含有卡拉胶的水性抗菌组合物.pdf

1、(10)申请公布号 CN 102665677 A (43)申请公布日 2012.09.12 CN 102665677 A *CN102665677A* (21)申请号 201080055037.4 (22)申请日 2010.10.04 12/587,405 2009.10.06 US A61K 9/00(2006.01) A61K 9/08(2006.01) A61K 47/36(2006.01) A61K 31/7072(2006.01) A61K 33/00(2006.01) (71)申请人 人口委员会股份有限公司 地址 美国纽约州 (72)发明人 罗宾A麦圭尔 米切尔索恩 大卫M菲利普斯

2、 内奥米鲁滕贝格 (74)专利代理机构 珠海智专专利商标代理有限 公司 44262 代理人 段淑华 刘曾剑 (54) 发明名称 含有卡拉胶的水性抗菌组合物 (57) 摘要 本发明揭示了用于抑制性传播感染传染的组 合物， 该组合物包含一种或更多种阴离子杀菌剂、 水溶性金属盐和特定的包括NNRTI类和NRTI类的 抗逆转录病毒剂， 阴离子杀菌剂如包括 型卡拉 胶的卡拉胶组。本发明还揭示了制造和利用该组 合物的方法。 (30)优先权数据 (85)PCT申请进入国家阶段日 2012.06.04 (86)PCT申请的申请数据 PCT/US2010/051303 2010.10.04 (87)PCT申请的

3、公布数据 WO2011/044034 EN 2011.04.14 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 25 页 附图 6 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 25 页 附图 6 页 1/1 页 2 1. 一种水性抗菌组合物， 包括有效量的包含卡拉胶群组的抗菌剂、 生理上可接受的水 溶性金属盐和从非核苷逆转录酶抑制剂与核苷逆转录酶抑制剂组成的群组中选择的一种 抗逆转录病毒剂， 所述卡拉胶群组中 型卡拉胶占所述卡拉胶群组干重的至少约 50%， 所 述卡拉胶群组的其余成分中至少有一种非 型卡拉胶。 2. 根据权利要求 1 所述的

4、抗菌组合物， 包括一种生理上可接受的 pH 值控制剂。 3. 根据权利要求 1 所述的抗菌组合物， 包括一种生理上可接受的防腐剂。 4. 根据权利要求 2 所述的抗菌组合物， 其中所述生理上可接受的 pH 值控制剂从醋酸 缓冲剂、 柠檬酸缓冲剂和乳酸缓冲剂组成的群组中选择。 5. 根据权利要求 4 所述的抗菌组合物， 其中所述醋酸缓冲剂包括醋酸和醋酸钠的混 合物。 6. 根据权利要求 4 所述的抗菌组合物， 其中所述柠檬酸缓冲剂包括柠檬酸和柠檬酸 钠的混合物。 7. 根据权利要求 4 所述的抗菌组合物， 其中所述乳酸缓冲剂包括乳酸和乳酸钠的混 合物。 8. 根据权利要求 3 所述的抗菌组合物，

5、 其中所述生理上可接受的防腐剂包括羟基苯 甲酸甲酯。 9. 根据权利要求 1 所述的抗菌组合物， 其中所述抗逆转录病毒剂包括非核苷逆转录 酶抑制剂。 10. 根据权利要求 9 所述的抗菌组合物， 其中所述非核苷逆转录酶抑制剂包括 MIV-150。 11. 根据权利要求10所述的抗菌组合物， 其中所述MIV-150存在的量从约5 mM至5000 mM。 12. 根据权利要求 11 所述的抗菌组合物， 其中所述 MIV-150 存在的量从约 20 mM 至 250 mM。 13. 根据权利要求 1 所述的抗菌组合物， 其中所述抗菌剂的所述有效量为所述组合物 总重量的约 1% 至约 5%。 14.

6、根据权利要求 13 所述的抗菌组合物， 其中所述抗菌剂的所述有效量为所述组合 物总重量的约 3%。 15. 根据权利要求 1 所述的抗菌组合物， 具有的 pH 值为约 3.5 至约 8.5。 16. 根据权利要求 15 所述的抗菌组合物， 其中该 pH 值为约 6.8 至约 7.2。 17. 根据权利要求 1 所述的抗菌组合物， 其中所述金属为锌、 铜或硫。 18. 根据权利要求 17 所述的抗菌组合物， 其中所述金属盐为醋酸锌。 19. 根据权利要求 17 所述的抗菌组合物， 其中所述金属盐为乳酸锌。 20. 根据权利要求 1 所述的抗菌组合物， 其中所述金属盐存在的量为， 在所述组合物 总

