AM真菌菌剂及其应用方法.pdf

1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910263414.6 (22)申请日 2019.04.02 (71)申请人 亿利资源集团有限公司 地址 017000 内蒙古自治区鄂尔多斯市东 胜区鄂尔多斯西街30号 申请人 亿利生态修复股份有限公司 (72)发明人 魏文君王勇张瑾董志新 苏贞峰 (74)专利代理机构 北京智信禾专利代理有限公 司 11637 代理人 吴肖肖 (51)Int.Cl. C12N 1/14(2006.01) A01G 18/10(2018.01) C12R 1/645(2006.01) (54

2、)发明名称 一种AM真菌菌剂及其应用方法 (57)摘要 本申请提供一种AM真菌菌剂及其应用方法， 涉及矿山修复技术领域。 一种AM真菌菌剂， 包括 AM真菌培养基和宿主植物根系， AM真菌培养基包 括菌种培养基和AM真菌， 菌种培养基包括以下重 量份数的组分： 沸石2050份， 蛭石530份， 河 沙530份， 保水剂25份。 上述AM真菌菌剂的应 用方法， 包括如下步骤： S1在种植坑内依次加入 矿山基质改良剂、 矿山土壤和AM真菌菌剂； S2将 苗木移栽至种植坑内， 再次加入矿山土壤， 并进 行AM真菌浸染种植。 本申请可以保证扩繁菌种在 半干旱矿区的适应性， 有效提高菌剂使用后菌种 的活

3、性及产孢量； 同时， 可以显著改善矿区土地 的养分及水分状况， 提高植被的生物量， 加快矿 区植被的恢复速率与质量。 权利要求书1页 说明书10页 附图1页 CN 110066738 A 2019.07.30 CN 110066738 A 1.一种AM真菌菌剂， 其特征在于： 包括AM真菌培养基和宿主植物根系， 所述AM真菌培养 基包括菌种培养基和AM真菌， 所述菌种培养基包括以下重量份数的组分： 沸石2050份， 蛭 石530份， 河沙530份， 保水剂25份。 2.根据权利要求1所述的AM真菌菌剂， 其特征在于： 所述宿主植物根系包括玉米、 高粱、 苜蓿、 白车轴草、 三叶草、 车前中任意

4、两种或三种的根系。 3.根据权利要求1所述的AM真菌菌剂， 其特征在于： 所述AM真菌为根内根孢囊霉。 4.根据权利要求1所述的AM真菌菌剂， 其特征在于： 所述保水剂包括无机保水剂钠基膨 润土、 有机保水剂聚丙烯酸钠、 聚丙烯酸钾、 淀粉接枝丙烯酸盐和复合型保水剂中的任意一 种。 5.一种如权利要求14任一项所述的AM真菌菌剂的应用方法， 其特征在于， 包括如下 步骤： S1.在种植坑内依次加入矿山基质改良剂、 矿山土壤和AM真菌菌剂； S2.将苗木移栽至种植坑内， 再次加入矿山土壤， 并进行AM真菌浸染种植。 6.根据权利要求5所述的AM真菌菌剂的应用方法， 其特征在于： 所述步骤S1中的

5、矿山基 质改良剂， 包括以下重量份数的组分： 保水剂510份， 膨润土1540份， 煤渣2040份， 动 物粪便1530份。 7.根据权利要求6所述的AM真菌菌剂的应用方法， 其特征在于： 所述保水剂包括无机保 水剂钠基膨润土、 有机保水剂聚丙烯酸钠、 聚丙烯酸钾、 淀粉接枝丙烯酸盐和复合型保水剂 中的任意一种。 8.根据权利要求6所述的AM真菌菌剂的应用方法， 其特征在于： 所述动物粪便包括猪 粪、 牛粪、 羊粪、 鸡粪、 鸭粪、 鹅粪中的一种或几种。 9.根据权利要求5所述的AM真菌菌剂的应用方法， 其特征在于， 所述步骤S1， 包括： 在种植坑内加入矿山基质改良剂至种植坑深度的1/101

