用于以SPIM显微术照明样品的布置.pdf

1、10申请公布号CN104054014A43申请公布日20140917CN104054014A21申请号201280053207422申请日20121022102011054914520111028DE102012109577920121009DEG02B21/16200601G02B21/36200601G02B21/0020060171申请人莱卡微系统CMS有限责任公司地址德国威茨勒72发明人维尔纳克尼贝尔弗兰克西克曼贝恩德维茨戈夫斯基沃纳富盖74专利代理机构北京清亦华知识产权代理事务所普通合伙11201代理人宋融冰54发明名称用于以SPIM显微术照明样品的布置57摘要本发明涉及一种用于以S

2、PIM显微术照明样品的布置，该布置具有照明透镜，照明透镜接收和聚焦光带或准光带，准光带由在光带平面上连续地前后移动的光束构成。该布置的特征在于其具有偏转工具，偏转工具使光带或准光带在穿过照明透镜之后偏转，使得光带或准光带与照明透镜的光轴成不同于零度的角度，特别是成直角传播，其中照明物镜和偏转装置布置为相对于彼此可移动。30优先权数据85PCT国际申请进入国家阶段日2014042886PCT国际申请的申请数据PCT/EP2012/0708662012102287PCT国际申请的公布数据WO2013/060644DE2013050251INTCL权利要求书3页说明书7页附图7页19中华人民共和国国

3、家知识产权局12发明专利申请权利要求书3页说明书7页附图7页10申请公布号CN104054014ACN104054014A1/3页21一种用于以SPIM显微术照明样品的布置，具有照明物镜，所述照明物镜接收和聚焦光带或准光带，所述准光带由在光带平面上连续地前后移动的光束构成，其中，存在偏转工具，所述偏转工具使所述光带或准光带在穿过所述照明物镜之后偏转，使得所述光带或准光带相对于所述照明物镜的光轴成不同于零度的角度，特别是成直角传播，其中，所述照明物镜和所述偏转设备相对于彼此可移动地布置。2根据权利要求1所述的布置，其中，A所述照明物镜和所述偏转设备相对于彼此可移置地布置；和/或B所述照明物镜在与

4、其光轴垂直的平面上相对于所述偏转设备可移置地布置；和/或C所述照明物镜在与其光轴垂直的方向上相对于所述偏转设备可移置地布置。3根据权利要求1或2所述的布置，其中，A存在补偿设备，使用所述补偿设备所述布置的光束路径可适应所述照明物镜和所述偏转设备的各自的当前相对位置；和/或B存在补偿设备，使用所述补偿设备能够补偿由所述照明物镜的移动引起的所述光带或准光带相对于所述照明物镜的未对准，特别是所述光带间或准光带间的空间偏移。4根据权利要求3所述的布置，其中，A所述补偿设备配备为可调节的，以便补偿所述照明物镜和/或所述偏转设备的不同的可能移动；和/或B所述补偿设备为与所述照明物镜和/或所述偏转设备的移动

5、同步地可调节的；和/或C所述补偿设备为与所述照明物镜和/或所述偏转设备的移动同步地可调节的，使得所述光带或准光带自动地偏转到所述照明物镜的入射光瞳中；和/或D所述补偿设备与所述照明物镜和/或所述偏转设备的移动机械地关联。5根据权利要求3或4所述的布置，其中，A所述补偿设备引起光束偏移；和/或B所述补偿设备具有透明的平行平面板，其中，板平面相对于所述光带或准光带的传播方向成不同于90度的角度布置；和/或C所述补偿设备具有透明的平行平面板，其中，板平面相对于所述光带或准光带的光轴成不同于90度的角度布置；和/或D所述补偿设备具有透明的平行平面板，所述透明的平行平面板可旋转地，特别是绕与所述光带或准

6、光带的传播方向平行的轴线安装；和/或E所述补偿设备使光束偏转装置移置，所述光束偏转装置通过前后偏转生成准光带。6根据权利要求1至5中任一项所述的布置，其中，A所述偏转设备具有用于使所述光带或准光带偏转的至少一个至少部分反射的表面；和/或B所述偏转设备具有用于使所述光带或准光带偏转的至少一个至少部分反射的表面，其中，所述反射表面配备为平面镜的一部分，或者至少一部分所述反射表面配备为在锥体的内侧上。7根据权利要求1至6中任一项所述的布置，其中，所述偏转设备包括多个反射表面；且每个表面具有用于照明物镜的参考位置，使得从处于参考位置的所述照明物镜出发的所权利要求书CN104054014A2/3页3述光