7、重量基础上为从约 0.03% 至约 1.5%。 21. 根据权利要求 20 所述的抗菌组合物， 其中所述金属盐存在的量为， 在所述组合物 总重量基础上为从约 0.3% 至约 1.0%。 权 利 要 求 书 CN 102665677 A 2 1/25 页 3 含有卡拉胶的水性抗菌组合物 0001 相关申请的交叉引用 本申请要求申请序列号为 12/587,405、 申请日为 2009 年 10 月 6 日、 名称为抗菌组合 物的独特组合的利益 ； 申请序列号为 12/587,405 的申请是申请号为 10/977,001、 申请日 为 2004 年 10 月 29 日的美国专利申请的部分继续申请

8、； 申请号为 10/977,001 的申请是国 际申请号为 PCT/US03/13456、 申请日为 2003 年 4 月 30 日的国际申请的继续申请 ； 国际申 请号为 PCT/US03/13456 的国际申请要求美国临时专利申请号为 No. 60/376,400、 申请日 为 2002 年 4 月 30 日的申请与美国临时专利申请号为 No. 60/377,050、 申请日为 2002 年 5 月 1 日的申请的申请日之利益， 以上申请所公开的内容通过参考而纳入本文。 背景技术 0002 卡拉胶群组为从俗称海藻的红藻中提取的多聚糖。它们是海藻的结构组成部分， 可被提取为三种主要类型的卡拉

9、胶， 分别为 型、 型、 型， 此外还有其他的类型如 -II 型、 M 型、 N 型。卡拉胶群组作为增稠剂、 胶凝剂及稳定与分散剂在食品、 制药及化妆 品工业中具有广泛地应用。 大量的药理学和毒理学的研究已进行。 卡拉胶被发现通过口腔、 皮肤及系统给药吸入途径获取即使非常高的剂量也没有毒性。因此 FDA（食品及药物管理 局） 在 1972 年把卡拉胶群组分在 “一般安全” （GRAS） 类别内 2。进一步地， 大量的在猪、 小 鼠、 沙鼠、 豚鼠、 雪貂、 仓鼠、 狗及猴上进行的口服药物动力学研究 3-11 显示， 卡拉胶群组在胃 肠道中的分解充其量是极小的且几乎完全不被吸收。 0003 国际

10、专利申请 WO 94/15624 指出了应用硫酸多糖 （sulfated polysaccarides） 如 型卡拉胶 （iota carrageenan） 、 硫酸葡聚糖 （dextran sulfate） 、 型卡拉胶 （kappa carrageenan） 、 型 卡 拉 胶 （lambda carrageenan） 、 模 拟 肝 素 （heparin mimetics） 、 硫酸肝素 （heparin sulfate） 、 戊聚糖多硫酸酯 （pentosan polysulfate） 、 硫酸软骨素 （chondrotin sulfate） 、 硫酸香菇多糖 （lentinan su

11、lfate） 、 硫酸凝胶多糖 （curdlan sulfate） 、 去氮硫酸肝素 （de-N-sulfated heparin）和褐藻糖胶 （fucoidan）等， 以抑 制 HIV 的细胞间传递， 进而抑制获得性免疫缺损综合症 （Acquired Immune Deficiency Syndrome） （AIDS） 以及衣原体生物疾病的性接触传染。该申请指出在活体内及活体外防止 HIV 感染和阻止衣原体感染方面， 型卡拉胶 （iota carrageenan） 在市售的硫酸卡拉胶群 组 （sulfated carrageenans） 中是最有效的。 发明概要 0004 申请人发现特定的卡

12、拉胶或各种卡拉胶的混合物或结合物具有特定的物理和化 学性质， 当它们配制为用于阴道给药时， 它们能提供长期的抗菌作用并抑制或降低性传播 感染 （STI） 的传染可能性。 0005 因此， 本发明的第一方面针对一种水性抗菌组合物， 该组合物包括有效量的含 有卡拉胶群组 （本文指的是 “卡拉胶群组”或一种 “卡拉胶混合物” ）的抗菌剂和生理上 可接受的 PH 值控制剂， 其中 型卡拉胶 （lambda carrageenan）至少为所述卡拉胶群 说 明 书 CN 102665677 A 3 2/25 页 4 组干重的约 50%， 所述卡拉胶群组的其余成分为至少一种的非 型卡拉胶 （non-lamb

13、da carrageenan） 。为了本发明的目的， 术语 “抗菌” 指的是包含抗菌和 / 或抗病毒的活性。 0006 本发明的一个相关方面针对一种抑制性传播感染 （STI） 的组合物， 该组合物包括 有效量的含有卡拉胶群组的抗菌剂和生理上可接受的 PH 值控制剂， 其中 型卡拉胶至少 占所述卡拉胶群组干重的约 50%， 所述卡拉胶群组的其余成分为至少一种的非 型卡拉 胶。 0007 该组合物可进一步包括另一种抗菌剂和 / 或一种阴道给药的药物， 在这种情况下 卡拉胶的成分可为只有 型卡拉胶， 而没有任何非 型卡拉胶。附加剂可与卡拉胶群组 混合和 / 或以一种复合物的方式与卡拉胶群组结合。相对