6、/6； 在种植坑内加入矿山土壤， 其中， 矿山土壤的加入量与所述矿山基质改良剂的加入量 相同； 在种植坑内撒入AM真菌菌剂， 其中， 所述矿山基质改良剂、 矿山土壤及AM真菌菌剂的总 高度至种植坑深度的1/3处。 权利要求书 1/1 页 2 CN 110066738 A 2 一种AM真菌菌剂及其应用方法 技术领域 0001 本申请涉及矿山修复技术领域， 特别涉及一种AM真菌菌剂及其应用方法。 背景技术 0002 矿产资源的开发和利用为我国经济的高速发展和城镇化建设做出了极大的贡献， 但其粗放式过度开发也引发了一系列环境问题， 严重破坏了当地的生态环境。 造成沙尘天 气、 水土流失， 并引发滑坡

7、、 塌方等自然地质灾害， 导致生态系统退化甚至崩溃， 严重威胁周 围地区的可持续发展以及区域生态安全。 恢复和重建退化的矿区生态系统迫在眉睫。 0003 植被恢复是矿山生态修复的重要环节， 植被恢复不仅对废弃地起着构建初始植被 的作用， 还能改善土壤结构、 养分状况和微生物环境， 促进整个生态系统结构和功能的恢 复。 矿区土壤大部分受到扰动， 遭受机械挖掘或搬运的破坏， 其物理、 化学和生物活性较差， 且其土壤结构遭受破坏， 土地肥力差， 水分不足， 丧失生产力， 其生物、 微生物生长环境急剧 恶化， 植被难以成活或者成活之后难以郁闭成林。 AM真菌作为一种可以与植物根系建立共 生关系的菌种，

8、 能够帮助植物吸收水分和养分， 特别是磷和微量元素的吸收， 增强植物抗 病、 抗逆、 抗旱性， 减少氮磷的流失， 提高植物对重金属污染的抵御能力； AM真菌在矿山修复 领域， 应用潜力巨大。 0004 目前公开的关于AM真菌扩繁及应用的方法大多并非针对矿区。 申请号为 CN00132468.3， 名称为 “以玻璃珠为培养基质的丛枝菌根真菌的培养” 的专利申请文件， 提 供了一种特定的培养装置及培养介质； 申请号为CN02159722.7， 名称为 “生产丛枝菌根真菌 菌剂的方法” 的专利申请文件， 将多种宿主植物混播混作在混合的培养基质上来生产AM真 菌等； 申请号为CN20161099084

9、9.7， 名称为 “一种煤矿区丛枝菌根真菌菌剂的扩繁方法” 的 专利申请文件， 主要是在培养基质中加入了风化煤， 基质易得。 但是， 这些培养AM真菌的方 法无法保证真菌在矿区恶劣的生存条件下最大限度的发挥出作用， 且更适合单一类型矿区 的应用， 应用范围受限。 发明内容 0005 有鉴于此， 本申请实施例提供了一种AM真菌菌剂及其应用方法， 以解决现有技术 中存在的技术缺陷。 0006 一种AM真菌菌剂， 包括AM真菌培养基和宿主植物根系， AM真菌培养基包括菌种培 养基和AM真菌， 菌种培养基包括以下重量份数的组分： 沸石2050份， 蛭石530份， 河沙5 30份， 保水剂25份。 00

10、07 进一步地， 宿主植物根系包括玉米、 高粱、 苜蓿、 白车轴草、 三叶草、 车前中任意两 种或三种的根系。 0008 进一步地， AM真菌为根内根孢囊霉。 0009 进一步地， 保水剂包括无机保水剂钠基膨润土、 有机保水剂聚丙烯酸钠、 聚丙烯酸 钾、 淀粉接枝丙烯酸盐和复合型保水剂中的任意一种。 说明书 1/10 页 3 CN 110066738 A 3 0010 一种上述AM真菌菌剂的应用方法， 包括如下步骤： 0011 S1.在种植坑内依次加入矿山基质改良剂、 矿山土壤和AM真菌菌剂； 0012 S2.将苗木移栽至种植坑内， 再次加入矿山土壤， 并进行AM真菌浸染种植。 0013 进一

