酰胺类化合物在制备单胺氧化酶抑制剂中的应用及化合物.pdf

1、10申请公布号CN101982170A43申请公布日20110302CN101982170ACN101982170A21申请号201010504104822申请日20101012A61K31/165200601A61K31/4164200601A61K31/235200601A61K31/167200601A61P25/24200601C07C251/16200601C07C235/06200601C07D233/2220060171申请人浙江工业大学地址310014浙江省杭州市下城区朝晖六区72发明人朱勍宋明贵74专利代理机构杭州天正专利事务所有限公司33201代理人黄美娟冷红梅54发明名称

2、酰胺类化合物在制备单胺氧化酶抑制剂中的应用及化合物57摘要本发明提供了结构如式I所示酰胺类化合物在制备单胺氧化酶抑制剂中的应用以及一类新的酰胺类化合物。本发明以式II所示的酚类化合物和和式III所示的2氯乙酰胺为反应底物，经反应得到式I所述酰胺类化合物，再以荧光检测方法检测单胺氧化酶抑制活性。该方法操作过程简便，原料来源都已商品化容易得到，并且所得到的单胺氧化酶抑制剂性质很稳定，纯度也很高99以上；与以前所研究的单胺氧化酶抑制剂的方法相比，所筛得的新型酰胺类单胺氧化酶抑制剂，结构简单，其抑制活性、对MAOA和MAOB选择性都有很大的提高。51INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专

3、利申请权利要求书3页说明书15页CN101982172A1/3页21结构如式I所示酰胺类化合物在制备单胺氧化酶抑制剂中的应用式I中R1N表示N个R1基团，N为1或2，R1为下列之一H、C1C4烷基、C1C4烷氧基、卤素、其中R3为H、OH或OCH3。2如权利要求1所述的应用，其特征在于所述酰胺类化合物为下列之一权利要求书CN101982170ACN101982172A2/3页33一种具有单胺氧化酶抑制活性的酰胺类化合物，结构如式II所示其中R2为下列之一权利要求书CN101982170ACN101982172A3/3页4权利要求书CN101982170ACN101982172A1/15页5酰胺

4、类化合物在制备单胺氧化酶抑制剂中的应用及化合物一技术领域0001本发明提供一类酰胺类化合物在制备单胺氧化酶抑制剂中的应用，以及具有单胺氧化酶抑制活性的新的酰胺类化合物。二背景技术0002单胺氧化酶MONOAMINEOXIDASE，MAO为催化单胺氧化脱氨反应的酶，可使儿茶胺类神经递质失活的酶，可用作抗抑郁征药物。0003现有单胺氧化酶抑制剂主要是某些肼类和非肼类化合物，它们抑制单胺氧化酶，表现出抗抑郁作用，包括肼类的苯乙肼、异羧肼、尼拉米，非肼类的反苯环丙胺等。该类药物通过抑制单胺氧化酶，减少儿茶酚胺的代谢灭活，促使突触部位的儿茶酚胺含量增多，产生抗抑郁作用，并有降压作用。但是这类药物除抑制单

5、胺氧化酶，对肝脏的药物代谢酶也有抑制作用，副作用较多，可产生中枢兴奋，诱使精神病发作，有肝脏毒性，引起体位性低血压。因此有必要筛选新的单胺氧化酶抑制剂，以替代现有的抗抑郁药物。三发明内容0004本发明目的是提供本发明提供一类酰胺类化合物在制备单胺氧化酶抑制剂中的应用，以及具有单胺氧化酶抑制活性的新的酰胺类化合物0005本发明采用的技术方案是0006结构如式I所示酰胺类化合物在制备单胺氧化酶抑制剂中的应用00070008式I中0009R1N表示N个R1基团，N为1或2，R1为下列之一H、C1C4烷基、C1C4烷氧基、卤素、其中R3为H、OH或OCH3。0010优选的，所述酰胺类化合物为下列之一0

