中， 加入乙醇， 放在80-85的恒温水浴锅中回流1-2h； 3)抽滤： 用真空泵抽滤经回流的液体； 4)蒸馏： 抽滤的液体在80-85的恒温水浴下进行蒸馏； 5)蒸发： 将蒸馏后溶液倒入蒸发皿中进行蒸发； 6)干燥： 将蒸发皿移至干燥箱中， 温度设置为45， 干燥至恒重， 即得黄酮类化合物粉 末。 2.如权利要求1所述的从银杏叶中提取黄酮类化合物的方法， 其特征在于， 所述步骤1) 中干燥具体为4

4、5-55干燥5-7h。 3.如权利要求2所述的从银杏叶中提取黄酮类化合物的方法， 其特征在于， 所述步骤1) 中干燥具体为50干燥6h。 4.如权利要求1所述的从银杏叶中提取黄酮类化合物的方法， 其特征在于， 所述步骤2) 中， 乙醇浓度为75。 5.如权利要求1所述的从银杏叶中提取黄酮类化合物的方法， 其特征在于， 所述步骤6) 中， 干燥箱的温度设置为45。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 107456469 A 2 一种从银杏叶中提取黄酮类化合物的方法 技术领域 0001 本发明属于化学领域， 特别是， 涉及一种从银杏叶中提取黄酮类化合物的方法。 背景技术 0002 黄酮类化合

5、物(Flavonoids)又称黄酮体、 黄碱素， 是一类重要的次生代谢产物， 它 存在于诸多植物组织中， 是自然界药用植物的主要药用活性。 由于黄铜类化合物具有抗动 脉粥样硬化、 抗血小板凝聚、 降血糖、 抗氧化等作用， 近几十年来一直成为国内外研究的热 点话题。 银杏叶作为药食两用的物质， 如何提取黄酮类化合物， 用于研究其怎样影响人体的 正常生理功能的， 这对于未来人们的身体保健， 预防疾病等具有十分重要的意义。 发明内容 0003 为了克服现有技术的不足， 本发明的目的在于提供一种从银杏叶中提取黄酮类化 合物的方法， 其简单高效的实现了从银杏叶中提取黄酮类化合物。 0004 为解决上述问

6、题， 本发明所采用的技术方案如下： 0005 一种从银杏叶中提取黄酮类化合物的方法， 包括以下步骤： 0006 1)干燥与粉碎： 取银杏叶洗净、 晾干， 放在干燥箱中干燥至恒重， 取出干燥后的银 杏叶粉碎、 过筛密封保存； 0007 2)回流： 取银杏叶于圆底烧瓶中， 加入乙醇， 放在80-85的恒温水浴锅中回流1- 2h； 0008 3)抽滤： 用真空泵抽滤经回流的液体； 0009 4)蒸馏： 抽滤的液体在80-85的恒温水浴下进行蒸馏； 0010 5)蒸发： 将蒸馏后溶液倒入蒸发皿中进行蒸发； 0011 6)干燥： 将蒸发皿移至干燥箱中， 温度设置为45度， 干燥至恒重， 即得黄酮类化 合

7、物粉末。 0012 进一步的， 所述步骤1)中干燥具体为45-55干燥5-7h。 0013 进一步的， 所述步骤1)中干燥具体为50干燥6h。 0014 进一步的， 所述步骤2)中， 乙醇浓度为75。 0015 进一步的， 所述步骤6)中， 干燥箱的温度设置为45。 0016 相比现有技术， 本发明的有益效果在于： 本发明采用干燥与粉碎、 回流、 抽滤、 蒸 馏、 蒸发和干燥一系列方法， 简单高效的实现了从银杏叶中提取黄酮类化合物， 便于用于研 究其怎样影响人体的正常生理功能的， 对于未来人们的身体保健， 预防疾病等具有十分重 要的意义。 附图说明 0017 图1为测荧光光谱测试结果； 001

8、8 图2为步荧光光谱测试结果； 说 明 书 1/3 页 3 CN 107456469 A 3 具体实施方式 0019 下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细说明。 0020 本发明公开了一种从银杏叶中提取黄酮类化合物的方法， 包括以下步骤： 0021 1)干燥与粉碎： 取银杏叶洗净、 晾干， 放在干燥箱中干燥至恒重， 取出干燥后的银 杏叶粉碎、 过筛密封保存； 0022 2)回流： 取银杏叶于圆底烧瓶中， 加入乙醇， 放在80-85的恒温水浴锅中回流1- 2h； 0023 3)抽滤： 用真空泵抽滤经回流的液体； 0024 4)蒸馏： 抽滤的液体在80-85的恒温水浴下进行蒸馏； 0025 5