11、步地， 步骤S1中的矿山基质改良剂， 包括以下重量份数的组分： 保水剂510 份， 膨润土1540份， 煤渣2040份， 动物粪便1530份。 0014 进一步地， 保水剂包括无机保水剂钠基膨润土、 有机保水剂聚丙烯酸钠、 聚丙烯酸 钾、 淀粉接枝丙烯酸盐和复合型保水剂中的任意一种。 0015 进一步地， 动物粪便包括猪粪、 牛粪、 羊粪、 鸡粪、 鸭粪、 鹅粪中的一种或几种。 0016 进一步地， 所述步骤S1， 包括： 0017 在种植坑内加入矿山基质改良剂至种植坑深度的1/101/6； 0018 在种植坑内加入矿山土壤， 其中， 矿山土壤的加入量与所述矿山基质改良剂的加 入量相同； 00

12、19 在种植坑内撒入AM真菌菌剂， 其中， 所述矿山基质改良剂、 矿山土壤及AM真菌菌剂 的总高度至种植坑深度的1/3处。 0020 本发明所述的方法与现有技术相比具有如下优点： 0021 1.保证了扩繁菌种在半干旱矿区的适应性， 可以有效提高菌剂使用后菌种的活性 及产孢量； 0022 2.加入矿山基质改良剂并接种AM真菌后可以显著改善矿区土地的养分及水分状 况， 提高植被的生物量， 加快矿区植被的恢复速率与质量； 0023 3.适用于多种类型的矿区， 应用范围广。 附图说明 0024 图1是本申请AM真菌菌剂应用方法的步骤示意图。 具体实施方式 0025 下面是对本申请的具体实施方式进行描述

13、。 0026 本申请中的AM真菌， 是一类土壤真菌， 能够与80以上的陆地植物根系建立共生 关系， 形成丛枝菌根， AM真菌在与植物形成菌根之后， 可以促进根系对土壤矿质营养的吸 收、 改善植株的水分代谢状况、 提高植株对重金属胁迫的抗/耐性、 增强植株的抗病性等。 0027 本申请中的沸石， 是沸石族矿物的总称， 是一种含水的碱或碱土金属铝硅酸盐矿 物， 沸石具有离子交换性、 吸附分离性、 催化性、 稳定性、 化学反应性、 可逆的脱水性、 电导性 等。 0028 本申请中的蛭石， 是一种天然、 无机， 无毒的矿物质， 在高温作用下会膨胀的矿物， 属于硅酸盐。 0029 本申请中的河沙， 是天

14、然石在自然状态下， 经水的作用力长时间反复冲撞、 摩擦产 生的， 其成份较为复杂、 表面有一定光滑性， 杂质含量多的非金属矿石。 0030 本申请中的保水剂， 使用的是高吸水性树脂， 是一种吸水能力特别强的功能高分 子材料， 无毒无害， 反复释水、 吸水， 因此农业上人们把它比喻为微型水库。 同时， 它还能 吸收肥料、 农药、 并缓慢释放， 增加肥效、 药效。 说明书 2/10 页 4 CN 110066738 A 4 0031 本申请中的玉米， 是禾本科玉蜀黍属一年生草本植物， 是重要的粮食作物和饲料 作物， 也是全世界总产量最高的农作物， 含有丰富的蛋白质、 脂肪、 维生素、 微量元素、

15、纤维 素等。 0032 本申请中的高粱， 是禾本科一年生草本植物， 喜温、 喜光， 并有一定的耐高温特性。 0033 本申请中的苜蓿， 是苜蓿属植物的通称， 俗称金花菜， 是一种多年生草本植物。 苜 蓿种类繁多， 多是野生的草本植物， 似三叶草， 耐干旱， 耐冷热， 产量高而质优， 又能改良土 壤。 0034 本申请中的白车轴草， 又名白三叶、 白花三叶草、 白三草、 车轴草、 荷兰翘摇等， 多 年生草本植物， 适应性广， 抗热抗寒性强， 可在酸性土壤中旺盛生长， 也可在砂质土中生长， 还具有一定的观赏价值。 白车轴草的主根和侧根上着生有大量根瘤， 能固定空气中的氮素， 种植过程中不需施用氮肥