6、011说明书CN101982170ACN101982172A2/15页60012说明书CN101982170ACN101982172A3/15页70013上述酰胺类化合物具有较好的单胺氧化酶抑制活性，可用于制备单胺氧化酶抑制剂，进而用于制备抗抑郁药物。0014上述酰胺类化合物由如下方法筛选获得00151构建酰胺类化合物库，方法如下以物质的量之比为10151的式II所示的酚类化合物和和式III所示的2氯乙酰胺为反应底物，在OH存在下，于DMF溶剂中，85下反应515H，反应结束后，进行质谱分析，如果2氯乙酰胺的峰消失，出现新的符合相应的酰胺类化合物的峰，则认为反应完全，生成了式I所示酰胺类化合物

7、，进行下一步操作；0016说明书CN101982170ACN101982172A4/15页80017式I、II中0018R为取代或未被取代的苯环类、杂环类或链烃类取代基；X为O，S，N或00192采用荧光探针法检测酰胺类化合物的单胺氧化酶活性取步骤1合成的酰胺类化合物，以DMSO稀释至浓度为05100M，吸取稀释液加入96孔板的反应孔中，再加入PH84硼酸缓冲液和BSA，加入适量MAOA或MAOB，混合物在38反应3H，然后加入荧光探针，再在38反应2H，用全功能荧光分光光度计EX/EM365/460NM进行检测，根据荧光值的高低判断酰胺类化合物对单胺氧化酶抑制活性的高低荧光强度越强，则抑制活

8、性越弱，反之其抑制活性就越强。0020目前有多种方法检测单胺氧化酶的活性分光光度法、放射性法、高效液相法以及荧光探针法等。分光光度法、放射性法、高效液相法等都不适合高通量的筛选而荧光探针具有很高的灵敏度和专一性，并且样品不需要复杂的提纯，因此荧光探针法被广泛应用于生物医学和生物学。0021所述荧光探针为下列之一14甲基73氨基丙基香豆素、2苯丙胺、34甲基71甲基1，2，3，6四氢吡啶4氧基香豆素。0022上述荧光探针反应机理以4甲基73氨基丙基香豆素为例该化合物其本身并无荧光，但经与单胺氧化酶作用，3氨基丙基转化为醛，接着发生消除反应后，生成了具有强烈荧光性能的4甲基7羟基香豆素。因此通过检

9、测荧光的变化就可检测MAO的活性。0023所述链烃类取代基包括甲基、甲氧基、乙氧基、羟基、卤素、吡啶基、苯甲氧基、硼酸基、二甲氨基、羟乙基甲氨基、硝基、羧基、苯乙烯基、二苯氨基、嘧啶基，醚、乙酰基、乙酰氧基等。这些链烃长度为25个碳，可以是直链也可以含有支链，支链数目为15个。0024所述苯环或链烃上的取代基包括1烷烃类取代基包括甲基、乙基；2烯烃类取代基包括苯乙烯基，其中苯乙烯基的苯环上可以含有甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、羟基、卤素、羧基、硝基、乙酰氧基等基团，这些基团位于取代基的苯环的25号位，数目为05个，取代基可以是相同的也可以是不同的；3卤素类取代基包括氟、氯、溴、碘；醚类取代基包括

10、甲氧基、乙氧基、苯甲氧基，其中苯甲氧基的苯环上可以含有甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、羟基、卤素、羧基、硝基、乙酰氧基等基团，这些基团位于取代基的苯环的25号位，数目为05个，取代基可以是相同的也可以是不同的；4芳烃类取代基包括苯基、带有取代基的苯基，其中苯基的取代基可以是甲基、甲氧基、乙氧基、羟基、卤素、吡啶基、苯甲氧基、硼酸基、带有取代基的苯基、二甲氨基、羟乙基甲氨基、硝基、羧基、苯乙烯基、二苯氨基、嘧啶基，醚、乙酰基、乙酰氧基等。这些取代基团位于苯环的25号位，取代基的数目05个，这些取代基可以是相同的也可以是不同的；5有机含氮类取代基包括硝基、二甲氨基、二苯氨基、羟乙基甲氨基；6杂环类取代