9、)蒸发： 将蒸馏后溶液倒入蒸发皿中进行蒸发； 0026 6)干燥： 将蒸发皿移至干燥箱中， 温度设置为45， 干燥至恒重， 即得黄酮类化合 物粉末。 0027 进一步的， 所述步骤1)中干燥具体为45-55干燥5-7h。 0028 进一步的， 所述步骤1)中干燥具体为50干燥6h。 0029 进一步的， 所述步骤2)中， 乙醇浓度为75。 0030 进一步的， 所述步骤6)中， 干燥箱的温度设置为45。 0031 实施例1 0032 从银杏叶中提取黄酮类化合物 0033 干燥与粉碎取银杏叶若许， 洗净、 晾干， 放在干燥箱中50干燥6h至恒重， 取出 干燥后的银杏叶粉碎、 过筛密封保存。 00

10、34 回流取5g银杏叶于圆底烧瓶中加入浓度为75的乙醇， 放在80的恒温水浴锅 中回流1.5h。 0035 抽滤用真空泵抽滤经回流的液体。 0036 蒸馏抽滤的液体在80恒温水浴下进行蒸馏。 0037 蒸发将蒸馏后溶液倒入蒸发皿中蒸发， 待溶液蒸发至剩余8ml左右。 0038 干燥将蒸发皿移至干燥箱中， 温度设置为45， 干燥至恒重， 得到黄酮类化合物 粉末。 0039 实施例2 0040 黄酮类化合物对牛血清白蛋白的影响 0041 准确称取0.4092g黄酮类化合物配置成溶液， 定容与250ml容量瓶中， 备用。 0042 2.1测荧光光谱测试： 0043 移取2ml BSA溶液于比色管中，

11、 用移液枪移取配置好的黄酮类化合物溶液(ml)为： 0、 0.090、 0.100、 0.125、 0.250、 0.375、 0.500、 0.750、 0.875、 1.000、 1.250、 1.300、 1.500、 2.000于比色管中， 加入缓冲溶液并定容至10ml， 分别在25和37下恒温、 静置5min。 设置 激发波长为280nm， 发射波长为290-450nm， 激发和发射狭缝为2.5nm、 5nm测不同温度下溶液 的荧光发射光谱， 获得如图1所示图谱。 0044 2.2同步荧光光谱测试 0045 移取2ml BSA溶液于比色管中， 并用移液枪移取配置好的黄酮类化合物溶液(

12、ml) 说 明 书 2/3 页 4 CN 107456469 A 4 为： 0、 0.100、 0.125、 0.250、 0.375、 0.500、 0.750、 1.000、 1.250、 1.300、 1.500、 2.000于比色 管中， 加入缓冲溶液并定容至10ml， 在37下恒温、 静置5min分别固定激发和发射波长差为 20nm、 60nm测定不同浓度的黄酮类化合物和BSA作用后酪氨酸残基、 色氨酸残基溶液的同步 荧光光谱， 获得如图2所示图谱。 0046 结合图1可知， T298K时， 1到11号黄酮类化合物的浓度/10-4mol/L： 0、 0.100、 0.125、 0.2

13、50、 0.375、 0.750、 1.000、 1.250、 1.300、 1.750、 2.000.黄酮类化合物对BSA荧光的 猝灭光谱。 结合图2可知， T310K时， 1到12号黄酮类化合物的浓度/10-4mol/L： 0、 0.100、 0.125、 0.250、 0.375、 0.500、 0.750、 1.000、 1.250、 1.300、 1.500、 2.000.黄酮类化合物对BSA 荧光的猝灭光谱。 0047 以上表明， 黄酮类化合物具有清除自由基、 抗菌、 抗病毒等作用， 牛血清白蛋白具 有内源荧光性， 主要是来自色氨酸、 酪氨酸和苯丙氨酸的残基， 因此固定BSA溶液的

14、量， 改变 黄酮类化合物溶液的量， 测得发射峰的形状大致不变， 但随着黄酮类化合物的增多， BSA的 荧光发射峰的峰值逐步降低， 直至猝灭。 0048 本发明采用干燥与粉碎、 回流、 抽滤、 蒸馏、 蒸发和干燥一系列方法， 简单高效的实 现了从银杏叶中提取黄酮类化合物， 便于用于研究其怎样影响人体的正常生理功能的， 对 于未来人们的身体保健， 预防疾病等具有十分重要的意义。 0049 对本领域的技术人员来说， 可根据以上描述的技术方案以及构思， 做出其它各种 相应的改变以及形变， 而所有的这些改变以及形变都应该属于本发明权利要求的保护范围 之内。 说 明 书 3/3 页 5 CN 107456469 A 5 图1 图2 说 明 书 附 图 1/1 页 6 CN 107456469 A 6