16、， 只需施些磷钾肥， 以使枝叶繁茂。 0035 本申请中的三叶草， 是多种拥有三出指状复叶的草本植物的通称， 主要包括三类： 豆科的车轴草属和苜蓿属、 酢浆草科的酢浆草属中的某些种类。 三叶草能增加土壤有机质， 有利培肥地力， 能降低夏季土壤温度， 稳定果园空气湿度， 利于夏季果树生长， 三叶草还能 保持良好的土壤结构， 由于三叶草良好的覆盖作用， 可以有效避免雨水对土壤的冲涮和沉 积作用， 保持土壤结构良好， 有利于土壤微生物的活动和果树根系的新陈代谢， 有利于各种 肥料的分解和有害物质的降解。 0036 本申请中的车前， 为二年生或多年生草本植物。 车前草适应性强， 耐寒、 耐旱， 对土

17、壤要求不严， 在温暖、 潮湿、 向阳、 沙质沃土上能生长良好。 0037 本申请中的膨润土， 是以蒙脱石为主要矿物成分的非金属矿产。 膨润土可分为钠 基膨润土(碱性土)、 钙基膨润土(碱土性土)、 天然漂白土(酸性土或酸性白土)， 其中钙基膨 润土又包括钙钠基和钙镁基等。 膨润土具有强的吸湿性和膨胀性， 可吸附815倍于自身体 积的水量， 体积膨胀可达数倍至30倍； 在水介质中能分散成胶凝状和悬浮状， 这种介质溶液 具有一定的黏滞性、 触变性和润滑性； 有较强的阳离子交换能力； 对各种气体、 液体、 有机物 质有一定的吸附能力， 最大吸附量可达5倍于自身的重量； 它与水、 泥或细沙的掺和物具有

18、 可塑性和黏结性； 具有表面活性的酸性漂白土能吸附有色离子。 0038 本申请中的煤渣， 是工业固体废物的一种， 主要成分是二氧化硅、 氧化铝、 氧化铁、 氧化钙、 氧化镁等。 0039 本申请中的动物粪便， 又俗称大便， 是动物的大肠排遗物， 粪便的四分之一是水 分， 其余大多是蛋白质、 无机物、 脂肪、 未消化的食物纤维、 脱了水的消化液残余、 以及从肠 道脱落的细胞和死掉的细菌， 还有维生素K、 维生素B。 0040 实施例1 0041 一种AM真菌菌剂， 包括AM真菌培养基和宿主植物根系， AM真菌培养基包括菌种培 养基和AM真菌， 菌种培养基包括以下重量份数的组分： 沸石2050份，

19、 蛭石530份， 河沙5 30份， 保水剂25份。 0042 进一步地， 宿主植物根系包括能够与AM真菌建立共生关系的植物的根系。 宿主植 物根系包括玉米、 高粱、 苜蓿、 白车轴草、 三叶草、 车前中任意两种或三种的根系。 0043 进一步地， AM真菌为Rhizophagus intraradices根内根孢囊霉。 0044 进一步地， 保水剂包括无机保水剂钠基膨润土、 有机保水剂聚丙烯酸钠、 聚丙烯酸 说明书 3/10 页 5 CN 110066738 A 5 钾、 淀粉接枝丙烯酸盐和复合型保水剂中的任意一种。 0045 上述AM真菌菌剂的培养方法， 包括以下步骤： 0046 (1)按照

20、比例将沸石、 蛭石、 河沙以及保水剂混合均匀， 并配制成菌种培养基， 菌种 培养基在使用前用60Co射线辐照灭菌； 0047 (2)选取合适的宿主植物种子， 并用10H2O2浸泡15min， 去离子水冲洗至完全冲洗 干净， 随后在灭菌的滤纸上萌发， 25的黑暗条件下催芽； 0048 (3)将灭菌完成的菌种培养基加入至盆栽中， 并放入若干粒萌发催芽后的宿主植 物种子， 撒入市面购买的纯菌种Rhizophagus intraradices根内根孢囊霉， 按照已放入组 分总质量的15加入去离子水， 最后在种子上层覆盖1cm左右菌种培养基， 期间视情况浇 水， 且每两周浇一次营养液； 0049 (4)