11、基包括吡啶、嘧啶等。0025所述杂环类取代基包括呋喃、吡唑、蒽环、吲哚、喹啉、苯并吡喃4酮等。杂环上的取代基包括甲基、甲氧基、羟基、硝基、卤素、羧基等。取代基的数目05个，可以是相说明书CN101982170ACN101982172A5/15页9同的也可以是不同的。0026优选的，所述步骤1中所述酰胺类化合物构建方法如下将所述酚类化合物溶解在DMF溶剂中，再加入NAOH和2氯乙酰胺，在85下摇床反应6小时，反应结束后进行质谱分析；其中酚类化合物2氯乙酰胺NAOHDMF的用量比为5MMOL5MMOL72MMOL1020ML。0027本发明还涉及一类按上述方法筛选获得的新的酰胺类化合物，结构如式I

12、I所示00280029其中R2为下列之一0030该类酰胺类化合物为未报道过的新化合物，具有较好的单胺氧化酶抑制活性，可用于制备单胺氧化酶抑制剂，进而用于制备抗抑郁药物。0031本发明的有益效果主要体现在1所构建筛选单胺氧化酶抑制剂的方法，操作过程简便，原料来源都已商品化容易得到，并且所得到的单胺氧化酶抑制剂性质很稳定，纯度也很高99以上；2与以前所研究的单胺氧化酶抑制剂的方法相比，所筛得的新型酰胺类单胺氧化酶抑制剂，结构简单，其抑制活性、对MAOA和MAOB选择性都有很大的提高。四具体实施方式0032下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此0033实施例1003

13、4反应式00350036万法00371将所述酚类化合物II溶解在DMF溶剂中，再加入NAOH和2氯乙酰胺，在85下加热反应6小时左右即可。其中酚类化合物2氯乙酰胺NAOH用量为5MMOL5MMOL72MMOL，DMF的体积为10ML。00382将步骤1构建的酰胺类化合物，以DMSO溶剂稀释至浓度为100M，吸取说明书CN101982170ACN101982172A6/15页10稀释液4L加入96孔板的反应孔中，再加入PH84硼酸缓冲液400L和BSA4L，加入MAOA20MG/ML或MAOB20MG/ML4L，混合物在38反应3H，然后加入荧光探针4甲基73氨基丙基香豆素2L10MMOL/ML

14、，再在38反应2H，用全功能荧光分光光度计EX/EM365/460NM进行检测，根据荧光值的高低判断酰胺类化合物对单胺氧化酶抑制活性的高低荧光强度越强，则抑制活性越弱，反之其抑制活性就越强。0039按照上述方法，得到的部分活性较好的酰胺类化合物的结构及其对MAOA和MAOB的抑制活性见表10040表10041说明书CN101982170ACN101982172A7/15页110042说明书CN101982170ACN101982172A8/15页120043实施例224丙烯2亚胺甲基苯氧基乙酰胺II1的制备0044说明书CN101982170ACN101982172A9/15页130045合成

15、路线如下00460047向50ML圆底烧瓶中加入4羟基苯甲醛6MMOL，NAOH72MMOL和DMF10ML，溶解完全后，加入2氯乙酰胺5MMOL，在85下搅拌6H，反应完全后320ML二氯甲烷萃取，NAHCO3饱和溶液洗，无水硫酸镁干燥，过滤，抽干，柱层析纯化，得到白色固体粉末，产率91。在将得到的白色粉末溶解在二氯甲烷中，在加入一个当量的丙炔胺反应一个小时，320ML二氯甲烷萃取，NAHCO3饱和溶液洗，无水硫酸镁干燥，过滤，抽干，柱层析纯化，得到白色固体产物，产率85。化合物表征1HNMRCDCL3165S，1H，CH，449S，2H，CH2C，465S，2H，OCH2，660570D，

16、2H，NH2，650681M，2H，CHCH，734728M，2H，CHCHESIMSM/Z217M10048实施例324丙烯2亚胺甲基苯氧基乙酰胺II2的制备00490050合成路线如下00510052向50ML圆底烧瓶中加入2羟基苯甲醛6MMOL，NAOH72MMOL和DMF10ML，溶解完全后，加入2氯乙酰胺5MMOL，在85下搅拌6H，反应完全后320ML二氯甲烷萃取，NAHCO3饱和溶液洗，无水硫酸镁干燥，过滤，抽干，柱层析纯化，得到白色固体粉末，产率88。在将得到的白色粉末溶解在二氯甲烷中，在加入一个当量的丙炔胺反应一个小说明书CN101982170ACN101982172A10/