14、应地， 本发明的进一步的方面针 对水性抗菌组合物， 包括 ：（a） 生理上可接受的 PH 值控制剂 ；（b） 有效量的抗菌剂， 该抗菌 剂包括一种含有 型卡拉胶或卡拉胶群组和一种抗菌的生理上可接受的水溶性阳离子金 属盐的复合物， 其中该卡拉胶群组中 型卡拉胶至少为所述卡拉胶群组干重的约 50%， 其 余成分为至少的一种非 型卡拉胶。 0008 本发明进一步的方面针对一种水性抗菌组合物， 包括 ：（a） 生理上可接受的 PH 值 控制剂 ；（b） 有效量的抗菌剂， 该抗菌剂包括一种含有 型卡拉胶或卡拉胶群组的复合物， 其中该卡拉胶群组中 型卡拉胶至少为所述卡拉胶群组干重的约 50%， 其余成分为

15、至少的 一种非 型卡拉胶 ； 以及 （c） 木质素磺酸 （lignosulfonic acid） 。 0009 本发明进一步的方面针对一种水性抗菌组合物， 包括 ：（a） 生理上可接受的 PH 值 控制剂 ；（b） 有效量的抗菌剂， 该抗菌剂包括一种含有 型卡拉胶或卡拉胶群组的复合物， 其中该卡拉胶群组中 型卡拉胶至少为所述卡拉胶群组干重的约 50%， 其余成分为至少的 一种非 型卡拉胶 ； 以及 （c） 一种阴道给药药物， 如避孕药或用于激素替代疗法 （hormone replacement therapy） 的药物。 0010 本发明进一步的方面针对一种水性抗菌组合物， 包括有效剂量的抗菌

16、剂、 一种生 理可接受的水溶性阳离子金属盐和包含一种非核苷逆转录酶抑制剂或核苷逆转录酶抑制 剂， 其中该抗菌剂包括多阴离子杀菌剂， 如卡拉胶群组， 在该卡拉胶群组中 型卡拉胶占 卡拉胶群组干重的至少约 50%， 其余成分为至少一种的非 型卡拉胶。 0011 本发明进一步的方面针对一种生产、 提纯或稳定化本发明卡拉胶群组的方法。该 方法需要使 型卡拉胶或卡拉胶群组以无水或粉末形式与干态的 PH 值控制剂混合， 然后 以例如通过添加水或另外的水溶液的方式水和卡拉胶。 该方法克服了现有技术中把高浓度 卡拉胶制造为同类水溶液相关的几个缺点， 并方便进一步加工为药物制剂， 如上述的组合 物和复合物。 附

17、图说明 0012 图 1 为示出本发明包含卡拉胶群组的组合物长期活性的图表。在应用该组合物后 不同时间间隔时用 95-100% HSV-2 感染剂量挑战小鼠。甚至在 24 小时过后组合物仍保持 一些水平的对抗 HSV-2 的活性。这表明即使在使用组合物和性交之间相当多的时间已过去 妇女仍可被保护。 0013 图 2 为从脾脏提取的核糖核酸 （RNA） 中的逆转录 （RT PCR） 制品的 Southern 印迹 杂交图表。路线 2 和 3 是阳性控制， 路线 4 至 8 来自在病毒挑战前 5 分钟用本发明包含卡 说 明 书 CN 102665677 A 4 3/25 页 5 拉胶群组的组合物预

18、处理的小鼠。路线 9 至 14 来自阴道接种 HIV 的小鼠。 0014 图 3 为示出 p24（HIV） 浓度与本发明包含卡拉胶群组的组合物浓度、 本发明另一 种包含卡拉胶群组和水溶性锌盐的复合物 （ “锌 - 卡拉胶” ） 的组合物浓度以及包含卡拉胶 群组和木质素磺酸 （LSA） 的复合物的组合物浓度相对照的条形图。 0015 图 4 为示出在 HSV-2 小鼠系统中本发明包含卡拉胶群组和 LSA 的组合物， 与本发 明包括卡拉胶群组的组合物之间的对照图。结果显示包含 LSA 和卡拉胶群组的组合物比只 含有卡拉胶群组的组合物更有效。 0016 图5是在通过p24酶联免疫吸附测定 （ELIS

19、A） ， 测定LSA抑制病毒复制百分比的图 例。 0017 图6为本发明包含卡拉胶群组的组合物和本发明包含锌-卡拉胶的另一种组合物 在防止 HSV-2 在维洛 （Vero） 细胞内形成蚀斑方面起作用剂量的有效性图表。 0018 图7是示出本发明包含卡拉胶群组的组合物和本发明另一种包括锌-卡拉胶的组 合物在保护阴道挑战的小鼠不受 HSV-2 感染的有效性图表。 0019 图 8 为示出 HSV-2 病毒挑战剂量为 104或 100% 感染剂量时， 本发明包含锌 - 卡拉 胶的组合物与两种已知产品 Conceptrol 及 Advantage S 相比较的长期活性对照图表。 0020 图9为示出本