21、培养46个月， 收集培养后得到的AM真菌培养基和宿主植物根系作为扩繁得 到的AM真菌菌剂。 0050 本申请创新的在菌种培养基中加入保水剂， 保水剂虽不溶于水， 但能吸收相当自 身重量成百倍的水， 并可有效抑制水分蒸发， 当土壤中渗入保水剂后， 可以在很大程度上抑 制水分的蒸发， 从而提高土壤饱和含水量， 降低土壤的饱和导水率， 从而减缓土壤释放水的 速度， 减少土壤水分的渗透和流失， 达到保水的目的。 0051 同时， 保水剂还可以刺激作物根系的生长和发育， 使根的长度增加、 条数增多， 在 干旱条件下保持较好长势。 由于保水剂具有吸收和保存水分的作用， 因此可以将可溶性化 肥、 农药等农作

22、物生长所需的营养物质固定其中， 在一定程度上减少了可溶性养分的流失， 提高化肥、 农药等的利用率， 改善农作物的长势情况。 0052 保水剂具有良好的保温性能， 使用保水剂之后， 可利用吸收的水分保持部分白天 光照产生的热能调节夜间温度， 使得土壤昼夜温差减小。 0053 保水剂还可以改善土壤结构， 保水剂施入土壤中， 随着吸水膨胀和失水收缩的规 律性变化， 可使周围土壤由紧实变为疏松， 孔隙增大， 从而在一定程度上改善土壤的通透状 况。 0054 实施例2 0055 一种上述AM真菌菌剂的应用方法， 参见图1， 包括如下所述的步骤： 0056 S1.在种植坑内依次加入矿山基质改良剂、 矿山土

23、壤和AM真菌菌剂； 0057 S2.将苗木移栽至种植坑内， 再次加入矿山土壤， 并进行AM真菌浸染种植。 0058 进一步地， 步骤S1中的矿山基质改良剂， 包括以下重量份数的组分： 保水剂510 份， 膨润土1540份， 煤渣2040份， 动物粪便1530份。 0059 进一步地， 保水剂包括无机保水剂钠基膨润土、 有机保水剂聚丙烯酸钠、 聚丙烯酸 钾、 淀粉接枝丙烯酸盐和复合型保水剂中的任意一种。 0060 进一步地， 动物粪便包括猪粪、 牛粪、 羊粪、 鸡粪、 鸭粪、 鹅粪中的一种或几种。 0061 进一步地， 在种植坑内加入矿山基质改良剂至种植坑深度的1/101/6； 0062 在种植

24、坑内加入矿山土壤， 其中， 矿山土壤的加入量与所述矿山基质改良剂的加 入量相同； 0063 在种植坑内撒入AM真菌菌剂， 其中， 所述矿山基质改良剂、 矿山土壤及AM真菌菌剂 的总高度至种植坑深度的1/3处。 说明书 4/10 页 6 CN 110066738 A 6 0064 本申请中的矿山基质改良剂中同样的加入了保水剂， 矿山基质改良剂与AM真菌菌 剂先后加入到种植坑中， 双份的保水剂可以发挥双重的保水作用， 可以为AM真菌发挥其促 进植物根系对营养成分的吸收等的作用提供了双份的保障。 0065 进一步地， 保水剂还可以与AM真菌菌剂发挥协同作用， 保水剂可以有效改善土壤 环境， 保证土壤

25、中的含水量， 减少土壤水分的渗透、 流失， 从而减少土壤中营养成分的流失， 进而增强AM真菌菌剂对土壤及苗木根系的作用效果。 0066 更进一步地， 保水剂的存在， 可以有效扩大本申请的适用范围， 使得AM真菌菌剂不 再只适合单一类型的矿区， 同时可以保证在矿区恶劣的生存条件下最大限度的发挥出作 用， 提高植被的生物量， 加快矿区植被的恢复速率与质量。 0067 试验例1 0068 本试验例同时设置处理组和对照组， 其中， 处理组采用如下所述方法进行处理： 0069 (1)配制菌种培养基， 包括以下重量份数的组分： 沸石45份、 蛭石25份、 河沙25份、 保水剂5份， 混合均匀， 本实施例中