17、15页14时，320ML二氯甲烷萃取，NAHCO3饱和溶液洗，无水硫酸镁干燥，过滤，抽干，柱层析纯化，得到白色固体产物，产率74。化合物表征1HNMRCDCL3163S，1H，CH，454S，2H，CH2C，459S，2H，OCH2，650581D，2H，NH2，707705M，2H，CHCH，789788M，2H，CHCHESIMSM/Z217M1。0053实施例424甲氧基苯氧基乙酰胺II4的制备00540055合成路线如下0056005750ML圆底烧瓶中加入4羟基苯甲醛6MMOL，NAOH72MMOL和丙酮6ML，溶解完全后，加入2氯乙酰胺5MMOL，在85下搅拌6H，反应完全后320

18、ML二氯甲烷萃取，NAHCO3饱和溶液洗，无水硫酸镁干燥，过滤，抽干，柱层析纯化，得到白色固体粉末，产率92。化合物表征1HNMRCDCL3362S，3H，CH3，483S，2H，OCH2，649580D，2H，NH2，707705M，2H，CHCH，790788M，2H，CHCHESIMSM/Z1821M1。0058实施例52苯亚砜基乙酰胺I1的制备00590060合成路线如下00610062具体过程参考实施例4，只是底物4羟基苯甲醛改为苯巯酚，然后再将产物溶解在二氯甲烷中用过量双氧水氧化3小时即可得到化合物I1。化合物表征1HNMRCDCL3350347M，2H，CH2，567451D，2

19、H，NH2，758754M，3H，CH，768758M，2H，CHESIMSM/Z1844M1。0063实施例6化合物II13的制备0064说明书CN101982170ACN101982172A11/15页150065合成路线如下00660067将24丙烯2亚胺甲基苯氧基乙酰胺10MMOL溶解在30ML的无水二氯甲烷中，再向溶剂中加入4MMOL的NABH4，室温下搅拌30MIN即可。反应完全后320ML二氯甲烷萃取，NAHCO3饱和溶液洗，无水硫酸镁干燥，过滤，抽干，柱层析纯化，得到白色固体粉末，产率95。0068化合物表征00691HNMRCDCL3726734D，2H，ARH，691692

20、M，2H，ARH，569，654D，2H，NH2，465S，2H，OCH3，450S，2H，NCH2，412S，2H，CH2，165S，1H，CHESIMSM/Z219M1。0070实施例7化合物II14的制备00710072合成路线如下00730074将1MMOL的24丙烯2亚胺甲基苯氧基乙酰胺溶解30ML的无水二氯甲烷中，然后再向溶液中加入4MMOL的NABH4室温下反应30MIN中即可。反应完全后320ML二氯甲烷萃取，NAHCO3饱和溶液洗，无水硫酸镁干燥，过滤，抽干，柱层析纯化，得到白色固体粉末，产率91。0075化合物表征00761HNMRCDCL3736737D，2H，ARH，6

21、93702M，2H，ARH，579，664D，2H，NH2，465S，2H，OCH3，485S，2H，NCH2，432S，2H，CH2，195S，1H，CHESIMSM/Z219M1。0077实施例8化合物II15的制备0078说明书CN101982170ACN101982172A12/15页160079合成路线如下00800081将1MMOL的产物8溶解在30ML的二氯甲烷中，然后向反应溶液中缓慢滴加4MMOL的乙二胺，反应30MIN钟后，再向其加入1MMOL的NBS，反应过夜。反应完全后320ML二氯甲烷萃取，NAHCO3饱和溶液洗，无水硫酸镁干燥，过滤，抽干，柱层析纯化，得到白色固体粉末