7、带，或者从所述照明物镜出发的所述准光带击中所述反射表面中的所述参考位置。8根据权利要求1至7中任一项所述的布置，其中，所述光带或准光带在样品上的入射方向，和/或所述光带或准光带在样品上的击中位置通过所述照明物镜和所述偏转设备之间的相对移动可调节。9根据权利要求1至8中任一项所述的布置，其中，所述偏转设备配备且意欲以相对于待研究的样品的位置固定的布置，而所述照明物镜相对于所述偏转设备可移动地，特别是可移置地布置，以便改变所述光带或准光带在所述样品上的所述入射方向。10根据权利要求1至9中任一项所述的布置，其中，所述偏转设备可移动地紧固在所述照明物镜上。11根据权利要求1至10中任一项所述的布置，

8、其中，A所述照明物镜为浸没物镜；或者B所述照明物镜为浸没物镜；且所述照明物镜配备且意欲，特别是与所述偏转设备一起浸没在样品腔或样品容器中，所述样品腔或样品容器填充有围绕待照明的样品的光学介质。12根据权利要求1至11中任一项所述的布置，其中，A进入所述照明物镜的所述入射光瞳的所述光带，或者进入所述照明物镜的所述入射光瞳的所述准光带至少与所述入射光瞳的直径一样宽；和/或B所述光带或准光带中心地耦合到所述照明物镜中。13根据权利要求1至12中任一项所述的布置，其中，存在光束形成装置，所述光束形成装置从光束生成所述光带或准光带。14根据权利要求13所述的布置，其中，所述光束形成装置A具有光束偏转装置

9、，特别是摆镜，所述光束偏转装置通过光束在光带平面上的前后摆动生成所述准光带；或者B具有圆柱状光学部件，所述圆柱状光学部件将光束形成为所述光带。15根据权利要求1至13中任一项所述的布置，其中，存在光源，特别是激光器，所述光源发射所述光带或者发射用于生成所述光带或准光带的光束。16根据权利要求1至14中任一项所述的布置，其中，A所述布置配备为特别是太空用的组件；和/或B所述布置配备为特别是太空用的组件，其中，存在至少一个耦合工具，特别是导向工具和/或紧固工具，所述至少一个耦合工具使得能够精确定位地耦合至特别是倒置的显微镜或者显微镜座；和/或C所述布置配备为特别是太空用的组件，从光束生成所述光带或

10、准光带的光束形成装置集成在所述组件中；和/或D所述布置配备为特别是太空用的组件，发射所述光带或者发射用于生成所述光带或准光带的光束的光源，特别是激光器，集成在所述组件中。17一种显微镜，所述显微镜具有根据权利要求1至16中任一项所述的布置。18根据权利要求17所述的显微镜，其中，A存在与所述照明物镜分离的观察物镜；和/或B存在观察物镜，通过所述观察物镜从样品行进的检测光被引导到检测器；和/或权利要求书CN104054014A3/3页4C存在观察物镜，所述观察物镜的光轴与所述照明物镜的光轴平行或同轴地布置。19根据权利要求17或18所述的显微镜，其中，A存在补偿设备，使用所述补偿设备所述显微镜的

11、光束路径可适应所述照明物镜和所述偏转设备的各自的当前相对位置；和/或B存在补偿设备，使用所述补偿设备所述显微镜的观察光束路径可适应所述照明物镜和所述偏转设备的各自的当前相对位置。20根据权利要求19所述的显微镜，其中，A所述补偿设备配备为可调节的，以便补偿所述照明物镜和/或所述偏转设备的不同的可能移动；和/或B所述补偿设备为与所述照明物镜和/或所述偏转设备的移动同步地可调节的；和/或C所述补偿设备为与所述照明物镜和/或所述偏转设备的移动同步地可调节的，使得来自所述观察物镜的所述检测光偏转到检测器；和/或D所述补偿设备与所述照明物镜和/或所述偏转设备的移动机械地关联。21根据权利要求20或21所