26、选用的保水剂为聚丙烯酸钾， 菌种培养基在使用前用60Co 射线辐照灭菌； 0070 选取玉米种子和苜蓿种子作为宿主植物种子， 并用10H2O2浸泡15min， 去离子水 冲洗8次至完全冲洗干净， 随后在灭菌的滤纸上萌发， 25的黑暗条件下催芽。 0071 将灭菌完成的AM真菌培养基加入至盆栽的2/3处， 放入萌发好的4粒玉米种子和15 粒苜蓿种子， 撒入市面购买的纯菌种Rhizophagusintraradices丛枝菌根真菌， 按照已放入 组分总质量的15加入去离子水， 最后在种子上层覆盖1cm左右菌种培养基， 期间视干旱情 况每35天浇一次水， 每两周浇一次pH为5.56.0的霍格兰营养液

27、(如表1所示)； 0072 表1.霍格兰营养液配制成分表 说明书 5/10 页 7 CN 110066738 A 7 0073 0074 0075 注： 最右一列表示配置1L营养液所需的母液(ml)。 0076 (2)培养5个月， 收集培养后的AM真菌培养基和宿主植物根系作为扩繁得到的AM真 菌菌剂。 0077 (3)将沙地柏的移植苗在半干旱矿区进行AM真菌侵染种植。 0078 根据沙地柏移植苗的根系大小挖好种植坑， 尺寸为50cm(直径)*40cm(高)， 首先施 入矿山基质改良剂至种植坑底面以上4cm处， 再施入与矿山基质改良剂相同量的矿山土壤， 随后撒入AM真菌菌剂至种植坑深度的1/3处

28、， 将2030cm的经保水剂浸泡根系的沙地柏移 植苗移栽至种植坑内， 回填矿山土壤， 并用脚将土壤踩实， 浇一次透水， 5个月后再次补充施 加AM真菌菌剂。 0079 其中， 本实施例中采用的矿山基质改良剂， 包括以下重量份数的组分： 聚丙烯酸钾 5份， 膨润土30份， 煤渣40份， 鹅粪25份。 0080 对照组采用传统植被恢复方法， 在处理过程中仅添加普通矿山基质改良剂， 而不 施加AM真菌菌剂， 其他步骤及条件均与上述处理组相同。 说明书 6/10 页 8 CN 110066738 A 8 0081 沙地柏移植苗之间的株行距为20cm*30cm。 0082 在沙地柏移植一年后， 对沙地柏

29、根系的浸染情况及生长状况进行检测， 得到表2所 示数据。 0083 表2.不同处理下沙地柏根系的侵染频度和侵染强度 0084 0085 0086 从表2可以看出， 处理组沙地柏根系的浸染频度和浸染强度明显高于对照组， 即采 用本发明所述的新型矿山植被恢复方法， 沙地柏根系的浸染频度和强度药显著高于传统方 法， 这说明处理过程中施入的AM真菌菌剂浸染了沙地柏根系， 并形成了互惠互利的共生体， 而在传统方法没有施入AM真菌菌剂的情况下， 也存在少量侵染， 这是由于矿山土地本身存 在土著AM真菌， 但真菌数量较少。 0087 沙地柏生长一年左右， 对其成活率及长势情况进行统计， 发现传统方法种植的沙

30、 地柏成活率相对较低， 只有5065左右， 且叶子部分枯黄； 而采用本发明方法种植的沙 地柏成活率显著提高至95以上， 且这部分沙地柏长势良好， 枝繁叶茂。 由此可见， 本发明 扩繁的AM真菌菌种增殖能力强， 其根外菌丝能够迅速与沙地柏根系建立共生关系， 能够较 好地适应矿山的环境， 提高苗木成活率， 同时， 可以与施入的保水剂和矿山基质改良剂一起 改善矿区土地的养分及水分状况， 提高植被的生物量， 有利于矿区植被的恢复。 0088 试验例2 0089 本试验例同时设置处理组和对照组， 其中， 处理组采用如下所述方法进行处理： 0090 (1)配制菌种培养基， 包括以下重量份数的组分： 沸石4