20、发明包含卡拉胶群组的组合物和本发明另一种包含锌-卡拉胶的组 合物对抗病毒挑战的保护的图表。 0021 图 10 是本发明包含卡拉胶群组的组合物中释放 Nestorone 量的图表。 0022 图11是在保护小鼠不被HSV-2感染方面， 本发明的卡拉胶组合物各种稀释情况下 的有效性对照的条形图。结果显示即使在卡拉胶群组被稀释至 1 ： 200 时， 它们仍能对感染 提供 40% 的保护。 0023 发明详述 本发明组合物中应用的阴离子杀菌剂为干扰病毒附着以减少 HIV 通过粘膜表面传染 的杀菌剂。这些阴离子杀菌剂包括如 PRO 2000、 Buffergel、 硫酸糊精 （dextrin sul

21、fate） 、 硫酸纤维素 （cellulose sulfate） 等化合物， 最优选地为卡拉胶群组。 0024 本发明组合物中的卡拉胶群组包括 型卡拉胶。在一定程度上非 型卡拉胶是 存在的 （在这种情况下组合物的卡拉胶成分可指的是 “卡拉胶群组” 或 “卡拉胶混合物” ） ， 在 组合物中卡拉胶总干重的基础上， 卡拉胶混合物中包含至少约 50%（优选为至少 50%） 的 型卡拉胶。在更优选的实施例中， 型卡拉胶的量至少约为卡拉胶总干重 （即 型卡拉胶 和非 型卡拉胶） 的 75%、 76%、 77%、 78%、 79%、 80%、 81%、 82%、 83%、 84%、 85%、 86%、

22、87%、 88%、 89%、 90%、 91%、 92%、 93%、 94%、 95%、 96%、 97%、 98% 或 99 %。其他优选的量为至少 75%、 至少约 85%、 至少约 95%、 约 85% 至约 99%、 及从约 94% 至约 97% 的 型卡拉胶。 0025 型卡拉胶在市面上有售 （费城的 FMC 公司） 。可替代地， 型卡拉胶可从二倍体 的海藻如Gigartina radula、Gigartina skottsbergii、 Gigartina chamissoi、Gigartina stellata、 Iridaea cordata、 Chondrus chrispu

23、s 及 Sarcothalia crispata. 中制取。 卡拉胶从海藻中的分离根据标准技术进行。例如， 对海藻进行分离、 清洗然后干燥。 型 卡拉胶在热的稀释氢氧化纳溶液中提取， 生产出包含浓度高达4%的型卡拉胶的糊状物。 生产出的糊状物通过离心及过滤以生产出澄清的 型卡拉胶溶液。通过蒸发、 酒精沉淀或 清洗、 及干燥等方法中的任意组合以去除水分。 说 明 书 CN 102665677 A 5 4/25 页 6 0026 本发明组合物的卡拉胶群组中的其余成分可包括至少一种非 型卡拉 胶。 “非 型卡拉胶”指代不是 型卡拉胶的任意类型的卡拉胶， 如 型卡拉胶 （kappa-carrageen

24、an） 、 型 卡 拉 胶 （iota carrageenan） 、 -II 型 卡 拉 胶 （kappa-II carrageenan） （其包括 型和 型卡拉胶） 、 M 型卡拉胶 （mu carrageenan） 及 N 型卡拉 胶 （nu carrageenan） 。非 型卡拉胶也在市面上有售 （如 FMC 公司） 或可根据标准技术从 海藻中提取。例如 -II 型卡拉胶也在上文所述的海藻品种中自然存在。在优选的实施例 中， 非 型卡拉胶包括 型卡拉胶、 型卡拉胶、 -II 型卡拉胶、 及任意两种或更多种卡 拉胶的混合物。在更优选的实施例中， 非 型卡拉胶包括 -II 型卡拉胶。在优选的

25、实施 例中， 卡拉胶群组中的非 型卡拉胶成分低于约 1%、 2%、 3%、 4%、 5%、 6%、 7%、 8%、 9%、 10%、 11%、 12%、 13%、 14%、 15%、 16%、 17%、 18%、 19%、 20%、 21%、 22%、 23%、 24% 或约 25% 的卡拉胶群组的总干 重。在更优选的实施例中， 非 型卡拉胶成分为低于约 25%、 低于约 15%、 低于约 5%、 约 1% 至约 15%、 或约 3% 至约 6% 的卡拉胶群组的总干重。在其他优选实施例中， 卡拉胶混合物中 基本或完全没有葡萄糖， 葡萄糖是食品工业中应用的卡拉胶中的一种常见成分。 0027 为提