12、述的显微镜，其中，A所述补偿设备引起光束偏移；和/或B所述补偿设备布置在所述显微镜的检测光束路径中；和/或C所述补偿设备具有透明的平行平面板，其中，所述板平面相对于所述检测光的传播方向成不同于90度的角度布置；和/或D所述补偿设备具有透明的平行平面板，其中，所述板平面相对于所述检测光的光轴成不同于90度的角度布置；和/或E所述补偿设备包括透明的平行平面板，所述透明的平行平面板可旋转地，特别是绕与所述检测光的传播方向平行的轴线安装。权利要求书CN104054014A1/7页5用于以SPIM显微术照明样品的布置技术领域0001本发明涉及一种用于以SPIM显微术照明样品的布置，该布置具有照明物镜，照

13、明物镜接收和聚焦光带或准光带，光带或准光带由在光带平面上连续地前后移动的光束构成。背景技术0002一种根据SPIM方法操作的显微镜描述在DE10257423A1中。在该显微镜中，样品被薄光带照明，而观察与照明光带的平面垂直地发生。此处，照明和检测通过各自具有单独的光学部件，特别是具有彼此垂直的两个单独的物镜的两个单独的光路进行。光带由照明物镜和放置在其前方的圆柱状光学部件生成。为了图像采集，将样品移动穿过相对于检测器静止的光带，以使平面检测器逐层捕获荧光和/或散射光。由此获得的分层的图像数据然后可以组合成与样品的三维图像对应的数据集。为了生成尽可能薄的光带，照明物镜必须具有相对高的数值孔径，且

14、照明物镜的自由工作距离必须相对大，以便防止碰撞照明物镜。这种类型的两个物镜的垂直布置可能对于成像某些样品，尤其是生物样品是不利的。例如，在直角物镜布置中，经常不可能以无碰撞的方式放置球形物体。除了样品准备方面的极端要求之外，样品中还经常发生不需要的遮蔽。0003在WO2010/012980A1中描述的改变的SPIM技术中，照明和检测使用相同的物镜进行。为了这个目的，物镜的入射光瞳非中心地欠照明，即照明光束穿过从光轴横向偏移的入射光瞳的一部分。布置在物镜前方的圆柱状透镜在样品中生成片光源，该片光源相对于物镜的光轴倾斜。被该片光源照明的样品区域然后又被物镜成像到检测器上。然而，该装置设计为专门用于

15、通过片光源倾斜照明样品，而不允许偏离其的任何使用，尤其是不允许样品的逐点共焦扫描或者片光源的空间光强分布的变化，特别是不允许使用与物镜的光轴垂直地定向的光带的照明。0004DE102004034957A1描述了用于通过显微镜物镜样品的显微镜观察的布置，在该显微镜物镜的壳体中，用于样品的照明光的光导设置在透镜光学部件外部。照明光最初在光导内与物镜的光轴平行地行进，然后击中安装在物镜的壳体上的小孔径反射器，且在另外的成像元件的帮助下，将照明光与显微镜物镜的光轴垂直地，由此与观察方向垂直地聚焦到样品中。此处，样品的照明也根据SPIM原理以平面的方式发生。尽管以该方式构造的显微镜物镜没有消除使用用于照

16、明光的另一物镜的需要，具有另外光导和反射器的该特殊物镜的特殊设计技术上是非常复杂的，且是昂贵的。0005使用从DE102004034957A1已知的设备，存在以下问题仅仅可以研究在物镜的最大图像场内在将照明光偏转到物体上的相对地定位的反射器之间的物体。然而仅仅提供低放大倍数的大图像场。通常具有高数值孔径的高放大倍数物镜不可用，因为样品大于最大图像场，因此不适合在相对定位的反射镜表面之间。具有低孔径的物镜不利地允许仅仅相对厚的光带的形成。说明书CN104054014A2/7页6发明内容0006本发明的目的是提出一种用于以SPIM显微术照明样品的情况的布置，该布置在样品上提供入射方向和/或入射位置

17、的精确的可靠调节性，同时允许能够使用具有高数值孔径的照明物镜，特别是当待研究的样品大于照明物镜的图像场时。0007该目的通过以下布置实现该布置的特征在于，存在偏转工具，所述偏转工具使所述光带或准光带在穿过所述照明物镜之后偏转，使得所述光带或准光带相对于所述照明物镜的光轴成不同于零度的角度，特别是成直角传播，其中，所述照明物镜和所述偏转设备相对于彼此可移动地布置。0008特别地可以设计为所述照明物镜和所述偏转设备相对于彼此可移动地布置，以便改变所述光带和/或准光带在所述样品上的入射方向和/或入射位置。0009高孔径的照明物镜的可用性具有以下特别的优点击中样品的光带或准光带可以为特别薄的，这提高了