31、0份、 蛭石30份、 河沙27份、 保水剂3份， 混合均匀， 本实施例中选用的保水剂为钠基膨润土， 菌种培养基在使用前用60Co 射线辐照灭菌； 0091 选取玉米种子和车前种子作为宿主植物种子， 并用10H2O2浸泡15min， 去离子水 冲洗8次至完全冲洗干净， 随后在灭菌的滤纸上萌发， 25的黑暗条件下催芽。 0092 将灭菌完成的AM真菌培养基加入至盆栽的2/3处， 放入萌发好的4粒玉米种子和15 粒车前种子， 撒入市面购买的纯菌种Rhizophagusintraradices丛枝菌根真菌， 按照已放入 组分总质量的15加入去离子水， 最后在种子上层覆盖1cm左右菌种培养基， 期间视干

32、旱情 况每35天浇一次水， 每两周浇一次pH为5.56.0的霍格兰营养液， 霍格兰营养液的配制 如实施例1中的表1所示。 0093 (2)培养5个月， 收集培养后的AM真菌培养基和宿主植物根系作为扩繁得到的AM真 菌菌剂。 0094 (3)将沙地柏的移植苗在半干旱矿区进行AM真菌侵染种植。 说明书 7/10 页 9 CN 110066738 A 9 0095 根据沙地柏移植苗的根系大小挖好种植坑， 尺寸为50cm(直径)*40cm(高)， 首先施 入矿山基质改良剂至种植坑底面以上4cm处， 再施入与矿山基质改良剂相同量的矿山土壤， 随后撒入AM真菌菌剂至种植坑深度的1/3处， 将2030cm的

33、经保水剂浸泡根系的沙地柏移 植苗移栽至种植坑内， 回填矿山土壤， 并用脚将土壤踩实， 浇一次透水， 5个月后再次补充施 加AM真菌菌剂。 0096 其中， 本实施例中采用的矿山基质改良剂， 包括以下重量份数的组分： 钠基膨润土 7份， 膨润土33份， 煤渣30份， 鸭粪30份。 0097 对照组采用传统植被恢复方法， 在处理过程中仅添加普通矿山基质改良剂， 而不 施加AM真菌菌剂， 其他步骤及条件均与上述处理组相同。 0098 沙地柏移植苗之间的株行距为20cm*30cm。 0099 在沙地柏移植一年后， 对沙地柏根系的浸染情况及生长状况进行检测， 得到表3所 示数据。 0100 表3.不同处

34、理下沙地柏根系侵染频度和侵染强度 0101 0102 从表3可以看出， 在沙地柏移栽一年后， 处理组的浸染频度和浸染强度都明显高于 对照组， 采用本发明的方法， 沙地柏根系的浸染频度和浸染强度都达到了85以上， 而采用 传统方法的沙地柏根系的浸染频度和浸染强度仅仅在10左右， 说明施入的AM真菌菌剂可 以与沙地柏根系形成互利互惠的共生体。 0103 同时， 经过对沙地柏的成活数量和长势情况进行统计， 发现采用本发明的方法种 植的沙地柏成活率在95以上， 长势良好， 而传统方法种植的沙地柏部分叶子枯黄， 成活率 相对较低， 只有60左右。 由此可见， 本发明的方法更加有利于矿山植被的成活及矿山土

35、壤 的恢复。 0104 试验例3 0105 本试验例同时设置处理组和对照组， 其中， 处理组采用如下所述方法进行处理： 0106 (1)配制菌种培养基， 包括以下重量份数的组分： 沸石50份、 蛭石25份、 河沙20份、 保水剂5份， 混合均匀， 本实施例中选用的保水剂为聚丙烯酸钠， 菌种培养基在使用前用60Co 射线辐照灭菌； 0107 选取高粱种子和苜蓿种子作为宿主植物种子， 并用10H2O2浸泡15min， 去离子水 冲洗8次至完全冲洗干净， 随后在灭菌的滤纸上萌发， 25的黑暗条件下催芽。 0108 将灭菌完成的AM真菌培养基加入至盆栽的2/3处， 放入萌发好的4粒高粱种子和15 粒苜