26、供抗菌作用， 型卡拉胶或卡拉胶群组的量通常为组合物总重的约 1% 至约 5%。在优选实施例中， 卡拉胶群组占组合物总重的约 3%。 “抗菌” 或 “抗菌作用” 指的是组 合物抑制或降低由细菌、 其他微生物或病毒导致的性传播感染的传染可能性。本发明组 合物在对抗性传播感染的保护是有效的， 例如通过抑制 HIV、 HPV、 HSV-2 及淋病奈瑟氏菌 （Neisseria gonorrhoeae） 感染。在另一方面， 术语 “抗菌” 或 “抗菌作用” 并不传达、 暗示 或限制于任意通过其可实现限制感染传染的特定方式。并不意图受任意特定的操作理论 约束， 据认为卡拉胶群组非特定地与性传播疾病 （ST

27、Is） 病原的病毒、 细菌或其他微生物结 合， 从而阻断受体部位。包含 型卡拉胶或卡拉胶群组的组合物可能会应用低于 1% 或高 于 5% 的量， 只要它们可提供抗菌作用且保持阴道内可接受性即可。 “阴道可接受性” 指的 是允许其被用于其预期目的的流变性能， 如组合物的粘度 （如， 组合物保持一定粘度使能它 能被使用者应用并在阴道空腔内保持， 同时具有美学性能如基本无臭、 平滑、 清澈、 无色及 无味） 。选择的粘度为能使组合物均匀地涂布阴道空腔的上皮层。通常， 组合物的粘度为约 10,000 cP 至约 50,000cP， 优选为约 20,000 cP 至约 50,000cP， 更优选为约 3

28、0,000 cP 至 约50,000cP。 卡拉胶具有连续的分子量。 通常， 本发明卡拉胶混合物可具有高达约2 x 106 道尔顿的分子量， 其中具有的平均分子量为 1 x 105道尔顿的卡拉胶分子小于约 1%（当用 气体渗透光谱和光散射确定时） 。更特别地， 本发明的 型卡拉胶具有的平均分子量为约 600,000至约1,200,000道尔顿。 这种物理性能使最终制剂具有非吸收性， 其反过来可提供 长时间的抗菌活性。 0028 在非卡拉胶的其他阴离子杀菌剂中， 也可应用于本发明组合物中的阴离子杀菌剂 为 PRO2000。这种杀菌剂是防止 HIV 的阴道杀菌剂。另外， 其他的这类阴离子杀菌剂包括

29、 Buffergel， Buffergel 为一种杀菌的杀精子剂其提供缓冲的活性以在精子存在时保持阴道 为温合的、 保护性的酸性。另外， 硫酸糊精一种可阻止 HIV 进入细胞表面的聚阴离子， 及硫 酸纤维素也可为此而使用。 0029 该组合物进一步包含生理上可接受的 PH 值控制剂， 如磷酸盐缓冲液 （PBS） 。除了 稳定组合物 pH 值 （如在约 3.5 至约 8.5 的等级， 优选地为约 5.8 至约 7.2， 例如从约 6.8 至 7.2） 以外， pH 值控制剂还防止或降低组合物的任何变化， 这种变化为一旦引入 PH 值会显著 说 明 书 CN 102665677 A 6 5/25

30、页 7 变化的体内后组合物可能产生的变化。阴道的 pH 值可在 3.5 至 5.5 之间的范围。因此， pH 值控制剂的存在延长了卡拉胶群组的抗菌效果。组合物包括约 0.001% 至 1.0% 的 pH 值控 制剂。根据拟定的用途 （如下文所述） ， 组合物制剂可进一步包括其他活性剂和 / 或惰性成 分。 0030 本发明卡拉胶群组具有另外的几个优点。 如暴露在冷冻环境或沸腾温度下它们仍 可保持稳定。混合物可适于人类阴道环境。并不意图受任意特定的操作理论约束， 据认为 卡拉胶群组可适于人类阴道环境， 且不充当基质或不会另外导致或刺激阴道自然菌群的成 长， 它们也没有干扰阴道内的自然植物群平衡的

31、毒性。除了归因于本发明的卡拉胶群组的 性能以外， 由于它们不被系统吸收或降解为任何可吸收的对人类有害的副产品， 因此它们 的抗菌活性可延续一段时间。 0031 本发明的另一方面针对一种水溶性金属盐与卡拉胶群组间的复合物。 在优选实施 例中， 金属盐为锌盐 （抗菌组合物称为 “锌卡拉胶” ） 。 锌是性传染病原体如HIV和HSV-2的抑 制剂。醋酸锌和硫酸锌已被证明可抑制细胞培养的 HIV 感染、 及可抑制在细胞培养与动物 试验的HSV-2感染。 锌盐已被证明在阻止活体外HIV39、 口蹄疫病毒、 人类鼻病毒、 A型与B型 流感病毒、 西门立克森林病毒 （semliki forest virus