18、对于样品的SPIM研究的分辨能力。0010在特别的实施例中设计为所述照明物镜和所述偏转设备相对于彼此可移置地布置。特别有利地设计是，所述照明物镜在与其光轴垂直的平面上相对于所述偏转设备可移置地布置；和/或所述照明物镜在与其光轴垂直的方向上相对于所述偏转设备可移置地布置。0011在特别的实施例中，存在补偿设备，使用所述补偿设备能够补偿由所述照明物镜的移动引起的所述光带或准光带相对于所述照明物镜的未对准，特别是所述光带或准光带与所述照明物镜之间的空间偏移。0012例如可以设计为，所述补偿设备配备为可调节的，以便补偿所述照明物镜的不同的可能移动。0013特别地可以可选地或者另外的设计为，所述补偿设备

19、为与所述照明物镜和/或所述偏转设备的移动同步地可调节的。该实施例具有以下优点另外的用于在相对于照明物镜的选择偏转设备相对位置的校准调整的工作过程不是必须的。更确切的说可以实现的是，不论偏转设备相对于照明物镜的相对位置如何，总是能够保证照明光束路径的正确对准，不需要使用者进行对准。0014在这种情况下，特别地可以设计为，所述补偿设备为与所述照明物镜和/或所述偏转设备的移动同步地可调节的，使得所述光带或准光带自动地偏转到所述照明物镜的入射光瞳中。0015上述实施例例如可以通过以下实现所述补偿设备与所述照明物镜和/或所述偏转设备的移动机械地关联。可选地还可以设计为，补偿设备具有专用定位机构，根据偏转

20、设备相对于照明物镜的相对位置电子地，优选自动地控制该专用定位机构。0016在允许照明光束路径的精确调节性的可靠构造的实施例中，所述补偿设备引起光束偏移。优选地可以如下测量和校准光束偏移在与照明物镜相对的由使用者选择的偏转装置的相对位置，通过光束偏转引起照明光线路径的校准调整。0017例如，所述补偿设备可以具有透明的平行平面板，其中，所述板平面相对于所述光带或准光带的传播方向成不同于90度的角度布置。可选地或另外地还可以设计为，所述补偿设备具有透明的平行平面板，所述透明的平行平面板可旋转地，特别是绕与所述光带或准光带的传播方向平行的轴线安装。说明书CN104054014A3/7页70018还可以

21、设计为，所述补偿设备使光束偏转装置移置，所述光束偏转装置通过前后偏转生成准光带。特别地可以设计为，光束偏转装置与偏转设备一起相对于照明物镜同步地移置。0019在特别的实施例中，所述偏转设备具有用于使所述光带或准光带偏转的至少一个至少部分地反射的表面。特别地另外可以设计为，所述反射表面配备为平面镜的一部分，或者至少一部分所述反射表面配备为在锥体的内侧上。0020在另一个实施例中设计为，所述偏转设备具有多个反射表面；且每个表面具有用于照明物镜的参考位置，使得从处于参考位置的所述照明物镜出发的所述光带，或者从所述照明物镜出发的所述准光带击中所述反射表面中的所述参考位置。0021如以上已经指出的，有利

22、地可以设计为，所述光带或准光带在样品上的入射方向，和/或所述光带或准光带在样品上的击中位置通过所述照明物镜和所述偏转设备之间的相对移动可调节。0022在特定的实施例中，偏转设备相对于照明物镜的相对位置的选择可以由使用者，例如通过致动合适布置的调节螺钉而设置。然而还可以设计为，使用者，例如在PC或另一输入装置，优选地基于待研究的物体的主视图的图示或者基于待研究的物体的占位符的图示，简单地规定样品上的所需的辐射方向和碰撞点。电子控制系统可以计算实施这些规定所需要的控制参数，且基于计算的控制参数可以控制合适布置的定位电机，以便产生必要的相对位置，优选还产生补偿设备的必要的设置。0023在有利的实施例