36、蓿种子， 撒入市面购买的纯菌种Rhizophagusintraradices丛枝菌根真菌， 按照已放入 组分总质量的15加入去离子水， 最后在种子上层覆盖1cm左右菌种培养基， 期间视干旱情 况每35天浇一次水， 每两周浇一次pH为5.56.0的霍格兰营养液， 霍格兰营养液的配制 说明书 8/10 页 10 CN 110066738 A 10 如实施例1中的表1所示。 0109 (2)培养6个月， 收集培养后的AM真菌培养基和宿主植物根系作为扩繁得到的AM真 菌菌剂。 0110 (3)将沙地柏的移植苗在半干旱矿区进行AM真菌侵染种植。 0111 根据沙地柏移植苗的根系大小挖好种植坑， 尺寸为5

37、0cm(直径)*40cm(高)， 首先施 入矿山基质改良剂至种植坑底面以上4cm处， 再施入与矿山基质改良剂相同量的矿山土壤， 随后撒入AM真菌菌剂至种植坑深度的1/3处， 将2030cm的经保水剂浸泡根系的沙地柏移 植苗移栽至种植坑内， 回填矿山土壤， 并用脚将土壤踩实， 浇一次透水， 5个月后再次补充施 加AM真菌菌剂。 0112 其中， 本实施例中采用的矿山基质改良剂， 包括以下重量份数的组分： 聚丙烯酸钠 10份， 膨润土30份， 煤渣20份， 鸡粪40份。 0113 对照组采用传统植被恢复方法， 在处理过程中仅添加普通矿山基质改良剂， 而不 施加AM真菌菌剂， 其他步骤及条件均与上述

38、处理组相同。 0114 沙地柏移植苗之间的株行距为20cm*30cm。 0115 在沙地柏移植一年后， 对沙地柏根系的浸染情况及生长状况进行检测， 得到表4所 示数据。 0116 表4.不同处理下沙地柏根系侵染频度和侵染强度 0117 0118 结果趋势同上述试验例1和试验例2， 在沙地柏移栽一年后， 采用本发明的方法达 到的效果明显优于传统方法。 如表4所示， 采用本发明方法的处理组沙地柏， AM真菌侵染频 度90以上， 侵染强度也达到85以上， 而沙地柏的死亡率更是不到5。 采用传统方法种 植的对照组， 依赖于土著AM真菌， 沙地柏根系的侵染频度约14， 而侵染强度维持在10左 右， 沙地

39、柏植株生长不良， 成活率约60。 两种矿山植被恢复方式的对比， 充分说明了施入 的AM真菌菌剂可以与沙地柏根系建立良好的互惠互利的共生关系， 和矿山基质改良剂一起 显著改善了矿区土地的养分及水分状况， 提高了植被的成活率及生物量， 对矿区植被的恢 复具有重大意义。 0119 在本文中，“第一” 、“第二” 等仅用于彼此的区分， 而非表示重要程度及顺序、 以及 互为存在的前提等。 0120 在本文中，“相等” 、“相同” 等并非严格的数学和/或几何学意义上的限制， 还包含 本领域技术人员可以理解的且制造或使用等允许的误差。 0121 除非另有说明， 本文中的数值范围不仅包括其两个端点内的整个范围， 也包括含 于其中的若干子范围。 0122 上面对本申请优选的具体实施方式和实施例作了详细说明， 但是本申请并不限于 说明书 9/10 页 11 CN 110066738 A 11 上述实施方式和实施例， 在本领域技术人员所具备的知识范围内， 还可以在不脱离本申请 构思的前提下做出各种变化。 说明书 10/10 页 12 CN 110066738 A 12 图1 说明书附图 1/1 页 13 CN 110066738 A 13