32、） 和辛德毕斯病毒 （sindbis virus） 感染方面是有效的 40。Haraguchi 等人39 发现通过 p24 ELISA 及 RT 检测时， 氯化锌、 醋酸镉 和氯化汞抑制 HIV-1 的制造。当存在的浓度高达 550 g/mL 时， 氯化锌也没有显示出明显 的细胞毒性。 0032 本发明中应用的水溶性锌盐不仅包括无机盐还包括有机盐， 这些锌盐显现出抗菌 性能且在根据本发明进行应用时不会产生无法承受的刺激。优选地水溶性锌盐包括醋酸 锌、 丙酸锌、 丁酸锌、 甲酸锌、 葡萄糖酸锌、 甘油酸锌、 乙醇酸锌、 乳酸锌、 硫酸锌、 氯化锌及溴 化锌。ZnSO4、 ZnCl2、 ZnBr2

33、、 Zn(Ac)2等。如果相对应的铜和银盐在体内无刺激且不会降解 为任何可吸收的对人体有害的副产品， 它们也可用于本发明。因此， 本发明组合组包括约 0.03% 至 1.5% 的水溶性金属盐， 优选为从约 0.3% 至 1.0%。组合物的抗菌活性大于只有卡 拉胶群组作为抗菌剂的制剂。 在本发明具有特定锌盐的实施例中， 抗微生物活性显著增加。 并不意图受任意特定的操作理论约束， 据认为制剂的抗菌活性是增强的， 因为金属盐被身 体吸收的速率相对是可控的， 且同时金属盐的刺激性是降低的。 0033 本发明复合物可应用金属离子取代天然存在于多糖主干上的阳离子的标准工艺 来生产。例如， 锌卡拉胶 （指的

34、是本发明锌离子与卡拉胶群组间的复合物） 是一种通过使锌 （II） 非共价地附接至卡拉胶群组的硫酸基的工序而合成的复合物。卡拉胶是一种由 D- 半 乳糖单元和 3, 6- 去水 D- 半乳糖单元以线状方式重复而组成的多糖。聚合体被高度硫化， 每个二糖单元都具有 3 个 S03基。锌与卡拉胶群组的结合通过用锌取代与卡拉胶天然结合 的钠的化学过程来实现。在这个过程中应用溶解度高的锌盐 （如醋酸锌） 的水溶液作为锌离 子的来源。 卡拉胶群组在醋酸锌的浓缩溶液内通过透析方式使带正电的锌离子扩散并与卡 拉胶群组中带负电的硫酸基结合。然后过量的锌通过在水内透析的方法除去。 0034 含有本发明锌II金属阳离

35、子与卡拉胶群组的复合物的包含物可通过应用锌II卡 拉胶而得到。锌卡拉胶通过用锌阳离子取代卡拉胶中的天然阳离子 （钠、 钾、 钙） 而合成。通 常锌卡拉胶通过在醋酸锌 II 的浓缩溶液中透析卡拉胶溶液而生产。然后在浓缩前， 例如在 冷冻干燥前， 过量的锌离子通过在水内透析而去除。在本发明中应用锌 II 卡拉胶可避免使 说 明 书 CN 102665677 A 7 6/25 页 8 用如乳酸根或醋酸根阴离子。 另一工艺需要如下步骤 （a） 在乳酸锌 （或其他可溶性锌盐） 为约 2.5%， 酒精 ： 水为 50 ： 50 的溶液中浸泡卡拉胶群组两小时，（b） 分离，（c） 在干燥前用酒精冲洗。步骤

36、（a） 至 （c） 可 能需要重复数次以在卡拉胶群组中获得所需的金属含量。为获得超过 50% 当量的锌卡拉胶 通常需要两个循环。 0035 上述工艺生成一种复合物， 其为水溶性的且具有对抗包膜病毒如 HIV 及 HSV-2 的 活性。与无机的或简单的有机锌盐不同， 锌卡拉胶保持优良的流变性能并具有高的分子量 （高达2,000,000 Da） ， 使得它可配制在阴道产品内， 无刺激性且不被吸收。 该组合物指的是 一种 “复合物” ， 由于在金属和卡拉胶群组之间分子间相互作用的存在， 不利于或阻碍分解 出自由的金属阳离子。在物理、 化学和 / 或抗菌性能方面， 包括金属盐和带负电的硫酸多糖 复合物

37、的本复合物群组与水溶性金属盐和卡拉胶群组的混合物是不同的。 0036 根据本发明的另一方面， 申请人发现不可溶于水的金属盐和卡拉胶群组之间的复 合物与特定的抗逆转录病毒剂一起的组合提供了预想不到的优点及协同性能。最特别地， 这种各成分的特定组合已被发现在抑制性传播感染方面， 特别是阻止阴道 SHIV-RT 感染 （猴 / 人类免疫缺陷性逆转录酶病毒） 方面， 可提供预想不到的效果。抗逆转录病毒剂为用 于治疗逆转录病毒主要是 HIV 感染的药物。有许多不同类别的抗逆转录病毒药物在 HIV 生 命周期的不同阶段起作用， 这些药物包括， 例如， 非核苷逆转录酶抑制剂类 （NNPTI类） 、 核苷 逆