23、中，所述偏转设备配备且意欲以相对于待研究的样品的位置固定的布置，而所述照明物镜相对于所述偏转设备可移动地，特别是可移置地布置，以便改变所述光带或准光带在所述样品上的所述入射方向。例如，偏转设备可以位置固定地布置在显微镜座和/或样品台上。0024特别地还可以设计为，所述偏转设备以相对于待研究的样品位置固定地布置。例如，待研究的样品和偏转设备可以由一个共用样品台共同地承载和/或保持。在特定的实施例中，偏转设备布置在倒置显微镜的样品台上。0025还可能的是，所述偏转设备可移动地紧固在所述照明物镜上。0026在特定的实施例中，所述照明物镜为浸没物镜。还可以设计为，所述照明物镜为浸没物镜；且所述照明物镜

24、配备且意欲，特别是与所述偏转设备一起浸没在样品腔或样品容器中，所述样品腔或样品容器填充有围绕待照明的样品的光学介质。0027在有利的实施例中设计为，进入所述照明物镜的所述入射光瞳的所述光带，或者进入所述照明物镜的所述入射光瞳的所述准光带至少与所述入射光瞳的直径一样宽；和/或所述光带或准光带中心地耦合到所述照明物镜中。由此有利地避免照明光功率的损失。除此之外完全利用照明物镜的成像能力，以便可以使用尽可能薄的光带或准光带照明样品。0028在用于照明样品的情况的布置的特定实施例中，存在光束形成装置，所述光束形成装置从光束生成所述光带或准光带。0029例如，可以设计为，首先生成横截面大体为圆形的光束，

25、且光束形成装置使光束快速前后摆动，使得形成准光带。特别地可以设计为，光束形成装置使光束快速前后摆动，使得接收检测光的检测器生成与例如使用圆柱状光学部件生成的光带的照明大体相同的检说明书CN104054014A4/7页8测信号。0030例如可以设计为，所述光束形成装置具有光束偏转装置，特别是摆镜，所述光束偏转装置通过光束在光带平面上前后摆动生成所述准光带。0031代替的，生成准光带可以设计为，光带从横截面最初为圆形的光束通过圆柱状光学部件，例如通过一个或多个圆柱状透镜和/或圆柱状反射镜形成。0032在特定的实施例中，设置光源，特别是激光器，所述光源发射所述光带或者发射用于生成所述光带或准光带的光

26、束。0033有利地，以上关于各种细节和实施例描述的用于照明的布置可以配备为特别太空用的组件。作为组件的实施例可以有利地使得使用者可以通过简单地耦合在用于样品的SPIM研究的组件上而改进现有的显微镜或显微镜座。优选地，组件的各个部件是预先对准的。0034特别地可以设计为，所述布置配备为特别太空用的组件，其中，存在至少一个耦合工具，特别是导向工具和/或紧固工具，所述至少一个耦合工具使得能够精确定位地耦合至特别是倒置的显微镜或者显微镜座。0035在作为组件的布置的非常特别灵活的可用实施例中，集成从光束生成所述光带或准光带的光束形成装置。可选地或另外地，还可以设计为，发射所述光带或者发射用于生成所述光

27、带或准光带的光束的光源，特别是激光器，集成在所述组件中。这些实施例具有以下特别优点使用者不依赖于显微镜的实际意欲用于其他应用的光源，或者显微镜的实际意欲用于其他应用的光束偏转装置。更确切的说，可以简单地凸缘安装和使用组件，不需要进行对显微镜或显微镜座的剩余光束路径的特别适配。除此之外也建立了使用不包括或者可以不提供其自己的光源或光束偏转装置的显微镜或显微镜座上的组件的能力。0036使用根据本发明的用于照明的布置使提供允许使用薄光带对甚至较大的样品进行SPIM研究由此具有高分辨能力的显微镜成为可能。0037例如，可以使用实际设计为共焦扫描显微镜或多光子显微镜的显微镜实现这样的显微镜。对此所需要的

28、改进实际上可以由终端使用者实施，尤其是如果必要的部件以预先对准的方式和/或以模块化设计设置。特别地可以设计为，扫描显微镜的光束偏转装置用于生成准光带。0038在具有根据本发明的用于照明的布置的显微镜中，可以存在与所述照明物镜分离的观察物镜。特别地可以设计为，存在观察物镜，通过所述观察物镜从样品行进的检测光被引导到检测器；和/或存在观察物镜，所述观察物镜的光轴与所述照明物镜的光轴平行或同轴地布置。0039从通过光带或准光带照明的样品的层行进的检测光通过观察物镜可以被引导到检测设备，例如CCD照相机。观察物镜，任选地与下面的另外的光学部件一起，优选将通过光带或准光带照明的样品的层成像到面检测器的光