22、，产率71。0082化合物表征00831HNMRCDCL3D31HNMRCDCL3D3382S，4H，2CH2，396BR，1H，NH，691731M，4H，ARH，482S，2H，CH2，597，682D，2H，NH2ESIMSM/Z220M1。0084实施例9化合物II16的制备00850086合成路线如下00870088将1MMOL的产物9溶解在30ML的二氯甲烷中，然后向反应溶液中缓慢滴加4MMOL的乙二胺，反应30MIN钟后，再向其加入1MMOL的NBS，反应过夜。反应完全后320ML二氯甲烷萃取，NAHCO3饱和溶液洗，无水硫酸镁干燥，过滤，抽干，柱层析纯化，得到白色固体粉末，产率

23、65。0089化合物表征00901HNMRCDCL3D3230S，3H，CH3，237S，3H，CH3，359S，3H，CH2，567，662D，2H，NH2，699714M，3H，ARHESIMSM/Z220M10091实施例10化合物II24的制备0092说明书CN101982170ACN101982172A13/15页170093合成路线如下00940095向50ML圆底烧瓶中加入4羟基苯甲醛6MMOL，NAOH72MMOL和DMF10ML，溶解完全后，加入2氯乙酰胺5MMOL，在85下搅拌6H，反应完全后320ML二氯甲烷萃取，NAHCO3饱和溶液洗，无水硫酸镁干燥，过滤，抽干，柱层析

24、纯化，得到白色固体粉末，产率91。在将得到的白色粉末溶解在二氯甲烷中，在加入一个当量的苄胺反应一个小时，320ML二氯甲烷萃取，NAHCO3饱和溶液洗，无水硫酸镁干燥，过滤，抽干，柱层析纯化，得到白色固体产物，产率780096化合物表征00971HNMRCDCL3D3689735M，9H，ARH，585，656D，2H，NH2，450S，2H，CH2，381S，2H，CH2，377S，2H，CH2ESIMSM/Z269M1。0098实施例11化合物II25的制备00990100合成路线如下01010102将1MMOL的化合物24先溶解30ML的无水二氯甲烷中，然后再向溶液中加入4MMOL的NA

25、BH4室温下反应30MIN中即可。反应完全后320ML二氯甲烷萃取，NAHCO3饱和溶液洗，无水硫酸镁干燥，过滤，抽干，柱层析纯化，得到白色固体粉末，产率78。化合物表征01031HNMRCDCL3D3706715M，9H，ARH，585，656D，2H，NH2，483S，2H，CH2，381S，4H，2CH2，377S，2H，CH2，187BR，1H，NHESIMSM/Z271M1。0104实施例12化合物II26的制备说明书CN101982170ACN101982172A14/15页1801050106合成路线如下01070108向50ML圆底烧瓶中加入2羟基苯甲醛6MMOL，NAOH72

26、MMOL和DMF10ML，溶解完全后，加入2氯乙酰胺5MMOL，在85下搅拌6H，反应完全后320ML二氯甲烷萃取，NAHCO3饱和溶液洗，无水硫酸镁干燥，过滤，抽干，柱层析纯化，得到白色固体粉末，产率91。在将得到的白色粉末溶解在二氯甲烷中，在加入一个当量的苄胺反应一个小时，320ML二氯甲烷萃取，NAHCO3饱和溶液洗，无水硫酸镁干燥，过滤，抽干，柱层析纯化，得到白色固体产物，产率73。0109化合物表征01101HNMRCDCL3D3682743M，9H，ARH，565，637D，2H，NH2，483S，2H，CH2，398S，2H，CH2，812S，1H，CHESIMSM/Z269M1

27、。0111实施例13化合物II27的制备01120113合成路线如下0114说明书CN101982170ACN101982172A15/15页190115将1MMOL的化合物II26先溶解30ML的无水二氯甲烷中，然后再向溶液中加入4MMOL的NABH4室温下反应30MIN中即可。反应完全后320ML二氯甲烷萃取，NAHCO3饱和溶液洗，无水硫酸镁干燥，过滤，抽干，柱层析纯化，得到白色固体粉末，产率76。0116化合物表征01171HNMRCDCL3D3675715M，9H，ARH，585，656D，2H，NH2，462S，2H，CH2，371S，4H，2CH2，367S，2H，CH2，189BR，1H，NHESIMSM/Z271M1。说明书CN101982170A