38、转录酶抑制剂类 （NRTI 类） 、 整合酶抑制剂类、 融合抑制剂类及 CCR5 拮抗剂类。 0037 NNRTI 类药物为使它们自身粘附在逆转录酶上， 阻止酶将 RNA 转换为 DNA 的 化合物， 从而 HIV 的遗传物质不能在健康细胞的遗传物质内复制， 并可防止细胞产生新 的病毒。这类药物包括如奈韦拉平 （nevirapine） 、 地拉夫定 （delavirdine） 、 依法韦仑 （efavirenz） 、 etravirine、 MIV-150、 MIV-160、 MIV-170、 dapivirine (TMC-120) 及 UC-781 等药物。最优选的 NNRTI 为 MIV

39、-150， 是由 Medivir 研发出的作为抗病毒药物治 疗而使用的 NNRTI。MIV-150 是一种与 HIV-RT 紧密结合的酶抑制剂， 其特点为形成迅速而 分解速度缓慢， 这在浓度非常低时钝化 HIV 的化学分离是有效的。在本发明的一个优选实 施例中， 申请人已发现本发明卡拉胶群组与水溶性金属盐， 优选如锌盐， 以及 NNRTI 类药物 如 MIV-150 的特定组合在完全阻止阴道 SHIV-PT 感染上是有效的。进一步的， 已发现这种 特定组合比单独的卡拉胶群组与水溶性金属盐如锌盐的组合 ； 或卡拉胶群组与 NNRTI 类药 物 ； 或卡拉胶群组自身更有效。在一个优选的实施例中，

40、本发明卡拉胶群组、 水溶性金属盐 和 NNRTI 的组合优选地包括上述的卡拉胶群组， 该卡拉胶群组包括至少占卡拉胶群组干重 50%的型卡拉胶， 其余的卡拉胶中至少具有一种非型卡拉胶， 最优选地为95%的型 卡拉胶和 5% 的 型卡拉胶的组合。总的组合为凝胶的形式， 包括 1% 至 5% 的卡拉胶， 优选 地为 3% 的卡拉胶 ； 组合物包括的水溶性金属盐优选地包含锌盐， 更优选地为醋酸锌或乳酸 锌的形式， 在总的组合物中包括 0.1wt.%（重量百分比） 至 1.5 wt.% 的金属如锌， 优选为约 0.3 wt.% ； 且包括的NNRTI类药物优选地为MIV-150， NNRTI如MIV-1

41、50的量从5mM至5000mM （或 0.000185% 至 0.185%） ， 优选地在 10mM 至 250mM 之间 （或 0.00074% 至 0.00925%） ， 最优 选地为约 50 mM ( 或 0.00185 %) 的 MIV-150。 0038 NRTI 类药物为合并入病毒的 DNA 内以停止其制造过程的化合物。因而它们导 致 DNA 不完全从而不能制造新的病毒。这类药物包括如阿巴卡韦 （abacavir） 、 替诺福韦 说 明 书 CN 102665677 A 8 7/25 页 9 （tenofovir） 及叠氮胸腺 （zidovudine） 等药物。 0039 申请人已

42、发现 NNRTI 类药物和 NRTI 类药物在本发明组合中应用时表现出特别意 想不到的性能。 0040 根据本发明的另一个方面， 木质素磺酸 （ “LSA” ） 与 型卡拉胶或卡拉胶群组组合 （本文称为 LSA- 卡拉胶） ， 以达到更好的抗菌效果。在商业上 LSA 作为工业稳定剂、 分散剂 和强化剂而应用。它还在饲养牛时作为大量纤维素的来源， 在生产人类消费的特定食品时 作为乳化剂和分散剂使用。它存在于高等植物的细胞壁内。细胞壁纤维通常由地球上最丰 富的多糖， 纤维素组成。 除了纤维素以外， 次生细胞壁包括的另一种非常丰富的材料叫做木 质素， 其为使植物挺直的多糖。在加热加压情况下， 在硫酸

43、氢钙溶液中蒸煮木屑， 木质素转 变为水溶性的木质素磺酸 （LSA） 溶液， 被称为失效的亚硫酸盐废液 31,32。它是一种低摩尔质 量的化合物， 具有的平均分子量为约 5000 道尔顿。因为木质素是非常复杂的自然聚合体， 具有很多随机键合， 其确切的化学结构是未知的， 但它被认为是磺化聚合物， 其基本单元是 与松柏醇中基本单元类似的丙基苯结构 3l。商业中， 木质素磺化盐因其分散、 结合、 配位及 乳化性能而应用。木质素磺酸的芳香环结构赋予植物抵制病菌攻击的能力。在活体外 LSA 已显示出抗 HIV 的活性。 0041 包含卡拉胶群组和 LSA 的制剂可通过在卡拉胶群组内加入 LSA 而生产，