29、敏区域上。可选地，还可能的是，特别是在共焦布置中，逐点扫描通过光带或准光带照明的样品的层。0040显微镜可以有利地具有补偿设备，使用所述补偿设备所述显微镜的光束路径可适应所述照明物镜和所述偏转设备的各自的当前相对位置。如已经详细地描述的，补偿设备可以是用于照明的布置的一部分。然而，可选地或另外地，还可能的是，显微镜包括在用于照明的布置外部的补偿设备，使用所述补偿设备所述显微镜的光束路径可适应所述照明物说明书CN104054014A5/7页9镜和所述偏转设备的各自的当前相对位置。0041特别地，可以存在补偿设备，使用所述补偿设备特别地所述显微镜的观察光束路径可适应所述照明物镜和所述偏转设备的各自

30、的当前相对位置。0042布置在用于照明的布置外部的显微镜的补偿设备还可以有利地配备为可调节的，以便补偿所述照明物镜和/或所述偏转设备的不同的可能移动。还可以设计为，这种补偿设备为与所述照明物镜和/或所述偏转设备的移动同步地可调节的；和/或所述补偿设备为与所述照明物镜和/或所述偏转设备的移动同步地可调节的，使得来自所述观察物镜的所述检测光被引导到检测器。可选地或另外地，还可以设计为，这种补偿设备与所述照明物镜和/或所述偏转设备的移动机械地关联。特别地，还可以设计为，这种补偿设备布置在显微镜的检测光束路径中。0043与关于用于照明的布置的补偿设备描述的类似，对于布置在用于照明的布置外部的显微镜的补

31、偿设备，还可以设计为，这种补偿设备引起光束偏移；和/或这种补偿设备包括透明的平行平面板，所述板平面相对于所述检测光的传播方向成不同于90度的角度布置。不同于零度的入射角导致可以用于补偿的光束偏移。0044特别地，可以有利地设计为，所述补偿设备包括透明的平行平面板，所述透明的平行平面板可旋转地，特别是绕与所述检测光的传播方向平行的轴线安装。附图说明0045本发明的另外的目的、优点、特征以及可能的应用从下面参考附图的示例性实施例的描述中变得明显。描述的和/或图示的所有特征单独地或以任何有用的组合的方式构成本发明的主题，不论它们在权利要求或其内部参考中是如何组合的。在附图中0046图1示出根据本发明

32、的用于以SPIM显微术照明样品的情况的布置的示例性实施例；0047图2示出设置不同辐射方向的示例性实施例；0048图3示出根据本发明的布置的不同示例性实施例，该布置具有用于生成准光带的光束偏转装置；0049图4示出设置不同辐射方向的不同示例性实施例；0050图5示出根据本发明的布置的另一示例性实施例，该布置具有用于生成准光带的光束偏转装置；0051图6示出设置不同辐射方向的另一示例性实施例；0052图7示出根据本发明的布置的第四示例性实施例，该布置具有用于生成准光带的圆柱状光学部件；0053图8示出设置不同辐射方向的第四示例性实施例；0054图9示出根据本发明的布置的第五示例性实施例，该布置具

33、有包括平行平面板的补偿设备；0055图10示出设置不同辐射方向的第五示例性实施例；和0056图11是根据本发明的显微镜的示例性实施例的详细视图，该显微镜具有在检测光束路径中的补偿设备。说明书CN104054014A6/7页10具体实施方式0057图1示出根据本发明的用于以SPIM显微术照明样品的情况的布置的示例性实施例。该布置具有照明物镜1，照明物镜1接收和聚焦光带2。代替光带2，也可以涉及由在光带平面上连续地前后移动的光束构成的准光带3。0058接收的光带2被照明物镜1聚焦且从照明物镜1的前透镜发出。光带2然后击中偏转设备10的第一反射表面4，且被偏转设备10的第一反射表面4偏转大约90度，