44、 通常 LSA 与卡拉胶总重的重量比例为从约 20 ： 1 至约 1 ： 20。在组合物包含金属盐的情况下， 可在卡 拉胶群组中混入固体的缓冲盐， 通常应用的重量比例为从约 1 ： 1 至约 10 ： 1。然后由此产生 的混合物在水溶液内稳定化。然后卡拉胶 -LSA 制剂的 PH 值通过加入酸如 HCL 或碱如 NaOH 可调整至约 6.0 至约 8.0。水溶液中的 LSA 产生出黄褐色至褐色的颜色。其颜色深度与应 用浓度的增加成比例。因此， 可在组合物中加入增白剂如二氧化钛。通常， 增白剂的存在量 占组合物总重量的约 0.1% 至约 3.0%。增白剂也可有助于抗菌作用。 0042 并不意图受

45、任意特定的操作理论约束， 据认为除了其自身所有的抗病毒活性以 外， LSA 还具有卡拉胶群组分散剂的功能， 松散并延长卡拉胶群组， 因此创造了更大密度的 这种材料及更强的抗菌效力。另一方面， 卡拉胶群组提供了优选的流变性能， 这对阴道 （甚 至直肠） 给药的可接受性和有效性是必需的， 这种流变性能不能通过 LSA 自身获得， 因为它 在自然界是相当稀薄的。在一些实施例中， 组合中的卡拉胶群组与 LSA 在防止或抑制性传 播感染方面是协同工作的。 0043 本发明的组合物还可包含在水性制剂中的与 PH 控制剂和 型卡拉胶或卡拉胶 群组一起的阴道给药药物。优选的药物为避孕药， 如类固醇激素， Sa

46、leh 等的美国专利 5972372 （ “Saleh” ） 中已公开， 其公开的内容因参考而纳入本文。在本发明中应用的避孕药 示例包括孕激素类 （progestins） 、 促肾上腺皮质激素 （ACTH） 、 雄激素类 （androgens） 、 雌激 素类 （estrogens） 、 促性腺激素 （gonadotropin） 、 人体生长激素 （human growth hormone） 、 促生育素 （menotropins） 、 孕酮 （progesterone） 、 孕激素类 （progestins） （如左炔诺孕酮 （levonorgestrel） 、 炔 诺 酮 （norethi

47、ndrone） 、 3- 酮 基 去 氧 孕 烯 （3-keto-desogestrel） 及孕二烯酮 （gestodene） ） 、 孕激素 （progestogen） 、 尿促卵泡素 （urofollitropin） 、 后 叶加压素 （vasopressin） 、 及其组合。优选的药物包括孕激素化合物类 （如醋炔诺酮 （norethindrone acetate） 、 NESTORONE ( “NES” ) (即 16-亚甲基-17.-醋酸基-19-去 孕烯 -3,20- 二酮 （16-methylene-17.alpha.-acetoxy-19-norpregnene-3,20-dio

48、ne)， 及 说 明 书 CN 102665677 A 9 8/25 页 10 孕激素类 （progestins） ( 如左炔诺孕酮 （levonorgestrel ） (LNG)。 0044 优选的避孕药为 16- 亚甲基 -17.- 醋酸基 -19- 去孕烯 -4-ene-3,20- 二酮 （16-methylene-17.-acetoxy-19-norpregn-4-ene-3,20-dione)（下文简称 “NES” ）其 已在文献中被确认为 “ST-1435” 。在应用经典的生物测定法测量孕效力的比较研究中， NES 被发现具有高于孕酮100倍、 高于左炔诺酮10倍的孕活性 53。

49、因此， 只需要少量的NES可达 到抑制排卵的效果。这种效力与没有雄激素、 雌激素及糖皮质激素等 （肝糖原沉积） 活性及 对脂水分配系数或临床化学参数没有影响相结合， 赋予 NES 在避孕用品中使用的特定优势 53-55。然而， 已显示出在口服时， NES 经历快速的新陈代谢并钝化， 使其适于哺乳期妇女通过 植入或阴道环给药而使用 56,57。当与 型 / 型卡拉胶混合物以凝胶形式组合时， NES 优 选的递送剂量为每天约 75 至约 100g 之间， 其将在血浆内达到约 200 皮摩尔 / 升 （pmol/ L） NES 的水平， 并在进行期间获得良好的血液模式。其他优选的阴道给药药物包括用于激 素替代疗法的药剂， 如雌激素类物质 （如乙炔雌二醇） ， 及其他类固醇化合物。 0045 并不意图受任意特定的操作理论约束，