34、使得光带2进一步相对于照明物镜1的光轴成不同于零度的角度，特别是成直角传播。光带2然后击中待研究的样品5，样品5位于样品台6上浸没流体7中，照明物镜1的前透镜也浸没在浸没流体7中。0059从样品行进的检测光8仅仅示意性地示出通过与照明物镜1分离的观察物镜9引导到该图中未示出的检测器。0060观察物镜9的光轴与照明物镜的光轴平行地布置。0061照明物镜1和偏转设备10相对于彼此可移动地布置。为了改变光带2在样品5上的入射方向，使照明物镜1与其光轴垂直地成直线移置，使得从照明物镜1的前透镜出发的光带2击中在偏转设备10的第二反射表面11上，而不是在第一反射表面4上。该情况在图2中示出。0062第二

35、反射表面11布置在相对于第一反射表面4所布置的平面成90度的角度的平面中。光带2被偏转设备10的第二反射表面11偏转大约90度，使得光带2进一步相对于照明物镜1的光轴成不同于零度的角度，特别是成直角传播。然而，该传播方向与前面的传播方向相反。样品5、偏转设备10和观察物镜9的位置优选保持不变。0063图3示出根据本发明的布置的不同示例性实施例，该布置具有用于生成准光带3的光束偏转装置22。首先，横截面大体为圆形的光束13由光源12生成，光束13在通过光纤14传输之后击中光束偏转装置22的摆镜17，光纤耦合器15布置在光纤14的端部，摆镜17由电流计16驱动。光束12足够快地前后摆动，以形成准光

36、带3。0064如已经关于图1中示出的示例性实施例描述的，为了改变光带2在样品5上的入射方向，使照明物镜1与其光轴垂直地成直线移置。该情况在图4中示出。0065为了产生来自光束偏转装置22的光带3的光束偏移设计为，补偿设备未示出使光束偏转装置22，优选自动地，与照明物镜1同步地在相同方向上移动。0066图3至图10示意性地示出面检测器23，面检测器23接收从样品5行进的检测光8。被准光带3照明的样品平面通过另一光学部件18的观察物镜9成像到面检测器23的检测器区域上。检测光束路径通过反射镜19折叠。0067图5和图6中示出的另一示例性实施例与图3和图4中示出的示例性实施例的区别在于具有光纤14的

37、耦合端的光纤耦合器15也另外被补偿设备移置。该实施例对未对准特别地不敏感。0068图7和图8示出根据本发明的布置的第四示例性实施例，该布置具有用于生成准光带2的圆柱状光学部件20。首先，横截面大体为圆形的光束13由光源12生成，且光束13在通过光纤14传输之后击中圆柱状光学部件20，光纤耦合器15布置在光纤14的端部。0069同样，使用该实施例，在将要改变照明方向时，补偿设备使光纤耦合器15和圆柱状光学部件20与照明物镜1同步地成直线移置。说明书CN104054014A107/7页110070图9和图10示出根据本发明的布置的第五示例性实施例，该布置具有包括平行平面板21的补偿设备。在该实施例

38、中，在照明物镜被移置时，平行平面板21优选自动地，绕光轴旋转180度，以便改变照明方向，如上所述。0071图11是根据本发明的显微镜的示例性实施例的详细视图，该显微镜具有在检测光束路径中的补偿设备。0072用于照明的设备具有用于生成准光带3的光束偏转装置22。首先，横截面大体为圆形的光束13由光源12生成，且光束13在通过光纤14传输之后击中光束偏转装置22的摆镜17，光纤耦合器15布置在光纤14的端部，摆镜17由电流计16驱动。光束12足够快地前后摆动，以形成准光带3。0073使用显微镜的该示例性实施例，用于照明的布置没有补偿设备。换而言之，在检测光束路径中设有平行平面板21作为补偿设备，平

39、行平面板21可以绕光轴，优选与照明物镜和偏转设备的相对移动同步地旋转。旋转位置总是被选择为检测光8到达检测器23。使用该示例性实施例，照明物镜与观察物镜之间的偏移，可以说，通过由补偿设备即倾斜放置的补偿板21产生的检测光的光束偏移补偿。光束偏移的大小和方向可以通过优选自动地选择补偿板21的倾斜度和旋转位置而调节。说明书CN104054014A111/7页12图1说明书附图CN104054014A122/7页13图2说明书附图CN104054014A133/7页14图3图4说明书附图CN104054014A144/7页15图5图6说明书附图CN104054014A155/7页16图7图8说明书附图CN104054014A166/7页17图9图10说明书附图CN104054014A177/7页18图11说明书附图CN104054014A18